KR102062025B1 - 표적화된 콘주게이트 및 입자 및 그것의 제형 - Google Patents

표적화된 콘주게이트 및 입자 및 그것의 제형 Download PDF

Info

Publication number
KR102062025B1
KR102062025B1 KR1020177002414A KR20177002414A KR102062025B1 KR 102062025 B1 KR102062025 B1 KR 102062025B1 KR 1020177002414 A KR1020177002414 A KR 1020177002414A KR 20177002414 A KR20177002414 A KR 20177002414A KR 102062025 B1 KR102062025 B1 KR 102062025B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
delete delete
acid
conjugate
poly
particles
Prior art date
Application number
KR1020177002414A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20170020923A (ko
Inventor
로시차 지. 알라르고바
마크 티. 빌로도
크레이그 에이. 던바
수다카르 카디얄라
라제쉬 알. 신데
수 패트릭 림
베이아타 스웨리다-크라비엑
브라이언 에이치. 화이트
패트릭 로제르 바지넷
리차드 우스터
Original Assignee
타베다 세라퓨틱스, 인코포레이티드
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 타베다 세라퓨틱스, 인코포레이티드 filed Critical 타베다 세라퓨틱스, 인코포레이티드
Publication of KR20170020923A publication Critical patent/KR20170020923A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102062025B1 publication Critical patent/KR102062025B1/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/28—Compounds containing heavy metals
    • A61K31/282—Platinum compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/337—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having four-membered rings, e.g. taxol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5365—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5383—1,4-Oxazines, e.g. morpholine ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
    • A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
    • A61K31/704—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin attached to a condensed carbocyclic ring system, e.g. sennosides, thiocolchicosides, escin, daunorubicin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/31—Somatostatins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/55—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound the modifying agent being also a pharmacologically or therapeutically active agent, i.e. the entire conjugate being a codrug, i.e. a dimer, oligomer or polymer of pharmacologically or therapeutically active compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/65—Peptidic linkers, binders or spacers, e.g. peptidic enzyme-labile linkers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

링커를 통해 활성제 예컨대 표적화 모이어티, 예컨대 소마토스타틴 수용체 결합 모이어티에 부착된 치료제, 예방제, 또는 진단제의 콘주게이트를 함유하는 나노입자 및 극미립자, 및 약제학적 그것의 제형이 설계되었다. 그와 같은 나노입자 및 극미립자는 활성제 및/또는 개선된 생체분포의 개선된 시간공간적 전달을 제공할 수 있다. 상기 콘주게이트, 상기 입자, 및 그것의 제형을 제조하는 방법이 제공된다. 상기 제형을 그것을 필요로 하는 대상체에게 투여하는 방법이 예를 들면, 암 또는 감염성 질환을 치료 또는 예방하기 위해 제공된다.

Description

표적화된 콘주게이트 및 입자 및 그것의 제형{TARGETED CONJUGATES AND PARTICLES AND FORMULATIONS THEREOF}
관련 출원 참고
본원은 하기에 대한 우선권을 주장한다: U.S. 가특허 출원 번호 62/019,001(2014년 6월 30일 출원, 명칭 Targeted Conjugates Encapsulated in Particles and Formulations Thereof), U.S. 가특허 출원 번호 62/077,487(2014년 11월 10일 출원, 명칭 Targeted Conjugates Encapsulated in Particles and Formulations Thereof), 및 U.S. 가특허 출원 번호 62/150,413(2015년 4월 21일 출원, 명칭 Targeted Conjugates and Particles and Formulations Thereof) (이들 각각의 내용은 그 전체가 참고로 본 명세서에 편입되어 있음).
발명의 분야
본 발명은 일반적으로 약물 전달을 위한 표적화 리간드, 그것의 콘주게이트, 및 입자의 분야에 관한 것이다. 더 상세하게는, 본 발명은 예를 들면, 암을 치료하기 위해 소마토스타틴 수용체를 표적으로 하는 분자의 사용에 관한 것이다.
나노의약의 개발은 일반적으로 약물의 약제학적 특성을 개선하는 방향으로 지향되고 있고, 일부 경우에서, 더 많은 세포 특이적 방식으로 표적화된 전달을 향상시킨다. 몇 개의 세포 특이적 약물이 기재되었고, 단클론성 항체, 압타머, 펩타이드, 및 소분자를 포함한다. 그와 같은 약물의 일부 잠재적인 이점에도 불구하고, 수많은 문제는 크기, 안정성, 제조 비용, 면역원성, 좋지 못한 약동학 및 다른 인자를 포함하는 그것의 임상 적용을 제한해 왔다.
나노미립자 약물 전달 시스템이 전신 약물 전달에 매력적인 것은, 순환 약물의 반감기를 길게 할 수 있고, 약물의 비-특이적 흡수을 감소시키고, 예를 들면, 향상된 투과 및 체류 (EPR) 효과를 통해 종양에서 약물의 축적을 개선할 수 있기 때문이다. DOXIL® (리포좀 캡슐화된 독소루비신) 및 ABRAXANE® (알부민 결합된 파클리탁셀 나노입자)를 포함하는 나노입자로서 전달하기 위해 제형화된 치료제의 제한된 예가 있다.
약물 또는 약물 후보자의 특정 이환 세포 및 조직, 예를 들면, 암 세포에의 유효한 전달을 위한 나노기술의 개발은, 특정 기관 또는 조직에서, 시간공간적으로 조절된 방식으로 잠재적으로 치료적 도전, 예컨대 전신 독성을 극복하거나 완화할 수 있다. 그러나, 전달 시스템의 표적화는 약물 요법이 필요한 부위에 우선적으로 전달할 수 있지만, 나노입자로부터 방출된 약물은 예를 들면, 유효한 양으로 표적화된 세포의 영역에 남아있지 않을 수 있거나 치료 빈도를 감소시키기 위해 충분한 시간 동안 상대적으로 비독성 상태로 순환에서 남아있지 않을 수 있거나 치료 효과를 여전히 달성하면서도 소량의 약물이 투여되도록 허용한다. 따라서, 입자로 편입될 수 있고 그것의 존재가 약물의 효능을 실질적으로 방해하지 않는 표적화 분자의 확인을 포함하는 개선된 약물 표적화 및 전달에 대한 당해 기술에서 요구가 있다.
발명의 요약
출원인은, 소마토스타틴 수용체 결합 모이어티 및 활성제의 콘주케이트, 예를 들면, 암 치료제 예컨대 백금-함유 제제인 분자를 만들었다. 더욱이, 그와 같은 콘주게이트는 입자에 캡슐화될 수 있다. 콘주게이트 및 입자는 활성제 예컨대 종양 세포독성 약물을 소마토스타틴 수용체 (SSTR)를 발현시키는 세포에 전달하는데 유용하다.
출원인은 폴리머성 나노입자, 및 약제학적 그것의 제형을 포함하는 신규 콘주게이트 및 입자를 개발했다. 활성제 예컨대 치료제, 예방제, 또는 진단제의 콘주게이트는 소마토스타틴 수용체에 결합할 수 있는 표적화 모이어티를 통해 링커에 부착된다. 콘주게이트 및 입자는 활성제 단독의 전달과 비교하여 활성제의 개선된 시간공간적 전달 및/또는 개선된 생체분포를 제공할 수 있다. 일부 경우에서, 표적화 모이어티는 치료제로서 또한 작용할 수 있다. 일부 구현예에서, 표적 치료제는 생체내 치료제의 효능을 실질적으로 방해하지 않는다. 콘주게이트, 입자, 및 그와 같은 입자를 포함하는 제형을 제조하는 방법은 본 명세서에 기재되어 있다. 그와 같은 입자는 활성제에 민감한 질환을 치료 또는 예방하는데, 예를 들면, 암 또는 감염성 질환을 치료 또는 예방하는데 유용하다.
콘주게이트는 링커에 의해 연결된 표적화 리간드 및 활성제를 포함하고, 상기 콘주게이트는 일부 구현예에서는 아래의 식을 갖는다:
(X-Y-Z)
식 중, X는 소마토스타틴 수용체 표적화 모이어티이고; Y는 링커이고; 그리고 Z는 활성제이다.
하나의 리간드는 2종 이상의 활성제에 접합될 수 있고 상기 콘주게이트는 아래의 식을 갖는다: X-(Y-Z)n. 다른 구현예에서, 1종의 활성제 분자는 2종 이상의 리간드에 연결될 수 있고 상기 콘주게이트는 아래의 식을 갖는다: (X-Y)n-Z. n은 1 이상의 정수이다.
표적화 모이어티, X는 임의의 소마토스타틴 수용체 결합 모이어티 예컨대, 비제한적으로, 소마토스타틴, 옥트레오타이드, 옥트레오테이트, 바프레오타이드, 파시레오타이드, 란레오타이드, 세글리타이드, 또는 소마토스타틴 수용체 결합 리간드의 임의의 다른 예일 수 있다. 일부 구현예에서, 표적화 모이어티는 소마토스타틴 수용체 2 및/또는 5에 결합하는 소마토스타틴 수용체 결합 모이어티이다.
링커, Y는, 1종 이상의 활성제 및 1종 이상의 표적화 리간드에 결합되어 콘주게이트를 형성한다. 링커 Y는 에스테르 결합, 디설파이드, 아미드, 아실하이드라존, 에테르, 카바메이트, 카보네이트, 및 우레아로부터 독립적으로 선택된 작용기에 의해 표적화 모이어티 X 및 활성제 Z에 부착된다. 대안적으로 링커는 티올과 말레이미드, 아자이드와 알킨 사이의 콘주게이션에 의해 제공된 것과 같이 비-절단가능 그룹에 의해 표적화 리간드 또는 활성 약물에 부착될 수 있다. 링커는 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 아릴, 및 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 각각의 상기 알킬, 알케닐, 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 아릴, 및 헤테로아릴 그룹은 1종 이상의 그룹으로 임의로 치환되고, 이들 각각은 할로겐, 시아노, 니트로, 하이드록실, 카복실, 카바모일, 에테르, 알콕시, 아릴옥시, 아미노, 아미드, 카바메이트, 알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴, 아릴알킬, 사이클로알킬, 헤테로아릴, 헤테로사이클릴로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 각각의 상기 카복실, 카바모일, 에테르, 알콕시, 아릴옥시, 아미노, 아미드, 카바메이트, 알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴, 아릴알킬, 사이클로알킬, 헤테로아릴, 또는 헤테로사이클릴은 1종 이상의 그룹으로 임의로 치환되고, 이들 각각은 할로겐, 시아노, 니트로, 하이드록실, 카복실, 카바모일, 에테르, 알콕시, 아릴옥시, 아미노, 아미드, 카바메이트, 알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴, 아릴알킬, 사이클로알킬, 헤테로아릴, 헤테로사이클릴로부터 독립적으로 선택된다.
일부 구현예에서, 링커는 절단가능 작용기를 포함한다. 절단가능 작용기는 생체내에서 가수분해될 수 있거나 예를 들면 카텝신 B에 의해 효소적으로 가수분해되도록 설계될 수 있다.
적재물로도 칭하는 활성제, Z는, 치료제, 예방적, 진단, 또는 영양제일 수 있다. 일부 구현예에서, 본 활성제, Z는, 항암제, 화학치료제, 항미생물, 항-염증제, 또는 이들의 조합일 수 있다.
일부 구현예에서, 콘주게이트는 식 Ia에 따른 화합물일 수 있다:
Figure 112017009030734-pct00001
식 중, X는 상기에서 정의된 소마토스타틴 수용체 표적화 모이어티이고; Z는 활성제이고; X', R1, Y', R2 및 Z'는 본 명세서에서 정의된 바와 같다.
X'는 부재하거나 카보닐, 아미드, 우레아, 아미노, 에스테르, 아릴, 아릴카보닐, 아릴옥시, 아릴아미노, 1종 이상의 천연 또는 비천연 아미노산, 티오 또는 석신이미도로부터 독립적으로 선택되고; R1 및 R2는 부재하거나 알킬, 치환된 알킬, 아릴, 치환된 아릴, 폴리에틸렌 글리콜 (2-30 단위)를 포함하고; Y'는 부재하고, 치환된 또는 비치환된 1,2-디아미노에탄, 폴리에틸렌 글리콜 (2-30 단위) 또는 아미드이고; Z'는 부재하거나 카보닐, 아미드, 우레아, 아미노, 에스테르, 아릴, 아릴카보닐, 아릴옥시, 아릴아미노, 티오 또는 석신이미도로부터 독립적으로 선택된다. 일부 구현예에서, 링커는 1종의 활성제 분자가 2종 이상의 표적화 리간드에 연결되도록 하거나, 1종의 표적화 리간드가 2종 이상의 활성제에 연결되도록 할 수 있다.
일부 구현예에서, 콘주게이트는 어떤 화합물일 수 있고, 여기서 링커 Y는 식 Ib에 따른 Am이다:
Figure 112017009030734-pct00002
식 중, A는 본 명세서에서 정의되고, m=0-20.
식 Ia 중 A는 스페이서 단위이고, 부재하거나 하기 치환체로부터 독립적으로 선택된다. 각 치환체에 대해, 단속선은 X, Z 또는 A의 또 다른 독립적으로 선택된 단위와의 치환 부위를 나타내고 상기 X, Z, 또는 A는 치환체의 한 면 상에 부착될 수 있다:
Figure 112017009030734-pct00003
Figure 112017009030734-pct00004
또는
Figure 112017009030734-pct00005
여기서 z = 0-40, R은 H 또는 임의로 치환된 알킬 그룹이고, 그리고 R'는 천연 또는 비천연 아미노산에서 발견된 임의의 측쇄이다.
일부 구현예에서, 본 링커는 식 Ic에 따른 화합물일 수 있다:
Figure 112017009030734-pct00006
식 중, A는 상기에서 정의되어 있고, m=0-40, n=0-40, x=1-5, y=1-5, 그리고 C는 본 명세서에서 정의된 분지화 요소이다.
식 Ic 중 C는 아미노산 예컨대 라이신, 2,3-디아미노프로판산, 2,4-디아미노부티르산, 글루탐산, 아스파르트산, 및 시스테인을 포함하여, 아민, 카복실산, 티올, 또는 석신이미드로부터 선택된, 스페이서 단위, 리간드, 또는 활성 약물에 공유결합하기 위한 3 내지 6개의 작용기를 함유하는 분지 단위이다.
본 발명의 콘주게이트의 비-제한적인 예는 하기 화합물로 구성된 군으로부터 선택된 화합물이다:
Figure 112017009030734-pct00007
Figure 112017009030734-pct00008
일부 구현예에서, 본 활성제 Z는 DM1이다. 일부 구현예에서, 소마토스타틴 수용체 표적화 모이어티 X는 소마토스타틴, 세글리타이드, Tyr3-옥트레오테이트 (TATE), 사이클로(AA-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Phe), 또는 유사체 또는 그것의 유도체로부터 선택된다. X는 그것의 C-말단 또는 N-말단에서 링커 Y에 공유결합될 수 있다. 일부 구현예에서, 표적화 모이어티 X는 적어도 1종의 D-Phe 잔기를 포함하고 표적화 모이어티 X의 D-Phe 잔기의 페닐 고리는 링커-함유 모이어티에 의해 대체되었다.
일 측면에서, 본 발명의 콘주게이트 및 반대이온을 함유하는 소수성 이온-짝짓기 복합체가 제공된다. 일부 구현예에서, 반대이온은 음으로 하전된다. 또 다른 측면에서, 본 발명의 콘주게이트를 함유하는 입자 또는 본 발명의 콘주게이트의 소수성 이온-짝짓기 복합체가 제공된다. 또 다른 측면에서, 약제학적으로 허용가능한 비히클 중 콘주게이트 또는 본 명세서에서 기재된 콘주게이트를 함유하는 입자, 또는 그것의 약제학적으로 허용가능한 염을 함유하는 약제학적 제형이 제공된다.
일 측면에서, 본 발명의 콘주게이트를 함유하는 입자는 제공된다. 일부 구현예에서, 입자는 10 nm 내지 5000 nm의 직경을 갖는다. 일부 구현예에서, 입자는 30 nm 내지 70 nm, 120 nm 내지 200 nm, 200 nm 내지 5000 nm, 또는 500 nm 내지 1000 nm의 직경을 갖는다.
콘주게이트 및 이 콘주게이트를 함유하는 입자를 제조하는 방법이 제공된다. 본 방법은 또한, 질환 또는 병태를 치료하기 위해 제공되고, 상기 방법은 콘주게이트를 함유하는 치료적 유효량의 입자를 그것을 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 구현예에서, 콘주게이트는 하기에 대해 표적화된다: 암 또는 과증식성 질환, 예를 들면, 림프종, 신장 세포 암종, 백혈병, 전립선암, 폐암 (예를 들면, 소세포 폐암 (SCLC) 및 비-SCLC), 췌장암 (예를 들면, 도관), 흑색종, 결장직장암, 난소암 (예를 들면, 상피성 난소암), 유방암, 교모세포종 (예를 들면, 별아교세포종 및 교모세포종 다형성), 위암, 간암, 육종, 방광암, 고환암, 식도암, 두경부 암, 자궁내막 암 및 연수막성 암종증.
도 1는 랫트의 꼬리 정맥 주사 후 시간 (시)의 함수로서 실시예 1의 옥트레오타이드-카바지탁셀 콘주게이트의 혈당 농도 (μM)의 그래프이다. 주사된 제형은 실시예 11의 유리 옥트레오타이드-카바지탁셀 콘주게이트 또는 옥트레오타이드-카바지탁셀 나노입자를 함유했다.
도 2는 랫트의 꼬리 정맥 주사 후 시간 (시)의 함수로서 실시예 2의 옥트레오타이드-독소루비신 콘주게이트의 혈당 농도 (μM)의 그래프이다. 주사된 제형은 실시예 12의 유리 옥트레오타이드-독소루비신 콘주게이트 또는 옥트레오타이드-독소루비신나노입자를 함유했다.
도 3는 옥트레오타이드에 의한 경쟁과 함께 또는 없이 막대로 나타내고 Y-축 그것의 활성을 보여주는 H524 증식 검정에서 다양한 콘주게이트의 그래프이다. Y-축은 부가된 옥트레오타이드가 있는 IC50 대 부가된 옥트레오타이드 없는 IC50의 비를 보여준다. 이러한 검정은, 콘주게이트의 활성이 소마토스타틴 수용체에 달려 있는 정도를 설명한다. 유일한 DM1 콘주게이트가 1 초과의 유의미한 비를 보여준다. 이것은, 유일한 DM1 콘주게이트가 수용체에 의존하는 활성을 보여준다는 놀라운 발견을 설명한다.
도 4는 NCI-H69 모델에서 콘주게이트 10, 콘주게이트 10 NP6 및 DM1에 의한 처리 후 최대 100 일의 기간에 걸쳐 종양 용적 변화를 보여준다.
도 5는 NCI-H69 모델에더 콘주게이트 10, 콘주게이트 10 NP6 및 DM1에 의한 처리 후 최대 100 일의 기간에 걸쳐 종양 < 2000mm3를 갖는 마우스의 퍼센트의 그래프이다.
도 6은 다회용량의 콘주게이트 10 및 콘주게이트 10 NP6에 의한 30 일의 기간에 걸쳐 종양 용적 변화를 설명한다.
도 7은 콘주게이트 10 및 콘주게이트 10 NP6의 랫트 플라즈마 pK를 보여준다.
도 8은 콘주게이트 10 및 콘주게이트 10 NP6에 의한 처리 후 NCI-H69 종양에서 포스포-히스톤 H3 반응을 보여준다.
발명의 상세한 설명
적어도 5종의 소마토스타틴 수용체 하위유형은 특성화되었고 종양은 다양한 수용체 하위유형을 발현할 수 있다. (예를 들면, 참고 Shaer 등, Int. 3. Cancer 70:530-537, 1997). 천연 발생 소마토스타틴 및 그것의 유사체는 수용체 하위유형에 대한 차별적인 결합을 나타낸다. 출원인은, 활성제를 포함하는 콘주게이트의 질환 조직 표적에의 표적화를 개선하기 위한 신규 입자를 만들긱 위해 이러한 특징을 개척했다. 그와 같은 표적화는, 예를 들면, 부위에서 활성제의 양을 개선할 수 있고 상기 대상체에 대한 활성제 독성을 감소시킬 수 있다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이, "독성"은 세포, 조직 유기체 또는 세포성 환경에 대해 유해하거나 유독할 물질 또는 조성물의 수용력을 의미한다. 저독성은 세포, 조직 유기체 또는 세포성 환경에 대해 유해하거나 유독할 물질 또는 조성물의 감소된 수용력을 의미한다. 그와 같은 감소되거나 낮은 독성은 표준 측정에 대해, 치료에 대해서 또는 치료의 부재에 대해일 수 있다.
독성은 대상체의 체중 감소에 대해 추가로 측정될 수 있고, 여기서 체중 감소 체중의 15% 초과, 20% 초과 또는 30% 초과의 체중 감소는 독성을 나타낸다. 독성의 다른 메트릭스가 측정될 수 있고, 그 예는 무기력 및 일반적인 권태감을 포함하는 환자 제시 메트릭스이다. 호중구감소증 또는 혈소판감소증은 또한 독성의 메트릭스일 수 있다.
독성의 약리 지표는 상승된 AST/ALT 수준, 신경독성, 신장 손상, GI 손상 등을 포함한다.
콘주게이트는 입자의 투여 후에 방출된다. 표적화된 약물 콘주게이트는 입자의 향상된 투과성 및 체류 효과 (EPR) 및 개선된 전반적인 생체분포과 활성 분자 표적화를 이용하여 표적화된 입자 또는 캡슐화된 표적화되지 않은 약물의 투여와 비교하여 더 큰 효능 및 내성을 제공한다.
또한, SSTR를 발현시키니 않는세포에 대한 활성제에 연결된 소마토스타틴 표적화 모이어티를 함유하는 콘주게이트의 독성은 활성제 단독의 독성과 비교하여 감소될 것으로 예상된다. 임의의 특정한 이론에 구속되지 않으면서, 출원인은, 이러한 특징은 세포에 들어가는 접합된 활성제의 능력이 활성제 단독의 세포에 들어가는 능력과 비교하여 감소되기 때문이라는 것으로 믿는다. 따라서, 활성제를 포함하는 콘주게이트 및 본원에서 기재된 바와 같은 콘주게이트를 함유하는 입자는 일반적으로, 활성제 단독과 비교하여 비-SSTR 발현 세포에 대한 감소된 독성 및 SSTR 발현 세포에 대한 적어도 동일 또는 증가된 독성을 갖는다.
본 발명의 목적은 시간공간적 약물 전달을 위해 개선된 화합물, 조성물, 및 제형을 제공하는 것이다.
본 발명의 추가 목적은 시간공간적 약물 전달을 위해 개선된 화합물, 조성물, 및 제형을 제조하는 방법을 제공한다.
또한, 본 발명의 목적은 개선된 화합물, 조성물, 및 제형을 필용한 개인에게 투여하는 방법을 제공한다.
I. 정의
용어 "화합물"은, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 묘사된 구조의 모든 입체이성질체, 기하 이성질체, 호변이성질체, 및 동위원소를 포함하는 것을 의미한다. 본원에서, 화합물은 콘주게이트와 상호교환적으로 사용된다. 따라서, 콘주게이트는, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 또한 묘사된 구조의 모든 입체이성질체, 기하 이성질체, 호변이성질체, 및 동위원소를 포함하는 것을 의미한다.
본 명세서에서 기재된 화합물은 (예를 들면, 1종 이상의 입체중심을 갖는) 비대칭일 수 있다. 모든 입체이성질체, 예컨대 거울상이성질체 및 부분입체이성질체가, 다르게 명시되지 않는 한 의도된다. 비대칭으로 치환된 탄소 원자를 함유하는 본 개시내용의 화합물은 광학 활성 또는 라세미 형태로 단리될 수 있다. 광학 활성 개시 물질로부터 광학 활성 형태를 제조하는 방법은 당해 기술에 공지되어 있고, 그 예는 라세미 혼합물의 분해 또는 입체선택적 합성에 의한 것이다. 올레핀, C=N 이중 결합, 등의 많은 기하 이성질체는 본 명세서에서 기재된 화합물에서 또한 존재할 수 있고, 그리고 모든 그와 같은 안정한 이성질체는 본 개시내용에서 고려된다. 본 개시내용의 화합물의 시스 및 트랜스 기하 이성질체가 기재되고 이성질체의 혼합물로서 또는 분리된 이성질체 형태로서 단리될 수 있다.
본 개시내용의 화합물은 또한, 호변이성질체 형태를 포함한다. 호변이성질체 형태는 단일 결합의 인접한 이중 결합과의 교환 및 양성자의 수반되는 이동으로부터 생긴다. 호변이성질체 형태는 동일한 실험식 및 총 전하를 갖는 이성질체 양성자첨가 상태인 양성자성 호변이성질체를 포함한다. 양성자성 호변이성질체의 예는 케톤 - 엔올 쌍, 아미드 - 이미드산 쌍, 락탐 - 락팀 쌍, 아미드 - 이미드산 쌍, 엔아민 - 이민 쌍, 및 환상 형태를 포함하고, 여기서 양성자는 헤테로사이클릭 시스템, 예컨대, 1H- 및 3H-이미다졸, 1H-, 2H- 및 4H- 1,2,4-트리아졸, 1H- 및 2H- 이소인돌, 및 1H- 및 2H-피라졸 중 2 이상의 위치를 차지할 수 있다. 호변이성질체 형태는 평형 상태일 수 있거나 적절한 치환에 의해 하나의 형태로 입체적으로 감겨질 수 있다.
본 개시내용의 화합물은 또한, 중간체 또는 최종 화합물에서 생기는 원자의 모든 동위원소를 포함한다. "동위원소"는 동일한 원자 번호를 갖지만 핵 중 상이한 수의 중성자로부터 기인하는 상이한 질량수를 갖는 원자를 의미한다. 예를 들면, 수소의 동위원소는 삼중수소 및 중수소를 포함한다.
본 개시내용의 화합물 및 염은 일상적인 방법으로 용매 또는 물 분자와 함께 제조되어 용매화물 및 수화물을 형성할 수 있다.
용어들 "대상체" 또는 "환자"는, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 입자가 예를 들면, 실험적인, 치료제, 진단, 및/또는 예방적 목적을 위해 투여될 수 있는 임의의 유기체를 의미한다. 전형적인 대상체는 동물 (예를 들면, 포유동물 예컨대 마우스, 랫트, 토끼, 기니아 피그, 소, 돼지, 양, 말, 개, 고양이, 햄스터, 라마, 비-인간 영장류, 및 인간)을 포함한다.
용어들 "치료하는" 또는 "예방하는"은, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 질환, 장애 및/또는 병태에 취약하지만 질환, 장애 또는 병태를 갖는 갖는 것으로 아직 진단되지 않은 동물에서 발생하는 질환, 장애 또는 병태를 예방하고; 질환, 장애 또는 병태를 억제하고, 예를 들면, 그것의 진행을 지연시키고; 그리고 질환, 장애, 또는 병태를 경감하고, 예를 들면, 질환, 장애 및/또는 병태의 퇴행을 야기하는 것을 포함할 수 있다. 질환, 장애, 또는 병태의 치료는기저 병리생리학이 영향을 받지 않더라도 특정한 질환, 장애, 또는 병태의 적어도 1종의 증상을 완화하고, 그와 같은 제제가 통증의 원인을 치료하지 않을지라도 진통제의 투여에 의해 대상체의 통증을 치료하는 것을 포함할 수 있다.
"표적"은, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 표적화된 구조물이 결합하는 부위를 의미한다. 표적은 생체내 또는 시험관내에 있을 수 있다. 특정 구현예에서, 표적은 백혈병 또는 종양 (예를 들면, 뇌, 폐 (소세포 및 비-소세포), 난소, 전립선, 유방 및 결장 뿐만 아니라 다른 암종 및 육종의 종양)에서 발견되는 암 세포일 수 있다. 또 다른 구현예에서, 표적은 표적화 모이어티 또는 리간드가 결합하는 분자 구조, 예컨대 합텐, 에피토프, 수용체, dsDNA 단편, 탄수화물 또는 효소를 의미할 수 있다. 표적은 조직, 예를 들면, 뉴런의 조직, 장 조직, 췌장 조직, 간, 신장, 전립선, 난소, 폐, 골수, 또는 유방 조직의 유형일 수 있다.
본 방법 또는 콘주게이트 또는 입자에 대한 표적으로서 쓰일 수 있는"표적 세포"는, 일반적으로 동물 세포, 예를 들면, 포유동물 세포이다. 본 방법은 즉, 세포 배양에서 시험관내, 또는 세포가 동물 조직의 일부를 형성하거나 달리 그 조직에 존재하는 생체내의 살아 있는 세포의 세포 기능을 변형시키도록 사용될 수 있다. 따라서, 표적 세포는, 예를 들면, 혈액, 림프 조직, 소화관을 라이닝하는 세포, 예컨대 경구 및 인두 점막, 작은 창자의 융모를 형성하는 세포, 큰 창자를 라이닝하는 세포, (본 발명의 흡입으로 접촉될 수 있는) 동물의 호흡 계통 (콧구멍/폐)를 라이닝하는 세포, 진피/표피 세포, 질 및 직장의 세포, 태반 및 소위 혈액/뇌 장벽의 세포를 포함하는 내부 기관의 세포, 등을 포함할 수 있다 일반적으로, 표적 세포는 적어도 1종의 유형의 SSTR을 발현시킨다. 일부 구현예에서, 표적 세포는 SSTR를 발현시키고 본 명세서에서 기재된 콘주게이트에 의해 표적화되는 세포일 수 있고, 콘주게이트의 활성제의 방출에 의해 영향을 받는 세포 근처에 있다. 예를 들면, 종양과 가까운 SSTR를 발현시키는 혈관이 표적일 수 있고, 한편 상기 부위에서 방출된 활성제는 종양에 영향을 줄 것이다.
용어 "치료 효과"는 기술적으로 인정되고 약리적 활성 물질에 의해 야기된 동물, 특히 포유동물, 및 더 상세하게는 인간에서 국소 또는 전신 효과를 의미한다. 따라서 용어는 동물, 예를 들면, 인간의 요망되는 물리적 또는 정신 발달 및 상태의 향상에서 질환, 장애 또는 병태의 진단, 치유, 완화, 치료 또는 예방을 위해 사용되는 임의의 물질을 의미한다.
용어 "조절"은 기술적으로 인정되고 반응의 상향 조절 (즉, 활성화 또는 자극), 하향 조절 (즉, 저해 또는 억제), 또는 그 두 가지가 결합되거나 분리된 것을 의미한다. 조절는 치료된 독립체에 대해 내부 또는 외부일 수 있는 기준선 또는 참조와 일반적으로 비교된다.
"비경구 투여"는, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 소화관 (장의) 또는 비-침습성 국소 경로를 통하는 것 이외의 임의의 방법에 의한 투여를 의미한다. 예를 들면, 비경구 투여는 정맥내로, 진피내로, 복강내로, 늑막내로, 기관내로, in골내로, 뇌내로, 척추강내로, 근육내로, 피하로, 결막하, 주사로, 주입에 의해 환자에게 투여하는 것을 포함할 수 있다.
"국소 투여"는, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 피부, 오리피스, 또는 점막에의 비-침습성 투여를 의미한다. 국소 투여는 국소로 전달될 수 있고, 즉, 치료제는 전신 노출 없는 또는 최소 전신 노출과 함께 하는 전달의 양으로 국소 효과를 제공할 수 있다. 일부 국소 제형은 예를 들면, 개체의 혈류에의 흡착을 통해 전신 효과를 제공할 수 있다. 국소 투여는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 피부 및 경피 투여, 구강 투여, 비강내 투여, 질내 투여, 방광내 투여, 안과 투여, 및 직장 투여.
"장의 투여"는, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 위장관을 통한 흡수에 의해 투여하는 것을 의미한다. 장의 투여는 경구 및 설하 투여, 위 투여, 또는 직장 투여를 포함할 수 있다.
"폐 투여"는, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 흡입으로 또는 기관내 투여 폐에 투여하는 것을 의미한다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "흡입"는 공기의 폐포에의 흡입을 의미한다. 공기의 흡입는 입 또는 코를 통해서 일어날 수 있다.
용어들 "충분한" 및 "유효한"은, 본 명세서에서 상호교환적으로 사용되는 바와 같이, 1종 이상의 원하는 결과(들)를 달성하는데 필요한 양 (예를 들면, 질량, 용적, 복용량, 농도, 및/또는 기간)을 의미한다. "치료적으로 유효한 양"는 적어도 1종의 증상 또는 특정한 병태 또는 장애의 측정가능한 개선 또는 예방을 달성하고 기대 수명의 측정가능한 향상을 달성하거나, 또는 일반적으로 환자 삶의 질을 개선하는데 필요한 적어도 최소 농도이다. 따라서 치료적으로 유효한 양은 특정 생물학적 활성 분자 및 치료될 특정 병태 또는 장애에 대해 의존적이다. 많은 활성제, 예컨대 항체의 치료적으로 유효한 양은, 당해 기술에 공지되어 있다. 예를 들면, 특정 장애를 치료하기 위한 본 명세서에서 기재된 화합물 및 조성물의치료적으로 유효한 양은 숙련가, 예컨대 의사의 기교 내에 있는 기술에 의해 결정될 수 있다.
용어들 "생체활성제" 및 "활성제"는, 본 명세서에서 상호교환적으로 사용되는 바와 같이, 비제한적으로, 신체에서 국소로 또는 전신으로 작용하는 생리적으로 또는 약리적 활성 물질을 포함한다. 생체활성제는 질환 또는 병의 치료 (예를 들면, 치료제), 예방 (예를 들면, 예방적 제제), 진단 (예를 들면, 진단제), 치유 또는 완화를 위해 사용된 물질, 및 신체의 구조 또는 기능에 영향을 주는 물질, 또는 예정된 생리적 환경에 놓인 후 생물학적 활성 또는 더 많은 활성을 갖는 전구-약물이다.
용어 "전구약물"은 시험관내 및/또는 생체내에서 생물학적 활성 형태로 전환되는 작은 유기 분자, 펩타이드, 핵산 또는 단백질을 포함하는 제제를 의미한다. 전구약물이, 일부 상황에서, 유용할 수 있는 것은 모 화합물 (활성 화합물)보다 투여하기 더 쉬울 수 있기 때문이다. 예를 들면, 전구약물은 경구 투여에 의해 생체이용가능할 수 있고, 반면에 모 화합물은 그렇지 않다. 전구약물은 또한 모 약물과 비교하여 약제학적 조성물 중 개선된 용해도를 가질 수 있다. 전구약물은 또한 모 약물보다 독성이 덜 할 수 있다. 전구약물은 효소 과정 및 대사성 가수분해를 포함하는 다양한 기전에 의해 모 약물로 전환될 수 있다. Harper, N.J. ((1962) Drug Latentiation in Jucker, ed. Progress in Drug Research, 4:221-294; Morozowich 등 (1977) Application of Physical Organic Principles to Prodrug Design in E. B. Roche ed. Design of Biopharmaceutical Properties through Prodrugs and Analogs, APhA; Acad. Pharm. Sci.; E. B. Roche, ed. (1977) Bioreversible Carriers in Drug in Drug Design, Theory and Application, APhA; H. Bundgaard, ed. (1985) Design of Prodrugs, Elsevier; Wang 등 (1999) Prodrug approaches to the improved delivery of peptide drug, Curr. Pharm. Design. 5(4):265-287; Pauletti 등 (1997) Improvement in peptide bioavailability: Peptidomimetics and Prodrug Strategies, Adv. Drug. Delivery Rev. 27:235-256; Mizen 등 (1998). The Use of Esters as Prodrugs for Oral Delivery of β-Lactam antibiotics, Pharm. Biotech. 11:345-365; Gaignault 등 (1996) Designing Prodrugs and Bioprecursors I. Carrier Prodrugs, Pract. Med. Chem. 671-696; M. Asgharnejad (2000). Improving Oral Drug Transport Via Prodrugs, in G. L. Amidon, P. I. Lee and E. M. Topp, Eds., Transport Processes in Pharmaceutical Systems, Marcell Dekker, p. 185-218; Balant 등 (1990) Prodrugs for the improvement of drug absorption via different routes of administration, Eur . J. Drug Metab . Pharmacokinet., 15(2): 143-53; Balimane and Sinko (1999). Involvement of multiple transporters in the oral absorption of nucleoside analogues, Adv . Drug Delivery Rev., 39(1-3):183-209; Browne (1997). Fosphenytoin (Cerebyx), Clin . Neuropharmacol. 20(1): 1-12; Bundgaard (1979). Bioreversible derivatization of drugs--principle and applicability to improve the therapeutic effects of drugs, Arch. Pharm . Chemi. 86(1): 1-39; H. Bundgaard, ed. (1985) Design of Prodrugs , New York: Elsevier; Fleisher 등 (1996) Improved oral drug delivery: solubility limitations overcome by the use of prodrugs, Adv . Drug Delivery Rev. 19(2): 115-130; Fleisher 등 (1985) Design of prodrugs for improved gastrointestinal absorption by intestinal enzyme targeting, Methods Enzymol. 112: 360-81; Farquhar D, 등 (1983) Biologically Reversible Phosphate-Protective Groups, J. Pharm . Sci., 72(3): 324-325; Han, H.K. 등 (2000) Targeted prodrug design to optimize drug delivery, AAPS PharmSci., 2(1): E6; Sadzuka Y. (2000) Effective prodrug liposome and conversion to active metabolite, Curr . Drug Metab., 1(1):31-48; D.M. Lambert (2000) Rationale and applications of lipids as prodrug carriers, Eur . J. Pharm . Sci ., 11 Suppl. 2:S15-27; Wang, W. 등 (1999) Prodrug approaches to the improved delivery of peptide drugs. Curr. Pharm . Des., 5(4):265-87.
용어 "생체적합성"은, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 일반적으로 수령체에게 비독성이고 수령체에게 임의의 유의미한 역효과를 야기하지 않는 그것의 임의의 대사물 또는 분해 생성물과 함께 물질을 의미한다. 일반적으로 말하면, 생체적합성 물질은 환자에게 투여될 때 유의미한 염증성 또는 면역 반응을 유도하지 않는 물질을 의미한다.
용어 "생분해성"은 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 일반적으로 대상체에 의해 대사작용되고, 제거하고, 또는 배출될 수 있는 더 작은 단위 도는 화학 종으로 분해되거나 침식될 물질을 의미한다. 분해 시간은 조성물 및 형태학의 함수이다. 분해 시간은 시 내지 주일 수 있다.
용어 "약제학적으로 허용가능한"은, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 하기와 같은 기관의 지침에 따라, 건전한 의료 판단의 범위 내에서, 합리적인 유익/유해 비율에 적합한 과도한 독성, 자극, 알러지성 반응, 또는 다른 문제 또는 합병증 없이 인간 및 동물의 조직과 접촉해서 사용하기에 적합한 화합물, 물질, 조성물, 및/또는 복용 형태를 의미한다: 미국 식품의약품안전청. "약제학적으로 허용가능한 담체"은, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 생체내에서 조성물의 전달을 촉진하는 약제학적 제형의 모든 성분을 의미한다. 약제학적으로 허용가능한 담체는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 희석제, 보존제, 결합제, 윤활제, 붕해제, 팽윤제, 충전제, 안정제, 및 이들의 조합.
용어 "분자량"은, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 일반적으로 물질의 질량 또는 평균 질량을 의미한다. 폴리머 또는 올리고머이면, 분자량은 벌크 폴리머의 상대적 평균 사슬 길이 또는 상대적 사슬 질량을 의미할 수 있다. 실제로, 폴리머 및 올리고머의 분자량은 겔 투과 크로마토그래피 (GPC) 또는 모세관 점도측정을 포함하는 다양한 방식으로 추정되거나 특성화될 수 있다. GPC 분자량은 수평균 분자량 (Mn)과 대조적으로 중량-평균 분자량 (Mw)으로서 보고된다. 모세관 점도측정은 농도, 온도, 및 용매 조건의 특정한 세트를 사용하여 희석 폴리머 용액으로부터 결정된 고유 점도로서 분자량의 추정치를 제공한다.
용어 "소분자"는, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 일반적으로 분자량이 2000 g/mol 미만, 1500 g/mol 미만, 1000 g/mol 미만, 800 g/mol 미만, 또는 미만 500 g/mol 미만인 유기 분자량을 의미한다. 소분자는 비-폴리머성 및/또는 비-올리고머성이다.
용어 "친수성"은, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 물과 쉽게 반응하는 강한 극성 그룹을 갖는 물질을 의미한다.
용어 "소수성"은, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 물에 대한 친화성이 부족하고; 물을 물리치고 흡수하지 않을 뿐만 아니라 물에서 용해되거나 그것과 혼합되지 않는 물질을 의미한다.
용어 "친유성"은, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 지질에 대한 친화성을 갖는 화합물을 의미한다.
용어 "양친매성"은, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 친수성 및 친유성 (소수성) 특성을 결합한 분자를 의미한다. "양친매성 물질"은 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 소수성 또는 더 소수성 올리고머 또는 폴리머 (예를 들면, 생분해성 올리고머 또는 폴리머) 및 친수성 또는 더 친수성 올리고머 또는 폴리머를 함유하는 물질을 의미한다.
용어 "표적화 모이어티"는, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 특정 로케일(locale)에 결합하거나 그것에 국한된 모이어티를 의미한다. 모이어티는, 예를 들면, 단백질, 핵산, 핵산 유사체, 탄수화물, 또는 소분자일 수 있다. 로케일은 조직, 및 특정한 세포 유형, 또는 세포하 구획일 수 있다. 일부 구현예에서, 표적화 모이어티는 선택된 분자에 특이적으로 결합할 수 있다.
용어 "반응성 커플링 그룹"은, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 제2 작용기와 반응하여 공유 결합을 형성할 수 있는 임의의 화학 작용기를 의미한다. 반응성 커플링 그룹의 선택은 당해 기술의 숙련가의 능력 내에 있다. 반응성 커플링 그룹의 예는 1차 아민 (-NH2) 및 아민-반응성 연결 기 예컨대 이소티오시아네이트, 이소시아네이트, 아실 아자이드, NHS 에스테르, 설포닐 클로라이드, 알데하이드, 글리옥살, 에폭사이드, 옥시란, 카보네이트, 아릴 할라이드, 이미도에스테르, 카보디이미드, 무수물, 및 플루오로페닐 에스테르를 포함할 수 있다. 아실화 또는 알킬화에 의한 아민에 대한 대부분의 이들 콘주게이트. 반응성 커플링 그룹의 예는 알데하이드 (-COH) 및 알데하이드 반응성 연결 기 예컨대 하이드라자이드, 알콕시아민, 및 1차 아민을 포함할 수 있다. 반응성 커플링 그룹의 예는 티올 그룹 (-SH) 및 설프하이드릴 반응성 그룹 예컨대 말레이미드, 할로아세틸, 및 피리딜 디설파이드를 포함할 수 있다. 반응성 커플링 그룹의 예는 광반응성 커플링 그룹 예컨대 아릴 아자이드 또는 디아지린을 포함할 수 있다. 커플링 반응는 촉매, 열, pH 버퍼, 광, 또는 이들의 조합의 사용을 포함할 수 있다.
