KR102093990B1 - 상엽 추출물을 유효 성분으로 포함하는 근위축 예방 및 개선용 조성물 - Google Patents
상엽 추출물을 유효 성분으로 포함하는 근위축 예방 및 개선용 조성물 Download PDFInfo
- Publication number
- KR102093990B1 KR102093990B1 KR1020170144009A KR20170144009A KR102093990B1 KR 102093990 B1 KR102093990 B1 KR 102093990B1 KR 1020170144009 A KR1020170144009 A KR 1020170144009A KR 20170144009 A KR20170144009 A KR 20170144009A KR 102093990 B1 KR102093990 B1 KR 102093990B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- extract
- composition
- muscular dystrophy
- preventing
- muscle
- Prior art date
Links
- 239000000284 extract Substances 0.000 title claims abstract description 162
- 201000006938 muscular dystrophy Diseases 0.000 title claims abstract description 37
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 64
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 26
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 33
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 claims description 24
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 claims description 24
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 claims description 23
- 241000209035 Ilex Species 0.000 claims description 12
- 235000003332 Ilex aquifolium Nutrition 0.000 claims description 12
- 235000002296 Ilex sandwicensis Nutrition 0.000 claims description 12
- 235000002294 Ilex volkensiana Nutrition 0.000 claims description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 9
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 6
- 210000002027 skeletal muscle Anatomy 0.000 claims description 6
- 240000007185 Albizia julibrissin Species 0.000 claims description 4
- 235000011468 Albizia julibrissin Nutrition 0.000 claims description 4
- 241000207199 Citrus Species 0.000 claims description 4
- 235000020971 citrus fruits Nutrition 0.000 claims description 4
- 230000002638 denervation Effects 0.000 claims description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 4
- 235000002710 Ilex cornuta Nutrition 0.000 claims description 3
- 241001310146 Ilex cornuta Species 0.000 claims description 3
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 claims description 3
- 208000020538 atrophic muscular disease Diseases 0.000 claims description 3
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 3
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 claims description 3
- 235000000177 Indigofera tinctoria Nutrition 0.000 claims description 2
- 229940097275 indigo Drugs 0.000 claims description 2
- COHYTHOBJLSHDF-UHFFFAOYSA-N indigo powder Natural products N1C2=CC=CC=C2C(=O)C1=C1C(=O)C2=CC=CC=C2N1 COHYTHOBJLSHDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 201000000585 muscular atrophy Diseases 0.000 abstract description 55
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 42
- 206010028289 Muscle atrophy Diseases 0.000 abstract description 41
- 230000020763 muscle atrophy Effects 0.000 abstract description 41
- 108010011376 AMP-Activated Protein Kinases Proteins 0.000 abstract description 39
- 102000014156 AMP-Activated Protein Kinases Human genes 0.000 abstract description 39
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 abstract description 14
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 abstract description 7
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 abstract description 2
- NOTGFIUVDGNKRI-UUOKFMHZSA-N AICA ribonucleotide Chemical compound NC1=C(C(=O)N)N=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O1 NOTGFIUVDGNKRI-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 58
- RTRQQBHATOEIAF-UHFFFAOYSA-N AICA riboside Natural products NC1=C(C(=O)N)N=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 RTRQQBHATOEIAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 58
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 40
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 18
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 17
- 210000003098 myoblast Anatomy 0.000 description 17
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 16
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 16
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 15
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 14
- 210000001087 myotubule Anatomy 0.000 description 14
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 13
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 12
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 description 12
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 12
- 210000004262 dental pulp cavity Anatomy 0.000 description 11
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 11
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 11
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 210000004209 hair Anatomy 0.000 description 10
- 230000036541 health Effects 0.000 description 9
- 235000019629 palatability Nutrition 0.000 description 9
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 8
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 8
- 102000006275 Ubiquitin-Protein Ligases Human genes 0.000 description 8
- 108010083111 Ubiquitin-Protein Ligases Proteins 0.000 description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 8
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 8
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 8
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 8
- 102000004364 Myogenin Human genes 0.000 description 7
- 108010056785 Myogenin Proteins 0.000 description 7
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 7
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 7
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 7
- XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M propidium iodide Chemical compound [I-].[I-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CCC[N+](C)(CC)CC)=C1C1=CC=CC=C1 XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- MPLLLQUZNJSVTK-UHFFFAOYSA-N 5-[3-[4-[2-(4-fluorophenyl)ethoxy]phenyl]propyl]furan-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(=O)O)=CC=C1CCCC(C=C1)=CC=C1OCCC1=CC=C(F)C=C1 MPLLLQUZNJSVTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102100025014 E3 ubiquitin-protein ligase TRIM63 Human genes 0.000 description 6
- 101710164910 E3 ubiquitin-protein ligase TRIM63 Proteins 0.000 description 6
- 102100040669 F-box only protein 32 Human genes 0.000 description 6
- 101710191029 F-box only protein 32 Proteins 0.000 description 6
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 6
- 101001023030 Toxoplasma gondii Myosin-D Proteins 0.000 description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 6
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 6
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 6
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 6
- 108090000672 Annexin A5 Proteins 0.000 description 5
- 102000004121 Annexin A5 Human genes 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 108010074084 Muscle Proteins Proteins 0.000 description 5
- 102000008934 Muscle Proteins Human genes 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 5
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 5
- -1 calistegin Chemical compound 0.000 description 5
- 230000008859 change Effects 0.000 description 5
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 5
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 5
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 5
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 description 4
- 241000186016 Bifidobacterium bifidum Species 0.000 description 4
- 241001164374 Calyx Species 0.000 description 4
- LXBIFEVIBLOUGU-UHFFFAOYSA-N Deoxymannojirimycin Natural products OCC1NCC(O)C(O)C1O LXBIFEVIBLOUGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- 231100000002 MTT assay Toxicity 0.000 description 4
- 238000000134 MTT assay Methods 0.000 description 4
- 240000000249 Morus alba Species 0.000 description 4
- 235000008708 Morus alba Nutrition 0.000 description 4
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 4
- REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N Quercetin Chemical compound C=1C(O)=CC(O)=C(C(C=2O)=O)C=1OC=2C1=CC=C(O)C(O)=C1 REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 235000021028 berry Nutrition 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 4
- LXBIFEVIBLOUGU-JGWLITMVSA-N duvoglustat Chemical compound OC[C@H]1NC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O LXBIFEVIBLOUGU-JGWLITMVSA-N 0.000 description 4
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 4
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 4
- 230000004660 morphological change Effects 0.000 description 4
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 4
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 4
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 235000013616 tea Nutrition 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 230000006663 ubiquitin-proteasome pathway Effects 0.000 description 4
- AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide Chemical compound [Br-].S1C(C)=C(C)N=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 238000000116 DAPI staining Methods 0.000 description 3
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 3
- 108010040476 FITC-annexin A5 Proteins 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000983397 Holarrhena pubescens Species 0.000 description 3
- 244000199866 Lactobacillus casei Species 0.000 description 3
- 235000013958 Lactobacillus casei Nutrition 0.000 description 3
- 241000218588 Lactobacillus rhamnosus Species 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010240 RT-PCR analysis Methods 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 229940002008 bifidobacterium bifidum Drugs 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 239000000306 component Substances 0.000 description 3
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 3
- 239000000469 ethanolic extract Substances 0.000 description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 3
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 3
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 3
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 3
- 229940017800 lactobacillus casei Drugs 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 3
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 description 3
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 230000001953 sensory effect Effects 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 3
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 3
- GNKZMNRKLCTJAY-UHFFFAOYSA-N 4'-Methylacetophenone Chemical compound CC(=O)C1=CC=C(C)C=C1 GNKZMNRKLCTJAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DVNYTAVYBRSTGK-UHFFFAOYSA-N 5-aminoimidazole-4-carboxamide Chemical compound NC(=O)C=1N=CNC=1N DVNYTAVYBRSTGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000000452 Acetyl-CoA carboxylase Human genes 0.000 description 2
- 108010016219 Acetyl-CoA carboxylase Proteins 0.000 description 2
- 235000006667 Aleurites moluccana Nutrition 0.000 description 2
- 241000186012 Bifidobacterium breve Species 0.000 description 2
- JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N Bioquercetin Natural products CC1OC(OCC(O)C2OC(OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5)C(O)C2O)C(O)C(O)C1O JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010018763 Biotin carboxylase Proteins 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 2
- 241001573881 Corolla Species 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000018700 F-Box Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010066805 F-Box Proteins Proteins 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 2
- 241000983851 Hosta longipes Species 0.000 description 2
- 240000007049 Juglans regia Species 0.000 description 2
- 235000009496 Juglans regia Nutrition 0.000 description 2
- 240000001046 Lactobacillus acidophilus Species 0.000 description 2
- 235000013956 Lactobacillus acidophilus Nutrition 0.000 description 2
- 240000001929 Lactobacillus brevis Species 0.000 description 2
- 235000013957 Lactobacillus brevis Nutrition 0.000 description 2
- 241001468191 Lactobacillus kefiri Species 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 208000002720 Malnutrition Diseases 0.000 description 2
- 240000000366 Melilotus officinalis Species 0.000 description 2
- 235000017822 Melilotus officinalis Nutrition 0.000 description 2
- 241001279838 Pachysandra terminalis Species 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- ZVOLCUVKHLEPEV-UHFFFAOYSA-N Quercetagetin Natural products C1=C(O)C(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=C(O)C(O)=C(O)C=C2O1 ZVOLCUVKHLEPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HWTZYBCRDDUBJY-UHFFFAOYSA-N Rhynchosin Natural products C1=C(O)C(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=CC(O)=C(O)C=C2O1 HWTZYBCRDDUBJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000194020 Streptococcus thermophilus Species 0.000 description 2
- 244000299461 Theobroma cacao Species 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 210000001099 axilla Anatomy 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 239000012148 binding buffer Substances 0.000 description 2
- 235000014121 butter Nutrition 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 2
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 238000001378 electrochemiluminescence detection Methods 0.000 description 2
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 description 2
- IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N eriodictyol 7-O-rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C=C3C(C(C(O)=C(O3)C=3C=C(O)C(O)=CC=3)=O)=C(O)C=2)O1 IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000015203 fruit juice Nutrition 0.000 description 2
- 230000004153 glucose metabolism Effects 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 230000003862 health status Effects 0.000 description 2
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 230000006882 induction of apoptosis Effects 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 239000010978 jasper Substances 0.000 description 2
- MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N kaempferol Natural products OC1=C(C(=O)c2cc(O)cc(O)c2O1)c3ccc(O)cc3 MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940039695 lactobacillus acidophilus Drugs 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 230000037356 lipid metabolism Effects 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 210000000663 muscle cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000027405 negative regulation of phosphorylation Effects 0.000 description 2
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 235000005875 quercetin Nutrition 0.000 description 2
- 229960001285 quercetin Drugs 0.000 description 2
- FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N quercetin rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 2
- 235000005493 rutin Nutrition 0.000 description 2
- IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N rutin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@@H]1OC[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N 0.000 description 2
- ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N rutin Natural products CC1OC(OCC2OC(O)C(O)C(O)C2O)C(O)C(O)C1OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5 ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960004555 rutoside Drugs 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 2
