KR102100092B1 - 이종 종양-관련 항원들을 발현하는 아데노바이러스 - Google Patents

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Abstract

본 발명은, 아데노바이러스가, 종양 항원을 암호화하는 하나 이상의 이종 핵산 서열을 포함함으로써, 상기 아데노바이러스가 이의 표면에 종양 항원(들)을 발현하는, 암 치료요법에 사용하기 위한 아데노바이러스에 관한 것이다.

Description

이종 종양-관련 항원들을 발현하는 아데노바이러스{ADENOVIRUSES EXPRESSING HETEROLOGOUS TUMOR-ASSOCIATED ANTIGENS}
관련 출원에 대한 상호-참조
본 출원은, 2012년 2월 2일자로 출원된 미국 가특허 출원 제61/594,005호의 이익을 주장하며, 이의 전문은 인용에 의해 본원에 포함된다.
서열목록, 표 및 컴퓨터 프로그램 목록의 간단한 설명
서열목록은 SEQ.tx (4KB, 01-February-13)로 명명한 파일로 본 출원에 첨부되며, 본원에 인용에 의해 포함된다.
배경
I. 기술분야
본 출원은 일반적으로 종양학 및 암 치료요법의 분야에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은, 면역원성 아데노바이러스에 관한 것이다.
II. 관련 배경의 설명
암은 세계적으로 사람에서 이병률 및 치사율의 주요 원인 중 하나로 남아있다. 수술, 화학 치료요법 및 방사선을 성공적으로 이용하여 암을 치유해왔음에도 불구하고, 새로운 전략이 필요하다. 정상 세포보다 종양 세포에서 더 잘 복제되는 바이러스는 종양분해 제제(oncolytic agent)로서의 가능성을 제시하여 왔다. 아데노바이러스를 사용한 유전자 전달 및 종양 분해의 실행가능성이 잘 정립되어 왔다(Kirn, 1999; Bischoff et al., 1996; Wildner et al., 1999a; Wildner et al., 1999b; (Sterman et al., Hum. Gene Ther. 9: 1083-1092 (1998)).
추가의 항-암 치료요법들에 대한 필요성이 남아있다.
요약
복제 적격 아데노바이러스(replication competent adenovirus)가 항-암 치료요법을 유효화할 수 있는 적어도 4개의 메커니즘이 존재한다. 첫 번째로, 아데노바이러스가 용균성 감염을 개시하고 완료함으로써, 세포를 용해시킬 수 있다(종양분해). 두 번째로, 아데노바이러스는 자살 유전자, 예를 들면, 티미딘 키나제(HSVtk) 유전자 또는 사이토신 데아미나제-티미딘 키나제 융합 단백질을 발현할 수 있고(Rogulski et al., Clin. Cancer Res. 3: 2081-2088 (1997)), 이는 종양분해 활성을 증강시킬 것이다. 세 번째로, 아데노바이러스의 투여는 각 제제의 종양분해 활성을 개선하기 위하여 화학 치료요법(임의의 약물 치료요법 포함), 또는 방사선과 병용될 수 있다(Nielsen et al., Cancer Gene Ther. 4: 835-846 (1997)). 마지막으로, 바이러스는, 면역자극제로서 또는 면역자극성 분자를 발현하는 벡터로서 기능하여, 종양 항원에 대해 특이적인 면역 이펙터 세포의 자극을 유발할 수 있다. 종양분해 및 면역 자극을 사용하는 병용 전략이 특히 흥미롭고, 이는, "백신 효과"를 통해 장기간 견딜 수 있는 반응을 제공할 수 있기 때문이다. 따라서, 본 발명에 이를 때까지, 종양 관련 항원을 발현하거나 나타내는 종양 세포에 대해 선택적으로 개선된 복제 선택적 아데노바이러스에 대한 요구가 당해 분야에 남아 있었다.
본 발명은, 아데노바이러스 피복 단백질(coat protein) 내로 도입된 암 항원들을 갖는 아데노바이러스 조성물, 상기 아데노바이러스에 의해 발현되는 암 항원, 또는 상기 아데노바이러스와 함께 전달되는 암 항원에 관한 것이다. 특정 양상에서, 변형된 피복 단백질은 변형된 섬유 단백질, 헥손 단백질, 또는 pIX 단백질을 포함할 것이다. 항원-변형된 아데노바이러스는 종양 환경에서 암 항원의 수준을 증가시키면서, 첫 복제 주기로부터 암 항원을 제시할 것이다. 종양 환경에서 증가된 항원의 수준은 암 항원에 대한 그리고 용해된 종양 세포에 대한 면역 반응을 자극할 것이다. 특정 양상에서, 종양 세포의 용해와 함께 면역 반응의 자극은, 종양 회귀의 가능성을 증가시키는 개선된 항-종양 면역성을 제공한다.
키메릭 아데노바이러스 피복 단백질은, 피복 단백질 아미노산 서열 내로 또는 피복 단백질 아미노산 서열 대신에 삽입되거나, 또는, 아데노바이러스 피복 단백질의 C-말단에 융합되는, 약 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 내지 약 30개의 이종 아미노산을 포함할 수 있다. 아데노바이러스 피복 단백질은 섬유 단백질, 펜톤 기본 단백질, 헥손, 또는 pIX 단백질일 수 있다. 항원은 헥손 초가변성성 영역 1(사람 아데노바이러스 5형 아미노산 139-167), 섬유 단백질 HI 루프(사람 5 아데노바이러스 5형 섬유 HI 루프 아미노산 537-549)에 삽입되고/되거나, 단백질 IX(사람 아데노바이러스 5형 단백질 IX 아미노산 140)에 접합되거나 융합될 수 있다. 특정 양상들에서, 이종 아미노산들은, 약 3개 내지 약 30개 아미노산(이들 사이의 모든 값 및 범위를 포함한다)의 스페이서 서열에 의해 키메릭 아데노바이러스 피복 단백질에 연결된다.
따라서, 실시형태들은, 복제 적격 종양분해 아데노바이러스에 커플링되거나, 이와 함께 투여되는 다중 종양 관련 항원(TAA: tumor associated antigen)들을 갖는 아데노바이러스를 포함한다. 특정 양상들에서, 상기 항원들은 아데노바이러스 피복 단백질과의 융합 단백질로서 제시된다. 다른 양상들에서, 상기 항원은 아데노바이러스의 피막(coat)에 공유 결합에 의해 결합되거나 비-공유 결합에 의해 결합된다. 공유 결합된 항원은 화학적 링커에 의해 아데노바이러스 피막에 화학적으로 부착될 수 있다. 비-공유 결합된 항원은, 상기 항원 또는 상기 항원에 부착된 결합 모이어티와, 상기 아데노바이러스 피복 단백질 또는 상기 피복 단백질에 부착된 결합 모이어티와의 사이의 친화성에 의해 피막에 결합될 수 있다. 다른 양상들에서, 상기 아데노바이러스는 아데노바이러스 조성물과 함께 공동-투여되는 복수의 항원과 함께 제형화될 수 있다.
특정 실시형태들은, 종양에, 복제 적격 아데노바이러스 및 하나 이상의 종양 관련 항원을 투여함을 포함하는, 암 치료 방법에 관한 것이다. 특정 양상에서, 복제 적격 아데노바이러스는 델타-24 아데노바이러스이다. 다른 양상에서, 델타-24 아데노바이러스의 피복 단백질들은 하나 이상의 종양 관련 항원들에 커플링된다. 특정 양상에서, 종양 관련 항원은 아데노바이러스의 표면에 융합 단백질 또는 단백질 키메라로서 제시된다. 본원에 사용된 바와 같은 용어 "키메라(chimera)" 또는 "키메릭(chimeric)"은 종종 반드시 상이한 단백질 유래인 것은 아닌, 다중 구성성분을 갖는 단일 전사 단위를 의미한다. 본원에 사용된 바와 같은 "키메릭"은 종양 관련 항원을 포함하는 이종 절편을 갖는 아데노바이러스 피복 단백질의 전부 또는 일부를 포함하는 단백질을 생성하기 위하여 유전적으로 조작된 아데노바이러스 단백질을 암호화하는 암호화 서열을 나타내기 위해 사용된다. 다른 양상에서, 항원은 아데노바이러스의 피막에 화학적 링커를 통해 공유 결합에 의해 부착된다. 또 다른 양상에서, 항원은 복제 적격 아데노바이러스와 함께 제형화되고, 바이러스와 함께 공동-투여된다. 다른 양상에서, 항원은 아데노바이러스에 의한 치료 전 또는 후에 투여될 수 있다. 특정 양상에서, 항원은 면역 자극제 또는 개선제와 함께 투여된다.
특정 실시형태에서, 아데노바이러스의 표면에 복수의 종양 항원을 발현하는 아데노바이러스가 제공된다. 특정 양상에서, 2, 3, 4, 또는 5개의 항원은, 예를 들면, 각 항원을 암호화하는 핵산을, 아데노바이러스 표면 단백질을 암호화하는 별도의 유전자로 삽입시킴으로써 아데노바이러스의 표면에서 발현된다. 종양 항원은 캡시드 또는 섬유의 일부로서 발현되거나, 아데노바이러스 감염 및 복제 동안 외인성 단백질의 제시를 증가시키기 위하여 자가 소화 작용(autophagy)-관련 단백질(예: LC3)에 연결된 외인성 단백질로서 제조될 수 있다. 다중 항원들의 표적화는 일관되고 효과적인 면역 반응의 생성을 도울 것이다.
종양 관련 항원(TAA)은, 이들에 제한되는 것은 아니지만, 알파 태아 단백질(AFP), 흑색종 관련 항원 - MAGE-1, MAGE-2, MAGE-3, 암배아 항원(CEA)(IIGYVIGTQQATPGPAYSGREII, 서열번호 1), 티로시나제(Tyr), 미드킨(MK), BAGE, CASP-8, β-카테닌, CA-125, CDK-1, ESO-1, gp75, gp100, MART-1, 뮤신(MUC-1), MUM-1, p53, PAP, PSA, PSMA, ras, trp-1, HER-2, TRP-2, IL13R 알파, AIM-3, 또는 NY-ESO1을 포함한다. 특정 양상에서, TAA는 C9orf112, SART1, BRAP, RTN4, GLEA2, TNKS2, KIAA0376, IG4, HSPH1, C13orf24, RBPSUH, C6orf153, NKTR, NSEP1, U2AF1L, CYNL2, TPR, SOX2, 또는 GOLGA이다. 아데노바이러스는 전장 종양 관련 항원 또는 이의 면역원성 펩타이드를 발현할 수 있다.
다른 종양 관련 항원은, 제한없이, 뇌암(예: 신경교종)이 있는 환자에서 발생되는 것으로 확인된 종양 관련 항원을 포함하며, 이의 대표적인 예는 다음을 포함한다: AIM2(흑색종 2에 부재함), BMI1(BMI1 폴리콤 약지 종양유전자), COX-2(사이클로옥시게나제-2), TRP-1(티로신 관련 단백질 2) TRP-2(티로신 관련 단백질 2), GP100(당단백질 100), EGFRvIII(상피 성장 인자 수용체 변이체 III), EZH2(껍질 동족체의 인핸서 2), LICAM(사람 LI 세포 부착 분자), 리빈, 리빈β, MRP-3(다중 약물 내성 단백질 3), 네스틴, OLIG2(희돌기교세포 전사 인자), SOX2(SRY-관련 HMG-박스 2), ART1(T세포 1에 의해 인식되는 항원), ART4(T세포 4에 의해 인식되는 항원), SART1(T세포 1에 의해 인식되는 편평 세포 암종 항원), SART2, SART3, B-사이클린, b-카테닌, Gli1(흑색종-관련 종양유전자 동족체 1), Cav-1(카베올린-1), 카텝신 B, CD74(분화 클러스터 74), E-카데린(내피 칼슘-의존성 부착), EphA2/Eck(EPH 수용체 A2/상피 키나제), Fra-1/Fosl 1(fos-관련 항원 1), GAGE-1(G 항원 1), 강글리오사이드/GD2, GnT-V, β1,6-Ν(아세틸글루코사미닐트랜스퍼라제-V), Her2/neu(사람 상피 성장 인자 수용체 2), Ki67(항체 Ki67의 핵 증식-관련 항원), Ku70/80(사람 Ku 이종이합체 단백질 서브유닛), IL13Ra2(인터류킨-13 수용체 서브유닛 알파-2), MAGE-A(흑색종-관련 항원 1), MAGE-A3(흑색종-관련 항원 3), NY-ESO-1(뉴욕 식도 편평 세포 암종 1), MART-1(T세포에 의해 인식되는 흑색종 항원), PROX1(prospero 호메오박스 단백질 1), PSCA(전립선 줄기 세포 항원), SOX10(SRY-관련 HMG-박스 10), SOX11, 서비빈, UPAR(우로키나제-형 플라스미노겐 활성화제 수용체), 및 WT-1(빌름 종양 단백질 1). 아데노바이러스는 전장 종양 관련 항원 또는 이의 면역원성 펩타이드를 발현할 수 있다.
