KR102193209B1 - Cosmetic composition for skin whitening comprising extract of Phragmites Communis - Google Patents
Cosmetic composition for skin whitening comprising extract of Phragmites Communis Download PDFInfo
- Publication number
- KR102193209B1 KR102193209B1 KR1020190176556A KR20190176556A KR102193209B1 KR 102193209 B1 KR102193209 B1 KR 102193209B1 KR 1020190176556 A KR1020190176556 A KR 1020190176556A KR 20190176556 A KR20190176556 A KR 20190176556A KR 102193209 B1 KR102193209 B1 KR 102193209B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- extract
- hot water
- reed
- cosmetic composition
- present
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
- A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
- A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
- A61K8/9794—Liliopsida [monocotyledons]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/33—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing oxygen
- A61K8/36—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
- A61K8/365—Hydroxycarboxylic acids; Ketocarboxylic acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
- A61Q19/02—Preparations for care of the skin for chemically bleaching or whitening the skin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
- A61K2800/52—Stabilizers
- A61K2800/522—Antioxidants; Radical scavengers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/74—Biological properties of particular ingredients
- A61K2800/78—Enzyme modulators, e.g. Enzyme agonists
- A61K2800/782—Enzyme inhibitors; Enzyme antagonists
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
- A61K2800/84—Products or compounds obtained by lyophilisation, freeze-drying
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Birds (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Botany (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Cosmetics (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
Description
본 발명은 갈대(Phragmites Communis) 열수 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물, (a) 갈대(Phragmites Communis)를 열수 추출하는 단계; (b) 상기 추출물을 냉각하는 단계; 및 (c) 냉각한 추출물을 분말형태의 추출물로 수득하는 단계를 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물의 제조방법 및 갈대(Phragmites Communis) 고온 및 가압 열수 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 의약외품 조성물에 관한 것이다.The present invention is a cosmetic composition for skin whitening comprising a hot water extract of reeds (Phragmites Communis) as an active ingredient, (a) extracting hot water of reeds (Phragmites Communis); (b) cooling the extract; And (c) a method for preparing a cosmetic composition for skin whitening comprising the step of obtaining the cooled extract as an extract in the form of a powder, and a quasi-drug composition for skin whitening comprising a hot and pressurized hot water extract of Phragmites Communis as an active ingredient. About.
사람의 피부색은 피부 내 멜라닌의 농도와 분포에 따라 유전적으로 결정되나, 태양 자외선이나 피로, 스트레스 등의 환경적 또는 생리적 조건에 의해서도 영향을 받는다.Human skin color is genetically determined according to the concentration and distribution of melanin in the skin, but is also affected by environmental or physiological conditions such as solar ultraviolet rays, fatigue, and stress.
피부의 색을 결정하는 멜라닌 생성에 대한 화학적 작용은 현재까지 여러 논문 등을 통해 많이 보고되고 있는데, 멜라닌 생성세포인 멜라노사이트(melanocyte)가 멜라노좀(melanosome)이라는 세포내 소기관 내에서 자외선으로부터 세포를 보호하는 기능을 가지는 멜라닌을 합성한 후, 상기 멜라닌이 멜라노사이트에서 각질형성세포(keratinocyte)로 이동하는 것으로 알려져 있으며, 이렇게 각질형성세포로 이동된 멜라닌이 피부색을 결정하는 것으로 보고되고 있다.The chemical action on the production of melanin, which determines the color of the skin, has been reported in a number of papers so far.Melanocytes, which are melanocytes, protect cells from ultraviolet rays in the intracellular organelle called melanosomes. After synthesizing melanin having a protective function, it is known that the melanin migrates from melanocytes to keratinocytes, and it is reported that the melanin transferred to the keratinocytes determines the skin color.
상기 멜라닌 생합성 과정에서 필요한 전구물질은 티로신이라는 아미노산으로, 이 티로신은 디히드록시페닐알라닌(dihydroxyphenylalanine, DOPA)으로 전환되고, 그 후 도파퀴논(dopaquinone)이라는 물질 등을 거쳐 최종적으로 멜라닌으로 전환된다고 알려져 있다.It is known that the precursor required in the melanin biosynthesis process is an amino acid called tyrosine, and this tyrosine is converted to dihydroxyphenylalanine (DOPA), and then finally converted to melanin through a substance called dopaquinone. .
이와 관련하여, 멜라닌 형성 효소로는 타이로시나제(tyrosinase; TYR), 타이로시나제 관련 단백질 1(tyrosinase-related protein 1; TRP-1) 및 타이로시나제 관련 단백질 2(tyrosinase-related protein 2, TRP-2/DOPA, chrome tautomerase) 등이 알려져 있으며, 상기 멜라닌 형성 효소는 MITF(microphthalmia-associated transcription factor)라 불리는 전사인자에 의해 조절된다고 알려져 있다. 멜라닌 합성 경로에 중요한 역할을 수행하는 타이로시나제는 L-티로신을 L-DOPA(L-3,4-dihydroxyphenylalanine)로 전환하고, 생성된 L-DOPA를 L-도파퀴논으로 신속하게 전환하며, 이후의 여러 반응을 통해 결국 멜라닌을 형성한다. 타이로시나제에 의해 합성된 멜라닌은 피부색을 짙게 만드는데, 건강 또는 미용상의 요구로 인해 상기 멜라닌 합성을 억제하여 피부색을 밝게 하려는 피부 미백 방법에 관한 연구가 활발히 진행 중이다.In this regard, melanin-forming enzymes include tyrosinase (TYR), tyrosinase-related protein 1 (TRP-1), and tyrosinase-related protein 2 (tyrosinase-related protein). 2, TRP-2/DOPA, chrome tautomerase) and the like are known, and the melanin-forming enzyme is known to be regulated by a transcription factor called a microphthalmia-associated transcription factor (MITF). Tyrosinase, which plays an important role in the melanin synthesis pathway, converts L-tyrosine to L-DOPA (L-3,4-dihydroxyphenylalanine), and rapidly converts the generated L-DOPA to L-dopaquinone, Through subsequent reactions, it eventually forms melanin. Melanin synthesized by tyrosinase darkens the skin color, and research on a skin whitening method to brighten the skin color by inhibiting the melanin synthesis due to health or beauty requirements is actively underway.
일반적으로 알려진 미백 성분으로서, 타이로시나제 효소 활성을 억제하는 알부틴, 코지산(코직산), 아젤라익산, 알로에신, 4-부틸레소시놀, 레스베라트롤, 세라마이드, 스핑고신-1-인산, 스핑고실포스포릴콜린 등과 같은 물질이나, 하이드로퀴논(대한민국 공개특허공보 2016-0014271)등이 있다. 이러한 미백 성분들은 멜라닌 색소의 합성을 저해함으로써, 피부 톤을 밝게 하여 피부 미백을 실현하거나, 자외선, 호르몬 또는 유전에 기인한 기미나 주근깨 등의 피부 과색소 침착증의 개선이 가능하다. 그러나 일부 미백성분들은 피부 적용 시, 자극과 발적 등의 안전성의 문제로 사용량의 제한이 있거나, 효과가 미미하여 실질적인 효과를 기대할 수 없는 문제점이 있다. 특히 하이드로퀴논의 경우 비가역적 백화현상 등의 원치 않는 부작용으로 그 사용이 금지 되었고(European Committee 24th Dir 2000/6/EC), 하이드로퀴논의 구조 유사체인 알부틴 등으로 대체된 바 있다. 이와 같이 미백분야에서는 타이로시나제 활성 저해 효과를 보유하여 미백 효과를 지니는 것뿐만 아니라 안정성 확보가 특히 중요하여, 상기와 같은 요건을 모두 충족하는 물질의 개발이 여전히 요구되고 있다.As a commonly known whitening ingredient, arbutin, kojic acid (kojic acid), azelaic acid, aloesin, 4-butylresorcinol, resveratrol, ceramide, sphingosine-1-phosphate, sphingosyl which inhibit tyrosinase enzyme activity There are substances such as phosphorylcholine and the like, and hydroquinone (Korean Patent Application Publication No. 2016-0014271). These whitening components inhibit the synthesis of melanin pigment, thereby brightening the skin tone to realize skin whitening, or to improve skin hyperpigmentation such as spots and freckles caused by ultraviolet rays, hormones, or genetics. However, when some whitening ingredients are applied to the skin, there is a problem in that the amount of use is limited due to safety problems such as irritation and redness, or the effect is insignificant and thus no practical effect can be expected. In particular, in the case of hydroquinone, its use was prohibited due to unwanted side effects such as irreversible bleaching (European Committee 24th Dir 2000/6/EC), and it was replaced with arbutin, a structural analog of hydroquinone. As described above, in the field of whitening, it is particularly important to not only have a whitening effect by having an effect of inhibiting tyrosinase activity, but also to secure stability, and development of a material that satisfies all of the above requirements is still required.
최근에는 라이프 스타일의 변화와 웰빙에 대한 관심과 더불어, 웰빙에 대한 수요가 점차 증가하고 있는 추세이다. 이에 피부 미용 분야에 있어서도 수요자들의 관심이 높아지고 있으며, 관련 피부 미백 제품의 개발도 다양하게 이루어지고 있으나, 그 효능에 대한 실제 소비자들의 신뢰도는 그다지 높지 않은 상황이다. 또한, 최근 자연주의 바람이 불면서 천연 재료로 만든 제품에 대한 선호도가 높아지고 있어, 천연 재료를 이용하는 기술을 기반으로 하는, 화장품 시장이 급격히 증가하고 있는 추세이다. 천연 재료를 이용하여 화장품을 제조하면 천연 재료가 갖는 유효성분의 흡수율과 안전성을 높일 수 있는 장점이 있다.In recent years, along with lifestyle changes and interest in well-being, the demand for well-being is gradually increasing. Accordingly, the interest of consumers is increasing in the field of skin beauty as well, and related skin whitening products are being developed in various ways, but the reliability of actual consumers in the efficacy is not very high. In addition, as the wind of naturalism has recently increased, preference for products made of natural materials is increasing, and the cosmetic market, which is based on technology using natural materials, is rapidly increasing. Manufacturing cosmetics using natural ingredients has the advantage of improving the absorption rate and safety of active ingredients of natural ingredients.
