KR102340001B1 - Cosmetics material having inhibitor for NO activator and tyrosinase activator, Revitalizing cosmetics containing the same and Manufacturing method thereof - Google Patents

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황정근
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Abstract

The present invention relates to a cosmetic using a natural resource material and functional cosmetics comprising the same, and more specifically, to an invention capable of providing functional cosmetics which have an anti-inflammatory effect and can prevent skin pigmentation by applying a complex extract containing extracts derived from a natural plant as a cosmetic, and cosmetics using the same.

Description

NO 활성 억제능 및 티로시나아제 활성 억제능을 가지는 화장료, 이를 포함하는 리바이탈라이징 화장품 및 이의 제조방법{Cosmetics material having inhibitor for NO activator and tyrosinase activator, Revitalizing cosmetics containing the same and Manufacturing method thereof}Cosmetics having NO activity inhibitory activity and tyrosinase activity inhibitory activity, revitalizing cosmetics containing the same, and manufacturing method thereof {Cosmetics material having inhibitor for NO activator and tyrosinase activator, Revitalizing cosmetics containing the same and Manufacturing method thereof}

본 발명은 피부 등에 염증을 유발하는 NO 활성 성분에 대한 억제, 스트레스 받고 지친 피부를 효과적으로 회복시켜주는 상기 NO 활성 억제능이 우수하면서도, 티로시나아제 효소 활성 억제를 통한 색소침착 발현 감소 내지 억제를 통해 기미 등의 색소침착 완화 내지 예방이 가능한 천연식물추출물 유래의 화장료, 이를 이용한 리바이탈라이징 화장품 및 이를 제조하는 방법에 관한 것이다.The present invention is excellent in inhibiting NO active ingredients that cause inflammation in the skin, etc., while having excellent NO activity inhibition ability that effectively restores stressed and tired skin, reducing or inhibiting pigmentation expression through inhibition of tyrosinase enzyme activity It relates to a cosmetic derived from a natural plant extract capable of alleviating or preventing pigmentation, such as, a revitalizing cosmetic using the same, and a method for manufacturing the same.

염증반응은 인체가 항상성 유지하기 위해 외부 자극원에 대한 인체의 방어 기작으로 미생물 유래의 LPS(lipopolysaccharide)와 같은 외부 자극원과 아라키돈산(arachidonic acid)과 같은 내부 자극원들을 매개로 하여 발생한다.The inflammatory response is a defense mechanism of the human body against external stimuli to maintain homeostasis. It occurs through external stimuli such as LPS (lipopolysaccharide) derived from microorganisms and internal stimuli such as arachidonic acid.

LPS는 그람 음성박테리아의 세포벽 최외각층에 존재하는 물질로서 병원성 세균과 진핵생물간의 상호작용에 다양한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 특히LPS는 인체에서 외래물질로 인식되어 세포 방어시스템을 활성화시키고, 이로 인해 면역 방어시스템 중 하나인, 염증유발경로가 활성화된다.LPS is a substance present in the outermost layer of the cell wall of Gram-negative bacteria and is known to play various roles in the interaction between pathogenic bacteria and eukaryotes. In particular, LPS is recognized as a foreign substance in the human body and activates the cellular defense system, thereby activating the inflammatory pathway, which is one of the immune defense systems.

세포가 LPS 등의 외부 자극원에 의해 자극을 받게 되면, iNOS(유도형NO synthas) 및 COX-2(cyclooxygenase-2)의 발현이 유도되고, 이로 인해 염증반응을 매개하는 세포 내 신호 전달 물질인 일산화질소(nitric oxide, NO)와 프로스타글란딘(prostaglandin E2, PGE2)을 방출하게 된다. 이렇게 과다 방출된NO 및PGE2로 인해 인체 및 조직에 염증반응이 일어나게 된다.When cells are stimulated by an external stimulator such as LPS, the expression of iNOS (inducible NO synthas) and COX-2 (cyclooxygenase-2) is induced, which in turn induces intracellular signal transduction substances that mediate the inflammatory response. Nitric oxide (NO) and prostaglandin E2 (PGE 2 ) are released. Due to this excessive release of NO and PGE 2 , an inflammatory reaction occurs in the human body and tissues.

일반적으로 NO는 생리적인 현상인 혈압조절과 신경전달 매개체로 작용하는 등 정상적인 생리활성의 조절작용을 하는 조절물질이며, 면역반응에 있어서도 중추적인 조절물질 역할을 하고 있다. 하지만, iNOS에 의해 과발현된 NO는 염증반응을 일으키고 면역체계의 이상을 유발한다. 또한, COX-2는 아라키돈산을 프로스타글란딘(PGE2)로 전환시키는 효소로서, COX-2가 과발현하게 되면, PGE2가 과다 생성되어 또 다른 염증유발경로 역할을 하게 된다.In general, NO is a modulator that regulates normal physiological activities, such as controlling blood pressure, which is a physiological phenomenon, and acting as a neurotransmitter mediator, and plays a central role in the immune response as well. However, NO overexpressed by iNOS causes an inflammatory response and causes abnormalities in the immune system. In addition, COX-2 is an enzyme that converts arachidonic acid into prostaglandin (PGE 2 ). When COX-2 is overexpressed, PGE 2 is overproduced and serves as another inflammatory pathway.

대부분의 염증 질환의 치료제로서 널리 사용되고 있는 제제인 비스테로이드성 소염제(non-steroidal anti-inflammatory drugs, NSAIDS)는 시클로옥시게나제(cyclooxygenase, COX)라고 하는 아라키돈산(arachidonicacid)로부터 프로스타글란딘(prostaglandin)의 생합성에 관여하는 효소 활성을 억제함으로써, 항염증 작용을 나타내는데, 주 치료작용 외에 위장관 장애, 간장애, 신장애 등의 심각한 부작용을 야기하기므로 장기간의 사용에 있어서 제약이 따르는 실정이다(Rajakariar R et al. 2006).Non-steroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDS), which are widely used agents for the treatment of most inflammatory diseases, are prostaglandins from arachidonicacid called cyclooxygenase (COX). By inhibiting the activity of enzymes involved in biosynthesis, it exhibits anti-inflammatory action, and since it causes serious side effects such as gastrointestinal disorders, liver disorders, and renal disorders in addition to the main therapeutic action, there are restrictions in long-term use (Rajakariar R et al. 2006).

한편, 피부의 멜라닌 세포에서 생성되는 멜라닌 색소는 검은 색소와 단백질의 복합체 형태를 갖는 페놀계 고분자물질로서, 태양으로부터 조사되는 자외선에 의한 피부손상 저해에 중요한 역할을 담당한다. 그러나 멜라닌의 과잉 합성 및 축적은 피부에 기미, 주근깨 및 노인성 흑자 등 심각한 미적 문제를 일으킬 뿐만 아니라, 피부노화를 촉진하며 피부암을 유발하기도 한다. 특히, 기미는 주로 뺨, 이마, 코, 턱 등 얼굴의 중심부위에 연한 갈색이나 암갈색 심지어는 검은색의 과색소성 병변이 발생하는 질환으로써, 주로 여성에게 발생하나 드물게 남성에게 생기는 경우도 있다. 기미에서 특이적으로 과다 발현되는 마커를 발굴하여, 이를 억제하는 연구가 진행된 바 있으며, 티로시나아제 효소의 활성 내지 발현을 억제하면 피부의 색소침착을 억제할 수 있다고 보고된 바 있다.On the other hand, melanin pigment produced in melanocytes of the skin is a phenolic polymer having a complex form of black pigment and protein, and plays an important role in inhibiting skin damage caused by ultraviolet rays irradiated from the sun. However, excessive synthesis and accumulation of melanin not only cause serious aesthetic problems such as freckles, freckles and senile surplus on the skin, but also promote skin aging and cause skin cancer. In particular, melasma is a disease in which light brown, dark brown, or even black hyperpigmented lesions occur on the central part of the face, such as the cheeks, forehead, nose, and chin, and occurs mainly in women, but rarely in men. Research has been conducted to discover markers that are specifically overexpressed in melasma and suppress them, and it has been reported that inhibiting the activity or expression of the tyrosinase enzyme can inhibit skin pigmentation.

최근에 피부 트러블을 최소화할 수 있는 천연식물 유래의 자원을 이용한 화장품에 대한 인기가 증가하고 있으며, 부작용 없는 천연 화장품 소재 및 제품에 대한 연구가 증대하고 있다.Recently, the popularity of cosmetics using natural plant-derived resources that can minimize skin troubles is increasing, and research on natural cosmetic materials and products without side effects is increasing.

대한민국 등록번호 10-1164083호(공고일 2012.07.16.)Republic of Korea Registration No. 10-1164083 (Announcement date: 2012.07.16.) 대한민국 등록번호 10-1964809호(공고일 2019.03.27.)Republic of Korea Registration No. 10-1964809 (Notice Date 2019.03.27.) 대한민국 등록번호 10-2125895호(공고일 2020.06.23.)Republic of Korea Registration No. 10-2125895 (Announcement date: 2020.06.23.)

본 발명자들이 개발하여 특허등록 받은 바 있는 천연식물 성분 유래의 NO 활성 억제 성분을 지속적으로 연구한 결과, 기존 복합추출물의 NO 활성 억제 효능 감소가 없으면서도 티로시나아제 활성 억제를 통한 색소 피부침착을 방지할 수 있는 복합 추출물의 최적 조성 및 조성비를 알게 되어 본 발명을 완성하게 되었다. 즉, 본 발명은 허브로버트 추출물(및/또는 이의 분획물), 타라곤 잎과 줄기(잎/줄기) 추출물, 잇꽃씨 추출물 및 갈대 추출물을 이용한 복합 추출물을 포함하는 화장료 및 이를 이용한 화장품 및 이의 제조방법을 제공하고자 한다.As a result of continuous research on the NO activity inhibitory ingredients derived from natural plant ingredients developed and patented by the present inventors, the existing complex extracts do not reduce the NO activity inhibitory efficacy and prevent pigmentation of the skin through inhibition of tyrosinase activity The present invention was completed by knowing the optimal composition and composition ratio of the complex extract that can be done. That is, the present invention relates to a cosmetic comprising a complex extract using a herbal robert extract (and/or a fraction thereof), a tarragon leaf and stem (leaf/stem) extract, a safflower seed extract, and a reed extract, and cosmetics using the same, and a manufacturing method thereof would like to provide

상기 과제를 해결하기 위한 본 발명은 허브로버트 추출물, 타라곤 잎과 줄기 추출물, 잇꽃씨 추출물 및 갈대 추출물을 포함하는 화장료를 제공하고자 한다.The present invention for solving the above problems is to provide a cosmetic comprising a herbal extract, tarragon leaf and stem extract, safflower seed extract and reed extract.

또한, 본 발명은 상기 화장료를 포함하는 화장품을 제공하고자 한다.In addition, the present invention is to provide a cosmetic comprising the cosmetic.

또한, 본 발명은 상기 화장료를 제조하는 방법을 제공하고자 한다.In addition, the present invention is to provide a method for preparing the cosmetic.

본 발명의 화장료는 세포 독성이 없으면서도 LPS에 의한 NO 생성을 억제, 염증마커인 iNOS, COX-2, TNFα, IL6 의 세포내 활성을 억제하여 우수한 항염 효과를 가진다. 따라서, 본 발명의 화장료는 화장료로 사용하기 적합하며, 나아가 화장품 등에 적용하여 피부트러블, 여드름 등으로 인한 염증 억제 효과가 있는 천연 화장품을 제공할 수가 있다. 또한, 본 발명의 화장료는 티로시나아제의 활성을 억제하여 피부 내 색소 침착을 방지, 억제 내지 예방하여 기미 등의 잡티를 제거, 방지 효과가 있는 천연 화장품을 제공할 수 있다.The cosmetic of the present invention has excellent anti-inflammatory effect by inhibiting NO production by LPS and inhibiting the intracellular activity of inflammatory markers iNOS, COX-2, TNFα, IL6 without cytotoxicity. Therefore, the cosmetic of the present invention is suitable for use as a cosmetic, and furthermore, it is possible to provide a natural cosmetic having an effect of inhibiting inflammation due to skin troubles, acne, etc. by applying it to cosmetics. In addition, the cosmetic of the present invention inhibits the activity of tyrosinase to prevent, inhibit or prevent pigmentation in the skin, thereby removing and preventing blemishes such as blemishes can be provided.

이하, 본 발명에 대하여 더욱 자세하게 설명을 하겠다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail.

허브로버트(herbs robert)는 제라늄(Geranium robertianum)의 일종으로, 유럽에 많이 야생하며, 여름에는 적자색의 작은 꽃이 핀다.Herb robert is a kind of geranium (Geranium robertianum), and it is wild in Europe, and small reddish purple flowers bloom in summer.

타라곤(Artemisia dracunculus, Tarragon)은 프랑스인들이 향신료의 여왕으로 여길 만큼 달콤한 향기와 매콤하면서 쌉쌀한 맛이 일품인 향신료로 사용되는 식물이며, 요리에는 주로 잎을 사용한다. 타라곤은 강장제로 머리, 심장, 간장에 좋고 피로 회복을 도와 중세에는 체력을 증진시키는 식물로 여겨졌으며, 잎에는 요오드, 미네랄, 소금 그리고 비타민C가 풍부해 비타민 결핍증의 치료약으로도 사용됐다. 타라곤 줄기는 50 ~ 90㎝ 정도 자라며, 잎은 윤기가 나는데 좁고 길며 녹색을 띤다. 그리고, 조그만 꽃봉오리가 맺히지만 꽃이 피지 않아 열매는 맺히지 않는 특징이 있다.Tarragon (Artemisia dracunculus, Tarragon) is a plant used as a spice because of its sweet aroma and spicy and bitter taste, which French consider the queen of spices. The leaves are mainly used for cooking. Tarragon is a tonic, good for the head, heart, and liver, and was considered a plant to improve stamina in the Middle Ages by helping to recover from fatigue. Tarragon stems grow about 50 to 90 cm tall, and the leaves are shiny and narrow, long, and green. Also, there is a characteristic that small flower buds are produced, but no fruits are produced because flowers do not bloom.

잇꽃(Carthamus tinctorius L.)는 홍화라고 불리며, 국화과에 속하는 1년생 또는 2년생 초본식물이다. 잇꽃은 염료로도 사용되며, 의약용이나 화장용 입술연지로도 사용되어 왔으며, 활혈,구어혈, 진통 등의 효능이 있어서 한약재로서 사용되어 왔었다. 그리고, 잇꽃씨는 이러한 잇꽃의 씨앗으로서 혈액 순환제로 한약적으로 사용되어 왔다.Safflower (Carthamus tinctorius L.), called safflower, is an annual or biennial herb belonging to the Asteraceae. Safflower is used as a dye, and has been used as a medicinal or cosmetic lip rouge, and has been used as a herbal medicine because it has effects such as blood flow, mouth blood, and pain relief. And, safflower seeds have been used medicinally as a blood circulation agent as the seeds of these safflowers.

