KR101937761B1 - 약용식물을 이용한 식물 혼합 농축액의 제조방법 - Google Patents

약용식물을 이용한 식물 혼합 농축액의 제조방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 (1) 치커리, 갈근, 대추, 천궁, 당귀, 작약, 상엽, 인진쑥, 영지, 황기, 창출, 오미자, 결명자, 우엉, 메밀 및 삼백초의 약용식물을 준비하는 단계; (2) 상기 (1)단계의 준비한 치커리, 갈근, 대추, 천궁 및 당귀를 혼합한 치커리 혼합물에 물을 첨가하여 추출한 후 여과하여 치커리 혼합 추출액을 제조하는 단계; (3) 상기 (1)단계의 준비한 작약, 상엽, 인진쑥, 영지, 황기, 창출 및 오미자를 혼합한 인진쑥 혼합물에 물을 첨가하여 추출한 후 여과하여 인진쑥 혼합 추출액을 제조하는 단계; (4) 상기 (1)단계의 준비한 결명자, 우엉, 메밀 및 삼백초를 혼합한 결명자 혼합물에 물을 첨가하여 추출한 후 여과하여 결명자 혼합 추출액을 제조하는 단계; 및 (5) 상기 (2)단계의 제조한 치커리 혼합 추출액, 상기 (3)단계의 제조한 인진쑥 혼합 추출액 및 상기 (4)단계의 제조한 결명자 혼합 추출액을 혼합한 후 농축하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 식물 혼합 농축액의 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 식물 혼합 농축액에 관한 것이다.

Description

약용식물을 이용한 식물 혼합 농축액의 제조방법{Method for producing plant mixed concentrate using medicinal plant}
본 발명은 치커리, 갈근, 대추, 천궁, 당귀, 작약, 상엽, 인진쑥, 영지, 황기, 창출, 오미자, 결명자, 우엉, 메밀 및 삼백초의 약용식물을 이용하여 제조하는 것을 특징으로 하는 식물 혼합 농축액의 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 식물 혼합 농축액에 관한 것이다.
20세기 후반에 이르러 현대의 약으로 치료가 어려운 만성 대사성 질환이 급증하고 있으며, 특히 체질성(constitutional) 질환이나, 심인성(psychosomatic) 질환의 급증 및 합성의약품의 심각한 부작용이 알려지면서 기존의 의약품을 대체할 새로운 수단이 요구되고 있다. 전통적인 항생물질에 의한 치료의 가장 유망한 대체 수단으로 인체가 갖는 고유의 방어기구인 면역계의 활성화를 유도하는 면역 조절제의 이용이 제안되고 있다.
면역계는 외부 위해 항원들의 침입이나 조직 손상을 야기하는 물질들이 신체에 침입하였을 때 이들로부터 신체를 보호하는 자기 방호 수단으로써 작용하고 림프구를 포함한 여러 가지 다양한 면역세포들에 의하여 다양한 면역반응들이 일어난다. 대식세포 활성화 지표 중의 하나인 NO는 사이토카인(cytokine)이나 미생물의 영향을 받아 대식세포에서 생성되는 반응질소 중간체로서 NOS(nitric oxide synthase)와 산소와 결합하여 L-아르기닌을 산화시켜 NO가 생성된다. 생성된 NO는 세포 내 감염을 일으키는 미생물과 암세포를 제어하는 것으로 보고되고 있고, NO가 필요 이상 생성되면 혈관확장, 염증반응에 의한 조직 손상, 돌연변이 등을 일으켜 생체 내 유해 작용을 나타내는 것으로도 알려져 있다. 따라서, NO는 이중적 특성을 나타내어, 약물 처리 시 세포독성을 유발하지 않는 농도에서 NO 생성을 촉진하면 면역기능을 증가시키는 것으로 판단할 수 있다.