이에, 본 발명의 발명자들은 피부 미백 기능의 화장품의 소재로, 천연 재료를 활용하여 피부에 적용시 안전성을 확보하면서도, 실질적으로 피부 미백 효능에 도움을 줄 수 있는 물질을 개발하고자 예의 노력한 결과, 갈대 뿌리를 고온 및 가압으로 추출한 추출물이 일반 열수 추출물보다 쿠마린산의 함량이 5배 이상 높고, L-DOPA 산화 억제능이 뛰어나며, 에탄올(70%, 100%) 추출물과 비교하여도 항산화 효능이 높고, 티로시나제 활성 저해능 및 α-글루코시다제의 활성 저해능이 높아 뛰어난 미백 효능이 있음을 최초로 발견하고, 이를 피부 미백 목적으로 사용할 수 있음을 확인하여 본 발명을 완성하였다.Accordingly, the inventors of the present invention made diligent efforts to develop a material that can substantially help skin whitening effect while securing safety when applied to the skin by using natural materials as a material for cosmetics with a skin whitening function. The extract obtained by extracting the roots at high temperature and pressurization has more than 5 times higher content of coumarin acid than general hot water extract, has excellent L-DOPA oxidation inhibitory ability, has high antioxidant efficacy even compared to ethanol (70%, 100%) extract, and tyrosinase The present invention was completed by discovering for the first time that it has excellent whitening effect due to its high activity inhibitory ability and α-glucosidase activity inhibitory ability, and it can be used for skin whitening purposes.
본 발명은 갈대 열수 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition for skin whitening comprising a reed hot water extract as an active ingredient.
본 발명은 (a) 갈대를 열수 추출하는 단계; (b) 상기 추출물을 냉각하는 단계; 및 (c) 냉각한 추출물을 분말형태의 추출물로 수득하는 단계를 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물의 제조방법에 관한 것이다.The present invention comprises the steps of (a) extracting hot water from reeds; (b) cooling the extract; And (c) it relates to a method for producing a cosmetic composition for skin whitening comprising the step of obtaining the cooled extract as a powder extract.
본 발명은 갈대 고온 및 가압 열수 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 의약외품 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a quasi-drug composition for skin whitening comprising a reed hot and pressurized hot water extract as an active ingredient.
이를 구체적으로 설명하면 다음과 같다. 한편, 본 발명에서 개시된 각각의 설명 및 실시형태는 각각의 다른 설명 및 실시 형태에도 적용될 수 있다. 즉, 본 발명에서 개시된 다양한 요소들의 모든 조합이 본 발명의 범주에 속한다. 또한, 하기 기술된 구체적인 서술에 의하여 본 발명의 범주가 제한된다고 볼 수 없다.This will be described in detail as follows. Meanwhile, each description and embodiment disclosed in the present invention can be applied to each other description and embodiment. That is, all combinations of various elements disclosed in the present invention belong to the scope of the present invention. In addition, it cannot be seen that the scope of the present invention is limited by the specific description described below.
상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 하나의 양태는 갈대 열수 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공한다.One aspect of the present invention for achieving the above object provides a cosmetic composition for skin whitening comprising a reed hot water extract as an active ingredient.
본 발명은 천연 소재인 갈대 뿌리를 고온 및 가압을 통해 추출한 추출물이 피부에 적용시 안전하면서도, 일반 열수 추출물보다 쿠마린산의 함량이 5배 이상 높고, L-DOPA 산화 억제능이 뛰어나며, 에탄올(70%, 100%) 추출물과 비교하여도 항산화 효능이 높고, 티로시나제 활성 저해능 및 α-글루코시다제의 활성 저해능이 높아 뛰어난 미백 효능이 있음을 발견하고, 이를 피부 미백용 조성물에 활용하고자한 기술사상에 기초한 것으로, 이의 효능은 본 발명자들에 의하여 최초로 규명된 것이다. The present invention is safe when applied to the skin when the extract extracted from the natural material reed root through high temperature and pressurization, the content of coumarin acid is 5 times higher than that of general hot water extract, L-DOPA oxidation inhibitory ability is excellent, ethanol (70% , 100%) compared to the extract, it has high antioxidant efficacy, high tyrosinase activity inhibitory ability and α-glucosidase activity inhibitory activity, so it has excellent whitening effect.Based on the technical idea to use this in skin whitening compositions As such, its efficacy was first identified by the present inventors.
본 발명에서 용어 "갈대(Phragmites Communis)"는 외떡잎식물 화본목 벼과의 여러해살이풀로, 습지나 갯가, 호수 주변의 모래땅에 군락을 이루고 자라는 식물을 의미한다. 구체적으로, 본 발명에서 갈대는 갈대의 뿌리를 의미하는 것일 수 있으나, 이에 특별히 제한되는 것은 아니다. 상기 갈대의 뿌리는 "노근(蘆根)"이라고도 하며, 한방에서는 갈대의 뿌리를 말린 것을 의미한다. 노근의 약리 작용으로는 이뇨 작용, 해열 작용, 간 보호 작용, 조혈 기능 강화 작용 등이 알려져 있다. In the present invention, the term "reed (Phragmites Communis)" is a perennial plant of the monocotyledonous herbaceous plant, and refers to a plant that forms a colony and grows in the sandy land around a wetland or a mandala or a lake. Specifically, in the present invention, the reed may mean the root of the reed, but is not particularly limited thereto. The root of the reed is also referred to as "nogeun", which means that the root of the reed is dried in oriental medicine. The pharmacological action of Nogeun is known for its diuretic action, antipyretic action, hepatic protection action, and hematopoietic reinforcement action.
본 발명에서 용어 "열수"는 고온의 물을 의미한다.In the present invention, the term "hot water" means hot water.
이때, “고온”은 높은 온도를 의미하며, 본 발명에 있어서 상기 고온은 110℃ 이상을, 보다 구체적으로는, 120℃이상을 의미하나, 이에 제한되는 것은 아니다.In this case, “high temperature” means a high temperature, and in the present invention, the high temperature means 110°C or more, more specifically, 120°C or more, but is not limited thereto.
본 발명에서 용어 "추출물"은 목적하는 물질을 다양한 용매에 침지한 다음, 상온, 저온 또는 가온 상태에서 일정시간 동안 추출하여 수득한 액상성분, 상기 액상성분으로부터 용매를 제거하여 수득한 고형분 등의 결과물을 의미한다. 뿐만 아니라, 상기 결과물의 희석액, 이들의 농축액, 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 또는 이들의 조정제물, 정제물 등을 모두 포함하는 것으로 포괄적으로 해석될 수 있다.In the present invention, the term "extract" refers to a liquid component obtained by immersing a target substance in various solvents and then extracting it at room temperature, low temperature or warming state for a certain period of time, and a resultant product such as a solid component obtained by removing the solvent from the liquid component. Means. In addition, it can be comprehensively interpreted as including all of the resulting diluted solution, a concentrated solution thereof, a dried product obtained by drying the extract, or a preparation thereof, a purified product, and the like.
보다 구체적으로, 상기 추출물은 가압 조건에서 열수 추출하는 것일 수 있으며, 상기 “가압”은 압력을 가하는 것을 의미하며, 본 발명에 있어서 상기 가압은 10psi 내지 20psi인 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.More specifically, the extract may be hot water extraction under pressurized conditions, and the “pressurization” refers to applying pressure, and in the present invention, the pressurization may be 10 psi to 20 psi, but is not limited thereto.
상기 추출물은 천연, 잡종, 변종식물로부터 제한없이 추출될 수 있으며, 물(정제수), C1 내지 C6의 알코올 및 이들의 혼합용매를 이용하여 추출하여 수득될 수 있다. 또한, 상기 추출물을 수득하기 위한 방법은 본 발명의 갈대 추출물을 수득할 수 있는 한 특별히 이에 제한되지 않으나, 구체적으로는 상기 갈대, 갈대 뿌리 등을 상기 용매에 침지하고 상온에서 추출하는 냉침추출법, 가열추출법, 초음파를 가하여 추출하는 초음파추출법, 환류 냉각기를 이용한 환류추출법 등의 방법을 사용할 수 있다.The extract may be extracted without limitation from natural, hybrid, and variety plants, and may be obtained by extraction using water (purified water), C1 to C6 alcohol, and a mixed solvent thereof. In addition, the method for obtaining the extract is not particularly limited as long as the reed extract of the present invention can be obtained, but specifically, the reed, reed root, etc., are immersed in the solvent and extracted at room temperature, such as cold sediment extraction, heating Methods such as extraction, ultrasonic extraction by applying ultrasonic waves, and reflux extraction using a reflux cooler may be used.
본 발명에 있어서, 상기 열수 추출물은 갈대 뿌리의 추출물일 수 있고, 구체적으로 고온 및 가압을 통해 얻은 추출물일 수 있으며, 보다 구체적으로, 10℃ 내지 130℃의 고온에서 10psi 내지 20psi의 가압조건에서 10분 내지 20분 열수 추출하는 것일 수 있으며, 상기 열수 추출물은 동결건조를 통해 분말형태로 제조될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.In the present invention, the hot water extract may be an extract of reed root, specifically, may be an extract obtained through high temperature and pressure, and more specifically, 10 psi to 20 psi at a high temperature of 10 °C to 130 °C. Hot water extraction may be performed for minutes to 20 minutes, and the hot water extract may be prepared in a powder form through lyophilization, but is not limited thereto.
본 발명에서 용어 “피부 미백”은 멜라닌 색소의 합성을 저해하고/하거나 타이로시나제 활성을 억제시킴으로써 피부 톤을 밝게 하는 것을 말한다. 또한, 상기 피부 미백은 자외선, 호르몬 또는 유전에 기인한 기미나 주근깨, 검버섯, 잡티 또는 흑색종 등의 피부 과색소 침착을 개선하는 것을 포함한다.In the present invention, the term "skin whitening" refers to brightening skin tone by inhibiting the synthesis of melanin pigment and/or inhibiting tyrosinase activity. In addition, the skin whitening includes improving the deposition of skin hyperpigmentation such as spots, freckles, age spots, blemishes or melanoma caused by ultraviolet rays, hormones or genetics.
상기 멜라닌은 흑갈색 알갱이의 색소로서, 멜라닌 세포 내 멜라노솜이라는 세포 소기관에 의해 만들어진다. 멜라닌은 피부, 털, 눈 등에 존재하며, 멜라닌의 양에 따라 피부색이 결정되는데, 멜라닌의 양이 많을수록 검은 피부색을 띤다. The melanin is a pigment of dark brown particles, and is produced by organelles called melanosomes in melanocytes. Melanin exists in the skin, hair, and eyes, and the skin color is determined by the amount of melanin. The higher the amount of melanin, the darker the skin color is.
따라서, 상기 조성물은 멜라닌 생성을 억제하는 피부 미백 효능을 특징으로 하는 것일 수 있다.Accordingly, the composition may be characterized by a skin whitening effect that suppresses melanin production.
