KR102136712B1 - 건강보조식품의 제조방법 - Google Patents

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Abstract

조성물 총 중량에 대하여, 토복령 5~20 중량%, 한련초 5~20 중량%, 오가피 5~20 중량%, 쑥 5~20 중량%, 초석잠 5~20 중량%, 대추 5~20 중량%, 천궁 5~20 중량%, 당귀 5~20 중량%, 작약 5~20 중량%, 마늘 5~20 중량%, 숙지황 5~20 중량%, 가자니아(gazania) 5~20 중량%, 및 해변씨레네(Silene villosa) 5~20 중량%를 포함하는 혼합물의 열수추출물을 포함하는 것을 특징으로 하는 면역력 강화를 위한 건강보조식품의 제조방법에 관한 것이다.

Description

건강보조식품의 제조방법{Manufacturing method of health supplement food}
본 발명은 건강보조식품의 제조방법에 관한 것이다.
혈전증(thrombosis)은 생체 내의 심혈관 및 혈관 내에서 혈액의 응고로 형성된 혈전(blood clot)이 혈관계 내를 흐르는 동안 생리적 손상을 받을 경우 혈액 성분의 하나인 혈소판이 침착하는 기전으로부터 발생한다. 생체 내에서 혈액은 응고와 용해작용이 항상 균형을 이루고 있으며 정상적으로 순환되는 동안에는 혈전이 형성되지 않는다.
그러나 여러 가지 병적인 요인으로 인해 균형이 깨지게 되면 혈액의 흐름이 원활하지 못하게 되고 이로 인한 심혈관계 질환이 발생하게 된다. 따라서 혈액의 기능적 이상 및 순화 이상 발생은 다양한 혈관계 질환을 유발하게 되며, 이러한 기능 및 순환 장애가 뇌 및 심장 등에서 나타나는 경우 생명에 치명적이 되며 그 후유증 또한 심각하다.
최근 우리나라에서도 경제수준의 향상으로 인하여 고영양, 고단백 등 식생활 양상의 변화에 따라 선진국과 같이 심혈관질환으로 사망하는 인구 수가 점차 증가하고 있다. 우리나라의 사망 및 사망원인에 대한 통계결과를 보면, 암, 심장질환, 뇌혈관질환 순으로 나타났다(통계청, 2012년 통계연보). 단일 질환별 사망률로 보면 심혈관질환은 암 다음으로 높은 주요 사망원인이다.
현재까지 혈전질환의 예방 및 치료에는 항혈소판제, 항응고제 및 이미 형성된 혈전을 용해하는 혈전용해제 등으로 나누어져 있다. 특히 항혈소판제의 대표적으로 사용되고 있는 아스피린의 효과는 탁월하지만 위장 장애 등으로 부작용을 일으키며, 그 외에 항응고제로 사용하고 있는 헤파린이나 쿠마린 등은 너무 고가의 약물이기 때문에 손쉽게 사용하기 어렵다.
따라서 약물의 부작용을 줄이면서도 동일한 효과를 보이는 천연물을 발굴하여 혈전 형성 억제 및 치료효과도 갖는 기능성 식품 소재 및 치료제를 개발하는 연구가 필요한 실정이다.
대한민국 공개특허 제10-2011-0042772호
본 발명자들은 상기와 같은 종래기술의 과제를 해결하기 위하여 예의 노력한 바, 인체에 안전하면서도 매우 우수한 혈전용해 및 혈소판 응집저해 활성 및 중풍 예방 효과를 제공할 수 있는 신규한 천연성분들, 특히 가자니아(gazania) 및 해변씨레네(Silene villosa)를 발견하여 본 발명을 완성하였다.