갈대(Phragmites communis)는 벼과에 속하는 다년생 초본식물로 갈대라는 이름은 속이 빈것이 대나무와 유사하고 갈색이라서 갈대라는 이름이 붙여졌다고 알려져 있으며, 이러한 갈대의 뿌리를 의미한다. 갈대뿌리는 보통 땅속으로 약 30 ~ 50cm까지 파고 들어가 채취하기가 어려우며, 갈대뿌리의 효능은 피로 맑게 해주고, 몸 속의 독을 해독해주는 청혈해독(淸血解毒)작용이 있는 것으로 알려져 있으며, 최근의 연구에 의하면 갈대뿌리에는 파라쿠마르산이라는 성분과 베타시소스테롤이라는 성분이 있는데, 이는 뇌혈관 관련 질환에 많은 도움을 준다고 알려져 있으며, 최근 갈대뿌리를 즙으로 가공하여 건강기능식품으로 판매되고 있다.Reed (Phragmites communis) is a herbaceous perennial plant belonging to the family Grapeaceae. Reed roots usually dig up to about 30-50 cm deep into the ground and are difficult to collect. According to the report, reed root contains a component called paracumaric acid and beta-cisosterol, which are known to help a lot in cerebrovascular diseases.

컴프리(Symphytum officinale)는 약용 또는 사료용으로 재배되는 쌍떡잎식물로서, 한방에서는 잎과 뿌리를 감부리(甘富利)라는 약재로 쓰는데, 건위 효과가 있고 소화기능을 향상시키며, 위산과다·위궤양·빈혈·종기·악창·피부염의 약재로서 사용되어 왔다.Comfrey (Symphytum officinale) is a dicotyledonous plant cultivated for medicinal or fodder purposes. In oriental medicine, the leaves and roots are used as a medicinal herb called Gamburi (甘富利). · It has been used as a medicine for sore throat and dermatitis.

종래 본 출원인은 허브로버트 추출물, 타라곤 잎/줄기 추출물 및/또는 잇꽃씨 추출물을 이용한 복합추출물을 화장료를 기술 개발 및 특허등록 받은 바 있는데, NO 활성 억제를 통한 항염능은 매우 우수하나, 티로시나아제 활성 억제능이 매우 부족했으며, 이러한 티로시나아제 활성 억제 효과를 증가시키기 위해 복합 추출물 내 추출물들의 특정 함량을 증가시키거나, 다른 성분을 사용하면 NO 활성 억제효과가 저해되는 문제가 있었다. 이에 다양한 연구, 시도한 결과, NO 활성억제 효과를 감소시키지 않으면서도, 우수한 티로시나아제 활성 억제 효과가 있는 최적 조성 및 조성비를 가지는 복합 추출물을 개발하게 되어 본 발명을 완성하게 되었다.Conventionally, the present applicant has developed and patented a cosmetic for a complex extract using herbal robert extract, tarragon leaf/stem extract and/or safflower seed extract. The activity inhibitory ability was very insufficient, and to increase the tyrosinase activity inhibitory effect, increasing a specific content of the extracts in the complex extract, or using other components, there was a problem that the NO activity inhibitory effect was inhibited. As a result of various studies and trials, the present invention was completed by developing a complex extract having an optimal composition and composition ratio having an excellent tyrosinase activity inhibitory effect without reducing the NO activity inhibitory effect.

본 발명의 화장료는 앞서 설명한 허브로버트. 타라곤 잎과 줄기의(이하, "잎/줄기"로 표현함), 잇꽃씨 및 갈대를 이용한 발명으로서, 상기 천연식물 각각의 추출물을 포함하는 복합 추출물을 이용한 발명이다.The cosmetic of the present invention is Herb Robert as described above. As an invention using tarragon leaves and stems (hereinafter referred to as "leaf/stem"), safflower seeds and reeds, it is an invention using a complex extract including extracts of each of the natural plants.

추출물을 포함하는 복합추출물을 포함하며, 복합 추출물은 허브로버트 추출물 및 타라곤 잎/줄기 추출물을 1 : 0.5 ~ 1.5 중량비로, 바람직하게는 허브로버트 추출물 및 타라곤 잎/줄기 추출물을 1 : 0.5 ~ 1.0 중량비로 포함할 수 있다. 타라곤 잎/줄기 추출물의 사용량이 0.5 중량비 미만이면 NO 활성 억제 상승효과가 미비할 수 있고, 1.5 중량비를 초과하여 사용하면 티로시나아제 활성 저해 효과가 감소하므로 상기 범위 내로 혼합하여 사용하는 것이 좋다.A complex extract including the extract is included, and the complex extract contains the herb Robert extract and the tarragon leaf/stem extract in a weight ratio of 1: 0.5 to 1.5, preferably, the herb Robert extract and the tarragon leaf/stem extract in a weight ratio of 1: 0.5 to 1.0. can be included as If the amount of tarragon leaf/stem extract used is less than 0.5 weight ratio, the NO activity inhibition synergistic effect may be insignificant, and when used in excess of 1.5 weight ratio, the tyrosinase activity inhibitory effect is reduced, so it is recommended to mix and use within the above range.

그리고, 본 발명의 복합 추출물은 허브로버트 추출물의 독성을 다소 감소시키면서 NO 활성 억제 효과 상승 및 피부 미백 효과를 위해 잇꽃씨 추출물을 포함하며, 허브로버트 추출물에 대해 잇꽃씨 추출물을 1 : 0.8 ~ 2.0 중량비로, 바람직하게는 허브로버트 추출물에 대해 잇꽃씨 추출물을 1 : 1.0 ~ 1.5 중량비로 포함하는 것이 좋다. 이때, 잇꽃씨 추출물 사용량이 0.8 중량비 미만이면 그 사용량이 너무 적어서 이의 도입으로 인한 향상 효과가 미비할 수 있고, 2.0 중량비를 초과하여 사용하더라도 더 이상의 미백 효과 증대가 없으므로, 상기 범위 내로 사용하는 것이 좋다.In addition, the complex extract of the present invention contains safflower seed extract to increase the NO activity inhibitory effect and skin whitening effect while slightly reducing the toxicity of the herbal Robert extract, and the safflower seed extract to the herbal Robert extract is used in a weight ratio of 1: 0.8 to 2.0. As a result, preferably, it is good to include the safflower seed extract in a weight ratio of 1: 1.0 to 1.5 with respect to the herb Robert extract. At this time, if the amount of safflower seed extract used is less than 0.8 weight ratio, the amount used is too small, and the improvement effect due to its introduction may be insignificant. .

또한, 본 발명의 복합 추출물은 티로시나아제 활성 억제 효과를 위해, 갈대 추출물 및/또는 컴프리잎 추출물을 더 포함한다.In addition, the complex extract of the present invention further comprises a reed extract and / or comfrey leaf extract for the tyrosinase activity inhibitory effect.

상기 갈대 추출물의 사용량은 허브로버트 추출물에 대해 1 : 0.5 ~ 1.5 중량비로, 바람직하게는 1 : 0.5 ~ 1.2 중량비로, 더욱 바람직하게는 1 : 0.7 ~ 1.0 중량비로 사용하는 것이 좋으며, 이때, 갈대 추출물 사용량이 0.5 중량비 미만이면 티로시나아제 활성 억제 효과가 부족할 수 있고, 1.5 중량비를 초과 사용하면 과량 사용이며 더 이상의 티로시나아제 활성 억제 효과 증대가 없으면서 오히려 NO 활성 억제 효과를 감소시키거나, 오히려 피부 세포에 대한 독성이 작용하여 피부 트러블을 유발할 수 있으므로 상기 범위 내로 사용하는 것이 좋다.The amount of the reed extract used is 1: 0.5 to 1.5 weight ratio with respect to the herb Robert extract, preferably 1: 0.5 to 1.2 weight ratio, more preferably 1: 0.7 to 1.0 weight ratio, and in this case, it is recommended to use the reed extract If the amount used is less than 0.5 weight ratio, the tyrosinase activity inhibitory effect may be insufficient, and if it is used in excess of 1.5 weight ratio, it is an excessive use and there is no further increase in the tyrosinase activity inhibitory effect, but rather reduces the NO activity inhibitory effect, or rather skin cells It is recommended to use within the above range because it may cause skin trouble due to its toxicity.

그리고, 컴프리잎 추출물은 갈대 추출물에 의한 피부 트러블 유발을 방지하면서 티로시나아제 활성 억제 효과를 함께 증진시키는 역할을 하며, 갈대 추출물 함량이 높을 때 함께 추가적으로 사용하는 것이 좋다. 그리고, 복합 추출물 내 이의 사용량은 허브로버트 추출물에 대해 1 : 0.1 ~ 0.5 중량비로, 바람직하게는 1 : 0.2 ~ 0.5 중량비로, 더욱 바람직하게는 1 : 0.2 ~ 0.4 중량비로 사용하는 것이 좋다. 이때, 컴프리잎 추출물 사용량이 0.1 중량비 미만이며 그 사용량이 너무 적어서 컴프리잎 추출물 사용으로 인한 효과가 미비할 수 있고, 0.5 중량비를 초과 사용하면 오히려 NO 활성 저해 효과가 감소할 수 있으므로 상기 범위 내로 사용하는 것이 좋다.In addition, the comfrey leaf extract serves to enhance the tyrosinase activity inhibitory effect while preventing skin trouble caused by the reed extract, and it is recommended to additionally use it together when the reed extract content is high. And, the amount thereof in the complex extract is 1: 0.1 to 0.5 weight ratio, preferably 1: 0.2 to 0.5 weight ratio, more preferably 1: 0.2 to 0.4 weight ratio with respect to the herb Robert extract. At this time, since the amount of comfrey leaf extract used is less than 0.1 weight ratio and the amount is too small, the effect due to the use of comfrey leaf extract may be insignificant. it's good

상기 허브로버트 추출물은 정제수 100 중량부에 대하여 건조된 허브로버트 15 ~ 35 중량부를, 바람직하게는 20 ~ 30 중량부를, 더욱 바람직하게는 20 ~ 25 중량부를 혼합하여 원료를 준비하는 단계; 상기 원료를 70 ~ 80℃ 하에서, 4 ~ 8시간 동안 열수 추출을 수행하여 추출하여 추출물을 얻는 단계; 상기 추출물을 1차 필터링(filtering)하여 얻은 1차 여과액을 제조하는 단계; 상기 1차 여과액에 1,2-헥산디올 및 에틸헥실글리세린을 첨가 및 교반한 후, 2차 필터링하여 허브로버트 추출물을 제조하는 단계;의 공정을 수행하여 제조한 것을 사용할 수 있다.The herbal extract is prepared by mixing 15 to 35 parts by weight of dried herb Robert, preferably 20 to 30 parts by weight, more preferably 20 to 25 parts by weight based on 100 parts by weight of purified water to prepare a raw material; extracting the raw material by performing hot water extraction under 70 to 80° C. for 4 to 8 hours to obtain an extract; preparing a first filtrate obtained by first filtering the extract; After adding and stirring 1,2-hexanediol and ethylhexylglycerin to the first filtrate, secondary filtering to prepare an herbal robert extract may be used.

상기 허브로버트 추출물 제조시, 상기 1차 필터링은 평균기공 20 ~ 30㎛ 필터막으로 필터링을 수행할 수 있고, 바람직하게는 평균기공 23 ~ 27㎛ 인 필터막으로 필터링을 수행할 수 있다.When preparing the herbal robert extract, the primary filtering may be performed with a filter membrane having an average pore size of 20 to 30 μm, preferably filtering with a filter membrane having an average pore size of 23 to 27 μm.

그리고, 상기 2차 필터링은 평균기공 8 ~ 15㎛ 필터막으로, 바람직하게는 8 ~ 12㎛ 필터막으로 필터링을 수행할 수 있다.In addition, the secondary filtering may be performed with an average pore 8 to 15 μm filter membrane, preferably an 8 to 12 μm filter membrane.

본 발명에서 상기 타라곤 잎/줄기 추출물은 정제수 100 중량부에 대하여, 건조된 타라곤 잎/줄기 10 ~ 30 중량부를, 바람직하게는 12 ~ 25 중량부를, 더욱 바람직하게는 12 ~ 18 중량부를 혼합하여 원료를 준비하는 단계; 상기 원료를 90 ~ 100℃ 하에서, 4 ~ 8시간 동안 열수 추출을 수행하여 추출하여 추출물을 얻는 단계; 상기 추출물을 1차 필터링(filtering)하여 얻은 1차 여과액을 제조하는 단계; 상기 1차 여과액에 1,2-헥산디올 및 에틸헥실글리세린을 첨가 및 교반한 후, 2차 필터링하여 타라곤 잎/줄기 추출물을 제조하는 단계;의 공정을 수행하여 제조한 것을 사용할 수 있다.In the present invention, the tarragon leaf/stem extract is prepared by mixing 10 to 30 parts by weight of dried tarragon leaves/stem, preferably 12 to 25 parts by weight, more preferably 12 to 18 parts by weight, based on 100 parts by weight of purified water. preparing; extracting the raw material by performing hot water extraction at 90 to 100° C. for 4 to 8 hours to obtain an extract; preparing a first filtrate obtained by first filtering the extract; After adding and stirring 1,2-hexanediol and ethylhexyl glycerin to the first filtrate, secondary filtering to prepare a tarragon leaf/stem extract may be used.

본 발명에서 상기 잇꽃씨 추출물은 건조된 잇꽃씨 분말을 n-헥산으로 15 ~ 30℃ 하에서 추출한 후, 추출물로부터 지방을 제거하는 1단계; 지방이 제거된 추출물에 60 ~ 75 부피% 농도의, 바람직하게는 65 ~ 75% 농도의 에탄올 수용액으로 15 ~ 30℃ 하에서 추출 및 여과하여 에탄올 추출물을 수득하는 2단계; 상기 에탄올 추출물을 감압 농축 및 여과하여 감압 농축물을 수득하는 3단계; 및 감압 농축물을 필터링하여 여과액인 잇꽃씨 추출물을 수득하는 4단계;를 포함하는 공정을 수행하여 제조한 것을 사용할 수 있다.In the present invention, the safflower seed extract is obtained by extracting dried safflower seed powder with n-hexane under 15 to 30° C., followed by a first step of removing fat from the extract; A second step of obtaining an ethanol extract by extracting and filtering the fat-removed extract with an aqueous ethanol solution of 60 to 75% by volume, preferably at a concentration of 65 to 75% under 15 to 30° C.; Step 3 of concentrating and filtering the ethanol extract under reduced pressure to obtain a concentrate under reduced pressure; and 4 steps of filtering the concentrated under reduced pressure to obtain a safflower seed extract as a filtrate;

잇꽃씨 추출물 제조시, 상기 1단계는 2회 내지 5회, 바람직하게는 3회 내지 4회 반복 수행하여 지방이 제거된 추출물을 제조한 후, 이를 2단계에서 에탄올 수용액으로 재추출 공정을 수행할 수 있다.When preparing the safflower seed extract, step 1 is repeated 2 to 5 times, preferably 3 to 4 times to prepare an extract from which fat has been removed, and then the re-extraction process is performed with an aqueous ethanol solution in step 2. can

상기 3단계의 감압 농축은 당업계에서 사용하는 일반적인 방법을 통해서 수행할 수 있으며, 용매 및 불순물 제거를 위해 수행한다.The concentration under reduced pressure of the three steps may be performed through a general method used in the art, and is performed to remove solvents and impurities.