우리나라는 사계절이 뚜렷하게 구분되어 있으며 토질 또한 세계 어느 나라보다 약리작용을 가능케 하는 성분이 많이 함유되어 있다. 따라서, 사계절이 뚜렷한 한국의 산과 들에서 자라난 산야초는 자생과정 중 더위, 추위, 온화함, 서늘함을 극복하면서 각종 미네랄, 게르마늄, 알카로이드, 다당체, 사포닌, 필수아미노산류, 단백질, 알기닌, 셀레늄, 마그네슘 등을 풍부하게 함유하고 있다. 이 중 사람에게 필요한 천연 다당체, 필수아미노산 등은 체내에서 합성이 불가능하기 때문에 체외로부터 섭취해야 하는 중요한 영양소이며 그 밖에 수많은 종류의 특수 천연 영양성분들이 다량 함축되어 있다. 그러나 대부분의 식물자원은 다량의 수분을 함유하고 있어 저장성이 취약하기 때문에 저장성과 기능성 향상을 위한 식품가공이 필요하다.
한국등록특허 제0514404호에는 식물 추출물 혼합 음료의 제조방법이 개시되어 있고, 한국등록특허 제1136085호에는 식물 발효 추출액의 제조방법이 개시되어 있으나, 본 발명의 약용식물을 이용한 식물 혼합 농축액의 제조방법과는 상이하다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명에서는 식물 소재를 최적화하여 선택하고, 식물 각각 고유한 유용 성분들이 추출 및 농축하는 과정에서 효율적으로 용출되어 선택된 재료들의 효능과 기능을 최대로 흡수할 수 있을 뿐만 아니라, 쓴맛이 적고 맛이 부드러워 소비자들의 기호도에 적합할 수 있는 식물 혼합 농축액의 제조방법을 제공하는 데 있다.
상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 (1) 치커리, 갈근, 대추, 천궁, 당귀, 작약, 상엽, 인진쑥, 영지, 황기, 창출, 오미자, 결명자, 우엉, 메밀 및 삼백초의 약용식물을 준비하는 단계; (2) 상기 (1)단계의 준비한 치커리, 갈근, 대추, 천궁 및 당귀를 혼합한 치커리 혼합물에 물을 첨가하여 추출한 후 여과하여 치커리 혼합 추출액을 제조하는 단계; (3) 상기 (1)단계의 준비한 작약, 상엽, 인진쑥, 영지, 황기, 창출 및 오미자를 혼합한 인진쑥 혼합물에 물을 첨가하여 추출한 후 여과하여 인진쑥 혼합 추출액을 제조하는 단계; (4) 상기 (1)단계의 준비한 결명자, 우엉, 메밀 및 삼백초를 혼합한 결명자 혼합물에 물을 첨가하여 추출한 후 여과하여 결명자 혼합 추출액을 제조하는 단계; 및 (5) 상기 (2)단계의 제조한 치커리 혼합 추출액, 상기 (3)단계의 제조한 인진쑥 혼합 추출액 및 상기 (4)단계의 제조한 결명자 혼합 추출액을 혼합한 후 농축하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 식물 혼합 농축액의 제조방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 방법으로 제조된 식물 혼합 농축액을 제공한다.
본 발명의 식물 혼합 농축액은 식물 각각 고유한 유용 성분들이 추출 및 농축하는 과정에서 효율적으로 용출되어 선택된 재료들의 효능과 기능을 최대로 흡수할 수 있을 뿐만 아니라, 쓴맛이 적고 맛이 부드러워 소비자들이 거리낌없이 섭취할 수 있는 건강식품으로서 이용될 수 있다. 또한, 약용식물들의 고유의 향과 맛이 조화롭게 어우러지고 장기간 복용하여도 부작용이 없을 뿐만 아니라 면역력 증강에 도움을 줄 수 있는 새로운 형태의 품질이 우수한 기능성 건강보조식품으로서 이용될 수 있다.
