KR102179636B1 - 신규한 털목이버섯 균주를 포함하는 비만 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents

신규한 털목이버섯 균주를 포함하는 비만 예방 또는 치료용 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 신규한 털목이버섯 균주; 그의 추출물 또는 분획물을 포함하는 비만 치료 또는 예방용 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 신규한 털목이버섯 균주를 포함하는 조성물은 지방전구세포의 지방세포로의 분화를 억제하며, 고지방 식이로 인한 체중 증가, 내장지방 축적, 혈당량, LDL 콜레스테롤 및 중성지방 축적을 억제하는 항비만 활성이 우수한 것인바, 비만 예방 및 치료에 유용하게 사용될 수 있다.

Description

신규한 털목이버섯 균주를 포함하는 비만 예방 또는 치료용 조성물{A composition for prevention and treatment of obesity comprising a novel strain of Auricularia polytricha}
본 발명은 신규한 털목이버섯 균주; 그의 추출물 또는 분획물을 포함하는 비만 치료 또는 예방용 조성물에 관한 것이다.
비만 (Obesity)은 일반적으로 여성에서는 35% 이상, 남성은 25% 이상의 체지방 함량을 비만이라고 하며, 유전적인 요인과 환경적 요인에 의해 유발되는 복합적이고 만성적인 상태로 최근에 들어 비만은 전 세계적으로 약 10억명이 과체중이고 3억명 이상이 비만으로 분류되어 있다.
실제로 미국의 경우 지난 20여년간 성인의 경우 2배 증가하여 2008년에 성인의 약 27%가 비만이고 60% 정도가 과체중으로 판단되었고, 어린이와 청소년의 경우는 더욱 심각하여 지난 30년간 3배 정도가 증가되어 심각한 사회문제로 대두되고 있으며, 국내의 경우에도 2015년 보건복지통계연보 발표와 같이 2013년 기준 비만율은 남성 37.6%, 여성 25.1%로 성인 3명 중 1명 수준으로 비만으로 나타나있다. 이와 같이, 비만은 현대사회에서 "대유행(epidemic)"이라 지칭될 정도로 심각하며 이의 증가 추세는 계속될 것으로 전망되고 있다.
비만은 단순한 체중 증가 외에 당뇨병 및 고지혈증, 심혈관계 질환, 그리고 일부의 암 등 각종 대사증후군의 증가를 수반하여 비만의 연구와 예방 및 치료제 개발은 더욱 큰 관심사로 여겨지고 있다. 지난 수십년 동안 서구화적인 식생활 습관의 변화는 비만의 증가의 요인으로 간주되고 있으나 식생활 습관 개선은 어렵기에 대사를 증가시켜 열량을 소모하려는 기능성 식품에 대한 수요가 증가되고 있으며, 이를 위한 천연유래 소재의 개발이 절실한 실정이다.
한편, 목이버섯류(Auricularia auricula)는 목이과 (Auriculariaceae), 목이속 (Auricularia)에 속하며, 목이속에는 (흑) 목이버섯 (Auricularia auricula-judae), 목이버섯과 같은 학명이면서 야생 종인 갈색목이버섯, 그리고 종이 다른 털목이버섯 (Auricularia polytricha) 등이 포함되어 있다(Park and Lee, 1999). 이러한 목이버섯의 디클로로메탄(dichloromethane) 추출물은 RAW 264.7 세포주의 inflammatory cytokines (IL-6, TNF-α, IL-1β)을 감소시켜 항염효과를 나타내고(Damte A et al, 2011, Official Journal of Korean Society of Toxicology, Vol.27; pp.11-14), 백혈병과 복수 암 세포주에 대한 항암 효과를 나타낸다는 것이 보고된 바 있으나(Reza A et al, 2011, Official Journal of Korean Society of Toxicology, Vol.27; pp.77-83), 아직 그 밖의 생리활성에 대한 연구는 미비한 실정이다.
이러한 배경 하에, 본 발명자들은 신규한 털목이버섯을 발굴하여 '새얀' 이라고 명명하였으며, 이의 생리활성을 연구한 결과, 본 발명의 신규한 털목이버섯 추출물이 지방전구세포의 지방세포로의 분화를 억제하며, 고지방 식이로 인한 체중 증가, 내장지방 축적, 혈당량, LDL 콜레스테롤 및 중성지방 축적을 억제하는 항비만 활성이 우수하다는 것을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 털목이버섯 새얀(Auricularia polytricha Saeyan) 균주; 그의 추출물 또는 분획물을 포함하는, 비만 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 털목이버섯 새얀(Auricularia polytricha Saeyan) 균주; 그의 추출물 또는 분획물을 포함하는, 비만 예방 또는 치료용 건강기능식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 털목이버섯 새얀(Auricularia polytricha Saeyan) 균주; 그의 추출물 또는 분획물을 포함하는, 비만 예방 또는 치료용 사료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 털목이버섯 새얀(Auricularia polytricha Saeyan) 균주; 그의 추출물 또는 분획물을 포함하는 조성물을 인간을 제외한 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 비만 예방 또는 치료방법을 제공하는 것이다.