용어 "보호 그룹"은, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 원하는 작용기를 어떤 반응 조건으로부터 보호하기 위해 다른 원하는 작용기에 부가되고/거나 그 작용기에 대해 치환되고 선택적으로 제거되고/거나 대체되어 원하는 작용기를 탈보호하거나 노출할 수 있는 작용기를 의미한다. 보호 그룹은 숙련가에게 공지되어 있다. 적합한 보호 그룹은 아래에서 기재된 것들을 포함할 수 있다: Greene 및 Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, (1991). 산 민감성 보호 그룹은 디메톡시트리틸 (DMT), tert- 부틸카바메이트 (tBoc) 및 트리플루오로아세틸 (tFA)를 포함한다. 염기 민감성 보호 그룹은 9-플루오레닐메톡시카보닐 (Fmoc), 이소부티르l (iBu), 벤조일 (Bz) 및 페녹시아세틸 (pac)를 포함한다. 다른 보호 그룹은 아세트아미도메틸, 아세틸, tert- 아밀옥시카보닐, 벤질, 벤질옥시카보닐, 2-(4-바이페닐릴)-2-프로필 옥시카보닐, 2- 브로모벤질옥시카보닐, tert-부틸7 tert-부틸옥시카보닐, 1-카보벤즈옥사미도-2,2.2- 트리플루오로에틸, 2,6-디클로로벤질, 2-(3,5-디메톡시페닐)-2-프로필옥시카보닐, 2,4- 디나이트로페닐, 디티아석시닐, 포르밀, 4-메톡시벤젠설포닐, 4-메톡시벤질, 4- 메틸벤질, o-니트로페닐설페닐, 2-페닐-2-프로필옥시카보닐, α-2,4,5- 테트라메틸벤질옥시카보닐, p-톨루엔설포닐, 크산테닐, 벤질 에스테르, N- 하이드록시석신이미드 에스테르, p-니트로벤질 에스테르, p-니트로페닐 에스테르, 페닐 에스테르, p- 니트로카보네이트, p-니트로벤질카보네이트, 트리메틸실릴 및 펜타클로로페닐 에스테르를 포함한다.
용어 "활성화된 에스테르"은, 본 명세서에서 사용된 바와 같이 카복실산의 알킬 에스테르를 의미하고, 상기 알킬은 아미노 그룹 보유 분자에 의한 친핵성 공격에 민감한 카보닐을 부여하는 양호한 이탈 그룹이다. 따라서 활성화된 에스테르는 아미노분해에 민감하고 아민과 반응하여 아미드를 형성한다. 활성화된 에스테르는 카복실산 에스테르 그룹 -CO2R을 함유하고, R은 이탈 그룹이다.
용어 "알킬"은 곧은 사슬 알킬 그룹, 분지형-사슬 알킬 그룹, 사이클로알킬 (지환족) 그룹, 알킬-치환된 사이클로알킬 그룹, 및 사이클로알킬-치환된 알킬 그룹을 포함하는 포화된 지방족 그룹의 라디칼을 의미한다.
일부 구현예에서, 직쇄 또는 분지쇄 알킬은 하기를 갖는다: 원자 그것의 골격 (예를 들면, 직쇄에 대해 C1-C30, 분지쇄에 대해 C3-C30)에서, 30개 이하, 20개 이하, 12개 이하, 또는 7개 이하의 탄소 원자. 마찬가지로, 일부 구현예에서 그것의 고리 구조 중 3-10개의 탄소 원자를 갖는 사이클로알킬은, 예를 들면, 고리 구조에서 5, 6 또는 7개의 탄소를 갖는다. 명세서, 실시예, 및 청구범위 전체에 걸쳐 사용된 용어 "알킬" (또는 "저급 알킬")은 "비치환된 알킬" 및 "치환된 알킬" 둘 모두를 포함하는 것으로 의도되고, 그것의 후자는 탄화수소 골격의 1개 이상의 탄소 상의 수소를 치환하는 1종 이상의 치환체을 갖는 알킬 모이어티를 의미한다. 그와 같은 치환체는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 할로겐, 하이드록실, 카보닐 (예컨대 카복실, 알콕시카보닐, 포르밀, 또는 아실), 티오카보닐 (예컨대 티오에스테르, 및 티오아세테이트, 또는 티오포르메이트), 알콕실, 포스포릴, 포스페이트, 포스포네이트, 및 포스피네이트, 아미노, 아미도, 아미딘, 이민, 시아노, 니트로, 아지도, 설프하이드릴, 알킬티오, 설페이트, 설포네이트, 설파모일, 설폰아미도, 설포닐, 헤테로사이클릴, 아르알킬, 또는 방향족 또는 헤테로방향족 모이어티.
탄소의 수가 다르게는 명시되지 않으면, "저급 알킬"은, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 상기에서 정의된 바와 같지만, 그것의 골격 구조에서 1 내지 10개의 탄소, 또는 1 내지 6개의 탄소 원자를 갖는 알킬 그룹을 의미한다. 마찬가지로, "저급 알케닐" 및 "저급 알키닐"은 유사한 사슬 길이를 갖는다. 일부 구현예에서, 알킬 그룹은 저급 알킬이다. 일부 구현예에서, 알킬로서 본 명세서에서 지정된 치환체는 저급 알킬이다.
탄화수소 사슬 상에서 치환된 모이어티는 자체가 적절하다면 치환될 수 있다는 것을 것 당해 분야의 숙련가는 이해할 것이다. 예를 들면, 치환된 알킬의 치환체는 하기를 포함할 수 있다: 할로겐, 하이드록시, 니트로, 티올, 아미노, 아지도, 이미노, 아미도, 포스포릴 (포스포네이트 및 포스피네이트 포함), 설포닐 (설페이트, 설폰아미도, 설파모일 및 설포네이트 포함), 및 실릴 그룹, 뿐만 아니라 에테르, 알킬티오, 카보닐 (케톤, 알데하이드, 카복실레이트, 및 에스테르 포함), -CF3, -CN 등. 사이클로알킬은 동일한 방식으로 치환될 수 있다.
용어 "헤테로알킬"은, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 적어도 1종의 헤테로원자를 함유하는, 직쇄 또는 분지쇄, 또는 사이클릭 탄소-함유 라디칼, 또는 이들의 조합을 의미한다. 적합한 헤테로원자는, 비제한적으로, O, N, Si, P, Se, B, 및 S를 포함하고, 상기 인 및 황 원자는 임의로 산화되고, 질소 헤테로원자는 임의로 사원화된다. 헤테로알킬은 알킬 그룹에 대해 상기에서 정의된 바와 같이 치환될 수 있다.
용어 "알킬티오"는 그 그룹에 부착된황 라디칼을 갖는, 상기에서 정의된 바와 같은 알킬 그룹을 의미한다. 일부 구현예에서, "알킬티오" 모이어티는 -S-알킬, -S-알케닐, 및 -S-알키닐 중 하나로 나타낸다. 대표적인 알킬티오 그룹은 메틸티오, 및 에틸티오를 포함한다. 용어 "알킬티오"는 또한, 사이클로알킬 그룹, 알켄 및 사이클로알켄 그룹, 및 알킨 그룹을 포함한다. "아릴티오"는 아릴 또는 헤테로아릴 그룹을 의미한다. 알킬티오 그룹은 알킬 그룹 에 대해 상기에서 정의된 바와 같이 치환될 수 있다.
용어들 "알케닐" 및 "알키닐"은, 상기에서 기재된 알킬와 길이와 가능한 치환이 비슷하지만, 적어도 1종의 이중 또는 삼중 결합 각각을 함유하는 불포화된 지방족 그룹을 의미한다.
용어들 "알콕실" 또는 "알콕시"는 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 그 그룹에 부착된 산소 라디칼을ㄹ 갖는 상기에서 정의된 바와 같은 알킬 그룹을 의미한다. 대표적인 알콕실 그룹은 메톡시, 에톡시, 프로필옥시, 및 tert-부톡시를 포함한다. "에테르"는 산소에 의해 공유 결합된 2개의 탄화수소이다. 따라서, 알킬을 에테르로 만드는 알킬의 치환체는 알콕실이거나, 그것과 닮아 있고, 그 예는 -O-알킬, -O-알케닐, 및 -O-알키닐 중 하나로 나타낼 수 있다. 아르옥시는-O-아릴 또는 O-헤테로아릴로 나타낼 수 있고, 여기서 아릴 및 헤테로아릴은 아래에서 정의된 바와 같다. 알콕시 및 아르옥시 그룹은 알킬에 대해 상기에서 기재된 바와 같이 치환될 수 있다.
용어들 "아민" 및 "아미노"는 기술적으로 인정되고 비치환된 및 치환된 아민 둘 모두, 예를 들면, 아래의 일반식으로 나타낼 수 있는 모이어티를 의미한다:
Figure 112017009030734-pct00009
또는
Figure 112017009030734-pct00010
여기서 R9, R10, 및 R'10 각각은 독립적으로 수소, 알킬, 알케닐, -(CH2)m-R8 또는 R9를 나타내고 R10는, 이들이 부착된 N 원자와 함께 합쳐져서, 고리 구조에서 4 내지 8개의 원자를 갖는 헤테로사이클을 완성하고; R8는 아릴, 및 사이클로알킬, 및 사이클로알케닐, 및 헤테로사이클 또는 폴리사이클을 나타내고; 그리고 m은 제로 또는 1 내지 8 범위의 정수이다. 일부 구현예에서, R9 또는 R10 중 단 하나는 카보닐, 예를 들면, R9, R10일 수 있고, 질소는 함께 이미드를 형성하지 않는다. 또 다른 구현예에서, 용어 "아민"은 예를 들면 아미드를 포함하지 않고, R9 및 R10 중 하나는 카보닐을 나타낸다. 추가 구현예에서, R9 및 R10 (및 임의로 R'10) 각각은 독립적으로 수소, 알킬 또는 사이클로알킬, 알케닐 또는 사이클로알케닐, 또는 알키닐을 나타낸다. 따라서, 용어 "알킬아민"은, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 상기에서 정의된 바와 같은 아민 그룹을 의미하고, 이 그룹은 그 그룹에 부착된, (알킬에 대해 상기에서 기재된 바와 같이) 치환되거나 비치환된 알킬을 가지며, 즉, R9 및 R10 중 적어도 하나는 알킬 그룹이다.
용어 "아미도"는 아미노-치환된 카보닐로서 기술적으로 인식되어 있고 아래의 일반식으로 나타낼 수 있는 모이어티를 포함한다:
Figure 112017009030734-pct00011
여기서 R9 및 R10는 상기에서 정의된 바와 같다.
"아릴"은, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, C5-C10-원 방향족, 헤테로사이클릭, 융합된 방향족, 융합된 헤테로사이클릭, 2방향족, 또는 바이헤테로사이클릭 고리계를 의미한다. 광범위하게 정의된, "아릴"은, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 0 내지 4개의 헤테로원자를 포함할 수 있는 5-, 6-, 7-, 8-, 9-, 및 10-원 단일-고리 방향족 그룹, 예를 들면, 벤젠, 피롤, 푸란, 티오펜, 이미다졸, 옥사졸, 티아졸, 트리아졸, 피라졸, 피리딘, 피라진, 피리다진 및 피리미딘, 등을 포함한다. 고리 구조 중 헤테로원자를 갖는 아릴 그룹들은 또한 "아릴 헤테로사이클" 또는 "헤테로방향족"로 칭할 수 있다. 방향족 고리는 1종 이상의 고리 위치에서 하기를 비제한적으로 포함하는 1종 이상의 치환체로 치환될 수 있다: 할로겐, 아자이드, 알킬, 아르알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 하이드록실, 알콕실, 아미노 (또는 사원화된 아미노), 니트로, 설프하이드릴, 이미노, 아미도, 포스포네이트, 포스피네이트, 카보닐, 카복실, 실릴, 에테르, 알킬티오, 설포닐, 설폰아미도, 케톤, 알데하이드, 에스테르, 헤테로사이클릴, 방향족 또는 헤테로방향족 모이어티, -CF3, -CN; 및 이들의 조합.
용어 "아릴"은 또한, 2종 이상의 사이클릭 고리를 갖는 폴리사이클릭 고리계를 포함하고, 여기서 2종 이상의 탄소는 2개의 인접하는 고리 (즉, "융합 고리")에 공통이고, 상기 고리 중 적어도 하나는 방향족, 예를 들면, 다른 사이클릭 고리 또는 고리는 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 아릴 및/또는 헤테로사이클일 수 있다. 헤테로사이클릭 고리의 예는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 벤즈이미다졸릴, 벤조푸라닐, 벤조티오푸라닐, 벤조티오페닐, 벤즈옥사졸릴, 벤즈옥사졸리닐, 벤즈티아졸릴, 벤즈트리아졸릴, 벤즈테트라졸릴, 벤즈이속사졸릴, 벤즈이소티아졸릴, 벤즈이미다졸리닐, 카바졸릴, 4aH 카바졸릴, 카볼리닐, 크로마닐, 크로메닐, 신놀리닐, 데카하이드로퀴놀리닐, 2H,6H-1,5,2-디티아지닐, 디하이드로푸로[2,3 b]테트라하이드로푸란, 푸라닐, 푸라자닐, 이미다졸리디닐, 이미다졸리닐, 이미다졸릴, 1H-인다졸릴, 인돌레닐, 인돌리닐, 인돌리지닐, 인돌릴, 3H-인돌릴, 이사티노일, 이소벤조푸라닐, 이소크로마닐, 이소인다졸릴, 이소인돌리닐, 이소인돌릴, 이소퀴놀리닐, 이소티아졸릴, 이속사졸릴, 메틸렌디옥시페닐, 모폴리닐, 나프티리디닐, 옥타하이드로이소퀴놀리닐, 옥사디아졸릴, 1,2,3-옥사디아졸릴, 1,2,4-옥사디아졸릴, 1,2,5-옥사디아졸릴, 1,3,4-옥사디아졸릴, 옥사졸리디닐, 옥사졸릴, 옥신돌릴, 피리미디닐, 펜안트리디닐, 펜안트롤리닐, 펜아지닐, 페노티아지닐, 페녹사티닐, 펜옥사지닐, 프탈라지닐, 피페라지닐, 피페리디닐, 피페리도닐, 4-피페리도닐, 피페로닐, 프테리디닐, 퓨리닐, 피라닐, 피라지닐, 피라졸리디닐, 피라졸리닐, 피라졸릴, 피리다지닐, 피리도옥사졸, 피리도이미다졸, 피리도티아졸, 피리디닐, 피리딜, 피리미디닐, 피롤리디닐, 피롤리닐, 2H-피롤릴, 피롤릴, 퀴나졸리닐, 퀴놀리닐, 4H-퀴놀리지닐, 퀴녹살리닐, 퀴누클리디닐, 테트라하이드로푸라닐, 테트라하이드로이소퀴놀리닐, 테트라하이드로퀴놀리닐, 테트라졸릴, 6H-1,2,5-티아디아지닐, 1,2,3-티아디아졸릴, 1,2,4-티아디아졸릴, 1,2,5-티아디아졸릴, 1,3,4-티아디아졸릴, 티안트레닐, 티아졸릴, 티에닐, 티에노티아졸릴, 티에노옥사졸릴, 티에노이미다졸릴, 티오페닐 및 크산테닐. 고리 중 1종 이상은 "아릴" 에 대해 상기에서 정의된 바와 같이 치환될 수 있다.
용어 "아르알킬"은, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 아릴 그룹 (예를 들면, 방향족 또는 헤테로방향족 그룹)으로 치환된 알킬 그룹을 의미한다.
용어 "카보사이클"은, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 방향족 또는 비-방향족 고리를 의미하고 상기 고리의 각 원자는 탄소이다.
"헤테로사이클" 또는 "헤테로사이클릭"은, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 고리 탄소 또는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 고리의 질소를 통해 부착된 사이클릭 라디칼을 의미하고, 상기 고리는 3-10개의 고리 원자, 예를 들면, 5-6개의 고리 원자를 함유하고, 탄소, 및 비-퍼옥사이드 산소, 황, 및 N(Y) (여기서 Y는 부재하거나 H, O, (C1-C10) 알킬, 페닐 또는 벤질임)으로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자로 구성되고, 1-3개의 이중 결합을 임의로 함유하고 1종 이상의 치환체로 임의로 치환된다. 헤테로사이클릭 고리의 예는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 벤즈이미다졸릴, 벤조푸라닐, 벤조티오푸라닐, 벤조티오페닐, 벤즈옥사졸릴, 벤즈옥사졸리닐, 벤즈티아졸릴, 벤즈트리아졸릴, 벤즈테트라졸릴, 벤즈이속사졸릴, 벤즈이소티아졸릴, 벤즈이미다졸리닐, 카바졸릴, 4aH -카바졸릴, 카볼리닐, 크로마닐, 크로메닐, 신놀리닐, 데카하이드로퀴놀리닐, 2H,6H-1,5,2-디티아지닐, 디하이드로푸로[2,3-b]테트라하이드로푸란, 푸라닐, 푸라자닐, 이미다졸리디닐, 이미다졸리닐, 이미다졸릴, 1H-인다졸릴, 인돌레닐, 인돌리닐, 인돌리지닐, 인돌릴, 3H-인돌릴, 이사티노일, 이소벤조푸라닐, 이소크로마닐, 이소인다졸릴, 이소인돌리닐, 이소인돌릴, 이소퀴놀리닐, 이소티아졸릴, 이속사졸릴, 메틸렌디옥시페닐, 모폴리닐, 나프티리디닐, 옥타하이드로이소퀴놀리닐, 옥사디아졸릴, 1,2,3-옥사디아졸릴, 1,2,4-옥사디아졸릴, 1,2,5-옥사디아졸릴, 1,3,4-옥사디아졸릴, 옥사졸리디닐, 옥사졸릴, 옥세파닐, 옥세타닐, 옥신돌릴, 피리미디닐, 펜안트리디닐, 펜안트롤리닐, 펜아지닐, 페노티아지닐, 페녹사티닐, 펜옥사지닐, 프탈라지닐, 피페라지닐, 피페리디닐, 피페리도닐, 4-피페리도닐, 피페로닐, 프테리디닐, 퓨리닐, 피라닐, 피라지닐, 피라졸리디닐, 피라졸리닐, 피라졸릴, 피리다지닐, 피리도옥사졸, 피리도이미다졸, 피리도티아졸, 피리디닐, 피리딜, 피리미디닐, 피롤리디닐, 피롤리닐, 2H-피롤릴, 피롤릴, 퀴나졸리닐, 퀴놀리닐, 4H-퀴놀리지닐, 퀴녹살리닐, 퀴누클리디닐, 테트라하이드로푸라닐, 테트라하이드로이소퀴놀리닐, 테트라하이드로피라닐, 테트라하이드로퀴놀리닐, 테트라졸릴, 6H-1,2,5-티아디아지닐, 1,2,3-티아디아졸릴, 1,2,4-티아디아졸릴, 1,2,5-티아디아졸릴, 1,3,4-티아디아졸릴, 티안트레닐, 티아졸릴, 티에닐, 티에노티아졸릴, 티에노옥사졸릴, 티에노이미다졸릴, 티오페닐 및 크산테닐. 헤테로사이클릭 그룹은 하기에 대해 상기에서 정의된 바와 같은 하나 이상의 위치에서 1종 이상의 치환체로 임의로 치환될 수 있다: 알킬 및 아릴, 예를 들면, 할로겐, 알킬, 아르알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 하이드록실, 아미노, 니트로, 설프하이드릴, 이미노, 아미도, 포스페이트, 포스포네이트, 포스피네이트, 카보닐, 카복실, 실릴, 에테르, 알킬티오, 설포닐, 케톤, 알데하이드, 에스테르, 및 헤테로사이클릴, 방향족 또는 헤테로방향족 모이어티, -CF3, 및 -CN.
용어 "카보닐"은 기술적으로 인정되고 아래의 일반 식으로 나타낼 수 있는 바와 같은 모이어티를 포함한다:
Figure 112017009030734-pct00012
또는
Figure 112017009030734-pct00013
식 중, X는 결합이거나 산소 또는 황을 나타내고, 그리고 R11는 수소, 알킬, 및 사이클로알킬, 알케닐, 사이클로알케닐, 또는 알키닐을 나타내고, R'11는 수소, 알킬, 및 사이클로알킬, 알케닐, 사이클로알케닐, 또는 알키닐을 나타낸다. 식 중, X는 산소이고 R11 또는 R'11는 수소가 아니고, 상기 식은 "에스테르"를 나타낸다. 식 중, X는 산소이고 R11는 상기에서 정의된 바와 같고, 모이어티는 본 명세서에서 일명 카복실 그룹이고, 및 특히 R11는 수소일 때, 상기 식은 "카복실산"을 나타낸다. 식 중, X는 산소 및 R'11는 수소이고, 상기 식은 "포르메이트"를 나타낸다. 일반적으로, 상기 식의 산소 원자는 황에 의해 치환되고, 상기 식은 "티오카보닐" 그룹을 나타낸다. 식 중, X는 황이고 R11 또는 R'11는 수소가 아니고, 상기 식은 "티오에스테르"을 나타낸다. 식 중, X는 황이고 R11는 수소이고, 상기 식은 "티오카복실산"을 나타낸다. 식 중, X는 황 및 R'11는 수소이고, 상기 식은 "티오포르메이트"를 나타낸다. 다른 한편으로, X는 결합이고, 그리고 R11는 수소가 아닐 때, 상기 식은 "케톤" 그룹을 나타낸다. 식 중, X는 결합이고, 그리고 R11는 수소이고, 상기 식은 r"알데하이드" 그룹을 나타낸다.
용어 "모노에스테르"는 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 디카복실산의 유사체를 의미하고, 여기서 카복실산 중 하나는 에스테르로서 작용화되고 다른 카복실산은 유리 카복실산 또는 카복실산의 염이다. 모노에스테르의 예는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 석신산, 글루타르산, 아디프산, 수베르산, 세박산, 아젤라산, 옥살산 및 말레산의 모노에스테르.
용어 "헤테로원자"은, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 탄소 또는 수소 이외의 임의의 원소의 원자를 의미한다. 헤테로원자의 예는 붕소, 질소, 산소, 인, 황 및 셀레늄이다. 다른 유용한 헤테로원자는 실리콘 및 비소를 포함한다.
본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "니트로"는 -NO2를 의미하고; 용어 "할로겐"은 -F, -Cl, -Br 또는 -I를 나타내고; 용어 "설프하이드릴"은 -SH를 의미하고; 용어 "하이드록실"은 -OH를 의미하고; 그리고 용어 "설포닐"은 -SO2-를 의미한다.
용어 "치환된"은, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 본 명세서에서 기재된 화합물의 모든 허용되는 치환체를 의미한다. 가장 넓은 의미로, 허용되는 치환체는 유기 화합물의비환식 및 사이클릭, 분지 및 비분지, 카보사이클릭 및 헤테로사이클릭, 방향족 및 비방향족 치환체를 포함한다. 예증적인 치환체는, 비제한적으로, 할로겐, 하이드록실 그룹, 또는 임의의 탄소 원자의 수, 예를 들면, 1-14개의 탄소 원자를 함유하는 임의의 다른 유기 그룹화를 포함하고, 선형, 분지형, 또는 사이클릭 구조적 포맷의1종 이상의 헤테로원자 예컨대 산소, 황, 또는 질소 그룹화를 임의로 포함한다. 대표적인 치환체는 하기를 포함한다: 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 페닐, 치환된 페닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 할로, 하이드록실, 알콕시, 치환된 알콕시, 페녹시, 치환된 페녹시, 아르옥시, 치환된 아르옥시, 알킬티오, 치환된 알킬티오, 페닐티오, 치환된 페닐티오, 아릴티오, 치환된 아릴티오, 시아노, 이소시아노, 치환된 이소시아노, 카보닐, 치환된 카보닐, 카복실, 치환된 카복실, 아미노, 치환된 아미노, 아미도, 치환된 아미도, 설포닐, 치환된 설포닐, 설폰산, 포스포릴, 치환된 포스포릴, 포스포닐, 치환된 포스포닐, 폴리아릴, 치환된 폴리아릴, C3-C20 사이클릭, 치환된 C3-C20 사이클릭, 헤테로사이클릭, 치환된 헤테로사이클릭, 아미노산, 펩타이드, 및 폴리펩타이드 그룹.
헤테로원자 예컨대 질소는 수소 치환체 및/또는 헤테로원자의 원자가를 만족하는 본 명세서에서 기재된 유기 화합물의 임의의 허용되는 치환체를 가질 수 있다. "치환" 또는 "치환된"은, 그와 같은 치환이 치환된 원자 및 치환체의 허용된 원자가를 따르고, 상기 치환으로 안정한 화합물, 즉, 및 예를 들면, 재배열, 고리화, 또는 제거에 의해 변환을 동시에 겪지 않는 화합물이 생기는 암시된 조건을 포함하는 것으로 이해된다.
넓은 측면에서, 허용되는 치환체는 유기 화합물의 비환식 및 사이클릭, 분지 및 비분지, 카보사이클릭 및 헤테로사이클릭, 방향족 및 비방향족 치환체를 포함한다. 예증적인 치환체는, 예를 들면, 본 명세서에서 기재된 것을 포함한다. 허용되는 치환체는 1종 이상이고 적절한 유기 화합물에 대해 동일 또는 상이할 수 있다. 헤테로원자 예컨대 질소는 수소 치환체 및/또는 헤테로원자의 원자가를 만족하는 본 명세서에서 기재된 유기 화합물의 임의의 허용되는 치환체를 가질 수 있다.
다양한 구현예에서, 상기 치환체는 알콕시, 아릴옥시, 알킬, 알케닐, 알키닐, 아미드, 아미노, 아릴, 아릴알킬, 카바메이트, 카복시, 시아노, 사이클로알킬, 에스테르, 에테르, 포르밀, 할로겐, 할로알킬, 헤테로아릴, 헤테로사이클릴, 하이드록실, 케톤, 니트로, 포스페이트, 설파이드, 설피닐, 설포닐, 설폰산, 설폰아미드, 및 티오케톤으로부터 선택되고, 이들 각각은 1종 이상의 적합한 치환체로 임의로 치환된다. 일부 구현예에서, 상기 치환체는 알콕시, 아릴옥시, 알킬, 알케닐, 알키닐, 아미드, 아미노, 아릴, 아릴알킬, 카바메이트, 카복시, 사이클로알킬, 에스테르, 에테르, 포르밀, 할로알킬, 헤테로아릴, 헤테로사이클릴, 케톤, 포스페이트, 설파이드, 설피닐, 설포닐, 설폰산, 설폰아미드, 및 티오케톤으로부터 선택되고, 여기서 각각의 상기 알콕시, 아릴옥시, 알킬, 알케닐, 알키닐, 아미드, 아미노, 아릴, 아릴알킬, 카바메이트, 카복시, 사이클로알킬, 에스테르, 에테르, 포르밀, 할로알킬, 헤테로아릴, 헤테로사이클릴, 케톤, 포스페이트, 설파이드, 설피닐, 설포닐, 설폰산, 설폰아미드, 및 티오케톤는 1종 이상의 적합한 치환체로 추가로 임의로 치환될 수 있다.
치환체의 예는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 할로겐, 아자이드, 알킬, 아르알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 하이드록실, 알콕실, 아미노, 니트로, 설프하이드릴, 이미노, 아미도, 포스포네이트, 포스피네이트, 카보닐, 카복실, 실릴, 에테르, 알킬티오, 설포닐, 설폰아미도, 케톤, 알데하이드, 티오케톤, 에스테르, 헤테로사이클릴, -CN, 아릴, 아릴옥시, 퍼할로알콕시, 아르알콕시, 헤테로아릴, 헤테로아릴옥시, 헤테로아릴알킬, 헤테로아르알콕시, 아지도, 알킬티오, 옥소, 아실알킬, 카복시 에스테르, 카복사미도, 아실옥시, 아미노알킬, 알킬아미노아릴, 알킬아릴, 알킬아미노알킬, 알크옥시아릴, 아릴아미노, 아르알킬아미노, 알킬설포닐, 카복사미도알킬아릴, 카복사미도아릴, 하이드록시알킬, 할로알킬, 알킬아미노알킬카복시, 아미노카복사미도알킬, 시아노, 알콕시알킬, 퍼할로알킬, 아릴알킬옥시알킬, 등. 일부 구현예에서, 상기 치환체는 시아노, 할로겐, 하이드록실, 및 니트로 로부터 선택된다.
용어 "코폴리머"는, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 일반적으로 2종 이상의 상이한 모노머를 포함하는 단일 폴리머성 물질을 의미한다. 코폴리머는 임의의 형태, 예를 들면, 랜덤, 블록, 또는 그라프트일 수 있다. 코폴리머는 캡핑된 또는 산 말단 그룹을 포함하는 임의의 말단-그룹을 가질 수 있다.
용어 "평균 입자 크기"는, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 일반적으로 조성물 중 입자의 통계적인 평균 입자 크기 (직경)를 의미한다. 본질적으로 구형인 입자의 직경은 물리적 또는 유체역학적 직경으로 불릴 수 있다. 비-구형 입자의 직경은 유체역학적 직경을 의미할 수 있다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 비-구형 입자의 직경은 입자의 표면 상의 2개의 지점 사이의 최대 선형 거리를 의미할 수 있다. 평균 입자 크기는 당해 분야에서 공지된 방법 예컨대 역학적 광 산란을 사용하여 측정될 수 있다. 2개의 집단은, 입자의 제1 집단의 통계적인 평균 입자 크기가 입자의 제2 집단 통계적인 평균 입자 크기의 20% 내; 예를 들면, 15% 내, 또는 10% 내에 있을 때, "실질적으로 동등 평균 입자 크기"를 갖는 것이라고 한다.
용어들 "단분산" 및 "균질 크기 분포"는, 본 명세서에서 상호교환적으로 사용되는 바와 같이, 동일 또는 거의 동일한 크기를 갖는 모든 입자, 극미립자, 또는 나노입자의 집단을 기재한다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 및 단분산 분포는 입자 분포를 의미하고, 여기서 분포의 90%는 평균 입자 크기의 5% 내에 있다.
용어들 "폴리펩타이드," "펩타이드" 및 "단백질"은 일반적으로 아미노산 잔기의 폴리머를 의미한다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어는 또한 아미노산 폴리머에 적용되고, 여기서 1종 이상의 아미노산은 상응하는 천연 발생 아미노산 또는 비천연 아미노산의 화학 유사체 또는 개질된 유도체이다. 용어 "단백질"은, 본 명세서에서 일반적으로 사용되는 바와 같이, 사슬 길이가 3차 및/또는 4차 구조를 생성하도록 충분한 폴리펩타이드를 형성하도록 펩타이드 결합에 서로 연결된 아미노산의 폴리머를 의미한다. 용어 "단백질"은 정의에 의해 작은 펩타이드를 배제하고, 작은 펩타이드는 단백질로 간주되는데 필요한 필수 고차 구조가 없다.
용어들 "핵산," "폴리뉴클레오타이드," 및 "올리고뉴클레오타이드"는 상호교환적으로 사용되고, 선형 또는 원형 형태에서, 그리고 단일- 또는 이중-가닥 형태에서 데옥시리보뉴클레오타이드 또는 리보뉴클레오타이드 폴리머를 의미한다. 이들 용어들은 폴리머의 길이에 대해 제한이 있는 것으로 해석되지 않는다. 용어들은 천연 뉴클레오타이드의 공지된 유사체, 뿐만 아니라 염기, 당 및/또는 포스페이트 모이어티 (예를 들면, 포스포로티오에이트 골격)에서 개질된 뉴클레오타이드를 포함할 수 있다. 일반적으로 및 다르게 구체화되지 않는 한, 특정한 뉴클레오타이드의 유사체는 동일한 염기쌍 특이성을 가지며; 즉, A의 유사체는 T와 염기쌍을 이룰 것이다. 용어 "핵산"는 적어도 2개의 염기-당-포스페이트 모노머 단위의 가닥을 의미하는 당해 기술의 용어이다. 뉴클레오타이드는 핵산 폴리머의 모노머 단위이다. 용어는 메신저 RNA, 안티센스, 플라스미드 DNA, 플라스미드 DNA의 일부 또는 바이러스로부터 유도된 유전 물질의 형태로 데옥시리보핵산 (DNA) 및 리보핵산 (RNA)를 포함한다. 안티센스 핵산은 DNA 및/또는 RNA 서열의 발현을 방해하는 폴리뉴클레오타이드이다. 용어 핵산은 적어도 2개의 염기-당-포스페이트 조합의 사슬을 의미한다. 천연 핵산은 포스페이트 골격을 갖는다. 인공 핵산은 다른 유형의 골격을 함유하지만 천연 핵산과 동일한 염기를 함유할 수 있다. 용어는 또한, PNA (펩타이드 핵산), 포스포로티오에이트, 및 원상태 핵산의 포스페이트 골격의 다른 변이체를포함한다.
단백질, 폴리펩타이드 또는 핵산의 "기능적 단편"은, 그 서열이 전장 단백질, 폴리펩타이드 또는 핵산과 동일하지 않지만, 전장 단백질, 폴리펩타이드 또는 핵산으로서 적어도 1종의 기능을 보유하는 단백질, 폴리펩타이드 또는 핵산이다. 기능적 단편은 상응하는 원상태 분자보다 더 많은, 더 적거나 동일한 수의 잔기를 가질 수 있고/거나 1종 이상의 아미노산 또는 뉴클레오타이드 치환을 함유할 수 있다. 핵산의 기능을 결정하는 방법 (예를 들면, 코딩 기능, 또 다른 핵산에 혼성화하는 능력)는 당해 기술에서 공지되어 있다. 유사하게, 단백질 기능을 결정하는 방법은 공지되어 있다. 예를 들면, 폴리펩타이드의 DNA 결합 기능은 예를 들면, 필터-결합, 전기영동 이동성 이동도, 또는 면역침강 검정에 의해 결정될 수 있다. DNA 절단은 겔 전기영동에 의해 분석될 수 있다. 또 다른 단백질과 작용하는 단백질의 능력은 예를 들면, 유전적 또는 생화학적 공-면역침강, 2-하이브리드 검정 또는 상보성에 의해 결정될 수 있다. 참고, 예를 들면, 분야 등 (1989) Nature 340:245-246; U.S. 특허 번호 5,585,245 및 PCT WO 98/44350.
본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "링커"는 헤테로원자 (예를 들면, 질소, 산소, 황, 등)를 함유하고 원자 길이가 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15,16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50일 수 있는 탄소 사슬을 의미한다. 링커는 하기를 비제한적으로 포함하는 다양한 치환체로 치환될 수 있다: 수소 원자, 알킬, 알케닐, 알키닐, 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노, 트리알킬아미노, 하이드록실, 알콕시, 할로겐, 아릴, 헤테로사이클릭, 방향족 헤테로사이클릭, 시아노, 아미드, 카바모일, 카복실산, 에스테르, 티오에테르, 알킬티오에테르, 티올, 및 우레이도 그룹. 당해 분야의 숙련가는, 각각의 이들 그룹이 차례로 치환될 수 있다는 것을 인식할 것이다. 링커의 예는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: pH-민감성 링커, 프로테아제 절단가능 펩타이드 링커, 뉴클레아제 민감성 핵산 링커, 리파제 민감성 지질 링커, 글리코시다아제 민감성 탄수화물 링커, 저산소증 민감성 링커, 광-절단가능 링커, 열-불안정한 링커, 효소 절단가능 링커 (예를 들면, 에스테라제 절단가능 링커), 초음파-민감성 링커, 및 x-선 절단가능 링커.
용어 "약제학적으로 허용가능한 반대 이온"은 약제학적으로 허용가능한 음이온 또는 양이온을 의미한다. 다양한 구현예에서, 약제학적으로 허용가능한 반대 이온은 약제학적으로 허용가능한 이온이다. 예를 들면, 약제학적으로 허용가능한 반대 이온은 하기로부터 선택된다: 시트레이트, 말레이트, 아세테이트, 옥살레이트, 클로라이드, 브로마이드, 아이오다이드, 니트레이트, 설페이트, 바이설페이트, 포스페이트, 산 포스페이트, 이소니코티네이트, 아세테이트, 락테이트, 살리실레이트, 타르트레이트, 올레이트, 탄네이트, 판토테네이트, 바이타르트레이트, 아스코르베이트, 석시네이트, 말레에이트, 겐티시네이트, 푸마레이트, 글루코네이트, 글루카로네이트, 사카레이트, 포르메이트, 벤조에이트, 글루타메이트, 메탄설포네이트, 에탄설포네이트, 벤젠설포네이트, p-톨루엔설포네이트 및 파모에이트 (즉, 1,1'-메틸렌-비스-(2-하이드록시-3-나프토네이트)). 일부 구현예에서, 약제학적으로 허용가능한 반대 이온은 하기로부터 선택된다: 클로라이드, 브로마이드, 아이오다이드, 니트레이트, 설페이트, 바이설페이트, 포스페이트, 산 포스페이트, 시트레이트, 말레이트, 아세테이트, 옥살레이트, 아세테이트, 및 락테이트. 특정 구현예에서, 약제학적으로 허용가능한 반대 이온은 하기로부터 선택된다: 클로라이드, 브로마이드, 아이오다이드, 니트레이트, 설페이트, 바이설페이트, 및 포스페이트.
용어 "약제학적으로 허용가능한 염(들)"는 본 조성물에서 사용된 화합물에 존재할 수 있는 산성 또는 염기성 그룹의 염을 의미한다. 본성이 염기성인 본 조성물에 포함된 화합물은 다양한 무기 및 유기 산과의 다양한 염을 형성할 수 있다. 그와 같은 염기성 화합물의 약제학적으로 허용가능한 산 부가 염을 제조하기 위해 사용될 수 있는 산은 하기를 형성하는 것이다: 비독성 산 부가 염, 즉, 비제한적으로 하기를 포함하는 약리적으로 허용가능한 음이온을 함유하는 염: 설페이트, 시트레이트, 말레이트, 아세테이트, 옥살레이트, 클로라이드, 브로마이드, 아이오다이드, 니트레이트, 설페이트, 바이설페이트, 포스페이트, 산 포스페이트, 이소니코티네이트, 아세테이트, 락테이트, 살리실레이트, 시트레이트, 타르트레이트, 올레이트, 탄네이트, 판토테네이트, 바이타르트레이트, 아스코르베이트, 석시네이트, 말레에이트, 겐티시네이트, 푸마레이트, 글루코네이트, 글루카로네이트, 사카레이트, 포르메이트, 벤조에이트, 글루타메이트, 메탄설포네이트, 에탄설포네이트, 벤젠설포네이트, p-톨루엔설포네이트 및 파모에이트 (즉, 1,1'-메틸렌-비스-(2-하이드록시-3-나프토네이트)) 염. 아미노 모이어티를 포함하는 본 조성물 내에 포함된 화합물은 상기에서 언급된 산에 추가하여, 다양한 아미노산과의 약제학적으로 허용가능한 염을 형성할수 있다. 본성이 산성인 본 조성물 내에 포함된 화합물은 다양한 약리적으로 허용가능한 양이온과의 염기 염을 형성할 수 있다. 그와 같은 염의 예는 알칼리 금속 또는 알칼리토 금속 염 및, 특히, 칼슘, 마그네슘, 나트륨, 리튬, 아연, 칼륨, 및 철 염을 포함한다.
본 명세서에서 기재된 화합물이 산 부가 염으로서 수득되면, 유리 염기는 산성 염의 용액을 염기성화하여 수득될 수 있다. 반대로, 생성물이 유리 염기이면, 부가 염, 특히 약제학적으로 허용가능한 부가 염은, 유리 염기를 적합한 유기 용매에서 용해시키고, 염기성 화합물로부터 산 부가 염을 제조하는 종래의 절차에 따라 용액을 산으로 처리하여 생산될 수 있다. 당해 분야의 숙련가는 비독성 약제학적으로 허용가능한 부가 염을 제조하기 위해 사용될 수 있는 다양한 합성 방법론을 인식할 것이다.
약제학적으로 허용가능한 염은 하기로부터 선택된 산으로부터 유도될 수 있다: 1-하이드록시-2-나프토산, 2,2-디클로로아세트산, 2-하이드록시에탄설폰산, 2-옥소글루타르 산, 4-아세트아미도벤조산, 4-아미노살리실 산, 아세트산, 아디프산, 아스코르브산, 아스파르트산, 벤젠설폰산, 벤조산, 캄포르산, 캄포르-10-설폰산, 카프르산 (데칸산), 카프로산 (헥산산), 카프릴산 (옥탄산), 카본산, 신남산, 시트르산, 사이클라민산, 도데실황산, 에탄-1,2-디설폰산, 에탄설폰산, 포름산, 푸마르산, 갈락타르산, 겐티식산, 글루코헵톤산, 글루콘산, 글루쿠론산, 글루탐산, 글루타르산, 글리세로인산, 글라이콜산, 히푸르산, 브롬화수소산, 염산, 이세티온산, 이소부티르ic 산, 락트산, 락토바이온산, 라우르산, 말레산, 말산, 말론산, 만델산, 메탄설폰산, 뮤신산, 나프탈렌-1,5-디설폰산, 나프탈렌-2-설폰산, 니코틴산, 질산, 올레산, 옥살산, 팔미트산, 파모산, 판토텐산, 인산, 프로피온산, 파이로글루탐산, 살리실산, 세박산, 스테아르산, 석신산, 황산, 타르타르산, 티오시안산, 톨루엔설폰산, 트리플루오로아세트산, 및 운데실렌산.
용어 "생체이용가능한"은 기술적으로 인정되고 대상체 또는 환자에게 투여되거나, 투여된 양의 일부가 흡수되거나, 그들에게 편입되거나, 달리 생리학적으로 이용가능하도록하는 본 발명의 형태를 의미한다.
II. 콘주게이트
콘주게이트는 링커에 의해 표적화 모이어티, 예를 들면, SSTR에 결합할 수 있는 분자에 부착된 그것의 활성제 또는 전구약물을 포함한다. 콘주게이트는 단일 활성제와 단일 표적화 모이어티 사이의 콘주게이트, 예를 들면, 구조 X-Y-Z(여기서 X는 표적화 모이어티이고, Y는 링커이고, 그리고 Z는 활성제임)을 갖는 콘주게이트일 수 있다.
일부 구현예에서 콘주게이트는 1개 초과의 표적화 모이어티, 1개 초과의 링커, 1개 초과의 활성제, 또는 이들의 임의의 조합을 함유할 수 있다. 콘주게이트는 표적화 모이어티, 링커, 및 활성제의 임의의 수를 가질 수 있다. 콘주게이트는 구조 X-Y-Z-Y-X, (X-Y)n-Z, X-(Y-Z)n, X-Y-Zn, (X-Y-Z)n, (X-Y-Z-Y)n-Z (여기서 X는 표적화 모이어티이고, Y는 링커이고, Z는 활성제이고, 그리고 n은 1 내지 50, 2 내지 20, 예를 들면, 1 내지 5의 정수임)를 가질 수 있다. X, Y, 및 Z의 각 경우는 동일 또는 상이할 수 있고, 예를 들면, 콘주게이트는 1개 초과 유형의 표적화 모이어티, 1개 초과 유형의 링커, 및/또는 1개 초과 유형의 활성제를 함유할 수 있다.
콘주게이트는 단일 활성제에 부착된 1개 초과의 표적화 모이어티를 함유할 수 있다. 예를 들면, 콘주게이트는 다중 표적화 모이어티와 함께 활성제를 포함할 수 있고, 상기 각 모이어티는 상이한 링커를 통해 부착된다. 콘주게이트는 구조 X-Y-Z-Y-X (여기서 각 X는 동일 또는 상이할 수 있는 표적화 모이어티이고, 각 Y는 동일 또는 상이할 수 있는 링커이고, 및 Z는 활성제임)를 가질 수 있다.
콘주게이트는 단일 표적화 모이어티에 부착된 1종 초과의 활성제를 함유할 수 있다. 예를 들면 콘주게이트는 상이한 링커를 통해 각각에 부착된 다중 활성제와 함께 표적화 모이어티를 포함할 수 있다. 콘주게이트는 구조 Z-Y-X-Y-Z (여기서, X는 표적화 모이어티이고, 각 Y는 동일 또는 상이할 수 있는 링커이고, 및 각 Z는 동일 또는 상이할 수 있는 활성제임)를 가질 수 있다.