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 2
- YUXKOWPNKJSTPQ-AXWWPMSFSA-N (2s,3r)-2-amino-3-hydroxybutanoic acid;(2s)-2-amino-3-hydroxypropanoic acid Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O.C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O YUXKOWPNKJSTPQ-AXWWPMSFSA-N 0.000 description 1
- UUTKICFRNVKFRG-WDSKDSINSA-N (4R)-3-[oxo-[(2S)-5-oxo-2-pyrrolidinyl]methyl]-4-thiazolidinecarboxylic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CSCN1C(=O)[C@H]1NC(=O)CC1 UUTKICFRNVKFRG-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CJIJXIFQYOPWTF-UHFFFAOYSA-N 7-hydroxycoumarin Natural products O1C(=O)C=CC2=CC(O)=CC=C21 CJIJXIFQYOPWTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 240000000530 Alcea rosea Species 0.000 description 1
- 235000017334 Alcea rosea Nutrition 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 235000017303 Althaea rosea Nutrition 0.000 description 1
- 208000031295 Animal disease Diseases 0.000 description 1
- 108050008874 Annexin Proteins 0.000 description 1
- 102000000412 Annexin Human genes 0.000 description 1
- 240000003291 Armoracia rusticana Species 0.000 description 1
- 235000011330 Armoracia rusticana Nutrition 0.000 description 1
- HDHRTQZSBFUBMJ-UHFFFAOYSA-N Artonin E Natural products O1C2=C3C=CC(C)(C)OC3=CC(O)=C2C(=O)C(CC=C(C)C)=C1C1=CC(O)=C(O)C=C1O HDHRTQZSBFUBMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 241000186018 Bifidobacterium adolescentis Species 0.000 description 1
- 241001608472 Bifidobacterium longum Species 0.000 description 1
- 241000186015 Bifidobacterium longum subsp. infantis Species 0.000 description 1
- 241000186148 Bifidobacterium pseudolongum Species 0.000 description 1
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010009866 Cold sweat Diseases 0.000 description 1
- 241000360771 Coreana Species 0.000 description 1
- 241000099774 Cuscuta salina Species 0.000 description 1
- 230000005778 DNA damage Effects 0.000 description 1
- 231100000277 DNA damage Toxicity 0.000 description 1
- SNRUBQQJIBEYMU-UHFFFAOYSA-N Dodecane Natural products CCCCCCCCCCCC SNRUBQQJIBEYMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000194032 Enterococcus faecalis Species 0.000 description 1
- 241000194031 Enterococcus faecium Species 0.000 description 1
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000008620 Fagopyrum esculentum Species 0.000 description 1
- 235000009419 Fagopyrum esculentum Nutrition 0.000 description 1
- 239000004606 Fillers/Extenders Substances 0.000 description 1
- 102000004315 Forkhead Transcription Factors Human genes 0.000 description 1
- 108090000852 Forkhead Transcription Factors Proteins 0.000 description 1
- 206010017577 Gait disturbance Diseases 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- OVSQVDMCBVZWGM-IDRAQACASA-N Hirsutrin Natural products O([C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)C1=C(c2cc(O)c(O)cc2)Oc2c(c(O)cc(O)c2)C1=O OVSQVDMCBVZWGM-IDRAQACASA-N 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 208000031226 Hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 1
- FVQOMEDMFUMIMO-UHFFFAOYSA-N Hyperosid Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(=O)C2=C(O)C=C(O)C=C2OC1C1=CC=C(O)C(O)=C1 FVQOMEDMFUMIMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000013016 Hypoglycemia Diseases 0.000 description 1
- 241000454172 Imosca coreana Species 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 108010076876 Keratins Proteins 0.000 description 1
- 102000011782 Keratins Human genes 0.000 description 1
- 241000186679 Lactobacillus buchneri Species 0.000 description 1
- 241000186840 Lactobacillus fermentum Species 0.000 description 1
- 241000186606 Lactobacillus gasseri Species 0.000 description 1
- 240000002605 Lactobacillus helveticus Species 0.000 description 1
- 235000013967 Lactobacillus helveticus Nutrition 0.000 description 1
- 241000186605 Lactobacillus paracasei Species 0.000 description 1
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 description 1
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 description 1
- 241000186604 Lactobacillus reuteri Species 0.000 description 1
- 241000186869 Lactobacillus salivarius Species 0.000 description 1
- 241000194038 Lactococcus plantarum Species 0.000 description 1
- 241000194037 Lactococcus raffinolactis Species 0.000 description 1
- 239000012741 Laemmli sample buffer Substances 0.000 description 1
- 241000192129 Leuconostoc lactis Species 0.000 description 1
- 241000192130 Leuconostoc mesenteroides Species 0.000 description 1
- 102100024295 Maltase-glucoamylase Human genes 0.000 description 1
- 241000218213 Morus <angiosperm> Species 0.000 description 1
- 208000028389 Nerve injury Diseases 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- 206010033799 Paralysis Diseases 0.000 description 1
- 229920002230 Pectic acid Polymers 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 241000985694 Polypodiopsida Species 0.000 description 1
- 206010051739 Pulmonary sepsis Diseases 0.000 description 1
- 241000917012 Quercus floribunda Species 0.000 description 1
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 241000872198 Serjania polyphylla Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 244000057717 Streptococcus lactis Species 0.000 description 1
- 235000014897 Streptococcus lactis Nutrition 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 239000008049 TAE buffer Substances 0.000 description 1
- 235000005764 Theobroma cacao ssp. cacao Nutrition 0.000 description 1
- 235000005767 Theobroma cacao ssp. sphaerocarpum Nutrition 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 102000044159 Ubiquitin Human genes 0.000 description 1
- 108090000848 Ubiquitin Proteins 0.000 description 1
- 206010047601 Vitamin B1 deficiency Diseases 0.000 description 1
- HGEVZDLYZYVYHD-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;2-[2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl-(carboxymethyl)amino]acetic acid Chemical compound CC(O)=O.OCC(N)(CO)CO.OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O HGEVZDLYZYVYHD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 235000013334 alcoholic beverage Nutrition 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 108010028144 alpha-Glucosidases Proteins 0.000 description 1
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 1
- 230000000049 anti-anxiety effect Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000003579 anti-obesity Effects 0.000 description 1
- 230000001754 anti-pyretic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 239000002221 antipyretic Substances 0.000 description 1
- 239000002249 anxiolytic agent Substances 0.000 description 1
- 238000009341 apiculture Methods 0.000 description 1
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 230000004900 autophagic degradation Effects 0.000 description 1
- 208000002894 beriberi Diseases 0.000 description 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 1
- 229940004120 bifidobacterium infantis Drugs 0.000 description 1
- 229940009291 bifidobacterium longum Drugs 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000007321 biological mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 235000008429 bread Nutrition 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 235000001046 cacaotero Nutrition 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000014171 carbonated beverage Nutrition 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N carbonic acid Chemical compound OC(O)=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000019219 chocolate Nutrition 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000003624 condensation of chromatin Effects 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000000249 desinfective effect Effects 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 229960001484 edetic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 229940032049 enterococcus faecalis Drugs 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 1
- 238000009313 farming Methods 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- 239000005428 food component Substances 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 235000020542 functional tea Nutrition 0.000 description 1
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 description 1
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000004190 glucose uptake Effects 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 239000010440 gypsum Substances 0.000 description 1
- 229910052602 gypsum Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 230000001744 histochemical effect Effects 0.000 description 1
- 230000002218 hypoglycaemic effect Effects 0.000 description 1
- 235000015243 ice cream Nutrition 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- OVSQVDMCBVZWGM-QCKGUQPXSA-N isoquercetin Natural products OC[C@@H]1O[C@@H](OC2=C(Oc3cc(O)cc(O)c3C2=O)c4ccc(O)c(O)c4)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O OVSQVDMCBVZWGM-QCKGUQPXSA-N 0.000 description 1
- 229940012969 lactobacillus fermentum Drugs 0.000 description 1
- 229940054346 lactobacillus helveticus Drugs 0.000 description 1
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 description 1
- 229940001882 lactobacillus reuteri Drugs 0.000 description 1
- VMPHSYLJUKZBJJ-UHFFFAOYSA-N lauric acid triglyceride Natural products CCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCC VMPHSYLJUKZBJJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 229960003511 macrogol Drugs 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 230000001071 malnutrition Effects 0.000 description 1
- 235000000824 malnutrition Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 239000004570 mortar (masonry) Substances 0.000 description 1
- XFFOMNJIDRDDLQ-UHFFFAOYSA-N morusin Chemical compound O1C2=C3C=CC(C)(C)OC3=CC(O)=C2C(=O)C(CC=C(C)C)=C1C1=CC=C(O)C=C1O XFFOMNJIDRDDLQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WUBUWBUVAKMGCO-UHFFFAOYSA-N morusin Natural products CC(=CCC1=C(Cc2c3C=CC(C)(C)Oc3cc(O)c2C1=O)c4ccc(O)cc4O)C WUBUWBUVAKMGCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004070 myogenic differentiation Effects 0.000 description 1
- 239000005445 natural material Substances 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 201000008383 nephritis Diseases 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 230000008764 nerve damage Effects 0.000 description 1
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 235000012149 noodles Nutrition 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 208000015380 nutritional deficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 235000014571 nuts Nutrition 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 229940126701 oral medication Drugs 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000004792 oxidative damage Effects 0.000 description 1
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 1
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N pectic acid Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)O[C@H](C(O)=O)[C@@H]1OC1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O2)C(O)=O)O)[C@@H](C(O)=O)O1 LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N 0.000 description 1
- 210000000578 peripheral nerve Anatomy 0.000 description 1
- 125000000864 peroxy group Chemical group O(O*)* 0.000 description 1
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 235000013550 pizza Nutrition 0.000 description 1
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 description 1
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000010318 polygalacturonic acid Substances 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 239000012151 protein quantification reagent Substances 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 229940024999 proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 description 1
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 1
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- OVSQVDMCBVZWGM-QSOFNFLRSA-N quercetin 3-O-beta-D-glucopyranoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=C(C=2C=C(O)C(O)=CC=2)OC2=CC(O)=CC(O)=C2C1=O OVSQVDMCBVZWGM-QSOFNFLRSA-N 0.000 description 1
- XXHSUYNZCSBPBG-GZIDCZEMSA-N quercetin 3-beta-gentiotrioside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](OC[C@@H]2[C@H]([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](OC=3C(C4=C(O)C=C(O)C=C4OC=3C=3C=C(O)C(O)=CC=3)=O)O2)O)O1 XXHSUYNZCSBPBG-GZIDCZEMSA-N 0.000 description 1
- XXHSUYNZCSBPBG-UHFFFAOYSA-N quercetin-3-gentotrioside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OCC2C(C(O)C(O)C(OC=3C(C4=C(O)C=C(O)C=C4OC=3C=3C=C(O)C(O)=CC=3)=O)O2)O)O1 XXHSUYNZCSBPBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 235000013580 sausages Nutrition 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 230000035943 smell Effects 0.000 description 1
- 235000011888 snacks Nutrition 0.000 description 1
- 239000000344 soap Substances 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000014347 soups Nutrition 0.000 description 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019590 thick flavour Nutrition 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000001256 tonic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HFTAFOQKODTIJY-UHFFFAOYSA-N umbelliferone Natural products Cc1cc2C=CC(=O)Oc2cc1OCC=CC(C)(C)O HFTAFOQKODTIJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ORHBXUUXSCNDEV-UHFFFAOYSA-N umbelliferone Chemical compound C1=CC(=O)OC2=CC(O)=CC=C21 ORHBXUUXSCNDEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000000112 undernutrition Nutrition 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 238000003026 viability measurement method Methods 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/60—Moraceae (Mulberry family), e.g. breadfruit or fig
- A61K36/605—Morus (mulberry)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23F—COFFEE; TEA; THEIR SUBSTITUTES; MANUFACTURE, PREPARATION, OR INFUSION THEREOF
- A23F3/00—Tea; Tea substitutes; Preparations thereof
- A23F3/16—Tea extraction; Tea extracts; Treating tea extract; Making instant tea
- A23F3/163—Liquid or semi-liquid tea extract preparations, e.g. gels, liquid extracts in solid capsules
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/48—Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/316—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on regeneration or building of ligaments or muscles
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2250/00—Food ingredients
- A23V2250/20—Natural extracts
- A23V2250/21—Plant extracts
- A23V2250/214—Tea
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Botany (AREA)
- Mycology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
본 발명은 상엽 추출물을 유효성분으로 포함하는 근위축 예방 및 개선용 조성물에 관한 것으로, 상기 조성물에 의하면 에너지 균형을 조절하는 AMP-활성화 단백질 키나아제(AMP-actived protein kinase, AMPK)의 활성 억제를 통해, 근위축 증상에 대한 방지 및 개선을 시킬 수 있다.
특히 상기 근위축 증상에 대한 방지 및 개선시키는 상엽 추출물은 상기 근위축 개선 효과가 매우 탁월하고, 사용에 따른 부작용이 없다는 장점을 가진다.
특히 상기 근위축 증상에 대한 방지 및 개선시키는 상엽 추출물은 상기 근위축 개선 효과가 매우 탁월하고, 사용에 따른 부작용이 없다는 장점을 가진다.
Description
본 발명은 상엽 추출물을 유효 성분으로 포함하는 근위축 예방 및 개선용 조성물에 관한 것이다. 보다 구체적으로 AMP-활성화 단백질 키나아제(AMP-actived protein kinase, AMPK)의 활성 억제를 통해, 근위축을 억제할 수 있는 상엽 추출물을 유효 성분으로 포함하는 근위축 예방 및 개선을 위한 기능성 식품 등의 다양한 분야에 활용될 수 있도록 하는 것이다.