본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은
(1) 치커리, 갈근, 대추, 천궁, 당귀, 작약, 상엽, 인진쑥, 영지, 황기, 창출, 오미자, 결명자, 우엉, 메밀 및 삼백초의 약용식물을 준비하는 단계;
(2) 상기 (1)단계의 준비한 치커리, 갈근, 대추, 천궁 및 당귀를 혼합한 치커리 혼합물에 물을 첨가하여 추출한 후 여과하여 치커리 혼합 추출액을 제조하는 단계;
(3) 상기 (1)단계의 준비한 작약, 상엽, 인진쑥, 영지, 황기, 창출 및 오미자를 혼합한 인진쑥 혼합물에 물을 첨가하여 추출한 후 여과하여 인진쑥 혼합 추출액을 제조하는 단계;
(4) 상기 (1)단계의 준비한 결명자, 우엉, 메밀 및 삼백초를 혼합한 결명자 혼합물에 물을 첨가하여 추출한 후 여과하여 결명자 혼합 추출액을 제조하는 단계; 및
(5) 상기 (2)단계의 제조한 치커리 혼합 추출액, 상기 (3)단계의 제조한 인진쑥 혼합 추출액 및 상기 (4)단계의 제조한 결명자 혼합 추출액을 혼합한 후 농축하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 식물 혼합 농축액의 제조방법을 제공한다.
본 발명의 식물 혼합 농축액의 제조방법에서, 상기 (1)단계의 약용식물은 바람직하게는 약용식물 총 중량 기준으로, 치커리 14~16 중량%, 갈근 12~13 중량%, 대추 12~13 중량%, 천궁 4.5~5.5 중량%, 당귀 4.5~5.5 중량%, 작약 2.2~2.8 중량%, 상엽 7~8 중량%, 인진쑥 9~11 중량%, 영지 2.2~2.8 중량%, 황기 2.2~2.8 중량%, 창출 2.2~2.8 중량%, 오미자 5.2~6.4 중량%, 결명자 5.5~6.5 중량%, 우엉 2.2~2.8 중량%, 메밀 2.2~2.8 중량% 및 삼백초 5.2~6.4 중량%로 준비한 약용식물일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 약용식물 총 중량 기준으로, 치커리 15.1 중량%, 갈근 12.5 중량%, 대추 12.5 중량%, 천궁 5 중량%, 당귀 5 중량%, 작약 2.5 중량%, 상엽 7.5 중량%, 인진쑥 10 중량%, 영지 2.5 중량%, 황기 2.5 중량%, 창출 2.5 중량%, 오미자 5.8 중량%, 결명자 6 중량%, 우엉 2.5 중량%, 메밀 2.5 중량% 및 삼백초 5.6 중량%로 준비한 약용식물일 수 있다. 상기와 같은 재료 및 배합비로 약용식물을 준비하는 것이 약용식물의 향과 맛이 잘 어우러지면서 면역 활성이 더욱 증진된 농축액으로 제조할 수 있었다.
또한, 본 발명의 식물 혼합 농축액의 제조방법에서, 상기 (2)단계의 치커리 혼합 추출액은 바람직하게는 치커리, 갈근, 대추, 천궁 및 당귀를 혼합한 치커리 혼합물에 물을 중량 기준으로 8~12배 첨가하여 82~88℃에서 10~14시간 동안 추출한 후 여과하여 제조할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 치커리, 갈근, 대추, 천궁 및 당귀를 혼합한 치커리 혼합물에 물을 중량 기준으로 10배 첨가하여 85℃에서 12시간 동안 추출한 후 여과하여 제조할 수 있다.
또한, 본 발명의 식물 혼합 농축액의 제조방법에서, 상기 (3)단계의 인진쑥 혼합 추출액은 바람직하게는 작약, 상엽, 인진쑥, 영지, 황기, 창출 및 오미자를 혼합한 인진쑥 혼합물에 물을 중량 기준으로 8~12배 첨가하여 90~100℃에서 20~28시간 동안 추출한 후 여과하여 제조할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 작약, 상엽, 인진쑥, 영지, 황기, 창출 및 오미자를 혼합한 인진쑥 혼합물에 물을 중량 기준으로 10배 첨가하여 95℃에서 24시간 동안 추출한 후 여과하여 제조할 수 있다.