그리고, 3단계의 감압 농축 및 4단계의 필터링은 당업계에서 사용하는 일반적인 감압 농축, 필터링 방법을 통해서 수행할 수 있으며, 일례를 들면, 상기 필터링은 평균기공 8 ~ 15㎛ 필터막으로, 바람직하게는 8 ~ 12㎛ 필터막으로 필터링을 수행할 수 있다.And, the concentration under reduced pressure of the 3rd step and the filtering of the 4th step can be performed through a general reduced pressure concentration and filtering method used in the art, for example, the filtering is an average pore 8 ~ 15㎛ filter membrane, preferably can perform filtering with an 8 ~ 12㎛ filter membrane.

본 발명에서 상기 갈대 추출물은 정제수 100 중량부에 대하여 건조된 갈대뿌리 50 ~ 80 중량부를, 바람직하게는 50 ~ 75 중량부를, 더욱 바람직하게는 55 ~ 70 중량부를 혼합하여 원료를 준비하는 단계; 상기 원료를 90 ~ 100℃ 하에서, 4 ~ 6시간 동안 열수 추출을 수행하여 추출하여 추출물을 얻는 단계; 상기 추출물을 1차 필터링(filtering)하여 얻은 1차 여과액을 제조하는 단계; 상기 1차 여과액에 1,2-헥산디올 및 에틸헥실글리세린을 첨가 및 교반한 후, 2차 필터링하여 추출물을 제조하는 단계;의 공정을 수행하여 제조한 것을 사용할 수 있다.In the present invention, the reed extract is prepared by mixing 50 to 80 parts by weight of dried reed root, preferably 50 to 75 parts by weight, more preferably 55 to 70 parts by weight, based on 100 parts by weight of purified water; extracting the raw material by performing hot water extraction under 90 to 100° C. for 4 to 6 hours to obtain an extract; preparing a first filtrate obtained by first filtering the extract; After adding and stirring 1,2-hexanediol and ethylhexylglycerin to the first filtrate, a second filtering step to prepare an extract may be used.

상기 1차 및/또는 2차 필터링은 앞서 설명한 허브로버트 추출물 제조시 사용한 1차, 2차 필터링과 동일한 방법으로 수행할 수 있다.The primary and/or secondary filtering may be performed in the same manner as the primary and secondary filtering used in preparing the herbal robert extract described above.

본 발명에서 상기 컴프리잎 추출물은 정제수 100 중량부에 대하여 건조된 컴프리잎 20 ~ 40 중량부를, 바람직하게는 20 ~ 35 중량부를, 더욱 바람직하게는 20 ~ 30 중량부를 혼합하여 원료를 준비하는 단계; 상기 원료를 60 ~ 75℃ 하에서, 4 ~ 8시간 동안 열수 추출을 수행하여 추출하여 추출물을 얻는 단계; 상기 추출물을 1차 필터링(filtering)하여 얻은 1차 여과액을 제조하는 단계; 상기 1차 여과액에 1,2-헥산디올 및 에틸헥실글리세린을 첨가 및 교반한 후, 2차 필터링하여 추출물을 제조하는 단계;의 공정을 수행하여 제조한 것을 사용할 수 있다.In the present invention, the comfrey extract is prepared by mixing 20 to 40 parts by weight of dried comfrey leaves, preferably 20 to 35 parts by weight, more preferably 20 to 30 parts by weight, based on 100 parts by weight of purified water; extracting the raw material by performing hot water extraction at 60 to 75° C. for 4 to 8 hours to obtain an extract; preparing a first filtrate obtained by first filtering the extract; After adding and stirring 1,2-hexanediol and ethylhexylglycerin to the first filtrate, a second filtering step to prepare an extract may be used.

상기 1차 및/또는 2차 필터링은 앞서 설명한 허브로버트 추출물 제조시 사용한 1차, 2차 필터링과 동일한 방법으로 수행할 수 있다.The primary and/or secondary filtering may be performed in the same manner as the primary and secondary filtering used in preparing the herbal robert extract described above.

복합 추출물을 도입한 본 발명의 화장료는 상기 복합 추출물을 2.0 중량% 이하의 농도로 포함할 때, RAW264.7 세포 생존율이 96.00% 이상일 수 있으며, 바람직하게는 복합 추출물을 0.125 ~ 2.0 중량%로 포함할 때, RAW264.7 세포 생존율이 96.5 ~ 102.0%, 더욱 바람직하게는 97.5 ~ 102.0%일 수 있다.When the cosmetic of the present invention introducing the complex extract contains the complex extract at a concentration of 2.0% by weight or less, the RAW264.7 cell viability may be 96.00% or more, and preferably contains the complex extract in an amount of 0.125 to 2.0% by weight When doing this, RAW264.7 cell viability may be 96.5 to 102.0%, more preferably 97.5 to 102.0%.

또한, 본 발명의 화장료는 상기 복합 추출물의 농도가 0.1 ~ 1.0 중량%일 때, 하기 수학식 1에 의거하여 측정시, RAW264.7 세포에서의 일산화질소(NO) 생성 억제율이 20 ~ 45%, 바람직하게는 22 ~ 43%, 더욱 바람직하게는 NO 생성 억제율이 25.0 ~ 40.0%일 수 있다.In addition, in the cosmetic of the present invention, when the concentration of the complex extract is 0.1 to 1.0% by weight, when measured based on Equation 1 below, the inhibition rate of nitric oxide (NO) production in RAW264.7 cells is 20 to 45%, Preferably 22 to 43%, more preferably the NO production inhibition rate may be 25.0 to 40.0%.

[수학식 1][Equation 1]

NO 생성 억제율(%) = (A-B)/A × 100%NO production inhibition rate (%) = (A-B)/A × 100%

수학식 1에서 A는 화장료 내 복합 추출물 농도가 0%일 때 RAW264.7 세포에서의 NO 생성량(100%)이고, B는 화장료 내 복합 추출물의 특정 농도에서의 RAW264.7 세포에서의 NO 생성량(%) 측정값이다.In Equation 1, A is the amount of NO production in RAW264.7 cells (100%) when the concentration of the complex extract in the cosmetic is 0%, and B is the amount of NO production in the RAW264.7 cells at a specific concentration of the complex extract in the cosmetic ( %) is the measured value.

본 발명의 화장료는 iNOS(유도형 NO synthas), COX-2(cyclooxygenase-2), 종양괴사인자인 TNF-α(tumor necrosis factor α) 및/또는 인터류킨수용체인 IL6의 활성을 억제하여, NO 활성억제 효과 및/또는 항염 효과를 가질 수 있다.The cosmetic of the present invention inhibits the activity of iNOS (induced NO synthas), COX-2 (cyclooxygenase-2), TNF-α (tumor necrosis factor α), and/or the interleukin receptor IL6, thereby NO activity It may have an inhibitory effect and/or an anti-inflammatory effect.

또한, 본 발명의 화장료는 상기 복합 추출물의 농도가 0.1 ~ 0.5 중량%일 때, 하기 수학식 2에 의거하여 측정시, 하기 수학식 2에 의해 측정된 티로시나아제 활성 억제율이 하기 방정식 1을 만족할 수 있다.In addition, in the cosmetic of the present invention, when the concentration of the complex extract is 0.1 to 0.5% by weight, when measured based on Equation 2, the tyrosinase activity inhibition rate measured by Equation 2 below satisfies Equation 1 can

[수학식 2][Equation 2]

티로시나아제 활성 억제율(%) = (A-B)/A × 100%Tyrosinase activity inhibition rate (%) = (A-B) / A × 100%

수학식 2에서, A는 화장료 내 복합 추출물 농도가 0 중량%인 대조군의 480nm에서의 흡광도이고, B는 복합 추출물 농도가 0.1 ~ 0.5 중량%인 화장료의 480nm에서의 흡광도이며,In Equation 2, A is the absorbance at 480 nm of the control in which the concentration of the complex extract in the cosmetic is 0% by weight, and B is the absorbance at 480 nm of the cosmetic in which the concentration of the complex extract is 0.1 to 0.5% by weight,

[방정식 1][Equation 1]

12% ≤ (A-B) ≤ 30%, 바람직하게는 12.5% ≤ (A-B) ≤ 28.5%, 더욱 바람직하게는 15.0% ≤ (A-B) ≤ 27.0%12% ≤ (A-B) ≤ 30%, preferably 12.5% ≤ (A-B) ≤ 28.5%, more preferably 15.0% ≤ (A-B) ≤ 27.0%

상기 방정식 1에서, A는 본 발명 복합 추출물을 포함하는 화장료의 티로시나아제 활성 억제율이고, B는 대조군의 티로시나아제 활성 억제율이며, 이때, 상기 대조군은 허브로버트 추출물과 타라곤 잎과 줄기 추출물을 1 : 2.2 중량비로 포함하는 복합추출물을 포함하는 화장료이다.In Equation 1, A is the tyrosinase activity inhibition rate of the cosmetic comprising the complex extract of the present invention, and B is the tyrosinase activity inhibition rate of the control group, where the control group is a herbal robert extract and tarragon leaf and stem extract 1 : Cosmetic containing complex extract included in a weight ratio of 2.2.

본 발명의 화장품은 앞서 설명한 복합 추출물을 포함하는 화장료를 이용하며, 수상액; 유상액; 상기 화장료; 향료; 및 정제수;를 포함한다.The cosmetic of the present invention uses a cosmetic comprising the above-described complex extract, and includes an aqueous solution; emulsion; the cosmetic; Spices; and purified water;

그리고, 본 발명의 화장품은 상기 수상액 100 중량부에 대하여, 상기 유상액 20 ~ 30 중량부, 상기 NO 활성 억제능 및 티로시나아제 활성 억제능이 우수한 화장료 1 ~ 30 중량부, 상기 향료 0.05 ~ 2 중량부 및 잔량의 정제수를 포함하며, 바람직하게는 상기 수상액 100 중량부에 대하여, 상기 유상액 22 ~ 28 중량%, 상기 NO 활성 억제제 5 ~ 30 중량부, 상기 향료 0.1 ~ 1 중량부 및 잔량의 정제수를 포함한다. 이때, 상기 유상액이 20 중량부 미만이면 유분 미달로 피부 보습 유지에 문제가 있을 수 있고, 35 중량부를 초과하면 과도한 오일 성분이 함유되어 피부호흡 방해나 지성피부의 뽀루지 등의 문제를 일으킬 수 있다. 또한, 화장료가 1 중량부 미만이면 그 함량이 너무 적어서 NO 활성 억제 및 티로시나아제 활성 억제 효과를 볼 수 없을 수 있고, 30 중량부를 초과하면 과다 사용으로 인해 다른 성분들과의 상용성이 떨어져서 제품의 질이 오히려 떨어질 수 있으며, 과다 사용으로 인한 NO 활성 억제 및 티로시나아제 활성 억제 효과도 거의 미비하므로 비경제적이다.And, the cosmetic of the present invention, based on 100 parts by weight of the aqueous phase, 20 to 30 parts by weight of the emulsion, 1 to 30 parts by weight of a cosmetic excellent in inhibiting NO activity and tyrosinase activity, and 0.05 to 2 parts by weight of the fragrance Contains parts and the remainder of purified water, preferably, with respect to 100 parts by weight of the aqueous solution, 22 to 28% by weight of the emulsion, 5 to 30 parts by weight of the NO activity inhibitor, 0.1 to 1 parts by weight of the fragrance, and the remaining amount Contains purified water. At this time, if the emulsion is less than 20 parts by weight, there may be a problem in maintaining skin moisture due to insufficient oil content, and if it exceeds 35 parts by weight, excessive oil components are contained, which may cause problems such as obstruction of skin breathing or pimples on oily skin. . In addition, if the cosmetic content is less than 1 part by weight, the content is too small, so the effect of inhibiting NO activity and tyrosinase activity may not be seen, and if it exceeds 30 parts by weight, compatibility with other ingredients decreases due to excessive use The quality may be rather deteriorated, and the effect of inhibiting NO activity and tyrosinase activity due to excessive use is also almost insignificant, so it is uneconomical.

화장료 성분 중 상기 향료는 당업계에서 사용하는 일반적인 것을 사용할 수 있으며, 구체적인 일례를 들면, Perfume 85147, Perfume 25399 등을 사용할 수 있다.Among the cosmetic ingredients, general perfumes used in the art may be used, and specific examples thereof include Perfume 85147, Perfume 25399, and the like.

[수상액][Awards]

본 발명의 화장료 성분 중 상기 수상액은 피부컨디셔닝제, 금속이온봉쇄제, 증점제, 보습제, 점도감소제, 살균보존제 및 용제를 포함한다.Among the cosmetic ingredients of the present invention, the aqueous solution includes a skin conditioning agent, a sequestering agent, a thickener, a moisturizing agent, a viscosity reducing agent, a sterilization preservative, and a solvent.

수상액 성분 중 상기 피부컨디셔닝제로는 소듐하이알루로네이트, 히알루론산, 감초가루 및 하이드롤라이트 중에서 선택된 1종 단독 또는 2종 이상을 혼합하여 사용할 수 있으며, 바람직하게는 히알루론산(hyaluronic acid), 감초가루 및 하이드롤라이트(hydrolite) 중에서 선택된 2종 이상을, 더욱 바람직하게는 히알루론산, 감초가루 및 하이드롤라이트를 혼합하여 사용할 수 있다. 그리고, 히알루론산, 감초가루 및 하이드롤라이트를 혼합하여 사용시 히알루론산, 감초가루 및 하이드롤라이트를 1 : 0.01 ~ 0.2 : 1 ~ 3 중량비로, 바람직하게는 하이드롤라이트를 1 : 0.02 ~ 0.15 : 1.2 ~ 2.7 중량비로 혼합하여 사용하는 것이 좋다.Among the components of the aqueous solution, the skin conditioning agent may be used alone or in a mixture of two or more selected from sodium hyaluronate, hyaluronic acid, licorice powder and hydrolite, preferably hyaluronic acid, Two or more selected from licorice powder and hydrolite, more preferably hyaluronic acid, licorice powder and hydrolite may be mixed and used. And, when using a mixture of hyaluronic acid, licorice powder and hydrolite, hyaluronic acid, licorice powder, and hydrolite are used in a weight ratio of 1: 0.01 to 0.2: 1-3, preferably hydrolite 1: 0.02 to 0.15: It is recommended to use the mixture in a weight ratio of 1.2 to 2.7.