본 발명의 일 실시예에서는, 갈대 열수 추출물이 갈대 에탄올(70%, 100%) 추출물과 비교하여 항산화 효능이 높고, 티로시나제 활성 저해능 및 α-글루코시다제의 활성 저해능이 높은 것을 확인하였으며, 상기 추출물을 멜라닌 세포에 처리하여 멜라닌의 색소 생성량이 감소되는 것을 확인하였다.In one embodiment of the present invention, it was confirmed that the reed hot water extract has high antioxidant efficacy, tyrosinase activity inhibitory ability, and α-glucosidase activity inhibitory activity compared to the reed ethanol (70%, 100%) extract. By treating the melanocytes, it was confirmed that the amount of pigment production of melanin was reduced.
이를 통해, 본 발명의 갈대 고온/가압 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 피부 미백용 화장료 조성물로 사용될 수 있음을 확인하였다.Through this, it was confirmed that the composition containing the high temperature/pressurized reed extract of the present invention as an active ingredient can be used as a cosmetic composition for skin whitening.
또한, 본 발명의 일 실시예에서는, 일반 갈대 뿌리 열수 추출물 보다 고온 및 가압으로 추출한 갈대 뿌리 열수 추출물이 쿠마린산의 함량이 5배 이상 높고, L-DOPA 산화 억제능이 뛰어나는 것을 확인하였다.In addition, in one embodiment of the present invention, it was confirmed that the hot water extract of reed root extracted by high temperature and pressure than the hot water extract of general reed root has a content of
이를 통해, 본 발명의 갈대 고온/가압 추출물이 일반 갈대 열수 추출물보다 우수함을 확인하였다.Through this, it was confirmed that the high temperature/pressurized reed extract of the present invention is superior to the general reed hot water extract.
본 발명의 “화장료 조성물”은 갈대 고온/가압 추출물을 조성물 총 중량에 대하여 0.0001 내지 50 중량%(w/w)로 포함할 수 있고, 구체적으로 0.001 내지 5 중량%(w/w)로 포함할 수 있으나, 특별히 이에 제한되지 않는다. 상기 화장료 조성물은 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 팩, 피부접착용 패치, 피부접착용 겔, 파우더, 연고, 페이스트, 젤, 서스펜션, 에멀젼, 스프레이, 미용액 또는 캡슐로 제형화되는 것일 수 있으나, 특별히 이에 제한되지 않는다.The "cosmetic composition" of the present invention may contain a high temperature/pressurized reed extract in an amount of 0.0001 to 50% by weight (w/w) based on the total weight of the composition, and specifically 0.001 to 5% by weight (w/w) However, it is not particularly limited thereto. The cosmetic composition is a softening lotion, astringent lotion, nutritional lotion, nutrition cream, massage cream, essence, pack, skin patch, skin adhesion gel, powder, ointment, paste, gel, suspension, emulsion, spray, essence or capsule. It may be formulated as, but is not particularly limited thereto.
본 발명의 화장료 조성물은 일반 피부 화장료에 배합되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체를 1종 이상 추가로 포함할 수 있으며, 통상의 성분으로 예를 들면 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급 알콜, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체는 제형에 따라 다양하다. The cosmetic composition of the present invention may additionally include one or more cosmetically acceptable carriers blended in general skin cosmetics, and as common ingredients, for example, oil, water, surfactant, moisturizer, lower alcohol, thickener, A chelating agent, a colorant, a preservative, a fragrance, and the like may be appropriately blended, but the present invention is not limited thereto. The cosmetically acceptable carrier included in the cosmetic composition of the present invention varies depending on the formulation.
본 발명의 제형이 연고, 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는, 담체 성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is an ointment, paste, cream or gel, animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, tracant, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc, zinc oxide or Mixtures of these can be used.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실케이트, 폴리아미드 파우더 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 포함할 수 있다.When the formulation of the present invention is a powder or spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate, polyamide powder, or mixtures thereof may be used as a carrier component, and in particular, in the case of a spray, additional chloro Propellants such as fluorohydrocarbon, propane/butane or dimethyl ether.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되며, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알콜, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일이 이용될 수 있으며, 특히, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수 배종 오일, 올리브오일, 피마자 오일 및 참깨 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a solution or emulsion, a solvent, a solubilizing agent or an emulsifying agent is used as a carrier component, such as water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene glycol, 1,3-butyl glycol oil may be used, and in particular, cottonseed oil, peanut oil, corn seed oil, olive oil, castor oil and sesame oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or fatty acid ester of sorbitan may be used. have.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알콜, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a suspension, as a carrier component, a liquid diluent such as water, ethanol or propylene glycol, an ethoxylated isostearyl alcohol, a suspending agent such as polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester, micro Crystalline cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tracant, and the like may be used.
한편, 본 발명의 제형이 캡슐인 경우에는, 알지네이트(alginate) 캡슐, 아가(agar) 캡슐, 젤라틴(gelatin) 캡슐, 왁스(wax)류 캡슐, 또는 이중 캡슐의 형태로 제형화될 수 있으며, 특별히 이에 제한되지 않는다.Meanwhile, when the formulation of the present invention is a capsule, it may be formulated in the form of alginate capsules, agar capsules, gelatin capsules, wax capsules, or double capsules. It is not limited thereto.
또한, 본 발명의 화장료 조성물은 갈대 고온 및 가압 열수 추출물 이외에 통상적으로 이용되는 보조제, 예컨대 친수성 또는 친지성 겔화제, 친수성 또는 친지성 활성제, 보존제, 항산화제, 용매, 방향제, 충전제, 차단제, 안료, 흡취제 및 염료 등을 포함할 수 있다.In addition, the cosmetic composition of the present invention is a supplement that is commonly used in addition to the high temperature and pressurized hot water extract of reeds, such as hydrophilic or lipophilic gelling agents, hydrophilic or lipophilic activators, preservatives, antioxidants, solvents, fragrances, fillers, blockers, pigments, It may contain an odorant and a dye.
상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 다른 하나의 양태는 (a) 갈대를 열수 추출하는 단계; (b) 상기 추출물을 냉각하는 단계; 및 (c) 냉각한 추출물을 분말형태의 추출물로 수득하는 단계를 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물의 제조방법을 제공한다. Another aspect of the present invention for achieving the above object is (a) extracting reeds with hot water; (b) cooling the extract; And (c) it provides a method for producing a cosmetic composition for skin whitening comprising the step of obtaining the cooled extract as a powder extract.
구체적으로, 상기 제조방법은 상기 (a) 단계에 있어서, 고온은 110℃ 내지 130℃인 것일 수 있고, 가압은 10psi 내지 20psi인 것일 수 있으며, 고온/가압 조건에서 10분 내지 20분간 추출하는 것일 수 있으며, 상기 (b) 단계에 있어서, 냉각은 0도 내지 ?80℃에서 이루어지는 것 수 있고, 상기 (a) 단계에 있어서, 수득은 동결건조를 통해 이루어지는 것일 수 있으나, 특별히 이에 제한되지 않는다.Specifically, the manufacturing method in the step (a), the high temperature may be 110 ℃ to 130 ℃, pressurization may be 10 psi to 20 psi, extracting for 10 minutes to 20 minutes under high temperature / pressure conditions In the step (b), the cooling may be performed at 0°C to ?80°C, and in the step (a), the obtained may be obtained through freeze-drying, but is not particularly limited thereto.
이때 용어, “갈대”, “고온”, “가압”, “추출물”, “피부 미백” 및 “화장료 조성물”은 상기에서 서술한 바와 같다.At this time, the terms “reed”, “high temperature”, “pressurized”, “extract”, “skin whitening” and “cosmetic composition” are as described above.
상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 또 다른 하나의 양태는 상기 갈대 고온 및 가압 열수 추출물을 포함하는 조성물을 인간을 제외한 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 피부 미백 방법을 제공한다.Another aspect of the present invention for achieving the above object provides a skin whitening method comprising administering a composition comprising the high temperature and pressurized hot water extract of reed to an individual other than a human.
이때 용어, “갈대”, “고온”, “가압”, “열수”, “추출물”, “피부 미백” 및 “화장료 조성물”은 상기에서 서술한 바와 같다.At this time, the terms “reed”, “high temperature”, “pressurized”, “hot water”, “extract”, “skin whitening” and “cosmetic composition” are as described above.
본 발명에서 "투여"는 어떠한 적절한 방법으로 개체에게 본 발명의 조성물을 도입하는 것을 의미하며, 상기 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달하여 피부 미백 효과를 나타낼 수 있는 한 어떠한 일반적인 경로를 통하여 투여될 수 있다. 상기 투여는 피부에 도포하는 것을 포함할 수 있으며, 복강 내 투여, 정맥 내 투여, 근육 내 투여, 피하 투여, 피내 투여, 경구 투여, 국소 투여, 비내 투여될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 구체적으로, 본 발명의 조성물이 피부 미백 효과가 있는 특성상, 상기 조성물의 투여 경로는 피부에 도포하여 투여될 수 있다. In the present invention, "administration" means introducing the composition of the present invention to an individual by any suitable method, and the route of administration of the composition is to be administered through any general route as long as it reaches the target tissue and can exhibit skin whitening effect. I can. The administration may include application to the skin, and intraperitoneal administration, intravenous administration, intramuscular administration, subcutaneous administration, intradermal administration, oral administration, topical administration, or intranasal administration, but is not limited thereto. Specifically, due to the nature of the composition of the present invention having a skin whitening effect, the route of administration of the composition may be applied to the skin and administered.
본 발명의 조성물은 매일 또는 간헐적으로 투여해도 좋고, 1일당 투여 횟수는 1회 또는 2~3회로 나누어 투여하는 것이 가능하다. 또한, 본 발명의 조성물은 피부 미백을 위하여 단독으로, 또는 다른 물질과 병용하여 사용할 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.The composition of the present invention may be administered daily or intermittently, and the number of administrations per day may be administered once or divided into 2 to 3 times. In addition, the composition of the present invention may be used alone or in combination with other substances for skin whitening. It is important to administer an amount capable of obtaining the maximum effect in a minimum amount without side effects in consideration of all the above factors, and this can be easily determined by a person skilled in the art.
본 발명에서 "개체"는 인간을 포함한 쥐, 생쥐, 가축 등의 모든 동물을 의미한다. 구체적으로, 인간을 포함하거나 포함하지 않는 포유동물일 수 있다.In the present invention, "individual" refers to all animals such as rats, mice, livestock, including humans. Specifically, it may be a mammal including or not including humans.
상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 또 다른 하나의 양태는 상기 갈대 고온 및 가압 열수 추출물을 유효성분으로 포함하는, 피부 미백용 의약외품 조성물을 제공한다.Another aspect of the present invention for achieving the above object is to provide a quasi-drug composition for skin whitening, comprising the reed hot and pressurized hot water extract as an active ingredient.
