KR102078412B1 - 황금찰수수 추출물 또는 그 분획물을 유효성분으로 함유하는 탈모방지 또는 발모촉진용 조성물 - Google Patents
황금찰수수 추출물 또는 그 분획물을 유효성분으로 함유하는 탈모방지 또는 발모촉진용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 황금찰수수 추출물 또는 그 분획물을 유효성분으로 함유하는 탈모방지 또는 발모촉진용 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 황금찰수수 추출물 또는 그 분획물은 사람의 모낭유두세포(Dermal papilla cell)와 인간 케라티노사이트(Human keratinocyte)의 성장 촉진에 직접적인 활성을 갖는다. 따라서, 본 발명의 조성물은 탈모의 진행을 완화하고, 모발의 양모/육모, 및 성장을 촉진할 수 있어, 탈모방지 또는 발모촉진용 약학적 조성물, 화장료 조성물 또는 식품 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.
본 발명의 황금찰수수 추출물 또는 그 분획물은 사람의 모낭유두세포(Dermal papilla cell)와 인간 케라티노사이트(Human keratinocyte)의 성장 촉진에 직접적인 활성을 갖는다. 따라서, 본 발명의 조성물은 탈모의 진행을 완화하고, 모발의 양모/육모, 및 성장을 촉진할 수 있어, 탈모방지 또는 발모촉진용 약학적 조성물, 화장료 조성물 또는 식품 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.
Description
본 발명은 탈모방지 또는 발모촉진용 조성물에 관한 것으로, 더욱 구체적으로 황금찰수수 추출물 또는 그 분획물을 유효성분으로 함유하는 탈모방지 또는 발모촉진용 조성물에 관한 것이다.
모발은 피부에 있는 모낭에서 자라나며, 모발이 자라나는 모낭은 안쪽뿌리 상피집, 바깥뿌리 상피집, 털 줄기, 털 바탕질 등으로 구성된 복잡한 기관으로, 일생 동안 성장기, 퇴행기, 휴지기 등의 주기가 지속적으로 반복되는 특징이 있다. 특히, 모낭을 형성하는 세포 중 진피유두 세포는 모발의 성장에 있어서 중요한 역할을 하고, 모낭의 성장기에는 진피유두를 둘러싸고 있는 기질의 각질세포를 포함한 모낭의 구성 세포들의 증식이 활발하게 일어난다. 모낭의 퇴행기에는 모낭의 성장이 중단되며 세포사멸(apoptosis)과 진피유두의 응축 및 세포외기질의 재구성이 일어나고, 모낭이 다시 성장기로 들어가기 위해 준비하는 단계인 휴지기에는 융기부위를 포함하여 영구적으로 지속되는 부분만이 남아있게 된다.
탈모란 모낭의 성장주기 중 성장기의 모낭에서 자라는 모발보다 퇴행기 또는 휴지기의 모낭에서 자라는 모발의 비율이 높아져 비정상적으로 빠지는 모발이 증가하는 현상을 말한다.
최근 외모를 중시하는 경향이 두드러지면서 탈모에 관한 관심이 증가하고 있다. 이러한 탈모의 원인으로 혈액순환 불량설, 남성호르몬 작용 과잉설, 피지분비 과잉설, 과산화물과 세균 등에 의한 두피 기능 저하설, 유전적 요인, 노화, 스트레스 등이 논의되고 있으며, 상기 요인들이 복합적으로 작용하는 것으로 이해되고 있다. 일반적으로 탈모의 가장 정형적인 형태는 남성호르몬 작용 과잉으로 나타나는 남성형 탈모증으로, 남성호르몬인 안드로겐 의존적으로 발생한다. 대표적인 안드로겐으로는 테스토스테론(testosterone)과 DHT(dihydrotestosterone)가 있는데, 탈모 환자에서는 DHT가 일반인보다 높은 농도로 존재하는 것으로 알려져 있다. 테스토스테론은 5알파-환원효소(5-reductase)에 의해 DHT로 전환되고, 이러한 전환은 Type 1과 Type 2의 2가지 형태의 5 알파-환원효소 중 Type 2의 5알파-환원효소에 의하여 이루어지며, 이렇게 전환된 DHT가 진피유두와 모낭의 점진적인 축소를 일으키는 것으로 이해되고 있다.
탈모증의 치료 및 예방에 있어서 현재 가장 널리 사용되는 것은 미국 FDA의 승인을 받은 미녹시딜 함유제제이며, 최근에는 머크사에서 개발된 Type 2의 5알파-환원효소 억제 효과가 있는 피나스테라이드(finasteride)가 사용되고 있다.