또한, 본 발명의 식물 혼합 농축액의 제조방법에서, 상기 (4)단계의 결명자 혼합 추출액은 바람직하게는 결명자, 우엉, 메밀 및 삼백초를 혼합한 결명자 혼합물에 물을 중량 기준으로 8~12배 첨가하여 82~88℃에서 7~9시간 동안 추출한 후 여과하여 제조할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 결명자, 우엉, 메밀 및 삼백초를 혼합한 결명자 혼합물에 물을 중량 기준으로 10배 첨가하여 85℃에서 8시간 동안 추출한 후 여과하여 제조할 수 있다.
상기 (2) 내지 (4)의 조건으로 추출하는 것이 식물 각각 고유한 유용 성분들이 추출 및 농축하는 과정에서 효율적으로 용출되어 선택된 재료들의 효능과 기능을 최대로 흡수할 수 있을 뿐만 아니라, 재료 특유의 풋내 및 이취는 제거되고 관능적인 특성이 향상된 추출액으로 제조할 수 있었다.
또한, 본 발명의 식물 혼합 농축액의 제조방법에서, 상기 (5)단계의 농축은 바람직하게는 55~65℃에서 60~70 brix가 될 때까지 농축할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 60℃에서 65 brix가 될 때까지 농축할 수 있다. 상기와 같은 조건으로 추출액을 혼합하여 농축하는 것이 추출액들의 풍미가 잘 어우러지고, 깊고 부드러우면서 품질이 우수한 농축액으로 제조할 수 있었다.
본 발명의 식물 혼합 농축액의 제조방법은, 보다 구체적으로는
(1) 약용식물 총 중량 기준으로, 치커리 14~16 중량%, 갈근 12~13 중량%, 대추 12~13 중량%, 천궁 4.5~5.5 중량%, 당귀 4.5~5.5 중량%, 작약 2.2~2.8 중량%, 상엽 7~8 중량%, 인진쑥 9~11 중량%, 영지 2.2~2.8 중량%, 황기 2.2~2.8 중량%, 창출 2.2~2.8 중량%, 오미자 5.2~6.4 중량%, 결명자 5.5~6.5 중량%, 우엉 2.2~2.8 중량%, 메밀 2.2~2.8 중량% 및 삼백초 5.2~6.4 중량%의 약용식물을 준비하는 단계;
(2) 상기 (1)단계의 준비한 치커리, 갈근, 대추, 천궁 및 당귀를 혼합한 치커리 혼합물에 물을 중량 기준으로 8~12배 첨가하여 82~88℃에서 10~14시간 동안 추출한 후 여과하여 치커리 혼합 추출액을 제조하는 단계;
(3) 상기 (1)단계의 준비한 작약, 상엽, 인진쑥, 영지, 황기, 창출 및 오미자를 혼합한 인진쑥 혼합물에 물을 중량 기준으로 8~12배 첨가하여 90~100℃에서 20~28시간 동안 추출한 후 여과하여 인진쑥 혼합 추출액을 제조하는 단계;
(4) 상기 (1)단계의 준비한 결명자, 우엉, 메밀 및 삼백초를 혼합한 결명자 혼합물에 물을 중량 기준으로 8~12배 첨가하여 82~88℃에서 7~9시간 동안 추출한 후 여과하여 결명자 혼합 추출액을 제조하는 단계; 및
(5) 상기 (2)단계의 제조한 치커리 혼합 추출액, 상기 (3)단계의 제조한 인진쑥 혼합 추출액 및 상기 (4)단계의 제조한 결명자 혼합 추출액을 혼합한 후 55~65℃에서 60~70 brix가 될 때까지 농축하는 단계를 포함할 수 있으며,
더욱 구체적으로는