이때 용어, “갈대”, “고온”, “가압”, “열수”, “추출물” 및 “피부 미백”은 상기에서 서술한 바와 같다.At this time, the terms “reed”, “high temperature”, “pressurized”, “hot water”, “extract” and “skin whitening” are as described above.
본 발명에서 용어 "의약외품"은 사람이나 동물의 질병을 진단, 치료, 개선, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용되는 물품들 중 의약품보다 작용이 경미한 물품들을 의미하는 것으로, 예를 들어 대한민국 약사법에 따르면 의약외품이란 의약품의 용도로 사용되는 물품을 제외한 것으로, 사람ㆍ동물의 질병 치료나 예방에 쓰이는 제품, 인체에 대한 작용이 경미하거나 직접 작용하지 않는 제품 등이 포함 된다.In the present invention, the term "quasi-drug" refers to items that are less effective than pharmaceuticals among items used for the purpose of diagnosing, treating, improving, alleviating, treating or preventing diseases of humans or animals. For example, according to the Korean Pharmacological Law Quasi-drugs exclude items used for pharmaceutical purposes, and include products used for the treatment or prevention of diseases of humans and animals, and products with minor or no direct action on the human body.
본 발명의 의약외품 조성물은 바디 클렌저, 폼, 비누, 마스크, 연고제, 크림, 로션, 에센스 및 스프레이로 이루어진 군에서 선택되는 형태로 제조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.The quasi-drug composition of the present invention may be prepared in a form selected from the group consisting of a body cleanser, foam, soap, mask, ointment, cream, lotion, essence, and spray, but is not limited thereto.
본 발명의 본 발명은 갈대 고온/가압 열수 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물을 의약외품 첨가물로 사용할 경우, 본 발명의 갈대 고온/가압 열수 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 의약외품 또는 의약외품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다.In the present invention of the present invention, when the composition containing the reed hot/pressed hot water extract as an active ingredient is used as a quasi-drug additive, the composition containing the reed hot/pressed hot water extract of the present invention as an active ingredient is added as it is or other quasi-drug or quasi-drugs It can be used together with an ingredient, and can be used suitably according to a conventional method.
상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 또 다른 하나의 양태는 상기 갈대 고온 및 가압 열수 추출물을 유효성분으로 포함하는, 피부 미백 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학용 조성물을 제공한다.Another aspect of the present invention for achieving the above object provides a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of skin whitening-related diseases, comprising the reed hot and pressurized hot water extract as an active ingredient.
본 발명에서 용어 "미백 관련 질환"은 피부에 색소가 과다하게 침착되는 증상을 가진 질환을 의미하는 것으로, 구체적으로 상기 미백 관련 질환은 기미, 주근깨, 검버섯, 잡티 또는 흑색종일 수 있다.In the present invention, the term "whitening-related disease" refers to a disease having symptoms in which pigment is excessively deposited on the skin, and specifically, the whitening-related disease may be spots, freckles, age spots, blemishes, or melanoma.
본 발명에서 용어 "예방"이란, 본 발명의 조성물이 미백 관련 질환 의 발생을 억제하거나 지연시키는 모든 행위를 의미한다.In the present invention, the term "prevention" means any action in which the composition of the present invention inhibits or delays the occurrence of whitening-related diseases.
본 발명에서 용어 "치료"는 본 발명의 약학 조성물이 미백 관련 질환의 증상을 호전되도록 하거나 이롭게 되도록 하는 모든 행위를 의미한다.In the present invention, the term "treatment" refers to any action that makes the pharmaceutical composition of the present invention ameliorate or benefit the symptoms of whitening-related diseases.
본 발명에서, 상기 약학 조성물은 약학적으로 허용가능한 담체를 추가로 포함할 수 있다.In the present invention, the pharmaceutical composition may further include a pharmaceutically acceptable carrier.
본 발명에서 용어 "약학적으로 허용가능한 담체"는 생물체를 자극하지 않고 본 발명 조성물의 미백 관련 질환 증상의 예방 또는 치료 활성 및 특성을 저해하지 않는 담체 또는 희석제를 말한다. 액상 용액으로 제제화되는 조성물에 있어서 허용되는 약학적 담체로는, 멸균, 및 생체에 적합한 것으로서, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 알부민 주사용액, 덱스트로즈 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 하나 이상의 성분을 혼합하여 사용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다.In the present invention, the term "pharmaceutically acceptable carrier" refers to a carrier or diluent that does not irritate an organism and does not inhibit the prophylactic or therapeutic activity and properties of whitening-related disease symptoms of the present composition. As acceptable pharmaceutical carriers for compositions formulated as liquid solutions, sterilization and biocompatible ones, saline, sterile water, Ringer's solution, buffered saline, albumin injection solution, dextrose solution, maltodextrin solution, glycerol, ethanol And one or more of these components may be mixed and used, and other conventional additives such as antioxidants, buffers, and bacteriostatic agents may be added as needed.
또한, 본 발명의 약학적으로 허용가능한 담체는 비자연적 담체를 포함할 수 있다.In addition, the pharmaceutically acceptable carrier of the present invention may include a non-natural carrier.
본 발명의 약학 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 단일 또는 다중 투여될 수 있다.The pharmaceutical composition of the present invention may be administered singly or in multiple doses in a pharmaceutically effective amount.
본 발명에서 용어 "약학적으로 유효가능한 양"은 의학적 예방 또는 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 예방 또는 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 질환의 중증도, 약물의 활성, 환자의 체중, 건강, 성 별, 환자의 약물에 대한 민감도, 사용된 본 발명 조성물의 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 사용된 본 발명의 조성물과 배합 또는 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다.In the present invention, the term "pharmaceutically effective amount" refers to an amount sufficient to prevent or treat a disease at a reasonable benefit/risk ratio applicable to medical prevention or treatment, and the effective dose level is the severity of the disease, the activity of the drug , Including the patient's weight, health, sex, sensitivity to the patient's drugs, the time of administration of the composition of the present invention used, the route of administration and the rate of excretion, the duration of treatment, and drugs used in combination or concurrent with the composition of the present invention used Factors and other factors well known in the medical field can be determined.
본 발명의 조성물은 고온 및 가압을 통해 추출한 갈대 뿌리 추출물을 유효성분으로 포함하는 것으로, 상기 추출물은 항산화 효능이 있고, 티로시나제 및 α-글루코시다제 활성을 억제하며, 멜라닌 세포의 활성을 억제함으로써 피부의 색소 침착을 예방 및 개선하는 피부 미백 용도로 활용될 수 있다.The composition of the present invention comprises a reed root extract extracted through high temperature and pressure as an active ingredient, and the extract has antioxidant effects, inhibits tyrosinase and α-glucosidase activities, and inhibits the activity of melanocytes It can be used for skin whitening to prevent and improve pigmentation.
도 1은 고온 및 가압 열수추출법(121℃)의 공정 방법을 나타내는 공정도이다.
도 2는 갈대 추출물의 추출방법에 따른 DPPH 소거능을 비교하는 그래프이다.
도 3은 갈대 추출물의 추출방법에 따른 Hydrogen peroxide 소거능을 비교하는 그래프이다.
도 4는 갈대 추출물의 추출방법에 따른 reducing power 환원력을 비교하는 그래프이다.
도 5는 갈대 에탄올(70%) 추출물의 멜라닌형성세포 독성평가를 나타내는 그래프이다.
도 6은 갈대 에탄올(100%) 추출물의 멜라닌형성세포 독성평가를 나타내는 그래프이다.
도 7은 갈대 열수추출물의 멜라닌형성세포 독성평가를 나타내는 그래프이다.
도 8은 갈대 에탄올(70%) 추출물의 멜라닌 색소 억제능을 나타내는 그래프이다.
도 9는 갈대 에탄올(100%) 추출물의 멜라닌 색소 억제능을 나타내는 그래프이다.
도 10은 갈대 열수 추출물의 멜라닌 색소 억제능을 나타내는 그래프이다.
도 11은 갈대 추출물의 추출방법에 따른 in vitro 티로시나제 활성 저해효능 비교를 나타내는 그래프이다.
도 12는 갈대 열수 추출물의 α-글루코시다제 활성 저해효능을 나타내는 그래프이다.
도 13은 갈대 열수 추출물에서 B16F10 멜라닌형성세포의 cell tyrosinase 억제효과를 나타내는 그래프이다.
도 14는 갈대 뿌리 추출물을 함유하는 제형의 가혹 및 가속조건에 따른 pH 및 비중의 변화를 나타내는 그래프이다.
도 15는 갈대 뿌리 추출물을 함유하는 세럼시험 제형의 일반세균에 대한 안전성을 나타내는 사진이다.
도 16은 갈대 뿌리 추출물을 함유하는 세럼시험 제형의 진균에 대한 안전성을 나타내는 사진이다.
도 17은 고온 및 가압 열수 추출물 및 일반 열수 추출물의 쿠마린산 함량을 비교하기 위하여 HPLC 분석 크로마토그램을 통해 비교하는 그래프이다.
도 18은 고온 및 가압 열수 추출물 및 일반 열수 추출물의 L-DOPA 산화 억제능을 비교하는 그래프이다.1 is a process chart showing a process method of a high temperature and pressurized hot water extraction method (121°C).
2 is a graph comparing the DPPH scavenging ability according to the extraction method of reed extract.
Figure 3 is a graph comparing the hydrogen peroxide scavenging ability according to the extraction method of reed extract.
4 is a graph comparing the reducing power reducing power according to the extraction method of reed extract.
5 is a graph showing the evaluation of melanogenesis cytotoxicity of the reed ethanol (70%) extract.
Figure 6 is a graph showing the melanogenesis cytotoxicity evaluation of the reed ethanol (100%) extract.
7 is a graph showing the toxicity evaluation of melanogenic cells of hot water extract of reeds.
8 is a graph showing the melanin pigment inhibitory ability of the reed ethanol (70%) extract.
9 is a graph showing the melanin pigment inhibitory ability of the reed ethanol (100%) extract.
10 is a graph showing the melanin pigment inhibitory ability of reed hot water extract.
11 is a graph showing a comparison of in vitro tyrosinase activity inhibitory effects according to the extraction method of reed extract.
12 is a graph showing the inhibitory effect of α-glucosidase activity of hot water extract of reeds.
13 is a graph showing the cell tyrosinase inhibitory effect of B16F10 melanocytes in hot water extract of reeds.
14 is a graph showing changes in pH and specific gravity according to harsh and accelerated conditions of a formulation containing a reed root extract.
15 is a photograph showing the safety of the serum test formulation containing the reed root extract against general bacteria.
16 is a photograph showing the safety of the serum test formulation containing reed root extract against fungi.
17 is a graph comparing the coumarin acid content of the hot and pressurized hot water extract and the general hot water extract through HPLC analysis chromatogram.