A. 활성제
본원에서 기재된 바와 같은 콘주게이트는 적어도 1종의 활성제 (제1 활성제)를 함유한다. 콘주게이트는 제1 활성제로부터 동일 또는 상이할 수 있는 1종 초과의 활성제를 함유할 수 있다. 활성제는 치료제, 예방적, 진단, 또는 영양제일 수 있다. 다양한 활성제는 당해 기술에 공지되어 있고 본 명세서에서 기재된 콘주게이트에서 사용될 수 있다. 활성제는 단백질 또는 펩타이드, 소분자, 핵산 또는 핵산 분자, 지질, 당, 당지질, 당단백질, 지질단백질, 또는 이들의 조합일 수 있다. 일부 구현예에서, 본 활성제는 항원, 아쥬반트, 방사성, 조영제 (예를 들면, 형광성 모이어티) 또는 폴리뉴클레오타이드이다. 일부 구현예에서 활성제는 유기금속 화합물이다.
항암제
활성제는 암 치료제일 수 있다. 암 치료제는 예를 들면, 하기를 포함한다: 사멸 수용체 효능제 예컨대 TNF-관련된 세포자멸사-유도 리간드 (TRAIL) 또는 Fas 리간드 또는 임의의 리간드 또는 사멸 수용체에 결합하거나 그것을 활성화하거나 달리 세포자멸사를 유도하는 항체. 적합한 사멸 수용체는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: TNFR1, Fas, DR3, DR4, DR5, DR6, LTβR 및 이들의 조합.
암 치료제 예컨대 화학치료제, 사이토카인, 케모카인, 및 방사선 요법 제제는 활성제 로서 사용될 수 있다. 화학치료제는, 예를 들면, 알킬화제, 항대사물질, 안트라사이클린, 식물성 알칼로이드, 토포이소머라제 저해제, 및 다른 항종양 제제를 포함한다. 그와 같은 제제는 전형적으로 세포 분열 또는 DNA 합성 및 기능에 영향을 미친다. 활성제로서 사용될 수 있는 치료제의 추가 예는 단클론성 항체 및 티로신 키나제 저해제 예를 들면 이마티닙 메실레이트를 포함하고, 이들은 특정 유형의 암 (예를 들면, 만성적 골수성 백혈병, 위장 기질 종양)에서 비정상인 분자를 직접적으로 표적으로 한다.
화학치료제는, 비제한적으로 하기를 포함한다: 시스플라틴, 카보플라틴, 옥살리플라틴, 메클로레타민, 사이클로포스파마이드, 클로르암부실, 빈크리스틴, 빈블라스틴, 비노렐빈, 빈데신, 탁솔 및 그것의 유도체, 이리노테칸, 토포테칸, 암사크린, 에토포시드, 에토포시드 포스페이트, 테니포시드, 에피포도필로톡신, 트라스투주맙, 세툭시맙, 및 리툭시맙, 베바시주맙, 및 이들의 조합. 이들 중 임의의 것은 콘주게이트에서 활성제로서 사용될 수 있다.
일부 구현예에서, 본 활성제는 하기일 수 있다: 20-에피-1,25 디하이드록시비타민 D3, 4-아이포메아놀, 5-에티닐우라실, 9-디하이드로탁솔, 아비라테론, 아시비신, 아클라루비신, 아코다졸 하이드로클로라이드, 아크로닌, 아실풀벤, 아데사이펜올, 아도젤레신, 알데스류킨, all-tk 길항제, 알트레타민, 암바무스틴, 암보마이신, 아메탄트론 아세테이트, 아미녹스, 아미포스틴, 아미노글루테티미드, 아미노레벌린산, 암루비신, 암사크린, 아나그렐라이드, 아나스트로졸, 안드로그라폴라이드, 혈관신생 저해제, 길항제 D, 길항제 G, 안타렐릭스, 안트라마이신, 항-등쪽화 형태형성 단백질-1, 항에스트로겐, 안티네오플라스톤, 안티센스 올리고뉴클레오타이드, 아파이디콜린 글리시네이트, 세포자멸사 유전자 조절물질, 세포자멸사 조절물질, 아퓨린산, ARA-CDP-DL-PTBA, 아르기닌 데아미나제, 아스파라기나제, 아스페를린, 아설라크라인, 아타메스탄, 아트리무스틴, 악시나스타틴 1, 악시나스타틴 2, 악시나스타틴 3, 아자시티딘, 아자세트론, 아자톡신, 아자티로신, 아제테파, 아조토마이신, 박카틴 III 유도체, 발라놀, 바티마스테이트, 벤조클로린, 벤조데파, 벤조일스타우로스포린, 베타 락탐 유도체, 베타-알레틴, 베타클라마이신 B, 베툴린산, BFGF 저해제, 바이칼루타마이드, 비스안트렌, 비스안트렌 하이드로클로라이드, 비스아지리디닐스페르민, 바이스나파이드, 바이스나파이드 디메실레이트, 비스트라텐 A, 바이젤레신, 블레오마이신, 블레오마이신 설페이트, BRC/ ABL 길항제, 브레플레이트, 브레퀴나르 나트륨, 브로피리민, 부도티테인, 부설판, 부티오닌 설폭시민, 카바지탁셀, 칵티노마이신, 칼시포트리올, 칼포스틴 C, 칼루스테론, 캄프토테신, 캄프토테신 유도체, 카나리폭스 IL-2, 카페시타빈, 카라세마이드, 카르베티머, 카보플라틴, 카복사마이드-아미노-트리아졸, 카복시아미도트리아졸, 카레스트 M3, 카르무스틴, 에른(earn) 700, 연골 유도된 저해제, 카루비신 하이드로클로라이드, 카르젤레신, 카세인 키나제 저해제, 카스타노 스페르민, 세크로핀 B, 세데핀골, 세트로렐릭스, 클로르암부실, 클로린, 클로로퀴녹살린 설폰아미드, 시카프로스트, 사이롤레마이신, 시스플라틴, 시스-포르피린, 클라드리빈, 클로마이펜 유사체, 클로트리마졸, 콜리스마이신 A, 콜리스마이신 B, 콤브레타스타틴 A4, 콤브레타스타틴 유사체, 코나게닌, 크람베스시딘 816, 크리스나톨, 크리스나톨 메실레이트, 크립토파이신 8, 크립토파이신 A 유도체, 큐라신 A, 사이클로펜트안트라퀴논, 사이클로포스파마이드, 사이클로플라탐, 사이페마이신, 사이타라빈, 사이타라빈 옥포스페이트, 세포용해 인자, 사이토스타틴, 다카바진, 다클릭시맙, 닥티노마이신, 다우노루비신 하이드로클로라이드, 데시타빈, 데하이드로디뎀닌 B, 데슬로렐린, 덱시포스파마이드, 덱소르파플라틴, 덱스라족산, 덱스베라파밀, 데자구아닌, 데자구아닌 메실레이트, 디아지쿠온, 디뎀닌 B, 디독스, 디에틸노르스페르민, 디하이드로-5-아자시티딘, 디옥사마이신, 디페닐 스피로무스틴, 도세탁셀, 도코사놀, 돌라세트론, 독시플루리딘, 독소루비신, 독소루비신 하이드로클로라이드, 드롤록시펜, 드롤록시펜 시트레이트, 드로모스타놀론 프로피오네이트, 드로나비놀, 두아조마이신, 듀오카르마이신 SA, 엡셀렌, 에코무스틴, 데다트렉세이트, 에델포신, 에드레콜로맙, 에플로니틴, 에플로니틴 하이드로클로라이드, 엘레멘, 엘사미트루신, 에미테푸르, 엔로플라틴, 엔프로메이트, 에피프로피딘, 에피루비신, 에피루비신 하이드로클로라이드, 에프리스테라이드, 에르불로졸, 적혈구 유전자 요법 벡터 시스템, 에소루비신 하이드로클로라이드, 에스트라무스틴, 에스트라무스틴 유사체, 에스트라무스틴 포스페이트 나트륨, 에스트로겐 효능제, 에스트로겐 길항제, 에타니다졸, 에토포시드, 에토포시드 포스페이트, 에토프린, 엑세메스탄, 파드로졸, 파드로졸 하이드로클로라이드, 파자라빈, 펜레티나이드, 필그라스팀, 피나스테라이드, 플라보피리돌, 플레즈엘라스틴, 플록수리딘, 플루아스테론, 플루다라빈, 플루다라빈 포스페이트, 플루오로다우노루니신 하이드로클로라이드, 플루오로우라실, 플루로시타빈, 포르페니멕스, 포르메스탄, 포스퀴돈, 포스트리에신, 포스트리에신 나트륨, 포테무스틴, 가돌리늄 텍사파이린, 갈륨 니트레이트, 갈로시타빈, 가니렐릭스, 젤라티나제 저해제, 젬시타빈, 젬시타빈 하이드로클로라이드, 글루타티온 저해제, 헵설팜, 헤레굴린, 헥사메틸렌 비스아세트아미드, 하이드록시우레아, 하이페리신, 이반드론산, 이다루비신, 이다루비신 하이드로클로라이드, 이독시펜, 이드라만톤, 이포스파마이드, 일모포신, 일로마스타트, 이미다조아크리돈, 이미퀴모드, 면역증대 펩타이드, 인슐린-유사 성장 인자- 1 수용체 저해제, 인터페론 효능제, 인터페론 알파-2A, 인터페론 알파-2B, 인터페론 알파-N1, 인터페론 알파-N3, 인터페론 베타-IA, 인터페론 감마-IB, 인터페론, 인터류킨, 아이오벤구안, 아이오도독소루비신, 이프로플라틴, 이리노테칸, 이리노테칸 하이드로클로라이드, 아이로플락트, 아이르소글라딘, 아이소벤가졸, 아이소호모할리콘드린 B, 이타세트론, 자스플라키놀라이드, 카할라리드 F, 라멜라린-N 트리아세테이트, 란레오타이드, 라로탁셀, 란레오타이드 아세테이트, 레이나마이신, 레노그라스팀, 렌티난 설페이트, 렙톨스타틴, 레트로졸, 백혈병 억제 인자, 백혈구 알파 인터페론, 류프롤라이드 아세테이트, 류프롤라이드/에스트로겐/프로게스테론, 류프로렐린, 레바미솔, 리아로졸, 리아로졸 하이드로클로라이드, 선형 폴리아민 유사체, 친유성 디사카라이드 펩타이드, 친유성 백금 화합물, 리쏘클린아미드 7, 로바플라틴, 롬브리신, 로메트렉솔, 로메트렉솔 나트륨, 로무스틴, 로니다민, 로소크산트론, 로소크산트론 하이드로클로라이드, 로바스타틴, 록소리빈, 루르토테칸, 루테튬 텍사파이린, 라이소필린, 분해적 펩타이드, 마이탄신, 만노스타틴 A, 마리마스타트, 마소프로콜, 마스핀, 마트릴리신 저해제, 매트릭스 메탈로프로테이나제 저해제, 메이탄신, 메이탄시노이드, 메르탄신 (DM1), 메클로레타민 하이드로클로라이드, 메게스트롤 아세테이트, 멜렌게스트롤 아세테이트, 멜팔란, 메노가릴, 메르바론, 머캅토퓨린, 메테렐린, 메티오니나제, 메토트렉세이트, 메토트렉세이트 나트륨, 메토클로프라마이드, 메토프린, 메투레데파, 미세조류 단백질 키나제 C 저해제, MIF 저해제, 미페프리스톤, 밀테포신, 미리모스팀, 불인치된 이중가닥 RNA, 미틴도마이드, 미토카르신, 미토크로민, 미토길린, 미토구아존, 미토락톨, 미토말신, 미토마이신, 미토마이신 유사체, 미토나파이드, 미토스페르, 미토탄, 미토톡신 섬유아세포 성장 인자-사포린, 미톡산트론, 미톡산트론 하이드로클로라이드, 모파로텐, 몰그라모스팀, 단클론성 항체, 인간 융모막 성선자극호르몬, 모노포스포릴 지질 a/미오박테리아 세포벽 SK, 모피다몰, 다중 약물 내성 유전자 저해제, 다중 종양 억제제 1 -기반 요법, 머스타드 항암제, 마이카퍼옥사이드 B, 마이코박테리아 세포 벽 추출물, 마이코페놀산, 마이리아포론, n-아세틸디날린, 나파렐린, 나그레스트립, 날록손/펜타조신, 나파빈, 나프테르핀, 나르토그라스팀, 네다플라틴, 네모루비신, 네리드론산, 중성 엔도펩티다아제, 닐루타마이드, 니사마이신, 산화질소 조절물질, 니트록사이드 항산화제, 니트룰린, 노코다졸, 노갈라마이신, n-치환된 벤즈아미드, 06-벤질구아닌, 옥트레오타이드, 오키세논, 올리고뉴클레오타이드, 오나프리스톤, 온단세트론, 오라신, 경구 사이토카인 유도물질, 오르마플라틴, 오사테론, 옥살리플라틴, 옥사우노마이신, 옥시수란, 파클리탁셀, 파클리탁셀 유사체, 파클리탁셀 유도체, 팔라우아민, 팔미토일라이족신, 팔미드론산, 파낙시트리올, 파노미펜, 파라박틴, 파젤립틴, 페가스파르가스, 펠데신, 펠리오마이신, 펜타무스틴, 펜토산 폴리설페이트 나트륨, 펜토스타틴, 펜트로졸, 페플로마이신 설페이트, 퍼플루브론, 페르포스파마이드, 페릴릴 알코올, 펜아지노마이신, 페닐아세테이트, 포스파타제 저해제, 피시바닐, 필로카핀 하이드로클로라이드, 피포브로만, 피포설판, 피라루비신, 피리트렉심, 파이록산트론 하이드로클로라이드, 플라세틴 A, 플라세틴 B, 플라스미노겐 활성제 저해제, 백금(IV) 복합체, 백금 화합물, 백금-트리아민 복합물, 플리카마이신, 플로메스탄, 포르퓌머 나트륨, 포르피머, 프레드니무스틴, 프로카바진 하이드로클로라이드, 프로필 비스-아크리돈, 프로스타글란딘 J2, 전립선 암종 안티안드로겐, 프로테아솜 저해제, 단백질 A-기반 면역 조절물질, 단백질 키나제 C 저해제, 단백질 티로신 포스파타제 저해제, 퓨린 뉴클레오사이드 포스포릴라제 저해제, 퓨로마이신, 퓨로마이신 하이드로클로라이드, 퓨르퓨린스, 피라조퓨린, 피라졸로아크리딘, 피리독실레이트화된 헤모글로빈 폴리옥시 에틸렌 콘주게이트, RAF 길항제, 랄티트렉세드, 라모세트론, RAS 파르네실 단백질 전달효소 저해제, RAS 저해제, RAS-갭 저해제, 레텔립틴 탈메틸화, 레늄 RE 186 에티드로네이트, 라이족신, 리보프린, 리보자임, RII 레틴아미드, RNAi, 로글레티마이드, 로히투카인, 로무르타이드, 로퀴니멕스, 부비기논 Bl, 루복실, 사핀골, 사핀골 하이드로클로라이드, 사인토핀, 사르크누, 사르코파이톨 A, 사르그라모스팀, SDI 1 모방체, 세무스틴, 노화 유도된 저해제 1, 센스 올리고뉴클레오타이드, siRNA, 신호 전달 저해제, 신호 전달 조절물질, 심트라젠, 단일 사슬 항원 결합 단백질, 시조피란, 소부족산, 나트륨 보로캅테이트, 나트륨 페닐아세테이트, 솔베롤, 소마토메딘 결합 단백질, 소네르민, 스파르포세이트 나트륨, 스파르포스산, 스파르소마이신, 스피카마이신 D, 스피로게르마늄 하이드로클로라이드, 스피로무스틴, 스피로플라틴, 스플레노펜틴, 스폰지스타틴 1, 스쿠알라민, 줄기세포 저해제, 줄기세포 분열 저해제, 스티피아미드, 스트렙토니그린, 스트렙토조신, 스트로멜라이신 저해제, 설피노신, 설로페누르, 초활성 혈관활성 장관 펩타이드 길항제, 수리다스타, 수라민, 스와인소닌, 합성 글리코사미노글리칸, 탈리소마이신, 탈리무스틴, 타목시펜 메티오다이드, 타우로무스틴, 타자로텐, 테코갈란 나트륨, 테가푸르, 텔루라피릴륨, 텔로머라제 저해제, 텔록산트론 하이드로클로라이드, 테모포르핀, 테모졸로마이드, 테니포시드, 테록시론, 테스토락톤, 테트라클로로데카옥사이드, 테트라조민, 탈리블라스틴, 탈리도마이드, 티아미프린, 티오코랄린, 티오구아닌, 티오테파, 트롬보포이에틴, 트롬보포이에틴 모방체, 티말파신, 티모포이에틴 수용체 효능제, 티모트리난, 갑상선 자극 호르몬, 티아조퓨린, 주석 에틸 에티오퓨르퓨린, 티라파자민, 티타노센 디클로라이드, 토포테칸 하이드로클로라이드, 탑센틴, 토레미펜, 토레미펜 시트레이트, 분화전능성 줄기세포 인자, 번역 저해제, 트레스톨론 아세테이트, 트레티노인, 트리아세틸우리딘, 트리시리빈, 트리시리빈 포스페이트, 트리메트렉세이트, 트리메트렉세이트 글루쿠로네이트, 트립토렐린, 트로피세트론, 투불로졸 하이드로클로라이드, 투로스테라이드, 티로신 키나제 저해제, 타이르포스틴, UBC 저해제, 우베니멕스, 우라실 머스타드, 우레데파, 비뇨생식동-유도된 성장 억제 인자, 우로키나제 수용체 길항제, 바프레오타이드, 바리올린 B, 벨라레솔, 베라민, 베르딘, 베르테포르핀, 빈블라스틴 설페이트, 빈크리스틴 설페이트, 빈데신, 빈데신 설페이트, 비네피딘 설페이트, 빈글리시네이트 설페이트, 빈류로신 설페이트, 비노렐빈, 비노렐빈 타르트레이트, 빈로시딘 설페이트, 빈크살틴, 빈졸리딘 설페이트, 비탁신, 보로졸, 조노테론, 제니플라틴, 질라스코르브, 지노스타틴, 지노스타틴 스티말라머, 또는 조루비신 하이드로클로라이드.
일부 구현예에서 활성제는 카바지탁셀, 또는 유사체, 유도체, 전구약물, 또는 그것의 약제학적으로 허용가능한 염이다.
활성제는 1종 이상의 금속 중심을 함유하는 무기 또는 유기금속 화합물일 수 있다. 일부 예에서, 화합물은 하나의 금속 중심을 함유한다. 활성제는, 예를 들면, 하기일 수 있다: 백금 화합물, 및 루테늄 화합물 (예를 들면, 트랜스-[RuCl2 (DMSO)4], 또는 트랜스-[RuCl4(이미다졸) 2, 등), 코발트 화합물, 구리 화합물, 또는 철 화합물.
특정 구현예에서, 본 콘주게이트의 활성제는 약 1% 내지 약 10%, 또는 약 10% 내지 약 20%, 또는 약 20% 내지 약 30%, 또는 약 30% 내지 약 40%, 또는 약 40% 내지 약 50%, 또는 약 50% 내지 약 60%, 또는 약 60% 내지 약 70%, 또는 약 70% 내지 약 80%, 또는 약 80% 내지 약 90%, 또는 약 90% 내지 약 99%의 예정된 몰 중량 백분율을 포함하고, 이로써, 상기 콘주게이트의 성분의 몰 중량 백분율의 합은 100%이다. 콘주게이트의 활성제(들)의 양은 표적화 리간드(들)에 비례하여 또한 표현될 수 있다. 예를 들면, 본 교시는 약 10:1, 9:1, 8:1, 7:1, 6:1, 5:1, 4:1, 3:1, 2:1, 1:1, 1:2, 1:3, 1:4; 1:5, 1:6, 1:7, 1:8, 1:9, 또는 1:10의 활성제 대 리간드의 비를 제공한다.
B. 표적화 모이어티
본원에서 기재된 바와 같은 표적화 리간드 (또한 표적화 모이어티라 칭함)는 1종 이상의 SSTR, 예를 들면, 인간 SSTR1, SSTR2, SSTR3, SSTR4, 또는 SSTR5에 결합할 수 있는 임의의 분자를 포함한다. 그와 같은 표적화 리간드는 펩타이드, 항체 모방체, 핵산 (예를 들면, 압타머), 폴리펩타이드 (예를 들면, 항체), 당단백질, 소분자, 탄수화물, 또는 지질일 수 있다. 일부 구현예에서, 표적화 모이어티는 소마토스타틴 또는 소마토스타틴 유사체이다.
본 발명의 세포독성 또는 치료적 콘주게이트는 소마토스타틴 수용체에 결합하는 임의의 소마토스타틴 유사체를 이용할 수 있다. 일부 구현예에서, 콘주게이트의 소마토스타틴 유사체 부분은 8 내지 18개의 아미노산을 함유하고 핵심 서열을 포함한다: 사이클로[Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys] (서열식별번호:1) 또는 사이클로[Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Cys] (서열식별번호 2). 예를 들면, 유사체의 C-말단은 Thr-NH2이다.
일부 구현예에서, 표적화 모이어티, X는, 소마토스타틴, 옥트레오타이드, Tyr3-옥트레오테이트 (TATE), 바프레오타이드, 사이클로(AA-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Phe)로부터 선택될 수 있고 상기 AA는 α-N-Me 라이신 또는 N-Me 글루탐산, 파시레오타이드, 란레오타이드, 세글리타이드, 또는 소마토스타틴 수용체 결합 리간드의 임의의 다른 예이다. 일부 구현예에서, 표적화 모이어티는 소마토스타틴 수용체 2 및/또는 5에 결합하는 소마토스타틴 수용체 결합 모이어티이다. 일부 구현예에서, X는 C-말단 에서 링커 모이어티 Y에 결합한다. 일부 구현예에서, X는 N-말단 에서 링커 모이어티 Y에 결합한다. 일부 구현예에서, 표적화 모이어티 X는 적어도 1종의 D-Phe 잔기를 포함하고 표적화 모이어티 X의 D-Phe 잔기의 페닐 고리는 링커-함유 모이어티에 의해 대체되었다.
본 발명에서 유용한 펩타이드인 소마토스타틴 유사체의 예는 본 명세서에 기재되어 있다. 유용한 소마토스타틴 유사체의 추가 예는 아래에서 제시된 공보(이들 각각은 그 전체가 참고로 본 명세서에 편입되어 있음) 에서 개시되어 있다:
PCT 출원 번호 WO 03/057214 (2003)
U.S. 출원 번호 20030191134 (2003)
U.S. 출원 번호 20030083241 (2003)
U.S. 특허 번호 6,316,414 (2001)
PCT 출원 번호 WO 02/10215 (2002)
PCT 출원 번호 WO 99/22735 (1999)
PCT 출원 번호 WO 98/08100 (1998)
PCT 출원 번호 WO 98/44921 (1998)
PCT 출원 번호 WO 98/45285 (1998)
PCT 출원 번호 WO 98/44922 (1998)
EP 출원 번호 P5164 EU (발명자: G. Keri);
Van Binst, G. 등, Peptide Research, 1992, 5:8;
Horvath, A. 등, Abstract, "Conformations of Somatostatin Analogs Having Antitumor Activity", 22nd European peptide Symposium, Sep. 13-19, 1992, Interlaken, Switzerland;
PCT 출원 번호 WO 91/09056 (1991);
EP 출원 번호 0 363 589 A2 (1990);
U.S. 특허 번호 4,904,642 (1990);
U.S. 특허 번호 4,871,717 (1989);
U.S. 특허 번호 4,853,371 (1989);
U.S. 특허 번호 4,725,577 (1988);
U.S. 특허 번호 4,684,620 (1987);
U.S. 특허 번호 4,650,787 (1987);
U.S. 특허 번호 4,603,120 (1986);
U.S. 특허 번호 4,585,755 (1986);
EP 출원 번호 0 203 031 A2 (1986);
U.S. 특허 번호 4,522,813 (1985);
U.S. 특허 번호 4,486,415 (1984);
U.S. 특허 번호 4,485,101 (1984);
U.S. 특허 번호 4,435,385 (1984);
U.S. 특허 번호 4,395,403 (1983);
U.S. 특허 번호 4,369,179 (1983);
U.S. 특허 번호 4,360,516 (1982);
U.S. 특허 번호 4,358,439 (1982);
U.S. 특허 번호 4,328,214 (1982);
U.S. 특허 번호 4,316,890 (1982);
U.S. 특허 번호 4,310,518 (1982);
U.S. 특허 번호 4,291,022 (1981);
U.S. 특허 번호 4,238,481 (1980);
U.S. 특허 번호 4,235,886 (1980);
U.S. 특허 번호 4,224,199 (1980);
U.S. 특허 번호 4,211,693 (1980);
U.S. 특허 번호 4,190,648 (1980);
U.S. 특허 번호 4,146,612 (1979);
U.S. 특허 번호 4,133,782 (1979);
U.S. 특허 번호 5,506,339 (1996);
U.S. 특허 번호 4,261,885 (1981);
U.S. 특허 번호 4,728,638 (1988);
U.S. 특허 번호 4,282,143 (1981);
U.S. 특허 번호 4,215,039 (1980);
U.S. 특허 번호 4,209,426 (1980);
U.S. 특허 번호 4,190,575 (1980);
EP 특허 번호 0 389 180 (1990);
EP 출원 번호 0 505 680 (1982);
EP 출원 번호 0 083 305 (1982);
EP 출원 번호 0 030 920 (1980);
PCT 출원 번호 WO 88/05052 (1988);
PCT 출원 번호 WO 90/12811 (1990);
PCT 출원 번호 WO 97/01579 (1997);
PCT 출원 번호 WO 91/18016 (1991);
U.K. 출원 번호 GB 2,095,261 (1981);
French 출원 번호 FR 2,522,655 (1983); 및
PCT 출원 번호 WO 04/093807 (2004).
U.S. 특허 번호 5,620,955 (1997)
U.S. 특허 번호 5,723,578 (1998)
U.S. 특허 번호 5,843,903 (1998)
U.S. 특허 번호 5,877,277 (1999)
U.S. 특허 번호 6,156,725 (2000)
U.S. 특허 번호 6,307,017 (2001)
PCT 출원 번호 WO 90/03980 (1990)
PCT 출원 번호 WO 91/06563 (1991)
PCT 출원 번호 WO 91/17181 (1991)
PCT 출원 번호 WO 94/02018 (1994)
PCT 출원 번호 WO 94/21674 (1994)
PCT 출원 번호 WO 04/093807 (2004);
소마토스타틴 펩타이드 및 유사체를 합성하는 방법은 문서로 잘 기록되어 있고, 상기에서 열거된 참조문헌에서 예시된 바와 같이 당해 분야의 숙련가의 능력 내에 있다. 초가 합성 절차는 하기 예에서 제공된다. 하기 예는 또한, 본 발명의 표적화된 세포독성 화합물을 합성하는 방법을 설명한다. 치료적 또는 세포독성 약물의 특이적 표적화는 생물학적 활성 펩타이드에 특이적인 수용체를 발현시키는 종양의 선택적 파괴를 허용한다. 예를 들면, 소마토스타틴 수용체를 발현시키는 종양은 폐, 유방, 전립선, 결장, 뇌, 위장관, 신경내분비 축, 간, 또는 신장의 신생물을 포함한다 (참고 Schaer 등, Int. J. Cancer, 70:530-537, 1997; Chave 등, Br. J. Cancer 82(1):124-130, 2000; Evans 등, Br. J. Cancer 75(6):798-803, 1997).
일부 구현예에서, 표적화 모이어티는 치료적 특징, 예를 들면, 표적화 모이어티는 세포독성 또는 항-혈관신생을 갖는다. 일부 구현예에서, 표적화 모이어티는 종양 맥관구조, 또는 혈관신생 혈관, 예를 들면, 소마토스타틴 수용체를 과-발현시키는 것들에 대한 일부 증가된 친화도를 갖는다 (참고 Denzler 및 Reubi, Cancer 85:188-198, 1999; Gulec 등, J. Surg. Res. 97(2):131-137, 2001; Woltering 등, J. Surg. Res. 50:245, 1991).
일부 구현예에서, 본 발명에서 사용되는 표적화 모이어티, 예를 들면, 소마토스타틴 유사체는 친수성이고, 따라서 수용성이다. 일부 구현예에서, 그와 같은 콘주게이트 및 그와 같은 콘주게이트를 함유하는 입자는, 이러한 특징이 예를 들면, 소수성 유사체를 포함하는 콘주게이트와 비교하여 유용한 치료 패러다임에서 사용된다. 본 명세서에서 기재된 친수성 유사체는 혈액, 뇌척수액, 및 다른 체액, 뿐만 아니라 신장에 의한 배출을 촉진할 수 있는 소변에서 가용성일 수 있다. 이러한 특징은, 예를 들면, 요망되지 않는 간독성을 나타내는 조성물의 경우에 유용할 수 있다. 본 발명은 또한, 유사체의 친수성의 조절이 다양한 접합된 세포독성 약물, 예를 들면, 콘주게이트 6의 화학 및 구조적 본성을 조정하도록 하는 펩타이드 유사체에 편입하기 위해 특정 친수성 요소 (예를 들면, PEG 링커의 편입, 및 당해 기술에서의 다른 예)를 개시한다. 아래.
일부 구현예에서, 표적화 모이어티는 하기 예의 항체 모방체이다: 모노바디, 예를 들면, ADNECTIN™ (Bristol-Myers Squibb, New York, New York), Affibody® (Affibody AB, Stockholm, Sweden), 아필린, 나노피틴 (아피틴, 예컨대 WO 2012/085861에서 기재되니 것들, Anticalin™, 아비머 (결합능 다량체), 및 DARPin™, 및 Fynomer™, Centyrin™ 및 쿠니츠 도메인 펩타이드. 특정 경우에, 그와 같은 모방체는 약 3 내지 20 kDa의 몰 질량을 갖는 인공 펩타이드 또는 단백질이다. 핵산 및 소분자는 항체 모방체일 수 있다.
또 다른 예에서, 표적화 모이어티는 일반적으로 하기인 압타머일 수 있다: 올리고뉴클레오타이드 (예를 들면, DNA, RNA, 또는 유사체 또는 그것의 유도체) (이것은 특정한 표적, 예컨대 폴리펩타이드에 결합함). 일부 구현예에서, 표적화 모이어티는 폴리펩타이드 (예를 들면, 종양 마커에 특이적으로 결합하는 항체)이다. 특정 구현예에서, 표적화 모이어티는 항체 또는 그것의 단편이다. 특정 구현예에서, 표적화 모이어티는 항체의 Fc 단편이다.
특정 구현예에서, 콘주게이트의 표적화 모이어티 또는 모이어티들은 약 0.1 % 내지 약 10%, 또는 약 1% 내지 약 10%, 또는 약 10% 내지 약 20%, 또는 약 20% 내지 약 30%, 또는 약 30% 내지 약 40%, 또는 약 40% 내지 약 50%, 또는 약 50% 내지 약 60%, 또는 약 60% 내지 약 70%, 또는 약 70% 내지 약 80%, 또는 약 80% 내지 약 90%, 또는 약 90% 내지 약 99%의 예정된 몰 중량 백분율로 존재하고, 이로써, 상기 콘주게이트의 성분의 몰 중량 백분율의 합은 100%이다. 콘주게이트의 표적화 모이어티의 양은 활성제(들)에 비례하여, 예를 들면, 약 10:1, 9:1, 8:1, 7:1, 6:1, 5:1, 4:1, 3:1, 2:1, 1:1, 1:2, 1:3, 1:4; 1:5, 1:6, 1:7, 1:8, 1:9, 또는 1:10의 리간드 대 활성제의 비로 또한 표현될 수 있다.
C. 링커
콘주게이트는 활성제 및 표적화 모이어티를 부착시키는 1종 이상의 링커를 함유한다. 링커, Y는, 1종 이상의 활성제 및 1종 이상의 표적화 리간드에 결합되어 콘주게이트를 형성한다. 링커 Y는 에스테르 결합, 디설파이드, 아미드, 아실하이드라존, 에테르, 카바메이트, 카보네이트, 및 우레아로부터 독립적으로 선택된 작용기에 의해 표적화 모이어티 X 및 활성제 Z에 부착된다. 대안적으로 링커는 티올과 말레이미드, 아자이드와 알킨 사이의 콘주게이션에 의해 제공된 것과 같이 비-절단가능 그룹에 의해 표적화 리간드 또는 활성 약물에 부착될 수 있다. 링커는 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 아릴, 및 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 각각의 상기 알킬, 알케닐, 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 아릴, 및 헤테로아릴 그룹은 1종 이상의 그룹으로 임의로 치환되고, 이들 각각은 할로겐, 시아노, 니트로, 하이드록실, 카복실, 카바모일, 에테르, 알콕시, 아릴옥시, 아미노, 아미드, 카바메이트, 알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴, 아릴알킬, 사이클로알킬, 헤테로아릴, 헤테로사이클릴로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 각각의 상기 카복실, 카바모일, 에테르, 알콕시, 아릴옥시, 아미노, 아미드, 카바메이트, 알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴, 아릴알킬, 사이클로알킬, 헤테로아릴, 또는 헤테로사이클릴은 1종 이상의 그룹으로 임의로 치환되고, 이들 각각은 할로겐, 시아노, 니트로, 하이드록실, 카복실, 카바모일, 에테르, 알콕시, 아릴옥시, 아미노, 아미드, 카바메이트, 알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴, 아릴알킬, 사이클로알킬, 헤테로아릴, 헤테로사이클릴로부터 독립적으로 선택된다.
일부 구현예에서, 링커는 절단가능한 절단가능 작용기를 포함한다. 절단가능 작용기는 생체내에서 가수분해될 수 있거나 예를 들면 카텝신 B에 의해 효소적으로 가수분해되도록 설계될 수 있다. "절단가능" 링커는, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 물리적으로 또는 화학적으로 절단될 수 있는 임의의 링커를 의미한다. 물리적 절단의 예는 광, 방사성 방출 또는 열에 의한 절단일 수 있고, 한편, 화학 절단의 예는 환원- 산화-반응, 가수분해, pH-의존적 절단 또는 효소에 절단을 포함한다.
일부 구현예에서 일커의 알킬 사슬은 1종 이상의 원자 또는-O-, -C(=O)-, -NR, -O-C(=O)-NR-, -S-, -S-S-로부터 선택된 그룹에 의해 임의로 방해될 수 있다. 링커는석신산, 글루타르산 또는 디글라이콜산의 디카복실레이트 유도체로부터 선택될 수 있. 일부 구현예에서, 링커 Y는 X'-R1-Y'-R2-Z'일 수 있고 콘주게이트는 식 Ia에 따른 화합물일 수 있다:
Figure 112017009030734-pct00014
식 중, X는 상기에서 정의된 표적화 모이어티이고; Z는 활성제이고; X', R1, Y', R2 및 Z'는 본 명세서에서 정의된 바와 같다.
X'는 부재하거나 카보닐, 아미드, 우레아, 아미노, 에스테르, 아릴, 아릴카보닐, 아릴옥시, 아릴아미노, 1종 이상의 천연 또는 비천연 아미노산, 티오 또는 석신이미도로부터 독립적으로 선택되고; R1 및 R2는 부재하거나 알킬, 치환된 알킬, 아릴, 치환된 아릴, 폴리에틸렌 글리콜 (2-30 단위)를 포함하고; Y'는 부재하고, 치환된 또는 비치환된 1,2-디아미노에탄, 폴리에틸렌 글리콜 (2-30 단위) 또는 아미드이고; Z'는 부재하거나 카보닐, 아미드, 우레아, 아미노, 에스테르, 아릴, 아릴카보닐, 아릴옥시, 아릴아미노, 티오 또는 석신이미도로부터 독립적으로 선택된다. 일부 구현예에서, 링커는, 1종의 활성제 분자가 2종 이상의 리간드에 연결되도록 하거나, 하나의 리간드가 2종 이상의 활성제 분자에 연결되도록 할 수 있다.
일부 구현예에서, 링커 Y는 Am일 수 있고 콘주게이트는 식 Ib에 따른 화합물일 수 있고:
Figure 112017009030734-pct00015
식 중, A는 본 명세서에서 정의되고, m=0-20.
식 Ia 중 A는 스페이서 단위이고, 부재하거나 하기 치환체로부터 독립적으로 선택된다. 각 치환체에 대해, 단속선은 X, Z 또는 A의 또 다른 독립적으로 선택된 단위와의 치환 부위를 나타내고 상기 X, Z, 또는 A는 치환체의 한 면 상에 부착될 수 있다:
Figure 112017009030734-pct00016
Figure 112017009030734-pct00017
또는
Figure 112017009030734-pct00018
여기서 z = 0-40, R은 H 또는 임의로 치환된 알킬 그룹이고, 그리고 R'는 천연 또는 비천연 아미노산에서 발견된 임의의 측쇄이다.
일부 구현예에서, 콘주게이트는 식 Ic에 따른 화합물일 수 있다:
Figure 112017009030734-pct00019
식 중, A는 상기에서 정의되어 있고, m=0-40, n=0-40, x=1-5, y=1-5, 그리고 C는 본 명세서에서 정의된 분지화 요소이다.
식 Ic 중 C는 아미노산 예컨대 라이신, 2,3-디아미노프로판산, 2,4-디아미노부티르산, 글루탐산, 아스파르트산, 및 시스테인을 포함하여, 아민, 카복실산, 티올, 또는 석신이미드로부터 선택된, 스페이서 단위, 리간드, 또는 활성 약물에 공유결합하기 위한 3 내지 6개의 작용기를 함유하는 분지 단위이다.
본 발명의 콘주게이트의 비-제한적인 예는 하기 화합물을 포함한다:
Figure 112017009030734-pct00020
Figure 112017009030734-pct00021
Figure 112017009030734-pct00022
일부 구현예에서, 본 활성제 Z는 DM1이고 소마토스타틴 수용체 결합제 X는 소마토스타틴, 사이클로(AA-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Phe), 바프레오타이드 또는 TATE로부터 선택된다. 일부 구현예에서, DM1는 링커 Y와 함께 X의 C-말단에 연결된다. 일부 구현예에서, DM1는 링커 Y와 함께 X의 N-말단에 연결된다. 일부 구현예에서, DM1는 링커 Y와 함께 X에 연결되고, 여기서 표적화 모이어티 X는 적어도 1종의 D-Phe 잔기를 포함하고 D-Phe 잔기의 페닐 고리는 링커 Y를 함유하는 그룹에 의해 치환되었다.
본 발명의 DM1 콘주게이트로 불리는 DM1을 포함하는 콘주게이트의 비-제한적인 예는 하기 화합물을 포함한다:
1)사이클로(AA-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Phe)-기반 DM1 콘주게이트
일부 구현예에서, 사이클로(AA-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Phe)는 소마토스타틴 수용체 표적화 모이어티로서 사용되고 콘주게이트는 하기의 일반적인 구조를 갖는다:
Figure 112017009030734-pct00023
8
일부 구현예에서, 표적화 모이어티는 아미드 결합을 만들 수 있는 아미노산을 함유한다. 일부 구현예에서, 링커는 하기를 통해 표적화 모이어티에 결합된다: 아미드 결합, 즉, -NH-CO-, 또는 -CO-NH- (상기 질소 상의 수소는 치환될 수 있음). 일부 구현예에서, 링커는 아미드 결합을 통해 표적화 모이어티에 결합되지 않는다. 일부 구현예에서, 링커는 하기를 포함한다: 아미드 결합, 즉, -NH-CO-, 또는 -CO-NH- (상기 질소 상의 수소는 치환될 수 있음).
사이클로(AA-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Phe) 및 DM1를 포함하는 콘주게이트의 비-제한적인 예는 표 1에서 보여진다:
표 1. 사이클로(AA-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Phe)-기반 콘주게이트
Figure 112017009030734-pct00024
Figure 112017009030734-pct00025
Figure 112017009030734-pct00026
Figure 112017009030734-pct00027
Figure 112017009030734-pct00028
Figure 112017009030734-pct00029
Figure 112017009030734-pct00030
2) C-말단 DM1 콘주게이트:
일부 구현예에서, 소마토스타틴 수용체 표적화 모이어티는 펩타이드 및 링커는 소마토스타틴 수용체 표적화 모이어티의 C-말단에 결합한다. 일부 구현예에서, 소마토스타틴 수용체 표적화 모이어티는 TATE 또는 TATE 유도체, 상기 링커는 TATE 또는 TATE 유도체의 C-말단에 결합한다. C-말단 DM1 콘주게이트는 하기의 일반적인 구조를 갖는다:
Figure 112017009030734-pct00031
여기서 R은 H, 알킬, 아릴, 카보닐, 아미드, 알코올, 또는 아민으로부터 선택되고, 이것은 1종 이상의 그룹으로 임의로 치환되고; 그리고
Ar1 및 Ar2는 1종 이상의 그룹으로 치환된 헤테로사이클릴, 아릴, 및 헤테로아릴 그룹으로부터 독립적으로 선택된다.
일부 구현예에서, 링커 및 소마토스타틴 수용체 표적화 모이어티의 C-말단를 연결하는 공유 결합은 아미드 결합이다.
상기 링커가 소마토스타틴 수용체 표적화 모이어티의 C-말단에 결합하고 상기 소마토스타틴 수용체 표적화 모이어티는 TATE인 DM1 콘주게이트의 비-제한적인 예는 표 2에서 보여진다:
표 2. C-말단 DM1-TATE 콘주게이트
Figure 112017009030734-pct00032
Figure 112017009030734-pct00033
Figure 112017009030734-pct00034
Figure 112017009030734-pct00035
3) N-말단 DM1 콘주게이트
일부 구현예에서, 소마토스타틴 수용체 표적화 모이어티는 펩타이드 및 링커는 소마토스타틴 수용체 표적화 모이어티의 N-말단에 결합한다. 일부 구현예에서, 표적 모이어티는 옥트레오타이드, 바프레오타이드, 및 TATE 로부터 선택된다. 일부 구현예에서, 링커 및 소마토스타틴 수용체 표적화 모이어티의 N-말단을 연결하는 공유 결합은 하기이다: 아미드 결합, 즉, -NH-CO-. 일부 구현예에서, 링커는 하기를 통해 소마토스타틴 수용체 표적화 모이어티의 N-말단에 결합한다: 아민 결합, 즉, -NH-CH2- (탄소 상의 수소가 치환될 수 있다). 일부 구현예에서, 링커는 하기를 통해 소마토스타틴 수용체 표적화 모이어티의 N-말단에 결합한다: 우레아 결합, 즉 -NH-CO-NH-. N-말단 DM1 콘주게이트는 하기의 일반적인 구조를 갖는다:
Figure 112017009030734-pct00036
여기서 R1 및 R2는 1종 이상의 그룹으로 임의로 치환된 H, OH, 알킬, 아릴, 카보닐, 에스테르, 아미드, 에테르, 알코올, 또는 아민 로부터 독립적으로 선택되고; 그리고
Ar1는 1종 이상의 그룹으로 임의로 치환된 헤테로사이클릴, 아릴, 및 헤테로아릴 그룹 로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R1 또는 R2 중 적어도 하나는 DM1를 포함한다.
링커가 소마토스타틴 수용체 표적화 모이어티의 N-말단에 결합하는 DM1 콘주게이트의 비-제한적인 예는 표 3에서 보여진다:
표 3. N-말단 DM1 콘주게이트
Figure 112017009030734-pct00037
Figure 112017009030734-pct00038
Figure 112017009030734-pct00039
Figure 112017009030734-pct00040
Figure 112017009030734-pct00041
Figure 112017009030734-pct00042
Figure 112017009030734-pct00043
Figure 112017009030734-pct00044
Figure 112017009030734-pct00045
Figure 112017009030734-pct00046
4) D- Phe 대체 DM1 콘주게이트
일부 구현예에서, 소마토스타틴 수용체 표적화 모이어티는 표적화 리간드 예컨대 옥트레오타이드 또는 TATE이고, 상기 표적화 리간드의 D-Phe 잔기의 페닐 고리는 링커-함유 모이어티에 의해 대체되었다. D-Phe 대체 DM1 콘주게이트는 하기의 일반적인 구조를 갖는다:
Figure 112017009030734-pct00047
여기서 R은 H, OH, 알킬, 아릴, 카보닐, 에스테르, 아미드, 에테르, 알코올, 또는 아민으로부터 선택되고, 이것은 1종 이상의 그룹으로 임의로 치환된다. 일부 구현예에서, R은 DM1을 포함한다.