그러므로 본 발명은 인체에 안전한 천연성분을 주성분으로 포함하면서도 매우 우수한 혈전용해 및 혈소판 응집저해 활성 및 중풍 예방 효과를 제공하는 건강보조식품을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은, 상기 목적을 달성하기 위하여,
조성물 총 중량에 대하여, 토복령 5~20 중량%, 한련초 5~20 중량%, 오가피 5~20 중량%, 쑥 5~20 중량%, 초석잠 5~20 중량%, 대추 5~20 중량%, 천궁 5~20 중량%, 당귀 5~20 중량%, 작약 5~20 중량%, 마늘 5~20 중량%, 숙지황 5~20 중량%, 가자니아(gazania) 5~20 중량%, 및 해변씨레네(Silene villosa) 5~20 중량%를 포함하는 혼합물의 열수추출물을 포함하는 것을 특징으로 하는 건강보조식품을 제공한다.
상기 건강보조식품은 음료, 차, 비타민 복합제, 분말, 과립, 정제, 또는 캡슐 형태일 수 있다.
본 발명은 또한,
(a) 조성물 총 중량에 대하여, 토복령 5~20 중량%, 한련초 5~20 중량%, 오가피 5~20 중량%, 쑥 5~20 중량%, 초석잠 5~20 중량%, 대추 5~20 중량%, 천궁 5~20 중량%, 당귀 5~20 중량%, 작약 5~20 중량%, 마늘 5~20 중량%, 숙지황 5~20 중량%, 가자니아(gazania) 5~20 중량% 및 해변씨레네(Silene villosa) 5~20 중량%를 포함하는 혼합물을 제조하는 단계; 및
(b) 상기 혼합물을 5~30배의 물과 함께 추출 용기에 넣고, 80~130℃로 1~24 시간 동안 추출 및 농축하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 건강보조식품의 제조방법을 제공한다.
상기 (b)단계에서 추출온도는 100~110℃이고, 추출시간은 10~24시간인 것이 바람직할 수 있다.
본 발명의 혈액순환 개선 및 혈관 벽 강화용 건강보조식품은 중풍 예방 및 혈전용해 활성을 강화시키는 천연성분들, 특히 혈전용해 및 혈소판 응집저해 활성이 우수한 가자니아(gazania) 및 해변씨레네(Silene villosa)를 포함함으로써, 인체에 안전하며, 매우 우수한 혈전용해 및 혈소판 응집저해 활성 및 중풍 예방 효과를 제공한다.
이하에서 본 발명을 바람직한 실시예를 참고하여 설명한다.
본 발명은, 조성물 총 중량에 대하여, 토복령 5~20 중량%, 한련초 5~20 중량%, 오가피 5~20 중량%, 쑥 5~20 중량%, 초석잠 5~20 중량%, 대추 5~20 중량%, 천궁 5~20 중량%, 당귀 5~20 중량%, 작약 5~20 중량%, 마늘 5~20 중량%, 숙지황 5~20 중량%, 가자니아(gazania) 5~20 중량%, 및 해변씨레네(Silene villosa) 5~20 중량%를 포함하는 혼합물의 열수추출물을 포함하는 것을 특징으로 하는 건강보조식품의 제조방법에 관한 것이다.
본 발명의 건강보조식품에서 상기 토복령은 루틴성분이 다량으로 함유되어 있어 혈관의 벽을 튼튼하게 해주며, 혈압을 낮춰줘 고혈압을 예방해주며 혈관비누로 유명한 사포닌성분이 함유되어 중금속을 배출하는 효능을 제공한다.
상기 오가피는 간과 신장의 기운을 보하여 힘줄과 뼈를 튼튼하게 하므로 사지마비, 구련, 허리와 무릎의 연약증상, 하지무력감, 골절상, 타박상, 부종, 혈액순환에 좋으며 기운을 회복하는데 도움을 주며, 해독 작용과 항암효과가 탁월한 아칸토산이 함유되어 있어 고혈압, 당뇨, 관절염에 효능이 있으며, 면역체계를 증강시켜주어 잔병치레를 예방한다.
상기 오가피에 포함된 아칸토사이드B,D, 치사노사이드 성분은 우리의 뼈를 튼튼하게 해주고 근육을 강화해주며, 아칸토산 성분은 탁월한 항암 효과를 제공하며, 엘레우테로사이드라는 성분은 간수치를 낮춰주어 간 건강을 개선한다. 치사노사이드라는 성분은 간경화 억제한다.