(1) 약용식물 총 중량 기준으로, 치커리 15.1 중량%, 갈근 12.5 중량%, 대추 12.5 중량%, 천궁 5 중량%, 당귀 5 중량%, 작약 2.5 중량%, 상엽 7.5 중량%, 인진쑥 10 중량%, 영지 2.5 중량%, 황기 2.5 중량%, 창출 2.5 중량%, 오미자 5.8 중량%, 결명자 6 중량%, 우엉 2.5 중량%, 메밀 2.5 중량% 및 삼백초 5.6 중량%의 약용식물을 준비하는 단계;
(2) 상기 (1)단계의 준비한 치커리, 갈근, 대추, 천궁 및 당귀를 혼합한 치커리 혼합물에 물을 중량 기준으로 10배 첨가하여 85℃에서 12시간 동안 추출한 후 여과하여 치커리 혼합 추출액을 제조하는 단계;
(3) 상기 (1)단계의 준비한 작약, 상엽, 인진쑥, 영지, 황기, 창출 및 오미자를 혼합한 인진쑥 혼합물에 물을 중량 기준으로 10배 첨가하여 95℃에서 24시간 동안 추출한 후 여과하여 인진쑥 혼합 추출액을 제조하는 단계;
(4) 상기 (1)단계의 준비한 결명자, 우엉, 메밀 및 삼백초를 혼합한 결명자 혼합물에 물을 중량 기준으로 10배 첨가하여 85℃에서 8시간 동안 추출한 후 여과하여 결명자 혼합 추출액을 제조하는 단계; 및
(5) 상기 (2)단계의 제조한 치커리 혼합 추출액, 상기 (3)단계의 제조한 인진쑥 혼합 추출액 및 상기 (4)단계의 제조한 결명자 혼합 추출액을 혼합한 후 60℃에서 65 brix가 될 때까지 농축하는 단계를 포함할 수 있다.
본 발명은 또한, 상기 방법으로 제조된 식물 혼합 농축액을 제공한다.
이하, 본 발명의 제조예 및 실시예를 들어 상세히 설명한다. 단, 하기 제조예 및 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 제조예 및 실시예에 한정되는 것은 아니다.
제조예 1. 식물 혼합 농축액
(1) 약용식물 총 중량 기준으로, 치커리 15.1 중량%, 갈근 12.5 중량%, 대추 12.5 중량%, 천궁 5 중량%, 당귀 5 중량%, 작약 2.5 중량%, 상엽 7.5 중량%, 인진쑥 10 중량%, 영지 2.5 중량%, 황기 2.5 중량%, 창출 2.5 중량%, 오미자 5.8 중량%, 결명자 6 중량%, 우엉 2.5 중량%, 메밀 2.5 중량% 및 삼백초 5.6 중량%의 약용식물을 준비하였다.
(2) 상기 (1)단계의 준비한 치커리, 갈근, 대추, 천궁 및 당귀를 혼합한 치커리 혼합물에 치커리 혼합물 대비 정제수를 중량 기준으로 10배 첨가하여 85℃에서 12시간 동안 추출한 후 여과하여 치커리 혼합 추출액을 제조하였다.
(3) 상기 (1)단계의 준비한 작약, 상엽, 인진쑥, 영지, 황기, 창출 및 오미자를 혼합한 인진쑥 혼합물에 인진쑥 혼합물 대비 정제수를 중량 기준으로 10배 첨가하여 95℃에서 24시간 동안 추출한 후 여과하여 인진쑥 혼합 추출액을 제조하였다.
(4) 상기 (1)단계의 준비한 결명자, 우엉, 메밀 및 삼백초를 혼합한 결명자 혼합물에 결명자 혼합물 대비 정제수를 중량 기준으로 10배 첨가하여 85℃에서 8시간 동안 추출한 후 여과하여 결명자 혼합 추출액을 제조하였다.
(5) 상기 (2)단계의 제조한 치커리 혼합 추출액, 상기 (3)단계의 제조한 인진쑥 혼합 추출액 및 상기 (4)단계의 제조한 결명자 혼합 추출액을 혼합한 후 60℃에서 65 brix가 될 때 농축하여 식물 혼합 농축액을 제조하였다.