특정 양상에서, 아데노바이러스는 아데노바이러스 게놈으로 혼입된 이종 핵산으로부터 종양-관련 항원을 발현할 수 있다. 이종 핵산은 아데노바이러스 또는 이종 프로모터의 제어 하에 존재할 수 있다. 작제물의 "이종(heterologous)" 영역은, 본래 더 큰 분자와 관련하여 발견되지 않는 더 큰 핵산 분자 내에서 확인 가능한 핵산 절편이다.
상피 성장 인자 수용체(EGFR)는 c-erb B 프로토-종양유전자에 의해 암호화되는 170kDa 당단백질이다(Ullrich et al., Nature 309:418-42 (1984)). 이 종양유전자는 다양한 암에서 활성화되고, 악성 신경교종의 약 40%에서 증폭된다. 새로운 접합을 생성하는 세포외 도메인에 267개 아미노산 인-프레임 결실을 포함하는, EGF 수용체 돌연변이(III형 돌연변이 또는 EGFRvIII으로서 공지됨)가 사람 암에서 흔히 발견되지만, 임의의 정상 조직에서는 발현되지 않는다. EGFRvIII에서 결실에 의해 생성된 신규 접합은 면역원성이다. EGFRvIII의 서열이 미국 특허 제6,455,498호에 기술되어 있으며, 이의 내용은 본원에 인용에 의해 포함된다. 면역원성 EGFRvIII은 이의 내용이 본원에 인용에 의해 포함된, 미국 특허 출원 공보 제2009/0155282호에 기술된 것, 특히, [0362] 단락 및 표 4.1 내지 4.3의 것을 포함한다.
바람직한 실시형태에서, 면역원성 EGFRvIII 에피토프를 함유하는 표면 단백질을 포함하는 아데노바이러스가 제공된다. 한 양상에서, 전장 EGFRvIII 또는 이의 면역원성 펩타이드를 암호화하는 핵산을, 아데노바이러스 표면 단백질을 암호화하는 유전자(예: 본래 유전자는 PCR 돌연변이유발에 의해 에피토프를 포함하도록 변형될 수 있다)로 삽입시킴으로써, 아데노바이러스는 EGFRvIII 에피토프를 포함하는 키메릭 표면 단백질을 발현한다. 따라서, 본 발명은 EGFRvIII 또는 이의 면역원성 펩타이드를 암호화하는 (이종) 핵산을 포함하는 게놈을 갖는 재조합 아데노바이러스 및 암 치료시 이의 용도를 제공한다. 한 양상에서, EGFRvIII 또는 이의 면역원성 펩타이드는 바람직하게는 H1 루프에서 섬유 단백질을 암호화하는 유전자로 삽입된다. 아데노바이러스의 이러한 영역은 항원 발현에 유용한 것으로 입증되어 왔다(Krause A. et al., J. Virol., 80:5523-30 (2006)). EGFRvIII 또는 이의 면역원성 펩타이드를 암호화하는 핵산은, 임의의 아데노바이러스의 하나 이상의 표면 단백질을 암호화하는 유전자로 삽입시킬 수 있다. 한 양상에서, 아데노바이러스는 델타-24이다. 본원에 사용된 바와 같은 용어 "면역원성 EGFRvIII 펩타이드"는 상응하는 EGFRvIII 단백질, 바람직하게는 사람 EGFRvIII의 돌연변이된 스플라이스 접합(splice junction)을 포괄하는 적합한 길이, 예를 들면, 적어도 10 또는 12개 아미노산 및 15, 20, 25 또는 30개 이하의 아미노산 또는 그 이상의 펩타이드를 의미한다. 바람직한 실시형태에서, 아데노바이러스 표면 단백질로 삽입된 핵산은 서열 EKKGNYVV(서열번호 2)로 이루어지거나, 필수적으로 이루어지거나, 이를 포함하는 8-20 아미노산 펩타이드를 암호화한다. 예를 들면, 펩타이드는, LEEKKGNY(서열번호 3), LEEKKGNYVVT(서열번호 4), LEEKKGNYVVTDH(서열번호 5), 또는 LEEKKGNYVVTDHC(서열번호 6)로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 서열을 가질 수 있다. 특히 바람직한 실시형태에서, EGFRvIII 면역원성 펩타이드는 LEEKKGNYVVT(서열번호 4)이며, 섬유 단백질을 암호화하는 유전자로, 바람직하게는 H1 루프로 삽입된다. 다른 실시형태에서, 전체 EGFRvIII 세포외 도메인을 암호화하는 핵산은 아데노바이러스의 표면 단백질을 암호화하는 유전자로 삽입된다.
다른 바람직한 실시형태에서, 본 발명은, MAGE 또는 이의 면역원성 펩타이드를 암호화하는 (이종) 핵산을 포함하는 게놈을 갖는 재조합 아데노바이러스 및 암 치료시 이의 용도를 제공한다. 바람직하게는, MAGE 또는 이의 면역원성 펩타이드를 암호화하는 핵산을, 표면 단백질을 암호화하는 유전자로 삽입시킴으로써, 아데노바이러스는, MAGE 또는 이의 면역원성 펩타이드를 포함하는 키메릭 표면 단백질을 발현한다. 한 양상에서, MAGE 또는 이의 면역원성 펩타이드를 암호화하는 핵산은, 아데노바이러스의 결실된 E3 영역으로 삽입된다. MAGE 또는 이의 면역원성 펩타이드를 암호화하는 핵산은, 임의의 아데노바이러스의 하나 이상의 표면 단백질을 암호화하는 유전자로 삽입시킬 수 있다. 한 양상에서, 아데노바이러스는 델타-24이다. 다른 양상에서, 암은 원발성 또는 전이성 뇌종양이다.
다른 바람직한 실시형태에서, 본 발명은, NY-ESO-1(GenBank U87459.1) 또는 이의 면역원성 펩타이드(예: SLLMWITQCFLPVF(서열번호 7))를 암호화하는 (이종) 핵산을 포함하는 게놈을 갖는 재조합 아데노바이러스, 및 암 치료시 이의 용도를 제공한다. 바람직하게는, NY-ESO-1 또는 이의 면역원성 펩타이드를 암호화하는 핵산을, 표면 단백질을 암호화하는 유전자로 삽입시킴으로써, 아데노바이러스는 NY-ESO-1 또는 이의 면역원성 펩타이드를 포함하는 키메릭 표면 단백질을 발현한다. 한 양상에서, NY-ESO-1 또는 이의 면역원성 펩타이드를 암호화하는 핵산이, 아데노바이러스의 헥손을 암호화하는 유전자의 초가변성 영역 5로 삽입된다. 아데노바이러스의 이러한 영역은 항원 발현에 유용한 것으로 제시되어 왔다(Crawford-Miksza and Schnurr, J. Virol., 70:1836-44 (1996)). NY-ESO-1 또는 이의 면역원성 펩타이드를 암호화하는 핵산은, 임의의 아데노바이러스의 하나 이상의 표면 단백질을 암호화하는 유전자로 삽입될 수 있다. 한 양상에서, 아데노바이러스는 델타-24이다. 다른 양상에서, 암은 원발성 또는 전이성 뇌종양이다.
특히 바람직한 실시형태에서, 본 발명은, (a) 아데노바이러스 섬유 단백질의 H1 루프를 암호화하는 유전자로 삽입되는 면역원성 EGFRvIII 펩타이드(예: LEEKKGNYVVT)를 암호화하는 핵산, (b) 아데노바이러스의 결실된 E3 영역으로 삽입되는 MAGE 또는 이의 면역원성 펩타이드를 암호화하는 핵산, 및 (c) 아데노바이러스의 헥손 단백질을 암호화하는 유전자의 초가변성 영역 5로 삽입되는 NY-ESO-1 또는 이의 면역원성 펩타이드를 암호화하는 핵산을 포함하는 게놈을 갖는 재조합 아데노바이러스, 및 암 치료시 이의 용도를 제공한다. 한 양상에서, 아데노바이러스는 델타-24이다. 다른 양상에서, 암은 원발성 또는 전이성 뇌종양이다.
아데노바이러스 유전자로의 종양 항원을 암호화하는 핵산의 삽입은, 바이러스가 이의 표면에서 종양 항원을 발현하도록 "인 프레임(in frame)"으로 수행되어야 한다.
특정 양상은, 다른 접근법에서 환자의 모집시 제한적 인자인, 종양의 완전한 절제를 요구하지 않는다. 추가로, 현행 방법 및 조성물의 특정 양상은 면역계에서 기억을 생성하고, 종양 재발의 가능성을 방지하거나 감소시키는 잠재력을 갖는다.
용어 "복제 적격 아데노바이러스 벡터(replication competent adenoviral vector)"는, 특정 세포 또는 조직에서 바이러스 복제에 필요한 임의의 유전자 기능이 결핍된 임의의 아데노바이러스 벡터를 의미한다. 벡터는 복제되어 패키징될 수 있어야 하지만, 특정 세포 또는 조직에서 단지 조건에 따라 복제될 수 있어야 한다.
용어 "치료학적 이점(therapeutic benefit)" 또는 "치료(treatment)"는, 전암(pre-cancer), 암 및 과증식성 질환의 치료를 포함하는, 그/그녀 병태의 의학적 치료에 관해서 대상자의 웰빙(well-being)을 촉진하거나 개선하는 모든 것을 의미한다. 이의 불완전한 예의 목록은 임의의 기간만큼의 대상자의 생명 연장, 질환의 신생물 발달의 감소 또는 지연, 과증식의 감소, 종양성장의 감소, 전이의 지연, 암 세포 또는 종양 세포 증식 속도의 감소, 및 대상자의 병태에 기여할 수 있는 대상자에 대한 통증의 감소를 포함한다.
용어 "신경교종"은, 뇌 또는 척수의 신경교세포에서 기원하는 종양을 의미한다. 신경교종은, 성상교세포 및 희돌기교세포와 같은 교세포 형태로부터 유도되므로, 신경교종은 역형성 신경교종, 교아세포종 및 상의세포종뿐만 아니라, 성상세포종 및 희돌기교종을 포함한다. 성상세포종 및 상의세포종은 어린이 및 성인 둘 다에서 뇌 및 척수의 모든 부위에서 발생할 수 있다. 희돌기교종은 통상 성인의 뇌 반구에서 발생한다. 신경교종은 소아에서 뇌종양의 75% 및 성인에서 뇌종양의 45%를 차지한다. 다른 뇌종양은 뇌수막종, 상피세포종, 송과체 부위 종양, 맥락얼기 종양(choroid plexus tumor), 신경상피 종양, 배세포 종양, 말초 신경모세포 종양, 뇌신경 종양, 조혈계 종양, 배아세포종, 및 스텔라 부위(stellar region) 종양이다.
본 발명의 다른 실시형태는 본 출원을 통해 논의된다. 본 발명의 한 양상에 대해 논의된 임의의 실시형태는 본 발명의 다른 양상에 또한 적용되고, 그 반대도 같다. 본원에 기술된 각각의 실시형태는, 본 발명의 모든 양상에 적용될 수 있는 본 발명의 실시형태인 것으로 이해되어야 한다. 본원에 논의된 임의의 실시형태는 본 발명의 임의의 방법 또는 조성물에 대해 실행될 수 있고, 그 반대도 같음이 고려되었다. 추가로, 본 발명의 조성물 및 키트는 본 발명의 방법을 성취하기 위해 사용될 수 있다.
특허청구범위 및/또는 명세서에서 용어 "포함"과 함께 사용되는 경우에 단어 "하나" 또는 "한"("a" 또는 "an")의 사용은 "하나(one)"를 의미할 수 있지만, "하나 이상(one or more)", "적어도 하나(at least one)", 및 "하나 또는 그 이상(one or more than one)"의 의미와도 일치한다.
본 출원을 통해, 용어 "약(about)"은 하나의 값이 그 값을 결정하는데 사용되는 장치 또는 방법에 대한 오차의 표준 편차를 포함함을 나타내기 위하여 사용된다.
특허청구범위에서 용어 "또는(or)"의 사용은, 기술이 단지 대안 및 "및/또는"을 의미하는 정의를 지지함에도 불구하고, 단지 대안을 의미하기 위해 명확히 제시되지 않거나 대안이 상호 배타적이지 않는 한, "및/또는"을 의미하기 위해 사용된다.
본 명세서 및 특허청구범위(들)에서 사용된 바와 같은 단어 "포함하는"(및 "포함한다(comprise 및 comprises)"와 같은 포함의 임의의 형태), "갖는(having)"(및 "가지다(have 및 has)"와 같은 갖는의 임의의 형태), "포함함(including)"(및 "포함하다(includes 및 include)"와 같은 포함함의 임의의 형태) 또는 "함유함(containing)"(및 "함유하다(contains 및 contain)"와 같은 함유함의 임의의 형태)은 포괄적이거나 제약을 두지 않는 것이며, 부가의 나열되지 않은 요소 또는 방법 단계들을 배제하지 않는다.