상기 표적화 리간드의 D-Phe 잔기의 페닐 고리가 링커-함유 모이어티에 의해 치환되었던 DM1 콘주게이트의 비-제한적인 예는 표 4에서 보여진다:
표 4. D-Phe 대체 콘주게이트
Figure 112017009030734-pct00048
Figure 112017009030734-pct00049
Figure 112017009030734-pct00050
Figure 112017009030734-pct00051
III. 입자
1종 이상의 콘주게이트를 함유하는 입자는 폴리머성 입자, 지질 입자, 고형 지질 입자, 무기 입자, 또는 이들의 조합 (예를 들면, 지질 안정화된 폴리머성 입자)일 수 있다. 일부 구현예에서, 입자는 폴리머성 입자이거나 폴리머성 매트릭스를 함유한다. 입자는 본 명세서에서 기재된 폴리머 중 임의의 것 또는 그것의 유도체 또는 코폴리머를 함유할 수 있다. 입자는 일반적으로 1종 이상의 생체적합성 폴리머를 함유한다. 폴리머는 생분해성 폴리머일 수 있다. 폴리머는 소수성 폴리머, 친수성 폴리머, 또는 양친매성 폴리머일 수 있다. 일부 구현예에서, 입자는 추가의 표적화 모이어티를 부착한1종 이상의 폴리머를 함유한다.
입자의 크기는 의도된 적용을 위해 조정될 수 있다. 입자는 나노입자 또는 극미립자일 수 있다. 입자는 약 10 nM 내지 약 10 마이크론, 약 10 nM 내지 약 1 마이크론, 약 10 nM 내지 약 500 nm, 약 20 nM 내지 약 500 nm, 또는 약 25 nM 내지 약 250 nm의 직경을 가질 수 있다. 일부 구현예에서 입자는 약 25 nM 내지 약 250 nm의 직경을 갖는 나노입자이다. 복수의 입자는 크기의 범위를 가질 것으로 당해 기술의 숙련가에 이해하고 직경은 중앙 입자의 직경 크기 분포인 것으로 이해된다.
다양한 구현예에서, 입자는 나노입자일 수 있고, 즉, 입자는 약 1 마이크로미터 미만의 특징적인 치수를 가지며, 상기 입자의 특징적인 치수는 입자와 동일한 용적을 갖는 완전한 구형체의 직경이다. 복수의 입자는 평균 직경 (예를 들면, 복수의 입자에 대한 평균 직경)을 특징으로 할 수 있다. 일부 구현예에서, 입자의 직경은 가우스-형 분포를 가질 수 있다. 일부 구현예에서, 복수의 입자는 약 300 nm 미만, 약 250 nm 미만, 약 200 nm 미만, 약 150 nm 미만, 약 100 nm 미만, 약 50 nm 미만, 약 30 nm 미만, 약 10 nm 미만, 약 3 nm 미만, 또는 약 1 nm 미만의 평균 직경을 갖는다. 일부 구현예에서, 입자는 적어도 약 5 nm, 적어도 약 10 nm, 적어도 약 30 nm, 적어도 약 50 nm, 적어도 약 100 nm, 적어도 약 150 nm, 또는 그 초과의 평균 직경을 갖는다. 특정 구현예에서, 복수의 입자는 약 10 nm, 약 25 nm, 약 50 nm, 약 100 nm, 약 150 nm, 약 200 nm, 약 250 nm, 약 300 nm, 약 500 nm, 등의 평균 직경을 갖는다. 일부 구현예에서, 복수의 입자는 약 10 nm 내지 약 500 nm, 약 50 nm 내지 약 400 nm, 약 100 nm 내지 약 300 nm, 약 150 nm 내지 약 250 nm, 약 175 nm 내지 약 225 nm, 등의 평균 직경을 갖는다. 일부 구현예에서, 복수의 입자는 약 10 nm 내지 약 500 nm, 약 20 nm 내지 약 400 nm, 약 30 nm 내지 약 300 nm, 약 40 nm 내지 약 200 nm, 약 50 nm 내지 약 175 nm, 약 60 nm 내지 약 150 nm, 약 70 nm 내지 약 130 nm, 등의 평균 직경을 갖는다. 예를 들면, 평균 직경는 약 70 nm 내지 130 nm일 수 있다. 일부 구현예에서, 복수의 입자는 약 20 nm 내지 약 220 nm, 약 30 nm 내지 약 200 nm, 약 40 nm 내지 약 180 nm, 약 50 nm 내지 약 170 nm, 약 60 nm 내지 약 150 nm, 또는 약 70 nm 내지 약 130 nm의 평균 직경을 갖는다. 일 구현예에서, 입자는 낮은 내지 제로 이온 강도 (1 내지 10 mM)에서 0 Mv에 가까운 제타 전위를 갖는 40 내지 120 nm의 크기를 가지며, 상기 전위 값은 + 5 내지 - 5 mV, 및 제로/중성 또는 작은 -ve 표면 전하이다.
A.콘주게이트
입자는 상기에서 기재된 바와 같은 1종 이상의 콘주게이트를 함유한다. 콘주게이트는 입자의 내부 상에, 입자의 외부 상에, 또는 둘 모두 상에 존재할 수 있다. 입자는 상기에서 기재된 1종 이상의 콘주게이트 및 반대이온에 의해 형성된 소수성 이온-짝짓기 복합체 또는 소수성 이온-쌍을 포함할 수 있다.
소수성 이온-짝짓기 (HIP)는 쿨롱 인력에 의해 함께 보유된 한 쌍의 반대 전하 이온 사이의 상호작용이다. HIP는, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 본 발명의 콘주게이트와 그것의 반대이온 사이의 상호작용을 의미하고, 상기 반대이온은 H+ 또는 HO- 이온이 아니다. 소수성 이온-짝짓기 착물 또는 소수성 이온-쌍은, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 본 발명의 콘주게이트 및 그것의 반대이온에 의해 형성된 착물의 의미한다. 일부 구현예에서, 반대이온은 소수성이다. 일부 구현예에서, 반대이온은 소수성 산 또는 소수성 산의 염에 의해 제공된다. 일부 구현예에서, 반대이온은 담즙산 또는 염, 지방산 또는 염, 지질, 또는 아미노산에 의해 제공된다. 일부 구현예에서, 반대이온은 음으로 하전된다 (음이온성). 음전하 반대이온의 비제한 예는 하기를 포함한다: 반대이온 나트륨 설포석시네이트 (AOT), 나트륨 올레이트, 나트륨 도데실 설페이트 (SDS), 인간 혈청 알부민 (HSA), 덱스트란 설페이트, 나트륨 데옥시콜레이트, 나트륨 콜레이트, 음이온성 지질, 아미노산, 또는 이들의 임의의 조합. 임의의 이론에 의해 구속되기를 바라지 않지만, 일부 구현예에서, HIP는 본 발명의 콘주게이트의 소수성 및/또는 친유성을 증가시킬 수 있다. 일부 구현예에서, 본 발명의 콘주게이트의 소수성 및/또는 친유성의 증가는 입자 제형에 유익할 수 있고 유기 용매 중 본 발명의 콘주게이트의 더 높은 용해도를 제공할 수 있다. 임의의 이론에 의해 구속되기를 바라지 않지만, HIP 쌍을 포함하는 입자 제형이 개선된 제형 특성, 예컨대 약물 부하 및/또는 방출 프로파일을 갖는 것으로 믿는다. 임의의 이론에 의해 구속되기를 바라지 않지만, 일부 구현예에서, 입자로부터의 본 발명의 콘주게이트의 느린 방출은 수용액 중 콘주게이트의 용해도의 감소에 의해 일어날 수 있다. 또한, 임의의 이론에 의해 구속되기를 바라지 않지만, 콘주게이트와 큰 소수성 반대이온과의 복합체화로, 폴리머성 매트릭스 내에서 콘주게이트의 확산이 느려질 수 있다. 일부 구현예에서, HIP는 반대이온의 본 발명의 콘주게이트로의 공유 콘주게이션 없이 생긴다.
임의의 이론에 의해 구속되기를 바라지 않지만, HIP의 강도는 본 발명의 입자의 약물 부하 및 방출 속도에 영향을 줄 수 있다. 일부 구현예에서, HIP의 강도는 본 발명의 콘주게이트의 pKa와 반대이온을 제공하는 제제의 pKa 사이의 차이의 규모를 증가시킨으로써 증가될 수 있다. 또한 임의의 이론에 의해 구속되기를 바라지 않지만, 이온쌍 형성 조건은 본 발명의 입자의 약물 부하 및 방출 속도에 영향을 줄 수 있다.
일부 구현예에서, 임의의 적합한 소수성 산 또는 이들의 조합은 본 발명의 콘주게이트와 함께 HIP 쌍을 형성할 수 있다. 일부 구현예에서, 소수성 산은 카복실산 (예컨대 비제한적으로 모노카복실산, 디카복실산, 트리카복실산), 및 설핀 산, 및 설펜산, 또는 설폰산일 수 있다. 일부 구현예에서, 적합한 소수성 산의 염 또는 이들의 조합은 사용되어 본 발명의 콘주게이트와 함께 HIP 쌍을 형성할 수 있다. 소수성 산, 포화된 지방산, 불포화된 지방산, 방향산, 담즙산, 고분자전해질, 물 중 그것의 해리 상수 (pKa) 및 logP 값의 예는 WO2014/043,625(이들의 내용은 본 명세서에 그 전체가 참고로 편입되어 있음)에서 개시되었다. 소수성 산의 강도, 소수성 산의 pKa와 본 발명의 콘주게이트의 pKa 사이의 차이, 소수성 산의 logP, 소수성 산의 상 전이 온도, 소수성 산 대 본 발명의 콘주게이트의 몰비, 및 소수성 산의 농도는 또한 WO2014/043,625(이들의 내용은 본 명세서에 그 전체가 참고로 편입되어 있음)에서 개시되었다.
일부 구현예에서, HIP 복합체를 포함하고/거나 임의의 반대이온을 제공하는 과정에 의해 제조되어 HIP 복합체를 콘주게이트와 함께 형성하는 본 발명의 입자는 HIP 복합체가 없거나 임의의 반대이온을 제공하지 않는 과정에 의해 제조되어 HIP 복합체를 콘주게이트와 함께 형성하는 입자보다 더 높은 약물 부하를 가질 수 있다. 일부 구현예에서, 약물 부하는 50%, 100%, 2 배, 3 배, 4 배, 5 배, 6 배, 7 배, 8 배, 9 배, 또는 10 배 증가될 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 입자는, 37oC에서 포스페이트 완충 용액에 두었을 때 적어도 약 1 분, 적어도 약 15 분, 적어도 약 1 시간 동안 콘주게이트를 보유할 수 있다.
일부 구현예에서, 입자 중 콘주게이트의 중량 백분율은 적어도 약 0.05%, 0.1%, 0.5%, 1%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 또는 50%이고, 이로써, 입자의 성분의 중량 백분율의 합은 100%이다. 일부 구현예에서, 입자 중 콘주게이트의 중량 백분율은 약 0.5% 내지 약 10%, 또는 약 10% 내지 약 20%, 또는 약 20% 내지 약 30%, 또는 약 30% 내지 약 40%, 또는 약 40% 내지 약 50%, 또는 약 50% 내지 약 60%, 또는 약 60% 내지 약 70%, 또는 약 70% 내지 약 80%, 또는 약 80% 내지 약 90%, 또는 약 90% 내지 약 99%이고, 이로써, 입자의 성분의 중량 백분율의 합은 100%이다.
일부 예에서, 콘주게이트는 약 50,000 Da 미만, 약 40,000 Da 미만, 약 30,000 Da 미만, 약 20,000 Da 미만, 약 15,000 Da 미만, 약 10,000 Da 미만, 약 8,000 Da 미만, 약 5,000 Da 미만, 또는 약 3,000 Da 미만의 분자량을 가질 수 있다. 일부 경우에서, 콘주게이트는 약 1,000 Da 내지 약 50,000 Da, 약 1,000 Da 내지 약 40,000 Da, 일부 구현예에서 약 1,000 Da 내지 약 30,000 Da, 일부 구현예에서 bout 1,000 Da 및 약 50,000 Da, 약 1,000 Da 내지 약 20,000 Da, 일부 구현예에서 약 1,000 Da 내지 약 15,000 Da, 일부 구현예에서 약 1,000 Da 내지 약 10,000 Da, 일부 구현예에서 약 1,000 Da 내지 약 8,000 Da, 일부 구현예에서 약 1,000 Da 내지 약 5,000 Da, 및 일부 구현예에서 약 1,000 Da 내지 약 3,000 Da의 분자량을 가질 수 있다. 콘주게이트의 분자량은 콘주게이트의 식에서 각 원자의 원자량에 각 원자의 수를 곱한 값으로서 계산될 수 있다. 질량 분광분석법, NMR, 크로마토그래피, 광 산란, 점도, 및/또는 임의의 다른 당해 분야에서 공지된 방법에 의해 또한 측정될 수 있다. 분자량의 단위는 g/mol, 달톤 (Da), 또는 원자 질량 단위 (amu)일 수 있는, 이것은 당해기술에서 공지되어 있고, 여기서 1 g/mol = 1 Da = 1 amu.
B. 폴리머
입자는 1종 이상의 폴리머를 함유할 수 있다. 폴리머는 하기 폴리에스테르 중 1종 이상을 함유할 수 있다: 글라이콜산 단위, 본 명세서에서 일명 "PGA", 및 락트산 단위, 예컨대 폴리-L-락트산, 폴리-D-락트산, 폴리-D,L-락트산, 폴리-L-락타이드, 폴리-D-락타이드, 및 폴리-D,L-락타이드, 종합적으로 본 명세서에서 일명 "PLA", 및 카프로락톤 단위, 예컨대 폴리(ε-카프로락톤), 종합적으로 본 명세서에서 일명 "PCL"를 포함하는 호모폴리머; 및 락트산 및 글라이콜산 단위, 예컨대 다양한 형태의 폴리(락트산-코-글라이콜산) 및 폴리(락타이드-코-글라이콜라이드)(락트산:글라이콜산, 종합적으로 본 명세서에서 일명 "PLGA"의 비를 특징으로 함)를 포함하는 코폴리머; 및 폴리아크릴레이트, 및 그것의 유도체. 예시적인 폴리머는 또한 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 및 상기 언급된 폴리에스테르의 코폴리머, 예컨대 다양한 형태의 PLGA-PEG 또는 PLA-PEG 코폴리머, 종합적으로 본 명세서에서 일명 "페길화된 폴리머"를 포함한다. 특정 구현예에서, PEG 영역은 폴리머와 공유적으로 관련되어 절단가능 링커에 의해 "페길화된 폴리머"를 얻을 수 있다.
입자는 1종 이상의 친수성 폴리머를 함유할 수 있다. 친수성 폴리머는 하기를 포함한다: 셀룰로오스 폴리머 예컨대 전분 및 다당류; 친수성 폴리펩타이드; 폴리(아미노산) 예컨대 폴리-L-글루탐산 (PGS), 감마-폴리글루탐산, 폴리-L-아스파르트산, 폴리-L-세린, 또는 폴리-L-라이신; 폴리알킬렌 글리콜 및 폴리알킬렌 옥사이드 예컨대 폴리에틸렌 글리콜 (PEG), 폴리프로필렌 글리콜 (PPG), 및 폴리(에틸렌 옥사이드) (PEO); 폴리(옥시에틸레이트화된 폴리올); 폴리(올레핀성 알코올); 폴리비닐피롤리돈); 폴리(하이드록시알킬메타크릴아미드); 폴리(하이드록시알킬메타크릴레이트); 폴리(사카라이드); 폴리(하이드록시 산); 폴리(비닐 알코올);폴리옥사졸린; 및 그것의 코폴리머.
입자는 1종 이상의 소수성 폴리머를 함유할 수 있다. 적합한 소수성 폴리머의 예는 하기를 포함한다: 폴리하이드록시산 예컨대 폴리(락트산), 폴리(글라이콜산), 및 폴리(락트산-코-글라이콜산); 폴리하이드록시알카노에이트 예컨대 폴리3-하이드록시부티레이트 또는 폴리4-하이드록시부티레이트; 폴리카프로락톤; 폴리(오르토에스테르); 폴리무수물; 폴리(포스파젠); 폴리(락타이드-코-카프로락톤); 폴리카보네이트 예컨대 티로신 폴리카보네이트; 폴리아미드 (합성 및 천연 폴리아미드 포함), 폴리펩타이드, 및 폴리(아미노산); 폴리에스테르아미드; 폴리에스테르; 폴리(디옥사논); 폴리(알킬렌 알킬레이트); 소수성 폴리에테르; 폴리우레탄; 폴리에테르에스테르; 폴리아세탈; 폴리시아노아크릴레이트; 폴리아크릴레이트; 폴리메틸메타크릴레이트; 폴리실록산; 폴리(옥시에틸렌)/폴리(옥시프로필렌) 코폴리머; 폴리케탈; 폴리포스페이트; 폴리하이드록시발레레이트; 폴리알킬렌 옥살레이트; 폴리알킬렌 석시네이트; 폴리(말레산), 뿐만 아니라 그것의 코폴리머.
특정 구현예에서, 소수성 폴리머는 지방족 폴리에스테르이다. 일부 구현예에서, 소수성 폴리머는 폴리(락트산), 폴리(글라이콜산), 또는 폴리(락트산-코-글라이콜산)이다.
입자는 1종 이상의 생분해성 폴리머를 함유할 수 있다. 생분해성 폴리머는 신체에서 수용성 물질로 화학적으로 또는 효소적으로 전환되는 물 중 불용성 또는 난용성인 폴리머를 포함할 수 있다. 생분해성 폴리머는 가교결합된 폴리머에 물 중 불용성 또는 난용성을 부여하기 위해 가수분해성 교차-연결 기에 의해 가교결합된 가용성 폴리머를 포함할 수 있다.
입자 중 생분해성 폴리머는 하기를 포함할 수 있다: 폴리아미드, 폴리카보네이트, 폴리알킬렌, 폴리알킬렌 글리콜, 폴리알킬렌 옥사이드, 폴리알킬렌 테레프탈레이드, 폴리비닐 알코올, 폴리비닐 에테르, 폴리비닐 에스테르, 폴리비닐 할라이드, 폴리비닐피롤리돈, 폴리글라이콜라이드, 폴리실록산, 폴리우레탄 및 그것의 코폴리머, 알킬 셀룰로오스 예컨대 메틸 셀룰로오스 및 에틸 셀룰로오스, 하이드록시알킬 셀룰로오스 예컨대 하이드록시프로필 셀룰로오스, 하이드록시-프로필 메틸 셀룰로오스, 및 하이드록시부틸 메틸 셀룰로오스, 셀룰로오스 에테르, 셀룰로오스 에스테르, 니트로 셀룰로오스, 셀룰로오스 아세테이트, 셀룰로오스 프로피오네이트, 셀룰로오스 아세테이트 부티레이트, 셀룰로오스 아세테이트 프탈레이트, 카복실에틸 셀룰로오스, 셀룰로오스 트리아세테이트, 셀룰로오스 설페이트 나트륨 염, 아크릴 및 메타크릴 에스테르의 폴리머 예컨대 폴리 (메틸 메타크릴레이트), 폴리(에틸메타크릴레이트), 폴리(부틸메타크릴레이트), 폴리(이소부틸메타크릴레이트), 폴리(헥실메타크릴레이트), 폴리(이소데실메타크릴레이트), 폴리(라우릴 메타크릴레이트), 폴리 (페닐 메타크릴레이트), 폴리(메틸 아크릴레이트), 폴리(이소프로필 아크릴레이트), 폴리(이소부틸 아크릴레이트), 폴리(옥타데실 아크릴레이트), 폴리에틸렌, 폴리프로필렌 폴리(에틸렌 글리콜), 폴리(에틸렌 옥사이드), 폴리(에틸렌 테레프탈레이트), 폴리(비닐 알코올), 폴리(비닐 아세테이트, 폴리 비닐 클로라이드 폴리스티렌 및 폴리비닐피롤리돈, 그것의 유도체, 그것의 선형 및 분지형 코폴리머 및 블록 코폴리머, 및 그것의 배합물. 예시적인 생분해성 폴리머는 하기를 포함한다: 폴리에스테르, 폴리(오르토에스테르), 폴리(에틸렌 이민), 폴리(카프로락톤), 폴리(하이드록시알카노에이트), 폴리(하이드록시발레레이트), 폴리무수물, 폴리(아크릴산), 폴리글라이콜라이드, 폴리(우레탄), 폴리카보네이트, 폴리포스페이트 에스테르, 폴리포스파젠, 그것의 유도체, 그것의 선형 및 분지형 코폴리머 및 블록 코폴리머, 및 그것의 배합물. 일부 구현예에서 입자는 생분해성 폴리에스테르 또는 폴리무수물 예컨대 폴리(락트산), 폴리(글라이콜산), 및 폴리(락트산-코-글라이콜산)를 함유한다.
입자는 1종 이상의 양친매성 폴리머를 함유할 수 있다. 양친매성 폴리머는 소수성 폴리머 블록 및 친수성 폴리머 블록을 함유하는 폴리머일 수 있다. 소수성 폴리머 블록은 상기의 소수성 폴리머 또는 그것의 유도체 또는 코폴리머 중 1종 이상을 함유할 수 있다. 친수성 폴리머 블록은 상기의 친수성 폴리머 또는 그것의 유도체 또는 코폴리머 중 1종 이상을 함유할 수 있다. 일부 구현예에서 양친매성 폴리머는 소수성 폴리머로부터 형성된 소수성 말단 및 친수성 폴리머로 형성된 친수성 말단을 함유하는 디-블록 폴리머이다. 일부 구현예에서, 모이어티는 소수성 말단에, 친수성 말단에, 또는 둘 모두에 부착될 수 있다. 입자는 2종 이상의 양친매성 폴리머를 함유할 수 있다.
C. 지질
입자는 1종 이상의 지질 또는 양친매성 화합물을 함유할 수 있다. 예를 들면, 입자는 리포좀, 지질 교질입자, 고형 지질 입자, 또는 지질-안정화된 폴리머성 입자일 수 있다. 지질 입자는 상이한 지질 중 하나 또는 그것의 혼합물로부터 만들어질 수 있다. 지질 입자는 생리적 pH에서 중성, 음이온성, 또는 양이온성일 수 있는 1종 이상의 지질로부터 형성된다. 지질 입자는, 일부 구현예에서, 1종 이상의 생체적합성 지질을 편입한다. 지질 입자는 1종 초과 지질의 조합을 사용하여 형성될 수 있다. 예를 들면, 충전된 지질은 생리적 pH에서 비-이온성 또는 미하전된 지질과 조합될 수 있다.
입자는 지질 교질입자일 수 있다. 약물 전달용 기질 교질입자는 당해 기술에 공지되어 있다. 지질 교질입자는 예를 들면, 지질 표면활성제와의 유중수 에멀젼으로부터 형성될 수 있다. 에멀젼은, 표면활성제가 부가되어 분산된 액적을 안정화시키는 2종의 불혼화성 상의 블렌드이다. 일부 구현예에서 지질 교질입자는 마이크로에멀젼이다. 마이크로에멀젼은, 액적 크기가 1 마이크론 미만, 약 10 nM 내지 약 500 nm, 또는 약 10 nM 내지 약 250 nm인 투명한 및 열역학적으로 안정한 시스템을 생성하는 적어도 물, 오일 및 지질 표면활성제로 구성된 열역학적으로 안정한 시스템이다. 지질 교질입자는 일반적으로 소수성 치료제, 소수성 예방적 제제, 또는 소수성 진단제를 포함하는 소수성 활성제를 캡슐화하는데 유용하다.
입자는 리포좀일 수 있다. 리포좀은 구형 이중층에서 마련된 지질에 의해 둘러싸인 수성 매질로 구성된 작은 소포이다. 리포좀은 작은 단일라멜라 소포, 큰 단일라멜라 소포, 또는 다중-라멜라 소포로서 분류될 수 있다. 다중-라멜라 리포좀은 다중 동심성 지질 이중층을 함유한다. 리포좀은 수성 내부에서 또는 이중층 사이에서 친수성 제제를 트랩핑하거나, 이중층 내의 소수성 제제를 트랩핑하여 제제를 캡슐화하도록 사용될 수 있다.
지질 교질입자 및 리포좀은 전형적으로 수성 중심을 갖는다. 수성 중심은 물 또는 물과 알코올의 혼합물을 함유할 수 있다. 적합한 알코올은, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 메탄올, 에탄올, 프로판올, (예컨대 이소프로판올), 부탄올 (예컨대 n-부탄올, 이소부탄올, sec-부탄올, tert-부탄올, 펜타놀 (예컨대 아밀 알코올, 이소부틸 카비놀), 헥산올 (예컨대 1-헥산올, 2-헥산올, 3-헥산올), 헵타놀 (예컨대 1-헵타놀, 2-헵타놀, 3-헵타놀 및 4-헵타놀) 또는 옥탄올 (예컨대 1-옥탄올) 또는 이들의 조합.
입자는 고형 지질 입자일 수 있다. 고형 지질 입자는 콜로이드성 교질입자 및 리포좀에 대한 대안을 제공한다. 고형 지질 입자는 전형적으로 그 크기가 약 10 nM 내지 약 1 마이크론, 10 nM 내지 약 500 nm, 또는 10 nM 내지 약 250 nm인 서브마이크론이다. 고형 지질 입자는 실온에서 고체인 지질로 형성된다. 상기 입자는 액체 오일을 고형 지질로 대체하여 수중유 에멀젼으로부터 유도된다.
적합한 중성 및 음이온성 지질은, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 스테롤 및 지질 예컨대 콜레스테롤, 인지질, 라이소지질, 라이소인지질, 스핑고지질 또는 페길화된 지질. 중성 및 음이온성 지질은, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 포스파티딜콜린 (PC) (예컨대 난(egg) PC, 콩 PC) (1,2-디아실-글리세로-3-포스포콜린 포함); 포스파티딜세린 (PS), 포스파티딜글리세롤, 포스파티딜이노시톨 (PI); 당지질; 스핑고인지질 예컨대 스핑고미엘린 및 스핑고당지질 (로도 공지된다 1-세라미딜 글루코사이드) 예컨대 세라미드 갈락토피라노시드, 강글리오사이드 및 세레브로시드; 지방산, 스테롤 (카복실산 그룹 예를 들면, 콜레스테롤 함유); 1,2-디아실-sn-글리세로-3-포스포에탄올아민 (비제한적으로, 1,2-디올레일포스포에탄올아민 (DOPE), 1,2-디헥사데실포스포에탄올아민 (DHPE), 1,2-디스테아로일포스파티딜콜린 (DSPC), 1,2-디팔미토일 포스파티딜콜린 (DPPC), 및 1,2-디미리스토일포스파티딜콜린 (DMPC) 포함). 지질은 또한 하기를 포함한다: 다양한 천연 (예를 들면, 조직 유도된 L-α-포스파티딜: 계란 노른자, 심장, 뇌, 간, 대두) 및/또는 지질의 합성 (예를 들면, 포화된 및 불포화된 1,2-디아실-sn-글리세로-3-포스포콜린, 1-아실-2-아실-sn-글리세로-3-포스포콜린, 1,2-디헵타노일-SN-글리세로-3-포스포콜린) 유도체.
적합한 양이온성 지질은, 비제한적으로, 하기를 포함한다: N-[1-(2,3-디올레오일옥시)프로필]-N,N,N-트리메틸 암모늄 염, 또한 TAP 지질, 예를 들면 메틸설페이트 염로서 참조문헌. 적합한 TAP 지질은, 비제한적으로, 하기를 포함한다: DOTAP (디올레오일-), DMTAP (디미리스토일-), DPTAP (디팔미토일-), 및 DSTAP (디스테아로일-). 리포좀 중 적합한 양이온성 지질은, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 디메틸디옥타데실 암모늄 브로마이드 (DDAB), 1,2-디아실옥시-3-트리메틸암모늄 프로판, N-[1-(2,3-디올로일옥시)프로필]-N,N-디메틸 아민 (DODAP), 1,2-디아실옥시-3-디메틸암모늄 프로판, N-[1-(2,3-디올레일옥시)프로필]-N,N,N-트리메틸염화암모늄 (DOTMA), 1,2-디알킬옥시-3-디메틸암모늄 프로판, 디옥타데실아미도글라이실스페르민 (개), 3 -[N-(N',N'-디메틸아미노-에탄)카바모일]콜레스테롤 (DC-Chol); 2,3-디올레오일옥시-N-(2-(스페르민카복사미도)-에틸)-N,N-디메틸-1-프로판아미늄 트리플루오로-아세테이트 (DOSPA), β-알라닐 콜레스테롤, 세틸 트리메틸 암모늄 브로마이드 (CTAB), diC14-아미딘, N-ferf-부틸-N'-테트라데실-3-테트라데실아미노-프로피오n아미딘, N-(알파-트리메틸암모니오아세틸)디도데실-D-글루타메이트 클로라이드 (TMAG), di테트라데카노일-N-(트리메틸암모니오-아세틸)디에탄올아민 클로라이드, 1,3-디올레오일옥시-2-(6-카복시-스페르밀)-프로필아미드 (DOSPER), 및 N, N, N', N'-테트라메틸-, N'-비스(2-하이드록실에틸)-2,3-디올레오일옥시-1,4-부탄di암모늄 아이오다이드. 일 구현예에서, 양이온성 지질은 1-[2-(아실옥시)에틸]2-알킬(알케닐)-3-(2-하이드록시에틸)-이미다졸리늄 클로라이드 유도체, 예를 들면, 1-[2-(9(Z)-옥타데세노일옥시)에틸]-2-(8(Z)-헵타데세닐-3-(2-하이드록시에틸)이미다졸리늄 클로라이드 (DOTIM), 및 1-[2-(헥사데카노일옥시)에틸]-2-펜타데실-3-(2-하이드록시에틸)이미다졸리늄 클로라이드 (DPTIM)일 수 있다. 일 구현예에서, 양이온성 지질은 하기일 수 있다: 4차 아민 상에 하이드록시알킬 모이어티를 함유하는 2,3-디알킬옥시프로필 4차 암모늄 화합물 유도체, 예를 들면, 1,2-디올레오일-3-디메틸-하이드록시에틸 암모늄 브로마이드 (DORI), 1,2-디올레일옥시프로필-3-디메틸-하이드록시에틸 암모늄 브로마이드 (DORIE), 1,2-디올레일옥시프로필-3-디메틸-하이드록시프로필 암모늄 브로마이드 (DORIE-HP), 1,2-디올레일-옥시-프로필-3-디메틸-하이드록시부틸 암모늄 브로마이드 (DORIE-HB), 1,2-디올레일옥시프로필-3-디메틸-하이드록시펜틸 암모늄 브로마이드 (DORIE-Hpe), 1,2-디미리스틸옥시프로필-3-디메틸-하이드록실에틸 암모늄 브로마이드 (DMRIE), 1,2-디팔미틸옥시프로필-3-디메틸-하이드록시에틸 암모늄 브로마이드 (DPRIE), 및 1,2-디스테아릴옥시프로필-3-디메틸-하이드록시에틸 암모늄 브로마이드 (DSRIE).
적합한 고형 지질은, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 고급 포화된 알코올, 고급 지방산, 스핑고지질, 합성 에스테르, 및 고급 포화된 지방산의의 모노-, 디-, 및 트리글리세라이드. 고형 지질은 10-40, 예를 들면, 12-30개의 탄소 원자를 갖는 지방족 알코올, 예컨대 세토스테아릴 알코올을 포함할 수 있다. 고형 지질은 10-40, 예를 들면, 12-30개의 탄소 원자의 고급 지방산, 예컨대 스테아르산, 팔미트산, 데칸산, 및 베헨산을 포함한다. 고형 지질은 하기를 포함하는 글리세라이드를 포함할 수 있다: 10-40, 예를 들면, 12-30개의 탄소 원자를 갖는 고급 포화된 지방산의 모노글리세라이드, 디글리세라이드, 및 트리글리세라이드, 예컨대 글리세릴 모노스테아레이트, 글리세롤 베헤네이트, 글리세롤 팔미토스테아레이트, 글리세롤 트리라우레이트, 트리카프린, 트리라우린, 트리미리스틴, 트리팔미틴, 트리스테아린, 및 수소화된 피마자유. 적합한 고형 지질은 세틸 팔미테이트, 밀랍, 또는 사이클로덱스트린을 포함할 수 있다.
양친매성 화합물은, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 인지질, 예컨대 1,2 디스테아로일-sn-글리세로-3-포스포에탄올아민 (DSPE), 디팔미토일포스파티딜콜린 (DPPC), 디스테아로일포스파티딜콜린 (DSPC), 디아라키도일포스파티딜콜린 (DAPC), 디베헤노일포스파티딜콜린 (DBPC), 디트리코사노일포스파티딜콜린 (DTPC), 및 디리그노세로일파티딜콜린 (DLPC) (0.01 내지 60 (중량 지질/w 폴리머), 예를 들면, 0.1 내지 30 (중량 지질/w 폴리머)의 비로 편입됨). 사용될 수 있는 인지질은, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 포스파티드산, 포화된 및 불포화된 지질을 갖는 포스파티딜 콜린, 포스파티딜 에탄올아민, 포스파티딜글리세롤, 포스파티딜세린, 포스파티딜이노시톨, 라이소포스파티딜 유도체, 카디올리핀, 및 β-아실-y-알킬 인지질. 인지질의 예는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 포스파티딜콜린 예컨대 디올레오일포스파티딜콜린, 디미리스토일포스파티딜콜린, 디펜타데카노일포스파티딜콜린 디라우로일포스파티딜콜린, 디팔미토일포스파티딜콜린 (DPPC), 디스테아로일포스파티딜콜린 (DSPC), 디아라키도일포스파티딜콜린 (DAPC), 디베헤노일포스파티딜콜린 (DBPC), 디트리코사노일포스파티딜콜린 (DTPC), 디리그노세로일파티딜콜린 (DLPC); 및 포스파티딜에탄올아민 예컨대 디올레오일포스파티딜에탄올아민 또는 1-헥사데실-2-팔미토일글리세로포스-포에탄올아민. 비대칭 아실 사슬 (예를 들면, 6개의 탄소의 하나의 아실 사실 및 12개의 탄소의 또 다른 아실 사슬)을 갖는 합성 인지질이 또한 사용될 수 있다.
D. 추가의 활성제
입자는 콘주게이트 내의 것에 추가하여 1종 이상의 추가의 활성제를 함유할 수 있다. 추가의 활성제는 상기에서 열거된 바와 같이 치료제, 예방제, 진단제, 또는 영양제일 수 있다. 추가의 활성제는 상기 입자의 중량을 기준으로 임의의 양, 예를 들면 약 0.5% 내지 약 90%, 약 0.5% 내지 약 50%, 약 0.5% 내지 약 25%, 약 0.5% 내지 약 20%, 약 0.5% 내지 약 10%, 또는 약 5% 내지 약 10% (w/w)으로 존재할 수 있다. 일 구현예에서, 제제는 약 0.5% 내지 약 10% 부하 w/w로 편입된다.
E. 추가의 표적화 모이어티
입자는 콘주게이트의 표적화 모이어티에 추가하여 장기, 조직, 세포 유형, 또는 세포하 구획에 대해 입자를 표적으로 하는 1종 이상의 표적화 모이어티를 함유할 수 있다. 추가의 표적화 모이어티는 입자의 표면, 입자의 내부, 또는 둘 모두 상에 존재할 수 있다. 추가의 표적화 모이어티는 입자의 표면 상에 고정될 수 있고, 예를 들면, 입자 중 폴리머 또는 지질에 공유결합될 수 있다. 일부 구현예에서, 추가의 표적화 모이어티는 양친매성 폴리머 또는 지질에 공유결합되고, 이로써, 표적화 모이어티는 입자의 표면에 배향된다.
IV. 제형
일부 구현예에서, 조성물은 인간, 인간 환자 또는 대상체에게 투여된다. 본 개시내용의 목적상, 어구 "활성 성분"은 일반적으로 본원에서 기재된 바와 같이 전달될 콘주게이트 또는 이 콘주게이트를 포함하는 입자를 의미한다.
본 명세서에서 제공되는 약제학적 조성물의 설명이 인간에게 투여하기에 적합한 약제학적 조성물에 관한 것이지만, 그와 같은 조성물이 일반적으로 임의의 다른 동물, 예를 들면, 비-인간 동물, 예를 들면 비-인간 포유동물에게 투여하기에 적합하다는 것은, 숙련가에 의해 이해될 것이다. 조성물을 다양한 동물에게 투여하기에 적합하도록 하기 위해 인간에게 투여하기에 적합한 약제학적 조성물의 변형은 잘 이해되고, 통상적으로 숙련된 수의과 약리학자는 단지 통상적인, 있다면, 실험과정으로 그와 같은 변형을 설계 및/또는 수행할 수 있다. 약제학적 조성물의 투여가 고려되는 대상체는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 인간 및/또는 다른 영장류; 포유동물 (상업적으로 관련된 포유동물 예컨대 소, 돼지, 말, 양, 고양이, 개, 마우스, 및/또는 랫트 포함); 및/또는 새(상업적으로 관련된 새 예컨대 가금, 닭, 오리, 거위, 및/또는 칠면조 포함).
본 명세서에서 기재된 약제학적 조성물의 제형은 약리학의 분야에서 공지되거나 이후에 개발된 임의의 방법에 의해 제조될 수 있다. 일반적으로, 그와 같은 제조 방법은 활성 성분을 부형제 및/또는 1종 이상의 다른 부속 성분과 결합시키고, 및 그 다음, 필요하면 및/또는 요망된다면, 생성물을 원하는 단일- 또는 다중-용량 단위로 분할, 형성화 및/또는 포장하는 단계를 포함한다.
본 발명에 따른 약제학적 조성물은 벌크로, 단일 단위 용량으로서, 및/또는 복수의 단일 단위 용량으로서, 제조, 포장 및/또는 판매될 수 있다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이, "단위 용량"은 예정된 양의 활성 성분을 포함하는 약제학적 조성물의 별개의 양이다. 활성 성분의 양은 일반적으로 대상체에게 투여되는 활성 성분의 복용량 및/또는 그와 같은 복용량의 편리한 분획 예컨대, 그와 같은 복용량의 2분의 1 또는 3분의 1와 같다.
본 발명에 따른 약제학적 조성물 중 활성 성분, 약제학적으로 허용가능한 부형제, 및/또는 임의의 추가 성분의 상대적인 양은 치료된 대상체의 동일성, 크기, 및/또는 병태에 따라 그리고 추가로 본 조성물이 투여되는 경로에 따라 변할 것이다. 예로써, 본 조성물은 0.1% 내지 100%, 예를 들면,.5 내지 50%, 1-30%, 5-80%, 적어도 80% (w/w) 활성 성분을 포함할 수 있다.
본 발명의 콘주게이트 또는 입자는 하기를 목적으로 1종 이상의 부형제를 사용하여 제형화될 수 있다: (1) 안정성 증가; (2) (예를 들면, 모노말레이미드의 데포 제형으로부터) 지속 또는 지연 방출 허용; (3) 생체분포를 변경함 (예를 들면, 모노말레이미드 화합물을 특정 조직 또는 세포 유형으로 표적화함); (4) 생체내 모노말레이미드 화합물의 방출 프로파일을 변경함. 부형제의 비-제한적인 예는 임의의 및 모든 용매, 분산매, 희석제, 또는 다른 액체 비히클, 분산 또는 서스펜션 조제, 계면 활성제, 등장제, 증점제 또는 유화제, 및 보존제를 포함한다. 본 발명의 부형제는 또한, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 리피도이드, 리포좀, 지질 나노입자, 폴리머, 리포플렉스, 코어-쉘 나노입자, 펩타이드, 단백질, 하이알로니다제, 나노입자 모방체 및 이들의 조합. 따라서, 본 발명의 제형은 1종 이상의 부형제를 포함할 수 있고, 부형제 각각은 모노말레이미드 화합물의 안정성을 함께 증가시키는 양으로 존재한다.
부형제
약제학적 제형은 약제학적으로 허용가능한 부형제를 추가로 포함할 수 있고, 이 부형제는, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 원하는 특정한 복용 형태에 적합하도록 임의의 및 모든 용매, 분산매, 희석제, 또는 다른 액체 비히클, 분산 또는 서스펜션 조제, 계면 활성제, 등장제, 증점제 또는 유화제, 보존제, 고형 결합제, 윤활제 등을 포함한다. Remington's The Science and Practice of Pharmacy, 21st Edition, A. R. Gennaro (Lippincott, Williams & Wilkins, Baltimore, MD, 2006; 이것은 본 명세서에 그 전체가 참고로 편입됨)은 약제학적 조성물을 제형하는데 사용된 다양한 부형제 및 그것의 제조를 위한 공지된 기술을 개시한다. 임의의 종래의 부형제 매질이 예컨대 임의의 요망되지 않는 생물학적 효과를 생성하거나 달리 약제학적 조성물의 임의의 다른 성분(들)과 유해한 방식으로 상용작용하여 물질 또는 그것의 유도체와 양립할 수 없는 것을 제외하고, 그것의 용도는 본 발명의 범위 내에 있는 것으로 고려된다.
일부 구현예에서, 약제학적으로 허용가능한 부형제는 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99%, 또는 100% 순수하다. 일부 구현예에서, 부형제는 인간에서 사용 그리고 수의적 용도로 승인되어 있다. 일부 구현예에서, 부형제는 미국 식품의약품안전청에 의해 승인되어 있다. 일부 구현예에서, 부형제는 약품 등급이다. 일부 구현예에서, 부형제는 미국 약전 (USP), 유럽 약전 (EP), 영국 약전, 및/또는 국제 약전의 표준에 부합한다.
약제학적 조성물의 제조에서 사용된 약제학적으로 허용가능한 부형제는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 불활성 희석제, 분산제 및/또는 과립화제, 계면 활성제 및/또는 유화제, 붕해제, 결합제, 보존제, 완충제, 윤활제, 및/또는 오일. 그와 같은 부형제는 약제학적 조성물 내에 임의로 포함될 수 있다.
예시적인 희석제는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 탈산칼슘, 탄산나트륨, 칼슘 포스페이트, 디칼슘 포스페이트, 황산칼슘, 칼슘 수소 포스페이트, 나트륨 포스페이트 락토오스, 수크로오스, 셀룰로오스, 미세결정성 셀룰로오스, 카올린, 만니톨, 소르비톨, 이노시톨, 염화나트륨, 건조 전분, 옥수수녹말, 분말화된 당, 등, 및/또는 이들의 조합.
예시적인 과립화 및/또는 분산제는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 감자 전분, 옥수수 전분, 타피오카 전분, 나트륨 전분 글라이콜레이트, 점토, 알긴산, 구아르 검, 사이트루스 펄프, 한천, 벤토나이트, 셀룰로오스 및 나무 제품, 천연 스폰지, 양이온교환 수지, 탈산칼슘, 실리케이트, 탄산나트륨, 가교결합된 폴리(비닐-피롤리돈) (크로스포비돈), 나트륨 카복시메틸 전분 (나트륨 전분 글라이콜레이트), 카복시메틸 셀룰로오스, 가교결합된 나트륨 카복시메틸 셀룰로오스 (크로스카르멜로오스), 메틸셀룰로오스, 사전절라틴화된 전분 (전분 1500), 미세결정성 전분, 수불용성 전분, 칼슘 카복시메틸 셀룰로오스, 마그네슘 알루미늄 실리케이트 (VEEGUM®), 나트륨 라우릴 설페이트, 4차 암모늄 화합물, 등, 및/또는 이들의 조합.