18 is a graph comparing the L-DOPA oxidation inhibitory ability of hot and pressurized hot water extracts and general hot water extracts.
이하, 본 발명을 하기 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예만으로 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail through the following examples. However, these examples are for illustrative purposes only, and the scope of the present invention is not limited to these examples.
실시예 1: 갈대 고온/가압 열수 추출물의 제조Example 1: Preparation of reed hot/pressurized hot water extract
갈대 뿌리를 이용하여 열수 추출물, 에탄올(70%) 추출물 및 에탄올(100%) 추출물을 제조하였다.Hot water extract, ethanol (70%) extract, and ethanol (100%) extract were prepared using reed root.
구체적으로, 열수 추출물은 정제수를 이용하여 121℃ 조건에서 추출하였고, 에탄올 추출물은 70% 및 100% 에탄올을 이용하여 상온 상압의 조건으로 추출하여 제조하였다.Specifically, the hot water extract was extracted using purified water at 121°C, and the ethanol extract was prepared by extraction at room temperature and pressure using 70% and 100% ethanol.
보다 구체적으로, 열수 추출물의 제조 방법은 건조갈대뿌리 10kg과 정제수 200L를 121℃ 및 15psi 압력을 15분간 가하여 추출하였고, 추출물을 필터링하고 -80℃에서 냉각한 뒤, 동결건조하여 추출하였다(도 1).More specifically, the method of preparing a hot water extract was extracted by applying 10 kg of dried reed root and 200 L of purified water at 121°C and 15psi for 15 minutes, and the extract was filtered and cooled at -80°C, followed by lyophilization (Fig. 1). ).
실시예 2: 추출방법에 따른 항산화 효과 비교Example 2: Comparison of antioxidant effects according to extraction methods
실시예 2-1: 추출방법에 따른 총 페놀 및 총 플라보노이드 함량 비교Example 2-1: Comparison of total phenol and total flavonoid contents according to the extraction method
갈대추출물 추출방법에 따른 총 페놀 및 총 플라보노이드 함량을 비교하였다.Total phenol and total flavonoid contents according to the reed extract extraction method were compared.
보다 구체적으로, 총 폴리페놀 함량은 페놀성 물질이 phosphomolybdic acid와 반응하여 청색으로 발색되는 원리를 이용한 Folin-Denis 방법에 따라 분석하였다. 추출물(1 mg/mL) 0.5 mL에 Folin 시약 0.5 mL을 혼합한 뒤 3분간 실온에서 반응시킨 후 2% Na3CO3 1.5 mL을 첨가한 뒤 2시간 동안 암소에서 반응시킨 후, 760 nm 에서 microplate reader를 이용하여 흡광도(OD)를 측정하였다. 시료에 함유된 총 폴리페놀 함량은 gallic acid 표준곡선을 통하여 시료 g당 gallic acid equivalent (GAE)로 나타내었다.More specifically, the total polyphenol content was analyzed according to the Folin-Denis method using the principle that a phenolic substance reacts with phosphomolybdic acid to develop a blue color. 0.5 mL of Folin reagent was mixed with 0.5 mL of the extract (1 mg/mL), reacted at room temperature for 3 minutes, 1.5 mL of 2% Na3CO3 was added, reacted in the dark for 2 hours, and then used a microplate reader at 760 nm. Then, the absorbance (OD) was measured. The total polyphenol content in the sample was expressed as gallic acid equivalent (GAE) per gram of sample through the gallic acid standard curve.
또한, 총 플라보노이드 함량 분석은 추출물 1 mL에 2% aluminium chloride methanolic solution 1 mL을 혼합한 뒤, 15분간 실온에서 반응시킨 후 430 nm에서 microplate reader (Tecan Group Ltd.)를 이용하여 흡광도를 측정하였다. 시료에 함유된 총 플라보노이드 함량은 quercetin의 표준곡선을 통하여 시료 g당 quercetin equivalent (QE)로 나타내었다.In addition, for the analysis of the total flavonoid content, 1 mL of 2% aluminum chloride methanolic solution was mixed with 1 mL of the extract, followed by reacting at room temperature for 15 minutes, and absorbance was measured at 430 nm using a microplate reader (Tecan Group Ltd.). The total flavonoid content in the sample was expressed as quercetin equivalent (QE) per gram of sample through the standard curve of quercetin.
그 결과, 갈대 열수 추출물이 총 페놀 387.3μg GAE/mg, 총 플라보노이드 12.56μg GAE/mg으로, 추출물 중 가장 높은 함량을 확인하였다.As a result, the hot water extract of reeds was 387.3 μg GAE/mg of total phenol and 12.56 μg GAE/mg of total flavonoids, confirming the highest content in the extract.
이를 통해, 갈대 열수 추출물에서 유효생리활성 물질의 함량이 가장 높아, 항산화 효과가 가장 높을 것을 예측할 수 있었다.Through this, it was predicted that the content of the effective physiologically active substance was the highest in the hot water extract of reeds, and the antioxidant effect would be highest.
실시예 2-2: DPPH 소거율 측정Example 2-2: DPPH removal rate measurement
갈대추출물 추출방법에 따른 DPPH 소거율을 비교하였다.DPPH scavenging rates according to the reed extract extraction method were compared.
구체적으로, 총 DPPH 소거율은 항산화 효능을 SC50 값으로 비교를 통해 분석하였다. 보다 구체적으로 상기 SC50은 96-well micro plate에 시료에, DPPH(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) 용액을 가한 뒤 잘 혼합하여 암소에서 30분간 반응시켰다. 반응액은 570 nm에서 흡광도를 측정한 후 radical scavenging activity(%)와 50% scavenging concentration(SC50)으로 나타내었다.Specifically, the total DPPH scavenging rate was analyzed by comparing the antioxidant efficacy with an SC 50 value. More specifically, the SC 50 was reacted in the dark for 30 minutes after adding a DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) solution to the sample on a 96-well micro plate, and mixing well. After measuring the absorbance at 570 nm, the reaction solution was expressed as radical scavenging activity (%) and 50% scavenging concentration (SC 50 ).
그 결과, 도 2에서 볼 수 있듯이, 갈대 에탄올(70%)추출물의 SC50은 0.755 mg/mL, 갈대 에탄올(100%)추출물의 SC50은 0.955 mg/mL, 갈대 열수 추출물의 SC50은 0.707 mg/mL임을 확인하였다.As a result, also as shown in Figure 2, the reed ethanol (70%), extract of the SC 50 is 0.755 mg / mL, reed ethanol (100%), extract of the SC 50 is 0.955 mg / mL, the reed hot water extract SC 50 is 0.707 It was confirmed that it was mg/mL.
이를 통해, 갈대 열수 추출물에서 가장 높은 DPPH 소거능이 나타남을 확인하였다.Through this, it was confirmed that the highest DPPH scavenging ability appeared in the hot water extract of reeds.
실시예 2-3: Hydrgogen peroxide 소거능 측정Example 2-3: Hydrgogen peroxide scavenging ability measurement
갈대추출물 추출방법에 따른 hydrogen peroxide 소거능을 비교하였다.The hydrogen peroxide scavenging ability according to the extraction method of reed extract was compared.
구체적으로, 총 hydrogen peroxide 소거능은 항산화 효능을 SC50 값으로 비교를 통해 분석하였다. SC50은 상기에서 서술한 바와 같다.Specifically, the total hydrogen peroxide scavenging ability was analyzed by comparing the antioxidant efficacy with an SC 50 value. SC 50 is as described above.
그 결과, 도 3에서 볼 수 있듯이, 갈대 에탄올(70%)추출물의 IC50은 1.004 mg/mL, 갈대 에탄올(100%)추출물의 SC50은 0.973 mg/mL, 갈대 열수 추출물의 SC50은 0.723 mg/mL임을 확인하였다.As a result, as can be seen in Figure 3, the IC50 of the reed ethanol (70%) extract is 1.004 mg / mL, the SC 50 of the reed ethanol (100%) extract is 0.973 mg / mL, the SC 50 of the hot water extract of reed is 0.723 mg It was confirmed that it was /mL.
이를 통해, 갈대 열수 추출물에서 가장 높은 hydrogen peroxide 소거능이 나타남을 확인하였다.Through this, it was confirmed that the highest hydrogen peroxide scavenging ability appeared in the hot water extract of reeds.
실시예 2-4: Reducing power 환원력 측정Example 2-4: Reducing power measurement of reducing power
갈대추출물 추출방법에 따른 Reducing power 환원력을 비교하였다.Reducing power reduction power according to the reed extract extraction method was compared.
구체적으로, 상기 환원력은 hydrogen peroxidase scavenging 방법을 통해 측정하였으며, 보다 구체적으로, 96-well micro plate에 시료에, 20% 과산화수소수를 널고 5분간 반응 후, ABTS와 peroxidase를 가하여 37에서 10분간 반응시킨 뒤, 상기 반응액은 405 nm에서 흡광도를 측정하였다.Specifically, the reducing power was measured through the hydrogen peroxidase scavenging method, and more specifically, after reacting for 5 minutes by adding 20% hydrogen peroxide solution to the sample on a 96-well micro plate, ABTS and peroxidase were added to react at 37 for 10 minutes. Then, the reaction solution was measured for absorbance at 405 nm.
그 결과, 도 4에서 볼 수 있듯이, 200 μg/mL 농도에서 갈대 에탄올(70%) 추출물은 흡광도 0.199, 갈대 에탄올(100%)추출물은 흡광도 0.186, 갈대 열수 추출물은 0.213의 흡광도가 나타나는 것을 확인하였다.As a result, as shown in Figure 4, it was confirmed that the absorbance of the reed ethanol (70%) extract at 200 μg/mL concentration was 0.199, the absorbance of the reed ethanol (100%) extract 0.186, and the reed hot water extract 0.213 .
이를 통해, 갈대 열수 추출물에서 가장 높은 환원력이 나타남을 확인하였다.Through this, it was confirmed that the highest reducing power appeared in the hot water extract of reeds.
실시예 3: 추출방법에 따른 세포독성평가Example 3: Cytotoxicity evaluation according to the extraction method
갈대추출물 추출방법에 따른 세포독성을 비교하였다.Cytotoxicity was compared according to the extraction method of reed extract.
보다 구체적으로, 갈대추출물 추출방법에 따른 세포독성을 비교하기 위하여, B16F10 멜라닌형성 세포에 상기 갈대추출물을 처리하여 세포독성을 비교하였다.More specifically, in order to compare the cytotoxicity according to the reed extract extraction method, the cytotoxicity was compared by treating the reed extract on B16F10 melanogenic cells.