본 발명의 다른 목적, 특징 및 이점은 하기의 상세한 설명으로부터 분명해질 것이다. 그러나, 상세한 설명 및 특정 실시예는 본 발명의 특정 실시형태를 나타내지만, 본 발명의 취지 및 범위 내에서 다양한 변화 및 변형이 이 상세한 설명으로부터 당해 분야의 숙련가에게 분명할 것이므로, 단지 예시로 제공됨을 이해해야 한다.
도 1. 아데노바이러스 작제물은 단백질을 발현하기 위한 항원 또는 전장 cDNA로서 표시될 에피토프를 삽입하기 위하여 이의 게놈의 몇몇 영역의 변형을 허용한다. 상부 좌측 패널은 3개의 별개의 표면 단백질(각각 섬유 단백질의 HI 루프, 헥손의 초가변성성 영역 5 및 결실된 E3 영역)로 삽입되는 3개의 별개의 종양 항원(면역원성 EGFRvIII 펩타이드, 면역원성 NY-ESO-1 펩타이드 및 전장 MAGE 단백질)을 암호화하는 핵산을 포함하는 게놈을 갖는 아데노바이러스(델타-24-백신)를 도시하고 있다. 이들 항원은 종양분해 효능의 임의의 감소없이 그리고 바이러스 단백질의 발현 사이에 간섭없이 재조합 아데노바이러스의 표면 상에서 발현될 것이다. 암이 있는 환자에 투여되는 경우에, 아데노바이러스는 종양 괴사를 유도할 것이다. 염증성 종양 마이크로환경에서 이들 항원의 발현은 "재-유도된" 항-종양 면역 반응을 트리거(trigger)하기 위하여 마크로파지 및 다른 항원 제시 세포를 구성해야 한다.
도 2. 면역원성 종양 항원을 발현하는 신규 아데노바이러스의 작제물. 패널 A. 면역원성 EGFRvIlI 펩타이드(LEEKKGNYVVT)는 델타-24-백신 섬유 단백질의 HI 루프에서 클론화되었다. 패널 B. HI 루프의 펩타이드를 클론화하기 위해 사용된 기술적 전략이 기술되어 있다(Suzuki et al., Clin. Cancer Res. 7:120-6 (2001)). 섬유 단백질 유전자를 함유하는 플라스미드는 펩타이드(즉 삽입물)을 포함하도록 PCR 돌연변이유발을 사용하여 변형시킨 다음, 델타-24 돌연변이를 포함하는 아데노바이러스 서열의 나머지를 함유하는 플라스미드와 세균에서 동종 재조합시켰다. 그 다음에, 최종 생성물은 293 세포를 사용하여 증폭시켰다.
도 3. 면역원성 EGFRvIlI 펩타이드의 발현. 패널 A는 EGFRvIlI 에피토프가 변형된 델타-24 아데노바이러스의 표면에서 발현됨을 입증하는 웨스턴 블롯을 나타낸다. 도 2에 따라 작제된 EGFRvIlI 에피토프를 함유하는 섬유 단백질을 발현하는 델타-24 아데노바이러스(D24 -EGFRvIlI)는 세포 용해액, 단백질 추출 및 웨스턴 블롯 분석에 적용시켰다. 아데노바이러스 섬유 단백질 또는 EGFRvIlI 펩타이드에 대한 항체를 사용하여, EGFRvIlI 항원의 높은 발현을 확인한다. 액틴은 부하 대조군으로서 사용되었다. 패널 B는 바이러스에 대한 항체(헥손), EGFRvIlI 펩타이드에 대한 항체(EGFRvIlI) 및 4',6-디아미디노-2-페닐인돌(DAPI)을 사용하여 D24-EGFRvIII으로 감염된 암세포의 면역형광 분석을 나타낸다. 영상은 D24-EGFRvIII으로 감염된 세포가 EGFRvIlI 펩타이드를 발현함을 나타낸다. DNA 염색(DAPI)으로 단지 감염된 세포만이 EGFRvIlI 펩타이드를 발현하는 것으로 확인된다. 아데노바이러스 캡시드는 핵에서 어셈블링된다.
도 4. D24-EGFRvIII-감염 세포의 표면에서 EGFRvIlI 에피토프의 표시 평가. HeLa 세포는 50 pfu/cell의 m.o.i.에서 제시된 아데노바이러스로 감염시켰다. 48시간 후, 세포는 마우스 모노클로날 항-EGFRvIIII 항체 L8A4로 염색시켰다. 표면에서 EGFRvIlI 에피토프를 갖는 세포의 %는 유세포 분석으로 평가했다. D24( EGFRvIlI 에피토프를 발현하지 않는 델타-24 아데노바이러스)는 바이러스 감염에 대한 대조군으로서 사용되었다. 마우스 IgG는 항체에 대한 네가티브 대조군으로서 사용되었다.
도 5. 델타-24-RGD는 항-면역 반응을 유도한다. GL261 세포는 C57BL/6 마우스로 두개내 이식했다. 델타-24-RGD는 7일 및 9일째에 종양으로 주입시켰다. 마지막 바이러스 감염 후 7일째에, 마우스 비장세포를 단리시키고, GL261 세포와 함께 배양시켰다. 림프구에 의해 분비된 IFN-γ는 ELISA로 측정했다.
도 6. 델타-24-RGD 처리로 종양 부위에 CD8+ 및 CD4+ T 세포의 보충을 유발한다. GL261 세포는 C57BL/6마리 마우스로 두개내 이식했다. 델타-24-RGD는 7일 및 10일째에 종양으로 주입시켰다. 마지막 바이러스 감염 후 7일째에, 림프구를 뇌로부터 단리시키고, 유세포 분석으로 특성분석했다.
발명의 상세한 설명
본 발명의 방법 및 조성물은 항-종양 치료요법을 개선하기 위한 종양 관련 항원에 대한 면역 반응을 나타내는 아데노바이러스 백신의 작제 및 입증을 포함한다.
I. 아데노바이러스 백신
아데노바이러스(Ad)는 사람을 감염시키는 큰(~36 Kb) DNA 바이러스이지만, 이는 광범위한 숙주 범위를 나타낸다. 물리적으로, 아데노바이러스는 이중-가닥의, 선형 DNA 게놈을 함유하는 20면체 바이러스이다. 사람 아데노바이러스의 대략 50개 혈청형이 있으며, 이는 분자, 면역학적 및 기능적 기준을 근거로 하여 6개의 그룹으로 나뉜다. 성인의 경우, 실제로 모든 사람은 보다 흔한 아데노바이러스 혈청형으로 감염되어 왔으며, 주요 효과는 감기-유사 증상이다.
숙주 세포의 아데노바이러스 감염은 에피솜으로 유지되는 아데노바이러스 DNA를 생성하며, 이는 통합 벡터와 관련된 잠재적인 유전독성을 감소시킨다. 또한, 아데노바이러스는 구조적으로 안정하며, 광범위한 증폭 후 게놈 재배열이 검출되지 않았다. 아데노바이러스는 그들의 세포 주기 단계와 무관하에 실제로 대부분의 상피세포를 감염시킬 수 있다. 지금까지, 아데노바이러스 감염은 사람에서 급성 호흡기 질환과 같은 경미한 질환에만 관련된 것으로 나타나고 있다.
57개 사람 아데노바이러스 혈청형(HAdV-1 내지 57) 중 임의의 것의 구성원은 본 발명에 따르는 하나 이상의 종양 관련 항원 펩타이드를 혼입하거나, 이에 결합되거나, 이와 함께 투여될 수 있다. 사람 Ad5는 유전적으로 및 생화학적으로 잘 특성화되어 있다(GenBank M73260; AC_000008). 따라서, 바람직한 실시형태에서, 아데노바이러스는 복제 적격 Ad5 혈청형 또는 Ad5 성분을 포함하는 하이브리드 혈청형이다. 아데노바이러스는 야생형 균주일 수 있거나, 예를 들면, 종양 세포에서 복제하는 바이러스의 능력에 영향없이 정상적인 정지세포 내에서 복제하는 바이러스의 능력을 약화시킴으로써, 종양 선택성을 개선하기 위하여 유전적으로 변형시킬 수 있다. 본 발명에 의해 포함되는 아데노바이러스의 비-제한적 예는 델타-24, 델타-24-RGD, ICOVIR-5, ICOVIR-7, ONYX-015, ColoAdl, H101 및 AD5/3-D24-GMCSF를 포함한다. Onyx-015는 암 선택성을 개선하기 위하여 E1B-55K 및 E3B 영역에서 결실된 바이러스 혈청형 Ad2 및 Ad5의 하이브리드이다. H101은 Onyx-015의 변형된 버젼이다. ICOVIR-5 및 ICOVIR-7은 E1A의 Rb-결합 부위 결실 및 E2F 프로모터에 의한 E1A 프로모터의 치환을 포함한다. ColoAdl은 키메릭 Add11p/Ad3 혈청형이다. AD5/3-D24-GMCSF(CGTG-102)는 GM-CSF를 암호화하는 혈청형 5/3 캡시드-변형된 아데노바이러스이다(Ad5 캡시드 단백질 노브(knob)는 혈청형 3으로부터의 노브 도메인으로 대체된다).
한 특히 바람직한 실시형태에서, 아데노바이러스는 델타-24 또는 델타-24-RGD이다. 델타-24는 미국 특허 출원 공보 제20030138405호 및 제20060147420호에 기술되어 있으며, 이들 각각은 본원에 인용에 의해 포함된다. 델타-24 아데노바이러스는 아데노바이러스 5형(Ad-5)으로부터 유래되며, 암호화된 E1A 단백질에서 아미노산 120-127에 상응하는 Rb 단백질(뉴클레오티드 923-946)을 결합하는데 관여하는 부위를 포함하는 E1A 유전자의 CR2 부분 내에 24-염기쌍 결실을 함유한다(Fueyo J et al., Oncogene, 19:2-12 (2000)). 델타-24-RGD는 섬유 노브 단백질의 HI 루프로 RGD-4C 서열(이는 ανβ3 및 ανβ5 인테그린에 강력하게 결합된다)의 삽입을 추가로 포함한다(Pasqualini R. et al., Nat Biotechnol, 15:542-546 (1997)). ElA 결실은 암세포에 대한 바이러스의 선택성을 증가시키고; RGD-4C 서열은 신경교종에서 바이러스의 감염성을 증가시킨다.
델타-24의 유의적인 항종양 효과가 세포배양 시스템 및 악성 신경교종 이종이식 모델에서 제시되어 왔다. 델타-24-RGD는 1단계 임상 시험에서 놀라운 항-종양 효과를 나타냈으며, 현재 부가적인 임상 시험의 대상이다. 현 발명의 양상은 이러한 항-종양 효능을 개선하는 것에 관한 것이다.
아데노바이러스의 감염 주기는 2단계로 일어난다: 아데노바이러스 게놈의 복제 개시를 진행하고, 조절 단백질 및 바이러스 DNA의 복제 및 전사에 관여하는 단백질의 생성을 허용하는 초기 단계, 및 구조 단백질의 합성을 유도하는 후기 단계. 초기 유전자는 E1 내지 E4(E는 "초기(early)"를 나타낸다)로 표시되는, 아데노바이러스 게놈에 분산되는 4개 영역에 분포된다. 초기 영역은 적어도 6개의 전사 단위를 포함하며, 이들 각각은 그들 자신의 프로모터를 갖는다. 초기 유전자의 발현은 그 자체로 조절되며, 일부 유전자는 다른 것보다 먼저 발현된다. 3개 영역, E1, E2 및 E4는 바이러스의 복제에 필수적이다. 따라서, 아데노바이러스가 이들 기능 중 하나에 대해 결함이 있다면, 이 단백질은 트랜스로 공급되어야 할 것이고, 또는 바이러스는 복제될 수 없다.
E1 초기 영역은 아데노바이러스 게놈의 5' 말단에 위치하며, 2개의 바이러스 전사 단위, E1A 및 E1B를 함유한다. 이 영역은 바이러스 주기에서 매우 초기에 참여하며, 아데노바이러스의 거의 모든 다른 유전자의 발현에 필수적인 단백질을 암호화한다. 특히, E1A 전사 단위는 E1B, E2A, E2B, E3, E4 영역의 프로모터로부터 전사를 유도하는, 다른 바이러스 유전자 및 후기 유전자의 전사를 전사활성화(transactivate)하는 단백질을 암호화한다. 통상적으로, 외인성 서열은 E3 영역의 전부 또는 일부 대신에 통합된다.