오가피 열매 속 세사민 성분은 기침을 멎을 수 있게 해주며, 진정작용으로 인해 심신을 안정시켜주고 우리 몸속의 혈관 속에 콜레스테롤이 축적되는 것을 방지하며 혈압강하작용으로 혈관 질환의 개선에 도움을 준다. 오가피속의 치사노사이드 성분은 간경화를 억제하고 튼튼하게 해주는 작용을 한다.
상기 오가피는 100g기준으로 니아산(1.60mg), 나트륨(85.00mg), 단백질(5.10g), 당질(13.20g), 베타카로틴(2.588.00㎍), 비타민A(431.00㎍RE,), 비타민B1(0.10mg), 비타민B2(0.49mg), 비타민B6(0.39mg), 비타민C(79.00mg), 식이섬유(2.40g), 아연(1.20mg), 엽산(1.20㎍), 인(88.00mg), 지질(0.10g), 철분(0.90mg), 칼륨(647.00mg), 칼슘(229.00mg), 회분(1.70g)을 포함한다.
상기 한련초는 지혈작용을 비롯하여 보음, 보신 등의 효능을 가지고 있으며 근육과 뼈를 튼튼하게 하기 때문에 혈전 관련 질환의 치료에 도움을 준다.
상기 초석잠에 포함된 콜린성분은 천연 두뇌기능 활성화 작용을 하며, 마늘속에 들어있는 알리신과 비타민B1은 피의흐름을 활성화시켜 주며 아연이 들어있어 면역력을 강화하며, 마늘 등을 먹으면 우리 몸에 황화수소라는 물질이 생기는데 이것이 혈관을 확장시키는 기능을 향상시킨다
또한, 초석잠은 콜린이라는 성분을 풍부하게 포함하는데, 상기 콜린은 혈액과 뇌장벽을 뚫고 들어갈 수 있는 희귀물로 뇌세포에 직접 작용해 기억력을 돕는 생화학물질을 만들어 기억력증진과 노인성치매 예방에 탁월한 효과를 제공한다.
또한, 초석잠은 어혈, 적혈을 풀며 기를 내리게 하고, 파혈작용이 우수하여 혈액 순환이 안되어 뭉쳐있는 것을 뚫어 순환이 되게 하므로 혈전 관련 질환의 치료에 도움을 준다.
상기 쑥은 무기질과 비타민을 고함량으로 포함하는 특징을 갖는다. 특히 비타민 A가 많아 약 80 g만 먹어도 하루에 필요한 양을 공급할 수 있고, 또한 쑥은 몸을 따뜻하게 해주는데 효과적이어서 특히 부인병에 좋은 것으로 알려져 있으며 추위를 잘 타는 사람에게 좋고 몸이 차서 일어나는 복통과 설사에 효과적이다.
또한, 기혈과 경맥을 따뜻하게 해주기 때문에 자궁과 하복부가 차서 일어나는 자궁출혈 및 임신중 출혈, 토혈, 코피, 각혈 등에 사용하면 지혈작용을 하므로 혈전 관련 질환의 치료에 도움을 줄 수 있다.
쑥은 100g 기준 니아산(2.20mg), 나트륨(10.00mg), 단백질(5.00g), 당질(0.50g), 베타카로틴(2.246.00㎍), 비타민A(374.00㎍RE,), 비타민B1(0.09mg), 비타민B2(0.17mg), 비타민B6(0.24mg), 비타민C(22.00mg), 식이섬유(8.50g), 아연(0.44mg), 엽산(145.80㎍), 인(96.00mg), 지질(0.50g), 철분(6.00mg), 칼륨(765.00mg), 칼슘(119.00mg), 회분(2.20g), 비타민E(1.60mg)을 포함한다.