그 결과, 도 5 내지 도 7에서 볼 수 있듯이, 갈대 에탄올(70%)추출물 400ug/mL를 24시간 처리하였을 때, 29%, 48시간 처리하였을 때, 50%의 세포독성이 나타났고, 갈대 에탄올(100%)추출물 400 ug/mL를 24시간 처리하였을 때, 33%, 48시간 처리하였을 때, 60%의 세포독성이 나타났고, 갈대 열수 추출물 400 ug/mL를 24시간 처리하였을 때, 19%, 48시간 처리하였을 때, 50%의 세포독성이 나타남을 확인하였다.As a result, as can be seen in FIGS. 5 to 7, when 400 ug/mL of reed ethanol (70%) extract was treated for 24 hours, when treated for 29% and 48 hours, 50% cytotoxicity was observed, and reed ethanol (100%) When 400 ug/mL of extract was treated for 24 hours, when 33% and 48 hours were treated, cytotoxicity of 60% was observed, and when 400 ug/mL of reed hot water extract was treated for 24 hours, 19% , When treated for 48 hours, it was confirmed that 50% of cytotoxicity appeared.
이를 통해, 3가지 추출방법에 따른 멜라닌형성세포의 세포독성평가에서 열수추출물이 가장 안전함을 확인하였다.Through this, it was confirmed that the hot water extract is the safest in the cytotoxicity evaluation of melanocytes according to the three extraction methods.
실시예 4: 추출 방법에 따른 미백 효능Example 4: whitening effect according to the extraction method
실시예 4-1: 멜라닌 색소 생성량 평가 비교Example 4-1: Comparison of melanin pigment generation amount evaluation
갈대추출물 추출방법에 따른 멜라닌 색소 억제능을 비교하였다.The ability to inhibit melanin pigment according to the reed extract extraction method was compared.
보다 구체적으로, 갈대추출물 추출방법에 따른 멜라닌 억제능을 비교하기 위하여, B16F10 멜라닌형성 세포에 α-MSH을 처리하여 멜라닌 생성을 유도하고, 상기 갈대추출물을 처리하여 멜라닌 억제능을 비교하였다. 이때, 양성 대조군으로는 알부틴(arbutin)을 사용하였으며, 상기 비교는 멜라닌 색소의 표준곡선을 이용하여 비교하였다.More specifically, in order to compare the melanin inhibitory ability according to the reed extract extraction method, B16F10 melanin-forming cells were treated with α-MSH to induce melanin production, and the reed extract was treated to compare the melanin inhibitory ability. At this time, arbutin was used as a positive control, and the comparison was performed using a standard curve of melanin pigment.
그 결과, 도 8에서 볼 수 있듯이, 갈대 에탄올(70%)추출물은 25, 50 ug/mL 농도에서 α-MSH에 비해 유의성 있게 감소하였으나, 100 ug/mL 이상의 농도에서는 멜라닌 생성억제효과가 유의성 있게 나타나지 않음을 확인하였다.As a result, as can be seen in FIG. 8, the reed ethanol (70%) extract significantly decreased compared to α-MSH at 25 and 50 ug/mL concentrations, but at a concentration of 100 ug/mL or higher, the melanin production inhibitory effect was significantly reduced. It was confirmed that it did not appear.
또한, 도 9에서 볼 수 있듯이, 갈대 에탄올(100%)추출물은 α-MSH에 비해 대부분 10% 전후의 억제 조절효과를 보이고 있으며 유의성이 없음을 확인하였다.In addition, as can be seen in FIG. 9, it was confirmed that the reed ethanol (100%) extract showed an inhibitory control effect of approximately 10%, compared to α-MSH, and had no significance.
또한, 도 10에서 볼 수 있듯이, 갈대 열수 추출물은 25, 50, 100 및 200 ug/mL 모든 농도에서 유의성 있는 멜라닌 억제능을 나타내었고, 25, 50 및 100 ug/mL 농도에서 알부틴과 비슷한 멜라닌 생성을 감소하였으며, 200 ug/mL 농도에서 알부틴 보다 3% 이상 멜라닌생성을 감소시킴을 확인하였다.In addition, as can be seen in Figure 10, the reed hot water extract showed significant melanin inhibitory ability at all concentrations of 25, 50, 100 and 200 ug/mL, and produced melanin similar to arbutin at concentrations of 25, 50 and 100 ug/mL. It was confirmed that at a concentration of 200 ug/mL, melanogenesis was reduced by more than 3% than arbutin.
이를 통해, 갈대 열수 추출물이 갈대 에탄올 추출물(70, 100%) 보다 멜라닌 생성 감소 효과가 우수함을 확인하였다.Through this, it was confirmed that the reed hot water extract has superior melanin production reduction effect than the reed ethanol extract (70, 100%).
실시예 4-2: 티로시나제 활성 저해 비교Example 4-2: Comparison of inhibition of tyrosinase activity
갈대추출물 추출방법에 따른 티로시나제 활성 저해 효능을 비교하였다.The inhibitory efficacy of tyrosinase activity according to the reed extract extraction method was compared.
구체적으로, 식약처 자료를 기반으로 하여, in vitro 실험을 통해 티로시나제 활성의 저해효능을 IC50을 통해 비교하였다.Specifically, based on the KFDA data, the inhibitory effect of tyrosinase activity was compared through IC50 through an in vitro experiment.
그 결과, 도 11에서 볼 수 있듯이, 갈대 열수 추출물의 SC50은 0.533 mg/mL인 것을 확인하였다.As a result, as can be seen in Figure 11, it was confirmed that the SC 50 of the reed hot water extract is 0.533 mg/mL.
이를 통해, 갈대 추출물 중 갈대 열수 추출물이 가장 높은 티로시나제 활성 저해효능이 있으며, 농도의존적으로 티로시나제 활성 저해효능이 증가함을 확인하였다.Through this, it was confirmed that the reed hot water extract has the highest tyrosinase activity inhibitory effect among the reed extracts, and the tyrosinase activity inhibitory effect increases depending on the concentration.
실시예 5: α-글루코시다제 활성 저해 효능Example 5: α-glucosidase activity inhibition efficacy
갈대 열수 추출물의 α-글루코시다제 활성 저해 효능을 확인하였다.The inhibitory effect of α-glucosidase activity of the hot water extract of reeds was confirmed.
티로시나제는 N-linked 글리코실화(glycosylation) 반응과정에 의해 만들어지며, 이때, α-글루코시다제가 마노스(mannose)와 글루코스(glucose)의 결합을 끊어줌으로써 N-linked 글리코실화 반응이 시작되고, α-글루코시다제 효소의 활성을 저해하면 티로시나제의 글리코실화 반응이 저해되어 불활성화 형태의 티로시나제가 멜라노좀으로 이동하여 색소침착이 억제된다고 알려져 있다. 이에, α-글루코시다제 활성 저해 효능을 SC50을 통해 확인하였으며, 양성 대조군으로는 Qucetin을 사용하였다.Tyrosinase is produced by the N-linked glycosylation reaction process, at this time, α-glucosidase breaks the bond between mannose and glucose, thereby starting the N-linked glycosylation reaction, and α -It is known that inhibition of the activity of the glucosidase enzyme inhibits the glycosylation reaction of tyrosinase, and the inactivated form of tyrosinase moves to the melanosomes, thereby inhibiting pigmentation. Thus, the α-glucosidase activity inhibition effect was confirmed through SC 50 , and Qucetin was used as a positive control.
그 결과, 도 12에서 볼 수 있듯이, 갈대 열수 추출물의 α-글루코시다제 SC50은 0.47 mg/mL임을 확인하였으며, 100 ug/mL 농도에서 12.33%, 200 ug/mL 농도에서 22.71%의 α-글루코시다제 저해 효과가 있음을 확인하였다.As a result, as shown in FIG. 12, it was confirmed that α-glucosidase SC 50 of the hot water extract of reed was 0.47 mg/mL, and α- of 12.33% at 100 ug/mL concentration and 22.71% at 200 ug/mL concentration. It was confirmed that there is a glucosidase inhibitory effect.
이를 통해, 갈대 열수 추출물이 농도 의존적으로 α-글루코시다제 저해하여 미백 효능이 있음을 확인하였다.Through this, it was confirmed that the reed hot water extract has a whitening effect by inhibiting α-glucosidase in a concentration-dependent manner.
실시예 6: 열수추출물의 세포 티로시나제 억제 효능Example 6: Efficacy of Inhibiting Cellular Tyrosinase of Hot Water Extract
갈대 열수 추출물의 티로시나제 억제 효능을 확인하였다.The tyrosinase inhibitory effect of the reed hot water extract was confirmed.
구체적으로, 멜라닌형성세포 B16F10에 본 발명의 갈대 열수 추출물을 처리하여, 세포의 티로시나제 상대적 활성을 비교하였다. 보다 구체적으로, α-MSH를 처리하여 멜라닌 형성을 유도하였으며, 양성 대조군으로는 알부틴을 사용하였다.Specifically, melanocytes B16F10 were treated with the reed hot water extract of the present invention to compare the relative activity of tyrosinase in cells. More specifically, α-MSH was treated to induce melanin formation, and arbutin was used as a positive control.
그 결과, 도 13에서 볼 수 있듯이, 갈대 열수 추출물의 100, 200 ug/mL 농도에서 유의성이 나타났으며, 100 ug/mL 농도에서 양성 대조군 알부틴과 유사한 티로시나제 억제 효능이 나타났으며, 200 ug/mL에서 알부틴 보다 15% 이상 증가한 티로시나제 억제 효능을 확인하였다.As a result, as can be seen in FIG. 13, significance was observed at 100 and 200 ug/mL concentrations of the reed hot water extract, and tyrosinase inhibitory efficacy similar to arbutin in the positive control was observed at 100 ug/mL concentration, and 200 ug/mL In mL, it was confirmed that the tyrosinase inhibitory effect increased by more than 15% than arbutin.
이를 통해, 갈대 열수 추출물은 α-MSH에 의해 증가된 티로시나제 활성을 억제하는 효능이 있음을 확인하였으며, 멜라닌 생성을 감소시켜 미백 효능이 있음을 확인하였다. Through this, it was confirmed that the reed hot water extract has the effect of inhibiting the tyrosinase activity increased by α-MSH, and it was confirmed that there is a whitening effect by reducing melanin production.
실시예 7: 시험제형 제조 및 안정성 조사Example 7: Test formulation preparation and stability investigation
본 발명의 갈대 뿌리 추출물을 포함하는 시험제형을 제조하고(표 2), 이의 안정성을 조사하기 위하여 안정성 검사를 실시하였다.A test formulation containing the reed root extract of the present invention was prepared (Table 2), and a stability test was performed to investigate the stability thereof.