아데노바이러스는 세포 표면 수용체를 통해 허용되는 숙주 세포로 도입된 다음 내재화된다. 복제 주기의 제1 단계에 필요한 특정 바이러스 단백질과 관련된 바이러스 DNA는 감염된 세포의 핵으로 도입되고, 여기서 전사가 개시된다. 아데노바이러스 DNA의 복제는 감염된 세포의 핵에서 일어나며, 세포 복제를 필요로 하지 않는다. 새로운 바이러스 입자 또는 비리온이 어셈블리된 후, 그들은 감염된 세포로부터 방출되어, 다른 허용되는 세포를 감염시킬 수 있다.
본 발명의 양상은 하나 이상의 종양 관련 항원(TAA)을 포함하는 백신의 개발, 제조 및 평가를 포함한다. 아데노바이러스 벡터 시스템은 실현가능한 전달 비히클을 제공할 뿐만 아니라, 항-종양 면역 반응을 나타낼 수 있다. 아데노바이러스는 항암 면역요법 및 심혈관 재혈관화를 포함한 몇몇 치료학적 적응에서 유전자 전달에 사용하기 위해 잘 정립되어 있다.
아데노바이러스는 매력적인 전달 시스템이다. 본 발명의 실시형태는 배치당 1 x 1016 바이러스 입자의 평균 수율을 갖는 현탁 세포 공정을 이용할 수 있다. 본 공정은 단백질, 혈청 및 동물 유래 성분들을 함유하지 않거나 필수적으로 함유하지 않음으로써, 그것을 광범위한 예방학적 및 치료학적 백신 제품 둘 다에 대해 적합하게 만들 수 있다.
몇몇 요인은 뇌종양의 치료를 위한 종양분해성 아데노바이러스의 사용을 뒷받침한다. 첫째로, 신경교종은 통상 국소화되므로, 효율적인 국소 접근법이 질환을 치유하기에 충분해야 한다. 둘째로, 신경교종은 상이한 유전적 이상을 발현하는 몇몇 세포 군집을 하버링한다. 따라서, 암세포에 대한 단일 유전자의 전달에 민감한 종양 범위가 제한될 수 있다. 세째로, 복제 적격 아데노바이러스는 G0에서 정지된 암세포를 감염시켜 파괴할 수 있다. 신경교종은 언제나 비-주기적 세포를 포함하므로, 이 특성은 중요하다. 마지막으로, p16-Rb 경로는 대부분의 신경교종에서 비정상적이므로, 델타-24 전략이 이들 종양의 대부분에 적합하도록 만든다. 망막모세포종 종양 억제 유전자의 손실에도 불구하고, 기능은 다양한 형태의 종양 원인과 관련되어 왔고, 신경교종의 치료로 제한되지 않는다.
아데노바이러스가 복제될 수 없거나 조건에 따라 복제가능하도록(특정 조건하에 복제-가능) 돌연변이되었다면, 헬퍼 세포(helper cell)가 바이러스 복제를 위해 필요할 수 있다. 필요한 경우, 헬퍼 세포주는 사람 세포, 예를 들면, 사람 배아 신장세포, 근세포, 조혈세포 또는 다른 사람 배아 중간엽 또는 상피 세포로부터 유래될 수 있다. 이와 달리, 헬퍼 세포는 사람 아데노바이러스에 대해 허용되는 다른 포유동물 종의 세포로부터 유래될 수 있다. 이러한 세포는, 예를 들면, 베로(Vero) 세포 또는 다른 원숭이 배아 중간엽 또는 상피 세포를 포함한다. 특정 양상에서, 헬퍼 세포주는 293이다. 숙주 및 헬퍼 세포의 다양한 배양 방법이 당해 분야, 예를 들면, 문헌(Racher et al., 1995)에서 확인될 수 있다.
특정 양상에서, 아데노바이러스는 통상 돌연변이체 Rb 경로에 의해 세포에서 복제-가능하다. 형질감염 후, 아데노바이러스 플라크는 아가로스-오버레이드 세포로부터 분리하고, 바이러스 입자는 분석을 위해 팽창시킨다. 상세한 프로토콜에 대해, 숙련가는 문헌(Graham and Prevac, 1991)을 언급한다.
아데노바이러스 벡터의 생성을 위한 대안적 기술은 상보성 아데노바이러스 서열을 함유하는 두 플라스미드를 이용하여 recA+세균 균주에서 생체내 세균 재조합에 세균 인공 염색체(BAC: bacterial artificial chromosome) 시스템, 및 효모 인공 염색체(YAC: yeast artificial chromosome) 시스템의 이용을 포함한다(PCT 공보 95/27071 및 96/33280, 이들은 본원에 인용에 의해 포함된다).
아데노바이러스는 시험관내 및 생체내에서 성장 및 조작하기 용이하고, 광범위한 숙주 범위를 나타낸다. 이 그룹의 바이러스는 높은 역가(예: 109 플라크 형성 단위(pfu)/ml 보다 큼)로 수득될 수 있으며, 그들은 상당히 감염성이다. 아데노바이러스의 라이프 사이클은 숙주세포 게놈으로의 통합을 요하지 않는다.
본원에 기술된 종양분해성 아데노바이러스의 변형은 암을 치료하는 종양분해성 아데노바이러스의 능력을 개선하게 만들 수 있다. 종양분해성 아데노바이러스의 상기 변형이 Jiang 등의 문헌(Curr Gene Ther. 2009 Oct 9(5):422-427)에 기술되어 있고, 미국 특허출원 제20060147420호를 또한 참조한다(이들 각각은 본원에 인용에 의해 포함된다).
몇몇 종양 형태에 대한 낮은 수준의 콕사키바이러스(coxsackievirus) 및 아데노바이러스 수용체(CAR)의 부재 또는 존재가 종양분해성 아데노바이러스의 효능을 제한할 수 있다. 다양한 펩타이드 모티프, 예를 들면, RGD 모티프(RGD 서열은 세포 표면 인테그린의 정상적인 리간드를 모의한다), Tat 모티프, 폴리리신 모티프, NGR 모티프, CTT 모티프, CNGRL 모티프, CPRECES 모티프 또는 스트렙트-표지 모티프를 섬유 노브에 가할 수 있다(Rouslahti and Rajotte, 2000). 모티프는 아데노바이러스 섬유 단백질의 HI 루프로 삽입시킬 수 있다. 캡시드의 변형은 CAR 무관한 표적 세포 감염을 허용한다. 이는 더 큰 복제, 보다 효율적인 감염, 및 종양 세포의 증가된 용해를 허용한다(본원에 인용에 의해 포함됨, Suzuki et al., 2001). 특정한 사람 신경교종 수용체(예: EGFR 또는 uPR)를 결합하는 펩타이드 서열을 또한 가할 수 있다. 암세포의 표면에서 독점적으로 또는 우선적으로 발견되는 특정 수용체가 아데노바이러스 결합 및 감염을 위한 표적으로서 사용될 수 있다(예: EGFRvIII).
II. 발현 카세트(Expression Cassettes)
본 발명의 특정 실시형태에서, 본원에 제시된 방법들은 TAA를 암호화하는 핵산 서열을 포함하며, 이때 핵산은 "발현 카세트"로 구성된다. 용어 "발현 카세트"는 핵산 암호화 서열의 일부 또는 전부가 전사될 수 있는 유전자 생성물(예: 항원 결정 부위)을 암호화하는 핵산을 함유하는 임의의 형태의 유전적 작제물을 포함함을 의미한다.
프로모터 및 인핸서 - 발현 카세트가 전사물의 발현을 수행하기 위하여, 핵산 암호화 유전자는 프로모터의 전사적 제어하에 놓이게 될 것이다. "프로모터"는 개시 및 전사 속도가 제어되는 핵산 서열 영역인 제어 서열이다. 구문 "작동가능하게 위치한(operatively positioned)", "작동가능하게 연결된(operatively linked)", "제어하(under control)" 및 "전사적 제어하(under transcriptional control)"는 프로모터가 그 서열의 전사적 개시 및/또는 발현을 제어하는 핵산 서열과 관련하여 정확한 기능적 위치 및/또는 배향에 존재함을 의미한다. 프로모터는 "인핸서(enhancer)"와 함께 사용되거나 사용되지 않을 수 있으며, 이는 핵산 서열의 전사적 활성화에 관여되는 시스-작용 조절 서열을 의미한다.
대상자의 세포에서 활성이 되는 당해 분야의 숙련가에게 공지된 임의의 프로모터가 본 발명의 방법 및 조성물에 적용될 수 있는 프로모터로서 시도되었다. 당해 분야의 통상의 숙련가 중 누군가는 본 방법 및 조성물에 적용될 수 있는 수많은 형태의 프로모터에 친숙할 것이다. 특정 실시형태에서, 예를 들면, 프로모터는 구성 프로모터, 유도성 프로모터, 또는 억제성 프로모터이다. 프로모터는 또한 조직 선택적 프로모터일 수 있다. 조직 선택적 프로모터는 다른 조직 형태에 비하여 특정 조직 형태에서 비교적 보다 활성인 임의의 프로모터를 의미하는 것으로 본원에서 정의된다. 프로모터의 예는 CMV 프로모터를 포함한다.
프로모터는 세포에서 활성인 것일 것이고, 프로모터로부터의 발현은 대상자의 면역계에 대한 항원 결정 부위의 표시를 유발한다. 예를 들면, 세포가 상피세포인 경우에, 실시형태에 사용된 프로모터는 그 특별한 세포 형태에서 활성을 갖는 것일 것이다.
프로모터는 암호화 절편 및/또는 엑손의 상류에 위치한 5'-비-암호화 서열을 단리시켜 수득될 수 있는 것과 같은 유전자 또는 서열과 본래 관련된 것일 수 있다. 상기 프로모터는 "내인성(endogenous)"으로서 언급될 수 있다. 유사하게, 인핸서는 그 서열의 하류 또는 상류에 위치한, 본래 핵산 서열과 관련된 것일 수 있다. 이와 달리, 특정 이점은 이의 본래 환경하에 핵산 서열과 통상 관련되지 않은 프로모터를 의미하는, 재조합 또는 이종 프로모터의 제어하에 암호화 핵산 절편을 배치시킴으로써 수득될 것이다. 재조합 또는 이종 인핸서도 또한 이의 본래 환경하에 핵산 서열과 통상 관련되지 않은 인핸서를 의미한다. 상기 프로모터 또는 인핸서는 다른 유전자의 프로모터 또는 인핸서, 및 임의의 다른 원핵, 바이러스 또는 진핵 세포로부터 단리된 프로모터 또는 인핸서, 및 "천연으로 존재"하지 않는, 즉 상이한 전사적 조절 영역의 상이한 요소, 및/또는 발현을 변화시키는 돌연변이를 함유하는 프로모터 또는 인핸서를 포함할 수 있다. 프로모터 및 인핸서의 핵산 서열을 합성적으로 제조하는 것 이외에, 서열은 PCR™을 포함한, 재조합 클로닝 및/또는 핵산 증폭 기술을 사용하여 제조할 수 있다(참조: 미국 특허 제4,683,202호 및 제5,928,906호, 각각 본원에 인용에 의해 포함됨).
본래, 발현을 위해 선택된 세포 형태, 세포소기관 및 유기체에서 DNA 절편의 발현을 효과적으로 지시하는 프로모터 및/또는 인핸서를 사용하는 것이 중요할 것이다. 분자생물학 분야의 숙련가는 일반적으로 단백질 발현을 위해 프로모터, 인핸서 및 세포 형태 조합물의 사용을 이해한다(예를 들면, 참조: 본원에 인용에 의해 포함됨, Sambrook et al. (2001)). 프로모터는 이종성 또는 내인성일 수 있다.
관심있는 핵산의 발현을 제어하기 위해 사용되는 특별한 프로모터는 그것이 충분한 수준으로 표적 세포에서 폴리뉴클레오티드를 발현할 수 있는 한, 엄격한 것으로 여겨지지 않는다. 따라서, 사람 세포가 표적인 경우에, 사람 세포에서 발현될 수 있는 프로모터에 인접하게 그리고 이의 제어하에 폴리뉴클레오티드 암호화 영역을 배치하는 것이 바람직하다. 일반적으로 말하면, 상기 프로모터는 사람 또는 바이러스 프로모터를 포함할 수도 있다.
다양한 실시형태에서, 사람 사이토메갈로바이러스(CMV), 전초기(immediate early) 유전자 프로모터, SV40 초기 프로모터 및 라우스 육종 바이러스(Rous sarcoma virus) 긴 말단 반복체가 사용될 수 있다. 폴리뉴클레오티드의 발현을 성취하기 위하여 당해 분야에 잘-공지된, 다른 바이러스 또는 포유동물의 세포성 또는 세균성 파지 프로모터의 사용이 또한 시도되었지만, 단 발현 수준은 면역 반응을 생성하기에 충분하다.