이를 구체적으로 설명하면 다음과 같다. 한편, 본 발명에서 개시된 각각의 설명 및 실시형태는 각각의 다른 설명 및 실시 형태에도 적용될 수 있다. 즉, 본 발명에서 개시된 다양한 요소들의 모든 조합이 본 발명의 범주에 속한다. 또한, 하기 기술된 구체적인 서술에 의하여 본 발명의 범주가 제한된다고 볼 수 없다.
또한, 당해 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 통상의 실험만을 사용하여 본 발명에 기재된 본 발명의 특정 양태에 대한 다수의 등가물을 인지하거나 확인할 수 있다. 또한, 이러한 등가물은 본 발명에 포함되는 것으로 의도된다.
본 발명의 하나의 양태는 털목이버섯 새얀(Auricularia polytricha Saeyan) 균주; 그의 추출물 또는 분획물을 포함하는, 비만 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 털목이버섯 새얀(Auricularia polytricha Saeyan) 균주는 본 발명자들이 최초로 분리 동정한 균주로, 상기 선별한 신규 균주가 털목이버섯에 속하는 것을 확인하여 털목이버섯 새얀(Auricularia polytricha Saeyan)이라 명명하였고 2018년 11월 16일자로 농촌진흥청 국립농업과학원 미생물은행(KACC: Korean Agricultural Culture Collection)에 기탁하여 수탁번호 KACC93319P를 부여받았다.
상기 털목이버섯 새얀은 항비만 활성을 갖는 형태라면 본 발명의 조성물에 포함될 수 있으며, 구체적으로 털목이버섯 새얀의 자실체를 건조한 후 통상적인 분쇄방법으로 분쇄하여 제조된 분말 형태이거나, 털목이버섯 새얀의 추출물 또는 그의 분획물일 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 용어 "추출물"은 목적하는 물질을 다양한 용매에 침지한 다음, 상온 또는 가온상태에서 일정시간 동안 추출하여 수득한 액상성분, 상기 액상성분으로부터 용매를 제거하여 수득한 고형분 등의 결과물을 의미한다. 구체적으로, 상기 추출물은 털목이버섯 새얀 균주를 추출 처리하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물 및 이의 분말화된 형태, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다.
상기 털목이버섯을 추출하는 방법은 특별히 제한되지 않으며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다. 상기 추출 방법의 비제한적인 예로는, 용매 추출법, 초음파 추출법, 여과법, 환류 추출법 등을 들 수 있으며, 이들은 단독으로 수행되거나 2종 이상의 방법을 병용하여 수행될 수 있다.
본 발명에서 상기 털목이버섯 추출에 사용되는 추출용매의 종류는 특별히 제한되지 않으며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 상기 추출용매는 추출물은 물, C1 내지 C10의 알코올, 헥산(Hexane) 및 이들의 혼합 용매일 수 있으며, 구체적으로는 C1 내지 C4의 알코올로 추출한 추출물일 수 있고, 보다 구체적으로는 에탄올로 추출한 추출물일 수 있으나 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 용어 "분획물"은 다양한 구성성분을 포함하는 혼합물로부터 특정성분 또는 특정 그룹을 분리하는 분획방법에 의하여 얻어진 결과물을 의미한다.
본 발명에서 상기 분획물을 얻는 분획 방법은 특별히 제한되지 않으며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 수행될 수 있다. 상기 분획 방법의 비제한적인 예로는, 본 발명의 털목이버섯을 추출하여 얻은 추출물에 소정의 용매를 처리하여 상기 추출물로부터 분획물을 얻는 방법을 들 수 있다.
본 발명에서 상기 분획물을 얻는 데 사용되는 분획 용매의 종류는 특별히 제한되지 않으며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 상기 분획 용매의 비제한적인 예로는 물, 알코올 등의 극성 용매; 헥산(Hexane), 에틸 아세테이트(Ethyl acetate), 클로로포름(Chloroform), 디클로로메탄(Dichloromethane) 등의 비극성 용매 등을 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 1종 이상 혼합하여 사용될 수 있다. 상기 분획 용매 중 알코올을 사용하는 경우에는 구체적으로 탄소수 1 내지 4의 알코올을 사용할 수 있다.
본 발명의 용어 "비만"은 일반적으로 체내에 지방조직이 과다한 상태이거나 또는 신체비만지수(체질량지수, Body mass index: 체중(kg)을 신장(m)의 제곱으로 나눈 값)가 25 이상인 경우를 의미한다. 남자는 체지방이 체중의 25％ 이상일 때, 여자는 체중의 30％ 이상일 때 비만이라고 하며, 음식으로 섭취하는 열량이 몸을 움직이며 소비하는 열량보다 많을 때 비만이 생긴다. 비만이 생기면 외형적으로 뚱뚱해 보이며, 숨이 쉽게 차고, 관절 통증, 당뇨병, 고혈압 등의 증상이 동반되기도 한다.
본 발명의 용어 "예방"은 본 발명에 따른 조성물의 투여로 상기 비만 또는 비만 관련 질환의 발병을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미하고, 용어 "치료"는 본 발명에 따른 조성물의 투여로 상기 비만 또는 비만 관련 질환의 증세가 호전되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미한다.
상기 비만 예방 또는 치료는 지방전구세포의 지방세포로의 분화억제에 의해 달성되는 것일 수 있다.