예시적인 계면 활성제 및/또는 유화제는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 천연 유화제 (예를 들면 아카시아, 한천, 알긴산, 나트륨 알기네이트, 트라가칸쓰, 콘드룩스, 콜레스테롤, 크산탄, 펙틴, 젤라틴, 계란 노른자, 카세인, 양모 지방, 콜레스테롤, 왁스, 및 레시틴), 콜로이드성 점토 (예를 들면 벤토나이트 [알루미늄 실리케이트] 및 VEEGUM® [마그네슘 알루미늄 실리케이트]), 장쇄 아미노산 유도체, 고분자량 알코올 (예를 들면 스테아릴 알코올, 세틸 알코올, 올레일 알코올, 트리아세틴 모노스테아레이트, 에틸렌 글리콜 디스테아레이트, 글리세릴 모노스테아레이트, 및 프로필렌 글리콜 모노스테아레이트, 폴리비닐 알코올), 카보머 (예를 들면 카복시 폴리메틸렌, 폴리아크릴산, 아크릴산 폴리머, 및 카복시비닐 폴리머), 카라기난, 셀룰로오스 유도체 (예를 들면 카복시메틸셀룰로오스 나트륨, 분말화된 셀룰로오스, 하이드록시메틸 셀룰로오스, 하이드록시프로필 셀룰로오스, 하이드록시프로필 메틸셀룰로오스, 메틸셀룰로오스), 소르비탄 지방산 에스테르 (예를 들면 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노라우레이트 [TWEEN®20], 폴리옥시에틸렌 소르비탄 [TWEENn®60], 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올레에이트 [TWEEN®80], 소르비탄 모노팔미테이트 [SPAN®40], 소르비탄 모노스테아레이트 [SPAN®60], 소르비탄 트리스테아레이트 [SPAN®65], 글리세릴 모노올레에이트, 소르비탄 모노올레에이트 [SPAN®80]), 폴리옥시에틸렌 에스테르 (예를 들면 폴리옥시에틸렌 모노스테아레이트 [MYRJ®45], 폴리옥시에틸렌 수소화된 피마자유, 폴리에톡실레이트화된 피마자유, 폴리옥시메틸렌 스테아레이트, 및 SOLUTOL®), 수크로오스 지방산 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 지방산 에스테르 (예를 들면 CREMOPHOR®), 폴리옥시에틸렌 에테르, (예를 들면 폴리옥시에틸렌 라우릴 에테르 [BRIJ®30]), 폴리(비닐-피롤리돈), 디에틸렌 글리콜 모노라우레이트, 트리에탄올아민 올레이트, 나트륨 올레이트, 칼륨 올레이트, 에틸 올레이트, 올레산, 에틸 라우레이트, 나트륨 라우릴 설페이트, PLUORINC®F 68, Poloxamer®188, 세트리모늄 브로마이드, 세틸피리디늄 클로라이드, 벤즈알코늄 클로라이드, 도쿠세이트 나트륨, 등 및/또는 이들의 조합.
예시적인 결합제는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 전분 (예를 들면 옥수수녹말 및 전분 페이스트); 젤라틴; 당류 (예를 들면 수크로오스, 글루코오스, 덱스트로오스, 덱스트린, 당밀, 락토오스, 락티톨, 만니톨,); 천연 및 합성 검 (예를 들면 아카시아, 나트륨 알기네이트, 뿔가사리의 추출물, 판와르 검, 가티 검, 이사폴 껍질의 점액, 카복시메틸셀룰로오스, 메틸셀룰로오스, 에틸셀룰로오스, 하이드록시에틸셀룰로오스, 하이드록시프로필 셀룰로오스, 하이드록시프로필 메틸셀룰로오스, 미세결정성 셀룰로오스, 셀룰로오스 아세테이트, 폴리(비닐-피롤리돈), 마그네슘 알루미늄 실리케이트 (VEEGUM®), 및 낙엽송 아라보갈탁탄); 알기네이트; 폴리에틸렌 옥사이드; 폴리에틸렌 글리콜; 무기 칼슘 염; 규산; 폴리메타크릴레이트; 왁스; 물; 알코올; 등; 및 이들의 조합.
예시적인 보존제는, 비제한적으로, 하기를 포함할 수 있다: 항산화제, 킬레이트제, 항미생물 보존제, 항진균 보존제, 알코올 보존제, 산성 보존제, 및/또는 다른 보존제. 예시적인 항산화제는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 알파 토코페롤, 아스코르브산, 아코르빌 팔미테이트, 부틸화된 하이드록시아니솔, 부틸화된 하이드록시톨루엔, 모노티오글리세롤, 칼륨 메타바이설파이트, 프로피온산, 프로필 갈레이트, 나트륨 아스코르베이트, 나트륨 바이설파이트, 나트륨 메타바이설파이트, 및/또는 아황산나트륨. 예시적인 킬레이트제는 에틸렌디아민테트라아세트산 (EDTA), 시트르산 1수화물, 디나트륨 에데테이트, 이칼륨 에데테이트, 에데트산, 푸마르산, 말산, 인산, 나트륨 에데테이트, 타르타르산, 및/또는 트리나트륨 에데테이트를 포함한다. 예시적인 항미생물 보존제는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 벤즈알코늄 클로라이드, 벤즈에토늄 클로라이드, 벤질 알코올, 브로노폴, 세트리마이드, 세틸피리디늄 클로라이드, 클로르헥시딘, 클로로부탄올, 클로로크레졸, 클로로자일레놀, 크레졸, 에틸 알코올, 글리세린, 헥세티딘, 이미드우레아, 페놀, 페녹시에탄올, 페닐에틸 알코올, 페닐수은 니트레이트, 프로필렌 글리콜, 및/또는 티메로살. 예시적인 항진균 보존제는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 부틸 파라벤, 메틸 파라벤, 에틸 파라벤, 프로필 파라벤, 벤조산, 하이드록시벤조산, 칼륨 벤조에이트, 칼륨 소르베이트, 나트륨 벤조에이트, 나트륨 프로피오네이트, 및/또는 소르브산. 예시적인 알코올 보존제는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 에탄올, 폴리에틸렌 글리콜, 페놀, 페놀성 화합물, 비스페놀, 클로로부탄올, 하이드록시벤조에이트, 및/또는 페닐에틸 알코올. 예시적인 산성 보존제는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 비타민 A, 비타민 C, 비타민 E, 베타-카로텐, 시트르산, 아세트산, 데하이드로아세트산, 아스코르브산, 소르브산, 및/또는 피트산. 다른 보존제는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 토코페롤, 토코페롤 아세테이트, 데테록심 메실레이트, 세트리마이드, 부틸화된 하이드록시아니솔 (BHA), 부틸화된 하이드록시톨루엔화된 (BHT), 에틸렌디아민, 나트륨 라우릴 설페이트 (SLS), 나트륨 라우릴 에테르 설페이트 (SLES), 나트륨 바이설파이트, 나트륨 메타바이설파이트, 칼륨 설파이트, 칼륨 메타바이설파이트, GLYDANT PLUS®, PHENONIP®, 메틸파라벤, GERMALL®115, GERMABEN®II, NEOLONE™, KATHON™, 및/또는 EUXYL®.
예시적인 완충제는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 시트레이트 완충 용액, 아세테이트 완충 용액, 포스페이트 완충 용액, 염화암모늄, 탈산칼슘, 염화칼슘, 칼슘 시트레이트, 칼슘 글루비오네이트, 칼슘 글루셉테이트, 칼슘 글루코네이트, D-글루콘산, 칼슘 글리세로포스페이트, 칼슘 락테이트, 프로판산, 칼슘 레벌리네이트, 펜탄산, 2염기성 칼슘 포스페이트, 인산, 3염기성 칼슘 포스페이트, 수산화칼슘 포스페이트, 칼륨 아세테이트, 칼륨 클로라이드, 칼륨 글루코네이트, 칼륨 혼합물, 2염기성 인산칼륨, 1염기성 인산칼륨, 인산칼륨 혼합물, 아세트산나트륨, 중탄산나트륨, 염화나트륨, 나트륨 시트레이트, 나트륨 락테이트, 2염기성 나트륨 포스페이트, 1염기성 나트륨 포스페이트, 나트륨 포스페이트 혼합물, 트로메타민, 수산화마그네슘, 알루미늄 하이드록사이드, 알긴산, 발열성물질 제거 물, 등장의 염수, 링거액, 에틸 알코올, 등, 및/또는 이들의 조합.
예시적인 윤활제는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 마그네슘 스테아레이트, 칼슘 스테아레이트, 스테아르산, 실리카, 탈크, 맥아, 글리세릴 베하네이트, 수소화된 식물성 오일, 폴리에틸렌 글리콜, 나트륨 벤조에이트, 아세트산나트륨, 염화나트륨, 류신, 마그네슘 라우릴 설페이트, 나트륨 라우릴 설페이트, 등, 및 이들의 조합.
예시적인 오일은, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 아몬드, 살구 알맹이, 아보카도, 바바수, 버가모트, 까막까치밥나무 종자, 보리지, 향나무속, 카밀레, 카놀라, 캐러웨이, 카르나우바, 캐스터, 신나몬, 코코아 버터, 코코넛, 대구 간, 커피, 옥수수, 면 종자, 에뮤, 유칼립투스, 달?이꽃, 물고기, 아마씨, 게라니올, 박, 포도씨, 헤이즐넛, 히솝, 이소프로필 미리스테이트, 요요바, 쿠쿠이 넛, 라반딘, 라벤다, 레몬, 릿세아 쿠베바, 마카다미아 넛, 아욱, 망고씨, 메도우폼 종자, 밍크, 육두구, 올리브, 오렌지, 오렌지 러피, 야자, 야자핵, 복숭아핵, 땅콩, 양귀비 종자, 호박씨, 평지씨, 쌀겨, 로즈마리, 잇꽃, 백단유, 사스쿠아나, 세이버리, 산자나무, 참께, 시어버터 나무, 실리콘, 대두, 해바라기, 차 나무, 엉겅퀴, 동백, 베티베르, 호두, 및 밀 배아 오일. 예시적인 오일은, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 부틸 스테아레이트, 카프릴산 트리글리세라이드, 카프르산 트리글리세라이드, 사이클로메티콘, 디에틸 세바케이트, 디메티콘 360, 이소프로필 미리스테이트, 광유, 옥틸도데칸올, 올레일 알코올, 실리콘 오일, 및/또는 이들의 조합.
부형제 예컨대 코코아 버터 및 좌약 왁스, 착색제, 코팅제, 감미제, 풍미제, 및/또는 방향제는 제형자의 판단에 따라 조성물 내에 존재할 수 있다.
투여
본 발명의 콘주게이트 또는 입자은 치료적으로 유효한 결과를 얻는 임의의 경로에 의해 투여될 수 있다. 이들은, 비제한적으로 하기를 포함한다: 장의, 위장, 경막외, 경구, 경피, 경막외 (경막주위), 뇌내 (대뇌로), 뇌심실내 (뇌 심실로), 표피 (피부 상에 도포), 진피내, (피부 자체로), 피하 (피부 하), 코 투여 (코를 통해), 정맥내 (정맥에), 동맥내 (동맥에), 근육내 (근육에), 심장내 (심장에), 뼈내 주입 (골수에), 척추강내 (척추관에), 복강내, (복막에 주입 또는 주사), 방광내 주입, 초자체내, (눈을 통해), 해면상내 주사, (음경의 기저부), 질내 투여, 자궁내, 추가의-양막 투여, 경피 (전신 분포를 위해 온전한 피부를 통한 확산), 경점막 (점막을 통해), 취입 (코흡입), 설하, 입술밑, 관장, 안약 (결막 상에서), 또는 귀물약으로. 특정 구현예에서, 조성물은 혈액-뇌 장벽, 혈관 장벽, 또는 다른 상피 장벽를 가로지르는 방식으로 투여될 수 있다.
본 명세서에서 기재된 제형은 그것이 필요한 개체에게 투여하기에 적절한 약제학적 담체 중 유효량의 콘주게이트 또는 입자를 함유한다. 제형은 비경구로 (예를 들면, 주사 또는 주입으로) 투여될 수 있다. 그것의 제형 또는 변화는 하기를 포함하는 임의의 방식으로 투여될 수 있다: 장으로, 국소로 (예를 들면, 눈에), 또는 폐 투여를 통해. 일부 구현예에서 제형은 국소로 투여된다.
A.비경구 제형
입자는 용액, 서스펜션 또는 에멀젼의 형태로 비경구 전달, 예컨대 주사 또는 주입용으로 제형화될 수 있다. 제형은 치료될 장기 또는 조직에 전신으로, 국부적으로 또는 직접적으로 투여될 수 있다.
비경구 제형은 기술을 사용하는 수성 조성물이 당해 기술에서 공지되어 있는 바와 같이 제조될 수 있다. 전형적으로, 그와 같은 조성물은 하기로서 제조될 수 있다: 주사가능 제형, 예를 들면, 용액 또는 서스펜션; 주사 전 재구성 매체의 부가시 용액 또는 서스펜션을 제조하기 위해 사용하는데 적합한 고체 형태; 에멀젼, 예컨대 유중수 (w/o) 에멀젼, 수중유 (o/w) 에멀젼, 및 그것의 마이크로에멀젼, 리포좀, 또는 에멀좀.
담체는 하기 예를 함유하는 용매 또는 분산매일 수 있다: 물, 에탄올, 1종 이상의 폴리올 (예를 들면, 글리세롤, 프로필렌 글리콜, 및 액체 폴리에틸렌 글리콜), 오일, 예컨대 식물성 오일 (예를 들면, 땅콩 오일, 옥수수 오일, 참께 오일, 등), 및 이들의 조합. 적절한 유체성는, 예를 들면, 코팅, 예컨대 레시틴의 사용에 의해, 분산물의 경우에 필요한 입자 크기의 유지에 의해 및/또는 표면활성제의 사용에 의해 유지될 수 있다. 일부 경우에서, 등장제는, 예를 들면, 1종 이상의 당, 염화나트륨, 또는 당해 기술에서 공지된 다른 적합한 제제 내에 포함된다.
입자의 용액 및 분산물은 표면활성제, 분산제, 유화제, pH 변형제, 및 이들의 조합을 비제한적으로 포함하는 1종 이상의 약제학적으로 허용가능한 부형제와 적합하게 혼합된 분산 매체 또는 또 다른 용매 또는 물에서 제조될 수 있다.
적합한 표면활성제는 음이온성, 양이온성, 양쪽성 또는 비이온성 계면 활성제일 수 있다. 적합한 음이온성 표면활성제는, 비제한적으로, 카복실레이트, 설포네이트 및 설페이트 이온을 함유하는 것들을 포함한다. 음이온성 표면활성제의 예는 하기를 포함한다: 장쇄 알킬 설포네이트 및 알킬 아릴 설포네이트의 나트륨, 칼륨, 암모늄 예컨대 나트륨 도데실벤젠 설포네이트; 디알킬 나트륨 설포석시네이트, 예컨대 나트륨 도데실벤젠 설포네이트; 디알킬 나트륨 설포석시네이트, 예컨대 나트륨 비스-(2-에틸티옥실)-설포석시네이트; 및 알킬 설페이트 예컨대 나트륨 라우릴 설페이트. 양이온성 표면활성제는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 4차 암모늄 화합물 예컨대 벤즈알코늄 클로라이드, 벤즈에토늄 클로라이드, 세트리모늄 브로마이드, 스테아릴 디메틸벤질 염화암모늄, 폴리옥시에틸렌 및 코코넛 아민. 비이온성 표면활성제의 예는 하기를 포함한다: 에틸렌 글리콜 모노스테아레이트, 프로필렌 글리콜 미리스테이트, 글리세릴 모노스테아레이트, 글리세릴 스테아레이트, 폴리글리세릴-4-올레에이트, 소르비탄 아실레이트, 수크로오스 아실레이트, PEG-150 라우레이트, PEG-400 모노라우레이트, 폴리옥시에틸렌 모노라우레이트, 폴리소르베이트, 폴리옥시에틸렌 옥틸페닐에티르, PEG-1000 세틸 에테르, 폴리옥시에틸렌 트리데실 에테르, 폴리프로필렌 글리콜 부틸 에테르, Poloxamer® 401, 스테아로일 모노이소프로판올아미드, 및 폴리옥시에틸렌 수소화된 탈로우 아미드. 양쪽성 표면활성제의 예는 나트륨 N-도데실-β-알라닌, 나트륨 N-라우릴-β-이미노디프로피오네이트, 미리스토암포아세테이트, 라우릴 베타인 및 라우릴 설포베타인을 포함한다.
제형은 미생물의 성장을 방지하기 위해 보존제를 함유할 수 있다. 적합한 보존제는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 파라벤, 클로로부탄올, 페놀, 소르브산, 및 티메로살. 제형은 활성제(들) 또는 입자의 분해를 방지하기 위해 항산화제를 또한 함유할 수 있다.
제형은 재구성 시 비경구 투여를 위해 3-8의 pH로 전형적으로 완충된다. 적합한 버퍼는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 인산염 버퍼, 아세테이트 버퍼, 및 시트레이트 버퍼. 10% 수크로오스 또는 5% 덱스트로오스를 사용한다면, 버퍼가 필요하지 않을수 있다.
수용성 폴리머는 비경구 투여용 제형으로서 종종 사용된다. 적합한 수용성 폴리머는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 폴리비닐피롤리돈, 덱스트란, 카복시메틸셀룰로오스, 및 폴리에틸렌 글리콜.
멸균된 주사가능 용액은 적절한 용매 또는 분산매 중 필요한 양의 입자를 상기 열거된 부형제 중 1종 이상과 함께 편입하고, 요구되는 바와 같이, 그 다음 여과된 멸균 여과하여 제조될 수 있다. 일반적으로, 분산물은 다양한 멸균된 입자를, 염기성 분산매 및 상기에서 열거된 것들로부터의 필요한 다른 성분을 함유하는 멸균된 비히클레 편입시켜 제조된다. 멸균된 주사가능 용액의 제조용 멸균된 분말의 경우에, 제조 방법의 예는 그것의 앞서 멸균된-여과된 용액으로부터 입자 플러스 임의의 추가의 원하는 성분의 분말을 얻는 진공-건조 및 냉동건조 기술을 포함한다. 분말는, 그 입자의 본성이 입자의 용해를 증가시킬 수 있는 다공성이 방식으로 제조될 수 있다. 다공성 입자의 제조 방법은 당해 기술에 공지되어 있다.
비경구 투여용 약제학적 제형은 1종 이상의 폴리머-약물 콘주게이트로부터 형성된 입자의 멸균된 수용액 또는 서스펜션의 형태일 수 있다. 허용가능한 용매는, 예를 들면, 물, 링거액, 포스페이트 완충된 염수 (PBS), 및 등장의 염화나트륨 용액을 포함한다. 제형은 또한, 비독성, 비경구로 허용가능한 희석제 또는 용매 예컨대 1,3-부탄디올 중 멸균된 용액, 서스펜션, 또는 에멀젼일 수 있다.
일부 예에서, 제형은 액체 형태로 분포 또는 포장된다. 대안적으로, 비경구 투여용 제형은 예를 들면 적합한 액체 제형의 동결건조에 의해 얻은 고형물로서 포장될 수 있다. 고형물은 투여 전에 적절한 담체 또는 희석제와 함께 재구성될 수 있다.
비경구 투여용 용액, 서스펜션, 또는 에멀젼은 안구 투여에 적합한 pH를 유지하는데 필요한 유효량의 버퍼로 완충될 수 있다. 적합한 버퍼는 당해 분야의 숙련가에 의해 잘 알려져 있고 유용한 버퍼의 일부 예는 아세테이트, 보레이트, 카보네이트, 시트레이트, 및 인산염 버퍼이다.
비경구 투여용 용액, 서스펜션, 또는 에멀젼은 등장의 범위의 제형을 조정하기 위해 1종 이상의 긴장성 제제를 또한 함유할 수 있다. 적합한 긴장성 제제는 당해 기술에서 잘 알려져 있고, 일부 예는 글리세린, 수크로오스, 덱스트로오스, 만니톨, 소르비톨, 염화나트륨, 및 다른 전해질을 포함한다.
비경구 투여용 용액, 서스펜션, 또는 에멀젼은 안과 제제의 박테리아 오염을 방지하기 위해 1종 이상의 보존제를 또한 함유할 수 있다. 적합한 보존제는 당해 기술에 공지되어 있고, 폴리헥사메틸렌바이구아니딘 (PHMB), 벤즈알코늄 클로라이드 (BAK), 안정화된 옥시클로로 복합체 (다르게는 Purite®로 공지됨), 페닐수은 아세테이트, 클로로부탄올, 소르브산, 클로르헥시딘, 벤질 알코올, 파라벤, 티메로살, 및 이들의 혼합물을 포함한다.
비경구 투여용 용액, 서스펜션, 또는 에멀젼은 또한, 공지된 1종 이상의 부형제, 예컨대 분산제, 습윤제, 및 현탁화제를 함유할 수 있다.
B. 점막 국소 제형
입자는 점막 표면에 대한 국소 투여용으로 제형화될 수 있다. 국소 투여용 적합한 복용 형태는 크림, 연고, 고약, 스프레이, 겔, 로션, 에멀젼, 액체, 및 경피 패치를 포함한다. 제형은 경점막, 경상피, 또는 경내피 투여용으로 제형화될 수 있다. 본 조성물은 1종 이상의 화학 침투 증강제, 막 투과성 제제, 막 수송 제제, 완화제, 표면활성제, 안정제, 및 이들의 조합을 함유한다. 일부 구현예에서, 입자는 액체 제형, 예컨대 용액 또는 서스펜션, 및 반-고형 제형, 예컨대 로션 또는 연고, 또는 고형 제형으로서 투여될 수 있다. 일부 구현예에서, 입자는, 점막에, 예컨대 눈 또는 질로 또는 직장으로 용액 및 서스펜션, 예컨대 안약을 포함하는 액체로서 또는 반-고체 제형으로서 제형화된다.
"표면활성제"는 표면 장력을 낮게 함으로써 생성물의 에멀젼화, 발포화, 분산, 퍼짐 및 습윤 특성을 증가시키는 표면-활성제이다. 적합한 비-이온성 표면활성제는 하기를 포함한다: 에멀젼화 왁스, 글리세릴 모노올레에이트, 폴리옥시에틸렌 알킬 에테르, 폴리옥시에틸렌 피마자유 유도체, 폴리소르베이트, 소르비탄 에스테르, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 사이클로덱스트린, 글리세린 모노스테아레이트, 폴록사머, 포비돈 및 이들의 조합. 일 구현예에서, 비-이온성 표면활성제는 스테아릴 알코올이다.
"유화제"는 또 다른 것 중 하나의 액체의 서스펜션을 촉진하고 오일 및 물의 안정한 혼합물, 또는 에멀젼의 형성을 촉진하는 표면 활성 물질이다. 공통의 유화제는 하기이다: 금속 비누, 어떤 동물 및 식물성 오일, 및 다양한 극성 화합물. 적합한 유화제는 하기를 포함한다: 아카시아, 음이온성 에멀젼화 왁스, 칼슘 스테아레이트, 카보머, 세토스테아릴 알코올, 세틸 알코올, 콜레스테롤, 디에탄올아민, 에틸렌 글리콜 팔미토스테아레이트, 글리세린 모노스테아레이트, 글리세릴 모노올레에이트, 하이드록시프로필 셀룰로오스, 하이프로멜로스, 라놀린, 함수, 라놀린 알코올, 레시틴, 중간-사슬 트리글리세라이드, 메틸셀룰로오스, 광유 및 라놀린 알코올, 1염기성 나트륨 포스페이트, 모노에탄올아민, 비이온성 에멀젼화 왁스, 올레산, 폴록사머, 폴록사머, 폴리옥시에틸렌 알킬 에테르, 폴리옥시에틸렌 피마자유 유도체, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 지방산 에스테르, 폴리옥시에틸렌 스테아레이트, 프로필렌 글리콜 알기네이트, 자가에멀젼화 글리세릴 모노스테아레이트, 나트륨 시트레이트 탈수화물, 나트륨 라우릴 설페이트, 소르비탄 에스테르, 스테아르산, 해바라기 오일, 트라가칸쓰, 트리에탄올아민, 크산탄 검 및 이들의 조합. 일 구현예에서, 유화제는 글리세롤 스테아레이트이다.
적합한 클래스의 침투 증강제는 당해 기술에 공지되어 있고 비제한적으로, 하기를 포함한다: 지방 알코올, 지방산 에스테르, 지방산, 지방 알코올 에테르, 아미노산, 인지질, 레시틴, 콜레이트 염, 효소, 아민 및 아미드, 착화제 (리포좀, 사이클로덱스트린, 개질된 셀룰로오스, 및 디이미드), 거대환화합물, 예컨대 매크로사이클릭 락톤, 케톤, 및 무수물 및 사이클릭 우레아, 표면활성제, N-메틸 피롤리돈 및 그것의 유도체, DMSO 및 관련된 화합물, 이온성 화합물, 아존 및 관련된 화합물, 및 용매, 예컨대 알코올, 케톤, 아미드, 폴리올 (예를 들면, 글리콜). 이들 클래스의 예는 당해 기술에 공지되어 있다.
투약
본 발명은 본원에서 기재된 바와 같은 콘주게이트 또는 이 콘주게이트를 함유하는 입자를 그것을 필요로 하는 대상체에게 투여하는 방법을 제공한다. 본원에서 기재된 바와 같은 콘주게이트 또는 이 콘주게이트를 함유하는 입자는 질환, 장애, 및/또는 병태 (예를 들면, 작업 기억 결손과 관련된 질환, 장애, 및/또는 병태)를 예방하거나 치료하거나 영상화하는데 유효한 임의의 양 및 임의의 투여 경로을 사용하여 대상체에게 투여될 수 있다. 필요한 정확한 양은 대상체의 종, 연령, 및 일반적인 병태, 질환의 중증도, 특정한 조성물, 그것의 투여 방식, 그것의 활성 방식, 등에 따라, 대상체 별로 변할 것이다.
본 발명에 따른 조성물은 전형적으로 복용량의 투여 용애성 및 균일성에 대해 투약량 단위 형태로 제형화된다. 그러나, 본 발명의 조성물의 1일 사용량은 건전한 의료 판단의 범위 내에서 주치의에 의해 결정될 수 있는 것으로 이해될 것이다. 임의의 특정 환자에 대한 특정 치료적으로 유효한, 예방적으로 유효한, 또는 적절한 영상화 용량 수준은 하기를 포함하는 다양한 인자에 의존할 것이다: 치료될 장애 및 장애의 중증도; 이용된 특정 화합물의 활성; 이용된 특정 조성물; 환자의 연령, 체중, 일반적인 건강, 성별 및 다이어트; 투여 시간, 투여 경로, 이용된 특정 화합물의 배출 속도; 치료의 지속시간; 이용된 특정 화합물과 함께 동시에 사용된 약물; 및 의술에서 잘 알려진 인자.
일부 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 원하는 치료, 진단, 예방적, 또는 영상화 효과를 얻기 위해, 대상체 체중 / 1일의 약 0.0001 mg/kg 내지 약 100 mg/kg, 약 0.001 mg/kg 내지 약 0.05 mg/kg, 약 0.005 mg/kg 내지 약 0.05 mg/kg, 약 0.001 mg/kg 내지 약 0.005 mg/kg, 약 0.05 mg/kg 내지 약 0.5 mg/kg, 약 0.01 mg/kg 내지 약 50 mg/kg, 약 0.1 mg/kg 내지 약 40 mg/kg, 약 0.5 mg/kg 내지 약 30 mg/kg, 약 0.01 mg/kg 내지 약 10 mg/kg, 약 0.1 mg/kg 내지 약 10 mg/kg, 또는 약 1 mg/kg 내지 약 25 mg/kg를 1회 이상/1일 전달하는데 충분한 복용량 수준으로 투여될 수 있다. 원하는 복용량은 전달된 3 회/1일, 2 회/1일, 1일 1회, 하루 걸러, 이틀 간격으로, 매주, 매 2 주, 매 3 주, 또는 매 4 주 전달될 수 있다. 일부 구현예에서, 원하는 복용량은 다중 투여 (예를 들면, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 또는 그 초과 투여)를 사용하여 전달될 수 있다. 다중 투여가 이용될 때, 분할 투약 레지멘 예컨대 본 명세서에서 기재된 것이 사용될 수 있다.
본 명세서에서 사용된 바와 같이, 및 "분할 용량"은 단일 단위 용량 또는 총 1일 용량의 2회 이상 용량, 예를 들면, 단일 단위 용량의 2회 이상 투여로의 분할이다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 및 "단일 단위 용량"은 1회 용량/한꺼번에/단일 경로/단일 접촉점, 즉, 단일 투여 사건으로 투여된 임의의 치료제의 용량이다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 및 "총 1일 용량"은 24 hr 기간 내에 주어지거나 규정된 양이다. 단일 단위 용량으로서 투여될 수 있다. 일 구현예에서, 본 발명의 모노말레이미드 화합물은 분할 용량으로 대상체에게 투여된다. 모노말레이미드 화합물은 버퍼만에서 또는 본 명세서에서 기재된 제형에서 제형화될 수 있다.
복용 형태
본 명세서에서 기재된 약제학적 조성물은 본 명세서에 기재된 복용 형태, 예컨대 국소, 비강내, 기관내, 또는 주사가능형 (예를 들면, 정맥내, 안구내, 초자체내, 근육내, 심장내, 복강내, 피하)로 제형화될 수 있다.
액체 투약 형태
비경구 투여용 액체 투약 형태는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 약제학적으로 허용가능한 에멀젼, 마이크로에멀젼, 용액, 서스펜션, 시럽, 및/또는 엘릭시르. 활성 성분에 추가하여, 액체 투약 형태는 당해 기술에서 통상적으로사용된 불활성 희석제를 포함할 수 있고, 이 희석제는 비제한적으로, 물 또는 다른 용매, 가용화제 및 유화제 예컨대 에틸 알코올, 이소프로필 알코올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸렌 글리콜, 디메틸포름아미드, 오일 (특히, 목화씨, 땅콩, 옥수수, 세균, 올리브, 캐스터, 및 참께 오일), 글리세롤, 테트라하이드로푸르푸릴 알코올, 폴리에틸렌 글리콜 및 소르비탄의 지방산 에스테르, 및 이들의 혼합물을 포함한다. 비경구 투여용 특정 구현예에서, 조성물은 가용화제 예컨대 CREMOPHOR®, 알코올, 오일, 개질된 오일, 글리콜, 폴리소르베이트, 사이클로덱스트린, 폴리머, 및/또는 이들의 조합과 혼합될 수 있다.
주사가능형
주사가능 제제, 예를 들면, 멸균된 주사가능 수성 또는 지질생산성 서스펜션은 공지된 기술에 따라 제형화될 수 있고, 적합한 분산제, 습윤제, 및/또는 현탁화제를 포함할 수 있다. 멸균된 주사가능 제제는 비독성 비경구로 허용가능한 희석제 및/또는 용매 멸균된 주사가능 용액, 서스펜션, 및/또는 에멀젼, 예를 들면, 1,3-부탄디올 중 용액일 수 있다. 이용될 수 있는 허용가능한 비히클 및 용매 중에서, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 물, 링거액, U.S.P., 및 등장의 염화나트륨 용액. 멸균된, 고정유는 용매 또는 분산매로서 종래에 이용된다. 이러한 목적을 위해 임의의 블렌드 고정유가 이용될 수 있고, 합성 모노- 또는 디글리세라이드를 포함한다. 지방산 예컨대 올레산은 주사제의 제조에서 사용될 수 있다.
주사가능 제형은, 예를 들면, 박테리아-고정 필터를 통한 여과로, 및/또는 사용 전에 멸균수 또는 다른 멸균된 주사가능 매질에서 용해 또는 분산될 수 있는 멸균된 고형 조성물의 형태로 살균제를 편입하여 멸균될 수 있다.
활성 성분의 효과를 연장하기 위해, 피하 또는 근육내 주사로부터 활성 성분의 흡수를 느리게 하는 것이 요망될 수 있다. 이것은 좋지 못한 수용해도를 갖는 결정성 또는 비정질 물질의 액체 서스펜션의 사용에 의해 달성될 수 있다. 모노말레이미드 화합물의 흡수율은 이때 그것의 용해 속도에 의존하고, 이것은 결국, 결정 크기 및 결정 형태에 의존할 수 있다. 대안적으로, 비경구로 투여된 모노말레이미드 화합물의 지연된 흡수는 오일 비히클에서 모노말이미드를 용해 또는 현탁시켜서 달성될 수 있다. 주사가능 데포 형태는 생분해성 폴리머 예컨대 폴리락타이드-폴리글라이콜라이드에서 모노말레이미드 화합물의 마이크로 캡슐 매트릭스를 형성하여 만들어진다. 모노말레이미드 화합물 대 폴리머의 비 및 이용된 특정한 폴리머의 본성에 따라, 모노말레이미드 화합물 방출 속도가 제어될 수 있다. 다른 생분해성 폴리머의 예는, 비제한적으로, 폴리(오르토에스테르) 및 폴리(무수물)을 포함한다. 데포 주사가능 제형은 신체 조직과 양립가능한 리포좀 또는 마이크로에멀젼에서 모노말레이미드 화합물을 포획하여 제조될 수 있다.
폐
폐 전달에 유용한 것으로서 본 명세서에서 기재된 제형은 약제학적 조성물의 비강내 전달을 위해 또한 사용될 수 있다. 비강내 투여에 적합한 또 다른 제형은 활성 성분을 포함하고 약 0.2 um 내지 500 um의 평균 입자를 갖는 거친 분말일 수 있다. 그와 같은 제형은 코담배를 취하는 방식으로, 즉 코에 가깝게 유지된 분말의 용기로부터 콧구멍을 통해 금속 흡입에 의해 투여될 수 있다.
비강 투여에 적합한 제형은, 예를 들면, 약 0.1% (w/w) 만큼 적은 그리고 100% (w/w) 만큼 많은 활성 성분을 포함할 수 있고 본 명세서에서 기재된 추가 성분 중 1종 이상을 포함할 수 있다. 약제학적 조성물은 구강 투여에 적합한 제형으로 제조, 포장 및/또는 시판될 수 있다. 그와 같은 제형은, 예를 들면, 종래의 방법을 사용하여 만들어진 정제 및/또는 로젠지의 형태일 수 있고, 예를 들면, 약 0.1% 내지 20% (w/w) 활성 성분을 함유할 수 있고, 상기 밸런스는 경구 용해성 및/또는 분해성 조성물 및, 임의로, 본 명세서에서 기재된 추가 성분 중 1종 이상을 포함할 수 있다. 대안적으로, 구강 투여에 적합한 제형은 활성 성분을 포함하는 분말 및/또는 에어로졸화된 및/또는 분무화된 용액 및/또는 서스펜션을 포함할 수 있다. 그와 같은 분말화된, 에어로졸화된, 및/또는 에어로졸화된 제형은, 분산될 때, 약 0.1 nM 내지 약 200 nm 범위의 평균 입자 및/또는 액적 크기를 가질 수 있고, 본 명세서에서 기재된 임의의 추가 성분 중 1종 이상을 추가로 포함할 수 있다.
약제의 제형 및/또는 제조에서의 일반적인 고려사항들은, 예를 들면, 아래에서 발견될 수 있다: Remington: The Science and Practice of Pharmacy 21st ed., Lippincott Williams & Wilkins, 2005 (본 명세서에 그 전체가 참고로 편입되어 있음).
코팅물 또는 쉘
고체 투약 형태의 정제, 당의정, 캡슐, 알약, 및 과립은 코팅물 및 쉘 예컨대 장용 코팅물 및 약제학적 제형 기술에서 잘 알려진 다른 코팅물로서 제조될 수 있다. 불투명화제를 임의로 포함할 수 있고 임의로, 지연 방식으로 활성 성분(들)만, 또는 우선적으로, 장관의 특정 부분에서 활성 성분을 방출하는 조성물일 수 있다. 사용될 수 있는 포매 조성물의 예는 폴리머성 물질 및 왁스를 포함한다. 유사한 유형의 고형 조성물은 락토오스 또는 유당 뿐만 아니라 고분자량 폴리에틸렌 글리콜 등과 같은 부형제를 사용하여 연질 및 경질-충전된 젤라틴 캡슐에서 충전제로서 이용될 수 있다.
V. 입자를 제조하는 방법
다양한 구현예에서, 입자를 제조하는 방법은 하기의 단계들을 포함한다: 콘주게이트를 제공하는 단계; 입자를 형성하기 위해 기재 성분 예컨대 PLA-PEG 또는 PLGA-PEG를 제공하는 단계; 유기 용액에서 콘주게이트 및 기재 성분을 조합하여 제1 유기상을 형성하는 단계; 및 제1 유기상을 제1 수용액과 조합하여 제2 상을 형성하는 단계; 제2 상을 에멀젼화하여 에멀젼 상을 형성하는 단계; 및 입자를 회수하는 단계. 다양한 구현예에서, 에멀젼 상은 추가로 균질화된다. 일부 구현예에서, 제2 상은 약 5 내지 약 50% 중량, 예를 들면 약 1 내지 약 40% 고형물, 또는 약 5 내지 약 30% 고형물, 예를 들면 약 5%, 10%, 15%, 및 20%의 콘주게이트 및 기재 성분을 포함한다. 특정 구현예에서, 제2 상은 약 5% 중량의 콘주게이트 및 기재 성분을 포함한다. 다양한 구현예에서, 유기상은 아세토니트릴, 테트라하이드로푸란, 에틸 아세테이트, 이소프로필 알코올, 이소프로필 아세테이트, 디메틸포름아미드, 메틸렌 클로라이드, 디클로로메탄, 클로로포름, 아세톤, 벤질 알코올, TWEEN® 80, SPAN® 80, 또는 이들의 조합을 포함한다. 일부 구현예에서, 유기상은 벤질 알코올, 에틸 아세테이트, 또는 이들의 조합을 포함한다.
다양한 구현예에서, 수용액은 물, 나트륨 콜레이트, 에틸 아세테이트, 또는 벤질 알코올을 포함한다. 다양한 구현예에서, 표면활성제는 제2 상, 제2 상, 또는 둘 모두에 부가된다. 표면활성제는, 일부 예에서, 본 명세서에서 개시된 조성물용 유화제 또는 안정제로서 작용할 수 있다. 적합한 표면활성제는 양이온성 표면활성제, 음이온성 표면활성제, 또는 비이온성 표면활성제일 수 있다. 일부 구현예에서, 본 명세서에서 기재된 조성물을 제조하는데 적합한 표면활성제는 소르비탄 지방산 에스테르, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 지방산 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 스테아레이트를 포함한다. 그와 같은 지방산 에스테르 비이온성 표면활성제의 예는 TWEEN® 80, SPAN® 80, 및 MYJ® 표면활성제(ICI)이다. SPAN® 표면활성제는 C12-C18 소르비탄 모노에스테르를 포함한다. TWEEN® 표면활성제는 폴리(에틸렌 옥사이드) C12-C18 소르비탄 모노에스테르를 포함한다. MYJ® 표면활성제는 폴리(에틸렌 옥사이드) 스테아레이트를 포함한다. 특정 구현예에서, 수용액은 또한, 폴리소르베이트를 포함하는 표면활성제 (예를 들면, 유화제)를 포함한다. 예를 들면, 수용액은 폴리소르베이트 80를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 적합한 표면활성제는 지질-기반 표면활성제를 포함한다. 예를 들면, 본 조성물은 1,2-디헥사노일-sn-글리세로-3-포스포콜린, 1,2-디헵타노일-sn-글리세로-3-포스포콜린, 페길화된 1,2-디스테아로일-sn-글리세로-3-포스포에탄올아민 (PEG5000-DSPE 포함), 페길화된 1,2-디올레오일-sn-글리세로-3-포스포에탄올아민 (1,2-디올레오일-sn-글리세로-3-포스포에탄올아민-N-[메톡시(폴리에틸렌 글리콜)-5000] (암모늄 염) 포함)를 포함할 수 있다.
에멀젼 상을 형성하기 위한 제2 상의 에멀젼화는 1 또는 2개의 에멀젼화 단계로 수행될 수 있다. 예를 들면, 1차 에멀젼가 제조되고, 그 다음 에멀젼화되어 미세 에멀젼을 형성할 수 있다. 1차 에멀젼은, 예를 들면, 단순 혼합, 및 고압 균질기, 프로브 초음파발생장치, 교반 바, 또는 회전자 고정자 균질기를 사용하여 형성될 수 있다. 1차 에멀젼은 예를 들면 프로브 초음파발생장치 또는 고압 균질기의 사용을 통해, 예를 들면 균질기를 통과시켜 미세 에멀젼으로 형성될 수 있다. 예를 들면, 고압 균질기가 사용될 때, 사용된 압력은 약 4000 내지 약 8000 psi, 약 4000 내지 약 5000 psi, 또는 4000 또는 5000 psi일 수 있다.
용매 증발 또는 희석은 용매 완벽한 추출 및 입자의 고형화에 필요할 수 있다. 추출의 동력학 및 더 확장가능한 공정에 대한 더 나은 제어를 위해, 수성 켄칭을통한 용매 희석이 사용될 수 있다. 예를 들면, 에멀젼은 모든 유기 용매를 용해시키는데 충분한 농도로 냉수로 희석하여 켄칭된 상을 형성할 수 있다. 켄칭은 약 5℃ 또는 그 미만의 온도에서 적어도 부분적으로 수행될 수 있다. 예를 들면, 켄칭에서 사용된 물은 실온 미만 (예를 들면 약 0 내지 약 10 ℃, 또는 약 0 내지 약 5 ℃)인 온도일 수 있다.
다양한 구현예에서, 입자는 여과에 의해 회수된다. 예를 들면, 한외여과 막이 사용될 수 있다. 예시적인 여과는 접선 유동 여과 시스템을 사용하여 수행될 수 있다. 예를 들면 용질, 교질입자, 및 유기 용매를 통과시키면서 입자를 유지하기에 적합한 기공 크기를 갖는 막을 사용함으로써, 입자는 선택적으로 분리될 수 있다. 약 300-500 kDa (-5-25 nm)의 분자량 컷-오프를 갖는 예시적인 막이 사용될 수 있다.
다양한 구현예에서, 입자는 일부 예에서, 그것의 유통 기한을 늘리기 위해 냉동건조 또는 동결건조된다. 일부 구현예에서, 조성물은 또한 동결건조보호제를 포함한다. 특정 구현예에서, 동결건조보호제는 당, 및 폴리알코올, 또는 그것의 유도체 로부터 선택된다. 일부 구현예에서, 동결건조보호제는 모노사카라이드, 및 디사카라이드, 또는 이들의 혼합물 로부터 선택된다. 예를 들면, 동결건조보호제는 수크로오스, 락툴로오스, 트레할로오스, 락토오스, 글루코오스, 말토오스, 만니톨, 셀로비오스, 또는 이들의 혼합물일 수 있다.
1종 이상의 콘주게이트를 함유하는 입자를제조하는 방법이 제공된다. 입자는 폴리머성 입자, 지질 입자, 또는 이들의 조합일 수 있다. 본 명세서에서 기재된 다양한 방법은 조정되어 입자의 크기 및 조성을 조절할 수 있고, 예를 들면 일부 방법은 극미립자를 제조하는데 가장 적합하고, 기타는 입자를 제조하는데 더 적합하다. 기재된 특징을 갖는 입자를 제조하는 방법의 선택은 과도한 실험과정 없이 숙련가에 의해 수행될 수 있다.
i. 폴리머성 입자
폴리머성 입자를 제조하는 방법은 당해 기술에 공지되어 있다. 폴리머성 입자는 당해 기술에서 공지되어 있는 임의의 적합한 방법을 사용하여 제조될 수 있다. 공통의 미세캡슐화 기술은, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 분무 건조, 계면 중합, 핫 멜트 캡슐화, 상 분리 캡슐화 (자발적인 에멀젼 미세캡슐화, 용매 증발 미세캡슐화, 및 용매 제거 미세캡슐화), 코아세르베이션, 저온 마이크로구형체 형성, 및 상 역전 나노캡슐화 (PIN). 이들 방법의 간단한 개요는 아래에서 제공된다.