본 발명의 맥락에서 사용될 수 있는 프로모터/요소의 부가적 예는 다음을 포함하며, 이는 모든 가능한 프로모터 및 인핸서 요소를 빠뜨리지 않으려고 한 것이 아니고, 단지 그의 예시인 것이다.
면역글로불린 중쇄(Baneiji et al., 1983; Gilles et al., 1983; Grosschedl et al., 1985; Atchinson et al., 1986, 1987; Imler et al., 1987; Weinberger et al., 1984; Kiledjian et al., 1988; Porton et al.; 1990); 면역글로불린 경쇄(Queen et al, 1983; Picard et al., 1984); T 세포 수용체(Luria et al., 1987; Winoto et al., 1989; Redondo et al; 1990); HLA DQ a 및/또는 DQ β(Sullivan et al., 1987); β 인터페론(Goodbourn et al., 1986; Fujita et al, 1987; Goodbourn et al., 1988); 인터류킨-2(Greene et al., 1989); 인터류킨-2 수용체(Greene et al., 1989; Lin et al., 1990); MHC 그룹 II(Koch et al., 1989); MHC 그룹 II HLA-DRa(Sherman et al, 1989); β-액틴(Kawamoto et al, 1988; Ng et al.; 1989); 근육 크레아틴 키나제(MCK)(Jaynes et al., 1988; Horlick et al., 1989; Johnson et al., 1989); 프리알부민(트랜스티레틴)(Costa et al., 1988); 엘라스타제 I(Omitz et al., 1987); 메탈로티오네인(MTII)(Karin et al., 1987; Culotta et al., 1989); 콜라게나제(Pinkert et al., 1987; Angel et al, 1987); 알부민(Pinkert et al., 1987; Tronche et al, 1989, 1990); a-태아단백질(Godbout et al., 1988; Campere et al., 1989); t-글로빈(Bodine et al., 1987; Perez-Stable et al, 1990); β-글로빈(Trudel et al., 1987); c-fos(Cohen et al., 1987); c-HA-ras(Triesman, 1986; Deschamps et al., 1985); 인슐린(Edlund et al., 1985); 신경세포 부착 분자(NCAM)(Hirsh et al., 1990); a1-항트립신(Latimer et al., 1990); H2B(TH2B) 히스톤(Hwang et al, 1990); 마우스 및/또는 제I형 콜라겐(Ripe et al., 1989); 글루코스-제어 단백질(GRP94 및 GRP78)(Chang et al., 1989); 쥐 성장 호르몬(Larsen et al., 1986); 사람 혈청 아밀로이드(SAA)(Edbrooke et al., 1989); 트로포닌 I(TN I)(Yutzey et al., 1989); 혈소판-유래 성장인자(PDGF)(Pech et al, 1989); 뒤시엔느 근위축증(Duchenne Muscular Dystrophy)(Klamut et al., 1990); SV40(Banerji et al., 1981; Moreau et al, 1981; Sleigh et al., 1985; Firak et al., 1986; Herr et al., 1986; Imbra et al, 1986; Kadesch et al., 1986; Wang et al., 1986; Ondek et al., 1987; Kuhl et al., 1987; Schaffner et al., 1988); 폴리오마(Swartzendruber et al., 1975; Vasseur et al., 1980; Katinka et al, 1980, 1981; Tyndell et al., 1981; Dandolo et al., 1983; de Villiers et al., 1984; Hen et al., 1986; Satake et al., 1988; Campbell and/or Villarreal, 1988); 레트로바이러스(Kriegler et al., 1982, 1983; Levinson et al., 1982; Kriegler et al, 1983, 1984a, b, 1988; Bosze et al, 1986; Miksicek et al., 1986; Celander et al., 1987; Thiesen et al., 1988; Celander et al., 1988; Choi et al., 1988; Reisman et al., 1989); 유두종 바이러스(Campo et al., 1983; Lusky et al, 1983; Wilkie, 1983; Spalholz et al., 1985; Lusky et al., 1986; Cripe et al., 1987; Gloss et al., 1987; Hirochika et al., 1987; Stephens et al., 1987); B형 간염 바이러스(Bulla et al., 1986; Jameel et al., 1986; Shaul et al, 1987; Spandau et al, 1988; Vannice et al., 1988); 사람 면역결핍 바이러스(Muesing et al., 1987; Hauber et al., 1988; Jakobovits et al., 1988; Feng et al., 1988; Takebe et al, 1988; Rosen et al, 1988; Berkhout et al., 1989; Laspia et al, 1989; Sharp et al., 1989; Braddock et al., 1989); 사이토메갈로바이러스(CMV)(Weber et al., 1984; Boshart et al, 1985; Foecking et al., 1986); GALV(Gibbon Ape Leukemia Virus)(Holbrook et al., 1987; Quinn et al., 1989).
인핸서는 본래 동일한 DNA 분자 상에서 먼 위치에 위치한 프로모터로부터의 전사가 증가된 유전적 요소로서 검출되었다. 인핸서와 프로모터 사이에 기본적 차이는 기능적인 것이다. 인핸서 영역은 전반적으로 멀리서 전사를 촉진할 수 있어야 하고; 이는 프로모터 영역이나 이의 성분 요소가 적용될 필요가 없다. 한편, 프로모터는 특별한 부위에서 그리고 특별한 배향으로 RNA 합성의 개시를 지시하는 하나 이상의 요소를 가져야하는 반면에, 인핸서는 이들 특이성이 결여되어 있다. 프로모터 및 인핸서는 종종 중복되고 인접하여, 종종 매우 유사한 모듈 조직화를 갖는 것으로 보여진다. 또한, 임의의 프로모터/인핸서 조합 [진핵성 프로모터 데이터베이스(Eukaryotic Promoter Data Base: EPDB)에 따라]이 또한 유전자의 발현을 유도하기 위하여 사용될 수 있었다. 특정 생리학적 신호에 대한 반응으로 조절되는 프로모터의 추가 선택은 작제물의 유도성 발현을 허용할 수 있다. 예를 들면, 사람 PAI-1 프로모터의 제어하에 폴리뉴클레오티드의 사용시, 발현은 종양 괴사 인자에 의해 유도될 수 있다. 특정 자극에 대한 반응으로 활성화될 수 있는 핵산 서열의 영역인 유도성 요소의 예는 다음을 포함한다(요소/인듀서): MT II/포르볼 에스테르(TFA) 또는 중금속(Palmiter et al., 1982; Haslinger et al., 1985; Searle et al., 1985; Stuart et al., 1985; Imagawa et al., 1987, Karin et al., 1987; Angel et al., 1987b; McNeall et al, 1989); MMTV(마우스 유방 종양 바이러스)/글루코코르티코이드(Huang et al., 1981; Lee et al., 1981; Majors et al., 1983; Chandler et al., 1983; Ponta et al., 1985; Sakai et al., 1988); β-인터페론/폴리(rI)x 또는 폴리(rc)(Tavernier et al., 1983); 아데노바이러스 5 E2/E1A(Imperiale et al., 1984); 콜라게나제/포르볼 에스테르(TPA)(Angel et al., 1987a); 스트로멜리신/포르볼 에스테르(TPA)(Angel et al, 1987b); SV40/포르볼 에스테르(TPA)(Angel et al., 1987b); 쥐 MX 유전자/인터페론, 뉴캐슬병 바이러스(Newcastle Disease Virus)(Hug et al., 1988); GRP78 유전자/A23187(Resendez et al., 1988); a-2-마크로글로불린/IL-6(Kunz et al., 1989); 비멘틴/혈청(Rittling et al., 1989); MHC 그룹 I 유전자 H-2κb/인터페론(Blanar et al., 1989); HSP70/E1A, SV40 큰 T 항원(Taylor et al., 1989, 1990a, 1990b); ㅍ프롤리페린/포르볼 에스테르-TPA(Mordacq et al., 1989); 종양 괴사 인자/PMA(Hensel et al., 1989); 및 갑상선 자극 호르몬, 유전자/갑상선 호르몬(Chatterjee et al., 1989).
개시 신호 - 특정 개시 신호가 또한 암호화 서열의 효율적인 번역에 필요할 수 있다. 이들 신호는 ATG 개시 코돈 또는 인접 서열을 포함한다. ATG 개시 코돈을 포함하는, 외인성 번역 제어 신호가 제공될 필요가 있을 수 있다. 당해 분야의 통상의 숙련가중 누군가는 용이하게 이를 결정하고 필요한 신호를 제공할 수 있을 것이다.
IRES - 본 발명의 특정 실시형태에서, 내부 리보솜 도입 부위(IRES) 요소의 용도가 다중유전자 또는 폴리시스트론 정보를 생성하는데 사용된다. IRES 요소는 5' 메틸화 Cap 의존성 번역의 리보솜 스캐닝 모델을 우회하여, 내부 부위에서 번역을 시작할 수 있다(Pelletier and Sonenberg, 1988). 포유동물 정보로부터의 IRES(Macejak and Sarnow, 1991)뿐만 아니라, 피코나바이러스 그룹의 두 구성원(소아마비 및 뇌심근염)으로부터의 IRES 요소가 기술되어 왔다(Pelletier and Sonenberg, 1988). IRES 요소는 이종성 개방 판독 프레임에 연결될 수 있다. IRES에 의해 각각 분리된, 다중 개방 판독 프레임은 함께 전사되어, 폴리시스트론 정보를 생성할 수 있다(참조: 미국 특허 제5,925,565호 및 제5,935,819호).
다중 클로닝 부위 - 발현 카세트는 다중 클로닝 부위(MCS)를 포함할 수 있으며, 이는 다중 제한효소 부위를 함유하는 핵산 영역으로, 이들 중 임의의 것이 벡터를 분해하기 위해 표준 재조합 기술과 함께 사용될 수 있다.
폴리아데닐화 신호 - 발현시, 통상 전사물의 적절한 폴리아데닐화를 수행하기 위한 폴리아데닐화 신호를 포함할 것이다. 폴리아데닐화 신호의 특성은 본 발명의 성공적인 실행에 대해 결정적인 것으로 여겨지지 않고/않거나, 임의의 상기 서열이 사용될 수 있다. 바람직한 실시형태는 다양한 표적 세포에서 잘 기능하기에 편리하고/하거나 기능하는 것으로 공지된 SV40 폴리아데닐화 신호 및/또는 소 성장 호르몬 폴리아데닐화 신호를 포함한다. 또한, 전사 종결 부위가 발현 카세트의 요소로서 시도되었다. 이들 요소는 정보 수준을 개선하고/하거나, 카세트로부터 다른 서열로 꼼꼼한 판독을 최소화하도록 작용할 수 있다.
다른 발현 카세트 성분 - 본 발명의 특정 실시형태에서, 아데노바이러스 벡터에 의해 감염된 세포는 발현 벡터에 리포터 유전자를 포함함으로써 시험관내 확인할 수 있다. 일반적으로, 선택할 수 있는 리포터는 분비될 수 있도록 하는 특성을 부여하는 것이다. 포지티브 선택가능한 리포터는 리포터 유전자의 존재가 이의 선택을 허용하는 것인 반면에, 네가티브 선택가능한 리포터는 이의 존재가 그의 선택을 방지하는 것이다. 포지티브 선택가능한 마커의 한 예는 약물 내성 마커이다(네오마이신, 푸로마이신, 히그로마이신, DHFR, GPT, 제오신 및 히스티디놀에 대한 내성을 부여하는 유전자). 다른 형태의 리포터는 선별가능한 리포터(예: GFP)이다.
본 발명의 실시형태는 종양 관련 항원을 암호화하는 이종 핵산 절편을 포함하는 아데노바이러스 핵산을 제조함으로써 백신을 생성하도록 디자인된 현 아데노바이러스 플랫폼 기술을 사용할 수 있다. 아데노바이러스 백신 작제물의 양상은 유전 물질을 아데노바이러스 벡터로 삽입시키고, 특성분석을 통해 작제물을 확인하며, 핵산, 바이러스 및 바이러스 생성물의 서열화를 포함한다. 그 다음에, 아데노바이러스 백신은 확장성을 평가하기 위해 디자인된 일련의 타당성 조사를 수행한다.
III. 암 항원
본 발명은 유전적 항암 면역화 및 종양 용해의 개발에 유용하다. 항암 백신화 전략의 개발은 암세포의 특정 마커로서 면역계에 의해 인식됨으로써, 표적으로서 이들 세포를 확인할 수 있는 종양 관련 항원(TAA)의 최근 확인에 의해 합리화되었다. 이들 종양 관련 항원은 종양 세포에 대해 독특한 돌연변이 또는 재배열을 갖는 유전자에 의해 암호화되는 단백질, 재활성화된 배아 유전자, 조직-특이적 미분화 항원, 및 수많은 다른 자가 단백질을 포함한다. 그러나, 이들 표적의 확인에도 불구하고, 효과적인 항암 백신화 전략의 개발은 이들 약한 자가-유래 항원에 대한 성공적인 백신화를 위한 수단의 결여로 상당히 제한되어 왔다. 따라서, 효능있는 항암 관련 항원 면역 반응의 생성이 효율적인 항암 면역화 전략의 개발에 있어서 주요 이슈로서 인식되고 있다.