단백질 분해 효소의 활성화, 유비퀴틴 결합(ubiquitin conjugation) 및 세포자식(autophagy) 등과 같은 세포 내 변화에 의하여 나타나는 현상인 근위축(muscle atrophy)은 노화 및 영양부족뿐만 아니라 폐혈증, 암 등과 같은 여러 가지 질병에 의하여 유발되는 것으로 알려져 있다.
근위축이 유발되면 근육 단백질 분해를 통한 단백질 함량의 감소 및 근섬유 지름의 감소에 의한 근력 감소 및 피로 저항 감소 등과 같은 현상이 나타난다.
특히 노화에 의한 근위축은 단백질 합성 감소 및 단백질 분해 증가 등에 의하여 유발되며, 결과적으로 운동능력 감소 및 보행 장애 등을 유발함으로서 삶의 질을 현저하게 악화시킬 뿐 만 아니라 사망률을 증가시키는 중요한 원인이 되므로 이를 극복하기 위한 관련 기전을 규명하기 위하여 많은 연구가 진행되고 있다.
AMP- 활성화 단백질 키나아제(AMP-activated protein kinase, AMPK)는 세린-트레오닌 헤테로트리머릭 키나아제(serine-threonine heterotrimeric kinase)로서 에너지 균형을 조절하는 중요한 조절자 및 에너지 센서이다. AMPK는 AMP/ATP 비율(ratio) 증가에 따른 Thr172 인산화에 의하여 활성화되면 에너지 소비 과정을 억제할 뿐만 아니라 혈당 흡수(glucose uptake) 및 지방산 산화(fatty acid oxidation)을 유발함으로서 포도당 및 지질 대사를 조절하는 것으로 알려져 있다.
최근 연구에서 AMPK가 활성화되면 전사인자인 forkhead box O3a(FoxO3a)를 경유하여 근육-특이적인 유비퀴틴 리가아제(muscle-specific ubiquitin ligases)인 muscle atrophy F-box(MAFbx)/atrogin-1 및 muscle RING finger-1(MuRF1)의 증가를 통한 유비퀴틴-프로테아좀(ubiquitin-proteasome) 경로의 활성화를 유발함으로서 근육 단백질 분해에 의한 근위축에 직접적으로 관여하는 것으로 보고되고 있다.
또한 근위축이 유발되면 근원성 분화(myogenic differentiation)에 관여하는 근육-특이적인 역전사 요인(muscle-specific transcription factors)인 MyoD 및 미오게닌(myogenin)의 발현은 상대적으로 감소하는 것으로 알려져 있다
약학 조성물을 천연물 소재로 개발하고 있는 것으로는 대부분 추출물을 이용하여 제품화하고 있어 정확한 약리 기전이 밝혀져 있지 않으나, 경구제로서 복용이 용이하고 독성 및 그에 따른 부작용이 적어 장기간 복용을 할 수 있으므로 그 개발이 활발하게 이루어지고 있다.
이러한 배경 하에서, AMP-활성화 단백질 키나아제(AMP-actived protein kinase, AMPK)의 활성 억제를 통해, 근위축을 억제할 수 있는 천연물 소재의 조성물 개발이 시급한 실정이다.
본 발명의 목적은 에너지 균형을 조절하는 AMP-활성화 단백질 키나아제(AMP-actived protein kinase, AMPK)의 활성 억제를 통해, 근위축 증상에 대한 방지 및 개선을 시킬 수 있는 상엽 추출물을 포함하는 근위축 예방 및 개선용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 상엽 추출물을 포함하는 근위축 예방 및 개선용 조성물을 제공하는 것이다.
또한 본 발명은 상기 상엽 추출물을 유효성분으로 포함하는 근위축의 예방 또는 개선용 조성물을 포함하는 기능성 차, 기타 기능성 식품을 제조할 수 있도록 하여 근위축 예방 또는 개선효과와 함께 기호성 높은 식품을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명의 일 실시예에 따른 근위축 예방 및 개선용 조성물은 상엽(Mori Folium) 추출물을 유효 성분으로 포함하는 상엽 추출물을 유효 성분으로 포함하는 근위축 예방 및 개선용 조성물이다.
상기 상엽 추출물은 물, 탄소수 1 내지 6의 알코올 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 용매로 추출될 수 있다.
상기 근위축은 불용성 근위축(disuse atrophy of muscle), 기계적 자극 부재 및 골격근의 탈신경지배 (denervation) 중 어느 하나 이상에 의한 것이다.
상기 근위축 예방 및 개선용 조성물은 자귀나무(Silk-tree) 추출물을 더 포함할 수 있다.
상기 근위축 예방 및 개선용 조성물은 호랑가시나무(Chinese horned Holly) 추출물을 더 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 일 실시예에 따른 약학 조성물은 상엽 추출물을 유효 성분으로 포함하는 근위축 예방 및 개선용 조성물을 포함할 수 있다.
본 발명의 또 다른 일 실시예에 따른 식품 조성물은 상엽 추출물을 유효 성분으로 포함하는 근위축 예방 및 개선용 조성물을 포함할 수 있다.
본 발명의 또 다른 일 실시예에 따른 차(茶)는 상엽 추출물을 유효 성분으로 포함하는 근위축 예방 및 개선용 조성물을 포함할 수 있다.
이하, 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다.
본 발명의 일 실시예에 따른 근위축 예방 및 개선용 조성물은 상엽(Mori Folium) 추출물을 유효 성분으로 포함할 수 있다.
상엽(桑葉, Mori Folium)은 뽕나무(Moru salba L.)의 잎을 건조한 것으로서 예로부터 각기병, 몸이 붓는 증세, 베인 상처, 식은땀, 중풍 등에 사용되어 왔다. 최근 연구에서 상엽에는 루틴(rutin), 쿼세틴(quercetin), 이소퀘르세틴(isoquercetin), 모라세틴(moracetin), 데옥시노지리마이신(deoxynojirimycin), 칼리스테진(calistegin), GABA, 모루신(morusin), 움벨리페론(umbelliferone) 등이 생리활성 성분이 함유되어 있으며, 항균, 항산화, 항염증, 항불안, 항당뇨, 혈당강하, 고지혈증 억제, 항비만 등과 같은 여러 가지 약리학적 효능을 가지는 것으로 보고되고 있다. 특히 상엽에 함유되어 있는 주요 성분 중 하나인 루틴(rutin)은 중성지방 억제 및 혈중 콜레스테롤 저하 효능이 있는 것으로 알려져 있으며, 쿼세틴(quercetin)은 산화적 스트레스에 의하여 유발되는 DNA 손상 감소 및 염증반응 억제 효능이 있을 뿐 만 아니라 1-데옥시노지리마이신(deoxynojirimycin, 1-DNJ)은 α-글루코시다아제(glucosidase) 저해를 통한 혈당상승 억제 기능을 가지는 것으로 보고되고 있다. 현재까지 발표된 연구 결과에서 알 수 있듯이 상엽은 다양한 약리작용을 가지는 기능성 물질이지만 근위축 억제 효능 및 그에 따른 분자생물학적 기전에 대한 연구는 전무한 실정이다.
본 발명에서 말하는 덖음이란, 물을 더하지 않고 그대로 볶아서 타지 않을 정도로 익히는 것을 말하며, 덖어진 상엽은 일반적인 상엽에 비하여 깊은 향이 발생하여 그 향미가 증진될 수 있을 뿐만 아니라, 상엽에 포함된 AMP-활성화 단백질 키나아제(AMP-actived protein kinase, AMPK)의 활성을 억제하는 유효성분 또는 그 활성이 증진되기 때문에 근위축 예방 및 개선 효과를 높이는데 훨씬 효과적이다.
본 발명에 있어서, '예방'은 상기 조성물의 투여에 의해 근위축을 억제하거나 발병을 지연시키는 모든 행위를 의미하며, '치료'는 상기 조성물의 투여에 의해 근위축 증세가 호전되거나 이롭게 변경하는 행위를 의미한다
상기 근위축은 불용성 근위축(disuse atrophy of muscle), 기계적 자극 부재 및 골격근의 탈신경지배(denervation) 중 어느 하나 이상에 의한 것일 수 있다.
상기 불용성 근위축(disuse atrophy of muscle)은 노화, 질병 등에 의한 활동제한, 오랜 침상생활, 부목(cast)시행 등에 의해 근육의 두께가 감소하는 것을 의미한다. 상기 상엽 추출물은 불용성 근위축에 대한 개선효과가 우수하다.
상기 근위축은 말초신경 손상, 암 및 폐혈증 등의 다양한 임상 질환뿐만 아니라 장기간 침상안정, 사지의 석고 고정 그리고 노화과정 등과 같이 동반된다. 일반적으로 근 위축은 근육 단백질의 감소에 의한 생리학적, 조직화학적 및 생화학적 변화를 동반하며 골격근의 고유 기능의 장애를 초래한다.
상기 골격근의 탈신경지배 (denervation)는 근육 총량 및 근력의 감소, 근섬유 굵기의 감소, 지근섬유가 속근섬유로 바뀌는 근섬유형의 변환, 섬유성 및 지방결합조직량의 증가 등을 특징으로 하는 근육위축을 유발한다.
이러한 근육위축의 기전은, 탈신경 지배된 근육세포에서 미토콘드리아가 수적으로 감소하고 기능이 상이 초래되어 미토콘드리아에서 ROS 생성이 증가하므로 산화적 손상에 의한 근육세포의 세포자연사 세포사멸(apoptosis)이 증가한 결과로 설명될 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 상엽 추출물은 물, 탄소수 1 내지 6의 알코올 및 이들의 혼합 용매로 구성되는 군으로부터 선택된 용매로 추출한 것일 수 있다. 상기 '상엽 추출물'이란 상엽을 추출하여 수득한 추출물을 의미한다.
상기 상엽 추출물은 상엽 분쇄물을 물, 에탄올, 메탄올 등과 같은 탄소수 C1 내지 C6의 알코올과 같은 극성 용매, 또는 알코올과 물의 1:0.1 내지 1:10의 혼합비를 갖는 혼합 용매로 용출할 수 있으며, 바람직하게는 1:3 내지 5 의 에탄올과 물의 혼합비를 가지는 혼합 용매로 용출할 수 있다. 이 때, 추출 온도는 10℃ 내지 100℃, 바람직하게는 실온에서, 추출 기간은 12시간 내지 4일, 바람직하게는 24시간 동안 추출한 추출물 일 수 있다.
여과된 추출물을 진공 회전 농축기로 감압 농축하여 수득한 결과물일 수 있으나, 본 발명의 근위축의 예방 및 개선 효과를 나타낼 수 있는 상엽 추출물인 한, 이에 제한되지 않고, 추출액, 추출액의 희석액 또는 농축액, 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 또는 이의 조정제물 또는 정제물을 모두 포함한다.
상기 상엽은 뽕나무의 줄기, 뿌리, 열매 등에 비하여 근위축의 예방 및 개선 효과가 우수하다. 따라서, 바람직하게는 상엽에 대한 에탄올 추출물을 사용하는 것일 수 있다.
보다 구체적으로, 상기 에탄올은 12 내지 22 중량%인 것일 수 있다. 상기 범위에 의한 추출물은 유효성분의 수득에 가장 유리할 수 있다.
한편 상기 상엽 추출물은 덖어진 상엽을 사용하여 추출물을 제조한 뒤 이를 발효한 것일 수 있다. 상엽 추출물을 발효하여 경우 세포독성이 낮아 상대적으로 높은 농도에서 안정적으로 사용할 수 있는 장점이 있다.
상기 발효에 사용하는 미생물로는 락토바실러스 살리바리우스(Lactobacillus salivarius), 락토바실러스 아시도필루스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis), 락토바실러스 람노수스(Lactobacillus rhamnosus), 락토바실러스 플랜타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus), 락토바실러스 퍼멘툼(Lactobacillus fermentum), 락토바실러스 파라카세이(Lactobacillus paracasei), 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 델브루에키(Lactobacillus delbrueckii), 락토바실러스 레우테리(Lactobacillus reuteri), 락토바실러스 부츠네리(Lactobacillus buchneri), 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri), 락토바실러스 존스니(Lactobacillus johonsonii), 락토바실러스 케피르(Lactobacillus kefir) 등과 같은 유산 바실리, 락토코코스 락티스(Lactococcus lactis), 락토코코스 플랜타룸(Lactococcus plantarum), 락토코코스 라피노락티스(Lactococcus raffinolactis), 엔테로코코스파에칼리스(Enterococcus faecalis), 엔테로코코스 파에시늄(Enterococcus faecium), 스트렙토코코스 터모필리우스(Streptococcus thermophilus), 류코노스톡락티스(Leuconostoc lactis), 류코노스톡 메센테로이드(Leuconostoc mesenteroides) 등과 같은 유산 콕사이 및 비피도박테리움 애닐멀스(Bifidobacterium animals), 비피도 박테리움 비피듐(Bifidobacterium bifidum),비피도박테리움 브레브(Bifidobacterium breve), 비피도박테리움 인판티스(Bifidobacterium infantis), 비피도바테리움 롱굼(Bifidobacterium longum), 비피도박테리움 수도롱굼(Bifidobacterium pseudolongum), 비피도박테리움 터모필룸(Bifidobacterium themophilum), 비피도박테리움 아돌센티스(Bifidobacterium adolescentis) 등과 같은 비피도박테리아를 포함할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 람노수스(Lactobacillus rhamnosus), 비피도 박테리윰 비피듐(Bifidobacterium bifidum) 비피더스균, 비피도 박테리움 브레브(Bifidobacterium breve) 비피더스균, 및 락토바실러스 아시도 필루스(Lactobacillus acidophilus)로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것일 수 있다.