또한, 화학적으로 합성된 약학적 제제들이 갖는 부작용을 해소하기 위하여 천연 추출물 기초한 탈모방지 및 발모촉진과 관련된 천연물 신약에 관한 연구들이 활발하게 진행되고 있다. 이러한 천연물의 예로, 천궁(특허 제2010-0119761호), 상황버섯(특허 제2012-0038426호), 금은화(특허 제2012-0038426호), 케모마일 등의 추출물(특허 제2012-0015874호, 특허 제2010-0091571호), 하수오(특허 제2013-0021464호, 특허 제2011-0097386호), 창포(특허 제2012-0115980호), 석류(특허 제2012-7012465호), 은행잎 추출물(특허 제2006-7008793호) 등이 연구된 바 있다. 그러나 이러한 소재를 사용하여 개발된 천연물 소재의 발모제 혹은 육모제는 실제 임상에서 충분한 효과를 나타내지 못한 것으로 알려져 있으며, 이로 인해 미녹시딜이나 프로페시아와 비교하여 동등 이상의 효과를 내면서도 부작용이 적은 천연물질로 이루어진 발모제의 개발이 시급한 실정이다.
한편, 수수(Sorghum, Sorghum bicolor L. Moench)는 외떡잎식물 벼목 화본과의 한해살이풀로 쌀, 보리, 밀, 옥수수에 이어 중요한 잡곡의 하나이며, 주로 식용으로 이용되고 있다. 수수는 탄닌, 석탄산, 안토시아닌, 식물 스테롤, 및 폴리코사놀(policosanols) 같은 2차대사 산물을 풍부하게 함유하고 있어 영양학적으로 주목을 받는 작물이다. 최근에는 수수가 항산화 활성, 항암 효과, 및 콜레스테롤 저하 효과가 있는 것으로 연구된 바 있고, 심혈관 질환을 감소시킬 수 있는 것으로 연구된 바 있다.
그러나, 아직까지 수수가 갖는 탈모방지 및 발모촉진 효과에 관한 연구는 미미한 실정이며, 수수를 단일 성분으로 사용하는 경우에 탈모방지 및 발모촉진에 충분한 효과를 내지 못하여 다른 천연물질을 혼합하여 일부 사용된 사례가 있다.
대다수 천연물질의 복합제품은 실험실 단계에서 검증되었던 효과에 크게 못 미치는 효과를 나타내었고, 이로 인해 소비자의 기대치에 부응하지 못하고 있으며, 지금까지는 발모 또는 육모에 효과를 나타내는 천연물질이 대중화되어 시장에서 널리 사용되지 못하고 있다.
이에, 본 발명자들은 탈모방지 또는 발모촉진에 효과를 나타내는 천연물질을 탐색하여 실제 시장에서 활용할 수 있도록 예의 연구 노력한 결과, 황금찰수수 추출물을 탈모방지 또는 발모촉진의 용도로 사용하는 경우, 실제 임상에서도 뛰어난 효과가 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하게 되었다.
따라서, 본 발명의 주된 목적은 천연소재인 황금찰수수 추출물 또는 그 분획물을 이용하여 탈모방지 또는 발모촉진에 효과가 있는 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기의 발명의 상세한 설명, 청구범위 및 도면에 의해 더욱 명확하게 된다.
본 발명의 한 양태에 따르면, 본 발명은 황금찰수수 추출물 또는 그 분획물을 유효성분으로 포함하는 탈모방지 또는 발모촉진용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명자들은 탈모방지 또는 발모촉진에 효능이 있는 물질을 찾고자 여러 가지 천연물질 중에서 유효한 물질을 검색한 결과, 상기 황금찰수수 추출물 또는 그 분획물이 우수한 탈모방지 또는 발모촉진 효과가 있음을 발견하였고, 또한 피부에 적용 시 안전성에도 문제가 없음을 확인하였다.
본 발명의 "황금찰수수(Hwanggeumchal Sorghum)"는 강원도 농업기술원에서 육성된 순계분리 육종방법으로 육성된 수수(Sorghum bicolor L.) 품종으로, 국립종자원에 품종명칭등록 제06-0013-8호(2005.03.16)로 등록된 품종이다. 상기 황금찰수수 품종은 수확 시기가 빠른 조숙 품종이고, 수량이 많은 다수성 찰수수 품종으로서 불포화지방산 함량이 많은 것이 특징이다. 또한, 황금찰수수는 갈릭산(Gallic acid)을 포함한 폴리페놀 화합물들이 다른 수수 품종들보다 다량 함유되어 높은 항산화 활성을 갖는 특징이 있다. 상기 황금찰수수는 강원도 전역에서 많이 재배되고 있으며, 최근에는 충청북도와 경상북도 지역으로 재배가 확대되고 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 "추출물"은 황금찰수수의 추출 처리에 따라 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다. 본 발명의 상기 추출물은 바람직하게 추출 후 건조 분말 형태로 제조되어 사용될 수 있다.