상기 마늘에 포함된 아조엔은 혈전방지 효능을 지닌 마늘의 알리신이 분해되면서 생기는 불포화 이화황 화합물로 체내의 노폐물과 독소를 배출하고, 특히 유화알릴 성분도 있어 살균과 보온 효과가 좋아 환절기 감기 예방에 도움을 주므로 혈전 관련 질환의 치료에 도움을 준다.
상기 가자니아(gazania)는 과명이 Asteraceae이고, 원산지가 Southern Africa인 초롱꽃목 국화과의 한해살이풀이다. 키는 15∼20㎝. 잎은 혁질(革質)이고 주걱 모양이며 뒷면에는 흰털이 빽빽이 나 있다. 꽃은 초여름과 늦가을 줄기 끝에 두상화(頭狀花)로 핀다. 두상화의 중심부는 통상화(筒狀花), 주변부는 설상화(舌狀花)이며, 설상화의 밑부분에는 아름다운 무늬가 있다. 꽃의 빛깔은 황·백·적색 등으로 잘 변화하며 낮 동안에는 피고 저녁에는 오므라든다. 습기가 많은 더위와 추위에는 약하다. 본 발명자들은 상기 가자니아가 우수한 혈전용해 및 혈소판 응집저해 활성을 갖는 것을 확인하여 본 발명을 완성하였다. 본 발명에서 가자니아의 꽃, 줄기, 잎이 모두 사용될 수 있다.
상기 해변씨레네(Silene villosa)는 사막 식물로서 지중해 연변 모래사장에서 자라는 것으로 알려져 있다. 본 발명자들은 상기 해변씨레네가 우수한 혈전용해 및 혈소판 응집저해 활성을 갖는 것을 확인하여 본 발명을 완성하였다. 본 발명에서 해변씨레네의 꽃, 줄기, 잎이 모두 사용될 수 있다.
본 발명의 혈액순환 개선 및 혈관 벽 강화용 건강보조식품은 음료, 차, 비타민 복합제, 분말, 과립, 정제, 또는 캡슐 등의 형태로 제조될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 혈액순환 개선 및 혈관 벽 강화용 건강보조식품은 천연성분으로 제조되므로 인체에 안전하다. 이러한 안전성은 많은 피험자들이 1년 이상 본 발명의 조성물을 복용하면서도 일체의 부작용이 보고되지 않은 것으로부터 확인된 바 있다. 본 발명의 중풍 예방 및 혈전용해용 건강보조식품은 실시예 1에서 제조된 천연성분의 열수추출액을 기준으로 1일 5~50 ml로 복용할 수 있다.
또한, 본 발명은
(a) 조성물 총 중량에 대하여, 토복령 5~20 중량%, 한련초 5~20 중량%, 오가피 5~20 중량%, 쑥 5~20 중량%, 초석잠 5~20 중량%, 대추 5~20 중량%, 천궁 5~20 중량%, 당귀 5~20 중량%, 작약 5~20 중량%, 마늘 5~20 중량%, 숙지황 5~20 중량%, 가자니아(gazania) 5~20 중량% 및 해변씨레네(Silene villosa) 5~20 중량%를 포함하는 혼합물을 제조하는 단계; 및
(b) 상기 혼합물을 5~30배의 물과 함께 추출 용기에 넣고, 80~130℃로 1~24 시간 동안 추출 및 농축하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 중풍 예방 및 혈전용해용 건강보조식품의 제조방법에 관한 것이다.
상기 (a)단계는 각 약초성분을 깨끗하게 씻어 적당히 세절하는 것을 포함한다.
상기 (b)단계는 상기 세절된 약초성분을 물과 함께 추출기에 추출하는 공정이다. 상기 (b)단계에서 추출온도는 100~110℃ 더욱 바람직하게는 끓는 온도로 하고, 추출시간은 10~24시간 동안 실시하는 것이 바람직할 수 있다.
이하에서, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명한다. 그러나, 하기의 실시예는 본 발명을 더욱 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 하기의 실시예에 의하여 한정되는 것은 아니다. 하기의 실시예는 본 발명의 범위 내에서 당업자에 의해 적절히 수정, 변경될 수 있다.