약용식물 배합비(중량%)
약용식물 종류 제조예 1 비교예 1 비교예 2
치커리 15.1 - 10
갈근 12.5 14.5 15
대추 12.5 14.5 10
천궁 5 6 7
당귀 5 6 3
작약 2.5 3.5 4
상엽 7.5 8.5 6
인진쑥 10 12 15
영지 2.5 3.5 1
황기 2.5 3.5 4
창출 2.5 3.5 1
오미자 5.8 7 8
결명자 6 7 4
우엉 2.5 - 1
메밀 2.5 - 1
삼백초 5.6 - 10
복분자 - 2.5 -
오가피 - 2.5 -
진피 - 5.5 -
비교예 1 및 2. 식물 혼합 농축액
상기 제조예 1의 방법으로 식물 혼합 농축액을 제조하되, (1)단계의 약용식물 준비 시, 표 1의 비교예 1 및 2의 재료 및 배합비로 준비한 각각의 약용식물을 사용하여, 식물 혼합 농축액을 제조하였다.
비교예 3. 식물 혼합 농축액
(1) 약용식물 총 중량 기준으로, 치커리 15.1 중량%, 갈근 12.5 중량%, 대추 12.5 중량%, 천궁 5 중량%, 당귀 5 중량%, 작약 2.5 중량%, 상엽 7.5 중량%, 인진쑥 10 중량%, 영지 2.5 중량%, 황기 2.5 중량%, 창출 2.5 중량%, 오미자 5.8 중량%, 결명자 6 중량%, 우엉 2.5 중량%, 메밀 2.5 중량% 및 삼백초 5.6 중량%의 약용식물을 준비하였다.
(2) 상기 (1)단계의 준비한 치커리, 갈근, 대추, 천궁, 당귀, 작약, 상엽, 인진쑥, 영지, 황기, 창출, 오미자, 결명자, 우엉, 메밀 및 삼백초를 혼합한 혼합물에 혼합물 대비 정제수를 중량 기준으로 10배 첨가하여 85℃에서 12시간 동안 추출한 후 여과하여 혼합 추출액을 제조하였다.
(3) 상기 (2)단계의 제조한 혼합 추출액을 60℃에서 65 brix가 될 때 농축하여 식물 혼합 농축액을 제조하였다.
실시예 1. 식물 혼합 농축액의 세포독성
실험에 사용한 대식세포주인 RAW 264.7 세포독성 측정은 MTT assay로 측정하였으며, 배양된 세포주를 5×104 cell/well의 농도로 조정하여 96 웰-플레이트에 100 ㎕씩 첨가하여 24시간 배양하고, 이후 새로운 배지에 시료를 농도별로 처리한 후 24시간 동안 배양하였다. 배양 후 0.5 mg/mL MTT[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide; Sigma-Aldrich Co.) 용액을 각 웰 10 ㎕씩 첨가하고 다시 4시간 동안 배양하여 포르마잔을 형성시켰다. 이후 상등액을 완전히 제거하고 DMSO(dimethyl sulfoxide) 100 ㎕를 각 웰에 첨가하여 10분간 반응시켜 포르마잔을 녹인 후 ELISA 리더(UVM-340, ASYS Co.)를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하였다.
제조예 1과 비교예들의 식물 혼합 농축액을 농도별로 처리하여 세포 생존율을 비교하였다. 농축액을 0.5~10 ㎍/mL로 처리하였을 때 10 ㎍/mL의 농도까지 유의적인 세포사멸이 나타나지 않아 세포독성이 없음을 확인하였다.
실시예 2. 식물 혼합 농축액의 NO 및 TNF -α 생성량
NO는 면역계에서 외부물질에 대한 방어 작용을 하는 중요한 신호 전달 물질로 NOS(nitric oxide synthase)의 작용에 의해 L-아르기닌이 L-시트룰린로 변화되는 과정에서 생성되며 대부분의 조직세포에 영향을 미쳐 순환기계에서는 혈관 이완 물질로, 중추신경계에서는 신경 전달 물질로, 면역계에서는 방어 물질로 알려져 있다. TNF-α는 인체에 침입한 병원체에 대한 숙주의 방어에 관여하며, 또한 IL-1, IL-6, IFNs과 같은 사이토카인들의 분비를 유도함으로써 인체의 면역반응을 조절한다고 알려져 있다.