또한, 본 발명의 상기 황금찰수수 추출물은, 천연, 잡종 또는 변종 식물로부터 추출될 수 있고, 식물 조직 배양물에서도 추출할 수 있으며, 잎, 줄기, 뿌리, 꽃, 열매 등의 부위에서 추출한 추출물을 포함한다.
상기 황금찰수수 추출물은 황금찰수수를 당 분야에서 사용되는 적절한 추출용매를 사용하여 추출할 수 있다. 상기 용매로서 적합한 것은, (i) 물, (ii) 알코올(예컨대, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 노말-프로판올, 이소-프로판올, 노말-부탄올, 1-펜탄올, 2-부톡시에탄올 및 에틸렌글리콜), (iii) 아세트산, (iv) DMFO(dimethyl-formamide) 또는 (v) DMSO(dimethyl sulfoxide) 등을 포함한다. 본 발명의 일 실시예에 따르면, 본 발명의 추출 용매는 에탄올이다. 본 명세서에서 사용되는 용어 "추출물"은 당업계에서 조추출물(crude extract)로 통용되는 의미를 갖는다.
상기 추출공정은 황금찰수수 무게에 대하여 약 1 내지 20배, 바람직하게는 약 10배의 상기 1차 추출용매, 바람직하게는 물과 에탄올의 혼합용매로 추출할 수 있다. 추출공정은 당 분야에 알려진 추출방법, 예컨대, 냉침, 열수추출, 초음파 추출, 환류 냉각 추출 등의 방법으로 수행될 수 있으나, 이에 국한되지 않는다. 추출 온도는 추출방법에 적절한 다양한 온도 범위를 당 분야의 통상의 기술자가 채택 가능하며, 예를 들어, 20℃ 내지 100℃의 온도에서 수행될 수 있으나, 이에 국한되지 않는다. 추출시간 역시 채택된 추출방법에 따라 상이하며, 적절한 추출시간은 당 분야의 통상의 기술자가 보유한 기술 수준 범위 내이며, 이에 국한되지 않으나, 약 1시간 내지 10일의 범위에서 단회 또는 복수회로 수행될 수 있다. 바람직하게는 상기 추출은 약 50℃에서 약 3시간 내지 12시간 동안 1회 내지 3회 반복하여 추출될 수 있다. 상기와 같이 추출을 수행하여 얻어진 추출물은 통상의 방법에 따라 여과하여 불순물을 제거한 액상 형태로 얻거나, 얻어진 액상 형태의 추출물을 통상의 방법에 따라 감압농축 및/또는 건조하여 분말 형태로 얻을 수 있다.
또한, 본 발명의 조성물은 탈모방지 또는 발모촉진의 효과를 나타내는 유효성분의 함량이 높이기 위하여 분획물을 사용할 수 있다.
본 발명의 용어 "분획물"이란 다양한 구성성분을 포함하는 혼합물로부터 특정 성분 또는 특정 그룹을 분리하는 분획방법에 따라 얻어진 결과물을 의미한다.
본 발명의 탈모방지 또는 발모촉진용 조성물에서, 상기 분획물은 헥산, 에틸아세테이트, 및 부탄올로 이루어진 혼합용매로 분획된 어느 하나의 분획물일 수 있다. 즉, 상기 황금찰수수 추출물을 물에 분산시킨 후, 적절한 2차 추출용매, 예컨대, 헥산, 에틸아세테이트, 및 부탄올로 이루어진 혼합용매 등으로 추출하는 단계를 수행함으로써, 생성되는 추출물 중의 유효성분 함량을 더욱 높일 수 있다.
본 발명에서는 바람직하게는 상기 황금찰수수 추출물을 용매 분획법, 한외여과 분획법, 크로마토그래피 분획법 등의 다양한 방법으로 분획한 결과물이 될 수 있다.
예컨대, 본 발명의 황금찰수수 추출물을 헥산, 에틸아세테이트, 또는 부탄올 용매와 물성이 유사한 용매로 분획한 분획물, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 통과시켜 얻은 분획물, 다양한 크로마토그래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리물 등, 추가로 실시된 다양한 정제방법을 통해 얻은 분획도 본 발명의 분획물과 등가물로 정의된다.