1. 분무 건조
분무 건조 기술을 사용하여 폴리머 입자를형성하는 방법은 아래에서 기재되어 있다: U.S. 특허 번호 6,620,617. 이러한 방법에서, 폴리머는 유기 용매 예컨대 메틸렌 클로라이드 또는 물에서 용해된다. 입자에서 편입될, 공지된 양의 1종 이상의 콘주게이트 또는 추가의 활성제는 (불용성 활성제의 경우에) 현탁되거나 (가용성 활성제의 경우에) 폴리머 용액에서 공-용해된다. 용액 또는 분산은 압축된 가스의 유동에 의해 유도된 미세화 노즐을 통해 펌핑되고, 수득한 에어로졸은 공기의 가열된 사이클론에서 현탁되어, 용매가 미세액적으로부터 증발되도록 하고, 입자를 형성한다. 0.1 내지 10 마이크론 범위의 마이크로구형체/나노구형체는 이러한 방법을 사용하여 수득될 수 있다.
2. 계면 중합
계면 중합이 또한 사용되어 1종 이상의 콘주게이트 및/또는 활성제를 캡슐화할 수 있다. 이러한 방법을 사용하여, 모노머 및 콘주게이트 또는 활성제(들)는 용매에서 용해된다. 제2 모노머는 제1 용매와 불혼화성인 제2 용매 (전형적으로 수성)에서 용해된다. 에멀젼은 제2 용액에서 교반을 통해 제1 용액을 현탁하여 형성된다. 에멀젼이 안정화되면, 개시제가 수성상에 부가되어 에멀젼의 각 액적의 계면에서 계면 중합을 일으킨다.
3. 핫 멜트 미세캡슐화
마이크로구형체는 아래에서 기재된 핫 멜트 미세캡슐화 방법을 사용하여 폴리머 예컨대 폴리에스테르 및 폴리무수물로부터 형성될 수 있다: Mathiowitz 등, Reactive Polymers, 6:275 (1987). 이러한 방법을 이용하는 일부 구현예에서, 3,000 내지 75,000 달톤의 분자량을 갖는 폴리머가 사용된다. 이러한 방법에서, 폴리머는 먼저 융용되고 그 다음 50 마이크론 미만으로 체질된, 편입될 1종 이상의 활성제의 고체 입차와 혼합된다. 혼합물은 비-혼화성 용매 (예컨대 실리콘 오일)에서 현탁되고, 계속되는 교반과 함께, 폴리머의 용융점보다 5℃ 초과로 가열된다. 에멀젼이 안정화되면, 폴리머 입자가 고형화될 때까지 냉각된다. 수득한 마이크로구형체는 석유 에테르에 의한 데칸트로 세정하여 자유 유동 분말을 생성한다.
4. 상 분리 미세캡슐화
상 분리 미세캡슐화 기술에서, 폴리머 용액은, 임의로 캡슐화될 1종 이상의 활성제의 존재에서 교반된다. 교반을 통해 물질을 계속해서 균일하게 현탁시키는 동안에, 폴리머용 비용매는 용액에 서서히 부가되어 폴리머의 용해도를 감소시킨다. 용매 및 비용매 중 폴리머의 용해도에 따라, 폴리머는 침전하거나 상은 폴리머 풍부 및 폴리머 좋지 못한 상으로 분리된다. 적절한 조건 하에서, 폴리머 풍부 상 중 폴리머는 연속상과 함께 계면으로 이동할 것이고, 외부 폴리머 쉘과 함께 액적으로 활성제(들)를 캡슐화한다.
a. 자발적인 에멀젼 미세캡슐화
자발적인 에멀젼화는 온도 변화, 용매 증발, 또는 화학 가교결합 제제의 부가에 의해 상기에서 형성된 에멀젼화된 액체 폴리머 액적을 고화시키는 것을 수반한다. 캡슐화제의 물리적 및 화학적 특성, 뿐만 아니라 발생기 입자에 임의로 편입된 1종 이상의 활성제의 특성은, 적합한 캡슐화 방법을 지시한다. 인자 예컨대 소수성, 분자량, 화학 안정성, 및 열적 안정성은 캡슐화에 영향을 미친다.
b. 용매 증발 미세캡슐화
용매 증발 기술을 사용하여 마이크로구형체를 형성하는 방법은 아래에서 기재되어 있다: Mathiowitz 등, J. Scanning Microscopy, 4:329 (1990); Beck 등, Fertil. Steril., 31:545 (1979); Beck 등, Am. J. Obstet. Gynecol. 135(3) (1979); Benita 등, J. Pharm. Sci., 73:1721 (1984); 및 U.S. 특허 번호 3,960,757. 폴리머는 휘발성 유기 용매, 예컨대 메틸렌 클로라이드에서 용해된다. 편입될 1종 이상의 활성제는 임의로 용액에 부가되고, 혼합물은 계면 활성제 예컨대 폴리(비닐 알코올)을 함유하는 수용액에서 현탁된다. 수득한 에멀젼은, 대부분의 유기 용매가 증발될 때까지 교반되고, 이로써 고체 극미립자/나노입자가 남는다. 이러한 방법은 상대적으로 안정한 폴리머 예컨대 폴리에스테르 및 폴리스티렌에 대해 유용하다.
c. 용매 제거 미세캡슐화
용매 제거 미세캡슐화 기술는 폴리무수물에 대해 주로 설계되고 예를 들면, WO 93/21906에서 기재되어 있다. 이러한 방법에서, 편입될 물질은 분산되거나 휘발성 유기 용매, 예컨대 메틸렌 클로라이드 중 선택된 폴리머의 용액에서 용해된다. 이러한 혼합물은 유기 오일, 예컨대 실리콘 오일에서 교반에 의해 현탁되어, 에멀젼을 형성한다. 1 내지 300 마이크론 범위인 마이크로구형체는 이러한 절차에 의해 수득될 수 있다. 마이크로구형체에 편입될 수 있는 물질은 의약품, 살충제, 영양소, 조영제, 및 금속 화합물을 포함한다.
5. 코아세르베이션
코아세르베이션 기술을 사용하는 다양한 물질의 캡슐화 절차는 아래 예의 당해 기술에 공지되어 있다: GB-B-929 406; GB-B-929 40 1; 및 U.S. 특허 번호 3,266,987, 4,794,000, 및 4,460,563. 코아세르베이션은 거대분자 용액의 2종의 불혼화성 액체상으로의 분리를 수반한다. 단상은 조밀한 코아세트베이트 상이고, 이 상은 고농도의 폴리머 캡슐화제 (및 임의로 1종 이상의 활성제)를 함유하고, 한편 제2 상은 저농도의 폴리머를 함유한다. 조밀한 코아세르베이트 상 내에, 폴리머 캡슐화제를 나노규모 또는 미소규모 액적을 형성한다. 코아세르베이션은 온도 변화, 비-용매의 부가 또는 마이크로-염 (간단한 코아세르베이션)의 부가에 의해, 또는 또 다른 폴리머의 부가에 의해 유도됨으로써, 혼성중합체 복합체 (복합체 코아세르베이션)를 형성한다.
6. 마이크로구형체의 저온 캐스팅
조절 방출 입자의 초저온 캐스팅 방법은 하기에서 기재되어 있다: U.S. 특허 번호 5,019,400. 이러한 방법에서, 폴리머는, 임의로 1종 이상의 용해된 또는 분산된 활성제와 함께 용매에서 용해된다. 그 다음 혼합물은, 폴리머 액적을 냉동시키는 폴리머 물질 용액의 빙점 미만의 온도에서 애체 비용매를 함유하는 용기에 분무된다. 폴리머용 액적 및 비용매는 가온됨에 따라, 액적 중 용매는 해동되고 비용매로 추출되어, 마이크로구형체가 경화된다.
7. 상 역전 나노캡슐화 (PIN)
입자는 또한 상 역전 나노캡슐화 (PIN) 방법을 사용하여 형성될 수 있고, 여기서 폴리머는 "양호한" 용매에서 용해되고, 편입될 물질, 예컨대 약물의 미세 입자는 폴리머 용액에서 혼합 또는 용해되고, 및 혼합물은 폴리머용 강한 비용매에 부어서, 호의적인 조건 하에서, 폴리머성 마이크로구형체를 동시에 생성하고, 상기 폴리머는 입자로 코팅되거나 입자는 폴리머에서 분산된다. 참고, 예를 들면, U.S. 특허 번호 6,143,211. 상기 방법은, 예를 들면, 약 100 나노미터 내지 약 10 마이크론을 포함하는 광범위한 크기로 나노입자 및 극미립자의 단분산 집단을 생성하도록 사용될 수 있다.
유익하게는, 에멀젼은 침전 전에 형성될 필요는 없다. 상기 공정이 사용되어 마이크로구형체를 열가소성 폴리머로부터 형성할 수 있다.
8. 에멀젼 방법
일부 구현예에서, 입자는 에멀젼 용매 증발 방법을 사용하여 제조된다. 예를 들면, 폴리머성 물질은 물 불혼화성 유기 용매에서 용해되고 약물 용액 또는 약물 용액의 조합물과 혼합된다. 일부 구현예에서 캡슐화될 치료제, 예방제, 또는 진단제의 용액은 폴리머 용액과 혼합된다. 폴리머는, 비제한적으로, 하기 중 1종 이상일 수 있다: PLA, PGA, PCL, 그것의 코폴리머, 폴리아크릴레이트, 상기 언급된 페길화된 폴리머. 약물 분자는 상기에서 기재된 바와 같은 1종 이상의 콘주게이트 및 1종 이상의 추가의 활성제를 포함할 수 있다. 물 불혼화성 유기 용매는, 비제한적으로, 하기 중 1종 이상일 수 있다: 클로로포름, 디클로로메탄, 및 아실 아세테이트. 약물은, 비제한적으로, 하기 중 1종 이상에서 용해될 수 있다: 아세톤, 에탄올, 메탄올, 이소프로필 알코올, 아세토니트릴 및 디메틸 설폭사이드 (DMSO).
수용액은 수득한 폴리머 용액에 부가되어 에멀젼화로 에멀젼 용액을 생성한다. 에멀젼화 기술은, 비제한적으로, 프로브 초음파처리 또는 균질기를 통한 균질화일 수 있다.
9. 나노침전
또 다른 구현예에서, 나노입자를 함유하는 콘주게이트는 나노침전 방법 또는 미세유체 디바이스를 사용하여 제조된다. 폴리머성 물질을 함유하는 콘주게이트는 추가의 폴리머를 임의로 함유하는 수혼화성 유기 용매에서 약물 또는 약물 조합체와 혼합된다. 추가의 폴리머는, 비제한적으로, 하기 중 1종 이상일 수 있다: PLA, PGA, PCL, 그것의 코폴리머, 폴리아크릴레이트, 상기 언급된 페길화된 폴리머. 수혼화성 유기 용매는, 비제한적으로, 하기 중 1종 이상일 수 있다: 아세톤, 에탄올, 메탄올, 이소프로필 알코올, 아세토니트릴 및 디메틸 설폭사이드 (DMSO). 그 다음, 수득한 혼합물 용액은 폴리머 비-용매, 예컨대 an 수용액에 부가되어, 나노입자 용액을 얻는다.
10. 미세유체공학
미세유체공학을 사용하여 입자를 제조하는 방법은 당해 기술에 공지되어 있다. 적합한 방법은 아래에서 기재된 것을 포함한다: U.S. 특허 출원 공개 번호 2010/0022680 A1. 일반적으로, 미세유체 디바이스는 혼합 장치로 수렴되는 적어도 2개의 채널을 포함한다. 채널은 전형적으로 폴리머 표면의 리쏘그래피, 에칭, 엠보싱, 또는 성형에 의해 형성된다. 유체의 공급원은 각 채널에 부착되고, 압력의 공급원에의 적용은 채널에서 유체의 유동을 야기한다. 압력은 주사기, 및 펌프, 및/또는 중력에 의해 적용될 수 있다. 폴리머, 표적화 모이어티, 지질, 약물, 적재물 등을 갖는 용액의 유입 스트림은 수렴 및 혼합되고, 수득한 혼합물은 폴리머 비-용매 용액와 조합되어 표면 상에 원하는 크기 및 밀도의 모이어티를 갖는 입자를 형성한다. 유입구 채널의 압력 및 유속 및 유체 공급원의 본성 및 조성을 변화시켜서 재생가능한 크기 및 구조를 갖는 입자가 생성될 수 있다.
ii. 지질 입자
지질 입자를 제조하는 방법은 당해 기술에 공지되어 있다. 지질 입자는 당해 기술에서 공지되어 있는 임의의 적합한 방법을 사용하여 제조된 지질 교질입자, 리포좀, 또는 고형 지질 입자일 수 있다. 활성제를 캡슐화하는 생성된 지질 입자에 대한 공통의 기술은, 비제한적으로 고압 균질화 기술, 초임계 유체 방법, 에멀젼 방법, 용매 확산 방법, 및 분무 건조를 포함한다. 이들 방법의 간단한 개요는 아래에서 제공된다.
1. 고압 균질화 (HPH) 방법
고압 균질화는, 지질 교질입자, 리포좀, 및 고형 지질 입자를 포함하는 좁은 크기 분포의 더 작은 지질 입자의 생산에 사용되는 신뢰할 수 있는 및 강력한 기술이다. 고압 균질기는 좁은 갭 (몇 마이크론의 범위에서) 좁은 갭을 통해 고압 (100-2000 bar)으로 액체를 밀어낸다. 유체는 실온에서 액체인 지질 또는 실온에서 고체인 지질의 용융물을 함유할 수 있다. 유체는 매우 짧은 거리에서 매우 높은 속도 (1000 Km/h 초과)로 가속된다. 이것은 입자를 파괴하는 높은 전단 응력 및 캐비테이션 력을 생성하며, 일반적으로 서브마이크론 범위까지 내려간다. 일반적으로 5-10% 지질 함량이 사용되지만, 최대 40% 지질 함량이 또한 조사되었다.
HPH의 2가지 접근법은 고온 균질화 및 저온 균질화, 지질 용액 또는 용융물의 벌크에서 약물을 혼합하는 동일한 개념으로 작동한다.
a. 고온 균질화:
고온 균질화는 지질의 용융점 초과의 온도에서 수행되고 따라서 에멀젼의 균질화로서 간주될 수 있다. 약물 부하 지질 용융 및 수성 유화제 상의 전-에멀젼은 고-전단 혼합으로 수득된다. 전-에멀젼의 HPH는 지질의 용융점 초과의 온도에서 수행된다. 온도, 압력, 및 사이클의 수를 포함하는 수많은 파라미터는, 원하는 크기를 갖는 지질 입자를 생성하도록 조정될 수 있다. 일반적으로, 더 높은 온도는 내부 상의 감소된 점도로 인해 더 작은 입자 크기를 야기한다. 그러나, 고온은 약물 및 담체의 분해 속도를 증가시킨다. 균질화 압력 또는 사이클 수의 증가는 종종 입자의 높은 운동 에너지로 인해 입자크기의 증가를 야기한다.
b. 저온 균질화
저온 균질화는 고온 균질화에 대한 대안으로서 개발되었다 저온 균질화는 문제 예컨대 온도-유도된 약물 분해 또는 균질화 동안 수성상으로의 약물 분포를 겪지 않는다. 저온 균질화는 고형 지질 입자에 특히 유용하지만, 약간의 변형이 적용되어 리포좀 및 지질 교질입자를 생성할 수 있다. 이러한 기술에서 지질 용융물을 함유하는 냉각되고, 고형 지질은o 지질 극미립자로 분쇄되고 이들 지질 극미립자는 차가운 표면활성제 용액에서 분산되어, 전-서스펜션을 얻는다. 전-서스펜션은 실온 이하에서 균질화되고, 상기 중력은 지질 극미립자를 고형 지질 나노입자로 직접적으로 분쇄할만큼 충분히 강하다.
2. 초음파처리/고속 균질화 방법
지질 교질입자, 리포좀, 및 고형 지질 입자를 포함하는 지질 입자는, 초음파처리/고속 균질화에 의해 제조될 수 있다. 초음파처리 및 고속 균질화의 조합은 더 작은 지질 입자의 생산에 특히 유용하다. 리포좀은 이러한 과정에 의해, 10 nm 내지 200nm, 예를 들면, 50 nm 내지 100 nm의 크기 범위로 형성된다.
3. 용매 증발 방법
지질 입자는 용매 증발 접근법에 의해 제조될 수 있다. 친유성 물질은 수성상에서 에멀젼화된 물-불혼화성 유기 용매 (예를 들면 사이클로헥산)에서 용해된다. 용매의 증발시, 입자 분산은 수성 매질에서 지질의 침전에 의해 형성된다. 용매의 파라미터 예컨대 온도, 압력, 선택은 입자 크기 및 분포를 조절하기 위해 사용될 수 있다. 용매 증발 속도는 증가된/감압 또는 증가된/감소된 온도를 통해 조정될 수 있다.
4. 용매 에멀젼화-확산 방법
지질 입자는 용매 에멀젼화-확산 방법에 의해 제조될 수 있다. 지질은 먼저 유기상, 예컨대 에탄올 및 아세톤에서 용해된다. 산성 수성상은 지질 코아세르베이션을 유도하는 제타 포텐셜을 조정하기 위해 사용된다. 연속 유동 방식은 물 및 알코올의 연속 확산을 허용하는데, 이것은 열역학적 불안정을 야기하고 리포좀을 산출하는 지질 용해도를 감소시킨다.
5. 초임계 유체 방법
리포좀 및 고형 지질 입자를 포함하는 지질 입자는 초임계 유체 방법으로부터 제조될 수 있다. 초임계 유체 접근법은 다른 제조 방법에서 사용된 유기 용매를 대체하거나 그 양을 감소시키는 이점을 갖는다. 지질, 캡슐화될 활성제, 및 부형제는 초임계 용매에서 고압에서 용매화될 수 있다. 초임계 용매는 가장 통상적으로 CO2이지만, 다른 초임계 용매는 당해 기술에 공지되어 있다. 지질의 용매도를 증가시키기 위해, 소량의 보조용매가 사용될 수 있다. 에탄올은 공통의 보조용매이지만, 제형에 안정한 것으로 간주되는 다른 작은 유기 용매가 사용될 수 있다. 지질 입자, 지질 교질입자, 리포좀, 또는 고형 지질 입자는 초임계 용액의 팽창에 의해 또는 주사로 비-용매 수성상으로 수득될 수 있다. 입자 형성 및 크기 초임계 용매, 보조용매, 비-용매, 온도, 압력, 등을 조정하여 조절될 수 있다
6. 마이크로에멀젼 기반 방법
지질 입자를 제조하는 마이크로에멀젼 기반 방법이 당해 기술에 공지되어 있다. 이들 방법은 다중상, 보통 2-상, 시스템의 희석을 기반으로 한다. 지질 입자의 생산에 대한 에멀젼 방법은 일반적으로 소량의 수성 매질의 더 큰 용적의 지질 함유 불혼화성 유기 용액에의 부가를 통한 유중수 에멀젼의 형성을 수반한다. 혼합물은 진탕되어 유기 용매 전체에 작인 액적으로서 분산시키고 지질은 유기상과 수성상 사이의 경게에서 단일층에 자체가 정렬한다. 액적의 크기는 존재하는 지질의 압력, 온도, 적용된 진탕 및 양에 의해 조절된다.
유중수 에멀젼은 이중 에멀젼의 형성을 통해 리포좀 서스펜션으로 전환될 수 있다. 이중 에멀젼에서, 물 방울을 함유하는 유기 용액은 큰 용적의 수성 매질에 부가되고, 진탕되어, 수중유중 수 에멀젼을 생산한다. 형성된 지질 입자의 크기 및 유형은 지질의 선택 및 양, 온도, 압력, 공-표면활성제, 용매, 등에 의해 제어될 수 있다.
7. 분무 건조 방법
폴리머성 입자를 제조하는 상기에서 기재된 것들과 유사한 건조 방법은 고형 지질 입자를 만들기 위해 이용될 수 있다. 전형적으로, 이러한 방법은 70oC 초과의 용융점을 갖는 지질과 함께 사용될 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 콘주게이트는 물 에멀젼 방법에서 단일 오일을 사용하여 폴리머성 입자 내에 캡슐화될 수 있다. 비제한적인 예로서, 콘주게이트 및 적합한 폴리머 또는 블록 코폴리머 또는 폴리머/블록 코폴리머의 혼합물은, 유기 용매 예컨대, 비제한적으로, 디클로로메탄 (DCM), 에틸 아세테이트 (EtAc) 또는 클로로포름에서 용해되어 오일상을 형성한다. 보조용매 예컨대, 비제한적으로, 디메틸 포름아미드 (DMF), 아세토니트릴 (CAN) 또는 벤질 알코올 (BA)가 사용되어 입자의 크기를 조절하고/거나 콘주게이트를 용해시킬 수 있다. 제형에 사용된 폴리머는, 비제한적으로, PLA97-b-PEG5, PLA35-b-PEG5 및 PLA16-b-PEG5 코폴리머를 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 입자 제형은 본 발명의 콘주게이트의 친유성을 변화시켜서 제조될 수 있다. 친유성은 상이한 반대이온과의 콘주게이트의 소수성 이온-쌍 또는 소수성 이온-짝짓기 (HIP)를 사용하여 변할 수 있다. HIP는 본 발명의 콘주게이트의 용해도를 변화시킨다. 수성 용해도는 떨어질 수 있고, 유기상 중 용해도는 증가할 수 있다.
임의의 적합한 제제는 본 발명의 콘주게이트와의 HIP 복합체를 형성하기 위해 반대이온을 제공하도록 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, HIP 복합체는 입자의 제형 전에 형성될 수 있다.
VI. 콘주게이트 및 입자를 사용하는 방법
본원에서 기재된 바와 같은 콘주게이트 또는 입자는, 적절한 경우 임의의 과증식성 질환, 대사성 질환, 감염성 질환, 또는 암을 치료하기 위해 투여될 수 있다. 제형은 면역화를 위해 사용될 수 있다. 제형은 주사로, 경구로, 또는 국소로, 전형적으로 점막 표면에 (폐, 코, 경구, 구강, 설하, 질로, 직장으로) 또는 눈에 (안구내로 또는 경안구로) 투여될 수 있다.
다양한 구현예에서, 암이 있는 대상체의 치료 방법이 제공되고, 상기 방법은 치료적으로-유효량의 본원에서 기재된 바와 같은 콘주게이트 또는 입자를, 암을 가지고 있거나, 암을 가지고 있는 것으로 의심되거나 암에 대한 소인을 가지고 있는 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 본 발명에 따르면, 암은 조절되지 않는 세포 증식, 예를 들면, 과증식을 특징으로 하는 임의의 질환 또는 병을 포함한다. 암은 종양, 예를 들면, 고형 종양 또는 임의의 신생물을 특징으로 할 수 있다.
일부 구현예에서, 대상체는 콘주게이트 또는 입자에 의한 치료에 대해 다르게는 징후가 없을 수 있다. 일부 구현예에서, 본 방법은 암 세포의 사용을 포함하고, 이 세포는 비제한적으로 포유동물 암 세포를 포함한다. 일부 예에서, 포유동물 암 세포는 인간 암 세포이다.
일부 구현예에서, 본 교시의 콘주게이트 또는 입자는 암 및/또는 종양 성장을 억제하는 것으로 발견되었다. 또한 세포 증식, 침습력, 및/또는 전이를 감소시킬 수 있고, 그렇게 함으로써 암의 치료에서 유용하게 된다.
일부 구현예에서, 본 교시의 콘주게이트 또는 입자는 종양 또는 암의 성장을 예방하고/거나 종양 또는 암의 전이의 예방하기 위해 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 본 교시의 조성물은 암을 수축시키거나 파괴하기 위해 사용될 수 있다.
일부 구현예에서, 암 세포의 증식을 억제하는데 유용한 콘주게이트 또는 입자가 본 명세서에서 제공된다. 일부 구현예에서, 세포성 증식을 억제하고, 예를 들면, 세포성 증식의 속도를 억제하고, 세포성 증식을 예방하고/거나 세포사를 유도하는데 유용한 콘주게이트 또는 입자가 본 명세서에서 제공된다. 일반적으로, 본원에서 기재된 바와 같은 콘주게이트 또는 입자는 암 세포의 세포성 증식을 억제할 수 있거나 둘 모두는 암 세포의 증식을 억제하거나 암 세포의 세포사를 유도한다.
본 교시의 방법에 의해 치료가능한 암은 일반적으로 포유동물에서 생긴다. 포유동물은, 예를 들면, 인간, 비-인간 영장류, 개, 고양이, 랫트, 마우스, 토끼, 흰담비, 기니아 피그 말, 돼지, 양, 염소, 및 소를 포함한다. 다양한 구현예에서, 상기 암은 폐암, 유방암, 예를 들면, 돌연변이체 BRCA1 및/또는 돌연변이체 BRCA2 유방암, 비-BRCA-관련된 유방암, 결장직장암, 난소암, 췌장암, 결장직장암, 방광암, 전립선암, 자궁경부암, 신장 암, 백혈병, 중추신경계 암, 골수종, 및 흑색종이다. 일부 구현예에서, 상기 암은 폐암이다. 특정 구현예에서, 상기 암은 인간 폐 암종, 난소암, 췌장암 또는 결장직장암이다.
본원에서 기재된 바와 같은 콘주게이트 또는 입자 또는 본원에서 기재된 바와 같은 콘주게이트 또는 입자를 함유하는 제형은 치료제, 예방제, 또는 진단제의 개체 또는 필요로 하는 환자에의 선택적 조직 전달을 위해 사용될 수 있다. 투약량 요법은 조정되어 최적의 원하는 반응 (예를 들면, 치료 또는 예방 반응)을 제공할 수 있다. 예를 들면, 단일 볼러스가 투여될 수 있고, 몇 개의 분할 용량은 투여된 경시적으로 투여될 수 있거나 용량은치료적 상황의 긴급에 의해 지적된 바와 같이 비례하여 감소 또는 증가될 수 있다. 본 명세서에서 사용된 바와 같은 투약량 단위 형태는 치료될 포유동물 대상체에 대한 일원화된 투약량으로서 적합한 물리적으로 별개의 단위를 의미하고; 각 단위는 원하는 치료제를 생산하기 위해 계산된 예정된 양의 활성 화합물을 함유한다.
다양한 구현예에서, 입자 내에 함유된 콘주게이트는 제어된 방식으로 방출된다. 방출은 시험관내 또는 생체내에서 일 수 있다. 예를 들면, 입자에 대해 아래에서 명시된 것을 포함하는 어떤 조건 하에서 방출 시험이 수행될 수 있다: U.S. Pharmacopeia and variations thereof.
다양한 구현예에서, 입자 내에 함유된 콘주게이트의 약 90% 미만, 약 80% 미만, 약 70% 미만, 약 60%, 약 50% 미만, 미만 약 40% 미만, 약 30% 미만, 약 20% 미만은, 입자가 방출 시험의 조건에 노출된 후 제1 시간 내에 방출된다. 일부 구현예에서, 입자 내에 함유된 콘주게이트의 약 90% 미만, 약 80% 미만, 약 70% 미만, 약 60% 미만, 또는 약 50% 미만은, 입자가 방출 시험의 조건에 노출된 후 제1 시간 내에 방출된다. 특정 구현예에서, 입자 내에 함유된 콘주게이트의 약 50% 미만은, 입자가 방출 시험의 조건에 노출된 후 제1 시간 내에 방출된다.
생체내에서 방출되는 콘주게이트에 대해, 예를 들면, 대상체에게 투여된 입자 내에 함유된 콘주게이트는 대상체의 신체로부터 보호될 수 있고, 신체는 콘주게이트가 입자로부터 방출될 때까지 콘주게이트로부터 또한 단리될 수 있다.
따라서, 일부 구현예에서, 콘주게이트는, 입자가 대상체의 신체에 전달되기까지 입자 내에 실질적으로 함유될 수 있다. 예를 들면, 총 콘주게이트의 약 90% 미만, 약 80% 미만, 약 70% 미만, 약 60%, 약 50% 미만, 미만 약 40% 미만, 약 30% 미만, 약 20% 미만, 약 15% 미만, 약 10% 미만, 약 5% 미만, 또는 약 1% 미만이 대상체의 신체, 예를 들면, 치료 부위에 전달되기 전에 입자로부터 방출된다. 일부 구현예에서, 콘주게이트는 장시간에 걸쳐 또는 버스트에 의해 방출될 수 있다 (예를 들면, 콘주게이트의 양은 짧은 기간 내에, 그 다음 콘주게이트가 실질적으로 방출되지 않는 기간 내에 방출된다). 예를 들면, 콘주게이트는 6 시간, 12 시간, 24 시간, 또는 48 시간에 걸쳐 방출될 수 있다. 특정 구현예에서, 콘주게이트는 1 주 또는 1 개월에 걸쳐 방출된다.
VII. 키트 및 디바이스
본 발명은 본 발명의 방법을 편리하게 및/또는 효과적으로 수행하기 위해 다양한 키드 및 디바이스를 제공한다. 전형적으로 키트는, 사용자가 대상체(들)의 다중 치료를 수행하고/거나 다중 실험을 수행하도록 하기 위해 성분의 충분한 양 및/또는 수를 포함할 것이다.
일 구현예에서, 본 발명은 시험관내 또는 생체내 종양 세포 성장을 억제하는 키트를 제공하고, 상기 키트는 본 발명의 콘주게이트 및/또는 입자 또는 본 발명의 콘주게이트 및/또는 입자? 조합을, 임의로 임의의 다른 활성제와 함께 포함한다.
본 키트는 제형 조성물을 형성하기 위해 패키징 및 설명서 및/또는 전달 제제를 추가로 포함한다. 전달 제제는 염수, 및 완충된 용액, 또는 본 명세서에서 개시된 임의의 전달 제제를 포함할 수 있다. 각 성분의 양은 일치된, 재생가능한 고 농도 염수 또는 간단한 버퍼 제형되도록 변할 수 있다. 성분은 일정 기간에 걸쳐 및/또는 다양한 조건 하에서 완충 용액에서 콘주게이트 및/또는 입자의 안정성을 증가시키기 위해 또한 변할 수 있다.
본 발명은 본 발명의 콘주게이트 및/또는 입자를 편입할 수 있는 디바이스를 제공한다. 이들 디바이스는 그것을 필요로 하는 대상체, 예컨대 인간 환자에 즉시 전달되도록 이용가능한 안정한 제형 내에 함유된다. 일부 구현예에서, 대상체는 암을 가지고 있다.
디바이스의 비-제한적인 예는 펌프, 및 카테터, 및 바늘, 및 경피 패치, 및 가압된 후각 전달 장치, 이온침투요법 디바이스, 다중-층상 미세유체 디바이스를 포함한다. 디바이스은 단일, 다중- 또는 분할-투약 레지멘에 따라 본 발명의 콘주게이트 및/또는 입자를 전달하기 위해 이용될 수 있다. 디바이스는 생물학적 조직을 가로 질로, 진피내, 피하로, 또는 근육내로 본 발명의 콘주게이트 및/또는 입자를 전달하기 위해 이용될 수 있다.
하기 예는 본 발명을 비제한적으로 설명하는 것으로 의되는 것으로 인정될 것이다. 이전의 설명 및 실시예의 다양한 다른 실시예 및 변형은 본 발명의 사상 및 범위를 벗어나지 않으면서 개시내용을 읽은 후 당해분야의 숙련가에게 분명할 것이고, 모든 그와 같은 실시예 또는 변형은 첨부된 청구항들의 범위 내에 포함되는 것으로 의도된다. 본 명세서에서 모든 공보 및 특허는 그 전체가 참고로 본 명세서에서 편입되어 있다.
실시예
실시예 A: HPLC 분석적 방법: C18 역상 HPLC (방법 1)에 의한 생성물의 분석
본 명세서에서 기재된 화합물의 HPLC 분석은 하기 상에서 수행되었다: Zorbax Eclipse XDB-C18 역상 칼럼 (4.6 x 100 mm, 3.5 μm, Agilent PN: 961967-902) (상기 칼럼은 물 + 0.1% TFA (용매 A) 및 아세토니트릴 + 0.1% TFA (용매 B)로 구성된 이동상을 가짐, 1.5 mL/min의 유속 및 35 ℃의 칼럼 온도에서). 주입 용량은 10μL이었고 분석물은 220 및 254 nm에서 UV를 사용하여 검출되었다. 구배는 표 5에서 보여진다.
표 5: 구배
Figure 112017009030734-pct00052
실시예 1: 콘주게이트 1의 합성
Figure 112017009030734-pct00053
디클로로메탄 (48 mL) 중 카바지탁셀 (2.00 g, 2.40 mmol) 및 2-(2-피리디닐디티오)에탄올 p-니트로페닐 카보네이트 (915 mg, 2.60 mmol)의 용액에 DMAP (439 mg, 3.60 mmol)을 부가했다. 용액을 실온에서 밤새 교반하고, 그 다음 0.1N HCl (3 x 20 mL)로 추출하고, 포화된 수성 NaCl (50 mL)로 세정하고, 그리고 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 진공에서 제거하고, 잔여 잔여물을 실리카겔 크로마토그래피 (2:1 석유 에테르:에틸 아세테이트)로 정제하여 카바지탁셀 2-(2-피리딜디티오)에틸카보네이트 (2.50 g, 2.38 mmol, 99% 수율)을 얻었다. LCMS m/z: 1049 (M + H).
Figure 112017009030734-pct00054
-40 ℃로 냉각된, DMF (20 mL) 및 디이소프로필에틸아민 (2.0 mL) 중 옥트레오타이드 아세테이트 (2.08 g, 1.93 mmol)의 용액에, DMF (5 mL) 중 BocOSu (419 mg, 1.95 mmol)의 용액을 적가했다. 반응을, 3 시간에 걸쳐 실온으로 서서히 따뜻하게 했다. 대부분의 DMF를 제거하고, 그리고 반응 혼합물을, 0.1% AcOH을 갖는 물 중 15% 내지 60% 아세토니트릴로 용출하는 C18 칼럼 상에 로딩하여, 생성물을 아세테이트 염 (1.53 g, 1.30 mmol, 67% 수율)으로서 얻었다. LCMS m/z: 510.3 (M - Boc + 2H)/2.
Figure 112017009030734-pct00055
DMF (10 mL) 및 디이소프로필에틸아민 (1 mL) 중 Lys-Boc 옥트레오타이드 아세테이트 (545 mg, 0.462 mmol)의 용액에 DMF (4 mL) 중 3-트리틸머캅토프로피온산 NHS 에스테르 (308 mg, 0.676 mmol)의 용액을 부가했다. 반응을 50 ℃에서 2 시간 동안 교반하고, 그 후 HPLC는 개시 물질의 완벽한 소비를 보여준다. 모든 용매를 진공에서 제거하고, 그리고 잔여 물질을 역상 크로마토그래피로 정제하여 생성물 (623 mg, 0.430 mmol, 93% 수율)을 얻었다.
Figure 112017009030734-pct00056
바이알에 Lys-Boc 옥트레오타이드 3-트리틸머캅토프로피온아미드 (443 mg, 0.306 mmol)을 충전하고, 그리고 물 (0.25 mL)을, 트리플루오로아세트산 (10 mL) 및 트리이소프로필실란 (0.25 mL)을 부가했다. 반응을 실온에서 10 분 동안 교반하고, 그리고 모든 용매를 진공에서 제거했다. 잔여 잔류물을 DMF (7 mL) 및 디이소프로필에틸아민 (0.50 mL) 에서 용해시켰다. DMF (3 mL) 중 카바지탁셀 2-(2-피리딜디티오)에틸카보네이트 (407 mg, 0.388 mmol)의 용액을 상기 용액에 부가하고, 그리고 반응을 실온에서 1 시간 동안 교반했다. 반응을 0.1% AcOH을 갖는 물 30% 내지 70% 아세토니트릴로 용출하는 C18 칼럼 상에 로딩하여 원하는 생성물, 콘주게이트 1을, 아세테이트 염 (288 mg, 0.137 mmol, 45% 수율)로서 얻었다. LCMS m/z: 1023.0 (M + 2H)/2.
실시예 2: 콘주게이트 2의 합성
Figure 112017009030734-pct00057
옥트레오타이드 아세테이트 (515 mg, 0.477 mmol)을 DMF (6 mL) 및 디이소프로필에틸아민 (1.0 mL) 에서 용해시켰다. 용액을 -40 ℃로 냉각하고, DMF (4 mL) 중 FMocOSu (182 mg, 0.539 mmol)의 용액을 적가했다. 반응을 2 시간에 걸쳐 실온으로 서서히 따뜻하게 했다. pH 8.0 인산염 버퍼 (1 mL)을 부가하고, 그리고 반응 혼합물을 50 g C18 칼럼 상에 로딩했다. 물 중 15% 내지 85% 아세토니트릴로 용출하여 Lys-Fmoc 옥트레오타이드 (419 mg, 0.337 mmol, 71% 수율)을 얻었다. LCMS m/z: 621.3 (M + 2H)/2.
Figure 112017009030734-pct00058
플라스크에 독소루비신 (1.39 g, 2.40 mmol) 및 FMocOSu (1.69 g, 5.00 mmol)을 충전했다. DMF (10 mL) 및 디이소프로필에틸아민 (875 μL, 5.00mmol)을 부가하고 그리고 반응을 실온에서 3시간 동안 교반했다. 모든 용매를 진공에서 제거하고, 그리고 잔여 잔여물을 디클로로메탄 중 0% 내지 8% 메탄올로 용출하는 80 g 실리카겔 칼럼 상에 로딩하여 FMoc 독소루비신 (1.84 g, 2.40 mmol, 100% 수율)을 얻었다. LCMS m/z: 397.1 (FMoc 다우노스아민), 352.2 (M - 다우노스아민).
Figure 112017009030734-pct00059
플라스크에 Fmoc 독소루비신 (1.84 g, 2.40 mmol) 및 글루타르산 무수물 (1.09 g, 9.60 mmol)을 충전했다. DMF (10 mL) 및 디이소프로필에틸아민 (875 μL, 5.00mmol)을 부가하고 그리고 반응을 실온에서 3시간 동안 교반했다. 대부분의 용매를 총용적이 ~5 mL일 때까지 진공에서 제거했다. 이러한 용액을 0°C로 냉각된 빠르게 교반된 0.1% 수성 트리플루오로아세트산 (100 mL)에 적가했다. 잔여 서스펜션을 여과하고, 잔여 고형물을 물 (20 mL)로 세정하고, 그리고 고형물을 진공에서 건조시켰다. 고형물을 디클로로메탄 중 2% 메탄올에서 취하고, 그리고 80g 실리카겔 칼럼 상에 로딩했다. 99.5/0.5 디클로로메탄/디이소프로필에틸아민 중 0% 내지 15% 메탄올로 용출하여 Fmoc 독소루비신 헤미글루타레이트 (1.10 g, 1.25 mmol, 52% 수율)을 얻었다. LCMS m/z: 493.1 (M - 다우노스아민), 397.1 (FMoc 다우노스아민).
Figure 112017009030734-pct00060
바이알에 Fmoc 독소루비신 헤미글루타레이트 (104 mg, 0.103 mmol)을 충전하고, 그리고 이것에 DMF (3 mL) 중 Lys-FMoc 옥트레오타이드 (134 mmol, 0.107 mmol)의 용액, 그 다음 DMF (3 mL) 중 TBTU (66.1 mg, 0.206 mmol)의 용액을 부가했다. 디이소프로필에틸아민 (50 μL, 0.278 mmol)을 부가하고 그리고 반응을 실온에서 2시간 동안 교반했다. 모든 용매를 진공에서 제거하고, 그리고 잔여 물질을 24 g 실리카겔 칼럼 상에 로딩했다. 디클로로메탄 중 0% 내지 15% 메탄올로 용출하여 Lys-Fmoc 옥트레오타이드 헤미글루타레이트 FMoc 독소루비신 (208 mg, 0.0989 mmol, 96% 수율)을 얻었다.
Figure 112017009030734-pct00061
Lys-Fmoc 옥트레오타이드 헤미글루타레이트 Fmoc 독소루비신 (208 mg, 0.0989 mmol)을 5 mL DMF, 및 1 mL 피페리딘 에서 용해시켰다. 30 분 동안 교반한 후, 모든 용매를 진공에서 제거하고, 그리고 잔여 잔류물을 DMF (1 mL)에서 용해시키고, 그리고 이러한 용액을 빠르게 교반된 에틸 아세테이트 (100 mL)에 적가했다. 이러한 서스펜션을 실온에서 5 분 동안 교반하고, 여과하고, 잔여 고형물을 에틸 아세테이트 (20 mL)로 세정하고, 그리고 진공에서 건조시켰다. 잔여 고형물을 정제된 by 역상 크로마토그래피 (물 중 5% 내지 50% 아세토니트릴, 0.1% TFA와 함께)로 정제하여 원하는 생성물을 비스-TFA 염 (55.8 mg, 0.0296 mmol, 28% 수율)로서 얻었다. LCMS m/z: 829.9 (M + 2H)/2.
실시예 3: 콘주게이트 3의 합성
Figure 112017009030734-pct00062
0 ℃로 냉각된, DMF (8 mL) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (175 μL, 1.00 mmol) 중 옥트레오타이드 아세테이트 (540 mg, 0.501 mmol)의 용액에, DMF (7 mL) 중 디-tert-부틸 디카보네이트 (109 mg, 0.499 mmol)의 용액을 부가했다. 반응을 0 ℃에서 1 시간 동안 교반하고, 그 다음 실온에서 1 시간 동안 교반했다. S-트리틸-3-머캅토프로피온산 N-하이드록시석신이미드 에스테르 (668 mg, 1.50 mmol)을 그 다음 고형물로서 부가하고, 그리고 반응을 실온에서 16 시간 동안 교반했다. 용매를 진공에서 제거하고, 그리고 잔여 물질을 실리카겔 크로마토그래피 (디클로로메탄 중 0% 내지 8% 메탄올)로 정제하여 A (560 mg, 0.386 mmol, 77% 수율)을 얻었다.
Figure 112017009030734-pct00063
메탄올 (20 mL) 중 2,2'-디피리딜 디설파이드 (1.51 g, 6.85 mmol)의 용액에 2-(부틸아미노)에탄티올 (500 μL, 3.38 mmol)을 부가했다. 반응을 실온에서 18 시간 동안 교반하고, 그 다음 용매를 진공에서 제거했다. 잔여 물질을 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여 디설파이드 B (189 mg, 0.780 mmol, 23% 수율)을 얻었고, 이것을 사용시까지 -18 ℃에서 보관했다.
Figure 112017009030734-pct00064
-40 ℃로 냉각된, 디클로로메탄 (10 mL) 및 피리딘 (0.50 mL) 중 카바지탁셀 (410 mg, 0.490 mmol)의 용액에, 디클로로메탄 (10 mL) 중 p-니트로페닐 클로로포르메이트 (600 mg, 2.98 mmol)의 용액을 부가했다. 반응을 -40 ℃에서 2 시간 동안 교반하고, 그리고 반응을 실온으로 따뜻하게 하고 0.1N HCl (20 mL)로 세정했다. 수성 층을 디클로로메탄 (2 x 20 mL)로 추출하고, 그리고 조합된 유기 층들을 MgSO4로 건조시키고, 그리고 용매를 진공에서 제거했다. 잔여 물질을 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여 카바지탁셀-2'-p-니트로페닐카보네이트 (390 mg, 0.390 mmol, 80% 수율)을 얻었다.
Figure 112017009030734-pct00065
디클로로메탄 (15 mL) 중 카바지탁셀-2'-p-니트로페닐카보네이트 (390 mg, 0.390 mmol)의 용액을 B (190 mg, 0.784 mmol)에 부가했다. N,N-디이소프로필에틸아민 (1.0 mL, 5.74 mmol)을 부가하고, 그리고 반응을 교30 ℃에서 18 시간 동안 교반하고, 그 다음 용매를 진공에서 제거하고 잔여 물질을 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여 카바지탁셀 디설파이드 (326 mg, 0.295 mmol, 78% 수율)을 얻었다. ESI MS: 계산치 1103.4, 실측치 1103.9 [M+1].