NO 분비효과를 측정하기 위하여 아질산 이온(NO2 -)의 농도는 NaNO2를 기준으로 그리스 시약(Griess reagent)을 이용하여 발색정도를 하기와 같이 측정하였다. RAW264.7 세포(ATCC The Global Bioresource CenterTM)를 96 웰 마이크로플레이트에 웰 당 1×105씩 분주하고, 각각 10 ㎍/㎖ 농도의 농축액을 처리한 후, 37℃ 및 5% CO2 조건에서 24시간 배양한 후 상층액을 취하여, 100 ㎕의 세포 배양 상층액에 동량의 그리스 시약(Griess reagent, 0.1%(w/v) N-(1-naphthyl)ethylenediamine dihydrochloride + 1% (w/v) sulfanilamide in 5%(v/v)phosphoric acid)을 넣고 혼합한 다음, 상온에서 10분 두었으며, 그 후 울트로스펙 4000 스펙트로포토메터(Pharmacia Biotech사, Uppsala, Sweden)를 사용하여 550 nm에서 흡광도를 측정하였다. 또한, 같은 조건에서 50 ㎕의 세포 배양 상층액을 취하여 염증 매개물질(inflammatory mediator)인 TNF-α(tumor necrosis factor-α)의 ELISA 검사를 실시하였다.
식물 혼합 농축액 처리에 따른, RAW264.7 세포에서의 NO 및 TNF-α 생성 효과
구분 음성 대조군 LPS 처리 제조예 1 비교예 1 비교예 2 비교예 3
NO 농도(uM) 7.1 25.5 18.2 10.2 15.8 17.2
TNF-α 농도(ng/ml) 9.0 25.6 22.5 12.4 16.2 18.6
그 결과, 표 2에 나타낸 바와 같이, RAW264.7 세포에서 식물 혼합 농축액 처리 시 산화질소(NO) 및 TNF-α 분비를 증가시킴을 확인할 수 있었고, 그 중 제조예 1의 식물 혼합 농축액 처리 시 양성대조군으로 사용한 LPS(Lipopolysaccharide) 단독 처리군과 유사한 증가효과를 나타냄을 확인할 수 있었다.
실시예 3. 식물 혼합 농축액의 관능검사
제조예 1과 비교예들의 방법으로 제조된 식물 혼합 농축액을 관능검사 요원 30명을 대상으로 색, 향, 맛 및 전체적인 기호도를 7점 평점법으로 실시하였다. 이때 채점 기준은 매우 좋다; 7점, 좋다; 6점, 좋은편이다; 5점, 보통; 4점, 조금 나쁘다; 3점, 나쁘다; 2점, 아주 나쁘다; 1점으로 하였고, 2시간 간격으로 시료의 번호를 바꾸어 같은 패널로 3회 반복하였으며, 각 반복 시 가장 높은 점수와 가장 낮은 점수를 제외하고 평균 득점을 구하였다.
식물 혼합 농축액의 관능검사
시료 색 향 맛 전체적인 기호도
제조예 1 5.5 6.0 6.4 6.2
비교예 1 4.9 4.8 5.0 4.8
비교예 2 5.3 5.2 5.2 5.2
비교예 3 5.2 5.4 5.6 5.5
그 결과, 색에 대한 기호도에서는 큰 차이를 나타내지 않았으나, 향, 맛 및 전체적인 기호도에서 비교예 1의 식물 혼합 농축액이 가장 낮은 선호도를 나타내었고, 제조예 1의 식물 혼합 농축액이 모든 항목에서 가장 높은 점수를 나타내어, 제조예 1의 재료 종류, 배합비, 전처리 조건 등으로 제조된 식물 혼합 농축액은 품질이 우수할 뿐만 아니라, 부드러운 풍미가 증가하고 쓴맛은 감소하여 기호도가 높게 나타남을 확인할 수 있었다.