상기 근위축의 예방 또는 개선용 조성물은 자귀나무(Silk-tree) 추출물을 더 포함하는 것일 수 있다.
상기 자귀나무는 부부의 금실을 상징하는 나무로 합환수(合歡樹), 합혼수, 야합수, 유정수라고도 한다. 이런 연유로 산과 들에서 자라는 나무를 마당에 정원수로 많이 심었다. 자귀대의 손잡이를 만드는데 사용되는 나무였기 때문에 자귀나무라고 하며 소가 잘 먹는다고 소쌀나무라고 부르는 곳도 있다.
또한, 나무의 줄기는 굽거나 약간 드러눕는다. 높이 3∼5m이고 큰 가지가 드문드문 퍼지며 작은 가지에는 능선이 있다. 겨울눈의 아린(芽鱗, 겨울눈을 싸고 있는 단단한 비늘 조각)은 2-3개가 있지만 거의 보기 어려울 정도로 작다. 잎은 어긋나고 2회깃꼴겹잎이다. 작은잎은 낫 같이 굽으며 좌우가 같지 않은 긴 타원형이고 가장자리가 밋밋하다. 작은잎의 길이는 6 내지 15mm, 너비는 2.5 내지 4.0mm 정도로서 양면에 털이 없거나 뒷면의 맥 위에 털이 있다.
꽃은 연분홍색으로 6 또는 7월에 피고 작은 가지 끝에 15 내지 20개씩 산형(傘形)으로 달린다. 꽃받침과 화관은 얕게 5개로 갈라지고 녹색이 돈다. 수술은 25개 정도로서 길게 밖으로 나오고 윗부분이 홍색이다. 꽃이 홍색으로 보이는 것은 수술의 빛깔 때문이다. 열매는 9월 말에서 10월 초에 익으며 편평한 꼬투리이고 길이 15cm 내외로서 5 또는 6개의 종자가 들어 있다. 특이한 점은 신경초나 미모사는 외부의 자극에 잎이 붙어버리지만 자귀나무는 해가 지고 나면 펼쳐진 잎이 서로 마주보며 접혀진다.
상기 상엽 추출물에 상기 자귀나무 추출물을 혼합하여 사용하는 경우 혼합사용에 따른 상승효과에 따라 AMP-활성화 단백질 키나아제(AMP-actived protein kinase, AMPK)의 활성을 억제 억제하는 효과가 상승된다. 따라서 보다 적은 함량으로 근위축 예방 및 개선에 우수한 효과를 낼 수 있다.
상기 근위축의 예방 또는 개선용 조성물은 호랑가시나무(Chinese horned Holly) 추출물을 더 포함하는 것일 수 있다.
상기 호랑가시나무는 묘아자나무라고도 한다. 해변가 낮은 산의 양지에서 자란다. 높이 2 내지 3m이고 가지가 무성하며 털이 없다. 잎은 어긋나고 두꺼우며 윤기가 있고 타원상 육각형이며 각점이 예리한 가시로 되어 있다. 꽃은 4 또는 5월에 피고 향기가 있으며 5 또는 6개가 잎겨드랑이에 산형꽃차례로 달린다. 암술은 암술대가 없고 암술머리는 약간 높아져서 4개로 갈라지고 흑색으로 된다. 열매는 둥글고 지름 8 내지 10mm이며 9 또는 10월에 적색으로 익는다. 종자는 4개씩 들어 있고 난형이며 맥문이 있다.
잎은 거풍, 강장 등에 열매는 자음, 강정 등에 사용한다. 번식은 가을에 익은 종자를 채취하여 봄에 파종한다. 한국의(전북 변산반도 이남), 중국 남부에 분포한다.
상기 상엽 추출물에 대하여 상기 자귀나무 추출물 및 호랑가시나무 추출물을 혼합하여 사용하는 경우 각 추출물의 상호 반응에 의한 상승 작용으로 근위축을 예방 또는 개선하는데 효과를 가지는 유효성분이 증가 또는 그 활성이 높아지게 되므로 각 추출물의 단순 조합 이상의 상승효과를 나타낼 수 있다.
바람직하게 상기 근위축 예방 또는 개선용 조성물은 상기 상엽 추출물 100 중량부에 대하여 자귀나무 추출물 1 내지 15 중량부 및 호랑가시나무 추출물 10 내지 40 중량부가 포함된 것일 수 있다. 상기 범위에 의하는 경우 각 추출물의 상호 작용에 의한 상승효과로 임계적 의의가 있는 정도의 상승효과가 발현되며, 상기 범위를 벗어나는 경우 상승효과가 급격히 저하되거나 거의 없게 된다.
또한 더 바람직하게 상기 근위축 예방 또는 개선용 조성물은 상기 상엽 추출물 100 중량부에 대하여 자귀나무 추출물 1 내지 15 중량부, 호랑가시나무 추출물 10 내지 40 중량부 및 땅비싸리 추출물 1 내지 15 중량부를 포함하는 것일 수 있다.
상기 범위에 의하는 경우 각 추출물의 혼합 작용에 의한 보다 높은 상승효과에 의해 AMP-활성화 단백질 키나아제(AMP-actived protein kinase, AMPK)의 활성 억제 효과가 활성화되어, 근위축 예방 및 개선 효과가 높아질 수 있다.
상기 땅비싸리(Kirilow indigo)는 기슭에서 흔히 자라며, 높이는 1m 정도이고 뿌리에서 많은 싹이 나온다. 여러 개의 줄기가 올라오며 가지에 세로로 된 줄 모양의 돌기가 있다. 잎은 어긋나고 홀수 1회 깃꼴겹잎이다. 작은잎은 7∼11개로 두껍고 원형 ·타원형 또는 거꾸로 선 달걀 모양이며 양면에 털이 있다. 길이 2cm 정도의 적자색 꽃이 5 또는 6월에 피고, 잎 겨드랑이에서 총상꽃차례(總狀花序)를 이룬다. 한편 꽃받침은 길이 3mm 정도이며 기판(旗瓣)의 겉에 털이 있다. 열매는 협과(莢果)로 줄 모양이고 10월에 익는다. 중국 만주 등지와 함경북도을 제외한 전국 각지에 분포한다. 농가의 양봉용, 사료용으로도 쓰인다. 유사종으로 꽃이삭이 잎보다 2배 정도 긴 것을 큰땅비싸리(var. coreana), 잎 뒷면에 털이 없는 것을 민땅비싸리(I. coreana)라고 한다.
또한 바람직하게 상기 근위축 예방 또는 개선용 조성물은 전동싸리(Yellow melilot) 추출물, 수호초(Pachysandra terminalis) 추출물 및 비비추(Hosta longipes) 추출물을 더 포함하는 것일 수 있다. 상기 추출물을 더 포함하는 경우 상엽의 텁텁한 향이 중화되고 다른 추출물과 혼합에 의하여 향미가 향상되어 보다 기호성 높은 식품 조성물로 제공될 수 있다.
전동싸리(Yellow melilot)는 초목서(草木犀)·멜리토우스초라고도 한다. 중국 북부 원산이다. 저지대의 풀밭에 자란다. 높이 60 내지 90cm이고 가지가 갈라지며 마르면 향기가 난다. 어릴 때는 털이 있으나 후에 없어진다. 잎은 어긋나고 3개의 작은잎으로 된 겹잎이다. 작은잎은 긴 타원형 또는 거꾸로 선 바소꼴이며 가장자리에 잔 톱니가 있다. 그리고 꽃은 7 또는 8월에 피고 노란색이며 가지 끝이나 잎겨드랑이에서 총상으로 빽빽하게 달린다. 꽃받침에는 잔 털이 있다. 열매는 달걀 모양이며 털이 없고 검게 익는다. 풀 전체를 해열·안질·신장염 등에 약용한다. 꽃이 보다 작고 흰색인 것을 흰전동싸리(M. alba)라고 한다. 모두 목초자원으로 재배하던 것이 번져서 야생으로 자란다.
수호초(Pachysandra terminalis)는 나무 그늘에서 자라며 원줄기가 옆으로 벋으면서 끝이 곧추 서고 녹색이며 처음에는 잔 털이 있으나 점차 없어진다. 높이 30cm 내외로 자란다. 잎은 어긋나지만 윗부분에 모여 달리고 달걀을 거꾸로 세운 듯한 모양이며 윗부분에 톱니가 있다. 잎 표면 맥 위에 잔 털이 있고 밑부분이 좁아져 잎자루가 된다. 또한 꽃은 4 또는 5월에 피고 흰색이며 수상꽃차례에 달린다. 암꽃은 꽃이삭 밑부분에 약간 달리고 수꽃은 윗부분에 많이 달린다. 꽃받침은 4개로 갈라지고 꽃잎은 없다. 수술은 3 내지 5개이고 암술대는 2개로 갈라져서 젖혀진다. 열매는 핵과로서 달걀 모양이고 겉에 털이 없다. 한국, 일본, 사할린섬, 중국에 분포한다.
비비추(Hosta longipes)는 산지의 냇가나 습기가 많은 곳에서 잘 자라며 높이 30 내지 40cm이다. 잎은 모두 뿌리에서 돋아서 비스듬히 자란다. 잎은 타원형이며 끝이 뾰족하고 8 또는 9맥이 있다. 꽃은 연한 자줏빛으로 7 또는 8월에 피고 한쪽으로 치우쳐서 총상으로 달리며 꽃줄기는 길이 30 내지 40cm이다. 포는 얇은 막질이고 자줏빛이 도는 흰색이며 작은꽃자루의 길이와 거의 비슷하다. 화관은 끝이 6개로 갈라져서 갈래조각이 약간 뒤로 젖혀지고 6개의 수술과 1개의 암술이 길게 꽃 밖으로 나온다. 열매는 삭과로 긴 타원형이다. 종자는 검은색으로서 가장자리에 날개가 있다. 연한 순을 식용하며 관상용으로 심는다. 야생종은 한국·일본·중국 등지에 분포한다. 비비추는 원예종으로 다양한 품종이 개발되어 외국에서 정원식물로 인기가 높다.
바람직하게 상기 근위축 예방 또는 개선용 조성물은 상기 상엽 추출물 100 중량부에 대하여 전동 싸리 추출물 2 내지 3 중량부, 수호초 추추물 3 내지 12 중량부 및 비비추 추출물 3 내지 12 중량부를 포함하는 것일 수 있다.
상기 범위에 의하는 경우 상엽 추출물의 AMP-활성화 단백질 키나아제(AMP-actived protein kinase, AMPK)의 활성 억제를 증진시키면서도 그 향미가 크게 개선되어 근위축 예방 및 개선 효과를 내고 기호성이 매우 우수한 기능성 식품 조성물을 제공될 수 있다, 특히 기호성이 높아 널리 보급하는데 매우 유리한 장점을 가진다.
더 바람직하게는 상기 근위축 예방 또는 개선용 조성물은 상기 상엽 추출물 100 중량부에 대하여 자귀나무 추출물 1 내지 15 중량부, 호랑가시나무 추출물 10 내지 40 중량부 및 땅비싸리 추출물 1 내지 15 중량부를 포함하고, 전동 싸리 추출물 1 내지 3 중량부, 수호초 추추물 3 내지 12 중량부, 비비추 추출물 3 내지 12 중량부를 포함하는 것일 수 있다.