본 명세서에서 용어 "유효성분으로 포함하는"이란 상기 황금찰수수 추출물 또는 그 분획물의 효능 또는 활성을 달성하는 데 충분한 양을 포함하는 것을 의미한다. 본 발명의 황금찰수수 추출물 또는 그 분획물은 식용이 가능한 황금찰수수에서 분리된 추출물 또는 그 분획물인바, 과량 투여하여도 인체에 부작용이 없으므로 상기 추출물 또는 그 분획물이 본 발명의 조성물에 포함된 양적 상한은 당업자가 적절한 범위 안에서 선택하여 실시할 수 있다.
본 발명의 탈모방지 또는 발모촉진용 약학적 조성물에서, 상기 황금찰수수 추출물 또는 그 분획물은 모낭유두세포 및 케라티노사이트의 증식을 촉진하는 것을 특징으로 하는데, 본 발명의 실시예에서는 기존 탈모치료제 의약품인 미녹시딜과 비교하여 상기 황금찰수수 추출물 또는 그 분획물이 월등히 높은 모유두세포 및 케라티노사이트의 증식 활성을 갖는 것을 확인할 수 있었다. 따라서, 본 발명의 조성물은 약학적 조성물로 제조될 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 본 발명의 조성물은 (a) 상술한 본 발명의 황금찰수수 추출물 또는 그 분획물의 약학적 유효량; 및 (b) 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약학적 조성물이다. 본 명세서에서 용어 "약학적 유효량"은 상술한 황금찰수수 추출물 또는 그 분획물의 효능 또는 활성을 달성하는 데 충분한 양을 의미한다.
본 발명의 조성물이 약학적 조성물로 제조되는 경우, 본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 허용되는 담체를 포함한다. 본 발명의 약학적 조성물에 포함되는 약학적으로 허용되는 담체는 제제시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 메틸셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 약학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다. 적합한 약학적으로 허용되는 담체 및 제제는 ‘Remington's Pharmaceutical Science’, ‘Mack Publishing Company, Easton PA’ 등의 문헌을 참조할 수 있다.
상기 약학 조성물은 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로, 예를 들면, 경구, 정맥, 근육, 또는 피하 주사에 의해 투여될 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물은 국소 방식으로도 적용될 수 있는데, 국소적용은 피부 및/또는 모발에 대한 유효성분의 직접적인 적용을 의미한다. 본 발명의 국소용 조성물은 용액, 로션, 납고, 크림, 연고, 리포좀, 스프레이, 젤, 폼(foam), 롤러 스틱(roller stick), 또는 피부과에서 일상적으로 사용되는 그 밖의 모든 제형의 형태일 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 나이, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하게 처방될 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물에 포함된 생리활성물질인 황금찰수수 추출물 또는 그 분획물의 투여량은 성인 기준으로 0.01-100㎎/kg 범위 내이다.
본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 황금찰수수 추출물 또는 그 분획물을 유효성분으로 포함하는 탈모방지 또는 발모촉진용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 탈모방지 또는 발모촉진용 화장료 조성물에서, 상기 분획물은 헥산, 에틸아세테이트, 및 부탄올로 이루어진 혼합용매로 분획된 어느 하나의 분획물인 것이 바람직하다.
상기 화장료 조성물은 상기 황금찰수수 추출물 또는 그 분획물을 사용하여 통상의 화장료 제조방법에 따라, 다양한 형태로 제조될 수 있다. 예를 들어, 상기 화장료 조성물은 황금찰수수 추출물 또는 그 분획물을 함유하는 향장 제품, 샴푸, 헤어로션, 헤어크림, 헤어 젤, 헤어토닉, 샴푸, 린스, 비누, 화장수, 에센스 등의 형태로 제조될 수 있으며, 이는 통상의 클렌징액, 수렴액 및 보습액으로 희석하여 사용될 수 있다. 또한, 상기 화장료 조성물은 화장료 조성물 분야에서 통상적으로 사용되는 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료, 및 향료와 같은 통상적인 보조제 또는 화장품용으로 허용되는 담체를 포함할 수 있다.
화장품용으로 허용되는 담체에는 정제수, 오일, 왁스, 지방산, 지방산 알코올, 지방산 에스테르, 계면활성제, 흡습제, 증점제, 점도 안정화제, 킬레이팅제, 완충제, 방부제, 저급 알코올 등이 포함되지만, 이에 제한되는 것은 아니다. 필요에 따라 보습제, 항염증제, 항박테리아제, 항진균제, 비타민, 자외선 차단제, 항생제, 향수, 염료가 포함될 수도 있다.