실시예 1: 중풍 및 혈전용해용 추출액의 제조
조성물 총 중량에 대하여, 건조상태의 토복령 80 g, 한련초 80 g, 오가피 80 g, 쑥 80 g, 초석잠 80 g, 대추 80 g, 천궁 80 g, 당귀 80 g, 작약 80 g, 마늘 80 g, 숙지황 80 g, 가자니아(gazania) 150 g, 및 해변씨레네(Silene villosa) 150 g을 혼합하여 열수추출용 혼합물을 제조하였다.
상기 혼합물 1,180 g과 11.8 kg의 물을 추출기에 넣고 20시간 동안 끓는 온도로 가열하고, 여과하여 추출액을 제조하였다.
비교예 1: 중풍 및 혈전용해용 추출액의 제조
조성물 총 중량에 대하여, 건조상태의 토복령 80 g, 한련초 80 g, 오가피 80 g, 쑥 80 g, 초석잠 80 g, 대추 80 g, 천궁 80 g, 당귀 80 g, 작약 80 g, 마늘 80 g, 및 숙지황 80 g을 혼합하여 열수추출용 혼합물을 제조하였다.
상기 혼합물 880 g과 8.8 kg의 물을 추출기에 넣고 20시간 동안 끓는 온도로 가열하고, 여과하여 추출액을 제조하였다.
시험예 1: 토끼 고지혈증 모델을 이용한 혈액순환 개선 효능시험
실험군 토끼에게 고지혈증 유발물질인 1%의 식이 콜레스테롤을 섞은 고콜레스테롤 식이를 사료에 섞어 공급하는 8주간 상기 실시예 1 및 비교예 1에서 제조된 중풍 및 혈전용해용 추출액 각 5 ml 를 1일 1회 함께 섭취시켰다. 대조군 토끼에게는 고지혈증 유발물질인 1%의 식이 콜레스테롤을 섞은 고콜레스테롤 식이를 사료에 섞어 8주간 섭취시켰다. 각 시험군의 토끼는 실험군, 대조 고콜레스테롤 식이 대조군, 단순 증류수 투여군으로 각각 6마리씩 사용하였다.
혈중에서의 지질은 시험개시 후 4주와 6주 그리고 8주로 나누어 채혈하여 혈중 총 콜레스테롤, 고밀도 콜레스테롤(HDL), 저밀도 콜레스테롤(LDL)의 수치를 측정하였다.
총 콜레스테롤 고밀도 콜레스테롤(HDL) 저밀도 콜레스테롤(LDL)
멸균증류수 투입군 4주 20.50 7.11 10.12
6주 39.80 15.23 23.65
8주 57.04 27.26 39.11
고콜레스테롤 식이군 4주 1573.21 549.55 55.32
6주 1652.33 638.11 76.45
8주 1697.31 768.36 95.87
실시예 1 추출물 투여 실험군 4주 1062.52 376.74 33.45
6주 1173.20 542.97 57.19
8주 496.67 581.62 75.66
비교예 1 추출물 투여 실험군 4주 1365.22 463.85 45.33
6주 1577.87 655.31 68.71
8주 723.61 746.39 84.96
상기 표 1에 나타낸 바와 같이, 채혈에 의한 혈중 지질 측정결과 멸균증류수 투입 토끼에 비해 고콜레스테롤 식이군의 총 콜레스테롤과 고밀도 콜레스테롤(HDL), 저밀도 콜레스테롤(LDL)이 크게 증가했으며 상대적으로 비교예 1 및 실시예 1의 중풍 및 혈전용해용 추출액을 함께 투여한 실험군의 총 콜레스테롤과 고밀도 콜레스테롤(HDL) 및 저밀도 콜레스테롤(LDL)이 현저히 낮았다. 특히, 본 발명의 실시예 1의 중풍 및 혈전용해용 추출액을 투여한 실험군은 멸균증류수 투여군 및 대조군은 물론, 비교예 1의 중풍 및 혈전용해용 추출액을 투여한 실험군과 비교하는 경우에도 총 콜레스테롤, 고밀도 콜레스테롤(HDL), 및 저밀도 콜레스테롤(LDL)의 억제에 있어서 현저히 우수한 효과를 나타냈다.