본 발명의 용어 "지방세포로의 분화" 는 지방전구세포가 지방세포로 전환되는 것을 의미하고, 본 발명의 목적상, 지방세포가 세포 내에 지방을 축적하는 것을 의미하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 지방세포로의 분화는 지방전구세포(preadipocyte)가 증식 및 분화되는 과정을 거쳐 성숙한 지방세포(adipocyte)로 되는 과정인 지방세포형성(adipogenesis)에 관여하는 일련의 유전자 발현을 조절하는 전사인자의 발현을 억제함으로써 달성되는 것일 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 일 구현예에서는, 털목이버섯 새얀의 분말화된 자실체 시료 100 g을 50% 에탄올용액 2L에 혼합하여 40℃에서 12시간 교반 추출 추출한 다음, 여과하고 회전진공농축기로 감압 농축하여, 털목이버섯 새얀의 에탄올추출물을 수득하였으며, 수득한 추출물을 지방전구세포 3T3-L1에 처리하여 지방 생성 과정에 관여하는 주요 핵심 조절자인 C/EBPα, PPARγ, CD36 및 FABP4의 유전자 및 단백질 발현을 현저히 저해하는 것을 확인하였는 바, 본 발명의 털목이버섯 새얀 추출물은 비만 예방 및 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은, 약학 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있다. 구체적으로, 상기 약학 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
본 발명에서, 상기 약학 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화 할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출물과 이의 분획물들에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘 카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는 데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물에 포함된 상기 털목이버섯 새얀(Auricularia polytricha Saeyan) 균주; 그의 추출물 또는 분획물의 함량은 약학 조성물이 비만 예방 또는 치료 효과를 가지는 한 제한되지 않으나, 최종 조성물 총 중량을 기준으로 0.0001 내지 99.9 중량%, 보다 구체적으로는 0.01 내지 80 중량%의 함량으로 포함될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 약제학적으로 유효한 양으로 투여될 수 있는데, 본 발명의 용어 "약제학적으로 유효한 양"이란 의학적 치료 또는 예방에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료 또는 예방하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 질환의 중증도, 약물의 활성, 환자의 연령, 체중, 건강, 성별, 환자의 약물에 대한 민감도, 사용된 본 발명 조성물의 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율 치료기간, 사용된 본 발명의 조성물과 배합 또는 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 약학 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적으로 또는 동시에 투여될 수 있다. 그리고 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하다.
본 발명의 약학 조성물의 투여량은 예를 들어, 본 발명의 약학 조성물을 사람을 포함하는 동물에 하루 동안 0.1 내지 500 mg/체중 kg으로 투여할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 본 발명의 조성물의 투여 빈도는 특별히 이에 제한되지 않으나, 1일 1회 투여하거나 또는 용량을 분할하여 수회 투여할 수 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 다른 하나의 양태는 털목이버섯 새얀(Auricularia polytricha Saeyan) 균주; 그의 추출물 또는 분획물을 포함하는, 비만 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 용어 "식품"은 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올음료, 비타민 복합제, 건강 기능 식품 및 건강 식품 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 식품을 모두 포함한다.
본 발명의 식품 조성물은 일상적으로 섭취하는 것이 가능하기 때문에 비만의 예방 또는 개선 효과를 기대할 수 있어 매우 유용하다.
본 발명의 용어 "개선"은 본 발명의 털목이버섯 새얀 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 조성물의 투여로 치료되는 상태와 관련된 파라미터, 예를 들면 증상의 정도를 적어도 감소시키는 모든 행위를 의미한다.
본 발명의 식품 조성물은 환제, 분말, 과립, 침제, 정제, 캡슐 또는 액제 등의 형태를 포함하며, 본 발명의 조성물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 예를 들어, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강보조 식품류 등이 있다.
본 발명의 식품 조성물에서 포함할 수 있는 필수 성분으로 상기 털목이버섯 새얀 추출물 또는 이의 분획물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별히 제한이 없으며 통상의 식품과 같이 여러 가지 생약추출물, 식품 보조 첨가제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 또한, 상기 식품 보조 첨가제는 당업계에 통상적인 식품 보조 첨가제, 예를 들어 향미제, 풍미제, 착색제, 충진제, 안정화제 등을 포함한다.
상기 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외에 향미제로서 천연 향미제(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다.
상기 외에 본 발명의 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 충진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 이의 염, 알긴산 및 이의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 천연 과일쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다.
본 발명에서 상기 건강보조식품은 건강기능식품 및 건강식품 등을 포함한다.
상기 건강 기능(성) 식품(functional food)이란, 특정보건용 식품(food for special health use, FoSHU)과 동일한 용어로, 영양 공급 외에도 생체조절기능이 효율적으로 나타나도록 가공된 의학, 의료효과가 높은 식품을 의미한다. 여기서 "기능(성)"이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다. 본 발명의 식품은 당 업계에서 통상적으로 사용되는 방법에 의하여 제조가능하며, 상기 제조시에는 당 업계에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한 상기 식품의 제형 또한 식품으로 인정되는 제형이면 제한 없이 제조될 수 있다. 본 발명의 식품 조성물은 다양한 형태의 제형으로 제조될 수 있으며, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어나, 본 발명의 식품은 비만의 예방 또는 개선의 효과를 증진시키기 위한 보조제로 섭취가 가능하다.