본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 황금찰수수 추출물 또는 그 분획물을 유효성분으로 포함하는 탈모방지 또는 발모촉진용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 탈모방지 또는 발모촉진용 식품 조성물에서, 상기 분획물은 헥산, 에틸아세테이트, 및 부탄올로 이루어진 혼합용매로 분획된 어느 하나의 분획물인 것이 바람직하다.
본 발명의 식품 조성물의 제형은 통상의 방법에 따라 제조하며, 담체와 함께 건조한 후 캡슐화하거나 기타 정제, 과립, 분말, 음료, 죽 등의 형태로 제형화할 수 있으며, 상기 기재한 것 외에도 모든 식품 형태로 제조할 수 있다.
본 발명의 식품 조성물은 건강기능식품으로써 사용될 수 있다. "건강기능식품"이라 함은 건강기능식품에 관한 법률 제6727호에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 의미하며, "기능성"이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미한다.
본 발명의 식품 조성물은 통상의 식품 첨가물을 포함할 수 있으며, "식품 첨가물"로서의 적합 여부는 다른 규정이 없는 한, 식품의약품안전처에 승인된 식품 첨가물 공전의 총칙 및 일반시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 판정한다.
상기 "식품 첨가물 공전"에 기재된 품목으로는 예를 들어, 케톤류, 글리신, 구연산칼륨, 니코틴산, 계피산 등의 화학적 합성물, 감색소, 감초추출물, 결정셀룰로오스, 고량색소, 구아검 등의 천연첨가물, L-글루타민산나트륨 제제, 면류첨가알칼리제, 보존료제제, 타르색소제제 등의 혼합제제류들을 들 수 있다.
본 발명의 건강 기능성 식품 조성물은 탈모예방 또는 발모촉진을 위한 식품 및 음료 등에 다양하게 이용될 수 있으며, 예컨대, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강기능성 보조 식품, 식품 첨가제 등에 사용될 수 있고, 분말, 과립, 정제, 캡슐, 환 또는 음료인 형태로 사용할 수 있다. 상기 기재한 것 외에도 모든 식품 형태일 수 있다.
이상 설명한 바와 같이, 본 발명의 황금찰수수 추출물 또는 그 분획물은 사람의 모낭유두세포(Dermal papilla cell)와 인간 케라티노사이트(Human keratinocyte)의 성장 촉진에 직접적인 활성을 갖는다. 따라서, 본 발명의 조성물은 탈모의 진행을 완화하고, 모발의 양모/육모, 및 성장을 촉진할 수 있어, 탈모방지 또는 발모촉진용 약학적 조성물, 화장료 조성물 또는 식품 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.
또한, 본 발명의 조성물은 식용 곡물인 황금찰수수만을 원료로 하여 인체에 매우 안전할 뿐만 아니라, 안정성도 매우 탁월하다.
도 1은 본 발명의 황금찰수수 추출물을 경피 투여한지 7일 경과시점에서 C57BL/6 마우스의 발모량을 미녹시딜 처리군과 비교하여 나타낸 그래프이다.
도 2는 본 발명의 황금찰수수 추출물을 처리한 C57BL/6 마우스의 발모량을 미녹시딜 처리군과 비교하여 촬영한 사진이다.
도 3은 본 발명의 황금찰수수 추출물을 처리한 C57BL/6 마우스의 피부조직을 적출하여 케라티노사이트 성장호르몬(Keratinocyte growth factor)의 발현을 웨스턴 블로 방식으로 측정한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 2는 본 발명의 황금찰수수 추출물을 처리한 C57BL/6 마우스의 발모량을 미녹시딜 처리군과 비교하여 촬영한 사진이다.
도 3은 본 발명의 황금찰수수 추출물을 처리한 C57BL/6 마우스의 피부조직을 적출하여 케라티노사이트 성장호르몬(Keratinocyte growth factor)의 발현을 웨스턴 블로 방식으로 측정한 결과를 나타내는 그래프이다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시예는 단지 본 발명을 예시하기 위한 것이므로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는다.
실시예
1.
황금찰수수
추출물 및
분획물의
제조
1-1.
황금찰수수
조추출물의
제조
강원도 영월 승당영농조합법인에서 구입한 황금찰수수 종실 건조물 1kg을 분쇄한 후, 70% 에탄올 5L를 가하여 50℃에서 10시간 동안 1차 추출하였다. 1차 추출액을 Whatman No.2 여과지로 감압 여과한 다음, 잔류물에 다시 신선한 70% 에탄올 5L를 가하고 50℃에서 10시간 동안 2차 추출한 다음, 여과한 여액을 모두 합하였다. 이 여과액을 Buchi 회전감압농축기로 감압 농축하여 280g의 황금찰수수 조추출물을 제조하였다.