상기 범위에 의하는 경우 각 추출물의 혼합 작용에 의한 상승효과로 AMP-활성화 단백질 키나아제(AMP-actived protein kinase, AMPK)의 활성의 억제 효과가 크게 높아지게 되어 근위축 예방 및 개선 효과가 극대화 될 뿐만 아니라 각 조합에 따른 향미가 우수하여 대단히 높은 기호성을 나타내어 기능성 및 기호성 높은 식품 조성물로 제공되도록 할 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함할 수 있다. 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 조성물은 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구 투여를 위한 고형제제에는 정제환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함될 수 있으며, 이러한 고형제제는 하나 이상의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구투여를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들어 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결 건조제제, 좌제가 포함될 수 있다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테로 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
또한, 본 발명의 약학 조성물은 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제 및 좌제로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가질 수 있다.
본 발명의 상엽 추출물은 예로부터 식용 및 약용으로 사용되어 온 것으로 그 투여용량에 특별한 제약은 없고, 체내 흡수도, 체중, 환자의 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설율, 질환의 중증도 등에 따라 변화될 수 있다. 일반적으로 상엽 추출물은 바람직하게는 체중 1 kg당 10 내지 1000 mg 정도를 투여할 수 있으며, 보다 바람직하게는 체중 1 kg당 50 내지 500 mg 정도 투여할 수 있다. 본 발명의 상엽 추출물을 유효성분으로 포함하는 약학 조성물은 유효량 범위를 고려하여 제조하도록 하며, 이렇게 제형화된 단위 투여형 제제는 필요에 따라 약제의 투여를 감시하거나 관찰하는 전문가의 판단과 개인의 요구에 따라 전문화된 투약법을 사용하거나 일정 시간 간격으로 수회 투여할 수 있다.
본 발명은 또한, 상엽 추출물을 유효성분으로 포함하는 근위축의 예방 또는 개선용 의약외품 조성물을 제공한다. 상기 상엽 추출물의 제조 및 구성에 관해서는 상기에서 설명한 바와 같다. 보다 구체적으로, 본 발명의 상엽 추출물은 근위축의 예방 또는 치료를 목적으로 의약외품 조성물에 첨가할 수 있다.
본 발명에 있어서 '의약외품'은 사람이나 동물의 질병을 치료, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용되는 섬유, 고무제품 또는 이와 유사한 것, 인체에 대한 작용이 약하거나 인체에 직접 작용하지 아니하며, 기구 또는 기계가 아닌 것과 이와 유사한 것, 감염형 예방을 위하여 살균, 살충 및 이와 유사한 용도로 사용되는 제제 중 하나에 해당하는 물품으로서, 사람이나 동물의 질병을 진단, 치료, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용하는 물품 중 기구, 기계 또는 장치가 아닌 것 및 사람이나 동물의 구조와 기능에 약리학적 영향을 줄 목적으로 사용하는 물품 중 기구, 기계 또는 장치가 아닌 것을 제외한 물품을 의미한다.
본 발명의 상엽 추출물을 의약외품 첨가물로 사용할 경우, 상기 상엽 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 의약외품 또는 의약외품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효성분의 혼합량은 사용 목적에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
본 발명의 의약외품 조성물은 이에 제한되지는 않으나, 상세하게는 소독청결제, 샤워폼, 가그린, 물티슈, 세제 비누, 핸드워시, 가습기 충진제, 마스크, 연고제 또는 필터 충진제일 수 있다.
본 발명은 또한, 상엽 추출물을 유효성분으로 포함하는 근위축의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다. 상기 상엽 추출물의 제조 및 구성에 관해서는 상기에서 설명한 바와 같다. 보다 구체적으로, 본 발명의 상엽 추출물은 근위축의 예방 또는 치료를 목적으로 건강기능식품 조성물에 첨가할 수 있다.
본 발명의 상엽 추출물을 건강기능식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 상엽 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 건강기능식품 또는 건강기능식품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효성분의 혼합량은 사용 목적에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
본 발명의 건강기능식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 추출 혼합물을 첨가할 수 있는 건강기능식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있고, 통상적인 의미에서의 건강기능식품을 모두 포함할 수 있으며, 동물을 위한 사료로 이용되는 식품을 포함할 수 있다. 상기 외에 본 발명의 건강기능식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.
본 발명은 또한, 상기 조성물을 인간을 제외한 근위축 의심 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 근위축의 치료 방법을 제공한다.
본 발명에서 상기 근위축 의심 개체는 근위축이 발병하였거나 발병할 수 있는 모든 동물을 의미하며, 본 발명의 상엽 추출물을 포함하는 약학 조성물을 근위축 질환 의심 개체에 투여함으로써, 개체를 효율적으로 치료할 수 있다.
본 발명에 있어서 '투여'는 어떠한 적절한 방법으로 근위축 의심 개체에게 본 발명의 약학 조성물을 도입하는 것을 의미하며, 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 경구 또는 비경구의 다양한 경로를 통하여 투여될 수 있다.
본 발명의 치료 방법은 상엽 추출물을 유효성분으로 포함하는 약학 조성물을 약학적 유효량으로 투여하는 것을 포함할 수 있다. 적합한 총 1일 사용량은 올바른 의학적 판단범위 내에서 처치의에 의해 결정될 수 있으며, 1회 또는 수회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나 본 발명의 목적상, 특정 환자에 대한 구체적인 치료적 유효량은 달성하고자 하는 반응의 종류와 정도, 경우에 따라 다른 제제가 사용되는지의 여부를 비롯한 구체적 조성물, 환자의 연령, 체중, 일반 건강 상태, 성별 및 식이, 투여 시간, 투여 경로 및 조성물의 분비율, 치료기간, 구체적 조성물과 함께 사용되거나 동시 사용되는 약물을 비롯한 다양한 인자와 의약 분야에 잘 알려진 유사 인자에 따라 다르게 적용하는 것이 바람직하다.
본 발명의 조성물에 의하면 에너지 균형을 조절하는 AMP-활성화 단백질 키나아제(AMP-actived protein kinase, AMPK)의 활성 억제를 통해, 근위축 증상에 대한 방지 및 개선을 시킬 수 있다.
특히 상기 근위축 증상에 대한 방지 및 개선시키는 상엽 추출물은 상기 근위축 개선 효과가 매우 탁월하고, 사용에 따른 부작용이 없다는 장점을 가진다.
따라서 본 발명에 따른 근위축 증상에 대한 방지 및 개선시키는 상엽 추출물을 사용하는 경우 종래의 상엽의 향균 효과 내지 상엽 그 자체의 향미에 기초한 식감 향상에서 벗어나 상기 근위축 효과의 개선을 위한 용도로서 기능성 식품 내지 약학적 제재 등 다양한 제형을 제조하여 상엽을 폭넓게 활용할 수 있다는 장점을 가진다.
도 1은 C2C12 근모세포에 AICAR를 24시간 동안 처리하고, trypan blue 염색을 실시한 후 헤모사이토미터(hemocytometer)를 이용하여 살아있는 세포의 수를 계수하여 비교한 결과이다.
도 2는 C2C12 근모세포에 AICAR를 24시간 동안 처리하고, AICAR가 유발하는 성장억제 정도를 알아보기 위하여 MTT 분석시험(assay)를 실시한 결과이다.
도 3은 C2C12 근모세포에 AICAR를 24시간 동안 처리하고, 세포사멸(apoptosis) 유발 시 나타나는 핵의 형태변화를 확인하기 위하여 DAPI 염색을 실시한 결과이다.
도 4는 C2C12 근모세포에 AICAR를 24시간 동안 처리하고, annexin V-FITC/PI로 염색한 후 유세포 분석을 실시한 결과이다.
도 5는 AICAR에 의해 유도된 세포 사멸 정도를 정량화하기 위해, 세포를 ITC-conjugated Annexin V and PI로 DNA 유세포 분석을 위해 염색한 것으로, 세포 사멸 세포는 annexin V+/PI- 세포 및 각 annexin V +/PI- 세포의 %를 세어 측정한 결과이다.
도 6은 C2C12 근아세포의 AICAR 처리에 의한 위축-처리된 단백질의 발현 레벨에 관한 것이다.
도 7은 C2C12 근아세포의 AICAR 처리에 의한 위축-처리된 단백질의 발현 레벨에 관한 것이다.
도 8은 AICAR 처리에 따른 C2C12 근관세포의 형태적 특징에 관한 결과이다.
도 9는 AICAR 처리에 따른 C2C12 근관세포 근섬유의 지름에 관한 결과이다.
도 10은 AICAR에 의하여 유발되는 근위축과 관련하여 근육-특이적인 유비퀴틴 리가아제(muscle-specific ubiquitin ligases) 및 근육-특이적인 역전사 요인(muscle-specific transcription factors)의 발현에 어떠한 영향을 미치는지 mRNA 수준에서 확인한 결과에 관한 것이다.
도 11은 AICAR에 의하여 유발되는 근위축과 관련하여 근육-특이적인 유비퀴틴 리가아제(muscle-specific ubiquitin ligases) 및 근육-특이적인 역전사 요인(muscle-specific transcription factors)의 발현에 어떠한 영향을 미치는지 단백질 수준에서 확인한 결과에 관한 것이다.
도 12는 C2C12 근관세포에서 AMPK 활성제인 AICAR에 의하여 유발되는 근위축 과정에서 상엽 추출물이 미치는 영향을 확인하기 위한 것으로, 상엽 추출물 및 AICAR 처리에 따른 세포독성을 가지지 않는 조건을 설정한 후 C2C12 근관세포의 형태적 특징을 확인한 결과에 관한 것이다.
도 13은 C2C12 근관세포에서 AMPK 활성제인 AICAR에 의하여 유발되는 근위축 과정에서 상엽 추출물이 미치는 영향을 확인하기 위한 것으로, 상엽 추출물 및 AICAR 처리에 따른 세포독성을 가지지 않는 조건을 설정한 후 C2C12 근섬유 지름을 확인한 결과에 관한 것이다.
도 14는 C2C12 근관세포에서 AMPK 활성제인 AICAR에 의하여 유발되는 근위축 과정에서 상엽 추출물이 미치는 영향을 확인하기 위한 것으로, 상엽 추출물 및 AICAR 처리에 따른 세포독성을 가지지 않는 조건을 설정한 후 C2C12 근관세포의 형태적 특징 및 근섬유 지름에 대한 현미경 사진 결과이다.
도 15는 무작위로 선택된 필드에서 근섬유 지름을 이미지 분석 프로그램을 사용하여 계량한 결과이다.
도 16은 상엽 추출물에 의한 근위축 억제와 관련된 유전자들의 변화를 확인한 결과에 관한 것이다.
도 2는 C2C12 근모세포에 AICAR를 24시간 동안 처리하고, AICAR가 유발하는 성장억제 정도를 알아보기 위하여 MTT 분석시험(assay)를 실시한 결과이다.
도 3은 C2C12 근모세포에 AICAR를 24시간 동안 처리하고, 세포사멸(apoptosis) 유발 시 나타나는 핵의 형태변화를 확인하기 위하여 DAPI 염색을 실시한 결과이다.
도 4는 C2C12 근모세포에 AICAR를 24시간 동안 처리하고, annexin V-FITC/PI로 염색한 후 유세포 분석을 실시한 결과이다.
도 5는 AICAR에 의해 유도된 세포 사멸 정도를 정량화하기 위해, 세포를 ITC-conjugated Annexin V and PI로 DNA 유세포 분석을 위해 염색한 것으로, 세포 사멸 세포는 annexin V+/PI- 세포 및 각 annexin V +/PI- 세포의 %를 세어 측정한 결과이다.
도 6은 C2C12 근아세포의 AICAR 처리에 의한 위축-처리된 단백질의 발현 레벨에 관한 것이다.
도 7은 C2C12 근아세포의 AICAR 처리에 의한 위축-처리된 단백질의 발현 레벨에 관한 것이다.
도 8은 AICAR 처리에 따른 C2C12 근관세포의 형태적 특징에 관한 결과이다.
도 9는 AICAR 처리에 따른 C2C12 근관세포 근섬유의 지름에 관한 결과이다.
도 10은 AICAR에 의하여 유발되는 근위축과 관련하여 근육-특이적인 유비퀴틴 리가아제(muscle-specific ubiquitin ligases) 및 근육-특이적인 역전사 요인(muscle-specific transcription factors)의 발현에 어떠한 영향을 미치는지 mRNA 수준에서 확인한 결과에 관한 것이다.
도 11은 AICAR에 의하여 유발되는 근위축과 관련하여 근육-특이적인 유비퀴틴 리가아제(muscle-specific ubiquitin ligases) 및 근육-특이적인 역전사 요인(muscle-specific transcription factors)의 발현에 어떠한 영향을 미치는지 단백질 수준에서 확인한 결과에 관한 것이다.