본 발명의 방법은 질환의 치료 또는 예방에 효과적이다. 많은 질환은 질환 상태와 관련된 특정 항원을 갖는다. 이러한 항원 또는 이들 항원의 면역우성 에피토프가 환자에서 면역 인식 및 질환의 궁극적인 제거 또는 제어에 사용된다. 상기 항원은 보호 항원으로서 당해 분야에서 언급된다.
본 발명의 방법은 암 치료에 사용될 수 있다. 암 형태의 특정 예는, 이들에 제한되는 것은 아니지만, 신경교종, 흑색종, 전이, 선암, 흉선종, 림프종, 육종, 폐암, 간암, 결장암, 비-호지킨 림프종(non-Hodgkins lymphoma), 호지킨 림프종, 백혈병, 자궁암, 유방암, 전립선암, 난소암, 자궁경부암, 방광암, 신장암, 췌장암 등을 포함한다.
용어 흑색종은, 이들에 제한되는 것은 아니지만, 흑색종, 전이성 흑색종, 멜라닌세포 또는 멜라닌세포 관련 신경 세포로부터 유래된 흑색종, 흑색암종, 멜라노에피텔리오마(melanoepithelioma), 흑색육종, 상피내 흑색종, 표재 확장성 흑색종, 결절성 흑색종, 악성 흑자 흑색종, 말단 흑자 흑색종, 침습성 흑색종 또는 가족성 부정형 몰 및 흑색종(FAM-M) 증후군을 포함한다. 포유동물의 이러한 흑색종은 염색체 이상, 퇴행성 성장 및 발달 장애, 분열촉진 제제, 자외선(UV), 바이러스 감염, 유전자의 부적절한 조직 발현, 유전자 발현시 변화 및 세포 상 표시, 또는 발암 물질에 의해 유발될 수 있다. 상기 언급한 암은 본 발명의 방법에 의해 평가하거나 치료될 수 있다. 암의 경우에, 암과 관련된 항원을 암호화하는 유전자가 하나 이상의 면역자극 분자를 암호화하는 유전자와 함께 재조합 바이러스 게놈 또는 이의 부분으로 혼입된다. 암과 관련된 항원은 암세포의 표면에서 발현될 수 있거나, 분비될 수 있거나, 내부 항원일 수 있다. 한 실시형태에서, 암과 관련된 항원은 종양 관련 항원(TAA) 또는 이의 부분이다.
본 발명에 사용될 수 있는 TAA의 예는, 이들에 제한되는 것은 아니지만, MART-1(Kawakami et al. J. Exp. Med. 180:347-352, 1994), MAGE-1, MAGE-3, GP-100, (Kawakami et al. Proc. Nat'l. Acad. Sci. U.S.A. 91:6458-6462, 1994), CEA, TRP-1, TRP-2, P-15, 및 티로시나제(Brichard et al. J. Exp. Med. 178:489, 1993) 등을 포함하는 흑색종 TAA를, 이들에 제한되는 것은 아니지만, 포함한다.
특정 실시형태에서, 아데노바이러스는 이의 표면에 다수의 항원을 발현할 것이다. 특정 양상에서, 2, 3, 4 또는 5개의 항원이 표면에서 발현될 수 있다. 항원은 캡시드 또는 섬유의 일부로서 발현될 수 있거나, 아데노바이러스 감염 및 복제 동안 외인성 단백질의 제시를 증가시키기 위한 자가 소화 작용-관련 단백질(예: LC3)에 연결된 외인성 단백질로서 제조될 수 있다. 다중 항원의 표적화는 일관되고 효과적인 면역 반응 생성을 도울 것이다. 종양 관련 항원(TAA)은, 이들에 제한되는 것은 아니지만, EGFRvIII 펩타이드, 알파 태아 단백질(AFP), 흑색종 관련 항원 - MAGE-1, MAGE-2, MAGE-3, 암배아 항원(CEA)(IIGYVIGTQQATPGPAYSGREII, 서열번호 1), 티로시나제(Tyr), 미드킨(MK), BAGE, CASP-8, β-카테닌, CA-125, CDK-1, ESO-1, gp75, gp100, MART-1, 뮤신(MUC-1), MUM-1, p53, PAP, PSA, PSMA, ras, trp-1 , HER-2, TRP-2, IL13R 알파, AIM-3, NY-ESO1, C9orf112, SART1, BRAP, RTN4, GLEA2, TNKS2, KIAA0376, ING4, HSPH1, C13orf24, RBPSUH, C6orf153, NKTR, NSEP1, U2AF1L, CYNL2, TPR, SOX2, 또는 GOLGA를 포함한다. 본 발명은 어떠한 방법으로든 상기 제시된 TAA를 암호화하는 유전자로 제한되지 않는다. 다른 TAA가 숙련가에게 공지되어 있고, 공지된 방법, 예를 들면, 미국 특허 제4,514,506호에 기술된 것에 의해 용이하게 제조할 수 있다.
IV. 약제학적 조성물
본 발명은 또한 본 발명의 임의의 조성물, 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다. 본 발명은 또한 본 발명의 임의의 조성물을 포함하는 백신 조성물을 제공한다. 백신 조성물은 적어도 하나의 보조제를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명은 또한 대상자에 본 발명의 조성물을 투여함을 포함하는, 대상자에서 항-종양 면역 반응의 자극 방법을 제공한다.
본 발명에 따라, 항원 결정인자와 병용된 아데노바이러스가 대상자에 투여되어 치료학적 또는 예방학적 목적을 위한 면역 반응을 유도한다. 따라서, 특정 실시형태에서, 발현 작제물이 이 목적에 적합한 조성물로 제형화된다. 구문 "약제학적으로(pharmaceutically)" 또는 "약물학적으로 허용됨(pharmacologically acceptable)"은 동물 또는 사람에 투여되는 경우에 역반응, 알러지 반응 또는 다른 뜻밖의 반응을 일으키지 않는 조성물을 의미한다. 본원에 사용된 바와 같은 "약제학적으로 허용되는 담체"는 임의의 및 모든 용매, 담체, 분산 매질, 코팅제, 항균 및 항진균제, 등장성 및 흡수 지연제 등을 포함한다. 약제학적 활성 물질을 위한 상기 매질 및 제제의 사용이 당해 분야에 잘 공지되어 있다. 임의의 통상적인 매질 또는 제제가 본 발명의 발현 작제물과 비혼화성인 한을 제외하고, 치료학적 조성물에서 이의 사용이 시도된다. 보충 활성 성분이 또한 조성물로 혼입될 수 있다. 예를 들면, 보충 활성 성분은 부가의 면역원성 제제일 수 있다.
주사용으로 적합한 약제학적 형태는 멸균 수용액 또는 분산액 및 멸균 주사용 용액 또는 분산액의 임기 제제용 멸균 분말을 포함한다. 모든 경우에, 상기 형태는 멸균되어야 하고, 용이한 주사능이 존재하는 정도로 유체여야 한다. 그것은 제조 및 저장 조건하에 안정해야 하고, 미생물(예: 세균 및 진균)의 오염 작용에 대해 보존되어야 한다. 담체는, 예를 들면, 물, 에탄올, 폴리올(예: 글리세롤, 프로필렌 글리콜 및 액체 폴리에틸렌 글리콜 등), 이의 적절한 혼합물, 및 식물성 오일을 함유하는 용매 또는 분산 매질일 수 있다. 필요하다면, 다양한 항균 및 항진균제, 예를 들면, 파라벤, 클로로부탄올, 페놀, 소르브산, 티메로살 등이 사용될 수 있다. 많은 경우에, 등장성 제제, 예를 들면, 당 또는 염화나트륨을 포함하는 것이 바람직할 것이다. 주사용 조성물의 연장된 흡수는 흡수를 지연하는 제제, 예를 들면, 알루미늄 모노스테아레이트 및 젤라틴의 조성물로 사용함으로써 얻을 수 있다.
멸균 주사용 용액은 상기 명시된 다양한 다른 성분과 함께 적절한 용매에 필요한 양의 화합물을 혼입시킨 다음, 필요에 따라, 여과 살균에 의해 제조한다. 일반적으로, 분산액은 다양한 멸균 활성 성분을 염기성 분산 매질 및 상기 명시된 것으로부터 필요한 다른 성분들을 함유하는 멸균 비히클로 혼입시켜 제조한다. 멸균 주사용 용액의 제조를 위한 멸균 분말의 경우에, 바람직한 제조 방법은 진공-건조 및 동결-건조 기술로, 이는 이의 이미 멸균-여과된 용액으로부터 활성 성분 + 임의의 원하는 부가 성분의 분말을 수득한다.
제형화시, 용액은 투여 제형과 혼화성인 방식으로 그리고, 치료학적으로 또는 예방학적으로 효과적인 양으로 투여될 것이다. 수용액 중 비경구 투여를 위해, 용액은 필요에 따라 적절히 완충시켜야 하고, 액체 희석제는 먼저 충분한 생리식염수 또는 글루코스에 의해 등장성으로 만들었다. 이들 특별한 수용액은 특히 혈관내 및 종양내 투여에 적합하다. 이와 관련하여, 사용될 수 있는 멸균 수성 매질은 본 발명을 고려하여 당해 분야의 숙련가에게 공지되어 있을 것이다.
투여시 일부 변환이 치료할 대상자의 상태에 따라 반드시 일어날 것이다. 투여에 관여하는 사람은 어찌 되었든 개개 대상자에 대해 적절한 용량을 결정할 것이다. 더욱이, 사람에 투여를 위해, 제제는 FDA에서 요하는 바와 같은 멸균성, 발열성, 일반적인 안전성 및 순도 표준에 부합되어야 한다.
투여 - 치료학적 또는 예방학적 제제의 유효량은 의도하는 목적, 예를 들면, 종양에 대한 면역 반응의 자극을 근거로 하여 결정된다. 당해 분야의 숙련가는 생체내 및 생체외 상황에서 유전자 전달을 적용하는 방법을 잘 알고 있다. 바이러스 벡터의 경우, 사람들은 일반적으로 바이러스 벡터 스톡을 제조할 것이다. 바이러스의 종류 및 수득할 수 있는 역가에 따라, 대상자에 적어도 약, 최대 약, 또는 약 l x lO4, l x lO5, l x lO6, l x lO7, l x lO8, l x lO9, l x lO10, l x l011 또는 l x l012의 감염성 입자 또는 그 사이에 임의의 값 또는 범위를 전달할 것이다. 다른 양상에서, 본 발명에 따르는 아데노바이러스는 단일 투여 또는 다중 투여로 투여될 수 있다. 바이러스는 1 x 105 플라크 형성 단위(plaque forming unit: PFU), 5 x 105 PFU, 적어도 1 x 106 PFU, 5 x 106 또는 약 5 x 106 PFU, 1 x 107, 적어도 1 x 107 PFU, 1 x 108 또는 약 1 x 108 PFU, 적어도 1 x 108 PFU, 약 또는 적어도 5 x 108 PFU, 1 x 109 또는 적어도 1 x 109 PFU, 5 x 109 또는 적어도 5 x 109 PFU, 1 x 1010 PFU 또는 적어도 1 x 1010 PFU, 5 x 1010 또는 적어도 5 x 1010 PFU, 1 x 1011 또는 적어도 1 xlO11, 1 x 1012 또는 적어도 1 x 1012, 1 x 1013 또는 적어도 1 x 1013의 용량으로 투여될 수 있다. 예를 들면, 바이러스는 약 107-1013 사이, 약 108-1013 사이, 약 109-1012 사이, 또는 약 108-1012 사이의 용량으로 투여될 수 있다.
본 발명에 따르는 아데노바이러스는 국소 또는 전신으로 투여될 수 있다. 예를 들면, 제한없이, 본 발명에 따르는 종양분해 바이러스는 혈관내(동맥내 또는 정맥내), 종양내, 근육내, 피부내, 복강내, 피하, 경구, 비경구, 비내, 기관내, 피하, 척수내, 안내 또는 두개내로 투여될 수 있다.
본 발명에 따르는 아데노바이러스는 또한 세포성 담체로 투여될 수 있다. 이러한 측면에서, 뉴런 및 간엽 줄기 세포는 높은 이동 잠재력을 갖지만, 종양 조직으로 한정되게 된다. 성인 간엽 세포의 아군(골수 유래 종양 침윤 세포 또는 BM-TICs)이 신경교종으로 주사에 이어서, 전체 종양을 침윤시키는 것으로 제시되어 왔다. 따라서, 본 발명에 따르는 종양분해 바이러스는 바이러스-생성 뉴런 또는 간엽 줄기 세포(예: BM-TIC) 담체로 투여될 수 있다(예를 들면, 담체 세포를 종양으로 주사함으로써).