1-2.
황금찰수수
분획물의
제조
상기 실시예 1-1에서 수득한 황금찰수수 추출물 50g을 증류수 100㎖에 용해시킨 후, 헥산 100㎖로 3회 추출한 분획물의 상층액을 모두 수거하여 감압농축하여 헥산 분획물 1.2g을 수득하였다.
또한, 상기 헥산 용매분획물을 제조하고 남은 잔류액에 100㎖의 에틸아세테이트를 가하고 3회 추출한 다음, 상층액을 모두 수거하고 감압농축하여 에틸아세테이트 분획물 1.8g을 수득하였다.
또한, 상기 에틸아세테이트 용매 분획물을 제조하고 남은 잔류물에 다시 100㎖의 부탄올을 가하고 3회 추출하였고, 그 상층액을 모두 수거하여 감압농축하여 부탄올 분획물 1.3g을 수득하였다.
상기 수득한 추출물과 분획물을 이용하여 탈모방지 및 발모촉진과 관련된 하기의 실험을 수행하였다.
실험예
1.
모낭유두세포
증식 활성 테스트
흰쥐 수염에서 분리된 모낭 유두 세포를 불멸화한 세포(Rat vibrissa immortalized dermal papilla cell: Filsell W, et al., 1994)를 100units/㎖ 페니실릴(penicillin, Gibco Inc, NY, USA) 및 100㎍/㎖ 스트렙토마이신(streptomycin, Gibco Inc, NY, USA)과 10% FBS(heat-inactivated fetal bovine serum; Gibco Inc, NY, USA)이 함유된 DMEM(Hyclone Inc, USA) 배지를 사용하여 37℃, 5% CO2 항온기에서 배양하였고, 3일에 한 번씩 계대배양 하였다.
모낭 유두 세포(Rat vibrissa immortalized dermal papilla cell)의 증식 여부는 MTT assay를 이용하여 다음과 같은 방법으로 측정하였다. 우선, 모낭 유두 세포(1.0×104 cells/㎖)를 1% FBS를 포함한 DMEM 배지에 혼탁하여 96 well plate에 넣고 48시간 배양한 후, 상기 실시예 1에서 제조한 황금찰수수 조추출물 및 3종의 용매분획물을 10㎍/㎖ 농도로 처리하였다. 양성 대조군으로는 미녹시딜(minoxidil, Sigma, MO, USA)을 10μM의 농도로 처리하였다. 처리 후, 모낭 유두 세포를 48시간 동안 배양한 후, 50㎕의 MTT(Sigma, MO, USA)을 첨가하고 3시간 동안 반응시켰다. 이후, 상층액을 제거하고, DMSO 용액을 200㎕을 가하고 1시간 동안 교반하여 침전물을 용해시킨 후, 마이크로플레이트 리더기(VERSAmax microplate reader, Molecular Devices, CA, USA)를 사용하여 540nm에서 흡광도를 측정하였다. 흡광도는 각 시료군에 대한 평균 흡광도 값을 구하였으며, 대조군의 흡광도 값과 비교하여 증식 정도를 조사하였다.
그 결과, (추가: 아무것도 처리하지 않은 무처리 군을 100%로 하였을 때) 본 발명의 황금찰수수 추출물을 처리한 군에서는 135.7±7.2%의 세포증식 증가 효과가 관찰되었고, 이러한 결과는 기존 탈모치료제 의약품으로 사용되는 양성대조군 미녹시딜 처리군에서 관측된 110.8±5.8%의 세포증식 효과에 비하여 현저하게 개선된 수치임이 확인되었다. 또한, 본 발명의 헥산 분획물을 처리한 군에서는 149.4±3.3%, 에틸아세테이트 분획물을 처리한 군에서는 162.5±4.1%, 그리고, 부탄올 분획물을 처리한 군에서는 139.2±5.6%의 세포증식 활성 효과가 나타나, 황금찰수수 분획물이 추출물에 비해 현저하게 개선된 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
[표 1]. 모낭유두세포 증식 활성 효과 실험결과
실험예
2. 마우스 동물모델에서의 발모촉진 활성 테스트
6주령의 수컷과 암컷 C57BL/6 마우스를 (주)중앙실험동물로부터 구입하여, 사육실에서 1주간 순화 기간을 거친 후 일반증상을 관찰하였고, 체중을 측정하여 건강한 개체만을 선별하여 사용하였다. 실험기간 중의 실험동물은 격리용 마우스 케이지당 5마리씩 수용하고, 사육실 환경조건은 실내온도 23℃, 상대습도 55%, 조명시간 12시간(오전 7시-오후 7시), 조도는 150-200lux로 조절하였으며, 정제수와 실험동물용 사료를 자유로이 섭취하도록 하였다.