수상액 성분 중 상기 금속이온봉쇄제는 제제에 함유할 수 있는 금속이온에 의해 변질을 방지하는 역할을 하는 것으로서, 그 사용량은 상기 피부컨디셔닝제 100 중량부에 대하여, 0.1 ~ 2 중량부를, 바람직하게는 0.2 ~ 1.5 중량부를 사용할 수 있으며, 이때, 금속이온봉쇄제의 사용량이 0.1 중량부 미만이면 금속이온 봉쇄 효과가 떨어질 수 있고, 2 중량부를 초과하여 사용하면 금속이온 봉쇄 증대 효과가 없으므로 비경제적인 문제가 있을 수 있으므로 상기 범위 내에서 사용하는 것이 좋다. 상기 금속이온봉쇄제는 당업계에서 사용하는 일반적인 것을 사용할 수 있으며, 바람직하게는 디소듐이디티에이(disodium EDTA), 디포타슘이디티에이(dipotassium EDTA), 트리소듐이디티에이, 테트라소듐이디티에이 및 라이스피테이트(rice phytate) 중에서 선택된 1종 단독 또는 2종 이상을 혼합하여 사용할 수 있다.Among the components of the aqueous solution, the sequestering agent serves to prevent deterioration by metal ions that may be contained in the formulation, and the amount used is 0.1 to 2 parts by weight, preferably based on 100 parts by weight of the skin conditioning agent. can be used 0.2 to 1.5 parts by weight, at this time, if the amount of the sequestering agent used is less than 0.1 parts by weight, the metal ion sequestration effect may fall, and if it is used in excess of 2 parts by weight, there is no effect of increasing the metal ion sequestration, so it is an uneconomic problem Because there may be, it is recommended to use within the above range. The sequestering agent may use a general one used in the art, preferably disodium EDTA, dipotassium EDTA, trisodium EDTA, tetrasodium EDTA A and rice phytate (rice phytate) can be used alone or a mixture of two or more selected from.

다음으로, 수상액 성분 중 상기 증점제는 제제에 적절한 점성과 끈적임을 부여하여 피부 밀착성을 증가시키 역할을 하는 것으로서, 증점제 사용량은 피부컨디셔닝제 100 중량부에 대하여, 0.5 ~ 2 중량부를, 바람직하게는 0.5 ~ 1.7 중량부를 사용할 수 있으며, 이때, 잔탄검의 사용량이 0.5 중량부 미만이면 그 사용량이 너무 적어서 이를 사용하는 효과가 미비하고, 2 중량부를 초과하여 사용하면 제제의 점도가 너무 높아져서 피부에 대한 끈적임이 너무 증가하여 상품성이 떨어지는 문제가 있을 수 있으므로 상기 범위 내에서 사용하는 것이 좋다. 증점제로는 당업계에서 사용하는 일반적인 것을 사용할 수 있으며, 바람직하게는 잔탐검, 구아하이드록시 트리모니움 클로라이드 및 하이드록시 에틸 셀룰로오스 중에서 선택된 1종 단독 또는 2종 이상을 혼합하여 사용할 수 있다.Next, among the components of the aqueous solution, the thickener serves to increase skin adhesion by imparting appropriate viscosity and stickiness to the formulation, and the amount of the thickener used is 0.5 to 2 parts by weight, preferably based on 100 parts by weight of the skin conditioning agent. 0.5 to 1.7 parts by weight can be used, and at this time, if the amount of xanthan gum used is less than 0.5 parts by weight, the amount used is too small and the effect of using it is insignificant. It is recommended to use within the above range because the stickiness may increase too much and there may be a problem of poor marketability. As the thickener, a general one used in the art may be used, and preferably, one selected from xantam gum, guar hydroxy trimonium chloride, and hydroxy ethyl cellulose may be used alone or in combination of two or more.

다음으로, 수상액 성분 중 상기 보습제는 유상액의 수분증발차단제와 함께 피부 보습을 증대시키는 역할을 하는 것으로서, 이의 사용량은 피부컨디셔닝제 100 중량부에 대하여, 40 ~ 80 중량부를, 바람직하게는 42 ~ 70 중량부를 사용할 수 있으며, 이때, 보습제의 사용량이 40 중량부 미만이면 피부 보습 효과가 떨어질 수 있고, 80 중량부를 초과하여 사용하더라도 보습 증대 효과가 없으므로 비경제적인 문제가 있을 수 있으므로 상기 범위 내에서 사용하는 것이 좋다. 그리고, 보습제로는 메틸프로판디올 및 글리세린 중에서 선택된 1종 단독 또는 2종 이상을 혼합하여 사용할 수 있다.Next, among the components of the aqueous solution, the moisturizer serves to increase skin moisture along with the moisture evaporation blocking agent of the emulsion, and the amount used is 40 to 80 parts by weight, preferably 42 parts by weight, based on 100 parts by weight of the skin conditioning agent. ~ 70 parts by weight can be used, and at this time, if the amount of the moisturizer is less than 40 parts by weight, the skin moisturizing effect may fall, and even if used in excess of 80 parts by weight, there may be a non-economic problem because there is no moisturizing effect. good to use In addition, as a moisturizing agent, one type selected from methylpropanediol and glycerin may be used alone or two or more types may be mixed.

다음으로, 수상액 성분 중 상기 점도감소제는 적정 점도를 유지하여 피부와의 점착력, 피부 흡수력을 증대시키기 위해 사용하는 것으로서, 이의 사용량은 피부컨디셔닝제 100 중량부에 대하여, 45 ~ 90 중량부를, 바람직하게는 50 ~ 85 중량부를, 더욱 바람직하게는 52 ~ 80 중량부를 사용할 수 있으며, 이때, 점도감소제 사용량이 45 중량부 미만이거나 90 중량부를 초과하면 제제의 점도가 너무 높거나 낮아져서 피부와의 점착력이 너무 낮거나 끈적임이 너무 증대하여 사용감이 떨어지는 문제가 있을 수 있다. 그리고, 상기 점도감소제로는 당업계에서 사용하는 일반적인 점도감소제를 사용할 수 있으며, 바람직하게는 디(C2 ~ C5 알킬렌)글라이콜을, 더욱 바람직하게는 디프로필렌글라이콜을 사용할 수 있다.Next, the viscosity reducing agent among the components of the aqueous solution is used to maintain an appropriate viscosity to increase adhesion to the skin and skin absorption, and its amount is 45 to 90 parts by weight based on 100 parts by weight of the skin conditioning agent, Preferably, 50 to 85 parts by weight, more preferably 52 to 80 parts by weight, may be used. In this case, if the amount of the viscosity reducing agent used is less than 45 parts by weight or exceeds 90 parts by weight, the viscosity of the formulation is too high or low, There may be a problem in that the adhesive strength is too low or the stickiness is too increased to reduce the feeling of use. And, as the viscosity reducing agent, a general viscosity reducing agent used in the art may be used, preferably di(C2 to C5 alkylene) glycol, more preferably dipropylene glycol .

다음으로, 수상액 성분 중 상기 살균보존제는 화장료가 미생물 등에 의해 오염되는 것을 방지하기 위해 사용하는 것으로서 화장품 소재로서 사용이 금지되지 않은 살균보존제라면 특별히 한정 없이 사용이 가능하며, 구체적인 일례로 클로페네신 등을 사용할 수 있다. 그리고, 이의 사용량은 피부컨디셔닝제 100 중량부에 대하여, 2 ~ 10 중량부를, 바람직하게는 4 ~ 8 중량부를 사용할 수 있으며, 그 사용량이 2 중량부 미만이면 미생물에 의한 오염 방지 효과가 미비할 수 있고, 10 중량부를 초과하여 사용하는 것은 과도한 사용으로서 피부 트러블을 유발할 수 있으므로 상기 범위 내에서 사용하는 것이 좋다.Next, among the components of the aqueous solution, the sterilization preservative is used to prevent contamination of cosmetics by microorganisms, and as long as it is a sterilization preservative that is not prohibited as a cosmetic material, it can be used without particular limitation, as a specific example, clofenesin etc. can be used. And, the amount thereof may be used in an amount of 2 to 10 parts by weight, preferably 4 to 8 parts by weight, based on 100 parts by weight of the skin conditioning agent, and if the amount used is less than 2 parts by weight, the effect of preventing contamination by microorganisms may be insufficient. There is, and using in excess of 10 parts by weight may cause skin troubles as excessive use, so it is recommended to use within the above range.

다음으로, 수상액 성분 중 상기 용제로는 헥산디올, 프로필렌글라이콜, 부틸렌글라이콜 및 펜틸렌 클라이콜 중에서 선택된 1종 단독 또는 2종 이상을 혼합하여 사용할 수 있으며, 바람직하게는 헥산디올 및 부틸렌글라이콜을 혼합하여 사용하거나, 더욱 바람직하게는 1,2-헥산디올 및 1,3-부틸렌글라이콜을 혼합하여 사용할 수 있다. 그리고, 용제 사용량은 피부컨디셔닝제 100 중량부에 대하여, 30 ~ 60 중량부를, 바람직하게는 35 ~ 50 중량부를 사용할 수 있으며, 30 중량부 미만으로 사용시 수상액 성분간 용해 및 혼합이 잘 되지 않을 수 있고, 60 중량부를 초과하여 사용하는 것은 비경제적이다.Next, as the solvent in the aqueous phase component, one type selected from hexanediol, propylene glycol, butylene glycol, and pentylene glycol may be used alone or a mixture of two or more types may be used, preferably hexanediol and Butylene glycol may be mixed and used, or more preferably, 1,2-hexanediol and 1,3-butylene glycol may be mixed and used. In addition, the amount of solvent used is 30 to 60 parts by weight, preferably 35 to 50 parts by weight, based on 100 parts by weight of the skin conditioning agent. and it is uneconomical to use in excess of 60 parts by weight.

[유상액][Emulsion]

본 발명의 화장료 성분 중 상기 유상액은 수분증발차단제, 토코페릴아세테이트, 피부컨디셔닝제, 유화제, 피부유연화제, 비이온계면활성제 및 피막형성제를 포함한다.Among the cosmetic ingredients of the present invention, the emulsion includes a moisture evaporation blocking agent, tocopheryl acetate, a skin conditioning agent, an emulsifier, a skin softener, a nonionic surfactant, and a film former.

유상액 성분 중 수분증발차단제는 화장료 제조 중 적정 수분 유지 및 제조된 제제를 피부에 적용시, 보습제와 함께 적정 수분 함량을 유지시키는 역할을 하는 것으로서, 당업계에서 사용하는 일반적인 것을 사용할 수 있으며, 바람직하게는 카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 오일(Caprylic/Capric Triglyceride oil), MCT 오일 및 스쿠알란 중에서 선택된 1종 또는 2종을 혼합하여 사용할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 MCT 오일 및 스쿠알란을 5 ~ 10 : 1 중량비로 혼합하여 사용하는 것이 좋다.Among the components of the emulsion, the moisture evaporation blocker serves to maintain proper moisture during the manufacture of cosmetics and to maintain an appropriate moisture content together with the moisturizer when the prepared formulation is applied to the skin. Preferably, one or two selected from caprylic / capric triglyceride oil, MCT oil, and squalane may be mixed and used, more preferably MCT oil and squalane 5 to 10: It is recommended to use it by mixing it in 1 weight ratio.

다음으로 유상액 성분 중 상기 토코페릴아세테이트는 제제가 시간이 지남에 따라 산화하여 변질되는 것을 막는 역할을 하는 것으로서, 그 사용량은 수분증발차단제 100 중량부에 대하여, 0.1 ~ 5 중량부를, 바람직하게는 0.4 ~ 2 중량부를 사용할 수 있다. 이때, 토코페릴아세테이트 사용량이 0.1 중량부 미만이면 그 사용량이 너무 적어서 산화방지 효과를 볼 수 없을 수 있고, 그 함량이 5 중량부를 초과하면 피부에 자극을 초래하는 문제가 있을 수 있으므로 상기 범위 내에서 사용하는 것이 좋다.Next, among the components of the emulsion, the tocopheryl acetate serves to prevent the formulation from being oxidized and deteriorated over time, and the amount used is 0.1 to 5 parts by weight, preferably based on 100 parts by weight of the moisture evaporation barrier. 0.4 to 2 parts by weight may be used. At this time, if the amount of tocopheryl acetate used is less than 0.1 parts by weight, the antioxidant effect may not be seen because the amount used is too small, and if the content exceeds 5 parts by weight, there may be a problem of causing irritation to the skin. good to use

다음으로 유상액 성분 중 상기 피부컨디셔닝제는 피부에 영양분을 공급하는 역할을 하는 것으로서, 쉐어지방(shea butter) 및 코코넛 오일, 마카다미아넛 오일, 호호바 오일 중에서 선택된 단종 또는 2종을 혼합하여 사용할 수 있으며, 바람직하게는 쉐어지방 및 코코넛 오일을 1 : 0.4 ~ 0.8 중량비로 혼합하여 사용할 수 있다. 피부컨디셔닝제의 사용량은 수분증발차단제 100 중량부에 대하여, 10 ~ 35 중량부를, 바람직하게는 13 ~ 30 중량부를 사용하는 것이 좋으며, 이때, 피부컨디셔닝제 함량이 10 중량부 미만이면 피부 영양공급 효과가 미미할 수 있는 문제가 있을 수 있고, 그 함량이 35 중량부를 초과하면 그 사용량이 너무 과하여 일정부분 피부흡수 후 피부표면에 남아 번들거리게 하는 문제가 있을 수 있으므로 상기 범위 내에서 사용하는 것이 좋다.Next, among the emulsion components, the skin conditioning agent serves to supply nutrients to the skin, and a single type or a mixture of two types selected from shea butter, coconut oil, macadamia nut oil, and jojoba oil can be used. , Preferably, shea fat and coconut oil can be mixed and used in a weight ratio of 1:0.4 to 0.8. The amount of the skin conditioning agent to be used is 10 to 35 parts by weight, preferably 13 to 30 parts by weight, based on 100 parts by weight of the moisture evaporation blocking agent. There may be a problem that may be insignificant, and if the content exceeds 35 parts by weight, the amount used is too excessive and there may be a problem of remaining on the skin surface after absorption of a certain part of the skin, so it is recommended to use it within the above range.