Figure 112017009030734-pct00066
바이알에 A (10.0 mg, 0.00690 mmol)을 충전하고, 그리고 물 (25 μL), 트리플루오로아세트산 (500 μL) 및 트리이소프로필실란 (10 μL)을 부가했다. 반응을 무색으로 변할 때까지 실온에서 5 분 동안 교반하고, 그 다음 모든 용매를 진공에서 제거했다. 이러한 잔류물에 카바지탁셀 디설파이드 (10.4 mg, 0.00942 mmol), pH 8.0 인산염 버퍼 (1.0 mL) 및 THF (1.0 mL)을 부가했다. 반응을 실온에서 2 시간 동안 교반했다. DMSO (1.0 mL)을 부가하여 임의의 잔여 고형 잔류물을 용해시키고, 그리고 수득한 용액을 분취 HPLC (0.2% 아세트산을 갖는 물 중 30% 내지 85% 아세토니트릴)로 정제하여 생성물을 as 아세테이트 염 (10.3 mg, 0.00477 mmol, 69% 수율)으로서 얻었다. ESI MS: 계산치 2098.9, 실측치 1050.6 [(M+2)/2].
실시예 4: 콘주게이트 4의 합성
Figure 112017009030734-pct00067
바이알에 트리틸 티오 옥트레오타이드 유도체 (20.9 mg, 0.0144 mmol),을 충전하고 물 (25 μL), 트리플루오로아세트산 (1.0 mL), 및 트리이소프로필실란 (10 μL)을 부가했다. 반응을 무색으로 변할 때 (5 min)까지 실온에서 교반하고, 그 다음 모든 용매를 진공에서 제거했다. 이러한 잔류물에 2,2'-디피리딜 디설파이드 (10.5 mg, 0.0477 mmol), 물 (1.0 mL) 및 메탄올 (1.0 mL)을 부가했다. 반응을 실온에서 2 시간 동안 교반하고, 그 다음 DMSO (1.0 mL)을 부가하여 임의의 잔류 고형물을 용해시켰다. 반응을 분취 HPLC (0.2% 아세트산을 갖는 물 중 5% 내지 50% 아세토니트릴)로 정제하여 디설파이드를 아세테이트 염 (12.6 mg, 0.00987 mmol, 69% 수율)으로서 얻었다. ESI MS: 계산치 1215.4, 실측치 608.8 [(M+2)/2].
Figure 112017009030734-pct00068
바이알에 디설파이드 (10.0 mg, 0.00783 mmol) 및 DM-1 (6.00 mg, 0.00813)을 충전했다. 인산염 버퍼 (pH 8, 2.0 mL) 및 메탄올 (3.0 mL)을 부가하고, 그리고 반응을 2 시간 동안 실온에서 교반했다. DMSO (3.0 mL)을 부가하여 반응 혼합물 중 임의의 잔류 고형물을 용해시키고, 그리고 반응 용액을 분취 HPLC (0.2% 아세트산을 갖는 물 중 25% 내지 75% 아세토니트릴)로 정제하여 생성물을 아세테이트 염 (9.32 mg, 0.00490 mmol, 63% 수율)로서 얻었다. ESI MS: 계산치 1841.7, 실측치 912.9 [(M+2-H2O)/2].
실시예 5: 콘주게이트 5의 합성
Figure 112017009030734-pct00069
바이알에 트리틸 티오 옥트레오타이드 유도체 (5.2 mg, 0.0036 mmol)을 충전하고, 그리고 물 (25 μL), 트리플루오로아세트산 (500 μL), 및 트리이소프로필실란 (10μL)을 부가했다. 반응을 무색일 때(5 분)까지 교반하고, 그 다음 모든 용매를 진공에서 제거했다. 이것에 DMF (1.0 mL) 중 MC-Val-Cit-PABC-MMAE (4.8 mg, 0.0036 mmol)의 용액을 부가했다. 포화된 중탄산나트륨 (100 μL)을 부가하고, 그리고 반응을 실온에서 2 시간 동안 교반했다. 추가의 물 (1 mL)을 부가하고, 그리고 수득한 용액을 정제된 by 분취 HPLC (0.2% 아세트산을 갖는 물 중 30% 내지 75% 아세토니트릴)로 정제하여 생성물을 아세테이트 염 (4.9 mg, 0.0020 mmol, 56% 수율)을 얻었다. ESI MS: 계산치 2422.2, 실측치 1212.9 [(M+2)/2].
실시예 6: 콘주게이트 6의 합성
Figure 112017009030734-pct00070
바이알에 아미노-PEG8-산 (221 mg, 0.501 mmol) 및 트리틸 3-머캅토프로피온산 NHS 에스테르 (223 mg, 0.501 mmol)을 충전했다. DMF (5 mL) 및 디이소프로필에틸아민 (500 μL)을 부가하고, 그리고 반응을 실온에서 24 시간 동안 교반했다. 24 시간 후, DCC (206 mg, 1.00 mmol) 및 N-하이드록시석신이미드 (115 mg, 1.00 mmol)을 부가하고, 그리고 반응을 또 다른 24 시간 동안 교반했다. 반응 혼합물을 여과하고, 3 mL DMF로 고형물을 세정하고, 그리고 수집된 여과물을 진공에서 농축했다. 잔여 물질을 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여 생성물 (406 mg, 0.467 mmol, 93% 수율)을 얻었다.
Figure 112017009030734-pct00071
옥트레오타이드 아세테이트 (335 mg, 0.311 mmol)을 DMF (5 mL)에서 용해시키고, 용액을 0°C로 냉각하고, 디이소프로필에틸아민 (150 μL)을 부가하고, 그리고 DMF (3 mL) 중 Boc2O (67.9 mg, 0.311 mmol)의 용액을 적가했다. 반응을 0°C에서 30 분 동안 교반하고, 그 다음 30 분 동안 실온으로 따뜻하게 했다. 5 mL DMF 중 NHS 에스테르의 그 다음 용액을 부가하고, 그리고 반응을 실온에서 3일 동안 교반했다. 모든 용매를 진공에서 제거하고, 그리고 잔여 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여 생성물 (249 mg, 0.133 mmol, 43% 수율)을 얻었다.
Figure 112017009030734-pct00072
개시 물질 (21.2 mg, 0.0113 mmol)을 TFA (1 mL), 물 (25 μL), 및 트리이소프로필실란 (25 μL) 에서 용해시켰다. 반응을 실온에서 5 분 동안 교반하고, 그리고 모든 용매를 진공에서 제거했다. 잔여 잔류물을 DMF (1 mL)에서 용해시키고, 그리고 DMF (1 mL) 중 2,2'-디피리딜디설파이드 (15.0 mg, 0.0681 mmol)의 용액을 부가하고, 그 다음 디이소프로필에틸아민 (200 μL)을 부가했다. 반응을 실온에서 10 분 동안 교반하고, 그리고 분취 HPLC로 정제했다. 중간체 2-피리딜디설파이드를 DMF (1 mL)에서 용해시키고, DMF (1 mL) 중 DM-1 (6.0 mg, 0.0081 mmol)의 용액을 부가하고, 그 다음 디이소프로필에틸아민 (200 μL)을 부가했다. 반응을 실온에서 15 분 동안 교반하고, 그리고 반응 혼합물을 분취 HPLC로 정제하여 생성물 (10.1 mg, 0.00445 mmol, 39% 수율)을 얻었다.
실시예 7: 콘주게이트 7의 합성
Figure 112017009030734-pct00073
디클로로메탄 (3.0 mL) 및 디이소프로필에틸아민 (0.20 mL) 중 Lys-Boc 옥트레오타이드 유리 염기 (50.0 mg, 0.0447 mmol), (Boc)HNCys(Trt)-[Lys(Boc)]4-OH (80.0 mg, 0.0581 mmol), 및 EDC (19.1 mg, 0.100 mmol)의 혼합물을 24 시간 동안 교반했다. 반응을 실리카겔 칼럼 상에 로딩하고, 디클로로메탄 중 0% 내지 15% 메탄올로 용출하여 BocHN-Cys(Trt)-[Lys(Boc)]4-옥트레오타이드(Lys-Boc) (24.0 mg, 0.00968 mmol, 22% 수율)을 얻었다.
Figure 112017009030734-pct00074
BocHN-Cys(Trt)-[Lys(Boc)]4-옥트레오타이드(Lys-Boc) (24.0 mg, 0.00968 mmol)을 물 (25 μL), TFA (1 mL), 및 트리이소프로필실란 (25 μL) 에서 용해시켰다. 반응을 실온에서 5 분 동안 교반하고, 그리고 모든 용매를 진공에서 제거했다. 잔여 잔류물을 DMF (1 mL)에서 용해시키고, 그리고 DMF (1 mL) 중 2,2'-디피리딜디설파이드 (15.0 mg, 0.0681 mmol)의 용액을 부가하고, 그 다음 디이소프로필에틸아민 (100 μL)을 부가했다. 반응을 실온에서 5 분 동안 교반하고, 그리고 분취 HPLC로 정제했다. 단리된 피리딜 디설파이드를 DMF (1 mL)에서 용해시키고, 그리고 DMF (1 mL) 중 DM-1 (5.2 mg, 0.070 mmol)의 용액을 부가하고, 그 다음 디이소프로필에틸아민 (100 μL)을 부가했다. 반응을 실온에서 10 분 동안 교반하고, 그 다음 분취 HPLC로 정제하여 생성물 (3.0 mg, 0.0013 mmol, 13% 수율)을 얻었다.
실시예 8: 콘주게이트에 의한 세포 증식의 저해
콘주게이트를 세포 증식의 저해를 평가하는 시험관내 검정에서 평가하였다. NCI-H524 (ATCC) 인간 폐암 세포를 5,000 세포/웰의 농도에서 96 웰, V-바닥 플레이트 (Costar)에서 플레이팅하고, 24 시간 후 화합물로 2 시간 동안 처리하고 70 시간 동안 추가로 인큐베이션했다. 화합물 개시 용량은 20 μM이었고, 총 10개의 포인트를 위해 3배 연속 희석이 행해졌다. 2 시간의 처리 후, 세포를 스핀다운하고, 약물 함유 배지를 제거하고, 새로운 완전 배지를 부가하고 이를 세포를 재현탁시키는데 사용하고, 이것을 다시 스핀했다. 세정 배지의 제거 후, 상기 세포를 완전 배지에서 재현탁시킨 후 백색 벽의, 편평한 바닥 96 웰 플레이트로 이동시켰다. 세포를 추가의 70 시간 동안 추가로 인큐베이션하여 세포 증식의 저해를 측정했다. 옥트레오타이드 단독은 세포 증식에 대한 유의미한 효과를 갖지 않았다. 증식은 표준 프로토콜 (Promega) 및 Glomax multi + 검출 시스템 (Promega)을 사용하여 CellTiter Glo 시약을 사용하여 측정되었다. 증식 저해 퍼센트는 하기 식을 사용하여 계산되었다: % 저해 = (대조군-처리)/ 대조군 *100. 대조군은 비히클 단독으로서 정의된다. IC50 곡선은 GraphPad Prism 6에 의한 비선형회귀 분석 (4개의 파라미터)을 사용하여 생성되었다. 대표적인 화합물 (콘주게이트 1-7)에 대한 데이터는 표 6에서 보여졌다. 옥트레오타이드 경쟁을 갖는 대표적인 화합물에 대한 IC50 값이 또한측정되었고 표 6에서 보여졌다.
표 6: 콘주게이트 1-7의 IC50
Figure 112017009030734-pct00075
이들 데이터는, 콘주게이트가 소마토스타틴에 결합하고 수용체를 내재화하는 능력을 보유한다는 것을 입증한다. 일부 예에서 이것은 또한, 링커가 절단되어 종양 세포를 효과적으로 사멸시키는 세포독성 페이로드를 활성화시킨다는 것을 보여준다.
실시예 9: 소마토스타틴 수용체에 대한 콘주게이트의 Ki
2개의 콘주게이트를 소마토스타틴 수용체 2 (SSTR2)에 대한 결합을 평가하는 시험관내 검정에서 평가했다. 방사성리간드-수용체 결합 검정을 Eurofins Panlabs (Taiwan)에서 수행하여 SSTR2에 대한 본원에 기재된 콘주게이트의 친화도를 측정했다. 상기 검정은 SSTR2 발현 CHO-K1 세포로부터의 막 제제를 사용하여 인간 SSTR2에 대한 방사선표지된 리간드, [125 I] 표지된 소마토스타틴의 결합을 측정한다. 10 uM의 용량에서 출발하여 10-pt 곡선을 얻기 위해 6x 연속 희석을 사용한 콘주게이트/화합물의 존재 하에 막을 방사선표지된 소마토스타틴 (0.03 nM)과 인큐베이션했다. 4시간 인큐베이션 후, 막을 여과하고, 3x 세정하고, 카운트하여 수용체에 결합된 채 남아있는 [125 I] 소마토스타틴을 측정했다. IC50 값은 MathIQTM (ID Business Solutions Ltd., UK)을 사용하여 비-선형, 최소 자승 회귀 분석에 의해 측정되었다. Ki 값은 시험된 콘주게이트/화합물의 관측된 IC50, 검정에 이용된 방사성리간드의 농도, 및 Eurofins에서 입수된 리간드의 KD에 대한 사료적값을 사용하여 청 및 프러소프의 방정식 (Cheng and Prusoff, Biochem. Pharmacol. 22:3099-3108, 1973)을 사용하여 계산되었다.
표 7: 콘주게이트 1-2의 Ki
Figure 112017009030734-pct00076
이들 데이터는, 수용체에 대한 펩타이드의 높은 친화도가 펩타이드에 링커 및 약물의 부가 후에도 유지된다는 것을 입증한다.
실시예 10: 콘주게이트의 소마토스타틴 수용체로의 내재화
2개의 콘주게이트를 SSTR2를 평가하는 시험관내 검정에서 평가했다. 하기 개괄된 단계는 일반적으로 제조자의 권고에 따라서 PathHunter eXpress 활성화된 GPCR 내재화 세포 및 PathHunter 검출 시약을 사용한 효능제 검정을 수행하기 위한 검정 용적 및 절차를 제공한다. GraphPad Prism®가 효능제 용량 반응을 플롯팅하기 위해 사용되었다.
표 8: 콘주게이트 1-2의 EC50
Figure 112017009030734-pct00077
이들 데이터는, 콘주게이트가, 콘주게이트의, SSTR2 발현 세포의 세포질로의 선택적 전달을 위한 기전으로서의 수용체의 내재화를 강력하게 유도한다는 것을 입증한다.
실시예 11: 콘주게이트 1의 나노입자 제형
콘주게이트 1의 나노입자 제형. 옥트레오타이드-카바지탁셀 콘주게이트 1는 물 에멀젼 방법에서 단일 오일(single oil)을 사용하여 폴리머성 나노입자에 성공적으로 캡슐화되었다 (하기 표 9A 및 표 9B를 참고한다). 전형적인 물-에멀젼 방법에서, 약물 및 적합한 폴리머 또는 블록 코폴리머 또는 폴리머/블록 코폴리머의 혼합물을 유기 용매 예컨대 디클로로메탄 (DCM), 에틸 아세테이트 (EtAc) 또는 클로로포름에 용해시켜 오일상을 형성했다. 보조용매 예컨대 디메틸 포름아미드 (DMF) 또는 아세토니트릴 (ACN) 또는 디메틸 설폭사이드 (DMSO) 또는 벤질 알코올 (BA)을 때때로 사용하여 나노입자의 크기를 조절하고/하거나 약물을 가용화시켰다. PLA97-b-PEG5, PLA35-b-PEG5 및 PLA16-b-PEG5 코폴리머를 포함한 다양한 폴리머를 제형에 사용했다. 나노입자 제형은 콘주게이트 1의 친유성을 변화시키면서 제조되었다. 친유성은 콘주게이트 1의 상이한 반대이온과의 소수성 이온-쌍을 사용하여 변화되었다. 표면활성제 예컨대 Tween® 80, 나트륨 콜레이트, Solutol® HS 또는 인지질을 수성상에서 사용하여 미세 에멀젼의 형성을 보조했다. 유화제 (예컨대 Tween® 80)를 함유하는 계속해서 교반된 수성상에 오일상을 전형적인 10%/90% v/v 오일/물 비로 서서히 부가하고, 회전자-고정자 균질기 또는 초음파 배쓰를 사용하여 조악한 에멀젼을 제조했다. 그 다음 조악한 에멀젼을 N=4 통과 동안 고압 균질기 (10,000 psi에서 작동됨)를 통해 가공하여 나노에멀젼을 형성했다. 그 다음 나노에멀젼을 주사 품질 물용 차가운 (0-5 ℃) 물로의 10-배 희석물로 켄칭시켜 대부분의 에틸 아세테이트 용매를 제거하여 에멀젼 액적을 경화시키고 나노입자 서스펜션을 형성했다. 일부 경우에, 휘발성 유기 용매 예컨대 디클로로메탄은 회전식 증발로 제거될 수 있다. 접선 유동 여과 (500 kDa MWCO, mPES 막)를 사용하여 나노입자 서스펜션을 농축시키고 이를 주사 품질 물용 물 (표면활성제/염의 존재 또는 부재)로 세정했다. 긴장제로서 또한 사용되는 동결보호제 (예를 들면, 10% 수크로오스)를 나노입자 서스펜션에 부가하고, 제형을 0.22 μm 필터를 통해 멸균 여과했다. 제형을 ≤ -20℃에서 냉동 보관했다. 나노입자의 역학적 광 산란에 의해 결정된 다분산도 지수 (PDI) 및 입자 크기 (Z-avg.)는 하기 표에 요약된 바와 같이 역학적 광 산란으로 확인되었다. 실제 약물 부하를 HPLC 및 UV-가시광 흡광도를 사용하여 측정했다. 이것은 공지된 용적의 나노입자 용액으로부터 물을 증발시키고 적절한 용매 예컨대 DMF에 고형물을 용해시킴으로써 달성되었다. 약물 농도는 증발 후 회수된 총 고형물에 대해 정규화되었다. 캡슐화 효율을 실제 및 이론적 약물 부하 사이의 비로서 계산했다.
유리 콘주게이트 1 을 사용한 제형.
콘주게이트 1은 표면활성제 예컨대 Tween® 80을 함유하는 수성 매질에서 높은 용해도를 가지며, 혼합된 교질입자를 형성하는 것으로 관측되었다. 어떤 제형에서, 콘주게이트 1은 그것의 원상태 친유성에 대한 임의의 변화 없이 사용되었다 (유리 콘주게이트). 놀랍게도, 수성 Tween® 80에서 콘주게이트 1의 높은 용해도에도, 유리 콘주게이트는 나노입자에서 높은 캡슐화도를 나타냈다. 임의의 특정 이론에 구속되지 않고, Tween®/물에서 높은 수성 용해도에도 불구하고 나노입자에 보유되는 콘주게이트 1의 경향은 카바지탁셀의 높은 친유성, 및 그것의 폴리머성 매트릭스와의 혼용성/혼화성에 기인할 수 있을 것이다. 옥트레오타이드 펩타이드에 2개의 페닐알라닌 아미노산의 존재는 또한 콘주게이트의 폴리머성 매트릭스와의 상호작용을 보조할 수 있다.
콘주게이트 1 의 소수성 이온-짝짓기 (HIP)를 사용한 제형화
HIP 기술을 콘주게이트 1의 친유성을 증진시키는데 사용했다. 콘주게이트는 라이신 아미노산 상에 하나의 양으로 하전된 모이어티를 갖는다. 매 한 분자의 콘주게이트에 대해 음으로 하전된 디옥틸 나트륨 설포석시네이트 (AOT) 분자를 사용하여 HIP를 형성했다. 콘주게이트 및 AOT를 메탄올, 디클로로메탄 및 물 혼합물에 부가하고, 1 시간 동안 진탕시켰다. 이 혼합물에 디클로로메탄 및 물의 추가의 부가 후, 콘주게이트 1/AOT HIP를 디클로로메탄 상으로부터 추출하고 건조시켰다. 때때로, HIP 복합물을 가용화시키는데 DMF를 사용했다. 제형화의 결과는 표 9A 및 9B에 요약된다.
표 9A: 유리 약물 콘주게이트 (DC)를 사용한 콘주게이트 1 나노입자의 제형
Figure 112017009030734-pct00078
표 9B: 콘주게이트 1/AOT HIP를 사용한 콘주게이트 1 나노입자의 제형
Figure 112017009030734-pct00079
이들 데이터는, 소마토스타틴 수용체 표적화된 콘주게이트가 나노입자에 효율적으로 및 효과적으로 캡슐화될 수 있음을 입증한다.
실시예 12: 콘주게이트 2 를 함유하는 나노입자
콘주게이트 2는 단일 수중유 에멀젼 방법을 사용하여 폴리머성 나노입자에 성공적으로 캡슐화되었다 (하기 표 6A 및 6B를 참조한다). 전형적인 물-에멀젼 방법에서, 약물 및 적합한 폴리머 또는 블록 코폴리머 또는 폴리머/블록 코폴리머의 혼합물을 유기 용매 예컨대 디클로로메탄 (DCM), 에틸 아세테이트 (EtAc) 또는 클로로포름에 용해시켜 오일상을 형성했다. 보조용매 예컨대 디메틸 포름아미드 (DMF) 또는 아세토니트릴 (ACN) 또는 디메틸 설폭사이드 (DMSO) 또는 벤질 알코올 (BA)을 때때로 사용하여 나노입자의 크기를 조절하고/하거나 약물을 가용화시켰다. PLA97-b-PEG5, PLA74-b-PEG5, PLA35-b-PEG5 및 PLA16-b-PEG5 코폴리머를 포함한 다양한 폴리머를 제형화에 사용했다. 나노입자 제형은 콘주게이트 2의 친유성을 변화시킴으로써 제조되었다. 콘주게이트 2의 친유성은 콘주게이트 2의 상이한 반대이온과의 소수성 이온-쌍을 사용함으로써 변화되었다. 표면활성제 예컨대 Tween® 80, 나트륨 콜레이트, Solutol® HS 또는 지질을 수성상에 사용하여 미세 에멀젼의 형성을 보조했다. 유화제 (예컨대 Tween® 80)를 전형적인 10/90% v/v 오일/물 비로 함유한 계속해서 교반된 수성상에 오일상을 서서히 부가하고, 회전자-고정자 균질기 또는 초음파 배쓰를 사용하여 조악한 에멀젼을 제조했다. 그 다음 조악한 에멀젼을 N=4 통과 동안 고압 균질기 (10,000 psi에서 작동됨)를 통해 가공하여 나노에멀젼을 형성했다. 그 다음 나노에멀젼을 주사 품질 물용 차가운 (0-5 ℃) 물로의 10-배 희석물로 켄칭시켜 대부분의 에틸 아세테이트 용매를 제거하여 에멀젼 액적을 경화시키고 나노입자 서스펜션을 형성했다. 일부 경우에, 휘발성 유기 용매 예컨대 디클로로메탄은 회전식 증발로 제거될 수 있다. 접선 유동 여과 (500 kDa MWCO, mPES 막)를 사용하여 나노입자 서스펜션을 농축시키고 이를 주사 품질 물용 물 (표면활성제/염의 존재 또는 부재)로 세정했다. 동결건조보호제 (예를 들면, 10% 수크로오스)를 나노입자 서스펜션에 부가하고, 제형을 0.22 μm 필터를 통해 멸균 여과했다. 제형을 ≤ -20℃에서 냉동 보관했다. 나노입자의 입자 크기 (Z-avg.) 및 다분산도 지수 (PDI)는 하기 표에 요약된 바와 같이 역학적 광 산란으로 확인되었다. 실제 약물 부하를 HPLC 및 UV- Vis 흡광도를 사용하여 측정했다. 이것은 공지된 용적의 나노입자 용액으로부터 물을 증발시키고 적절한 용매 예컨대 DMF에 고형물을 용해시킴으로써 달성되었다. 약물 농도는 증발 후 회수된 총 고형물에 대해 정규화되었다. 캡슐화 효율을 실제 및 이론적 약물 부하 사이의 비로서 계산했다.
일부 제형에서, 콘주게이트 2는 그것의 원상태 친유성에 대한 임의의 변화 없이 사용되었다 (유리 콘주게이트). 놀랍게도, 수성 Tween® 80에서 2의 높은 용해도, 및 옥트레오타이드의 친수성 성질에도, 유리 콘주게이트는 나노입자에서 높은 캡슐화도를 나타냈다. 나노입자에 유지되는 2의 경향은 1과 비교하여 감소되었다.
콘주게이트 2 의 HIP를 사용한 제형
소수성 이온-짝짓기 (HIP) 기술을 사용하여 콘주게이트 2의 친유성을 증진시켰다. 콘주게이트는 라이신 및 독소루비신 상에 2개의 염기성 모이어티를 갖는다. 매 분자의 콘주게이트에 대해 음으로 하전된 디옥틸 나트륨 설포석시네이트 (AOT) 분자를 사용하여 HIP를 형성했다. 콘주게이트 및 AOT를 메탄올, 디클로로메탄 및 물 혼합물에 부가하고, 1 시간 동안 진탕시켰다. 이 혼합물에 디클로로메탄 및 물의 추가의 부가 후, 콘주게이트 2/AOT HIP를 디클로로메탄 상으로부터 추출하고 건조시켰다. 일부 경우에, HIP 복합물을 가용화시키는데 DMF를 사용했다. 자세한 설명 및 데이터는 표 10A 및 표 10B에서 보여진다.
콘주게이트 2 와 AOT의 HIP 복합물의 제조예
콘주게이트 2 상의 양전하 # = 2; MW = 1658.9 g/mol
콘주게이트 2의 질량 = 34.5 mg.
콘주게이트 2의 몰 # = 0.0208 mmol
2 양전하를 커버하는데 필요한 AOT의 몰 = 0.0416 mmol.
AOT의 중량(mg) [MW = 445 g/mol] = 18.5 mg
콘주게이트 2 및 AOT를 1 mL의 물 및 2.1 mL의 메탄올의 용액에 부가했다. 1 mL의 디클로로메탄을 이 혼합물에 부가했다. 맑은 적색 균질한 용액을 수득했다. 이 용액을 대략 30 분 동안 진탕시켰다. 1 mL 물 및 1 mL의 디클로로메탄을 상기 용액에 부가하고, 혼합물을 간단히 진탕시켰다. 2개의 상들을 분리시켰다. 때때로 2상의 분리를 가속화시키기 위해, 혼합물을 원심분리할 수 있다. 최하부 상은 주로 디클로로메탄으로 구성되었고, 반면에 최상부 상 (수성상)은 주로 물 및 메탄올로 구성되었다. 콘주게이트 2:AOT HIP 복합물의 형성 후, 화합물 상에 도입된 친유성은 디클로로메탄 상에서 그것의 용해도를 증가시켰다. 그 다음 HIP 복합물을 최하부 상으로부터 회수하고, 디클로로메탄을 증발시켰다. 때때로 추가의 디클로로메탄을 나머지 수성상에 부가하여 나머지 콘주게이트 2:AOT HIP 복합물을 추출했다.
표 10A: 유리 약물 콘주게이트 (DC)를 사용한 콘주게이트 2 나노입자의 제형
Figure 112017009030734-pct00080
표 10B: 콘주게이트 2/AOP HIP를 사용한 콘주게이트 2 나노입자의 제형
Figure 112017009030734-pct00081
이들 데이터는 추가로, 소마토스타틴 수용체 표적화된 콘주게이트가 나노입자에서 효율적으로 및 효과적으로 캡슐화될 수 있음을 입증한다.
실시예 13: 1 및 2 의 나노입자 제형의 약동학.
나노입자는 전형적으로 10% 수크로오스 및 변화되는 유리 약물 제형에서 생체내 전달을 위해 제형화되지만, 전형적으로 10% Solutol®/10% 수크로오스, 또는 생리 식염수에서 투여된다. 이 실시예에서 나노입자 제형이 없는 콘주게이트 1은 20% 프로필렌글리콜/80% 수성 수크로오스 중 용액 (10%)으로 투여되었다.
본원에서 기재된 바와 같은 나노입자를 사용한 랫트 약력학적 연구의 경우, 0.1 mg/mL 용액을 10 mL/kg으로 투여하고 이로써, 1 mg/kg IV 볼러스 용량이 랫트에 꼬리 정맥 주사로 도입되었다. 화합물 투여 후, 혈액을 리튬 헤파린 코팅된 진공 튜브 내에 투여후 0.083 시간, 0.25 시간, 0.5 시간, 1 시간, 2 시간, 4 시간, 8 시간, 및 24 시간에 수집했다. 튜브를 5 분 동안 역전시킨 후 4°C에서 5 분 동안 6000 rpm에서 원심분리시까지 습성 얼음 위에 두었다. 플라즈마를 수확하고, -80 ℃에서 냉동시키고, 생분석을 위해 드라이아이스 상에 이동시켰다.
50 uL의 랫트 플라즈마를 300 uL의 DMF로 침전시키고, 수득한 상청액을 포지티브 방식으로 LC-MS/MS 전기분무 이온화에 의해 화합물 함량에 대해 측정했다.
콘주게이트 1 및 콘주게이트 1의 나노입자 제형에 대한 대표적인 용량 정규화된 랫트 약력학적 곡선은 도 1에서 보여진다. 표 11은 도 1에서 콘주게이트 1 및 콘주게이트 1을 포함하는 나노입자에 대한 정규화된 곡선하 면적 (AUC) 계산치를 나타낸다.
표 11: 콘주게이트 1 및 나노입자 제형의 AUC
Figure 112017009030734-pct00082
콘주게이트 2 및 콘주게이트 2의 나노입자 제형에 대한 대표적인 용량 정규화된 랫트 약력학적 곡선은 도 2에서 보여진다. 표 12는 도 2에서 콘주게이트 2 및 콘주게이트 2를 포함하는 나노입자에 대한 정규화된 곡선하 면적 (AUC) 계산치를 나타낸다.
표 12: 콘주게이트 2 및 나노입자 제형의 AUC
Figure 112017009030734-pct00083
이들 데이터는, 나노입자가 콘주게이트의 AUC를 증가시킴을 입증하며, 그것에 의해 약물 전달, 예를 들면, 화학치료제의 종양으로의 전달을 위한 개선된 사용을 나타내는 바람직한 특성을 갖는 표적화된 나노입자가 본 명세서에서 기재된 방법을 사용하여 합성될 수 있음을 입증한다.
실시예 14: DM1 콘주게이트의 합성
DM1을 포함하는 콘주게이트를 하기 절차에 따라 합성했다:
중간체의 합성
Figure 112017009030734-pct00084
Nα-Me-Nα-Fmoc-Nε-Boc-라이신 (640 mg, 1.31 mmol)을 디옥산 (5 mL) 및 4N HCl (5 mL) 에서 용해시켰다. 반응을, LCMS가 완벽한 탈보호를 보여줄 때까지 실온에서 교반했다. 반응 혼합물을 역상 크로마토그래피로 정제하여 Nα-Me-Nα-Fmoc-라이신 (2', 500 mg, 1.31 mmol, 100% 수율)을 얻었다. 이러한 물질을 DMF (5 mL)에서 용해시키고 디이소프로필에틸아민 (0.50 mL), 및 트리틸 3-머캅토프로피온산 NHS 에스테르 (875 mg, 1.98 mmol)을 부가했다. 반응을 실온에서 교반하고, 그리고 역상 크로마토그래피로 정제하여 Nα-Me-Nα-Fmoc-Nε-(STrt-프로피오네이트)-라이신 (3', 600 mg, 0.843 mmol, 64% 수율)을 얻었다.
Figure 112017009030734-pct00085
Fmoc-트레오닌(tBu)-OH를 2-클로로트리틸 수지 (3.0 g 수지, 1.5 mmol/g 로딩물) 상에 로딩했다. 4:1 DMF:피페리딘에 의한 반복적인 탈보호, 그리고 그 뒤에 표준 SPPS 조건을 사용하는 Nα-Fmoc-Nε-Boc-라이신, Nα-Fmoc-Nin-Boc-D-트립토판, Fmoc-티로신(tBu), Nα-Me-Nα-Fmoc-Nε-(3STrt-프로피오네이트)-라이신, 및 Fmoc-페닐알라닌과 커플링으로 수지에 결합된 선형 펩타이드를 얻었다. 디클로로메탄 중 1% TFA에 의한 수지 절단, 그 다음 DMF (45 mL) 및 디이소프로필에틸아민 (3.0 mL) 중 HATU (1.71 g, 4.5 mmol) 및 HOAt (0.6 M 용액, 7.5 mL, 4.5 mmol)을 갖는 플라스크에 10 mL DMF 중 선형 펩타이드의 용액을 적가하여 고리화했다. 3 시간 동안 실온에서 교반한 후, 모든 DMF를 진공에서 제거하고, 그리고 잔여 물질을 95:2.5:2.5 TFA:EDT:물로 30 분 동안 처리하고, 용매를 진공에서 제거하고, 그리고 잔여 물질을 역상 크로마토그래피로 정제하여 사이클로[Phe-Nα-Me-Nε-(3STrt-프로피오네이트)-Lys-Tyr-DTrp-Lys-Thr] (4', 427 mg, 0.447 mmol, 10% 전체 수율)을 제공했다. LCMS M/Z: 956.5 [M + 1].
화합물 5'을 화합물 4'와 유사한 방식으로 제조했다.
Figure 112017009030734-pct00086
DMF (5 mL) 및 디이소프로필에틸아민 (0.50 mL) 5' 트리플루오로아세테이트 염 (380 mg, 0.387 mmol)의 용액에 DMF (2 mL) 중 BocOSu (91.5 mg, 0.425 mmol)의 용액을 부가했다. 반응을 실온에서 4 시간 동안 교반하고, 그 다음 반응 혼합물을 50 g C18 Isco 칼럼 상에 로딩했다. 0.1% AcOH을 갖는 물 중 5% 내지 75% 아세토니트릴로 용출하여 6' (338 mg, 0.349 mmol, 90% 수율)을 얻었다.
Figure 112017009030734-pct00087
바이알에 사이클로[Phe-NMeGlu-Tyr-DTrp-Lys(Boc)-Thr] (6', 41.8 mg, 0.0431 mmol), 3-말레이미도프로필아민 HCl (32.9 mg, 0.172 mmol) 및 COMU (73.7 mg, 0.172 mmol)을 충전했다. DMF (1 mL) 및 디이소프로필에틸아민 (0.10 mL)을 부가하고, 그리고 반응을 실온에서 30 분 동안 교반했다. 30 분 후, 추가의 3-말레이미도프로필아민 HCl (32.9 mg, 0.172 mmol) 및 디이소프로필에틸아민 (0.10 mL)을 부가하고, 그리고 반응을 추가 3 시간 동안 교반했다. 반응을 아세트산 (0.30 mL)의 부가로 산성화하고, 물 (1 mL)을 부가하여 용액에서 나온 임의의 물질을 용해시켰다. 반응 혼합물을 분취 HPLC (0.1% AcOH을 갖는 물 중 5% 내지 75% 아세토니트릴)로 정제하여 7' (25.7 mg, 0.0233 mmol, 54% 수율)을 얻었다.
Figure 112017009030734-pct00088
바이알에 사이클로[Phe-NMeGlu-Tyr-DTrp-Lys(Boc)-Thr] (6', 39.0 mg, 0.0402 mmol), S-Trt 시스테아민 (38.6 mg, 0.121 mmol) 및 TBTU (38.8 mg, 0.121 mmol)을 충전했다. DMF (1.0 mL) 및 디이소프로필에틸아민 (0.10 mL)을 부가하고, 그리고 반응을 실온에서 2 시간 동안 교반했다. 반응 혼합물을 분취 HPLC (0.1% AcOH을 갖는 물 중 5% 내지 95% 아세토니트릴)로 정제하여 8' (36.2 mg, 0.0285 mmol, 71% 수율)을 얻었다.
Figure 112017009030734-pct00089
바이알에 Fmoc-STrt-시스테인 (585 mg, 1.00 mmol) 및 TBTU (330 mg, 1.03 mmol)을 충전했다. DMF (4 mL), tert-옥틸아민 (0.176 mL, 1.10 mL) 및 디이소프로필에틸아민 (0.30 mL)을 부가하고, 그리고 반응을 실온에서 16 시간 동안 교반했다. 피페리딘 (2 mL)을 부가하고, 반응을 실온에서 30 분 동안 교반하고, 그리고 반응 혼합물을 0.1% AcOH을 갖는 물 중 15% 내지 85% 아세토니트릴로 용출하는 50g C18 Isco 칼럼 상에 로딩했다. 정제된 생성물을 진공에서 건조시키고, 그리고 단리된 생성물을 메탄올 (10 mL)에서 재용해시켰다. 1N HCl (2 mL)을 부가하고, 그리고 모든 용매를 진공에서 다시 제거하여 S-트리틸 시스테인 tert-옥틸 아미드 HCl 염 (401 mg, 0.784 mmol, 78% 수율)을 얻었다.
Figure 112017009030734-pct00090
바이알에 사이클로[Phe-NMeGlu-Tyr-DTrp-Lys(Boc)-Thr] (6', 27.0 mg, 0.0279 mmol), S-트리틸 시스테인 tert-옥틸 아미드 HCl (20.0 mg, 0.0391 mmol) 및 TBTU (11.0 mg, 0.0343 mmol)을 충전했다. DMF (1 mL) 및 디이소프로필에틸아민 (0.10 mL)을 부가하고, 그리고 반응을 실온에서 1 시간 동안 교반했다. 반응 혼합물을 분취 HPLC (0.1% AcOH을 갖는 물 중 25% 내지 95% 아세토니트릴)로 정제하여 9' (24.2 mg, 0.0170 mmol, 61% 수율)을 얻었다.
Figure 112017009030734-pct00091
플라스크에 트리틸-3-머캅토프로피온산 NHS 에스테르 (1.02 g, 2.29 mmol)을 충전하고, 이것을 DMF (10 mL)에서 용해시켰다. 반응을 0 oC로 냉각하고, 4,7,10-트리옥사-1,13-트리데칸디아민 (3.00 mL, 13.7 mmol)을 한번에 부가했다. 반응을 0 oC에서 10 분 동안 교반하고, 그 다음 실온으로 따듯하게 하고 2 시간 동안 교반했다. 반응 혼합물을 100 C18 Isco 칼럼 상에 로딩하고 물 중 5% 내지 85% 아세토니트릴로 용출하여 10' (552 mg, 1.00 mmol, 44% 수율)을 얻었다.
화합물 11'-13'을 10'와 유사한 방식으로 제조했다:
Figure 112017009030734-pct00092
바이알에 6' (27.6 mg, 0.0285 mmol), 10' (31.4 mg, 0.0570 mmol) 및 TBTU (18.3 mg, 0.0570 mmol)을 충전했다. DMF (1 mL) 및 디이소프로필에틸아민 (0.10 mL)을 부가하고, 그리고 반응을 실온에서 2 시간 동안 교반했다. 반응 혼합물을 prep HPLC (0.1% AcOH을 갖는 물 중 25% 내지 95% 아세토니트릴)로 정제하여 14' (29.6 mg, 0.0197 mmol, 69% 수율)을 얻었다.
화합물 15'-17'을 14'와 유사한 방식으로 제조했다:
Figure 112017009030734-pct00093
바이알에 N-Boc-글루탐산 (125 mg, 0.506 mmol), 3-말레이미도프로필아민 HCl (200 mg, 1.05 mmol) 및 TBTU (330 mg, 1.03 mmol), DMF (5 mL) 및 디이소프로필에틸아민 (0.30 mL)을 충전하고, 혼합물 10 분 동안 초음파처리하여 부드러운 서스펜션을 얻었고, 반응을 실온에서 18 시간 동안 교반했다. 반응을 아세트산 (0.50 mL)로 산성화하고, 그 다음 물 (2.0 mL)로 희석했다. 반응 혼합물을 30 g C18 Isco 칼럼 상에 로딩하고, 0.1% AcOH을 갖는 물 중 5% 내지 60% 아세토니트릴로 용출하여 18' (77.0 mg, 0.148 mmol, 29% 수율)을 얻었다. LCMS M/Z: 520.2 (M + 1).
화합물 19'을 유사한 방식으로 제조했다:
Figure 112017009030734-pct00094
바이알에 18' (12.0 mg, 0.0233 mmol), 및 TFA (1 mL)을 충전했다. 반응을 실온에서 5 분 동안 교반하고, 그 다음 모든 TFA를 진공에서 제거했다. 제2 바이알에서, 사이클로[Phe-NMeGlu-Tyr-DTrp-Lys(Boc)-Thr] (6', 20.0 mg, 0.0206 mmol) 및 TBTU (9.0 mg, 0.0280 mmol)을 DMF (1 mL), 및 디이소프로필에틸아민 (0.15 mL)에서 용해시켰다. 이러한 용액을 실온에서 5 분 동안 교반하고, 그 다음 탈보호된 18'와 함께 바이알에 부가했다. 반응을 실온에서 2 시간 동안 교반하고, 그리고 반응을 AcOH (0.20 mL)의 부가로 산성화했다. 그 다음 반응을 0.2% AcOH을 갖는 물 중 15% 내지 80% 아세토니트릴로 용출하는 HPLC로 정제하여 20' (11.6 mg, 0.0085 mmol, 41% 수율)을 얻었다.
화합물 21'을 20'와 유사한 방식으로 제조했다:
Figure 112017009030734-pct00095
바이알에 2,2'-디티오디피리딘 (110 mg, 0.500 mmol)을 충전하고 이러한 메탄올 (1 mL)에서 용해시켰다. 메탄올 (1 mL) 중 2-(부틸아미노)에탄티올 (37.0 μL, 0.250 mmol)의 용액을 적가하고, 5 분 동안 교반하고, 그리고 모든 메탄올을 진공에서 제거했다. 잔여 잔류물에 DMF (2 mL) 및 디이소프로필에틸아민 (0.10 mL) 중 사이클로[Phe-NMeGlu-Tyr-DTrp-Lys(Boc)-Thr] (6', 28.6 mg, 0.0295 mmol) 및 TBTU (14.2 mg, 0.0443 mmol)의 용액을 부가했다. 반응을 실온에서 1 시간 동안 교반하고, 그리고 그 다음 반응 혼합물을 0.1% AcOH를 갖는 물 중 40% 내지 95% 아세토니트릴로 용출하는 30 g C18 Isco 칼럼 상에 로딩하여 22' (21.1 mg, 0.0177 mmol, 60% 수율)을 얻었다. LCMS M/Z: 547.4 [(M + 2 - Boc) / 2].
화합물 23'을 22'와 유사한 방식으로 제조했다:
Figure 112017009030734-pct00096
f-사이클로(CTwKTC)T-OH (24')을, Fmoc-트레오닌(tBu)을 2-클로로트리틸 수지 상에 로딩하고, 후속의 아미노산을, Fmoc-S-트리틸-시스테인, Fmoc-트레오닌(tBu), Nα-Fmoc-Nε-Boc-라이신, Nα-Fmoc-Nin-Boc-D-트립토판, Fmoc-티로신(tBu), Fmoc-S-트리틸-시스테인, 및 Fmoc-D-페닐알라닌과 함께 표준 Fmoc 화학으로 추가하여 합성했다. 최종 탈보호를 95:2.5:2.5 TFA:물:트리이소프로필실란으로 처리하여 달성했다. 조 펩타이드를 건조시키고, 칭량하고, 1:1 아세토니트릴:물 에서 용해시키고, 메탄올 중 2 당량 요오드로 처리하여 사이클릭 디설파이드을 얻었다. 역상에서 정제하여 원하는 펩타이드를 얻었다.
화합물 25'-28'을 24'와 유사한 방식으로 제조했다:
Figure 112017009030734-pct00097
Figure 112017009030734-pct00098
DMF (2 mL) 및 디이소프로필에틸아민 (0.10 mL) 중 24' (50.0 mg, 0.0477 mmol)의 용액에 Boc2O (52.0 mg, 0.238 mmol)을 부가했다. 반응을 실온에서 2 시간 동안 교반하고, 그 다음 반응 혼합물을 30% 내지 90.1% AcOH을 갖는 물 중 5% 아세토니트릴로 용출하는 30 g C18 Isco 칼럼 상에 로딩하여 29' (42.0 mg, 0.0336 mmol, 70% 수율)을 얻었다.