본 발명의 털목이버섯 새얀 추출물을 포함하는 조성물은 비만의 예방 또는 개선 효과를 나타낼 수 있다면 다양한 중량%로 포함될 수 있으며, 구체적으로 본 발명의 추출물을 식품 조성물의 총 중량 대비 0.00001 내지 100 중량% 또는 0.01 내지 80 중량%로 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 다른 하나의 양태는 털목이버섯 새얀(Auricularia polytricha Saeyan) 균주; 그의 추출물 또는 분획물을 포함하는 또는 그의 분획물을 포함하는, 비만 예방 또는 개선용 사료 조성물을 제공한다.
털목이버섯 새얀 균주, 그의 추출물, 분획물, 비만, 예방 및 치료는 상기에서 설명한 것과 같다.
상기 사료용 조성물은 사료 첨가제를 포함할 수 있다. 본 발명의 사료첨가제는 사료관리법상의 보조사료에 해당한다.
본 발명에서 용어, "사료"는 동물이 먹고, 섭취하며, 소화시키기 위한 또는 이에 적당한 임의의 천연 또는 인공 규정식, 한끼식 등 또는 상기 한끼식의 성분을 의미한다.
상기 사료의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 사료를 사용할 수 있다. 상기 사료의 비제한적인 예로는, 곡물류, 근과류, 식품 가공 부산물류, 조류, 섬유질류, 제약 부산물류, 유지류, 전분류, 박 류 또는 곡물 부산물류 등과 같은 식물성 사료; 단백질류, 무기물류, 유지류, 광물성류, 유지류, 단세포 단백질류, 동물성 플랑크톤류 또는 음식물 등과 같은 동물성 사료를 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 2종 이상을 혼합하여 사용될 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서는 털목이버섯 새얀의 분말 또는 추출물을 고지방 식이에 첨가하여 마우스에 급여한 결과, 체중, 내장지방, 혈당량, LDL 콜레스테롤 및 중성지방 증가량이 대조군에 비해 감소하는 것을 확인하였는 바, 본 발명의 털목이버섯 새얀을 포함하는 조성물은 비만 예방 및 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
본 발명의 다른 하나의 양태는 털목이버섯 새얀(Auricularia polytricha Saeyan) 균주; 그의 추출물 또는 분획물을 포함하는 조성물을 인간을 제외한 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 비만 예방 또는 치료방법을 제공한다.
상기 비만, 예방 및 치료는 상기에서 설명한 바와 같다.
상술한 바와 같이, 본 발명의 털목이버섯 새얀 균주, 그의 추출물 또는 이의 분획물은 비만 예방 또는 치료효과를 가지는 바, 이를 포함하는 조성물을 비만을 예방 또는 치료하는 데 사용할 수 있다.
본 발명의 용어 "개체"란 비만 및 관련된 질병이 발병될 가능성이 있거나 또는 발병된 쥐, 가축, 인간 등의 모든 동물을 의미하며, 구체적으로는 인간을 제외한 것일 수 있다.
본 발명의 비만 예방 및 치료 방법에 있어서, 약학 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 어떠한 일반적인 경로를 통하여도 투여될 수 있다. 본 발명의 약학 조성물은 특별히 이에 제한되지 않으나, 목적하는 바에 따라 복강내 투여, 정맥내 투여, 근육내 투여, 피하 투여, 피내 투여, 경구 투여, 비내 투여, 폐내 투여, 직장내 투여 등의 경로를 통해 투여 될 수 있다.
본 발명의 털목이버섯 새얀(Auricularia polytricha Saeyan) 균주; 그의 추출물 또는 분획물을 포함하는 조성물은 지방전구세포의 지방세포로의 분화를 억제하며, 고지방 식이로 인한 체중 증가, 내장지방 축적, 혈당량, LDL 콜레스테롤 및 중성지방 축적을 억제하는 효과가 우수한 것으로, 비만 예방 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 in vitro에서 목이버섯 추출물의 지방세포 분화 억제 효과를 Oil Red O 염색으로 확인한 것으로, 도 1a는 11종의 목이버섯 추출물을 처리한 후 Oil Red O 염색 정도를 spectrophotometer를 사용하여 정량화한 것이고, 도 1b는 예비실험 결과 선별된 4종의 목이버섯 추출물을 처리한 Oil Red O 염색 및 이를 정량화한 것이다.
도 2는 in vitro에서 목이버섯 추출물을 처리한 지방세포에서의 PPARγ 및 FABP4 (aP2), CD36, C/EBPα의 RT-PCR 결과이다.
도 3은 in vitro에서 목이버섯 추출물을 처리한 지방세포에서의 PPARγ 및 FABP4(aP2), CD36, C/EBPα에 대한 웨스턴 블럿 결과이다.
도 4는 정상식이, 고지방식이, 고지방식이에 목이버섯 분말 또는 에탄올추출물을 첨가하여 급여한 마우스의 체중 변화를 나타낸 것이다.
도 5는 정상식이, 고지방식이, 고지방식이에 목이버섯 분말 또는 에탄올추출물을 첨가하여 급여한 마우스의 간, 신장, 비장, 고환, 부고환 등의 장기 무게를 측정한 것이다.
도 6은 정상식이, 고지방식이, 고지방식이에 목이버섯 분말 또는 에탄올추출물을 첨가하여 급여한 마우스의 혈청 글루코스 및 중성지방(TG), 총 콜레스테롤, HDL 및 LDL 콜레스테롤, Glutamic-oxaloacetic transaminase(GOT), Glutamic-pyruvic transaminase (GPT)를 측정한 것이다.