다음으로 유상액 성분 중 상기 유화제는 유상액 조성물들간 상용성 향상 및 유화력을 증대시키기 위한 것으로서, 당업계에서 사용하는 일반적인 것을 사용할 수 있으며, 바람직하게는 세테아릴 글루코사이드-세테아릴 알코올(cetearyl glucoside and cetearyl alcohol), 세테아릴알코올, 글리세릴스테아레이트, 피이지-6 소르비탄스테아레이트, 피이지-20 스테아레이트, 피이지-40 스테아레이트 및 피이지-100 스테아레이트 중에서 선택된 1종 단독 또는 2종 이상을 혼합하여 사용할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 세테아릴 글루코사이드-세테아릴 알코올 및 세테아릴알코올 중에서 선택된 종 단독 또는 2종 이상을 혼합하여 사용할 수 있다. 그리고, 유화제의 사용량은 피부컨디셔닝제 100 중량부에 대하여, 30 ~ 60 중량부를, 바람직하게는 40 ~ 55 중량부를 사용할 수 있으며, 이때, 유화제 사용량이 30 중량부 미만이면 유상액 간 혼합, 용해가 잘 되지 않을 수 있으며, 60 중량부를 초과하여 사용하는 것은 비경제적이다.Next, among the components of the emulsion, the emulsifier is for improving compatibility and emulsifying power between the emulsion compositions, and general ones used in the art may be used, preferably cetearyl glucoside-cetearyl alcohol (cetearyl glucoside). and cetearyl alcohol), cetearyl alcohol, glyceryl stearate, PEG-6 sorbitan stearate, PEG-20 stearate, PEG-40 stearate, and PEG-100 stearate alone or Two or more kinds may be mixed and used, and more preferably, a species selected from cetearyl glucoside-cetearyl alcohol and cetearyl alcohol may be used alone or two or more types may be mixed. In addition, the amount of the emulsifier used is 30 to 60 parts by weight, preferably 40 to 55 parts by weight, based on 100 parts by weight of the skin conditioning agent. It may not work well, and it is uneconomical to use in excess of 60 parts by weight.

다음으로 유상액 성분 중 상기 피부유연화제는 거친 피부를 부드럽게 하는 역할을 하는 것으로서, 그 사용량은 피부컨디셔닝제 100 중량부에 대하여, 2 ~ 10 중량부를, 바람직하게는 3 ~ 7.5 중량부를 사용하는 것이 좋으며, 이때, 피부유연화제 사용량이 2 중량부 미만이면 효과가 미미할 수 있는 문제가 있을 수 있고, 그 함량이 10 중량부를 초과하면 그 사용량이 너무 과하여 사용시 끈적거림이 심할 수 있는 문제가 있을 수 있으므로 상기 범위 내에서 사용하는 것이 좋다. 그리고, 피부유연화제는 하나 이상의 중간사슬 모노글리세라이드 함유한 유상제, 글리세릴카프레이트, 폴리글리세릴-2-라우레이트 및 폴리글리세릴-10-라우레이트 중에서 선택된 1종 단독 또는 2종 이상을 혼합하여 사용할 수 있으며, 바람직하게는 하나 이상의 중간사슬 모노글리세라이드 함유한 유상제 및 폴리글리세릴-10-라우레이트 중에서 선택된 1종 단독 또는 2종 이상을 혼합하여 사용할 수 있다. 그리고, 하나 이상의 중간사슬 모노글리세라이드 함유한 상기 유상제의 구체적인 일례로는 알콜라인 MCM(AKOLINE MCM) 등이 있다.Next, among the components of the emulsion, the skin softening agent serves to soften rough skin, and the amount used is 2 to 10 parts by weight, preferably 3 to 7.5 parts by weight, based on 100 parts by weight of the skin conditioning agent. At this time, if the amount of the skin softener used is less than 2 parts by weight, there may be a problem that the effect may be insignificant. It is recommended to use within the above range. And, the skin emollient is one or more selected from an oil agent containing one or more medium chain monoglycerides, glyceryl caprate, polyglyceryl-2-laurate, and polyglyceryl-10-laurate. It may be used in combination, and preferably, one or more selected from an oil agent containing one or more medium chain monoglycerides and polyglyceryl-10-laurate may be used alone or in combination of two or more. In addition, a specific example of the emulsifier containing one or more medium-chain monoglycerides includes AKOLINE MCM and the like.

다음으로 유상액 성분 중 상기 비이온계면활성제는 유화제와 함께 조성물들에 대한 용해 보조제 역할을 하는 것으로서, 당업계에서 사용하는 일반적인 비이온 계면활성제를 사용할 수 있으며, 구체적인 일례로는 Tween 20, Tween 40 및 Tween 60 중에서 선택된 1종 단독 또는 2종 이상을 혼합하여 사용할 수 있다. 그리고, 비이온계면활성제의 사용량은 피부컨디셔닝제 100 중량부에 대하여, 7 ~ 20 중량부를, 바람직하게는 10 ~ 15 중량부를 사용할 수 있다.Next, among the components of the emulsion, the nonionic surfactant serves as a dissolution aid for the compositions together with the emulsifier, and general nonionic surfactants used in the art may be used, and specific examples include Tween 20, Tween 40 and Tween 60 may be used alone or in combination of two or more. And, the amount of the nonionic surfactant may be used in an amount of 7 to 20 parts by weight, preferably 10 to 15 parts by weight, based on 100 parts by weight of the skin conditioning agent.

다음으로, 유상액 성분 중 피막형성제는 제제가 피부에 적용 후, 외부의 불필요한 오염 물질 등으로부터 피부를 보호하는 역할을 하는 것으로서, 당업계에서 사용하는 일반적인 것을 사용할 수 있으며, 구체적인 일례로는 세피플러스 400(sepiplus 400) 등을 사용할 수 있다. 그리고, 피막형성제의 사용량은 피부컨디셔닝제 100 중량부에 대하여, 피막형성제 1.5 ~ 8 중량부를, 바람직하게는 2.5 ~ 7 중량부를 사용할 수 있으며, 그 사용량이 1.5 중량부 미만이면 그 사용량이 너무 적어서 이를 사용하는 효과를 볼 수 없고, 8 중량부를 초과하여 사용하면 유상액 성분 내 고형분이 발생할 수 있으므로 상기 범위 내에서 사용하는 것이 좋다.Next, among the emulsion components, the film forming agent serves to protect the skin from unnecessary external contaminants after the formulation is applied to the skin, and general ones used in the art may be used, and as a specific example, cepi Plus 400 (sepiplus 400) or the like can be used. In addition, the amount of the film-forming agent used is 1.5 to 8 parts by weight, preferably 2.5 to 7 parts by weight, of the film-forming agent based on 100 parts by weight of the skin conditioning agent, and if the amount used is less than 1.5 parts by weight, the amount used is too much. Since it is small, the effect of using it cannot be seen, and if it is used in excess of 8 parts by weight, solid content in the emulsion component may occur, so it is recommended to use it within the above range.

또한, 유상액은 증점안정제를 더 포함할 수 있다. 그 사용량은 피부컨디셔닝제 100 중량부에 대하여, 1 ~ 10 중량부를, 바람직하게는 2 ~ 8 중량부를 사용할 수 있으며, 10 중량부를 초과하면 그 사용량이 너무 과하여 이루고자 하는 점도를 초과하여 사용하기에 불편할 수 있는 문제가 있을 수 있으므로 상기 범위 내에서 사용하는 것이 좋다. 그리고, 상기 증점안정화제로는 소듐폴리아크릴레이트, 폴리아크릴레이트, 폴리이소부텐, 카보머, 폴리소르베이트 20, 폴리소르베이트 50, 폴리소르베이트 60 및 폴리소르베이트 80 중에서 선택된 1종 단독 또는 2종 이상을 혼합하여 사용할 수 있으며, 바람직하게는 폴리아크릴레이트, 폴리이소부텐 및 폴리소르베이트 80 중에서 선택된 1종 단독 또는 2종 이상을 혼합하여 사용할 수 있다.In addition, the emulsion may further include a thickening stabilizer. The amount used is 1 to 10 parts by weight, preferably 2 to 8 parts by weight, based on 100 parts by weight of the skin conditioning agent. It is recommended to use within the above range because there may be problems. In addition, as the thickening stabilizer, one or two selected from sodium polyacrylate, polyacrylate, polyisobutene, carbomer, polysorbate 20, polysorbate 50, polysorbate 60 and polysorbate 80 A mixture of the above may be used, and preferably, one type selected from polyacrylate, polyisobutene, and polysorbate 80 may be used alone or two or more types may be mixed.

이하에서는 앞서 설명한 본 발명의 화장품을 제조하는 방법에 대하여 설명을 한다.Hereinafter, a method for manufacturing the cosmetic of the present invention described above will be described.

본 발명의 화장품은 유상액 및 수상액을 각각 제조한 후, 이들을 특정 조건 온도 하에서 유화시켜 제조한 것으로서, 수상액 및 유상액을 각각 제조하는 1단계; 상기 유상액에 수상액을 첨가한 다음 교반시켜서 혼합물을 제조하는 2단계; 40 ~ 50℃ 하에서 2단계의 혼합물, 본 발명의 복합 추출물을 포함하는 상기 화장료, 향료 및 정제수를 혼합 및 2,000 ~ 3,000rpm의 교반속도로 교반시키는 3단계;를 포함하는 공정을 수행하여 제조할 수 있다.The cosmetic of the present invention is prepared by preparing an oil phase and an aqueous phase, respectively, and then emulsifying them under a specific temperature and condition, the first step of preparing the aqueous phase and the aqueous phase, respectively; a second step of preparing a mixture by adding an aqueous solution to the emulsion and then stirring; It can be prepared by performing a process comprising; mixing the mixture of two steps, the cosmetic, fragrance and purified water containing the complex extract of the present invention under 40 to 50 ° C. and stirring at a stirring speed of 2,000 to 3,000 rpm; have.

그리고, 상기 1단계의 유상액은 피부컨디셔닝제, 토코페릴아세테이트, 유화제, 피부유연화제, 수분증발차단제 및 비이온계면활성제를 혼합한 후, 60 ~ 75℃, 바람직하게는 65 ~ 72℃의 온도가 되도록 가열 및 교반시켜서 용해액을 제조한 다음, 상기 용액에 피막형성제를 분산 및 교반시켜서 제조할 수 있다.And, the emulsion of the first step is mixed with a skin conditioning agent, tocopheryl acetate, an emulsifier, a skin softener, a moisture evaporation blocking agent and a nonionic surfactant, and then at a temperature of 60 to 75 ℃, preferably 65 to 72 ℃ A solution may be prepared by heating and stirring so as to become

또한, 1단계의 수상액은 피부컨디셔닝제, 금속이온봉쇄제, 증점제, 보습제, 점도감소제, 살균보존제 및 용제를 혼합한 후, 50 ~ 60℃가 되도록 가열 및 교반시켜서 제조할 수 있다.In addition, the aqueous solution of step 1 can be prepared by mixing a skin conditioning agent, a sequestering agent, a thickener, a moisturizing agent, a viscosity reducing agent, a sterilization preservative, and a solvent, and then heating and stirring to 50 ~ 60 ℃.

상기 유상액 및 수상액에 사용되는 성분 및 이의 사용량은 앞서 설명한 바와 동일하다.Components used in the emulsion and aqueous phase and their usage are the same as described above.

2단계는 유상액에 수상액을 첨가한 다음 70 ~ 80℃ 하에서 2,000 ~ 3,000rpm의 교반 속도로 1 ~ 4분간 유화를 수행하여 혼합물을 제조할 수 있다.In step 2, a mixture can be prepared by adding an aqueous solution to the emulsion and then emulsifying for 1 to 4 minutes at a stirring speed of 2,000 to 3,000 rpm under 70 to 80 ° C.

그리고, 3단계의 화장료는 앞서 설명한 방법으로 제조한 것일 수 있다.And, the cosmetic in step 3 may be prepared by the method described above.

이렇게 제조된 본 발명의 화장품은 pH 5.4 ~ 6.2, 바람직하게는 pH 5.8 ~ 6.0, 더욱 바람직하게는 pH 5.85 ~ 5.95일 수 있다.The cosmetic of the present invention thus prepared may have a pH of 5.4 to 6.2, preferably a pH of 5.8 to 6.0, and more preferably a pH of 5.85 to 5.95.

앞서 설명한 본 발명의 화장품은 다양한 타입의 화장품을 제조할 수 있으며, 일례를 들면, 크림 타입, 세럼 타입 등의 화장품을 제조할 수 있다.The cosmetics of the present invention described above can manufacture various types of cosmetics, for example, cosmetics such as cream type and serum type.

이하, 실시예에 의거하여 본 발명을 더욱 자세하게 설명을 한다. 그러나, 하기 실시예에 의해 본 발명의 권리범위를 한정하여 해석해서는 안된다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail based on examples. However, it should not be construed to limit the scope of the present invention by the following examples.

[실시예][Example]

준비예 1 : 허브로버트 추출물의 제조Preparation Example 1: Preparation of Herb Robert Extract

정제수 100 중량부에 대하여 건조된 허브로버트 23 중량부를 혼합하여 원료를 준비하였다.Raw materials were prepared by mixing 23 parts by weight of dried herb Robert with respect to 100 parts by weight of purified water.

다음으로, 상기 원료를 약 78 ~ 80℃에서 6시간 동안 열수 추출하여 추출물을 얻었다.Next, the raw material was extracted with hot water at about 78 to 80° C. for 6 hours to obtain an extract.

다음으로, 상기 추출물을 평균기공 25㎛인 필터막으로 필터링하여 1차 여과액을 얻었다.Next, the extract was filtered with a filter membrane having an average pore size of 25 μm to obtain a primary filtrate.

다음으로 상기 여과액 여과액 94.9ml에 1,2-헥산디올 5ml 및 에틸헥실글리세린 0.1ml을 첨가한 다음 충분하게 교반한 후, 교반액을 평균기공 10㎛인 필터막으로 2차 필터링을 수행하여 허브로버트 추출물을 제조하였다.Next, 5 ml of 1,2-hexanediol and 0.1 ml of ethylhexyl glycerin were added to 94.9 ml of the filtrate filtrate, and after sufficient stirring, the stirred solution was subjected to secondary filtering with a filter membrane having an average pore size of 10 μm. Herb Robert extract was prepared.

준비예 2 : 타라곤 잎/줄기 추출물의 제조Preparation Example 2: Preparation of tarragon leaf/stem extract

정제수 100 중량부에 대하여 건조된 타라곤 잎 및 줄기 16 중량부를 혼합하여 원료를 준비하였다.A raw material was prepared by mixing 16 parts by weight of dried tarragon leaves and stems with respect to 100 parts by weight of purified water.

다음으로, 상기 원료를 95 ~ 98℃에서 6시간 동안 열수 추출하여 추출물을 얻었다.Next, the raw material was extracted with hot water at 95 ~ 98 ℃ for 6 hours to obtain an extract.

다음으로, 상기 추출물을 평균기공 25㎛인 필터막으로 필터링하여 1차 여과액을 얻었다.Next, the extract was filtered with a filter membrane having an average pore size of 25 μm to obtain a primary filtrate.

다음으로 상기 여과액 여과액 94.9ml에 1,2-헥산디올 5ml 및 에틸헥실글리세린 0.1ml을 첨가한 다음 충분하게 교반한 후, 교반액을 평균기공 10㎛인 필터막으로 2차 필터링을 수행하여 타라곤 잎/줄기 추출물을 제조하였다.Next, 5 ml of 1,2-hexanediol and 0.1 ml of ethylhexyl glycerin were added to 94.9 ml of the filtrate filtrate, and after sufficient stirring, the stirred solution was subjected to secondary filtering with a filter membrane having an average pore size of 10 μm. Tarragon leaf/stem extracts were prepared.