시험군은 용매대조군(Normal), 황금찰수수 조추출물을 124㎎/㎖ 농도로 조제한 황금찰수수 조추출물 처리군(HGC), 및 미녹시딜 5% 시판품 처리군으로 분류하였으며, 2일마다 1회 0.2㎖씩 제모 부위에 경피로 도포하면서 실험하였다.
발모효과를 관찰하기 위해 전기제모기(electric clipper)를 사용하여 시료 도포 하루 전 마우스의 등 부위의 털을 제거하고, 제모제를 발라 완전한 제모를 하였다. 각 처리군별 요구 농도로 약 0.2㎖씩을 제모 부위에 붓을 사용하여 고르게 도포하였고, 실험물질의 흡수를 확인한 후 군별로 분류하였다. 각 시험물질의 도포는 21일간 1회씩 매일 실시하였다. 체중측정은 시험물질 도포 직전 및 도포 7일, 14일, 및 21일에 같은 시각 오전(10:00)에 동일한 조건에서 측정하였다.
암수 모두에서 실험 개시일로부터 실험물질 도포 직전, 7일, 14일, 및 21일째에 실험동물을 펜토바비탈(pentobarbital)로 마취시킨 후, 발모의 정도를 육안 및 사진 촬영하여 관찰하였다.
각 처리군의 모발성장 효과는 황금찰수수 조추출물(HGC)을 처리한 군에서 경피 투여 7일째에 미녹시딜 처리군에 비하여 약 2배 이상 빠른 모발 성장 촉진 효과가 측정되었다(도 1 참조).
또한, 황금찰수수(HGC) 추출물을 처리한 동물군에서는 7일째 및 14일째에서 대조군 및 미녹시딜 처리군에 비하여 발모량이 확연히 증가한 것을 관찰할 수 있었다(도 2 참조).
실험예
3.
케라티노사이트
성장 호르몬 발현 변화 측정
상기 실험예 2와 동일한 동물모델을 이용하여 황금찰수수 추출물이 KGF(Keratinocyte growth factor) 호르몬의 발현이 미치는 영향을 측정하였고, 이를 통해 황금찰수수 추출물의 발모촉진 효과를 평가하였다.
먼저, 실험동물의 등쪽 피부를 제모하고, 좌/우로 2등분하여 좌측은 용매대조군, 우측은 황금찰수수 추출물 처리군으로 하여 2일 간격으로 21일 동안 처리하였다. 21일 후 실험동물을 희생시키고, 피부조직을 적출하여 웨스턴 블롯(western blotting)을 실시하여 KGF 호르몬의 발현량을 측정하였다.
그 결과, 도 3을 참조하면, 용매만 처리한 대조군(도 3 좌측 그래프)과 대비하여, 황금찰수수 추출물을 처리한 군(도 3 우측 그래프)에서는 KGF 호르몬의 발현량이 2배 이상 높게 측정되었다. 이러한 결과를 통해 본 발명의 황금찰수수 추출물을 포함하는 조성물이 케라티노사이트 세포의 증식에 직접적으로 작용하는 것을 확인할 수 있었다.
제조예
1.
황금찰수수
추출물 함유 약제의 제조
1-1. 정제
상기 실시예 1-1의 황금찰수수 추출물을 유효성분으로 함유하는 정제는 하기 [표 2]의 조성과 같이 제조하였다.
[표 2]
상기 실시예 1-1에 따른 황금찰수수 추출물의 250 중량부, 락토오스 175.9 중량부, 감자전분 180 중량부 및 콜로이드성 규산 32 중량부와 혼합하였다. 상기 혼합물에 10% 젤라틴용액을 첨가시킨 후, 분쇄하여 14 매쉬체를 통과시켰다. 이것을 건조하고, 여기에 감자전분 160 중량부, 활석 50 중량부 및 스테아린산 마그네슘 5 중량부를 첨가하여 얻은 혼합물을 정제로 제조하였다.
1-2. 시럽제
상기 실시예 1-1의 황금찰수수 추출물을 유효성분으로 함유하는 시럽제는 하기 [표 3]의 조성과 같이 제조하였다.
[표 3]
제조예
2.
황금찰수수
추출물 함유
화장료의
제조
본 발명에 따른 피부 외용 발모촉진용 조성물을 제조하였으며 물리화학적 및 관능적 평가를 통해서 아래 [표 4]의 조성과 같이 영양크림을 제조하였다.
[표 4]
제조예
3.