이하 본 발명을 실시예 및 실험예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나 이들 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예 및 실험예에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1: 지방세포 분화 억제 효과가 우수한 털목이버섯 균주 선별
실시예 1-1: 다양한 목이버섯의 에탄올 추출물 제조
털목이(Auricularia polytricha) 균주 91, 110, 189, 새얀, 21001, 21008, 그리고 흑목이(Auricularia auricula-judae) 균주 181, 194, 21002 등 11종의 버섯시료를 수세하고, 이를 50℃의 온도조건에서 열풍 건조하거나, 냉동동결건조한 후 분말화하였다.
상기 분말화된 목이버섯 자실체 시료 100 g을 50% 에탄올용액 2L에 혼합하여 40℃에서 12시간 교반 추출 추출한 다음, 여과하고 회전진공농축기로 감압 농축하여, 목이버섯 자실체 에탄올추출물을 수득하였다. 또한 수득한 목이버섯 추출물을 동결건조하여 분말 시료를 수득하였다.
실시예 1-2: 목이버섯의 지방세포 분화 억제 효과 확인
실시예 1-1에서 수득한 에탄올추출물을 지방전구세포 3T3-L1(American Type Culture Collection, Rockville. MD, USA)에 처리한 후, Oil Red O 염색, RT-PCR 및 웨스턴 블럿팅을 수행하여 분화 억제 효과를 확인하였다.
실시예 1-2-1: 지방세포 배양 및 분화 유도 방법
지방전구세포 3T3-L1의 유지는 Dulbecco's Modified Eagle's Medium(DMEM)과 10% fetal bovine serum(FBS)(Hyclone, Logan, UT, USA), 1% penicillin- streptomycin을 혼합하여 사용하였다. 세포 유지를 위해서 2일 간격으로 배지를 교체하고, 약 80% confluent 전에 계대배양을 실시하여 지방세포 분화 능력을 유지하였다.
지방세포 분화유도는 세포가 100% confluent해지고 24시간 경과 후 진행하였으며, 분화를 위한 adipogenic cocktail을 사용하였다. 구체적으로 DMEM에 10% FBS 와 DMI를 포함한 media를 사용하였고, DMI는 1μM Dexamethason (Sigma, St Louis, MO, USA), 0.5 mM isobutyl-1-Methylxanthine (IBMX)(Sigma-Aldrich, St Louis, MO, USA), 5 μg/mL 인슐린 (Sigma- Aldrich, St Louis, MO, USA)을 포함하였다.
상기 지방전구세포를 37℃, 5% CO2 인큐베이터에서 배양하여 지방세포가 confluent상태가 되면 지방세포분화를 유도하기 위해 adipogenic cocktail을 포함한 adipogenic media로 분화를 유도하고 2일 후에 DMEM, 10% FBS 와 인슐린을 포함한 배양액으로 교체하고, 이후에는 3일 간격으로 같은 배양액을 교체하였으며, 보통 지방세포 분화차이가 최대가 되는 4∼7일 동안 분화시켰다.
실시예 1-2-2: Oil Red O 염색
지방전구세포에 목이버섯 추출물을 처리하고, 분화된 세포의 지방구에 특이적으로 반응하는 Oil Red O(Sigma)를 사용하여 염색을 수행함으로써 배양한 지방세포의 분화정도를 시각화하였다.
구체적으로, 실시예 1-2-1의 방법을 통해 3T3-L1(지방전구세포)을 지방세포로 분화시키면서 각 목이버섯 자실체의 50% 에탄올추출물을 처리하였다. 대조군으로는 분화유도 시약만을 처리하였으며, 양성 대조군으로는 지방세포 분화억제 효과가 있다고 알려져 이미 많은 연구가 진행되어 있는 레스베라트롤(resveratrol) 20μM을 분화유도 시약과 함께 처리했다. 예비실험으로 본 발명에 사용된 목이버섯 추출액은 각각 50㎍/ml의 농도로 처리하였다.
분화가 완료된 세포들은 Phosphate buffer saline(PBS)로 1회 세척한 후, 4% 포름알데히드 용액으로 1시간동안 고정시키고 남아있는 고정액을 제거한 후 0.2% Oil Red O 용액에서 1시간동안 세포를 염색하고 염색시약의 여분을 제거하고 증류수로 세척을 반복하여 염색액이 plate에 남아있지 않도록 하고 건조시켰다. Oil Red O 염색 후에 spectrophotometer를 사용하여 정량하였다(도 1a).
예비실험 결과 털목이 중에서는 새얀과 21001 균주가, 흑목이 중에서는 194, 21002 균주가 가장 높은 억제 효과를 나타내는 것을 확인하였으며, 상기 4종류의 균주의 에탄올 추출물을 250㎍/ml씩 처리하여 동일한 방법으로 실험을 수행하였다.
그 결과, 4종의 목이버섯 추출물을 처리한 실험군에서 지방세포 분화가 덜 일어난 것을 육안으로 확인하였으며, 특히 털목이버섯 새얀을 처리한 실험군에서 가장 효과가 뛰어난 것을 확인하였다. 또한, 이를 정량화한 값 역시 동일한 결과를 나타냈다(도 1b).