도 12는 C2C12 근관세포에서 AMPK 활성제인 AICAR에 의하여 유발되는 근위축 과정에서 상엽 추출물이 미치는 영향을 확인하기 위한 것으로, 상엽 추출물 및 AICAR 처리에 따른 세포독성을 가지지 않는 조건을 설정한 후 C2C12 근관세포의 형태적 특징을 확인한 결과에 관한 것이다.
도 13은 C2C12 근관세포에서 AMPK 활성제인 AICAR에 의하여 유발되는 근위축 과정에서 상엽 추출물이 미치는 영향을 확인하기 위한 것으로, 상엽 추출물 및 AICAR 처리에 따른 세포독성을 가지지 않는 조건을 설정한 후 C2C12 근섬유 지름을 확인한 결과에 관한 것이다.
도 14는 C2C12 근관세포에서 AMPK 활성제인 AICAR에 의하여 유발되는 근위축 과정에서 상엽 추출물이 미치는 영향을 확인하기 위한 것으로, 상엽 추출물 및 AICAR 처리에 따른 세포독성을 가지지 않는 조건을 설정한 후 C2C12 근관세포의 형태적 특징 및 근섬유 지름에 대한 현미경 사진 결과이다.
도 15는 무작위로 선택된 필드에서 근섬유 지름을 이미지 분석 프로그램을 사용하여 계량한 결과이다.
도 16은 상엽 추출물에 의한 근위축 억제와 관련된 유전자들의 변화를 확인한 결과에 관한 것이다.
이하, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명의 실시예에 대하여 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다.
[제조예: 상엽 추출물의 제조]
상엽은 대한생약식품(주)에서 구입하였으며, 상엽 에탄올 추출물(ethanol extract of Mori Folium, EEMF)을 얻기 위하여 상엽 100 g당 에탄올 1 L를 첨가하여 60℃, 150 rpm으로 3일간 교반한 후 이를 3,000 rpm에서 20분간 원심분리하여 상층액만 분리하였다. 분리된 상층액을 Whatman 필터(No.2)로 여과하고 감압농축과정을 통하여 고형성분을 얻어내고 막자사발로 잘게 마쇄하고 밀봉시켜 -70℃ 초저온 냉동고에 보관하였다. 실험 시에는 디메틸 설폭사이드(dimethyl sulfoxide, DMSO, Amresco, Solon, OH, USA)를 이용하여 100 mg/ml의 농도로 만든 다음 이를 적정 농도로 배지에 희석하여 처리하였다.
[실험예: AMPK 활성제인 5-아미노이미다졸-4-카복사마이드 리보뉴클레오티드를 이용한 인위적인 근위축 개선 효과 시험]
1. 실험 방법
실험 재료
본 실험에서 C2C12 세포의 배양 및 분화를 위하여 사용된 둘베코 변형된 이글 미디엄(Dulbecco's modified eagle's medium, DMEM), 소혈청 세럼(fetal bovine serum(FBS), 말 혈청(horse serum, HS), 페니실린/스트렙토마이신(penicillin/streptomycin, PS)은 WELGENE(대구, 한국)에서 구입하였고, AICAR 및 3-(4,5-디메틸티아졸-2-일)-2,5-디페닐 테트라졸리움 브로마이드(3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide, MTT)는 시그마-알드리치 케미칼(Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Lousi, MO, USA)에서 구입하였다. mRNA 분석을 위하여 사용된 프라이머(primer)는 바이오니어(Bioneer, 대전, 한국)에서 구입하였으며, 단백질 분석을 위하여 사용된 1차 항체인 AMPK, p-AMPK, 아세틸-coA-카보실아제(acetyl-coA carboxylase, ACC), p-ACC, FoxO3a, pFoxO3a, MAFbx/atrogin-1, MuRF1, MyoD, 미오게닌(myogenin) 및 액틴(actin)과 2차 항체인 호스래디쉬 페록시다제(horseradish peroxidase, HRP)-컨쥬게이티드 항-마우스(conjugated anti-mouse) 및 항-레빗(anti-rabbit) 항체는 산타 크루즈 바이오테크놀로지(Santa Cruz Biotechnology Inc., Santa Cruz, CA, USA)에서 구입하였다.
C2C12 근아세포의 분화 및 근위축 유도
C2C12 근아세포는 아메리칸 타입 컬쳐 콜렉션(American Type Culture Collection, Manassa, VA, USA)에서 구입하여 사용하였으며, 10% FBS 및 100 unit/ml PS가 포함된 90% DMEM을 사용하여 37℃, 5% CO₂ 조건 하에서 배양하였다. C2C12 근아세포를 근관세포로 분화시키기 위하여 100% 세포 배양(confluent) 상태의 세포를 대상으로 90% DMEM, 2% HS 및 100 unit/ml PS가 포함된 분화배지를 매 2일마다 교체하였으며, 근위축 유도를 위하여 적정농도의 AICAR를 24시간 동안 처리하였다. 근위축 과정 중 나타나는 형태변화를 확인하기 위하여 도립 현미경(inverted microscope, Carl Zeiss, Gottingen, Germany)을 이용하여 200배의 배율로 관찰하였으며, 근위축 유발 정도를 확인하기 위하여 근관세포 직경 (myotube diameter)을 측정한 다음 이미지 분석 프로그램(image analysis program)을 이용하여 분석하였다.
헤모사이토미터(hemocytometer)를 이용한 세포 생존율 측정
AICAR 및 EEMF 처리에 따른 C2C12 근아세포의 생존율을 측정하기 위하여 100% 컨플루언트(confluent) 상태의 C2C12 세포에 AICAR 및 EEMF를 적정 농도로 처리하였다. 일정 시간 경과 후 배지를 제거하고 0.05% 트립신-에틸렌 다이아민 테트라아세틱 산(trypsin-ethylene diamine tetraacetic acid, EDTA, Sigma-Aldrich Chemical Co.)를 처리하여 세포를 부유시킨 다음 2,000 rpm으로 5분간 원심분리하여 상층액을 제거하였다. 이렇게 모인 세포를 대상으로 각각 1 ml의 인산염완충식염수(phosphate buffer saline, PBS)와 0.5% 트라이판 블루 용액(trypan blue solution, Gibco BRL, Grand Island, NY, USA)을 첨가하여 2분간 염색을 실시하고 헤모사이토미터(hemocytometer)에 적용시킨 다음 도립 현미경을 이용하여 살아있는 세포를 계수하였다.
MTT 분석시험(assay)를 이용한 성장억제 조사
C2C12 근아세포에서 AICAR 및 EEMF가 유발하는 성장억제 정도를 확인하기 위하여 상기와 동일한 방법으로 처리된 세포를 대상으로 배지를 제거하고 0.5 mg/ml 농도의 MTT를 2 ml씩 분주하고 빛을 차단한 다음 CO2 인큐베이터(incubator)에서 배양시켰다. 2시간 경과 후 MTT 시약을 제거하고 DMSO를 적정량 분주하여 웰(well)에 생성된 포마진(formazin)을 모두 녹인 다음 96 웰 플레이트(well plate)에 200 μl씩 옮겨서 ELISA 리더(reader)(Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA)로 540 nm에서 흡광도를 측정하였다.
아넥신 V-플루오레세인 아이소티오시아네이트(Annexin V-fluorescein isothiocyanate, FITC) 스테이닝(staining)에 의한 세포사멸(apoptosis)의 정량적 측정
C2C12 근아세포에서 AICAR 처리에 의한 세포사멸(apoptosis) 유발 정도의 정량적 분석을 위하여 준비된 세포들을 모은 다음 10 mM HEPES/NaOH, pH 7.4, 140 mM NaCl 및 2.5 mM CaCl2가 포함된 아넥신 V 바인딩 완충용액(annexin V binding buffer) (Becton Dickinson, San Jose, CA, USA)에 부유시킨 다음 아넥신 V-FITC(annexin V-FITC) 및 프로피디엄 아이오다이드(propidium iodide, PI)를 처리하여 암실에서 20분 동안 반응을 시켰다. 반응이 끝난 후 유동 세포분석기(flow cytometer)(FACS Calibur, Becton Dickinson)에 적용시켜 세포사멸(apoptosis)이 유발된 세포(annexin V+/PI-)를 형광반응에 따라 분석하였다.
DAPI staining에 의한 세포사멸(apoptosis) 유발의 확인
세포사멸(apoptosis)가 유발되었을 경우 특이적으로 나타나는 핵의 형태적 변화를 관찰하기 위하여 24시간 동안 다양한 농도의 AICAR가 처리된 조건에서 배양된 세포를 모아 fixing solution (3.7% formaldehyde in PBS)을 처리하여 상온에서 10분 동안 고정하였다. 고정이 끝난 후 slide glass에 세포를 부착시키고 0.2% Triton X-100 (Amresco)을 첨가하여 상온에서 10분간 반응시킨 후 2.5 μg/ml 농도의 4',6-디아미디노-2-페닐인돌(4',6-diamidino-2-phenylindole, DAPI, Sigma-Aldrich Co.) 용액으로 15분간 염색하였다. 염색이 끝난 후 형광 현미경(fluorescene microscope, Carl Zeiss)을 이용하여 400배의 배율로 암세포의 핵의 형태 변화를 관찰하였다.
웨스턴 블롯 분석(Western blot analysis)에 의한 단백질 발현의 분석
근위축 조절 관련 유전자들의 발현을 단백질 수준에서 비교하기 위하여 준비된 세포에 리시스 완충용액(lysis buffer) [25 mM Tris-Cl (pH 7.5), 250 mM NaCl, 5 mM EDTA, 1% NP-40, 1 mM 페닐메틸 설포닐플루오라이드(phenymethyl sulfonylfluoride, PMSF), 5 mM 디티오트레이톨(dithiothreitol, DTT)]를 첨가하고 4℃에서 1시간 동안 반응시켜 단백질을 분리한 다음 Bio-Rad 단백질 정량 시약(Bio-Rad Laboratory, Hercules, CA, USA)을 이용하여 정량하였다. 램나이 샘플 완충용액(Laemmli sample buffer)(Bio-Rad Laboratory)와 혼합된 단백질을 소디움 도데실 설페이트-폴리아크릴아마이드(sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide) 겔(gel)을 이용하여 전기영동으로 분리한 후 니트로셀룰로오스 막(nitrocellulose membrane, Schleicher and Schuell, Keene, NH, USA)으로 전이시켰다. 단백질이 전이된 막(membrane)에 각각의 1차 및 2차 항체를 처리하여 반응시킨 다음 향상 화학발광(enhanced chemiluminescence, ECL) 용액(Amersham Life Science Corp., Arlington Heights, IL, USA)을 이용하여 특정 단백질의 발현 변화를 분석하였다.
Reverse transcriptase polymerase chain reaction(RT-PCR)에 의한 mRNA의 분석
동일한 조건에서 준비된 세포를 대상으로 TRIzol reagent (Invitrogen Co., Carlsbad, CA, USA)를 이용하여 total RNA를 분리하고 정량한 다음 각각의 primer, DEPC water 및 ONE-STEP RT-PCR PreMix Kit (Intron, Seongnam, Korea)를 첨가하고 Mastercycler gradient (Eppendorf, Hamburg, Germany)를 이용하여 증폭하였다. 각 PCR 산물들을 양적 차이를 확인하기 위하여 1×TAE buffer로 1% agarose gel을 만들고 well 당 각각의 프라이머(primer)에 해당하는 PCR 산물에 DNA 겔 로딩 용액(gel loading solution)을 섞어서 로딩(loading) 한 후 100 V에서 전기영동을 하였다. 전기영동으로 DNA 분리가 끝난 겔(gel)을 EtBr를 이용하여 염색한 후 UV 하에서 확인하였다.
통계분석
모든 실험 결과들의 유의성을 검정하기 위하여 분산분석(ANOVA)을 실시한 후 p<0.05 수준에서 듀칸 멀티플 레인지 실험(Duncan's multiple range tests)를 실시하였으며, 그 결과는 평균(mean) ± 표준편차(standard deviation, SD)로 표시하였다.