황금찰수수
추출물 함유 식품의 제조
3-1. 밀가루식품의 제조
상기 실시예 1-1의 황금찰수수 추출물 0.5~5.0 중량부를 밀가루에 첨가하고, 이 혼합물을 이용하여 빵, 케이크, 쿠키, 크래커 및 면류를 제조하였다.
3-2.
스프
및 육즙(gravies)의 제조
상기 실시예 1-1의 황금찰수수 추출물 0.1~5.0 중량부를 스프 및 육즙에 첨가하여 건강증진용 육가공제품, 면류의 수프 및 육즙을 제조하였다.
3-3.
그라운드비프(ground beef)의
제조
상기 실시예 1-1의 황금찰수수 추출물 10 중량부를 그라운드비프에 첨가하여 건강증진용 그라운드비프를 제조하였다.
3-4. 유제품(dairy products)의 제조
상기 실시예 1-1의 황금찰수수 추출물 5~10 중량부를 우유에 첨가하고, 상기 우유를 이용하여 버터 및 아이스크림과 같은 다양한 유제품을 제조하였다.
3-5.
선식의
제조
현미, 보리, 찹쌀, 율무를 공지의 방법으로 알파화시켜 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60메쉬(mesh)의 분말로 제조하였다. 검정콩, 검정깨, 들깨도 공지의 방법으로 쪄서 건조시킨 것을 배전한 후, 분쇄기로 입도 60메쉬의 분말로 제조하였다.
상기 실시예 1-1의 황금찰수수 추출물을 진공농축기에서 감압 농축하고, 분무 및 열풍건조기로 건조하여 얻은 건조물을 분쇄기로 입도 60메쉬로 분쇄하여 건조분말을 얻었다.
상기에서 제조한 곡물류현미 30 중량부, 율무 15 중량부, 보리 20 중량부), 종실류(들깨 7 중량부, 검정콩 8 중량부, 검정깨 7 중량부) 및 실시예 1-1의 황금찰수수 추출물(3 중량부) 배합하여 선식을 제조하였다.
3-6. 건강음료의 제조
액상과당(0.5%), 올리고당(2%), 설탕(2%), 식염(0.5%), 물(75%)과 같은 부재료와, 본 발명에 따른 실시예 1-1의 황금찰수수 추출물 5g을 균질하게 배합하여 순간살균한 후, 이를 유리병, 패트병 등의 소포장 용기에 포장하여 제조하였다.
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다.
따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
Claims (7)
- 황금찰수수 추출물 또는 그 분획물을 유효성분으로 포함하는 탈모방지 또는 발모촉진용 약학적 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 분획물은 헥산, 에틸아세테이트, 및 부탄올로 이루어진 혼합용매로 분획된 어느 하나의 분획물인 것을 특징으로 하는 탈모방지 또는 발모촉진용 약학적 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 황금찰수수 추출물 또는 그 분획물은 모낭유두세포 및 케라티노사이트의 증식을 촉진하는 것을 특징으로 하는 탈모방지 또는 발모촉진용 약학적 조성물. - 황금찰수수 추출물 또는 그 분획물을 유효성분으로 포함하는 탈모방지 또는 발모촉진용 화장료 조성물.
- 제4항에 있어서,
상기 분획물은 헥산, 에틸아세테이트, 및 부탄올로 이루어진 혼합용매로 분획된 어느 하나의 분획물인 것을 특징으로 하는 탈모방지 또는 발모촉진용 화장료 조성물. - 황금찰수수 추출물 또는 그 분획물을 유효성분으로 포함하는 탈모방지 또는 발모촉진용 식품 조성물.
- 제6항에 있어서,
상기 분획물은 헥산, 에틸아세테이트, 및 부탄올로 이루어진 혼합용매로 분획된 어느 하나의 분획물인 것을 특징으로 하는 탈모방지 또는 발모촉진용 식품 조성물.
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| JP2010083840A (ja) | 2008-10-02 | 2010-04-15 | Ichimaru Pharcos Co Ltd | 発毛を抑制又は毛の成長を抑制するための薬剤 |
| KR100957577B1 (ko) | 2007-11-21 | 2010-05-11 | 바이오스펙트럼 주식회사 | 긴잎모시풀추출물 및 이로부터 단리된 아피제닌을 함유하는탈모증 예방 및 치료용 조성물 |
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| KR101467395B1 (ko) * | 2012-11-15 | 2014-12-03 | 대한민국(농촌진흥청장) | 수수 및 수수 부산물 유래 폴리페놀계 화합물을 함유하는 추출물과 이를 유효성분으로 함유하는 염증성 질환 예방 및 치료용 약학 조성물 |
-
2018
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