실시예 1-2-3: RT-PCR을 이용한 지방세포 분화 마커 발현수준 측정
지방전구세포에 목이버섯 추출물을 처리하고, RT-PCR을 수행하여 지방세포 분화 마커의 발현 수준을 측정하였다.
구체적으로, 지방전구세포에 실시예 1-2-2에서 확인한 4종의 목이버섯인 털목이 새얀, 21001과 흑목이 194, 21002의 50% 에탄올 추출물을 처리하였으며 양성 대조군으로는 40μM의 레스베라트롤을 사용하였다. 그리고 나서 지방세포 분화 마커인 PPARγ 및 FABP4 (aP2), CD36, C/EBPα의 상대적 mRNA 발현량을 RT-PCR을 이용해 측정하였다.
구체적인 RT-PCR 수행 방법은 다음과 같다. TRIzol 시약(Invitrogen, Carlsbad, CA, USA)을 이용하여 3T3-L1세포로부터 총 RNA를 추출 및 분리한 후 0.5μg의 RNA와 300pmol의 random primer를 혼합한 다음 ultra-pure water로 10μl가 되도록 조정하고 65℃에서 5분간 반응시켰다. 여기에 5X primescript reverse transcriptase(Takara, 2680A, Japan)와 primescript reverse transcriptase buffer, 10mM dNTP, ultra-pure water를 넣어 20μl가 되도록 조정하였다. 30℃에서 10분, 4℃에서 30분, 70℃에서 15분 반응하여 complementary DNA(cDNA)를 합성하고, SYBR Premix Ex Taq(Takara, 2640A, Japan)과 primer, cDNA를 넣어 PCR 증폭회로를 40회 돌리고 발현량은 36B4에 의해 조정하였으며 모든 real-time PCR은 최소 2회 수행하였다. ΔCT값은 각 샘플의 CT값과 대조군(36B4)간의 차이에 대하여 계산하고 상대적인 발현수준은 2-ΔCT으로 계산하였다. RT-PCR에 사용한 프라이머의 염기서열은 표 1에 나타내었다.
Gene Primer Sequence 서열번호
PPARγ Forward 5’-CCATTCTGGCCCACCAAC-3’ 1
Reverse 5’-AATGCGAGTGGTCTTCCATCA-3’ 2
FABP4(aP2) Forward 5’-CGTCTCCAGTGAGAACTTCG-3’ 3
Reverse 5’-TCATGACACATTCCACCACC-3’ 4
CD36 Forward 5’-GGCCAAGCTATTGCGACAT-3’ 5
Reverse 5’-CAGATCCGAACACAGCGRTAGA-3’ 6
C/EBPα Forward 5’-AGAACAGCAACGAGTACCGG-3’ 7
Reverse 5’-TTGACCAAGGAGCTCTCAGG-3’ 8
실험 결과, 4종의 목이버섯 중 털목이버섯 새얀과 21001 균주는 지방세포 분화 마커 전부에 대해 생성을 억제하는 것을 확인하였으며, 특히 새얀의 억제효과가 우수한 것을 알 수 있었다(도 2).
실시예 1-2-4: 웨스턴 블럿팅을 이용한 지방세포 분화 단백질 발현수준 측정
실시예 1-2-2 및 실시예 1-2-3을 통해 선별한 새얀 및 21001 strain의 지방분화 단백질 발현 억제효과를 확인하기 위해 웨스턴 블럿팅을 수행하였다.
구체적으로, 지방분화를 마친 3T3-L1 세포가 들어있는 6 well plate에 1X PBS 용액 1ml 씩을 첨가하여 cell을 분리하고 micro tube에 회수한 후 8,000rpm로 4분간 원심분리하여 pellet을 제외한 상층액을 제거하였다. 여기에 RIPA- P.I 용액을 처리하고 vortexing과 icing을 3회 반복 시행하였다. 이것을 4℃ 13,000rpm에서 15분간 원심분리하여 단백질을 추출하고 추출된 단백질은 Bradford Protein Assay를 통해 정량하였으며, 10㎕를 10% SDS-PAGE에 내린 후 PVDF membrane에 ?グ若?. Tween 20이 첨가된 TBS에 1% skim milk를 녹여 30분 동안 상온에서 blocking하고, PPARγ 및 FABP4(aP2), CD36, C/EBPα에 대한 항체인 primary antibody를 4℃에서 overnight시켰다. 대조군으로는 β-actin에 대한 항체를 사용하였다. 마지막으로 secondary antibody를 상온에서 1시간 반응시켜 ECL detection system으로 밴드를 확인하였다.
실험 결과, 2종의 목이버섯 모두 20μM 레스베라트롤 처리 시와 거의 동일한 수준으로 지방분화 단백질의 발현을 억제하는 것을 확인하였으며, 특히 새얀의 효과가 뛰어난 것을 확인하였다(도 3).
이를 통해, 본 발명의 신규한 털목이버섯 균주 새얀이 지방세포 분화를 억제하는 효과가 우수하다는 것을 확인하였다.
실시예 2: 털목이버섯 '새얀'의 항비만 효과의 in vivo 실험
실시예 1에서 선별한 털목이버섯 '새얀'의 항비만 효과를 in vivo에서 확인하기 위한 동물실험을 수행하였다.