준비예 3 : 잇꽃씨 추출물의 제조Preparation Example 3: Preparation of Safflower Seed Extract

건조된 잇꽃씨를 분쇄하여 잇꽃씨 분말을 제조하였다. 다음으로, 상기 잇꽃씨 분말 및 비극성 용매인 99.99 부피% 농도의 n-헥산을 1 : 22 중량비로 혼합한 후, 24 ~ 25℃하에서 추출한 후, 지방을 제거하였다. 상기 추출 및 지방 제거를 3회 반복 수행하여 지방이 제거된 추출물을 수득하였다. 다음으로, 상기 지방비 제거된 추출물 및 72 ~ 73 부피% 농도의 에탄올 수용액을 1 : 10 중량비로 혼합한 후, 24 ~ 25℃하에서 추출하여 에탄올 추출물을 수득하였다. 다음으로, 상기 에탄올 추출물을 감압 농축한 후, 여과하여 감압 농축물을 수득하였다. 다다음으로, 상기 에탄올 추출물을 감압 농축한 후, 여과하여 감압 농축물을 수득하였다. 다음으로, 상기 감압 농축물을 평균기공 10㎛인 필터막으로 필터링을 수행하여 잇꽃씨 추출물을 제조하였다.The dried safflower seeds were pulverized to prepare safflower seed powder. Next, the safflower seed powder and n-hexane having a concentration of 99.99% by volume as a non-polar solvent were mixed in a weight ratio of 1:22, followed by extraction at 24 to 25° C., and then fat was removed. The extraction and fat removal were repeated three times to obtain an extract from which fat was removed. Next, the extract from which the fat ratio has been removed and an aqueous ethanol solution having a concentration of 72 to 73% by volume were mixed in a 1:10 weight ratio, followed by extraction at 24 to 25° C. to obtain an ethanol extract. Next, the ethanol extract was concentrated under reduced pressure, and then filtered to obtain a concentrate under reduced pressure. Next, the ethanol extract was concentrated under reduced pressure, and then filtered to obtain a concentrate under reduced pressure. Next, the safflower seed extract was prepared by filtering the reduced pressure concentrate with a filter membrane having an average pore size of 10 μm.

준비예 4 : 갈대 추출물의 제조Preparation Example 4: Preparation of reed extract

정제수 100 중량부에 대하여 건조된 갈대뿌리 63 중량부를 혼합하여 원료를 준비하였다.A raw material was prepared by mixing 63 parts by weight of dried reed root with respect to 100 parts by weight of purified water.

다음으로, 상기 원료를 약 85 ~ 90℃에서 5시간 동안 열수 추출하여 추출물을 얻었다.Next, the raw material was extracted with hot water at about 85 to 90° C. for 5 hours to obtain an extract.

다음으로, 상기 추출물을 평균기공 25㎛인 필터막으로 필터링하여 1차 여과액을 얻었다.Next, the extract was filtered with a filter membrane having an average pore size of 25 μm to obtain a primary filtrate.

다음으로 상기 여과액에 1,2-헥산디올 5ml 및 에틸헥실글리세린 0.1ml을 첨가한 다음 충분하게 교반한 후, 교반액을 평균기공 10㎛인 필터막으로 2차 필터링을 수행하여 갈대 추출물을 제조하였다.Next, 5 ml of 1,2-hexanediol and 0.1 ml of ethylhexyl glycerin were added to the filtrate, and after sufficient stirring, the stirred solution was subjected to secondary filtering with a filter membrane having an average pore size of 10 μm to prepare a reed extract did

준비예 5 : 컴프리잎 추출물의 제조Preparation Example 5: Preparation of Comfrey Leaf Extract

정제수 100 중량부에 대하여 건조된 컴프리잎 25 중량부를 혼합하여 원료를 준비하였다.A raw material was prepared by mixing 25 parts by weight of dried comfrey leaves with respect to 100 parts by weight of purified water.

다음으로, 상기 원료를 약 70 ~ 72℃에서 5시간 동안 열수 추출하여 추출물을 얻었다.Next, the raw material was extracted with hot water at about 70 to 72° C. for 5 hours to obtain an extract.

다음으로, 상기 추출물을 평균기공 25㎛인 필터막으로 필터링하여 1차 여과액을 얻었다.Next, the extract was filtered with a filter membrane having an average pore size of 25 μm to obtain a primary filtrate.

다음으로 상기 여과액에 1,2-헥산디올 5ml 및 에틸헥실글리세린 0.1ml을 첨가한 다음 충분하게 교반한 후, 교반액을 평균기공 10㎛인 필터막으로 2차 필터링을 수행하여 컴프리잎 추출물을 제조하였다.Next, 5 ml of 1,2-hexanediol and 0.1 ml of ethylhexylglycerin were added to the filtrate, and after sufficient stirring, the stirred solution was subjected to secondary filtering with a filter membrane having an average pore size of 10 μm to obtain a comfrey extract. prepared.

실시예 1 : 화장료(복합 추출물)의 제조Example 1: Preparation of cosmetics (complex extract)

준비예 1의 허브로버트 추출물, 준비예 2의 타라곤 잎/줄기 추출물, 준비예 3의 잇꽃씨 추출물 및 준비예 4의 갈대 추출물을 1 : 0.75 : 1.0 : 0.80 중량비로 혼합하여 복합 추출물을 화장료로 제조하였다.The herbal robert extract of Preparation Example 1, the tarragon leaf/stem extract of Preparation Example 2, the safflower seed extract of Preparation Example 3 and the reed extract of Preparation Example 4 were mixed in a weight ratio of 1: 0.75: 1.0: 0.80 to prepare a complex extract as a cosmetic. did

실시예 2 ~ 실시예 3Examples 2 to 3

상기 실시예 1과 동일한 추출물을 사용하되, 하기 표 1과 같이 각 추출물을 중량비를 달리하여 복합 추출물을 각각 제조하여 실시예 2 ~ 실시예 3을 실시하였다.Examples 2 to 3 were carried out by using the same extract as in Example 1, but by preparing a complex extract by varying the weight ratio of each extract as shown in Table 1 below.

실시예 4Example 4

상기 실시예 1과 동일한 추출물을 사용하되, 컴프리잎 추출물을 0.3 중량비를 추가 사용하여 복합 추출물을 화장료로 제조하였다.The same extract as in Example 1 was used, but the comfrey leaf extract was additionally used in a weight ratio of 0.3 to prepare a complex extract as a cosmetic.

비교예 1Comparative Example 1

준비예 1의 허브로버트 추출물 단독을 NO 활성 억제제로 준비하였다.Herb Robert extract of Preparation Example 1 alone was prepared as a NO activity inhibitor.

비교예 2Comparative Example 2

준비예 2의 타라곤 잎/줄기 추출물 단독을 NO 활성 억제제로 준비하였다.Tarragon leaf/stem extract alone of Preparation Example 2 was prepared as a NO activity inhibitor.

비교예 3 ~ 비교예 6Comparative Example 3 ~ Comparative Example 6

상기 실시예 1과 동일한 방법으로 복합 추출물(NO 활성 억제제)를 제조하되, 하기 표 1과 같은 조성을 가지는 복합 추출물을 각각 제조하여 NO 활성 억제제로 준비하였다.A complex extract (NO activity inhibitor) was prepared in the same manner as in Example 1, but each complex extract having the composition shown in Table 1 was prepared as an NO activity inhibitor.

구분
(중량비)
division
(weight ratio)
허브로버트
추출물
Herb Robert
extract
타라곤 잎/줄기
추출물
Tarragon leaves/stalks
extract
잇꽃씨
추출물
safflower seed
extract
갈대
추출물
Reed
extract
컴프리잎
추출물
comfrey leaf
extract
실시예 1Example 1 1One 0.750.75 1.01.0 0.80.8 -- 실시예 2Example 2 1One 0.750.75 1.01.0 0.60.6 -- 실시예 3Example 3 1One 0.750.75 1.01.0 1.21.2 -- 실시예 4Example 4 1One 0.750.75 1.01.0 0.80.8 0.300.30 비교예 1Comparative Example 1 1One -- -- -- -- 비교예 2Comparative Example 2 -- 1One -- -- -- 비교예 3Comparative Example 3 1One 2.22.2 -- -- -- 비교예 4Comparative Example 4 1One 1.81.8 1.01.0 0.80.8 -- 비교예 5Comparative Example 5 1One 0.750.75 1.01.0 0.20.2 -- 비교예 6Comparative Example 6 1One 0.750.75 1.01.0 1.651.65 --

실험예 1 : 복합 추출물(NO 활성 억제제)에 대한 세포 생존율 측정Experimental Example 1: Measurement of cell viability for complex extract (NO activity inhibitor)

추출물의 세포 독성을 확인하기 위해서 마우스 대식세포주인 RAW 264.7 세포를 염증유발 모델로 측정하였다.In order to confirm the cytotoxicity of the extract, RAW 264.7 cells, a mouse macrophage cell line, were measured as an inflammation model.

(1) 세포 배양(1) cell culture

마우스 대식세포주인 RAW 264.7 세포는 10% 소태아혈청(fetal bovine serum, Thermo사의 SH30406.02) 및 1% 페니실린/스테렙토마이신(penicillin/streptomycin, Thermo사의 SV30010)이 함유된 DMEM 배지(high glucose, Thermo사의 SH30243.01)를 이용하여 100mm 세포배양접시(cell culture dish)를 사용하여 5% CO2 배양기에 배양했다. 컨플루언스(confluence)에 도달한 세포는 스크래퍼(Scraper, SPL사의 90030)를 사용하여 계대 배양하여 유지했다.RAW 264.7 cells, a mouse macrophage cell line, were prepared in DMEM medium (high glucose, Using Thermo's SH30243.01), it was cultured in a 5% CO 2 incubator using a 100 mm cell culture dish. Cells that reached confluence were maintained by subculture using a scraper (SPL, 90030).

(2) 세포 생존율 실험(2) Cell viability experiment

살아있는 세포 내의 미토콘드리아에 존재하는 탈수소효소는 WST(Tetrazolium Salt)에서 포르마잔(formazan)이라는 발색물질을 생성한다. 따라서 이를 측정하여 살아있는 세포의 수를 측정할 수 있다. 96 웰세포 배양기(well cell culture plate, 코닝사의 3595)에 1×104 cells/well 농도의 RAW 264.7 세포를 10% FBS(fetal bovine serum), 1% 페니실린/스테렙토마이신이 첨가된 DMEM 배양액으로 24시간 배양한다. 그 후 시료가 복합 추출물(0%, 0.125 중량%, 0.25 중량%, 0.5 중량%, 1 중량%, 2 중량%, 4 중량%)의 농도별로 포함된 DMEM 배지로 교체하여 48시간 배양한다. 배양이 끝난 세포에 EZ-CYTOX 시약(Daeilab의 EZ-1000)을 이용하고 450nm에서 흡광도를 측정하여 하기 수학식 2 에 의거하여, 농도별 세포 생존율을 측정하였으며, 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다. 하기 표 1의 측정 결과는 3회 반복 실험한 평균 값을 나타낸 것이며, 대조군(추출물 0 중량%)을 기준으로 상대적으로 측정한 수치이다.Dehydrogenase present in mitochondria in living cells produces a chromogenic substance called formazan from WST (Tetrazolium Salt). Therefore, it is possible to measure the number of living cells by measuring it. In a 96-well cell culture plate (Corning 3595), RAW 264.7 cells at a concentration of 1×10 4 cells/well were treated with DMEM culture medium supplemented with 10% fetal bovine serum (FBS) and 1% penicillin/stereptomycin. Incubate for 24 hours. Thereafter, the sample is replaced with a DMEM medium containing each concentration of the complex extract (0%, 0.125% by weight, 0.25% by weight, 0.5% by weight, 1% by weight, 2% by weight, 4% by weight) and cultured for 48 hours. Cell viability was measured for each concentration based on Equation 2 below by using EZ-CYTOX reagent (EZ-1000 from Daeilab) and measuring the absorbance at 450 nm for the cells that were cultured, and the results are shown in Table 2 below. . The measurement results in Table 1 below show the average value of three repeated experiments, and are relative values measured based on the control (0 wt% of the extract).

[수학식 2][Equation 2]

세포생존율(Cell viability)=(시료 첨가군의 흡광도/무처리군 흡광도)×100Cell viability = (absorbance in the sample added group / absorbance in the untreated group) × 100

구분division 0 중량%0 wt% 0.125 중량%0.125 wt% 0.25 중량%0.25% by weight 0.5 중량%0.5% by weight 1 중량%1% by weight 2 중량%2% by weight 대조군control 100%100% -- -- -- -- -- 비교예 1Comparative Example 1 -- 100.03100.03 100.26100.26 101.17101.17 102.68102.68 103.81103.81 비교예 2Comparative Example 2 -- 99.9899.98 98.0698.06 97.0297.02 94.3294.32 91.2291.22 비교예 3Comparative Example 3 -- 100.47100.47 100.52100.52 100.85100.85 102.57102.57 100.66100.66 비교예 6Comparative Example 6 -- 98.2398.23 97.0297.02 95.3395.33 90.3590.35 84.9884.98 실시예 1Example 1 -- 100.05100.05 100.46100.46 100.97100.97 101.28101.28 101.03101.03 실시예 2Example 2 -- 100.12100.12 100.61100.61 101.10101.10 102.88102.88 101.57101.57 실시예 3Example 3 -- 99.8899.88 100.20100.20 100.58100.58 100.97100.97 100.45100.45 실시예 4Example 4 -- 100.02100.02 99.8499.84 99.3599.35 98.9298.92 98.0998.09

상기 표 2의 실험결과를 살펴보면, 비교예 1의 허브로버트 추출물을 2.0% 이하의 농도로 처리한 시험군은 대조군과 대비하여 통계적으로 유의한 세포 생존율의 차이를 나타내지 않아 2.0% 이하의 농도에서는 RAW264.7 세포에 대한 세포 독성을 나타내지 않았다. 그리고, 타라곤 잎/줄기 추출물을 단독으로 사용한 비교예 2의 경우, 대조군 및 비교예 1과 비교할 때, 타라곤 잎/줄기 추출물이 다소 독성이 있어서 세포 생존율이 상대적으로 낮은 결과를 보였다.Looking at the experimental results in Table 2, the test group treated with the herbal robert extract of Comparative Example 1 at a concentration of 2.0% or less did not show a statistically significant difference in cell viability compared to the control group, so RAW264 at a concentration of 2.0% or less .7 showed no cytotoxicity to cells. And, in the case of Comparative Example 2 in which the tarragon leaf/stem extract was used alone, compared with the control group and Comparative Example 1, the tarragon leaf/stem extract was somewhat toxic, resulting in a relatively low cell viability.