시험예 2: 가자니아(gazania) 및 해변씨레네(Silene villosa) 추출물의 항혈전 활성 평가
가자니아 150 g과 물 1.5 kg을 추출기에 넣고, 끓는 온도로 20시간 가열하여 가자니아 활성성분을 추출한 후, 여과하여 가자니아 열수추출액을 제조하였다.
또한, 해변씨레네 150 g과 물 1.5 kg을 추출기에 넣고, 끓는 온도로 20시간 가열하여 해변씨레네 활성성분을 추출한 후, 여과하여 해변씨레네 열수추출액을 제조하였다.
상기 추출액의 항혈전 활성을 평가한 결과는 표 2에 나타내었다.
이때 추출액의 항혈전 활성 평가의 일환으로 혈액응고 저해활성을 평가하였으며, 평가방법은 기존에 보고된 방법에 준해 평가하였으며(Sohn et al., 2004. Kor. J. Pharmacogn 35. 52-61; Kwon et al., 2004. J.Life Science, 14. 509-513; 류 등 2010. J. Life Science, 20. 922-928), 트롬빈 타임, 프로트롬빈 타임과 에이피티 타임을 측정하였다. 혈장은 시판 control plasma (MD Pacific Technology Co., Ltd, Huayuan Industrial Area, China)를 사용하였으며 트롬빈 타임, 프로트롬빈 타임과 에이피티티 측정법은 다음과 같은 과정으로 수행되었다.
(1) 트롬빈 타임(Thrombin Time)
37℃에서 0.5U 트롬빈(Sigma Co., USA) 50μl와 20 mM CaCl2 50μl, 시료 추출액 10μl를 Amelung coagulometer KC-1A(Japan)의 튜브에 혼합하여 2분간 반응시킨 후, 혈장 100μl를 첨가한 후 혈장이 응고될 때까지의 시간을 측정하였다. 대조로는 아스피린(Sigma Co., USA)을 사용하였으며, 용매 대조군으로는 시료 대신 DMSO를 사용하였다. DMSO의 경우 32.1초의 응고시간을 나타내었다. 트롬빈 저해 효과는 3회 이상 반복한 실험의 평균치로 나타내었으며, 트롬빈 저해활성은 시료 첨가시의 응고시간을 용매 대조군의 응고시간으로 나눈 값으로 나타내었다.
(2) 프로트롬빈 타임(prothrombin time)
표준혈장(MD Pacific Co., China) 70μl와 시료액 10μl를 Amelung coagulometer KC-1A(Japan)의 튜브에 첨가하여 37℃에서 3분간 가온 후, 130μl의 PT reagent를 첨가하고 혈장이 응고될 때까지의 시간을 3회 반복한 실험의 평균치로 나타내었다. 대조로는 아스피린(Sigma Co., USA)을 사용하였으며, 용매 대조군으로는 시료 대신 DMSO를 사용하였다. DMSO의 경우 18.1초의 응고시간을 나타내었다. 프로트롬빈 저해활성은 시료 첨가시의 응고시간을 용매 대조군의 응고시간으로 나눈 값으로 나타내었다.
(3) aPTT (activated Partial Thromboplastin Time)
혈장 100μl와 다양한 농도의 시료 추출액 10μl를 Amelung coagulometer KC-1A(Japan)의 튜브에 첨가하여 37℃에서 3분간 가온한 후, 50μl의 aPTT reagent(Sigma, ALEXINTM)를 첨가하고 다시 37℃에서 3분간 배양하였다.
이후 50μl CaCl2(35mM)을 첨가한 후 혈장이 응고될 때까지의 시간을 측정하였다. 용매 대조군으로는 시료 대신 DMSO를 사용하였으며, 이 경우 55.1초의 응고시간을 나타내었다. aPTT의 결과는 3회 반복한 실험의 평균치로 나타내었으며, 혈액응고인자 저해활성은 시료 첨가시의 aPTT시간을 용매 대조군의 aPTT시간으로 나눈 값으로 나타내었다.