치료 및 투여 횟수 둘 다에 따라, 투여되는 양은 치료할 대상자, 대상자의 상태 및 원하는 보호에 따라 좌우된다. 치료학적 조성물의 정밀한 양은 또한 의사의 판단에 따라 좌우되며, 각 개체에 대해 특별하다.
하나 이상의 공-자극/보조 분자를 암호화하는 유전자 및/또는 사이토킨을 암호화하는 유전자가 또한 아데노바이러스 게놈으로 혼입되거나, 본 발명의 방법에 사용하기 위한 아데노바이러스와 함께 제형화될 수 있다. 공자극 분자의 예는, 이들에 제한되는 것은 아니지만, B7-1, B7-2, ICAM1, ICAM-2, LFA-1, LFA-3, CD72 등을 포함한다. 본 발명에 포함되는 사이토킨의 예는, 이들에 제한되는 것은 아니지만, 활성화시 조절되는, IL-2, IL-1, IL-3 내지 IL-9, IL-11, IL-13 내지 IL-15, G-CSF, M-CSF, GM-CSF, TNFa, IFNa, IFNγ, IL-10, IL-12, 정상적인 T 발현 및 아마도 분비되는 사이토킨(RANTES) 등을 포함한다. 본 발명에 포함되는 케모킨의 예는, 이들에 제한되는 것은 아니지만, CTAP III, ENA-78, GRO, I-309, PF-4, IP- 10, LD-78, MBSA, MIP-1α 및 MIP1B 등을 포함한다.
SEQUENCE LISTING <110> BOARD OF REGENTS, THE UNIVERSITY OF TEXAS SYSTEM <120> ADENOVIRUSES EXPRESSING HETEROLOGOUS TUMOR-ASSOCIATED ANTIGENS <130> 011863-5003 WO <150> US 61/594,005 <151> 2012-02-02 <160> 7 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 23 <212> PRT <213> carcinoembryonic antigen (CEA) <300> <301> Schrewe,H., Thompson,J., Bona,M., Hefta,L.J., Maruya,A., <302> Cloning of the complete gene for carcinoembryonic antigen: analysis <303> Mol. Cell. Biol. <304> 10 <305> 6 <306> 2738-48 <307> 1990-06-01 <308> GenBank/AAA62835 <309> 1995-03-06 <313> (80)..(102) <400> 1 Ile Ile Gly Tyr Val Ile Gly Thr Gln Gln Ala Thr Pro Gly Pro Ala 1 5 10 15 Tyr Ser Gly Arg Glu Ile Ile 20 <210> 2 <211> 8 <212> PRT <213> EGFRvIII epitope <300> <302> STRUCTURAL ALTERATIONS OF THE EGF RECEPTOR GENES IN HUMAN TUMORS <308> USPTO/US 6,455,498 <309> 2007-10-22 <310> 09/664,752 <311> 2000-09-19 <312> 2002-09-24 <313> (3)..(10) <400> 2 Glu Lys Lys Gly Asn Tyr Val Val 1 5 <210> 3 <211> 8 <212> PRT <213> EGFRvIII epitope <300> <302> STRUCTURAL ALTERATIONS OF THE EGF RECEPTOR GENES IN HUMAN TUMORS <308> USPTO/US 6,455,498 <309> 2007-10-22 <310> 09/664,752 <311> 2000-09-19 <312> 2002-09-24 <313> (2)..(9) <400> 3 Leu Glu Glu Lys Lys Gly Asn Tyr 1 5 <210> 4 <211> 11 <212> PRT <213> EGFRvIII epitope <300> <302> STRUCTURAL ALTERATIONS OF THE EGF RECEPTOR GENES IN HUMAN TUMORS <308> USPTO/US 6,455,498 <309> 2007-10-22 <310> 09/664,752 <311> 2000-09-19 <312> 2002-09-24 <313> (2)..(12) <400> 4 Leu Glu Glu Lys Lys Gly Asn Tyr Val Val Thr 1 5 10 <210> 5 <211> 13 <212> PRT <213> EGFRvIII epitope <300> <302> STRUCTURAL ALTERATIONS OF THE EGF RECEPTOR GENES IN HUMAN TUMORS <308> USPTO/US 6,455,498 <309> 2007-10-22 <310> 09/664,752 <311> 2000-09-19 <312> 2002-09-24 <313> (2)..(14) <400> 5 Leu Glu Glu Lys Lys Gly Asn Tyr Val Val Thr Asp His 1 5 10 <210> 6 <211> 14 <212> PRT <213> EGFRvIII epitope <300> <302> STRUCTURAL ALTERATIONS OF THE EGF RECEPTOR GENES IN HUMAN TUMORS <308> USPTO/US 6,455,498 <309> 2007-10-22 <310> 09/664,752 <311> 2000-09-19 <312> 2002-09-24 <313> (2)..(15) <400> 6 Leu Glu Glu Lys Lys Gly Asn Tyr Val Val Thr Asp His Cys 1 5 10 <210> 7 <211> 14 <212> PRT <213> NY-ESO-1 epitope <300> <301> Chen,Y.T., Scanlan,M.J., Sahin,U., Tureci,O., Gure,A.O., Tsang,S., <302> A testicular antigen aberrantly expressed in human cancers detected <303> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. <304> 94 <305> 5 <306> 1914-8 <307> 1997-03-04 <308> GenBank/U87459 <309> 1997-01-28 <313> (157)..(170) <300> <308> GenBank: AAB49693 <309> 1997-01-28 <313> (157)..(170) <400> 7 Ser Leu Leu Met Trp Ile Thr Gln Cys Phe Leu Pro Val Phe 1 5 10

Claims (25)

  1. 재조합 종양용해성(oncolytic) 아데노바이러스로서,
    상기 재조합 종양용해성 아데노바이러스는 종양 항원을 암호화하는 하나 이상의 이종(heterologous) 핵산 서열들을 포함하는 게놈을 가짐으로써, 상기 종양용해성 아데노바이러스가 이의 표면에 종양 항원(들)을 발현하여 면역 반응을 자극하고, 여기서
    i) 상기 이종 핵산이 헥손 초가변성(hypervariable) 영역 1, 헥손 유전자의 초-가변성 영역 5, 및 섬유 단백질 HI 루프 중 적어도 하나에 삽입되거나, 또는
    ii) 상기 이종 핵산이 단백질 IX에 접합되거나, 또는
    iii) 상기 이종 핵산이 헥손 초가변성(hypervariable) 영역 1, 헥손 유전자의 초-가변성 영역 5, 및 섬유 단백질 HI 루프 중 적어도 하나에 삽입되고, 상기 이종 핵산이 단백질 IX에 접합되는, 재조합 종양용해성 아데노바이러스.
  2. 제1항에 있어서, MAGE-1, MAGE-2, MAGE-3, CEA, 티로시나제, 미드킨, BAGE, CASP-8, β-카테닌, CA-125, CDK-1, ESO-1, gp75, gp100, MART-1, MUC-1, MUM-1, p53, PAP, PSA, PSMA, ras, trp-1, HER-2, TRP-1, TRP-2, IL13R알파, IL13R알파2, AIM-2, AIM-3, NY-ESO-1, C9orf112, SART1, SART2, SART3, BRAP, RTN4, GLEA2, TNKS2, KIAA0376, ING4, HSPH1, C13orf24, RBPSUH, C6orf153, NKTR, NSEP1, U2AF1L, CYNL2, TPR, SOX2, GOLGA, BMI1, COX-2, EGFRvIII, EZH2, LICAM, 리빈, 리빈β, MRP-3, 네스틴, OLIG2, ART1, ART4, B-사이클린, Gli1, Cav-1, 카텝신 B, CD74, E-카드헤린, EphA2/Eck, Fra-1/Fosl 1, GAGE-1, 강글리오사이드/GD2, GnT-V, β1, 6-Ν, Ki67, Ku70/80, PROX1, PSCA, SOX10, SOX11, 서바이빈, UPAR 및 WT-1 또는 이들의 면역원성 펩타이드로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 종양 항원을 각각 암호화하는 1개 내지 5개의 이종 핵산 서열들을 포함함으로써, 상기 아데노바이러스가 이의 표면에 1개 내지 5개의 종양 항원들을 발현하는, 재조합 종양용해성 아데노바이러스.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, CEA 또는 이의 면역원성 펩타이드를 암호화하는 이종 핵산을 포함함으로써, 상기 아데노바이러스가 CEA 또는 이의 면역원성 펩타이드를 포함하는 키메릭(chimeric) 표면 단백질을 발현하는, 재조합 종양용해성 아데노바이러스.
  4. 제3항에 있어서, 상기 CEA의 면역원성 펩타이드가 서열번호 1인, 재조합 종양용해성 아데노바이러스.
  5. 제1항 또는 제2항에 있어서, EGFRvIII 또는 이의 면역원성 펩타이드를 암호화하는 이종 핵산을 포함함으로써, 상기 종양용해성 아데노바이러스가 EGFRvIII 또는 이의 면역원성 펩타이드를 포함하는 키메릭 표면 단백질을 발현하는, 재조합 종양용해성 아데노바이러스.
  6. 제5항에 있어서, 상기 EGFRvIII의 면역원성 펩타이드가 서열번호 2 내지 6으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 재조합 종양용해성 아데노바이러스.
  7. 제1항 또는 제2항에 있어서, 종양 항원을 각각 암호화하는 2개 내지 5개의 이종 핵산 서열들을 포함하는 게놈을 가짐으로써, 상기 종양용해성 아데노바이러스가 이의 표면에 종양 항원들을 발현하는, 재조합 종양용해성 아데노바이러스.
  8. 제1항 또는 제2항에 있어서, MAGE 또는 이의 면역원성 펩타이드를 암호화하는 이종 핵산을 포함하는, 재조합 종양용해성 아데노바이러스.
  9. 제8항에 있어서, 상기 종양용해성 아데노바이러스가 E3 유전자 영역의 일부 또는 전부의 결실을 포함하는, 재조합 종양용해성 아데노바이러스.
  10. 제9항에 있어서, 상기 이종 핵산이, 상기 종양용해성 아데노바이러스의 E3 결실된 유전자 영역으로 삽입됨으로써, 상기 종양용해성 아데노바이러스가 이의 표면에 MAGE 또는 이의 면역원성 펩타이드를 발현하는, 재조합 아데노바이러스.
  11. 제1항 또는 제2항에 있어서, NY-ESO-1 또는 이의 면역원성 펩타이드를 암호화하는 이종 핵산을 포함함으로써, 상기 종양용해성 아데노바이러스가, NY-ESO-1 또는 이의 면역원성 펩타이드를 포함하는 키메릭 표면 단백질을 발현하는, 재조합 종양용해성 아데노바이러스.
  12. 제11항에 있어서, 상기 NY-ESO-1의 면역원성 펩타이드가 서열번호 7인, 재조합 종양용해성 아데노바이러스.
  13. 제1항에 있어서, E3 유전자 영역의 일부 또는 전부의 결실을 갖고,
    a. 상기 종양용해성 아데노바이러스의 헥손 유전자의 초-가변성 영역 5로 삽입되는 CEA 또는 이의 면역원성 펩타이드를 암호화하는 이종 핵산;
    b. 상기 종양용해성 아데노바이러스의 섬유 유전자의 HI 루프 영역으로 삽입되는 EGFRvIII 또는 이의 면역원성 펩타이드를 암호화하는 이종 핵산;
    c. 상기 종양용해성 아데노바이러스의 헥손 유전자의 초-가변성 영역 5로 삽입되는 NY-ESO-1 또는 이의 면역원성 펩타이드를 암호화하는 이종 핵산
    을 포함하는 게놈을 갖는, 재조합 종양용해성 아데노바이러스.
  14. 제1항, 제2항 및 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 아데노바이러스가 사람 아데노바이러스 5형 또는 사람 아데노바이러스 5형 구성성분을 포함하는 하이브리드인, 재조합 종양용해성 아데노바이러스.
  15. 제14항에 있어서, 상기 아데노바이러스가 델타-24 또는 델타-24-RGD인, 재조합 종양용해성 아데노바이러스.
  16. 제1항, 제2항 및 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 아데노바이러스가 ICOVIR-5, ICOVIR-7, ONYX-015, ColoAd1, H101 및 AD5/3-D24-GMCSF로부터 선택되는, 재조합 종양용해성 아데노바이러스.
  17. 제1항, 제2항 및 제13항 중 어느 한 항에 따른 재조합 종양용해성 아데노바이러스를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 환자에서 암을 치료하기 위한, 약제학적 조성물.