또한, 갈대 추출물을 1.5 중량비를 초과하여 사용한 비교예 6의 경우, 실시예 3과 비교할 때, RAW264.7 세포에 대한 세포 독성이 높게 나오는 결과를 보였다.In addition, in the case of Comparative Example 6 in which the reed extract was used in excess of 1.5 weight ratio, when compared with Example 3, the cytotoxicity to RAW264.7 cells was high.

이에 반해, 실시예 1 ~ 실시예 4의 경우, 전반적으로 매우 양호한 세포 생존율을 보였다. 그리고, 실시예 1, 실시예 3 및 비교예 6을 비교해 보면, 갈대 추출물 사용량이 높으면 세포 생존율이 낮아지는 경향이 있었다. 하지만, 컴프리잎 추출물을 사용하면(실시예 4), 타라곤 잎/줄기 및 갈대 추출물 함량 증대에 따른 세포 생존율 감소를 방지할 수 있음을 확인할 수 있었다.On the other hand, in the case of Examples 1 to 4, the overall cell viability was very good. And, comparing Example 1, Example 3, and Comparative Example 6, when the amount of the reed extract used was high, there was a tendency that the cell viability is low. However, it was confirmed that when the comfrey leaf extract was used (Example 4), it was possible to prevent a decrease in cell viability due to an increase in the tarragon leaf/stem and reed extract content.

실험예 2 : 복합 추출물의 NO 생성억제 측정Experimental Example 2: Measurement of NO production inhibition of complex extract

(1) 시험 물질 처리(1) Treatment of test substances

RAW 264.7 세포를 2×106 cells/dish density로 60mm 플레이트(plate)에 분주하여 24시간 동안 플레이트에 부착시켰다. 염증반응을 유발하기 위해 1㎍/㎖ 농도의 LPS(lipopolysaccharide)와 시험물질을 함유한 새로운 배지를 처리하여 24시간 배양하였다.RAW 264.7 cells were dispensed in a 60 mm plate at 2×10 6 cells/dish density and adhered to the plate for 24 hours. In order to induce an inflammatory response, a fresh medium containing LPS (lipopolysaccharide) at a concentration of 1 μg/ml and a test substance was treated and cultured for 24 hours.

(2) 일산화질소(NO) 생성량 측정 실험(2) Nitric oxide (NO) production measurement experiment

RAW 264.7 세포에서 생성되어 배양액에 존재하는 NO 수준을 그리스(Griess) 반응을 기본으로 하는 NO 디텍션키트(detection kit, intron사의 21021)를 사용하여 측정하였다. NO가 존재한다고 추정되는 배양액을 96 웰-플레이트(well plate)에 100㎕씩 분주한 후 N1 버퍼(sulfanilamide) 50㎕를 넣어 10분간 실온에서 반응시킨다. 이어서 N2 버퍼(naphthylethylenediamine) 50㎕를 넣고 10분간 실온에서 반응시킨 후 540nm에서 흡광도 측정하였으며, 각 NO 생성량은 아질산염 기준(nitrite standard)를 이용하여 얻은 표준검량곡선을 이용하여 산출하였다. 양성대조군(Positive control)은 L-NMMA 50μM(NG-Methyl-L-arginine acetate salt, 시그마사의 M7033)을 사용하였다.The level of NO produced in RAW 264.7 cells and present in the culture medium was measured using a NO detection kit based on a Griess reaction (intron's 21021). After aliquoting 100 μl of the culture solution in which NO is presumed to be present in 96 well-plates, 50 μl of N1 buffer (sulfanilamide) is added and reacted at room temperature for 10 minutes. Then, 50 μl of N2 buffer (naphthylethylenediamine) was added, and after reacting at room temperature for 10 minutes, absorbance was measured at 540 nm, and each NO production amount was calculated using a standard calibration curve obtained using a nitrite standard. As a positive control, 50 μM of L-NMMA (N G -Methyl-L-arginine acetate salt, M7033 from Sigma) was used.

각각의 결과는 마이크로소프트사의 오피스 엑셀 2007(Office Excel 2007)의 t-테스트(Paired t-test, 양측검증) 기능을 이용하여 시험결과의 통계적 유의성을 확인한 것이며, 그 결과는 하기 표 3과 같다. 그리고, 표 3의 NO 생성 억제율은 하기 수학식 1에 의거하여 계산하였다.Each result confirms the statistical significance of the test result using the t-test (paired t-test, two-sided verification) function of Microsoft's Office Excel 2007, and the results are shown in Table 3 below. And, the NO production inhibition rate of Table 3 was calculated based on the following Equation 1.

또한, 복합 추출물의 농도는 정제수와 희석시켜 조절한 것이다.In addition, the concentration of the complex extract was adjusted by dilution with purified water.

[수학식 1][Equation 1]

NO 생성 억제율(%) = (A-B)/A × 100%NO production inhibition rate (%) = (A-B)/A × 100%

수학식 1에서 A는 화장료 내 복합 추출물 농도가 0%일 때 RAW264.7 세포에서의 NO 생성량(100%)이고, B는 화장료 내 복합 추출물의 특정 농도에서의 RAW264.7 세포에서의 NO 생성량(%) 측정값이다. 하기 표 2의 측정 결과는 3회 반복 실험한 평균 값을 나타낸 것이며, 대조군(추출물 0 중량%)을 기준으로 상대적으로 측정한 수치이다.In Equation 1, A is the amount of NO production in RAW264.7 cells (100%) when the concentration of the complex extract in the cosmetic is 0%, and B is the amount of NO production in the RAW264.7 cells at a specific concentration of the complex extract in the cosmetic ( %) is the measured value. The measurement results in Table 2 below show the average value of three repeated experiments, and are relative values measured based on the control (0 wt% of the extract).

NO 생성억제율(%)NO production inhibition rate (%) 0 중량%0 wt% 0.125 중량%0.125 wt% 0.25 중량%0.25% by weight 0.5 중량%0.5% by weight 1 중량%1% by weight 2 중량%2% by weight 대조군control 0%0% -- -- -- -- -- 양성대조군(L-NMMA 50μM)Positive control (L-NMMA 50 μM) 61.05%61.05% -- -- -- -- -- 비교예 1Comparative Example 1 -- 16.62%16.62% 19.98%19.98% 22.07%22.07% 24.76%24.76% 22.54%22.54% 비교예 2Comparative Example 2 -- 1.24%1.24% 2.35%2.35% 3.88%3.88% 3.96%3.96% 3.98%3.98% 비교예 3Comparative Example 3 -- 25.34%25.34% 26.52%26.52% 31.97%31.97% 33.25%33.25% 31.17%31.17% 비교예 4Comparative Example 4 -- 26.23%26.23% 28.55%28.55% 32.31%32.31% 35.19%35.19% 32.78%32.78% 비교예 5Comparative Example 5 -- 25.10%25.10% 26.03%26.03% 30.92%30.92% 33.18%33.18% 30.46%30.46% 비교예 6Comparative Example 6 -- 22.07%22.07% 23.14%23.14% 25.38%25.38% 27.32%27.32% 22.39%22.39% 실시예 1Example 1 -- 25.43%25.43% 26.72%26.72% 31.81%31.81% 34.13%34.13% 32.38%32.38% 실시예 2Example 2 -- 25.22%25.22% 26.08%26.08% 31.52%31.52% 33.88%33.88% 31.81%31.81% 실시예 3Example 3 -- 24.25%24.25% 25.37%25.37% 29.34%29.34% 30.21%30.21% 28.34%28.34% 실시예 4Example 4 -- 27.31%27.31% 32.21%32.21% 37.30%37.30% 38.71%38.71% 33.13%33.13%

상기 표 3의 측정결과를 살펴보면, 양성 대조군인 L-NMMA는 50μM 농도 범위에서 RAW264.7 세포의 NO 생성을 약 61% 정도 저해시켰다. 그리고, 비교예 1의 허브로버트 추출물은 0.125 내지 2.0% 농도범위에서 통계적으로 유의한 수준으로 RAW264.7 세포의 Nitirc oxide(NO) 생성을 저해하는 것을 확인할 수 있다. 0.125 중량% ~ 1 중량% 처리시 약 10 ~ 25%의 NO 생성을 저해하는 것을 확인할 수 있었으며, 2 중량%에서는 오히려 NO 생성 저해율이 저하되는 문제가 있었다. 그리고, 비교예 2의 타라곤 잎/줄기 추출물의 경우, NO 생성 억제율 효과가 미비했다.Looking at the measurement results in Table 3, the positive control L-NMMA inhibited the NO production of RAW264.7 cells by about 61% in the 50 μM concentration range. In addition, it can be confirmed that the herb Robert extract of Comparative Example 1 inhibits the production of nitirc oxide (NO) in RAW264.7 cells at a statistically significant level in the concentration range of 0.125 to 2.0%. It was confirmed that about 10 to 25% of NO production was inhibited when treated with 0.125 wt% to 1 wt%, and at 2 wt%, there was a problem in that the NO production inhibition rate was rather reduced. And, in the case of the tarragon leaf / stem extract of Comparative Example 2, the NO production inhibitory rate effect was insignificant.

이에 반해, 허브로버트 추출물 및 타라곤 잎/줄기 추출물을 혼합 사용한 비교예 3의 경우 , 비교예 1과 비교할 때, 전반적으로 우수한 NO 생성 저해율을 보이며, 0.5 ~ 1 중량%에서도 높은 NO 생성 저해율을 보였다.On the other hand, in Comparative Example 3 using a mixture of herb Robert extract and tarragon leaf/stem extract, compared to Comparative Example 1, overall excellent NO production inhibition rate, and a high NO production inhibition rate even at 0.5 to 1% by weight.

또한, 허브로버트 추출물 및 타라곤 잎/줄기 추출물을 혼합 사용한 비교예 3과 비교하여, 잇꽃 추출물, 갈대 추출물 및/또는 컴프리잎 추출물을 더 도입한 복합 추출물인 실시예 1 ~ 4의 경우, 비교예 3과 유사 내지 동등 또는 다소 더 우수한 NO 생성 저해율을 보였다.In addition, as compared with Comparative Example 3 using a mixture of herb Robert extract and tarragon leaf/stem extract, in the case of Examples 1 to 4, which are complex extracts further introduced with safflower extract, reed extract and/or comfrey leaf extract, Comparative Example 3 It showed a similar to, equivalent to, or somewhat better inhibition of NO production.

다만, 갈대 추출물을 1.5 중량비를 초과 사용한 비교예 6의 경우, 실시예 3(1.2 중량비)과 비교할 때, NO 생성 저해율 효과가 오히려 크게 감소하는 문제가 있었다.However, in the case of Comparative Example 6 in which the reed extract was used in excess of 1.5 weight ratio, there was a problem in that the NO production inhibition rate effect was rather significantly reduced compared to Example 3 (1.2 weight ratio).

실험예 3 : 복합 추출물의 티로시나아제 활성 억제 측정Experimental Example 3: Measurement of inhibition of tyrosinase activity of the complex extract

티로시나아제의 활성 억제는 일반적으로 분광학적인 방법으로 측정하는데, 본 실험에서는 바니 등의 방법으로 실시하였다(VanniA. at al., Annali di Chimica, 80(35), 1990). 티로시나아제는 감자나 버섯으로부터 정제되는 효소로서, 본 실험에서는 버섯류로부터 추출한 것을 사용하였다. 0.1M 포타슘 포스페이트(potassium phosphate) 완충액(pH 6.8) 1.0㎖, 0.3㎎/㎖ L-티로신 수용액 1.0㎖ 및 1250unit/㎖ 머쉬룸 티로시나아제(mushroom tyrosinase) 0.1㎖(시그마알드리치, USA)를 혼합한 후 여기에 시료용액을 농도에 따라 각각 0.2㎖씩 첨가하여 37℃에서 10분간 효소 반응시켰다. 그 다음, 반응용액의 흡광도를 480nm에서(JASCO V-550, japan)측정하고 하기 수학식 2에 따라 계산하여 복합추출물 농도 0.5 중량%에서의 티로시나아제 효소 활성 억제율을 구하였다. 이때, 복합 추출물의 농도는 정제수와 희석시켜 조절한 것이다.Inhibition of tyrosinase activity is generally measured by a spectroscopic method. In this experiment, it was carried out by the method of Vanni et al. (Vanni A. at al., Annali di Chimica, 80(35), 1990). Tyrosinase is an enzyme purified from potatoes or mushrooms, and in this experiment, those extracted from mushrooms were used. After mixing 1.0 ml of 0.1M potassium phosphate buffer (pH 6.8), 1.0 ml of 0.3 mg/ml L-tyrosine aqueous solution, and 0.1 ml of 1250 unit/ml mushroom tyrosinase (Sigma-Aldrich, USA) Here, 0.2 ml of each sample solution was added according to the concentration, followed by enzymatic reaction at 37° C. for 10 minutes. Then, the absorbance of the reaction solution was measured at 480 nm (JASCO V-550, japan) and calculated according to Equation 2 below to obtain a rate of inhibition of tyrosinase enzyme activity at a concentration of 0.5 wt % of the complex extract. At this time, the concentration of the complex extract was adjusted by diluting it with purified water.

양성대조군으로는 실험군과 동일한 농도의 알부틴 0.5 중량% 농도를 사용하였으며 실험군의 대조군으로는 복합 추출물을 첨가하지 않은 반응용액을 사용하였다. 그 결과는 하기 표 4에 나타내었다.As a positive control group, a 0.5 wt% concentration of arbutin at the same concentration as the experimental group was used, and as a control group for the experimental group, a reaction solution without addition of the complex extract was used. The results are shown in Table 4 below.

[수학식 2][Equation 2]

티로시나아제 활성 억제율(%) = (A-B)/A × 100%Tyrosinase activity inhibition rate (%) = (A-B) / A × 100%

수학식 2에서, A는 복합 추출물 농도가 0%인 대조군의 480nm에서의 흡광도이고, B는 복합 추출물 농도가 0.50 중량%인 화장료의 480nm에서의 흡광도이다.In Equation 2, A is the absorbance at 480 nm of the control having a complex extract concentration of 0%, and B is the absorbance at 480 nm of the cosmetic having a complex extract concentration of 0.50 wt%.

구분division 복합 추출물 0.50 중량% 농도에서의 티로시나아제 활성 억제율(%)Inhibition rate (%) of tyrosinase activity at a concentration of 0.50 wt% of the complex extract 대조군(0 중량%)Control (0 wt%) -- 알부틴arbutin 34.12%34.12% 비교예 3Comparative Example 3 11.61%11.61% 비교예 4Comparative Example 4 20.32%20.32% 비교예 5Comparative Example 5 15.70%15.70% 비교예 6Comparative Example 6 33.41%33.41% 실시예 1Example 1 29.67%29.67% 실시예 2Example 2 27.45%27.45% 실시예 3Example 3 33.30%33.30% 실시예 4Example 4 34.37%34.37%

상기 표 4의 실험결과를 살펴보면, 허브로버트 및 타라곤 잎/줄기 추출물로만 제조된 복합 추출물인 비교예 3에 비해 실시예 1 ~ 4가 전반적으로 12% 이상의 티로시나아제 활성 억제율을 가짐을 확인할 수 있었다.Looking at the experimental results in Table 4, compared to Comparative Example 3, which is a complex extract prepared only with herb Robert and tarragon leaf/stem extract, it was confirmed that Examples 1 to 4 had a tyrosinase activity inhibition rate of 12% or more overall. .