구분 혈액응고 저해활성*
실험농도
(mg/ml)
트롬빈 타임 프로트롬빈 타임 에이피티
타임
용매대조군
(DMSO)
- 1.00±0.05 1.00±0.02 1.00±0.03
아스피린 1.5 1.75±0.35 1.46±0.02 1.56±0.03
가자니아 열수추출물 5.0 1.58±0.03 1.38±0.15 1.49±0.06
해변씨레네 열수추출물 5.0 1.61±0.01 1.42±0.02 1.52±0.14
*혈액응고 저해활성: 시료 첨가구의 혈액응고시간 / DMSO 첨가구의 혈액응고 시간상기 표 2에 나타낸 바와 같이, 가자니아 및 해변씨레네 열수추출액은 항응고 활성을 나타내는 것으로 확인되었다. 활성은 아스피린보다 약간 약한 정도였으나, 천연물추출 성분인 점을 고려하면 매우 뛰어난 활성을 나타내는 것으로 확인되었다.
시험예 3: 가자니아(gazania) 및 해변씨레네(Silene villosa) 추출물의 혈소판 응집저해 활성 평가
혈소판은 인간 농축혈소판을 사용하였으며, 이를 washing buffer(138mM NaCl, 2.7mM KCl, 12mM NaHCO3, 0.36mM NaH2PO4, 5.5mM Glucose, 1mM EDTA, pH 6.5)로 1회 세척하였다. 이후, suspending buffer(138mM NaCl, 2.7mM KCl, 12mM NaHCO3, 0.36mM NaH2PO4, 5.5mM Glucose, 0.49mM MgCl2, 0.25% gelatin, pH 7.4)에 재 현탁한 후, 3,000rpm에서 10분간 원심분리한 후 다시 suspending buffer에 재 현탁하였으며, 이때 혈소판 수는 4 X 109/ml이 되도록 조정하였다. 이후 1ml 현탁액에 2.5μl collagen을 가해 5분간 반응시키고, whole-blood aggregometer(Chrono-log, USA)를 사용하여 37℃에서 혈소판 응집을 측정하였다.
시료 / 대조군
(mg/ml)
혈소판 응집곡선 혈소판 응집능(%)
강도
(Amplitude: ohm)
기울기
(slope)
연장시간
(Lag time: 초)
하강면전
(Area under)
용매대조군
(DMSO)
14 2 10 103.1 100
아스피린(0.25) 9 1 41 51.8 48.4
아스피린(0.50) 5 0 52 28.5 27.8
가자니아 열수추출물 11 1.2 37 55.8 53.2
해변씨레네 열수추출물 10 1.1 39 52.5 50.7
상기 표 3에 나타낸 바와 같이, 가자니아 및 해변씨레네 열수추출물은 혈소판 응집저해 활성을 나타내는 것으로 확인되었다. 활성은 아스피린보다 약간 약한 정도였으나, 천연물추출 성분인 점을 고려하면 매우 뛰어난 활성을 나타내는 것으로 확인되었다.

Claims (1)

  1. (a) 조성물 총 중량에 대하여, 토복령 5~20 중량%, 한련초 5~20 중량%, 오가피 5~20 중량%, 쑥 5~20 중량%, 초석잠 5~20 중량%, 대추 5~20 중량%, 천궁 5~20 중량%, 당귀 5~20 중량%, 작약 5~20 중량%, 마늘 5~20 중량%, 숙지황 5~20 중량%, 가자니아(gazania) 5~20 중량% 및 해변씨레네(Silene villosa) 5~20 중량%를 포함하는 혼합물을 제조하는 단계; 및
    (b) 상기 혼합물을 10배의 물과 함께 추출 용기에 넣고, 100~110℃로 20시간 동안 추출 및 농축하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 건강보조식품의 제조방법.
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