실시예 2-1: 동물실험에 사용된 식이 조성 및 사육방법
구체적으로 6주령의 일반 동물실험용 ICR mouse 56수를 (주)대한바이오링크 로부터 구입하여 일반식이로 1주일간 적응시킨 다음, 일반식이(Normal Diet; ND), 고지방식이(High-fat Diet; HFC), 털목이버섯 새얀 분말을 함유한 고지방식이(HFP), 털목이버섯 새얀의 50% 에탄올추출물을 함유한 고지방식이(HFE)군으로 나누어 급여하였다. 동물을 체중에 따라 난괴법에 의해 5군으로 구분하여 4주 동안 한 마리씩 cage내에서 사육하였으며, 각 군당 7마리씩 사육하였다. 구체적인 식이 조성은 하기 표 2와 같다.
재료 Dietary group
NC3)
(정상식이)		 HFC4)
(고지방식이)		 HFP 0.15)
(분말0.1%) 		HFP 0.56)
(분말0.5%)		 HFP 1.07)
(분말 1%)		 HFE 0.058)
(추출물 0.05%) 		HFE 0.19)
(추출물 0.1%)		 HFE 0.210)
(추출물 0.2%)
Corn Starch 36.8 16.8 16.8 16.8 16.8 16.8 16.8 16.8
Casein 20.0 20.0 20.0 20.0 20.0 20.0 20.0 20.0
Dextrinized cornstarch 13.2 3.2 3.2 3.2 3.2 3.2 3.2 3.2
Sucrose 10.0 10.0 10.0 10.0 10.0 10.0 10.0 10.0
Mineral mixture1) 3.5 3.5 3.5 3.5 3.5 3.5 3.5 3.5
Vitamin mixture2) 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0
L-Cystine 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3
Choline chloride 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25
TBHQ 0.0014 0.0014 0.0014 0.0014 0.0014 0.0014 0.0014 0.0014
Cellulose 5.0 5.0 4.9 4.5 4.0 4.95 4.9 4.8
Auricularia spp. powder 0.0 0.0 0.1 0.5 1.0 0.0 0.0 0.0
Auricularia spp. extract 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.05 0.1 0.2
Lard 10.00 40.0 40.0 40.0 40.0 40.0 40.0 40.0
일반식이 및 고지방식이, 물은 ad libitum으로 공급하며, 사육실의 온도는 22~25℃, 습도는 55±5%로 유지하고, 명암은 12시간 간격으로 점등 및 소등하였다.
실시예 2-2: 마우스 체중 측정
실시예 2-1과 같은 방법으로 마우스를 사육하면서 체중을 측정하였다. 체중은 주 3회 측정하고, 식이 섭취량은 매일 측정하였다.
그 결과, 마우스의 초기 체중은 31.34±0.41∼32.11±0.53g, 4주 사육 후에는 36.27±1.53∼40.60±2.03g으로 8개군 모두 체중이 증가한 것으로 나타났다. 1일 증체량을 살펴보면 일반식이를 급여한 NC군은 0.18±0.002g, 고지방식이를 공급한 HFC군은 0.31±0.06g, 목이버섯 분말 1.0%를 첨가하여 급여한 HFP1.0군은 0.27±0.05g, 목이버섯 추출물 0.2%를 첨가하여 급여한 HFE0.2군은 0.21±0.08g씩 증가하였다. 식이효율(사료 섭취량 대비 체중 증가량) 면에서는 NC군이 0.16± 0.01g으로 가장 낮게 나타났으며 HFE0.2, HFE0.1, HFE0.05 HFP1.0, HFP0.5, HFP0.1, HFC 순의 경향을 보였다. 목이버섯 분말 또는 추출물 섭취군들은 고지방식이 대조군인 HFC군과 거의 비슷한 양의 사료 섭취량을 나타냈지만, 체중증가량이 적어 비교적 낮은 식이효율을 나타냈다.
체중 측정 결과를 하기 표 3 및 도 4에 요약하였다.
분석 실험군1)
NC
(정상식이)		 HFC
(고지방식이)		 HFP 0.1
(분말0.1%) 		HFP 0.5
(분말0.5%)		 HFP 1.0
(분말 1%)		 HFE 0.05
(추출물 0.05%) 		HFE 0.1
(추출물 0.1%)		 HFE 0.2
(추출물 0.2%)
초기체중(g) 31.34±0.41 32.03±1.02 32.11±0.53 31.72±0.98 31.62±1.10 31.80±0.97 31.93±0.67 31.48±1.31
최종체중(g) 36.27±1.53 40.60±2.03 40.20±2.95 39.77±1.85 39.17±2.87 38.42±2.44 37.92±3.97 37.34±3.35
체중증가량
(g/day)		 0.18± 0.002 0.31± 0.06 0.29± 0.05 0.29± 0.04 0.27± 0.05 0.24± 0.05 0.22± 0.05 0.21± 0.08
식이효율
(g/day)		 0.16± 0.01 0.32± 0.01 0.29± 0.02 0.28± 0.02 0.27± 0.02 0.26± 0.02 0.24± 0.02 0.21± 0.02
실시예 2-3: 마우스 장기 무게 측정
실시예 2-1과 같은 방법으로 마우스를 사육하여 각 마우스를 희생시켜 장기 무게를 측정하였다.