보다 구체적으로, 한방바이오산업 임상지원센터에 피부첩포자극 안정성 조사를 의뢰하였고, 식품의약품안전처(KFDA)의 안정성시험 가이드라인에 따라 가혹/가속안정성 및 제형/지표물질 안정도를 검사하였으며, 상기 갈대 뿌리 추출물을 포함하는 세럼시험제형의 미생물 안전성을 시험하였다.More specifically, a skin patch irritation stability investigation was requested to the Oriental Medicine Bio Industry Clinical Support Center, and the harsh/accelerated stability and formulation/indicator stability were tested according to the safety test guidelines of the Ministry of Food and Drug Safety (KFDA). The microbial safety of the serum test formulation containing the root extract was tested.
그 결과, 한방바이오산업 임상지원센터에서 피부첩포자극 안정성을 조사하여 무자극으로 안전함을 확인하였다.As a result, it was confirmed that it is safe without irritation by investigating the stability of skin patch irritation at the Clinical Support Center for Oriental Medicine Bio Industry.
또한, 도 14에서 볼 수 있듯이, 식약처의 안정성시험 가이드라인에 따라 가속/가혹조건에서 pH 및 비중의 변화가 없이 갈대 뿌리 추출물이 제형에 영향을 주지 않는 것을 확인하였다.In addition, as can be seen in FIG. 14, it was confirmed that the reed root extract did not affect the formulation without changes in pH and specific gravity under accelerated/severe conditions according to the safety test guidelines of the Ministry of Food and Drug Safety.
또한, 도 15 내지 16에서 볼 수 있듯이, 갈대 뿌리 추출물을 함유하는 세럼시험 제형의 일반세균 및 진균 미생물에 대한 안정성을 확인하였다.In addition, as can be seen in Figures 15 to 16, it was confirmed the stability of the serum test formulation containing the reed root extract against common bacteria and fungal microorganisms.
이를 통해, 본 발명의 갈대 뿌리 추출물을 포함하는 시험제형의 안정성을 확인하였다.Through this, it was confirmed the stability of the test formulation containing the reed root extract of the present invention.
실시예 8: 일반 열수 추출법 및 고온/가압 열수 추출법 비교Example 8: Comparison of general hot water extraction method and high temperature/pressure hot water extraction method
실시예 8-1: 쿠마린산 함량 비교Example 8-1: Comparison of coumarin acid content
고온/가압 열수 추출법의 우수성을 확인하기 위하여, 실시예 1의 고온/가압 열수 추출법을 통한 추출물과, 가압을 가하지 않고 100℃에서 추출한 일반 열수 추출법을 통해 추출한 추출물의 쿠마린산을 비교하였다.In order to confirm the superiority of the hot/pressurized hot water extraction method, the extract through the hot/pressurized hot water extraction method of Example 1 and the coumarin acid of the extract extracted through the general hot water extraction method extracted at 100° C. without applying pressure were compared.
보다 구체적으로, 쿠마린산 함량은 HPLC 분석을 통해 확인하였다. 각각의 추출법을 통해 획득한 분말 추출물을 에탄올에 0.1% 농도로 용해시켜 HPLC 분석을 통해 분석하였다.More specifically, the coumarin acid content was confirmed through HPLC analysis. The powder extract obtained through each extraction method was dissolved in ethanol at a concentration of 0.1% and analyzed by HPLC analysis.
그 결과, 표 3 내지 도 17에서 볼 수 있듯이, 일반 열수 추출법과 비교하여, 고온/가압 열수 추출법에서 동결건조물 1kg당 쿠마린산 함량이 2741mg/kg으로 553mg/kg 함량을 보인 일반 열수 추출법과 비교하여 5배 이상 월등히 뛰어남을 확인하였으며, 고온/가압 열수 추출물은 동결건조 후 분말형태로 전환되는 반면, 일반 열수 추출물은 동결건조 후 얻은 분말이 딱딱한 덩어리로 변하는 것을 확인하였다.As a result, as can be seen in Tables 3 to 17, compared to the general hot water extraction method, compared with the general hot water extraction method showing the coumarin acid content per 1 kg of lyophilisate is 2741 mg / kg 553 mg / kg in the high temperature / pressurized hot water extraction method It was confirmed that it was superior to 5 times or more, and it was confirmed that the hot/pressurized hot water extract was converted into a powder form after freeze-drying, whereas the general hot water extract was confirmed that the powder obtained after freeze-drying turned into a hard mass.
이를 통해, 고온/가압 열수 추출물의 쿠마린산 함량이 5배 이상 높고, 안정적인 분말형태로 전환되어 이용이 용이함을 확인하였다.Through this, it was confirmed that the coumarin acid content of the hot/pressurized hot water extract was 5 times higher, and it was converted into a stable powder form, so that it was easy to use.
실시예 8-2: L-DOPA oxidation assay 비교Example 8-2: Comparison of L-DOPA oxidation assay
고온/가압 열수 추출법의 우수성을 확인하기 위하여, 실시예 1의 고온/가압 열수 추출법을 통한 추출물과, 가압을 가하지 않고 100℃에서 추출한 일반 열수 추출법을 통해 추출한 추출물의 L-DOPA oxidation assay를 비교하였다.In order to confirm the excellence of the hot/pressurized hot water extraction method, the L-DOPA oxidation assay of the extract through the hot/pressurized hot water extraction method of Example 1 and the extract extracted through the general hot water extraction method extracted at 100°C without applying pressure was compared. .
보다 구체적으로, 상기 방법을 통해 획득한 시료들은 각각 0.1M sodium phosphate buffer(pH7.0)에 1000μg/ml 부터 일정배수로 희석하여 준비하였고, L-DOPA를 기질로 하는 효소인 티로시나제는 268.7mU 용액, 기질인 L-DOPA는 10mM를 준비하였다. 또한, 양성대조군으로는 알부틴 900μg/mL을 준비하였다. 이후, 96-well plate에 티로시나제 용액 5μL를 넣고, 시료 또는 양성대조군을 첨가한 뒤, 기질인 L-DOPA 5μL와 buffer 85μL를 동시에 첨가하였다. 공시험액으로는 L-DOPA 대신 buffer를 첨가하여 분석하였다. 그 뒤, 실온에서 20~30분 반응시키고 ELISA 리더기 450nm에서 흡광도값을 측정하였다. L-DOPA 산화(%)는 하기식을 통해 계산하였다.More specifically, samples obtained through the above method were prepared by diluting each of them in 0.1M sodium phosphate buffer (pH7.0) from 1000 μg/ml to a constant multiple, and tyrosinase, an enzyme using L-DOPA as a substrate, was 268.7mU solution, The substrate L-DOPA was prepared in 10 mM. In addition, 900 μg/mL of arbutin was prepared as a positive control. Thereafter, 5 μL of a tyrosinase solution was added to a 96-well plate, a sample or a positive control was added, and then 5 μL of L-DOPA and 85 μL of buffer were simultaneously added. As a blank test solution, buffer was added instead of L-DOPA for analysis. Then, the reaction was performed at room temperature for 20 to 30 minutes, and the absorbance value was measured at 450 nm with an ELISA reader. L-DOPA oxidation (%) was calculated through the following formula.
L-DOPA 산화(%) = {(시험군-시험군의 공시험군)/(음성대조군-음성대조군의 공시험군)*100 }L-DOPA oxidation (%) = {(test group-blank test group of test group)/(negative control group-blank test group of negative control group) *100}
그 결과, 도 18에서 볼 수 있듯이, 고온/가압 열수 추출물은 200μg/mL에서부터 억제활성을 나타냈으나, 일반 열수 추출물은 500μg/mL에서부터 억제활성을 나타냈으며, 고온/가압 열수 추출물이 일반 열수 추출물 보다 높은 억제활성이 나타남을 확인하였다.As a result, as can be seen in FIG. 18, the hot/pressurized hot water extract showed inhibitory activity from 200 μg/mL, but the general hot water extract showed inhibitory activity from 500 μg/mL, and the hot/pressed hot water extract was general hot water extract. It was confirmed that higher inhibitory activity appeared.
이를 통해, 고온/가압 열수 추출물이 일반 열수 추출물보다 높은 산화 억제능을 보임을 확인하였다.Through this, it was confirmed that the high-temperature/pressurized hot-water extract showed higher antioxidant activity than the general hot-water extract.
이상의 설명으로부터, 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.From the above description, those skilled in the art to which the present invention pertains will be able to understand that the present invention can be implemented in other specific forms without changing the technical spirit or essential features thereof. In this regard, it should be understood that the embodiments described above are illustrative in all respects and not limiting. The scope of the present invention should be construed that all changes or modifications derived from the meaning and scope of the claims to be described later rather than the above detailed description and equivalent concepts are included in the scope of the present invention.
Claims (19)
상기 열수 추출물은 110℃ 내지 130℃의 고온 및 15psi 내지 20psi의 가압조건에서 10분 내지 20분 열수 추출하는 것이고,
쿠마린산 함량이 증가된 것을 특징으로 하는 것인, 화장료 조성물.
A cosmetic composition for skin whitening that contains hot water extract of the reed (Phragmites Communis) root as an active ingredient,
The hot water extract is to extract hot water for 10 to 20 minutes at a high temperature of 110°C to 130°C and pressurized conditions of 15 psi to 20 psi,
The cosmetic composition, characterized in that the coumarin acid content is increased.
The cosmetic composition of claim 1, wherein the extract is in powder form.
The cosmetic composition of claim 6, wherein the powder is obtained through lyophilization.
The cosmetic composition of claim 1, wherein the extract has an antioxidant effect.
The cosmetic composition of claim 1, wherein the whitening is due to inhibition of the activity of tyrosinase.
The cosmetic composition according to claim 1, wherein the whitening is due to inhibition of the activity of α-glucosidase.
The cosmetic composition of claim 1, wherein the whitening is due to inhibition of the activity of melanocytes.
상기 수득된 추출물은 쿠마린산 함량이 증가된 것을 특징으로 하는 것인, 피부 미백용 화장료 조성물의 제조방법.
(a) extracting hot water from the reed (Phragmites Communis) roots at a high temperature of 110°C to 130°C and pressurization conditions of 15psi to 20psi for 10 to 20 minutes; (b) cooling the extract; And (c) obtaining the cooled extract as an extract in powder form,
The obtained extract is characterized in that the content of coumarin acid is increased, the method for producing a cosmetic composition for skin whitening.
The method of claim 13, wherein the cooling in step (b) is performed at 0°C to 80°C.
The method of claim 13, wherein the step (c) is obtained through lyophilization.