그리고, 타라곤 잎/줄기 추출물을 1.5 중량비를 초과하여 사용한 비교예 4의 경우, 실시예 1과 비교할 때, 티로시나아제 활성 억제율이 오히려 급격하게 감소하는 문제가 있었다.And, in the case of Comparative Example 4, in which the tarragon leaf/stem extract was used in excess of 1.5 weight ratio, there was a problem in that the tyrosinase activity inhibition rate was rather sharply decreased compared to that of Example 1.

또한, 갈대 추출물을 0.5 중량비 미만인 0.2 중량비로 사용한 비교예 5의 경우, 실시예 1 및 실시예 2와 비교할 때, 티로시나아제 활성 억제 효과가 매우 떨어지는 문제가 있었고, 갈대 추출물을 1.5 중량비를 초과한 1.65 중량비로 사용한 비교예 6의 경우, 실시예 3과 비교할 때, 티로시나아제 활성 억제 증대 효과가 더 이상 없는 결과를 보였으며, 앞서 설명한 바와 같이 오히려 NO 생성 억제 효과만 저해되는 문제만 있었다.In addition, in the case of Comparative Example 5 using the reed extract in a 0.2 weight ratio that is less than 0.5 weight ratio, there was a problem that the tyrosinase activity inhibitory effect was very poor, compared to Examples 1 and 2, and the reed extract exceeded 1.5 weight ratio. In the case of Comparative Example 6 used in a weight ratio of 1.65, when compared with Example 3, there was no longer an effect of increasing inhibition of tyrosinase activity, and as described above, there was only a problem in that only the inhibitory effect of NO production was rather inhibited.

제조예 1 : 화장품 제조Preparation Example 1: Cosmetic Preparation

(1) 수상액의 제조(1) Preparation of aqueous solution

하기 표 5의 성분들을 용제에 완전 분산시킨 후, 정제수를 투입한 다음, 56 ~ 57℃로 가열 및 교반하여 완전 용해시켜서 수상액을 제조하였다.After the components of Table 5 were completely dispersed in the solvent, purified water was added, and then the aqueous solution was prepared by heating and stirring to 56 ~ 57 ℃ and completely dissolving.

수상액award 구분division 종류Kinds 중량부parts by weight 피부컨디셔닝skin conditioning 히알루론산(1% 농도)Hyaluronic acid (1% concentration) 39.239.2 감초분말Licorice Powder 22 하이드롤라이트-5Hydrolite-5 58.858.8 금속이온봉쇄제sequestering agent EDTA-2NAEDTA-2NA 0.390.39 증점제thickener 잔탄검(Keltrol F)Xanthan Gum (Keltrol F) 0.980.98 보습제moisturizer 글리세린glycerin 49.0649.06 점도감소제viscosity reducing agent 디프로필렌 글라이콜dipropylene glycol 58.8358.83 용제solvent 1,2-헥산디올1,2-Hexanediol 19.6119.61 1,3-부틸렌글라이콜1,3-butylene glycol 19.6119.61 살균보존제sterilization preservative 클로페네신Clofenesin 5.885.88

(2) 유상액의 제조(2) Preparation of emulsion

하기 표 5의 성분들을 혼합한 후, 68℃ 에서 아지믹서로 저어주면서 혼합 및 용해시킨 다음, 피막형성제를 투입하여 골고루 분산 및 혼합하여 유상액을 제조하였다.After mixing the components in Table 5 below, mixing and dissolving while stirring with an azimuth mixer at 68° C., a film forming agent was added, and uniformly dispersed and mixed to prepare an emulsion.

유상액emulsion 구분division 종류Kinds 사용량(중량부)Usage (parts by weight) 피부증발차단제skin evaporator MCT 오일MCT Oil 87.587.5 스쿠알란squalane 12.512.5 토코페릴아세테이트tocopheryl acetate Vit-E AcetateVit-E Acetate 0.6250.625 피부컨디셔닝skin conditioning 쉐어버터shea butter 12.5012.50 코코넛 오일coconut oil 6.256.25 유화제emulsifier 세테아릴글루코시드 및
세테아릴알코올(Emulgade PL 68/50)
cetearyl glucoside and
Cetearyl Alcohol (Emulgade PL 68/50)
18.7518.75
세테아릴알코올(KALCOL 6850)Cetearyl Alcohol (KALCOL 6850) 2525 피부유연화제skin emollient 하나 이상의 중간사슬 모노글리세라이드
포함 유상(AKOLINE MCM)
one or more medium chain monoglycerides
Included fee (AKOLINE MCM)
55
비이온계면활성제nonionic surfactant Tween 60Tween 60 12.512.5 피막형성제film forming agent SEPIPLUS 400SEPIPLUS 400 3.753.75

(3) 앞서 제조한 제조된 수상액 100 중량부를 메인 유화탱크에 넣고, 유상액 25 중량부를 별도의 유상탱크에 넣고 각각을 80℃로 가온시킨 다음, 유상액을 메인 탱크에 서서히 가하면서 혼합 유화시켰다. 다음으로, 유상액을 가한 다음 호머믹서 2,500rpm 과 애지믹서 40rpm의 속도로 약 3분간 유화시켰다. 유화가 끝나면 애지믹서를 12rpm 의 속도로 하여 내용물을 냉각시킨 후, 45℃에서 실시예 1의 복합 추출물 22 중량부와 향료(Perfume 85147) 0.12 중량부를 내용물에 가한 다음 38℃에서 교반을 멈추고 25℃에서 숙성시켜 크림상의 소프트 크림 타입의 화장품(유백색의 크림상)을 제조하였다.(3) Put 100 parts by weight of the previously prepared aqueous phase solution into the main emulsification tank, put 25 parts by weight of the oil phase in a separate oil phase tank, and heat each to 80° C. made it Next, after adding the emulsion, it was emulsified for about 3 minutes at a speed of 2,500 rpm with a Homer mixer and 40 rpm with an agitator. After the emulsification is finished, the contents are cooled by using an agitator at a speed of 12 rpm, and then 22 parts by weight of the complex extract of Example 1 and 0.12 parts by weight of a fragrance (Perfume 85147) are added to the contents at 45° C. A creamy soft cream type cosmetic (milky white cream) was prepared.

제조예 2 : 화장품 제조Preparation Example 2: Cosmetic Preparation

상기 제조예 1과 동일한 방법으로 소프트 크림 타입의 화장품(유백색의 크림상)을 제조하되, 실시예 1의 복합 추출물 22 중량부 대신 실시예 2의 복합 추출물 27 중량부를 사용하여 화장품을 제조하였다.A soft cream type cosmetic (milky white cream) was prepared in the same manner as in Preparation Example 1, except that 27 parts by weight of the complex extract of Example 2 was used instead of 22 parts by weight of the complex extract of Example 1 to prepare cosmetics.

상기 실시예 및 실험예를 통하여, 특정 추출물을 최적 조성, 조성비로 포함하는 본 발명의 복합 추출물(화장료)가 우수한 항염 효과가 있으면서도, 산화적 스트레스 방어 효과가 있으면서, 기미 등의 피부 색소 침착을 유발하는 티로시나아제 활성을 저해하는 효과가 있는 것을 확인할 수 있었다. 이러한, 본 발명은 화장료를 이용하여 다양한 제형의 기능성 화장품을 제공할 수 있다.Through the above Examples and Experimental Examples, the complex extract (cosmetics) of the present invention containing a specific extract in an optimal composition and composition ratio has an excellent anti-inflammatory effect, has an oxidative stress defense effect, and induces skin pigmentation such as spots It was confirmed that there is an effect of inhibiting the tyrosinase activity. As such, the present invention can provide functional cosmetics of various formulations using cosmetics.

Claims (9)

삭제delete 삭제delete 허브로버트 추출물, 타라곤 잎과 줄기 추출물, 잇꽃씨 추출물, 갈대 추출물 및 컴프리잎 추출물을 1 : 0.5 ~ 1.0 : 1.0 ~ 2.0 : 0.7 ~ 1.5 : 0.2 ~ 0.4 중량비로 포함하는 복합추출물을 포함하며,
상기 복합추출물의 농도가 0.1 ~ 1.0 중량%일 때, 하기 수학식 1에 의거하여 측정시, RAW264.7 세포에서의 일산화질소(NO) 생성 억제율이 20 ~ 45%이고,
복합추출물의 농도가 0.1 ~ 0.5 중량%일 때, 하기 수학식 2에 의거하여 측정시, 하기 수학식 2에 의해 측정된 티로시나아제 활성 억제율이 하기 방정식 1을 만족하는 것을 특징으로 하는 NO 활성 억제능 및 티로시나아제 활성 억제능을 가지는 화장료;
[수학식 1]
NO 생성 억제율(%) = (A-B)/A × 100%
수학식 1에서, A는 화장료 내 복합 추출물 농도가 0%일 때 RAW264.7 세포에서의 NO 생성량(100%)이고, B는 화장료 내 복합 추출물의 특정 농도에서의 RAW264.7 세포에서의 NO 생성량(%) 측정 값이며,
[수학식 2]
티로시나아제 활성 억제율(%) = (A-B)/A × 100%
수학식 2에서, A는 화장료 내 복합 추출물 농도가 0 중량%인 대조군의 480nm에서의 흡광도이고, B는 복합 추출물 농도가 0.1 ~ 0.5 중량%인 화장료의 480nm에서의 흡광도이며,
[방정식 1]
12% ≤ (A-B) ≤ 30%
방정식 1에서, A는 복합 추출물의 티로시나아제 활성 억제율이고, B는 대조군의 티로시나아제 활성 억제율이며, 이때, 상기 대조군은 허브로버트 추출물과 타라곤 잎과 줄기 추출물을 1 : 2.2 중량비로 포함하는 복합추출물이다.
Herb Robert extract, tarragon leaf and stem extract, safflower seed extract, reed extract and comfrey leaf extract 1: 0.5 ~ 1.0: 1.0 ~ 2.0: 0.7 ~ 1.5: Contains a complex extract comprising 0.2 ~ 0.4 weight ratio,
When the concentration of the complex extract is 0.1 to 1.0% by weight, when measured based on Equation 1 below, the inhibition rate of nitric oxide (NO) production in RAW264.7 cells is 20 to 45%,
When the concentration of the complex extract is 0.1 to 0.5% by weight, when measured based on Equation 2, the inhibition of tyrosinase activity measured by Equation 2 below satisfies Equation 1 below. and cosmetics having the ability to inhibit tyrosinase activity;
[Equation 1]
NO production inhibition rate (%) = (AB)/A × 100%
In Equation 1, A is the amount of NO production (100%) in RAW264.7 cells when the concentration of the complex extract in the cosmetic is 0%, and B is the amount of NO production in the RAW264.7 cells at a specific concentration of the complex extract in the cosmetic. (%) is the measured value,
[Equation 2]
Tyrosinase activity inhibition rate (%) = (AB) / A × 100%
In Equation 2, A is the absorbance at 480 nm of the control in which the concentration of the complex extract in the cosmetic is 0% by weight, and B is the absorbance at 480 nm of the cosmetic in which the concentration of the complex extract is 0.1 to 0.5% by weight,
[Equation 1]
12% ≤ (AB) ≤ 30%
In Equation 1, A is the tyrosinase activity inhibition rate of the complex extract, and B is the tyrosinase activity inhibition rate of the control group, wherein the control is a combination containing herb Robert extract and tarragon leaf and stem extract in a weight ratio of 1: 2.2 It is an extract.
제3항에 있어서, 상기 복합추출물을 2 중량% 이하로 포함할 때, RAW264.7 세포 생존율이 96.00% 이상인 것을 특징으로 하는 NO 활성 억제능 및 티로시나아제 활성 억제능을 가지는 화장료.[4] The cosmetic according to claim 3, wherein when the complex extract is contained in an amount of 2 wt% or less, the RAW264.7 cell viability is 96.00% or more. 삭제delete 삭제delete 수상액; 유상액; 제3항 또는 제4항의 화장료; 향료; 및 정제수;를 포함하며,
상기 수상액은 피부컨디셔닝제, 금속이온봉쇄제, 증점제, 보습제, 점도감소제, 살균보존제 및 용제를 포함하고,
상기 유상액은 수분증발차단제, 토코페릴아세테이트, 피부컨디셔닝제, 유화제, 피부유연화제, 비이온계면활성제 및 피막형성제를 포함하는 것을 특징으로 하는 화장품.
aqueous solution; emulsion; The cosmetic of claim 3 or 4; Spices; and purified water;
The aqueous solution includes a skin conditioning agent, a sequestering agent, a thickener, a moisturizing agent, a viscosity reducing agent, a sterilization preservative and a solvent,
The emulsion is a cosmetic, characterized in that it comprises a moisture evaporation blocking agent, tocopheryl acetate, a skin conditioning agent, an emulsifier, a skin softener, a nonionic surfactant and a film former.
삭제delete 수상액 및 유상액을 각각 제조하는 1단계;
상기 유상액에 수상액을 첨가한 다음 교반시켜서 혼합물을 제조하는 2단계;
40 ~ 50℃하에서 상기 혼합물, 복합 추출물, 향료 및 정제수를 혼합 및 2,000 ~ 3,000rpm의 교반속도로 교반시키는 3단계;를 포함하는 공정을 수행하며,
상기 복합 추출물은 허브로버트 추출물, 타라곤 잎과 줄기 추출물, 잇꽃씨 추출물, 갈대 추출물 및 컴프리잎 추출물을 1 : 0.5 ~ 1.0 : 1.0 ~ 2.0 : 0.7 ~ 1.5 : 0.2 ~ 0.4 중량비로 포함하는 것을 특징으로 하는 NO 활성 억제능 및 티로시나아제 활성 억제능을 가지는 리바이탈라이징 화장품의 제조방법.
Step 1 of preparing an aqueous phase and an emulsion, respectively;
Step 2 of preparing a mixture by adding an aqueous solution to the emulsion and then stirring;
3 steps of mixing the mixture, complex extract, flavoring and purified water at 40-50 ° C. and stirring at a stirring speed of 2,000-3,000 rpm; performing a process comprising;
The complex extract comprises herb Robert extract, tarragon leaf and stem extract, safflower seed extract, reed extract and comfrey leaf extract in a weight ratio of 1: 0.5 to 1.0: 1.0 to 2.0: 0.7 to 1.5: 0.2 to 0.4 by weight. A method for manufacturing a revitalizing cosmetic having NO activity inhibitory ability and tyrosinase activity inhibitory activity.
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