구체적으로, 희생 전 16시간 절식시킨 생쥐를 ether로 마취시킨 후 개복하고. 혈액은 개복 직후, 하대정맥에서 채혈하며, 3,000rpm에서 15분간 원심 분리하여 혈청을 분리하고 즉시 분석에 사용하였다. 간, 신장, 비장, 고환, 부고환 등의 장기는 적출 후 0.9% 생리식염수에 세척하고 여과지로 수분을 완전히 제거한 후 무게를 측정하였다.
실험 결과, 비장 무게에 있어서는 유의적인 차이는 나타나지 않았지만, 간 및 신장, 고환, 부고환 지방조직의 무게에서 목이버섯 추출물 함유 사료 섭취군은 고지방사료군인 HFC군과 비교해 유의한 차이를 나타냈다. 특히 목이버섯 0.2% 추출물 섭취군의 평균 신장 무게와 부고환 지방조직 무게는 HFC군에 비해 각각 11%, 27% 낮은 수치를 나타냈다(도 5).
이는 체중 측정 결과와도 일치하는 것으로, 목이버섯 분말 또는 추출물 섭취 시, 내장 지방의 양이 줄어들어 체중도 감소되었다는 것을 유추할 수 있다.
실시예 2-4: 생화학적 지표 측정
혈청 glucose 및 중성지방(TG), 총 콜레스테롤, HDL 및 LDL 콜레스테롤, Glutamic-oxaloacetic transaminase(GOT), Glutamic-pyruvic transaminase (GPT) 등 비만과 관련된 7가지 지표를 측정하였다(도 6).
실험 결과, 혈당은 NC군이 153.56±4.33, HFC군이 190.19±2.88, HFP1.0군이 182.59±5.50, HFE0.2군이 166.42±5.31 mg/dl로 나타났으며, NC군 다음으로 낮은 혈당량을 보인 HFE0.2군은 HFC군의 수치에 비해 약 13% 낮은 수치를 나타냈다.
HFE0.2군은 혈당에서와 마찬가지로 모든 콜레스테롤 수치(총 콜레스테롤, HDL, LDL)와 중성지방 수치에서 HFC군에 비해 유의한 차이를 나타냈다. 총 콜레스테롤은 15.93%, LDL-콜레스테롤은 18.86%, 중성지방은 35.39%의 감소 효과를 보였으며. HDL-콜레스테롤 수치는 4.08% 증가했다.
그 밖에 간수치 지표 AST 및 ALT 에서도 털목이버섯 새얀 strain 50% 에탄올 추출물을 섭취한 3개군(HFE0.05, HFE0.1, HFE 0.2)에서 유의하게 감소하였다.
이를 통해, 털목이버섯 새얀의 추출물 또는 분말 형태 모두 비만을 억제하는 효과가 있음을 알 수 있다.
이상의 설명으로부터, 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.
농업생명공학연구원 KACC93319P 20181116
<110> Jeollanamdo Agricultural Research and Extension Service <120> A composition for prevention and treatment of obesity comprising a novel strain of Auricularia polytricha <130> KPA180248-KR <160> 8 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> PPARg_F <400> 1 ccattctggc ccaccaac 18 <210> 2 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> PPARg_R <400> 2 aatgcgagtg gtcttccatc a 21 <210> 3 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> FABP4_F <400> 3 cgtctccagt gagaacttcg 20 <210> 4 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> FABP4_R <400> 4 tcatgacaca ttccaccacc 20 <210> 5 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> CD36_F <400> 5 ggccaagcta ttgcgacat 19 <210> 6 <211> 22 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> CD36_R <400> 6 cagatccgaa cacagcgrta ga 22 <210> 7 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> CEBPa_F <400> 7 agaacagcaa cgagtaccgg 20 <210> 8 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> CEBPa_R <400> 8 ttgaccaagg agctctcagg 20

Claims (8)

  1. 수탁번호 KACC93319P로 기탁된 털목이버섯 새얀(Auricularia polytricha Saeyan) 균주; 그의 추출물 또는 분획물을 포함하는, 비만 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  2. 삭제
  3. 제1항에 있어서, 상기 추출물은 물, C1 내지 C10의 알코올, 헥산(Hexane) 및 그의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 용매에 의한 추출물인 것인, 약학적 조성물.
  4. 제3항에 있어서, 상기 용매는 에탄올인 것인, 약학적 조성물.
  5. 제1항에 있어서, 상기 비만 예방 또는 치료는 지방전구세포 분화 억제에 의해 달성되는 것인, 약학적 조성물.
  6. 수탁번호 KACC93319P로 기탁된 털목이버섯 새얀(Auricularia polytricha Saeyan) 균주; 그의 추출물 또는 분획물을 포함하는, 비만 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
  7. 수탁번호 KACC93319P로 기탁된 털목이버섯 새얀(Auricularia polytricha Saeyan) 균주; 그의 추출물 또는 분획물을 포함하는, 비만 예방 또는 개선용 사료 조성물.
  8. 수탁번호 KACC93319P로 기탁된 털목이버섯 새얀(Auricularia polytricha Saeyan) 균주; 그의 추출물 또는 분획물을 포함하는 조성물을 인간을 제외한 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 비만 예방 또는 치료방법.
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조세현. 목이버섯 품종간 영양성분 및 생리활성 비교 연구. 2011년, 성균관대학교 대학원 학위논문*

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