상기 열수 추출물은 110℃ 내지 130℃의 고온 및 15psi 내지 20psi의 가압조건에서 10분 내지 20분 열수 추출하는 것이고,
쿠마린산 함량이 증가된 것을 특징으로 하는 것인, 의약외품 조성물.It is a quasi-drug composition for skin whitening that contains the hot and pressurized hot water extract of the root of Phragmites Communis as an active ingredient,
The hot water extract is to extract hot water for 10 to 20 minutes at a high temperature of 110°C to 130°C and pressurized conditions of 15 psi to 20 psi,
It is characterized in that the coumarin acid content is increased, quasi-drug composition.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1020190176556A KR102193209B1 (en) | 2019-12-27 | 2019-12-27 | Cosmetic composition for skin whitening comprising extract of Phragmites Communis |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1020190176556A KR102193209B1 (en) | 2019-12-27 | 2019-12-27 | Cosmetic composition for skin whitening comprising extract of Phragmites Communis |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
KR102193209B1 true KR102193209B1 (en) | 2020-12-18 |
Family
ID=74041525
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020190176556A KR102193209B1 (en) | 2019-12-27 | 2019-12-27 | Cosmetic composition for skin whitening comprising extract of Phragmites Communis |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
KR (1) | KR102193209B1 (en) |
Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN112972314A (en) * | 2021-03-31 | 2021-06-18 | 科丝美诗(中国)化妆品有限公司 | Eye repair composition and preparation method and application thereof |
KR102340001B1 (en) * | 2021-05-25 | 2021-12-17 | 주식회사 예인코스메틱 | Cosmetics material having inhibitor for NO activator and tyrosinase activator, Revitalizing cosmetics containing the same and Manufacturing method thereof |
KR20220114335A (en) | 2021-02-08 | 2022-08-17 | 오유정 | Compositions for skin-whitening and anti-winkle comprising narural material |
KR20220138649A (en) | 2021-04-06 | 2022-10-13 | 주식회사 단정바이오 | Composition for protecting skin comprising extract of Oryza Sativa(Rice), Phragmites Communis, Zea Mays(Corn) Silk, Malva Sylvestris(Mallow) and Aloe Barbadensis as active ingredient |
CN116270379A (en) * | 2023-02-13 | 2023-06-23 | 天津大学 | Rhizoma phragmitis extract capable of whitening skin, and preparation method and application thereof |
Citations (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20030059944A (en) * | 2002-01-04 | 2003-07-12 | 김용학 | The manufacturing method of various kinds of functional health foods by heat-medium abstraction of high temperature and pressurization |
KR20050071595A (en) * | 2002-10-30 | 2005-07-07 | 산또리 가부시키가이샤 | Method of manufacturing plant finished product |
KR20050099839A (en) * | 2004-04-12 | 2005-10-17 | 주식회사 태평양 | Composition for skin whitening containing extract from culture fluid of actinomycetes |
KR20080105808A (en) * | 2007-06-01 | 2008-12-04 | 이민원 | Cosmetic composition for skin whitening comprising phenolic compounds isolated from phragmitis rhizoma as active ingredient |
KR20110020350A (en) * | 2009-08-24 | 2011-03-03 | 최진호 | A memory improving agent developed from components of red ginseng and reed root, a preparation method thereof, and food compositions enhanced functionality containing the same |
KR20130130579A (en) * | 2012-05-22 | 2013-12-02 | 정진남 | Composition for treating alcohol intoxication containing fructus xanthii extracts and method of preparing the extracts |
KR20160021676A (en) * | 2014-08-18 | 2016-02-26 | 유민정 | Cosmetic Compositions with Whitening and Anti-oxidative Effect Comprising of Phragmitis Rhizoma, Salicomia herbacea L. and Prunus mume |
KR101800961B1 (en) * | 2016-05-25 | 2017-11-23 | 국립낙동강생물자원관 | Skin-lightening Composition Using an Extract of Reed or a Product Obtained by Fermenting the Same with Lactic Acid Bacteria |
KR20170138239A (en) * | 2016-06-07 | 2017-12-15 | 순천대학교 산학협력단 | Composition for skin whitening comprising Reed young leave extracts |
-
2019
- 2019-12-27 KR KR1020190176556A patent/KR102193209B1/en active IP Right Grant
Patent Citations (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20030059944A (en) * | 2002-01-04 | 2003-07-12 | 김용학 | The manufacturing method of various kinds of functional health foods by heat-medium abstraction of high temperature and pressurization |
KR20050071595A (en) * | 2002-10-30 | 2005-07-07 | 산또리 가부시키가이샤 | Method of manufacturing plant finished product |
KR20050099839A (en) * | 2004-04-12 | 2005-10-17 | 주식회사 태평양 | Composition for skin whitening containing extract from culture fluid of actinomycetes |
KR20080105808A (en) * | 2007-06-01 | 2008-12-04 | 이민원 | Cosmetic composition for skin whitening comprising phenolic compounds isolated from phragmitis rhizoma as active ingredient |
KR20110020350A (en) * | 2009-08-24 | 2011-03-03 | 최진호 | A memory improving agent developed from components of red ginseng and reed root, a preparation method thereof, and food compositions enhanced functionality containing the same |
KR20130130579A (en) * | 2012-05-22 | 2013-12-02 | 정진남 | Composition for treating alcohol intoxication containing fructus xanthii extracts and method of preparing the extracts |
KR20160021676A (en) * | 2014-08-18 | 2016-02-26 | 유민정 | Cosmetic Compositions with Whitening and Anti-oxidative Effect Comprising of Phragmitis Rhizoma, Salicomia herbacea L. and Prunus mume |
KR101800961B1 (en) * | 2016-05-25 | 2017-11-23 | 국립낙동강생물자원관 | Skin-lightening Composition Using an Extract of Reed or a Product Obtained by Fermenting the Same with Lactic Acid Bacteria |
KR20170138239A (en) * | 2016-06-07 | 2017-12-15 | 순천대학교 산학협력단 | Composition for skin whitening comprising Reed young leave extracts |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Mi-Ok Sim 외 2인, "Young leaves of reed (Phragmites communis) suppress melanogenesis and oxidative stress in B16F10 melanoma cells", Biomedicine & Pharmacotherapy, 93, pp.165-171 (2017)* * |
Cited By (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20220114335A (en) | 2021-02-08 | 2022-08-17 | 오유정 | Compositions for skin-whitening and anti-winkle comprising narural material |
CN112972314A (en) * | 2021-03-31 | 2021-06-18 | 科丝美诗(中国)化妆品有限公司 | Eye repair composition and preparation method and application thereof |
CN112972314B (en) * | 2021-03-31 | 2023-04-25 | 科丝美诗(中国)化妆品有限公司 | Eye repair composition and preparation method and application thereof |
KR20220138649A (en) | 2021-04-06 | 2022-10-13 | 주식회사 단정바이오 | Composition for protecting skin comprising extract of Oryza Sativa(Rice), Phragmites Communis, Zea Mays(Corn) Silk, Malva Sylvestris(Mallow) and Aloe Barbadensis as active ingredient |
KR102525579B1 (en) * | 2021-04-06 | 2023-04-25 | 주식회사 단정바이오 | Composition for protecting skin comprising extract of Oryza Sativa(Rice), Phragmites Communis, Zea Mays(Corn) Silk, Malva Sylvestris(Mallow) and Aloe Barbadensis as active ingredient |
KR102340001B1 (en) * | 2021-05-25 | 2021-12-17 | 주식회사 예인코스메틱 | Cosmetics material having inhibitor for NO activator and tyrosinase activator, Revitalizing cosmetics containing the same and Manufacturing method thereof |
CN116270379A (en) * | 2023-02-13 | 2023-06-23 | 天津大学 | Rhizoma phragmitis extract capable of whitening skin, and preparation method and application thereof |
CN116270379B (en) * | 2023-02-13 | 2023-09-26 | 天津大学 | Rhizoma phragmitis extract capable of whitening skin, and preparation method and application thereof |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
KR102193209B1 (en) | Cosmetic composition for skin whitening comprising extract of Phragmites Communis | |
AU2007361455A1 (en) | Topical cosmetic skin lightening compositions and methods of use thereof | |
KR101669359B1 (en) | composition for promoting melanin synthesis | |
KR20140082555A (en) | Compositions containing an extract of hydrangea macrophylla for. otaksa for skin whitening | |
KR102111648B1 (en) | Method for manufacturing prunus yedoensis leaves biorenovate extract and cosmetic composition for skin whitening containing the same | |
KR20190137328A (en) | Skin external application composition for anti-aging containing Rhodotypos scandens extract | |
KR100602684B1 (en) | Cosmetic composition comprising extract of erigeron breviscapus for whitening | |
KR101299024B1 (en) | Cosmetics composition for skin lightening color, antioxidantsand and method for preparing the same | |
CN106413687B (en) | Product and its preparation method and application containing gadol extract and ginkgo biloba extract | |
KR20100018139A (en) | A skin-care agent containing sedum sarmentosum extracts and lipoic acid-peg conjugated compounds | |
KR102000550B1 (en) | Composition comprising Polyamine compounds isolated from Quercus Mongolica pollen extracts for whitening | |
KR101304677B1 (en) | A chestnut bur extracts and a cosmetic composition containing the chestnut bur extracts as an active ingredient | |
KR102325393B1 (en) | Skin whitening cosmetic composition with bioconversion of Breea segeta extract | |
KR102152407B1 (en) | Cosmetic composition containing phycocyanobilin and its derivative derived from spirulina | |
KR20110067799A (en) | Skin whitening composition using a mulberry extract | |
KR20210137335A (en) | Cosmetic composition comprising extracellular vesicles of seaweed for whitening skin | |
KR101317433B1 (en) | The cosmetic composition for skin whitening comprising the mixture of extract of Hovenia dulcia, Platycodon grandiflorum, wheat bud and sage | |
KR101777368B1 (en) | Composition for skin-whitener containing extract of china rose | |
KR102225547B1 (en) | Cosmetic composition comprising substance P for whitening skin | |
KR102289135B1 (en) | Herbal medicine mixed extract and uses therof | |
KR102186533B1 (en) | A cosmetic composition for skin whitening comprising Rosa Damascena Flower Oil and Rhodiola Rosea root extract | |
KR101107614B1 (en) | Cosmetic Composition Containing Fermented of Viola mandshurica Extract | |
KR20100068258A (en) | Use of 2,2'-cyclolignanes for inducing, restoring or stimulating the pigmentation of the skin, hair or hairs | |
KR20230096777A (en) | Stabilized fomulation for skin protection containing extract of Phragmites Communis as an active ingredient | |
KR20160119548A (en) | Skin whitening composition comprising Scrophularia buergeriana hot water extract as an active ingredient |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
AMND | Amendment | ||
E601 | Decision to refuse application | ||
X091 | Application refused [patent] | ||
AMND | Amendment | ||
X701 | Decision to grant (after re-examination) | ||
GRNT | Written decision to grant |