2. 시험 결과
AICAR가 C2C12 근아세포의 생존율 및 성장에 미치는 영향
근위축을 유발하기 위하여 사용된 AICAR가 C2C12 세포의 생존율 및 성장에 미치는 영향을 확인하기 위하여 다양한 농도의 AICAR를 24시간 동안 처리한 후 trypan blue 염색 및 MTT 분석시험(assay)를 이용하여 조사하였다. 먼저 trypan blue 염색을 실시한 후 헤모사이토미터(hemocytometer)를 이용하여 살아있는 세포의 수를 계수하여 비교한 결과는 도 1에 나타낸 바와 같이 1 mM 처리군까지는 생존율 감소 현상이 크게 나타나지 않았지만 1.5 mM 처리군에서부터는 처리농도 증가에 따른 생존율 감소 현상이 증가되는 것으로 나타났다. 또한 상기와 동일한 조건에서 AICAR가 유발하는 성장억제 정도를 알아보기 위하여 MTT 분석시험(assay)를 실시한 결과는 도 2에 나타낸 바와 같다. 결과에서 나타난 바와 같이 AICAR가 유발하는 성장억제의 경우에도 1 mM 처리군까지는 큰 변화가 관찰되지 않았지만 1.5 mM 처리군에서부터는 성장억제 현상이 강하게 유발하였다.
C2C12 근아세포에서 AICAR에 의한 세포사멸(apoptosis) 유발
도 1 및 2의 결과에서 나타난 AICAR 처리에 의한 C2C12 세포에서의 생존율 감소 및 증식 억제 현상이 세포사멸(apoptosis) 유발과 관련성이 있는지의 여부를 조사하였다. 먼저 세포사멸(apoptosis) 유발 시 나타나는 핵의 형태변화를 확인하기 위하여 DAPI 염색을 실시한 결과 도 3에 나타난 바와 같이 정상 조건에서 배양된 세포에서는 아무런 변화가 나타나지 않았지만, 1.5 mM AICAR 처리군에서부터 염색질의 응축에 의한 세포사멸 사체(apoptotic body)의 형성이 현저하게 증가하는 것으로 나타났다. 다음은 C2C12 세포에서 AICAR가 유발하는 세포사멸(apoptosis)의 정량적인 비교를 위하여 상기와 동일한 조건에서 배양된 세포를 대상으로 annexin V-FITC/PI로 염색한 후 flow cytometry 분석을 실시하였다. 도 4의 결과에서 알 수 있듯이 1 mM AICAR 처리군까지는 세포사멸(apoptosis) 유발 정도가 크게 증가하지 않았지만, 1.5 mM AICAR 처리군에서부터 급격하게 증가하여 2 mM AICAR 처리군에서는 약 37.32%의 세포에서 세포사멸(apoptosis)가 유발되는 것으로 나타났다. 이상의 결과에서 C2C12 세포에 AICAR를 고농도로 처리하였을 경우 나타나는 생존율 감소 및 성장억제는 세포사멸(apoptosis)에 의한 현상임을 알 수 있었다. 따라서 AICAR 1 mM 처리군까지는 C2C12 근아세포에 대한 세포독성이 거의 없는 것으로 판단되어 이후의 실험들은 1 mM의 농도 범위에서 실시하였다.
C2C12 근아세포에서 근위축 관련 유전자의 발현에 미치는 AICAR의 영향
AMPK는 에너지 소비 과정의 억제뿐 만 아니라 혈당 흡수 및 지방산 산화 유발을 통한 포도당 및 지질 대사를 조절하는 에너지 균형 조절자 및 에너지 센서이다. 뿐 만 아니라 AMPK는 유비퀴틴-프로테아좀(ubiquitin-proteasome) 경로의 활성화를 통한 근육 단백질 분해에 직접적으로 관여함으로서 근위축 유발에도 관여하는 것으로도 알려져 있다. AMPK가 활성화되면 FoxO3a를 경유하여 골격근에서 특이적으로 발현되는 근육-특이적인 유비퀴틴 리가아제(muscle-specific ubiquitin ligases)로서 F-box type E3 리가아제(ligase)인 MAFbx/atrogin-1 및 링 프린거(Ring Finger) 유형의 E3 리가아제(ligase)인 MuRF1의 증가를 통한 유비퀴틴-프로테아좀(ubiquitin-proteasome) 경로의 활성화를 유발함으로서 근원성 분화에 관여하는 근육-특이적인 역전사 요인(muscle-specific transcription factors)인 MyoD 및 미오게닌(myogenin)의 분해를 촉진하여 근위축을 유발시키는 것으로 보고되고 있다. 따라서 C2C12 세포에서 AICAR 처리에 따른 AMPK 및 근위축 관련 유전자의 발현 변화를 확인하였다. 먼저 도 6 및 7에서 나타난 바와 같이 AICAR는 AMPK 및 AMPK의 하위단계에서 작용하는 ACC의 인산화를 농도의존적으로 증가시키는 것으로 확인되었으며, FoxO3a의 발현도 증가시키는 것으로 나타났다. 또한 근육-특이적인 유비퀴틴 리가아제(muscle-specific ubiquitin ligases)인 MAFbx/atrogin-1 및 MuRF1의 발현 증가와 함께 근육-특이적인 역전사 요인(muscle-specific transcription factors)인 MyoD 및 미오게닌(myogenin)의 발현 감소를 유발하였다. 이상의 결과에서 AICAR는 AMPK 및 FoxO3a를 경유한 근위축 관련 유전자의 발현을 조절함으로서 근위축에 관여할 수 있다.
C2C12 근관세포에서 근위축에 미치는 AICAR의 영향
근위축은 노화, 영양부족 및 여러 가지 질병에 의하여 유발되며, 유비퀴틴-프로테아좀(ubiquitin-proteasome) 경로 활성화를 통한 근육 단백질 분해가 유발됨으로서 근섬유 수 및 지름의 감소를 통한 전체적인 근육량의 감소와 같은 특징을 가진다. 이러한 근위축을 억제하기 위한 연구를 위하여 AICAR가 인위적인 근위축 유도인자로서 활용될 수 있는지를 확인하고자 하였다. 이를 위하여 C2C12 근관세포에 세포독성이 없는 조건의 AICAR를 처리하였을 경우 나타나는 형태적인 특징 및 근위축 관련 유전자의 발현을 조사하였다. 먼저 도 8 및 9에 나타난 바와 같이 AICAR 처리에 따른 C2C12 근관세포의 형태적 특징 및 근섬유의 지름을 확인한 결과, AICAR 처리 농도 의존적으로 근섬유의 수와 지름이 현저하게 감소하는 것으로 나타났다. 다음으로 AICAR에 의하여 유발되는 근위축과 관련하여 근육-특이적인 유비퀴틴 리가아제(muscle-specific ubiquitin ligases) 및 근육-특이적인 역전사 요인(muscle-specific transcription factors)의 발현에 어떠한 영향을 미치는지 mRNA 및 단백질 수준에서 확인한 결과는 도 10 및 11에 나타난 바와 같다. 결과에서 볼 수 있듯이 근모세포(myoblasts)에서 근육대롱세포(myotubes)로 분화를 유발한 후 AICAR를 처리하였을 경우 MAFbx/atrogin-1 및 MuRF1의 발현 증가와 함께 MyoD 및 미오게닌(myogenin)의 발현 감소가 유발되었다. 이상의 결과에서 AMPK 활성제인 AICAR는 C2C12 근관세포의 근위축을 유발한다는 것을 알 수 있었으므로 근위축 유도인자로 사용할 수 있을 것이다.
C2C12 근관세포에서 AICAR에 의해 유도된 근위축에 미치는 EEMF의 영향
C2C12 근관세포에서 AMPK 활성제인 AICAR에 의하여 유발되는 근위축 과정에서 상엽 에탄올 추출물(EEMF)가 어떠한 영향을 미치는 지를 확인하였다. 도 12 및 13에서와 같이 EEMF 및 AICAR 처리에 따른 세포독성을 가지지 않는 조건을 설정한 후 C2C12 근관세포의 형태적 특징 및 근섬유의 지름을 확인한 결과, AICAR 처리에 의하여 근섬유의 수와 지름의 감소가 유발되었지만 EEMF 처리에 의하여 회복되는 것으로 나타났으므로 EEMF가 근위축을 억제할 수 있다는 것을 확인하였다. 아울러 EEMF에 의한 근위축 억제와 관련된 유전자들의 변화를 확인한 결과 도 16에서 나타난 바와 같이 AICAR 처리에 의하여 증가된 AMPK 및 ACC의 인산화가 EEMF에 의하여 억제되는 것으로 나타났으며, FoxO3a의 발현도 감소되었다. 또한 EEMF는 AICAR 처리에 의하여 증가된 MAFbx/atrogin-1 및 MuRF1의 발현을 감소시켰으며, 감소된 MyoD 및 미오게닌(myogenin)의 발현을 회복시키는 것으로 나타났다. 이상의 결과를 살펴볼 때 AICAR 처리에 의하여 유발된 근위축을 EEMF가 억제한다는 것을 알 수 있었으며, 이러한 현상은 AMPK 활성 억제를 통한 전사인자인 FoxO3a를 억제함으로서 유발되는 유비퀴틴-프로테아좀(ubiquitin-proteasome) 경로의 차단이 중요한 역할을 하였다.
[제조예 2: 혼합 추출물의 제조]
1. 자귀나무 추출물(AF)의 제조
자귀나무를 세척하고 건조한 뒤 이를 분쇄하였다. 상기 분쇄물을 정제수에 혼합하고 이를 2시간 동안 98 내지 100℃를 유지하고, 이를 냉각시킨 뒤 와트만 여과지로 여과하여 그 여액을 수득하였다.
2. 기타 식물 추출물의 제조
상기 자귀나무 추출물과 동일한 방법으로 각각 호랑가시나무 추출물(BF), 땅비싸리 추출물(CF), 전동싸리 추출물(DF), 수호초 추출물(EF) 및 비비추 추출물(FF)을 제조하였다.
3. 혼합 추출물의 제조
상기 상엽 추출물(MF), 자귀나무 추출물(AF), 호랑가시나무 추출물(BF), 땅비싸리 추출물(CF), 전동싸리 추출물(DF), 수호초 추출물(EF) 및 비비추 추출물(FF)을 하기의 [표 1]과 같은 조성을 혼합하여 혼합 추출물을 제조하였다.
| MX1 | MX2 | MX3 | MX4 | MX5 | MX6 | MX7 | MX8 | MX9 | MX10 | |
| MF | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 |
| AF | 0.5 | 1 | 10 | 15 | 20 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 |
| BF | 5 | 10 | 25 | 40 | 50 | 25 | 25 | 25 | 25 | 25 |
| CF | 0.5 | 1 | 10 | 15 | 20 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 |
| DF | - | - | - | - | - | 0.5 | 1 | 2 | 3 | 5 |
| EF | - | - | - | - | - | 1 | 3 | 10 | 12 | 16 |
| FF | - | - | - | - | - | 1 | 3 | 10 | 12 | 16 |
(단위: 중량부)
[실험예 2: 혼합 추출물의 근위축 예방 및 개선 효과 확인]
1. 관절염 억제 효과 실험
상기 혼합 추출물의 사용에 따른 상호작용에 의한 상승 효과를 확인하기 위하여 상기 근위축 개선효과를 확인한 상기 상엽 추출물(MF) 및 근위축과 관련된 AMPK 및 ACC의 인산화 억제 및 FoxO3a의 발현도 감소 여부를 비교평가하였다.
상기 실험과 동일한 방법으로, 3주간 각 혼합 추출물(MX 1 내지 MX 5)을 투여한 실험군에서 AMPK 및 ACC의 인산화 억제 및 FoxO3a의 발현 정도를 평가하여 상기 상엽 추출물의 결과 값과 비교하여 평가하였다. 각 혼합 추출물의 사용에 따른 효과가 직접 드러날 수 있도록 상기 상엽 추출물 및 각 혼합 추출물을 이전의 용량에 10%로 줄여 1일 1회 10mg/kg의 용량으로 투여하였다.
또한 상기 상엽 추출물(MF)의 AMPK 및 ACC의 인산화 억제 및 FoxO3a의 발현 정도를 지수 5로 고정하여 기준으로 삼고 상기 혼합 추출물 사용에 따른 결과를 이와 비교하여 1 내지 10의 지수로 나타내었다. 상기 지수는 그 숫자가 높을수록 억제 활성이 우수한 것으로 근위축 개선 활성이 우수한 것이다.
그 결과를 하기의 [표 2]에 나타내었다.
| MF | MX1 | MX2 | MX3 | MX4 | MX5 | |
| AMPK 인산화 억제 | 5 | 5 | 8 | 9 | 9 | 6 |
| ACC 인산화 억제 | 5 | 4 | 8 | 9 | 8 | 6 |
| Fox03a 억제 활성 | 5 | 4 | 9 | 9 | 9 | 6 |
(단위: 지수)
상기 [표 2]를 참조하면 혼합 추출물에 사용에 따른 상승효과가 나타난다는 사실을 알 수 있다. 특히 MX 2 내지 MX 4에 의하는 경우 AMPK 및 ACC의 인산화 억제 및 FoxO3a의 발현 억제 효과가 크게 증가된다는 사실을 알 수 있다.