Claims (4)

  1. (1) 약용식물 총 중량 기준으로, 치커리 14~16 중량%, 갈근 12~13 중량%, 대추 12~13 중량%, 천궁 4.5~5.5 중량%, 당귀 4.5~5.5 중량%, 작약 2.2~2.8 중량%, 상엽 7~8 중량%, 인진쑥 9~11 중량%, 영지 2.2~2.8 중량%, 황기 2.2~2.8 중량%, 창출 2.2~2.8 중량%, 오미자 5.2~6.4 중량%, 결명자 5.5~6.5 중량%, 우엉 2.2~2.8 중량%, 메밀 2.2~2.8 중량% 및 삼백초 5.2~6.4 중량%의 약용식물을 준비하는 단계;
    (2) 상기 (1)단계의 준비한 치커리, 갈근, 대추, 천궁 및 당귀를 혼합한 치커리 혼합물에 물을 첨가하여 추출한 후 여과하여 치커리 혼합 추출액을 제조하는 단계;
    (3) 상기 (1)단계의 준비한 작약, 상엽, 인진쑥, 영지, 황기, 창출 및 오미자를 혼합한 인진쑥 혼합물에 물을 첨가하여 추출한 후 여과하여 인진쑥 혼합 추출액을 제조하는 단계;
    (4) 상기 (1)단계의 준비한 결명자, 우엉, 메밀 및 삼백초를 혼합한 결명자 혼합물에 물을 첨가하여 추출한 후 여과하여 결명자 혼합 추출액을 제조하는 단계; 및
    (5) 상기 (2)단계의 제조한 치커리 혼합 추출액, 상기 (3)단계의 제조한 인진쑥 혼합 추출액 및 상기 (4)단계의 제조한 결명자 혼합 추출액을 혼합한 후 농축하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 식물 혼합 농축액의 제조방법.
  2. 삭제
  3. 제1항에 있어서,
    (1) 약용식물 총 중량 기준으로, 치커리 14~16 중량%, 갈근 12~13 중량%, 대추 12~13 중량%, 천궁 4.5~5.5 중량%, 당귀 4.5~5.5 중량%, 작약 2.2~2.8 중량%, 상엽 7~8 중량%, 인진쑥 9~11 중량%, 영지 2.2~2.8 중량%, 황기 2.2~2.8 중량%, 창출 2.2~2.8 중량%, 오미자 5.2~6.4 중량%, 결명자 5.5~6.5 중량%, 우엉 2.2~2.8 중량%, 메밀 2.2~2.8 중량% 및 삼백초 5.2~6.4 중량%의 약용식물을 준비하는 단계;
    (2) 상기 (1)단계의 준비한 치커리, 갈근, 대추, 천궁 및 당귀를 혼합한 치커리 혼합물에 물을 첨가하여 82~88℃에서 10~14시간 동안 추출한 후 여과하여 치커리 혼합 추출액을 제조하는 단계;
    (3) 상기 (1)단계의 준비한 작약, 상엽, 인진쑥, 영지, 황기, 창출 및 오미자를 혼합한 인진쑥 혼합물에 물을 첨가하여 90~100℃에서 20~28시간 동안 추출한 후 여과하여 인진쑥 혼합 추출액을 제조하는 단계;
    (4) 상기 (1)단계의 준비한 결명자, 우엉, 메밀 및 삼백초를 혼합한 결명자 혼합물에 물을 첨가하여 82~88℃에서 7~9시간 동안 추출한 후 여과하여 결명자 혼합 추출액을 제조하는 단계; 및
    (5) 상기 (2)단계의 제조한 치커리 혼합 추출액, 상기 (3)단계의 제조한 인진쑥 혼합 추출액 및 상기 (4)단계의 제조한 결명자 혼합 추출액을 혼합한 후 농축하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 식물 혼합 농축액의 제조방법.
  4. 제1항 또는 제3항의 방법으로 제조된 식물 혼합 농축액.
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