  18. 제17항에 있어서, 상기 환자가, 원발성 또는 전이성 뇌암, 흑색종, 선암, 흉선종, 림프종, 육종, 폐암, 간암, 결장암, 비-호지킨 림프종(non-Hodgkins lymphoma), 호지킨 림프종, 백혈병, 자궁암, 유방암, 전립선암, 난소암, 자궁경부암, 방광암, 신장암, 및 췌장암으로부터 선택되는 암을 갖는, 약제학적 조성물.
  19. 제18항에 있어서, 상기 환자가 저등급(low-level) 또는 고등급(high-level) 신경교종을 갖는, 약제학적 조성물.
  20. 제17항에 있어서, 상기 종양용해성 아데노바이러스가 종양내, 혈관내, 또는 뉴런이나 간엽 줄기 세포 담체로의 투여를 위해 제형화되는, 약제학적 조성물.
  21. 제17항에 있어서, 상기 종양용해성 아데노바이러스가 108 내지 1013 플라크 형성 단위(plaque forming unit; pfu)의 용량으로 제조되는, 약제학적 조성물.
  22. 제17항에 있어서, 상기 환자가 사람인, 약제학적 조성물.
  23. 삭제
  24. 삭제
  25. 삭제
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Families Citing this family (36)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2725450T3 (es) 2007-07-02 2019-09-24 Etubics Corp Métodos y composiciones para la producción de un vector adenoviral para su uso en vacunaciones múltiples
SG11201404313YA (en) 2012-01-25 2014-10-30 Dnatrix Inc Biomarkers and combination therapies using oncolytic virus and immunomodulation
US9605276B2 (en) 2012-08-24 2017-03-28 Etubics Corporation Replication defective adenovirus vector in vaccination
AU2014236207B2 (en) 2013-03-14 2019-05-23 Salk Institute For Biological Studies Oncolytic adenovirus compositions
EP3071697B1 (en) * 2013-11-22 2019-10-16 DNAtrix, Inc. Adenovirus expressing immune cell stimulatory receptor agonist(s)
CN104328140B (zh) * 2014-10-08 2018-06-05 兰州大学 一种高嗜性膀胱癌靶向性肿瘤杀伤腺病毒
KR20170102002A (ko) 2015-01-09 2017-09-06 이투빅스 코포레이션 에볼라 바이러스 백신접종을 위한 방법 및 조성물
CN113456812B (zh) 2015-01-09 2024-08-20 埃图比克斯公司 用于联合免疫治疗的方法和组合物
CN104762269A (zh) * 2015-03-18 2015-07-08 红土生物技术有限公司 一种增强肿瘤抗原免疫原性的新策略及其在肺癌免疫治疗中的应用
US11149087B2 (en) * 2015-04-20 2021-10-19 Etubics Corporation Methods and compositions for combination immunotherapy
CA2985029A1 (en) * 2015-05-04 2016-11-10 Vcn Biosciences Sl Oncolytic adenoviruses with mutations in immunodominant adenovirus epitopes and their use in cancer treatment
CN105087648B (zh) * 2015-06-17 2018-05-25 深圳益世康宁生物科技有限公司 携带mage-a3抗原基因的重组腺相关病毒载体及构建方法与应用
CN105087647B (zh) * 2015-06-17 2018-10-02 深圳益世康宁生物科技有限公司 一种携带Survivin抗原基因的重组腺相关病毒载体及其构建方法与应用
WO2017112797A1 (en) 2015-12-22 2017-06-29 Thomas Jefferson University Intra-lesional cmv-based cancer vaccines
FI127460B (en) * 2016-01-15 2018-06-29 Targovax Oy COMBINATION OF ADENOVIRUS AND CHEMOTHERAPY AGENTS FOR CANCER CARE
WO2017147265A1 (en) 2016-02-23 2017-08-31 Salk Institute For Biological Studies High throughput assay for measuring adenovirus replication kinetics
CA3013639A1 (en) 2016-02-23 2017-08-31 Salk Institute For Biological Studies Exogenous gene expression in therapeutic adenovirus for minimal impact on viral kinetics
CN105779480B (zh) * 2016-03-24 2020-03-20 成都康景生物科技有限公司 一种携带多位点突变型egfr新抗原基因的重组腺相关病毒载体及构建方法和应用
WO2017205875A1 (en) 2016-05-27 2017-11-30 Dnatrix, Inc. Adenovirus and immunomodulator combination therapy
CA3045892A1 (en) 2016-12-12 2018-06-21 Salk Institute For Biological Studies Tumor-targeting synthetic adenoviruses and uses thereof
CN110650745A (zh) 2016-12-21 2020-01-03 曼珍有限责任公司 武装复制型溶瘤腺病毒
CN110741080A (zh) * 2017-01-30 2020-01-31 埃皮辛特瑞柯斯公司 多转基因重组腺病毒
EA201990822A1 (ru) 2017-04-12 2020-01-09 Эписентарикс, Инк. Иммуномодулирующие слитые белки
GB201804468D0 (en) 2018-03-21 2018-05-02 Valo Therapeutics Oy PeptiCRAd Cancer Therapy
WO2019237371A1 (zh) * 2018-06-16 2019-12-19 深圳市博奥康生物科技有限公司 定点插入 ct1.1 基因的 cho 细胞株的构建方法及其用途
CN109081873B (zh) * 2018-08-10 2022-04-22 固安鼎泰海规生物科技有限公司 一种抗肿瘤重组nmm融合抗原质粒dna疫苗
US20210340279A1 (en) 2018-08-31 2021-11-04 Yale University Compositions and methods of using cell-penetrating antibodies in combination with immune checkpoint modulators
CN110684800B (zh) * 2018-11-02 2020-11-03 深圳益世康宁生物科技有限公司 一种携带肿瘤-睾丸抗原10基因的重组腺相关病毒载体及其应用价值
JOP20210186A1 (ar) 2019-01-10 2023-01-30 Janssen Biotech Inc مستضدات البروستاتا المستحدثة واستخداماتها
WO2020259189A1 (zh) * 2019-06-27 2020-12-30 北京太东生物科技有限公司 Sox11作为精神分裂症诊断标记物的应用
BR112022001912A2 (pt) 2019-08-05 2022-04-19 Mesoblast Int Sarl Composições celulares compreendendo vetores virais e métodos de tratamento
US12018289B2 (en) 2019-11-18 2024-06-25 Janssen Biotech, Inc. Vaccines based on mutant CALR and JAK2 and their uses
US20240293487A1 (en) * 2020-03-25 2024-09-05 Jin-Woo Choi Immunoevasive anti-tumor adenovirus
CN111850041A (zh) * 2020-07-30 2020-10-30 药鼎(北京)国际细胞医学技术有限公司 一种治疗肝癌的含il12双顺反子的病毒构建体及其用途和构建方法
EP4192940A1 (en) 2020-08-10 2023-06-14 Mesoblast International Sárl Cellular compositions and methods of treatment
WO2024081736A2 (en) 2022-10-11 2024-04-18 Yale University Compositions and methods of using cell-penetrating antibodies

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009117656A2 (en) * 2008-03-21 2009-09-24 Vectorlogics,Inc. Capsid-incorporated antigen for novel adenovirus vaccine

Family Cites Families (37)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4514506A (en) 1982-02-23 1985-04-30 The Government Of The United States As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Method for the identification and purification of human lung tumor-associated antigens (hLTAA) and clinical detection and determination of these antigens
US4683202A (en) 1985-03-28 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying nucleic acid sequences
US5981725A (en) 1989-09-08 1999-11-09 The Johns Hopkins Univiersity Structural alterations of the EGF receptor gene in human tumors
DE4228457A1 (de) 1992-08-27 1994-04-28 Beiersdorf Ag Herstellung von heterodimerem PDGF-AB mit Hilfe eines bicistronischen Vektorsystems in Säugerzellen
US5846945A (en) 1993-02-16 1998-12-08 Onyx Pharmaceuticals, Inc. Cytopathic viruses for therapy and prophylaxis of neoplasia
US7252989B1 (en) 1994-04-04 2007-08-07 Board Of Regents, The University Of Texas System Adenovirus supervector system
FR2722208B1 (fr) 1994-07-05 1996-10-04 Inst Nat Sante Rech Med Nouveau site interne d'entree des ribosomes, vecteur le contenant et utilisation therapeutique
US5846782A (en) 1995-11-28 1998-12-08 Genvec, Inc. Targeting adenovirus with use of constrained peptide motifs
ES2258265T3 (es) 1994-11-28 2006-08-16 Cell Genesys Inc. Vectores de replicacion con especificidad tisular.
DE69628744D1 (de) 1995-04-17 2003-07-24 Univ Texas System Austin Board Adenovirus helfervirus system
US20030026789A1 (en) 1995-05-03 2003-02-06 Richard J. Gregory Gene therapy using replication competent targeted adenoviral vectors
US5928906A (en) 1996-05-09 1999-07-27 Sequenom, Inc. Process for direct sequencing during template amplification
US6080578A (en) 1996-12-31 2000-06-27 Onyx Pharmaceuticals, Inc. Cytopathic adenoviral E1B mutated viruses for therapy and prophylaxis of neoplasia
US6403370B1 (en) 1997-02-10 2002-06-11 Genstar Therapeutics Corporation Oncolytic/immunogenic complementary-adenoviral vector system
JP2002514075A (ja) 1997-03-03 2002-05-14 セル ジェネシス，インコーポレイティド 癌胎児性抗原を発現する細胞に特異的なアデノウイルスベクターおよびその使用方法
US6096718A (en) 1997-06-05 2000-08-01 Gene Targeting Corp. Tissue specific adenovirus vectors for breast cancer treatment
AU2344100A (en) 1998-11-18 2000-06-05 Canji, Inc. Viral vectors with late transgene expression
GB9906815D0 (en) 1999-03-24 1999-05-19 Isrec Anti-neoplastic viral agents
US6824771B1 (en) * 1999-05-12 2004-11-30 The Uab Research Foundation Infectivity-enhanced conditionally-replicative adenovirus and uses thereof
US20040175362A1 (en) 1999-05-12 2004-09-09 Curiel David T. Infectivity-enhanced conditionally-replicative adenovirus and uses thereof
AU1190901A (en) 1999-09-30 2001-04-30 Trustees Of The University Of Pennsylvania, The Replication selective adenoviruses for use in cancer therapy
WO2001028569A1 (en) 1999-10-15 2001-04-26 Canji, Inc. Targeted vectors
US6756044B1 (en) 2000-02-09 2004-06-29 Genvec, Inc. Antigenic complexes and methods
US6740525B2 (en) 2000-02-09 2004-05-25 Genvec, Inc. Adenoviral capsid containing chimeric protein IX
US20030138405A1 (en) 2001-04-17 2003-07-24 Juan Fueyo Conditionally replicative adenovirus to target the Rb and Rb-related pathways
US20030211477A1 (en) * 2002-04-05 2003-11-13 Holmes Kathryn V. Carcinoembryonic antigen cell adhesion molecule 1 (CEACAM1) structure and uses thereof in drug identification and screening
KR101531400B1 (ko) 2003-06-27 2015-06-26 암젠 프레몬트 인코포레이티드 상피 성장 인자 수용체의 결실 돌연변이체 지향 항체 및 그용도
US20070134202A1 (en) 2003-10-15 2007-06-14 The New Industry Reserch Organization Cancer gene therapeutic drug
WO2005086922A2 (en) * 2004-03-10 2005-09-22 Board Of Regents, University Of Texas System Oncolytic adenovirus armed with therapeutic genes
CN101607985B (zh) 2008-12-24 2013-03-27 中国科学院生物物理研究所 抗人cea的单克隆抗体，包含其的组合物，及其用途
US20100297072A1 (en) 2009-05-19 2010-11-25 Depinho Ronald A Combinations of Immunostimulatory Agents, Oncolytic Virus, and Additional Anticancer Therapy
EP2407177A1 (en) * 2010-07-13 2012-01-18 Institut Gustave Roussy Adenovirus vaccine vectors
EP2383577A1 (en) 2010-04-30 2011-11-02 Deutsches Krebsforschungszentrum Diagnostic method for predicting the response of a patient to chemovirotherapy or radiovirotherapy
WO2011140284A2 (en) 2010-05-04 2011-11-10 Fred Hutchinson Cancer Research Center Conditional superagonist ctl ligands for the promotion of tumor-specific ctl responses
FI123955B (en) 2011-11-25 2014-01-15 Oncos Therapeutics Ltd Oncolytic adenovirus
SG11201404313YA (en) 2012-01-25 2014-10-30 Dnatrix Inc Biomarkers and combination therapies using oncolytic virus and immunomodulation
PL3010519T3 (pl) 2013-06-18 2021-09-27 Dnatrix, Inc. Adenowirus onkolityczny do zastosowania w leczeniu nowotworu mózgu

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009117656A2 (en) * 2008-03-21 2009-09-24 Vectorlogics,Inc. Capsid-incorporated antigen for novel adenovirus vaccine

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