따라서 MX 2 내지 MX 4 범위의 혼합 추출물에 의하는 경우 각 추출물의 혼합에 의한 상승 작용으로 단순 조합이상의 상승효과가 나타난다는 사실을 알 수 있다.
이에 따라 상기 혼합 추출물을 사용하는 경우 보다 적은 함량으로 AMPK 및 ACC의 인산화 억제 및 FoxO3a의 발현 억제 활성을 나타낼 수 있다는 것을 알 수 있다. 따라서 이를 통하여 상대적으로 낮은 농도로서 근위축 예방 및 개선 효과를 낼 수 있으므로 부작용이 적으면서도 장기간 복용할 수 있는 근위축 예방 또는 개선용 조성물을 포함하는 제품을 제조할 수 있다.
2. 관능성 평가
상기 상엽 추출물(MF) 및 각 혼합 추출물을 포함하는 조성물이 기능성 식품조성물로 제공될 수 있도록 각 조합에 따른 향미와 맛에 대한 관능성을 평가하였다.
따라서 상엽 추출물(MF) 및 혼합 추출물 MX 3, MX 6 내지 MX 10 각각을 차(茶) 음료로 제조하고, 성인남녀 20인에 대한 관능성 평가를 수행하였다. 관능성 평가는 향과 맛을 기초로 기호성에 따라 1 내지 10의 지수로 평가하여 평균지수로 구분하였고 그 결과를 [표 3]에 나타내었다.
한편, 하기의 지수는 그 숫자가 높을수록 기호성이 높은 것이다.
| MF | MX3 | MX6 | MX7 | MX8 | MX9 | MX10 | |
| 향 | 5 | 1 | 2 | 7 | 9 | 9 | 5 |
| 맛 | 4 | 1 | 3 | 9 | 8 | 9 | 4 |
| 기호성 | 4.5 | 1 | 2.5 | 7.5 | 8.5 | 9.0 | 4.5 |
(단위: 지수)
상기 [표 3]을 참조하면, 상기 상엽 추출물은 덖어진 과정에서 향미와 맛이 상승하기 때문에 상엽 특유의 밍밍한 맛이 개성되고 전체적으로 구수한 향이 높아지기 때문에 일반적인 상엽 차에 비하여 기호성이 높아지는다는 것을 알 수 있다.
다만, MX 3에 따른 혼합 추출물 결과를 참조하면 자귀나무 추출물, 호랑가신나무 추출물 및 땅비싸리 추출물이 포함되는 경우 퇴행성 관절염에 대한 억제효과를 상승하지만 상호 조합에 따라 향미와 맛이 크게 저하된다는 사실을 알 수 있다.
그러나, 전동싸리 추출물, 수호초 추출물 및 비비추 추출물이 일정한 범위로 혼합되는 경우 상기 [표 3]에서 확인할 수 있는 바와 같이 자귀나무 추출물, 호랑가신나무 추출물 및 땅비싸리 추출물의 혼합에도 불구하고, 전체적인 향미와 맛이 개선되는 사실을 알 수 있다.
특히 MX 7 내지 MX 9를 참조하면, 자귀나무 추출물, 호랑가신나무 추출물 및 땅비싸리 추출물이 일정한 범위로 혼합되는 경우 상엽의 구수한 향이 유지되면서 자귀나무 추출물, 호랑가신나무 추출물 및 땅비싸리 추출물의 혼합에 따른 잡향과 텁텁한 맛이 제거되면서 각 추출물의 상호 조합에 따라 차 음료의 향미와 맛이 크게 증진된다는 사실을 알 수 있다.
따라서 상기 범위의 혼합 추출물에 의하는 경우 상기 상엽 추출물 또는 상엽 추출물과 함께 자귀나무 추출물, 호랑가신나무 추출물 및 땅비싸리 추출물을 포함하여 퇴행성 관절염에 대한 억제 효과를 크게 높일 수 있을 뿐만 아니라 전체적으로 향미와 맛이 우수하게 조합되어 보다 기호성이 높은 기능성 식품 또는 기능성 차로 널리 보급될 수 있다.
이상에서 본 발명의 바람직한 실시예에 대하여 상세하게 설명하였지만 본 발명의 권리범위는 이에 한정되는 것은 아니고 다음의 청구범위에서 정의하고 있는 본 발명의 기본 개념을 이용한 당업자의 여러 변형 및 개량 형태 또한 본 발명의 권리범위에 속하는 것이다
Claims (8)
- 상엽(Mori Folium) 추출물을 유효 성분으로 포함하며,
자귀나무(Silk-tree) 추출물, 호랑가시나무(Chinese horned Holly) 추출물 및 땅비싸리(kirilow indigo) 추출물을 추가로 포함하며,
상기 상엽 추출물 100 중량부에 대하여, 자귀나무 추출물 5 내지 15 중량부, 호랑가시나무 추출물 10 내지 40 중량부 및 땅비싸리 추출물 1 내지 15 중량부를 포함하는
상엽 추출물을 유효 성분으로 포함하는 근위축 예방 또는 개선용 조성물. - 제 1항에 있어서,
상기 상엽 추출물은 물, 탄소수 1 내지 6의 알코올 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 용매로 추출되는
상엽 추출물을 유효 성분으로 포함하는 근위축 예방 또는 개선용 조성물. - 제 1항에 있어서,
상기 근위축은 불용성 근위축(disuse atrophy of muscle), 기계적 자극 부재 및 골격근의 탈신경지배 (denervation) 중 어느 하나 이상에 의한 것인
상엽 추출물을 유효 성분으로 포함하는 근위축 예방 또는 개선용 조성물. - 삭제
- 삭제
- 제 1항에 따른 상엽 추출물을 유효 성분으로 포함하는 근위축 예방 또는 개선용 조성물을 포함하는
근위축 치료용 약학 조성물. - 제 1항에 따른 상엽 추출물을 유효 성분으로 포함하는 근위축 예방 또는 개선용 조성물을 포함하는
식품 조성물. - 제 1항에 따른 상엽 추출물을 유효 성분으로 포함하는 근위축 예방 또는 개선용 조성물을 포함하는
차(茶).
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020170144009A KR102093990B1 (ko) | 2017-10-31 | 2017-10-31 | 상엽 추출물을 유효 성분으로 포함하는 근위축 예방 및 개선용 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020170144009A KR102093990B1 (ko) | 2017-10-31 | 2017-10-31 | 상엽 추출물을 유효 성분으로 포함하는 근위축 예방 및 개선용 조성물 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20190048794A KR20190048794A (ko) | 2019-05-09 |
| KR102093990B1 true KR102093990B1 (ko) | 2020-03-26 |
Family
ID=66546653
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020170144009A KR102093990B1 (ko) | 2017-10-31 | 2017-10-31 | 상엽 추출물을 유효 성분으로 포함하는 근위축 예방 및 개선용 조성물 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR102093990B1 (ko) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR102459434B1 (ko) * | 2020-07-28 | 2022-10-25 | 한국한의약진흥원 | 위릉채 추출물 또는 쪽 추출물을 함유하는 근위축 개선, 예방 또는 치료용 조성물 |
| KR102511861B1 (ko) * | 2022-10-14 | 2023-03-20 | 주식회사 함소아제약 | 신선초와 상엽의 복합추출물을 포함하는 근력 강화용 조성물 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100380867B1 (ko) * | 2000-12-06 | 2003-04-18 | 한국 한의학 연구원 | 골다공증 예방 및 치료에 효과를 갖는 합환피 추출물 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101422632B1 (ko) * | 2007-10-19 | 2014-07-24 | 오영님 | 뽕잎차 제조방법 |
| KR20130005118A (ko) | 2011-07-05 | 2013-01-15 | 연세대학교 원주산학협력단 | 사우치논을 유효성분으로 포함하는 근위축 억제 및 예방용 조성물 |
| JP6564134B2 (ja) * | 2015-05-26 | 2019-08-21 | ニュートゥリー カンパニー リミテッド | モルシン、クワノンジ又は桑白皮を含有する筋肉疾患予防及び治療用又は筋機能改善用組成物 |
| KR101793429B1 (ko) * | 2015-06-10 | 2017-11-06 | 김민지 | 연골 재생 또는 연골 질환 치료용 또는 예방용 식품 조성물 및 제조방법. |
| KR101770035B1 (ko) | 2015-10-17 | 2017-08-22 | 동의대학교 산학협력단 | 상엽 추출물을 유효성분으로 포함하는 IL-1β에 의한 관절염의 예방 또는 개선용 조성물 |
-
2017
- 2017-10-31 KR KR1020170144009A patent/KR102093990B1/ko active IP Right Grant
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100380867B1 (ko) * | 2000-12-06 | 2003-04-18 | 한국 한의학 연구원 | 골다공증 예방 및 치료에 효과를 갖는 합환피 추출물 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR20190048794A (ko) | 2019-05-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN110519997B (zh) | 通过辣木叶提取物和杜仲提取物的复合物的抗生、抗氧化、抗炎、抑制牙周骨损失和再生牙周骨缓解牙龈炎和牙周炎的方法 | |
| KR101828584B1 (ko) | 참여로, 가래나무, 도깨비 부채 및 모과나무의 복합추출물을 포함하는 항산화 또는 미백용 조성물 | |
| KR102093990B1 (ko) | 상엽 추출물을 유효 성분으로 포함하는 근위축 예방 및 개선용 조성물 | |
| KR20170121532A (ko) | 갱년기 증상 또는 골다공증 개선용 조성물 | |
| KR102081156B1 (ko) | 산수유 추출물을 유효성분으로 포함하는 양성 전립선 비대증 예방 또는 치료용 조성물 | |
| JP2017531644A (ja) | アルパインワームウッド抽出物を含む脱毛防止または育毛促進用組成物 | |
| KR20190081545A (ko) | 산수유 추출물을 유효성분으로 포함하는 양성 전립선 비대증 예방 또는 치료용 조성물 | |
| KR20160081205A (ko) | 산수국 추출물을 포함하는 비만 예방 또는 개선용 조성물 | |
| KR102114133B1 (ko) | 알피나 골무꽃 추출물을 포함하는 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물 | |
| KR102158134B1 (ko) | 오미자 추출물을 유효성분으로 함유하는 항균용 조성물 | |
| KR100601903B1 (ko) | 산삼세포의 제조방법 | |
| KR101942429B1 (ko) | 상엽 추출물을 유효성분으로 포함하는 관절염의 예방 또는 개선용 조성물 | |
| KR102122742B1 (ko) | 줄의관말 추출물을 포함하는 신경 염증 예방 및 치료용 조성물 | |
| KR102224313B1 (ko) | 알피나 골무꽃 추출물을 포함하는 미백용 조성물 | |
| KR101525877B1 (ko) | 피부 주름 개선 및 피부 노화 방지를 위한 조성물 | |
| KR102061622B1 (ko) | 상엽 추출물을 유효 성분으로 포함하는 항염 및 항산화 활성용 조성물 | |
| KR101955961B1 (ko) | 머루근 추출물을 유효 성분으로 포함하는 항산화 활성용 조성물 | |
| KR102275268B1 (ko) | 갱년기 증상 또는 골다공증 개선용 조성물 | |
| KR100927435B1 (ko) | 당뇨병 개선 및 완화용 환제 건강식품 및 이의 제조방법 | |
| KR20200115927A (ko) | 포도잎 추출물 및 병풀 추출물을 포함하는 정맥순환 장애 개선용 조성물 | |
| KR102319379B1 (ko) | 바나나 잎 추출물을 포함하는 항산화, 항우울 및 항스트레스용 조성물 | |
| KR102546957B1 (ko) | 참죽나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 항염 및 항균용 조성물 | |
| KR102496534B1 (ko) | 항산화력 증진 효과가 우수한 영춘화 추출물을 유효 성분으로 포함하는 기능성 식품 조성물 | |
| KR102345335B1 (ko) | 다닥냉이 추출물을 유효성분으로 포함하여 스트레스 완화 및 개선 효과를 나타내는 항스트레스용 조성물 | |
| KR102537835B1 (ko) | 물푸레나무 잎 추출물을 포함하는 항우울 개선 효과가 우수한 동시에, 항스트레스 효과를 나타내는 항우울 및 항스트레스용 조성물 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A201 | Request for examination | ||
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| E90F | Notification of reason for final refusal | ||
| E701 | Decision to grant or registration of patent right |