화합물 30'-34'을 유사한 방식으로 제조했다:
Figure 112017009030734-pct00099
35'을, 1.49 g Sieber 아미드 수지 (0.67 mmol/g, 1.00 mmol)을 FMoc-S-트리틸-시스테인와 함께 충전하고, Fmoc-알라닌, Fmoc-알라닌, 및 Fmoc-트레오닌(tBu)을 표준 Fmoc 화학을 통해 부가하여 합성했다. 상기 수지를 95:3:2 디클로로메탄:트리이소프로필실란:TFA로 절단하고, 그 다음 분취 HPLC로 정제하여 35' (34.0 mg, 0.0514 mmol, 5.1% 수율)을 얻었다.
Figure 112017009030734-pct00100
플라스크에 Fmoc-S-트리틸-시스테인 사이클로헥실 아미드 (514 mg, 0.771 mmol), 및 물 (0.50 mL), TFA (10 mL) 및 트리이소프로필실란 (0.50 mL)을 충전했다. 반응을, 황색 색상이 사라질 때까지 실온에서 10 분 동안 교반하고, 모든 용매를 진공에서 제거했다. 잔여 잔류물을 DMF (2 mL)에서 용해시키고 DMF (8 mL) 중 2,2'-디티오디피리딘 (1.03 g, 4.68 mmol)의 용액을 부가했다. 100 mM pH 7.4 인산염 버퍼 (2.0 mL)을 적가하고, 그리고 반응을 실온에서 5 분 동안 교반했다. 그 다음 반응을 50 g C18 Isco 칼럼 상에 로딩하고, 0.1% AcOH을 갖는 물 중 35% 내지 95% 아세토니트릴로 용출하여 36' (174 mg, 0.326 mmol, 42% 수율)을 제공했다.
바이알에 36' (81.0 mg, 0.152 mmol)을 충전하고, 이것을 4:1 DMF:피페리딘 (2 mL) 에서 용해시켰다. 반응을 실온에서 30 분 동안 교반하고, 그리고 모든 용매를 진공에서 제거했다. 잔여 잔류물을 4:1 DMF:피페리딘 (2 mL)에서 재용해시키고, 실온에서 30 분 동안 교반하고, 그리고 모든 용매를 진공에서 다시 제거했다. 잔여 잔류물을 1:1 메탄올:톨루엔 (5 mL)에서 용해시키고, 모든 용매를 진공에서 제거하고, 임의의 잔류 피페리딘을 완벽하게 제거했다. 그 다음 조 아민 37'을 다음 후속의 반응에서 직접적으로 사용했다.
Figure 112017009030734-pct00101
플라스크에 29' (18.4 mg, 0.0147 mmol), S-Trt 시스테아민 (25.0 mg, 0.0783 mmol) 및 COMU (30.0 mg, 0.0700 mmol)을 충전했다. DMF (5 mL) 및 디이소프로필에틸아민 (0.10 mL)을 부가하고, 그리고 반응을 실온에서 24 시간 동안 교반했다. 반응 혼합물을, 0.2% AcOH을 갖는 물 중 5% 내지 95% 아세토니트릴로 용출하는 분취 HPLC로 정제하여, 38' (10.6 mg, 0.00684 mmol, 47% 수율)을 얻었다.
화합물 39'-50'을 38'와 유사한 방식으로 제조했다.
Figure 112017009030734-pct00102
Figure 112017009030734-pct00103
사이클로(CYwK(Boc)TC)T-OH (51')을, Fmoc-트레오닌(tBu)을 2-클로로트리틸 수지 상에 로딩하고, Fmoc-S-트리틸-시스테인, Fmoc-트레오닌(tBu), Nα-Fmoc-Nε-Boc-라이신, Nα-Fmoc-Nin-Boc-D-트립토판, Fmoc-티로신(tBu), 및 Fmoc-S-트리틸-시스테인을 표준 Fmoc 화학을 사용하여 부가하여 합성했다. N-말단 Fmoc 그룹을 절단하지 않고, 펩타이드를 95:2.5:2.5 TFA:물:트리이소프로필실란으로 수지로부터 절단하고, 1:1 아세토니트릴:물 중 요오드로 고리화하고, DMF 중 Boc2O 및 디이소프로필에틸아민으로 처리하고, 마지막으로 디클로로메탄 중 20% 디에틸아민으로 처리하고, 역상 크로마토그래피로 정제하여 51'를 제공했다.
화합물 52' 및 53'을 51'와 유사한 방식으로 제조했다.
Figure 112017009030734-pct00104
DMF (10 mL) 중 옥트레오타이드 아세테이트 (545 mg, 0.505 mmol)의 용액에 디이소프로필에틸아민 (0.50 mL)을 부가했다. 그 다음 용액을 -40 oC로 냉각하고, DMF (5 mL) 중 BocOSu (119 mg, 0.553 mmol)의 용액을 적가했다. 반응을 -40 oC에서 1 시간 동안 교반하고, 그 다음 1 시간에 걸쳐 최대 실온까지 서서히 따뜻하게 했다. 대부분의 DMF를 진공에서 제거하고, 그리고 잔여 잔류물을 50 g C18 Isco 칼럼 상에 로딩했다. 0.1% AcOH을 갖는 물 중 15% 내지 60% 아세토니트릴로 용출하여 Lys-Boc 옥트레오타이드 아세테이트 (54', 440 mg, 0.373 mmol, 74% 수율)을 1H NMR에 의한 >95% 위치선택성으로 얻었다.
Figure 112017009030734-pct00105
화합물 55', Lys-Boc 바프레오타이드를, 54'와 유사한 방식으로 제조했다.
Figure 112017009030734-pct00106
Fmoc-아스파르트산(tBu)을 2-클로로트리틸 수지 상에 로딩하고, Fmoc-아스파르트산(tBu), Fmoc-S-트리틸-시스테인, 및 Ac2O를 표준 Fmoc 화학을 사용하여 첨부했다. 펩타이드를 수지로부터 절단하고, 역상 크로마토그래피로 정제했다. 정제된 펩타이드 (50 mg, 0.067 mmol)을 디클로로메탄 (3 mL)에서 용해시키고, DCC (20.6 mg, 0.100 mmol) 및 HOSu (11.5 mg, 0.100 mmol)을 부가하고, 그리고 반응을 밤새 교반했다. 수득한 용액을 여과하고, 여과물을 진공에서 농축하고, 그리고 조 NHS 에스테르를 있는 그대로 사용했다.
Figure 112017009030734-pct00107
플라스크에 트리페닐메탄티올 (1.23 g, 4.45 mmol) 및 디클로로메탄 (7 mL), 디이소프로필에틸아민 (1.0 mL) 및 아크롤레인 (0.60 mL, 8.98 mmol)을 충전했다. 반응을 실온에서 1 시간 동안 교반하고, 그리고 모든 용매를 진공에서 제거하고 트리틸 3-머캅토프로피온알데하이드 (57', 1.48 g, 4.45 mmol)을 얻었고, 이것을 다음 단계에서 있는 그대로 사용했다.
Figure 112017009030734-pct00108
화합물 58' 및 59'을 화합물 57'와 유사한 방식으로 제조했다.
Figure 112017009030734-pct00109
플라스크에 에틸 1-피페라지닐아세테이트 (1.03 g, 6.02 mmol) 및 트리틸 3-머캅토프로피온알데하이드 (2.00 g, 6.02 mmol)을 충전했다. 시약을 디클로로메탄 (20 mL)에서 용해시키고, 아세트산 (0.10 mL)을 부가하고, 그리고 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (3.19 g, 15.0 mmol)을 부가했다. 반응을 실온에서 2 시간 동안 교반하고, 그 다음 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여 60' (1.80 g, 3.69 mmol, 61% 수율)을 제공했다.
60' (640 mg, 1.31 mmol)을 10:1 에탄올:물 (10 mL) 에서 용해시키고, 수산화리튬 (63.0 mg, 2.62 mmol)을 부가했다. 반응을 실온에서 2 시간 동안 교반하고, 그 다음 10% 시트르산으로 산성화했다. 수득한 고형물을 여과하고, 물로 세정하고, 건조하여 61' (400 mg, 0.870 mmol, 66% 수율)을 제공했다.
61' (76.3 mg, 0.167 mmol)을 디클로로메탄 (2 mL)에서 용해시켰다. DCC (51.5 mg, 0.250 mmol) 및 HOSu (28.8 mg, 0.250 mmol)을 부가하고, 반응을 밤새 교반하고, 그 다음 반응을 여과하고 여과물을 진공에서 농축했다. 수득한 NHS 에스테르를 다음 단계에서 있는 그대로 사용했다.
Figure 112017009030734-pct00110
디클로로메탄 (15 mL) 중 61' (450 mg, 0.978 mmol)의 용액에 CDI (190 mg, 1.17 mmol)을 고형물로서 부가했다. 반응을 실온에서 30 분 동안 교반하고, 그 다음 N,O-디메틸하이드록실아민 하이드로클로라이드 (114 mg, 1.17 mmol)을 고형물로서 부가했다. 반응을 실온에서 4 시간 동안 교반하고, 반응을 물 (15 mL)로 세정하고, 유기 층을 건조시키고 진공에서 농축하여 63' (200 mg, 0.398 mmol, 41% 수율)을 얻었다.
THF (5 mL) 중 63' (50 mg, 0.099 mmol)의 용액에, 0 oC에서, 리튬 수소화알루미늄 (0.13 mL, THF 중 1M, 0.13 mmol)의 용액을 부가했다. 반응을 0 oC에서 2 시간 동안 교반하고, 그 다음 1 N HCl (5 mL) 으로 켄칭하고 에틸 아세테이트 (10 mL)로 추출했다. 유기 층을 MgSO4로 건조시키고, 진공에서 농축하여 조 64' (20 mg, 0.045 mmol, 45% 수율)을 제공했고, 이것을 다음 단계에서 있는 그대로 사용했다.
Figure 112017009030734-pct00111
화합물 65'을 화합물 64'와 유사한 방식으로 제조했다.
Figure 112017009030734-pct00112
플라스크에 66' (200 mg, 0.388 mmol)을 충전하고, 이것을 4:1 DMF:디에틸아민 (10 mL) 에서 용해시켰다. 반응을 실온에서 4 시간 동안 교반하고, 그리고 용매를 진공에서 제거했다. 잔류물을 몇 방울의 디클로로메탄 에서 용해시키고, 디에틸 에테르 (20 mL)을 부가하여 생성물이 침전되었다. 조 67'를 여과하고, 그리고 다음 단계에서 직접적으로 취했다.
조 67'을 DMF (5 mL)에서 용해시키고, 그리고 트리틸 3-머캅토프로피온산 NHS 에스테르 (173 mg, 0.388 mmol)을 부가하고, 그 다음 디이소프로필에틸아민 (0.30 mL)을 부가했다. 반응을 실온에서 3 시간 동안 교반하고, 그리고 반응을 분취 HPLC로 정제하여 68' (140 mg, 0.224 mmol, 58% 수율)을 제공했다.
바이알에 68' (40 mg, 0.064 mmol), DCC (14 mg, 0.064 mmol) 및 HOSu (7.4 mg, 0.064 mmol)을 충전했다. 디클로로메탄 (2 mL)을 부가하고, 반응을 실온에서 16 시간 동안 교반하고, 그리고 반응을 여과하고, 여과물을 수집하고 진공에서 농축하고, 그리고 조 69'을 직접적으로 다음 단계에서 사용했다.
Figure 112017009030734-pct00113
플라스크에 N-Boc D-티로신 메틸 에스테르 (1.00 g, 3.39 mmol), 트리페닐포스핀 (977 mg, 3.73 mmol), 및 S-트리틸-2-머캅토에탄올 (1.08 g, 3.39 mmol)을 충전했다. 질소 하에서, THF (20 mL)을 부가하고, 그 다음 디에틸아조디카복실레이트 (0.64 mL, 4.1 mmol)을 적가했다. 반응을 실온에서 16 시간 동안 교반하고, 그리고 용매를 진공에서 제거하고, 그리고 잔여 잔류물을 분취 HPLC로 정제하여 70' (880 mg, 1.48 mmol, 44% 수율)을 제공했다.
70' (880 mg, 1.48 mmol)을 에탄올 (20 mL) 및 물 (2 mL) 에서 용해시키고, 수산화리튬 (72 mg, 3.0 mmol)을 부가했다. 반응을 실온에서 3 시간 동안 교반하고, 그리고 반응을 분취 HPLC로 정제하여 71' (820 mg, 1.41 mmol, 95% 수율)을 제공했다.
바이알에 71' (58 mg, 0.10 mmol), DCC (21 mg, 0.10 mmol) 및 HOSu (11 mg, 0.10 mmol)을 충전했다. 디클로로메탄 (2 mL)을 부가하고, 반응을 실온에서 16 시간 동안 교반하고, 그 다음 여과했다. 여과물을 진공에서 농축하고, 그리고 수집된 조 72'을 직접적으로 다음 단계에서 사용했다.
Figure 112017009030734-pct00114
DMF (3 mL) 중 52' (62.0 mg, 0.0539 mmol)의 용액에 트리틸 3-머캅토프로피온산 NHS 에스테르 (90.0 mg, 0.202 mmol)을 부가했다. 디이소프로필에틸아민 (0.20 mL)을 부가하고, 그리고 반응을 실온에서 24 시간 동안 교반했다. 그 다음 반응 혼합물을 30 g C18 Isco 칼럼 상에 로딩하고, 0.1% AcOH을 갖는 물 중 5% 내지 95% 아세토니트릴로 용출하여 73' (43.1 mg, 0.0291 mmol, 54% 수율)을 제공했다.
화합물 74'-85'을 73'와 유사한 방식으로 제조했다.
Figure 112017009030734-pct00115
Figure 112017009030734-pct00116
54' (413 mg, 0.350 mmol)을 디클로로메탄 (10 mL), 메탄올 (3 mL) 및 아세트산 (0.25 mL) 에서 용해시켰다. 57' (180 mg, 0.541 mmol)을 부가하고, 그 다음 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (115 mg, 0.541 mmol)을 부가했다. 반응을 실온에서 2 시간 동안 교반하고, 그리고 모든 용매를 진공에서 제거했다. 잔여 잔류물을 최소량의 DMF 에서 용해시키고, 50 g C18 Isco 칼럼 상에 로딩했다. 0.1% TFA를 갖는 물 중 15% 내지 85% 아세토니트릴로 용출하여 86'을 트리플루오로아세테이트 염 (389 mg, 0.251 mmol, 72% 수율)으로서 제공했다.
화합물 87'-94'을 86'와 유사한 방식으로 제조했다:
Figure 112017009030734-pct00117
Figure 112017009030734-pct00118
디클로로메탄 (1 mL) 및 디이소프로필에틸아민 (0.20 mL) 중 p-니트로페닐 클로로포르메이트 (145 mg, 0.719 mmol)의 용액에 디클로로메탄 (2 mL) 중 S-트리틸 시스테아민 (168 mg, 0.526 mmol)의 용액을 부가했다. 반응을 실온에서 5 분 동안 교반하고, 그리고 반응 혼합물을 24 g 실리카겔 칼럼 상에 직접적으로 로딩했다. 헵탄 중 0% 내지 30% 에틸 아세테이트로 용출하여 95' (120 mg, 0.247 mmol, 47% 수율)을 제공했다.
Figure 112017009030734-pct00119
THF (3 mL) 및 디이소프로필에틸아민 (0.50 mL) 중 54' (162 mg, 0.137 mmol)의 용액에 THF (1 mL) 중 95' (120 mg, 0.247 mmol)의 용액을 부가했다. DMAP (36.6 mg, 0.300 mmol)을 고형물로서 부가하고, 그리고 반응을 50 oC에서 6 시간 동안 교반했다. 모든 용매를 진공에서 제거하고, 그리고 잔여 물질을0.1% AcOH을 갖는 물 중 15% 내지 95% 아세토니트릴로 용출하는 30 g C18 Isco 칼럼 상에 로딩하여, 96' (201 mg, 0.137 mmol, 100% 수율)을 제공했다.
Figure 112017009030734-pct00120
바이알에 88' (30.0 mg, 0.0190 mmol), COMU (16.0 mg, 0.0.0374 mmol), 및 11' (35.0 mg, 0.0896 mmol)을 충전했다. 디클로로메탄 (2 mL) 및 디이소프로필에틸아민 (0.20 mL)을 부가하고, 그리고 반응을 실온에서 20 시간 동안 교반했다. 용매를 진공에서 제거하고, 그리고 잔여 물질을 30 g C18 Isco 칼럼 상에 로딩하고, 40% 내지0.1% AcOH을 갖는 물 중 95% 아세토니트릴로 용출하여 97' (16.6 mg, 0.00903 mmol, 47% 수율)을 제공했다.
Figure 112017009030734-pct00121
S-트리틸-L-시스테인 에틸렌디아민 아미드 (40.0 mg, 0.0986 mmol) 및 글루타르산 무수물 (45.0 mg, 0.395 mmol)을 DMF (2 mL)에서 용해시켰다. 반응을 실온에서 16 시간 동안 교반하고, 그리고 반응 혼합물을 분취 HPLC로 정제하여 98' (30.0 mg, 0.0473 mmol, 48% 수율)을 제공했다.
Figure 112017009030734-pct00122
바이알에 98' (8.0 mg, 0.0126 mmol), 54' (28.2 mg, 0.0252 mmol), EDC (5.8 mg, 0.030 mmol) 및 HOBt (4.1 mg, 0.30 mmol)을 충전했다. DMF (2 mL) 및 디이소프로필에틸아민 (9 μL, 0.05 mmol)을 부가하고, 그리고 반응을 35 oC에서 16 시간 동안 교반했다. 그 다음 반응을 분취 HPLC로 정제하여 99' (21.0 mg, 0.00740 mmol, 59% 수율)을 얻었다.
DM1 콘주게이트의 합성
Figure 112017009030734-pct00123
플라스크에 DM-1 (41.8 mg, 0.0566 mmol), 및 디클로로메탄 (2 mL), 디이소프로필에틸아민 (0.10 mL) 및 아크롤레인 (0.25 mL)을 충전했다. 반응을 실온에서 5 분 동안 교반하고, 그리고 모든 용매를 진공에서 제거했다. 잔여 잔류물을 디클로로메탄 (1 mL) 및 톨루엔 (0.5 mL) 에서 재용해시키고, 용매를 진공에서 다시 제거하고, 임의의 잔류 아크롤레인을 완벽하게 제거했다. 잔여 잔류물에 디클로로메탄 (2 mL) 및 아세트산 (0.05 mL) 중 54' (61.0 mg, 0.0517 mmol)의 용액을 부가했다. 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (11.5 mg, 0.0523 mmol)을 고형물로서 부가하고, 그리고 반응을 실온에서 1 시간 동안 교반했다. 모든 용매를 진공에서 제거하고, 그리고 잔여 잔류물을 TFA (3 mL) 에서 용해시켰다. 반응을 실온에서 5 분 동안 교반하고, 그리고 대부분의 TFA를 진공에서 제거했다. 잔여 물질을 분취 HPLC (0.2% AcOH을 갖는 물 중 5% 내지 55% 아세토니트릴)로 정제하여 콘주게이트 100을 아세테이트 염 (7.6 mg, 0.0040 mmol, 7.6% 수율)을 제공했다. LCMS M/Z: 899.0 [(M + 2) / 2].
Figure 112017009030734-pct00124
DMF (8 mL) 및 디이소프로필에틸아민 (1 mL) 중 2,2'-디티오디피리딘 (1.24 g, 5.65 mmol)의 용액에 2 mL DMF 중 DM-1 (417 mg, 0.565 mmol)의 용액을 5분에 걸쳐 적가했다. 반응을 실온에서 추가 30 분 동안 교반하고, 반응 혼합물을 C18 Isco 골드 칼럼 상에 로딩했다. 물 중 25% 내지 85% 아세토니트릴로 용출하여 DM1-SSPy (287 mg, 0.339 mmol, 60% 수율)을 제공했다. LCMS M/Z: 847.3 [M + 1].
Figure 112017009030734-pct00125
바이알에 4' (20.0 mg, 0.0209 mmol), 및 DMF (2 mL) 중 DM-1/SSPy (17.7 mg, 0.0209 mmol)의 용액을 충전했다. 100 mM pH 7.4 인산염 버퍼 (1.0 mL)을 빠르게 교반하면서 적가하고, 반응을 추가 5 분 동안 실온에서 교반했다. 반응 혼합물을 분취 HPLC (0.2% AcOH을 갖는 물 중 5% 내지 65% 아세토니트릴)로 정제하여 콘주게이트 10 (22.1 mg, 0.0126 mmol, 60% 수율)을 아세테이트 염으로서 제공했다. LCMS M/Z: 837.5 [(M + 2 - H2O) / 2].
Figure 112017009030734-pct00126
DM-1 콘주게이션 방법 A: 바이알에 8' (20.2 mg, 0.0159 mmol), 및 물 (0.025 mL), TFA (1 mL) 및 트리이소프로필실란 (0.025 mL)을 충전했다. 반응을 실온에서 5 분 동안 교반하고, 그리고 모든 용매를 진공에서 제거했다. 잔여 잔류물에 DMF (3 mL) 중 DM-1/SSPy (13.5 mg, 0.0159 mmol)의 용액을 부가했다. 교반하면서, 100 mM pH 7.4 인산염 버퍼 (1 mL)을 적가하고, 그리고 반응을 추가 5 분 동안 실온에서 교반했다. 그 다음 반응을 아세트산 (0.25 mL)로 산성화했다. 그 다음 반응 혼합물을 분취 HPLC (0.2% AcOH 중 물을 갖는 5% 내지 70% 아세토니트릴)로 정제하여 콘주게이트 14 (9.3 mg, 0.0054 mmol, 34% 수율)을 아세테이트 염으로서 제공했다. LCMS M/Z: 832.3 [(M + 2) / 2].
Figure 112017009030734-pct00127
DM-1 콘주게이션 방법 B: 바이알에 22' (21.2 mg, 0.0177 mmol) 및 TFA (1 mL)을 충전했다. 반응을 실온에서 5 분 동안 교반하고, 그리고 모든 용매를 진공에서 제거했다. 잔여 잔류물에 DMF (2 mL) 중 DM-1 (13.1 mg, 0.0177 mmol)의 용액을 부가했다. 교반하면서, 100 mM pH 7.4 인산염 버퍼 (1 mL)을 적가하고, 그리고 그 다음 반응을 실온에서 추가 5 분 동안 교반했다. 반응을 아세트산 (0.25 mL)의 부가로 산성화하고, 반응 혼합물 분취 HPLC (0.2% AcOH을 갖는 물 중 5% 내지 75% 아세토니트릴)로 정제하여 콘주게이트 22 (20.2 mg, 0.0114 mmol, 64% 수율)을 아세테이트 염으로서 제공했다. LCMS M/Z: 860.5 [(M + 2) / 2].
Figure 112017009030734-pct00128
DM-1 콘주게이션 방법 C: 바이알에 7 (25.7 mg, 0.0233 mmol), 및 TFA (1 mL)을 충전했다. 반응을 실온에서 5 분 동안 교반하고, 그리고 모든 용매를 진공에서 제거했다. 잔여 잔류물에 DMF (4 mL) 중 DM-1 (17.2 mg, 0.0233 mmol)의 용액을 부가하고, 그 다음 디이소프로필에틸아민 (0.25 mL)을 부가했다. 반응을 실온에서 10 분 동안 교반하고, 그리고 그 다음 아세트산 (0.40 mL)의 부가로 산성화했다. 그 다음 반응 혼합물을 분취 HPLC (0.2% AcOH 중 물을 갖는 5% 내지 70% 아세토니트릴)로 정제하여 콘주게이트 12 (25.6 mg, 0.0142 mmol, 61% 수율)을 아세테이트 염으로서 제공했다. LCMS M/Z: 872.0 [(M + 2) / 2].
Figure 112017009030734-pct00129
57A의 합성. Fmoc-시스테인(Trt)-OH를 2-클로로트리틸 수지 (25.0 g 수지, 100-200, 1 meq/g 로딩물) 상에 로딩했다. 4:1 DMF:피페리딘으로 반복적으로 탈보호하고, 그 다음 Fmoc-트레오닌(tBu)-OH, Nα-Fmoc-Nε-Boc-라이신, Nα-Fmoc-Nin-Boc-D-트립토판, Fmoc-티로신(tBu), Fmoc-시스테인(Trt)-OH, 및 Boc-D-페닐알라닌으로, 표준 SPPS 조건 (Nature Prot. 2012, 432)을 사용하여 커플링하여 수지에 결합된 선형 펩타이드를 얻었다. 8 g의 수지 (0.338 mmol/g)을, 요오드 (3 equiv.)을 함유하는 DMF (80 mL)와 함께, 3 시간 동안 RT에서 교반하고, 그 다음 여과하고 DMF (2 X 40 mL)로 세정했다. 수지를 DMF (80 mL) 중 요오드 (3 equiv.)에 3 시간 내에 재제공했다. 수지를 DMF (2 X 40 mL), 그 다음 DCM (2 X 40 mL)로 세정하고 수지를 진공에서 RT에서 건조시켰다.
수지 (8 g, 0.338 mmol/g)을 DCM (80 mL)에서 팽윤시키고 헥사플루오로이소프로판올 (30 mL)을 RT에서 ~1 분에 걸쳐 부가했다. 수득한 혼합물을 30 분 동안 RT에서 교반하고, 그 다음 여과하고 DCM (2 X 40 mL)로 세정했다. 여과물을 진공에서 20-25C에서 농축했다. 수지를 DCM (80 mL) 및 헥사플루오로이소프로판올 (30 mL)를 갖는 절단 조건에 제공하고, 30 분 동안 교반하고, 그 다음 여과하고 DCM (2 X 40 mL)로 세정했다. 여과물을 감압 하에서 20-25 ℃에서 증발시켰다. 조 잔류물을 MTBE (최소량) 에서 용해시키고, 그 다음 RT에서에서 교반된 n-헵탄에 적가하여 침전물을 생산했다. 고형물을 여과하고 RT에서 건조하여 57A (2.95 g, 2.17 mmol, 80 % 수율)을 얻었다. LCMS M/Z: 1361 [M + 1].
Figure 112017009030734-pct00130
100 mL RBF에 57A (2.73 g, 2.01 mmol) 및 (2R)-2-아미노-3-트리틸설파닐-프로판아미드 (728.60 mg, 2.01 mmol)을 충전했다. 디클로로메탄 (27.00 mL)을 부가하고 그 다음 디이소프로필에틸아민 (519.54 mg, 4.02 mmol) 및 HATU (840.69 mg, 2.21 mmol)을 부가했다. 1.5 시간 후, 전환은 HPLC/MS에 의해 완료되었다. 27 g 실리카겔 (10 weighs)을 용융된 유리 깔때기에 충전했다. 40:60 TBME/DCM을 사용하여 실리카를 습성화했다. DCM 용액을 실리카겔의 최상부 상에 부가하고, 그 다음 40:60 TBME/DCM (250 mL), 그 다음 40:60 TBME/DCM (250 mL) 중2% 이소프로판올로 용출했다. 여과물을 증발시켰다. 원하는 생성물 57B을 수득했다.　(3.16 g, 92% 수율)을 얻었다. LCMS M/Z: 1705 [M + 1].
Figure 112017009030734-pct00131
탈보호 방법 A. 57B (500.00 mg, 293.23 umol)을 50 mL RBF에 충전하고, 2,2'-디티오디피리딘 (129.85 mg, 589.39 umol) 및 트리이소프로필실란 (386.81 mg, 2.44 mmol)을 부가하고, 그 다음 헥사플루오로이소프로판올 (8 mL), 그 다음 헥사플루오로이소프로판올 (8 mL) 중8 mL의 0.5 M HCl를 부가했다. 2 시간 후, HPLC/MS는 완벽한 전환을 보여주었다. 용액을 TBME (30 mL)에 서서히 부가하고 형성된 침전물을 여과하고, 그 다음 TBME (30 mL)로 세정했다. 고형물을 1 M AcOH (8 mL) 에서 용해시키고 용액을 RT에서 2 시간 동안 교반했다. HPLC/MS은 원하는 생성물로의 완벽한 전환을 보여주었다. 조 혼합물을 100 g C18 Isco 골드 칼럼 상에에 직접적으로 주입했다. 칼럼을 360 mL (3 용적) 100 mM 암모늄 아세테이트으로 씻어 내고, 그 다음 0.1% AcOH(2 용적)을 갖는 물 중 5% 아세토니트릴으로 다시 평형을 이루고 0.1% AcOH을 갖는 물 중 5% 내지 30% 아세토니트릴의 구배를 사용하여 24 분 동안 용출했다. 순수한 분획을 동결건조하여 57C을 아세테이트 염으로서 얻었다. LCMS M/Z: 1160 [M + 1].
Figure 112017009030734-pct00132
탈보호 방법 B. 플라스크에 57C (502 mg, 0.294 mmol)을 충전했다. 별개의 바이알에 TFA (8.8 mL), 트리이소프로필실란 (0.20 mL), 물 (0.50 mL), 및 티오아니솔 (0.50 mL)을 충전했다. 이러한 바이알을, 혼합물이 균질해질 때까지 진탕하고, 그 다음 탈보호 칵테일을 고형물 57C에 부가했다. 플라스크를, 모들 것이 용해될 때까지 교반하고, 그 다음 실온에서 추가 30 분 동안 교반했다. HPLC/MS는 완벽한 탈보호를 보여준다. TFA를, 반응 혼합물의 용적이 하기일 때까지 진공에서 제거했다: 1 mL. 에탄올 (30 mL)을 반응물에 부가하고, 용액을 0 ℃로 냉각하고, 그 다음 10 mL 에탄올 중 2,2'-디티오디피리딘 (130 mg)의 용액을 부가했다. 용액을 0°C에서 1 시간 동안 교반하고, 그 다음 실온에서 2 시간 동안 교반했다. HPLC/MS는 SSPy 생성물로의 완변한 전환을 보여주었다. 피리딘 (5 mL)을 부가하고, 용액을 실온에서 5 분 동안 교반하고, 그 다음 모든 용매를 진공에서 제거했다. 잔류물을 물 중 2 mL DMF 및 8 mL 1% AcOH 에서 용해시키고, 100 g C18 Isco 골드 칼럼 상에 로딩했다. 칼럼을 360 mL (3 용적) 100 mM 암모늄 아세테이트으로 씻어 내고, 그 다음 0.1% AcOH(2 용적)을 갖는 물 중 5% 아세토니트릴으로 다시 평형을 이루고 0.1% AcOH을 갖는 물 중 5% 내지 30% 아세토니트릴의 구배를 사용하여 24 분 동안 용출했다. 순수한 분획을 동결건조하여 57C을 아세테이트 염으로서 얻었다. 241 mg 단리된 (61.5% 수율). LCMS M/Z: 1160 [M + 1].
Figure 112017009030734-pct00133
100 mL RBF를 57C 비스-아세테이트 염 (210 mg, 0.164 mmol)을 충전하고 이것을 THF (4 mL) 및 0.2M AcOH (3.6 mL) 및 0.2M NaOAc (0.4 mL) 에서 용해시켰다. 57C을 분취량의 2 uL의 분취량을 취하여 LCMS으로 확인하고 50 uL 메탄올에서 용해시키고, 아래의 방법으로 수행했다. 반응 혼합물에 THF (4 mL) 중 DM-1 (124 mg, 0.167 mmol)의 용액을 부가했다. 반응을 실온에서 1 시간 동안 교반했다. 2 uL 분취량을 제거하고, 50 uL 메탄올로 희석하고, LCMS로 확인했다. BT-891의 면적: BT-976의 면적은 280 nm에서> 10:1였고, 상기 반응은 완료된 것으로 판단되었다. 모든 용매를 진공에서 제거하고, 35 ℃의 배쓰 온도로, 10 mbar에서 45 분 동안 모든 물을 제거했다. 잔여 잔류물을 1 mL DMF에서 용해시키고, 이것을 3 mL 수성 1% 아세트산으로 희석했다. 이러한 용액을 50 g RediSep Rf Gold C18 칼럼 (20-40 마이크론 입자 크기) 상에 로딩했다. 또 다른 1 mL DMF 및 3 mL 1% 아세트산을 반응물 플라스크에 부가하고, 이것을 또한 C18 칼럼 상에 로딩했다. 40 mL/min 구배로 용출된 칼럼, 17 min 시행. 2 min @ 0.1% AcOH을 갖는 물 중 5% 아세토니트릴, 그 다음 0.1% AcOH을 갖는 물 중 5% 내지 40% 아세토니트릴의 15 분 구배. 생성물을 단일 피크 약 35% 아세토니트릴로서 용출했다.　용출된 분획을 수집하고, 대부분의 용매를, 총 용적이 5 mL가 될 때까지 진공에서 제거했다. 이러한 용액을 앰버 바이알로 이동시키고, 5 mL의 아세토니트릴:물의 1:1 혼합물을 사용하여 플라스크를 헹구고, 앰버 바이알로 이동시켰다. 2 uL 분취량을 50 uL 메탄올로 희석하고, 아래의 LCMS 방법으로 체크했다. 수득한 용액을 드라이아이스/아세톤 배쓰에 넣어서 냉동하고, 벤치톱 동결 건조기에서 200 밀리토르에서 3일 동안 건조시켰다. 57을 비스-아세테이트 염 (262 mg, 0.137 mmol, 84% 수율)로서 단리했다. LCMS M/Z: 893.4 [(M + 2) / 2].
표 13: DM1 콘주게이트의 합성
Figure 112017009030734-pct00134
Figure 112017009030734-pct00135
실시예 15 : 약물 콘주게이트의 나노입자 제형
본 발명의 임의의 콘주게이트일 수 있는, 전형적인 콘주게이트 X의 나노입자 제형. 콘주게이트 X는 단일 수중유 에멀젼 방법을 사용하여 폴리머성 나노입자에서 성공적으로 캡슐화되었다 (하기 표 14를 참고한다). 전형적인 물-에멀젼 방법에서, 약물 콘주게이트 및 적합한 폴리머 또는 블록 코폴리머 또는 폴리머/블록 코폴리머의 혼합물을 유기 용매 예컨대 디클로로메탄 (DCM), 에틸 아세테이트 (EtAc) 또는 클로로포름에 용해시켜 오일상을 형성했다. 보조용매 예컨대 디메틸 포름아미드 (DMF) 또는 아세토니트릴 (ACN) 또는 디메틸 설폭사이드 (DMSO) 또는 벤질 알코올 (BA)을 때때로 사용하여 나노입자의 크기를 조절하고/하거나 약물 콘주게이트를 가용화시켰다. PLA97-b-PEG5, PLA35-b-PEG5 및 PLA16-b-PEG5 코폴리머를 포함한 다양한 폴리머를 제형에 사용했다. 표면활성제 예컨대 Tween® 80, 나트륨 콜레이트, Solutol® HS 또는 인지질을 수성상에 사용하여 미세 에멀젼의 형성을 보조했다. 유화제 (예컨대 Tween 80)를 전형적인 10%/90% v/v 오일/물 비로 함유한 계속해서 교반된 수성상에 오일상을 서서히 부가하고, 회전자-고정자 균질기 또는 초음파 배쓰를 사용하여 조악한 에멀젼을 제조했다. 그 다음 조악한 에멀젼을 N=4 통과 동안 고압 균질기 (10,000 psi에서 작동됨)를 통해 가공하여 나노에멀젼을 형성했다. 그 뒤에 나노에멀젼을 주사 품질 물용 차가운 (0-5 ℃) 물로의 10-배 희석물로 켄칭시켜 나노에멀젼 액적에서 대부분의 에틸 아세테이트 용매를 제거하여 에멀젼 액적을 경화시키고 나노입자 서스펜션을 형성했다. 일부 경우에, 휘발성 유기 용매 예컨대 디클로로메탄은 회전식 증발로 제거될 수 있다. 접선 유동 여과 (500 kDa MWCO, mPES 막)를 사용하여 나노입자 서스펜션을 농축시키고 이를 주사 품질 물용 물 (표면활성제/염의 존재 또는 부재)로 세정했다. 유리 약물 콘주게이트를 다양한 기술을 사용하여 나노서스펜션으로부터 제거했다. 긴장제로서 또한 사용되는 동결보호제 (예를 들면, 10% 수크로오스)를 나노입자 서스펜션에 부가하고, 제형을 0.22 μm 필터를 통해 멸균 여과했다. 제형을 ≤ -20℃에서 냉동 보관했다. 나노입자의 역학적 광 산란에 의해 결정된 다분산도 지수 (PDI) 및 입자 크기 (Z-avg.)는 하기 표에 요약된 바와 같이 역학적 광 산란으로 확인되었다. 실제 약물 부하를 HPLC 및 UV-가시광 흡광도를 사용하여 측정했다. 이것은 공지된 용적의 나노입자 용액으로부터 물을 증발시키고 적절한 용매 예컨대 DMF에 고형물을 용해시킴으로써 달성되었다. 약물 농도는 증발 후 회수된 총 고형물에 대해 정규화되었다. 캡슐화 효율을 실제 및 이론적 약물 부하 사이의 비로서 계산했다.
콘주게이트 X 의 소수성 이온-짝짓기 (HIP)를 사용한 제형화
일부 예에서, HIP 기술을 사용하여 콘주게이트 X의 친유성을 증진시켰다. 콘주게이트 X 는 1종 이상의 양으로 하전된 모이어티를 갖는다. 매 한 분자의 콘주게이트에 대해 음으로 하전된 반대 이온 예컨대 디옥틸 나트륨 설포석시네이트 (AOT) 분자를 사용하여 HIP를 형성했다. 콘주게이트 X 및 AOT를 메탄올, 디클로로메탄 및 물 혼합물에 부가하고, 1 시간 동안 진탕시켰다. 이 혼합물에 디클로로메탄 및 물의 추가의 부가 후, X/AOT HIP를 디클로로메탄 상으로부터 추출하고 건조시켰다. 일부 구현예에서, HIP 복합물을 가용화시키는데 DMF를 사용했다. 제형화 결과는 하기 표 14에 요약된다.
표 14 : 콘주게이트 76 , 10 및 78
Figure 112017009030734-pct00136
이들 데이터는 나노입자에서 콘주게이트 X의 효율적인 캡슐화를 위한 조건이 발명될 수 있음을 입증한다.
실시예 16: H524 세포에서 IC 50
본 발명의 콘주게이트는 세포 증식의 저해를 평가하는 시험관내 검정에서 평가되었다. NCI-H524 (ATCC) 인간 폐암 세포를 96 웰, V-바닥 플레이트 (Costar)에 5,000 세포/웰의 농도로 플레이팅했다. 24 시간 후, 세포를 콘주게이트로 2 시간 동안 처리하고, 70 시간 동안 추가로 인큐베이션하거나 또는 옥트레오타이드 경쟁 실험을 위해 100 μM 옥트레오타이드로 30 분 동안 처리한 후 콘주게이트로 2 시간 동안 처리하고, 70 시간 동안 추가로 인큐베이션했다. 콘주게이트 초기 용량은 20 μM이었고, 총 10 포인트를 위해 3배 연속 희석이 행해졌다. 2 시간의 처리 후, 세포를 스핀다운하고, 약물 함유 배지를 제거하고, 새로운 완전 배지를 부가하고 이를 세포를 재현탁시키는데 사용하고, 이것을 다시 스핀했다. 세정 배지의 제거 후, 상기 세포를 완전 배지에서 재현탁시킨 후 백색 벽의, 편평한 바닥 96 웰 플레이트로 이동시켰다. 세포를 추가의 70 시간 동안 추가로 인큐베이션하여 세포 증식의 저해를 측정했다. 증식은 표준 프로토콜 (Promega) 및 Glomax multi + 검출 시스템 (Promega)을 사용하여 CellTiter Glo 시약을 사용하여 측정되었다. 증식 저해 퍼센트는 하기 식을 사용하여 계산되었다: % 저해 = (대조군-처리)/ 대조군 *100. 대조군은 비히클 단독으로서 정의된다. IC50 곡선은 GraphPad Prism 6에 의한 비선형회귀 분석 (4개의 파라미터)을 사용하여 생성되었다. DM1을 포함하는 콘주게이트에 대한 IC50 값은 하기 표 15에서 보여졌다. 이들 데이터는, 콘주게이트가 소마토스타틴에 결합하고 수용체를 내재화하는 능력을 보유한다는 것을 입증한다. 일부 예에서 이것은 또한, 링커가 절단되어 종양 세포를 효과적으로 사멸시키는 세포독성 페이로드를 활성화시킨다는 것을 보여준다.
실시예 17: 수용체에 대한 활성 의존성
본 발명의 콘주게이트는 소마토스타틴 수용체에 대한 그것의 활성 의존성에 대해 시험되었다. 콘주게이트에서 활성제 Z는 아우리스타틴, 카바지탁셀, DM1, 독소루비신, 백금, SN-38 및 빈블라스틴으로부터 선택되었다. 활성제 Z는 다양한 링커와 함께 옥트레오타이드에 연결된다. 콘주게이트의 증식 IC50 값을 측정했다. 옥트레오타이드 경쟁이 없는 콘주게이트의 증식 IC50 값을 또한 측정했다. 옥트레오타이드 경쟁을 갖는 IC50과 옥트레오타이드 경쟁이 없는 IC50의 비는 도 3에서 보여졌다. 옥트레오타이드 경쟁을 갖는 IC50과 옥트레오타이드 경쟁이 없는 IC50의 비는 활성이 소마토스타틴 수용체에 대한 결합에 적어도 부분적으로 의존적인지 여부의 지표이다. DM1을 포함하는 콘주게이트는, 옥트레오타이드 경쟁을 갖는 것보다 옥트레오타이드 경쟁의 부재 하에, 1 초과의 비율을 나타냈으며, 이는 더 낮은 IC50, 즉, 더 나은 효능을 나타냈다. 따라서, DM1을 포함하는 콘주게이트의 활성은 소마토스타틴 수용체에 대한 결합에 의존적이다.
옥트레오타이드 경쟁을 갖는 DM1을 포함하는 콘주게이트에 대한 IC50 값은 하기 표 15에서 보여졌다. 표 15의 결과는 모든 DM1을 포함하는 콘주게이트에 대한 IC50 값이 옥트레오타이드 경쟁에 따라 증가했음을 보여주며, 이는 DM1을 포함하는 콘주게이트의 효능이 옥트레오타이드 경쟁에 따라 감소했음을 의미한다. DM1 단독은 옥트레오타이드 경쟁을 갖는 IC50 값의 그와 같은 변화를 나타내지 않았다. 따라서, DM1을 포함하는 콘주게이트의 효능은 소마토스타틴 수용체에 대한 콘주게이트의 결합에 적어도 부분적으로 의존한다.
실시예 18: H69 종양 DM-1 수준
종양에 축적되는 본 발명의 콘주게이트의 능력을 조사하기 위해, 쥣과 암 모델을 사용했다. 모든 마우스를 실험실 동물의 인간 케어 및 사용에 대한 OLAW 공중 보건 서비스 정책(OLAW Public Health Service Policy on Human Care and Use of Laboratory Animals) 및 실험실 동물의 케어 및 사용을 위한 ILAR 가이드(ILAR Guide for the Care and Use of Laboratory Animals)에 따라 처리했다. 모든 생체내 연구를 블렌드 치료제 동물실험윤리위원회(Blend Therapeutics Institutional Animal Care and Use Committee)에 의해 승인된 프로토콜에 따라서 수행했다. 동물을 오른쪽 옆구리에 피하 주사를 통해 1:1 RPMI 1640 (Invitrogen, Carlsbad, CA)/Matrigel® (BD Biosciences, San Jose, CA) 중 2.5 x 10^6 NCI-H69 SCLC (소세포 폐암) 세포로 예방접종했다. 종양이 ~500 mm3의 근사 용적에 도달하게 하였다. 그 다음 동물을 시점당 3 마리 동물의 치료 그룹으로 무작위 배정하고, DM-1 (주사용 물 중 10% 프로필렌 글리콜)에 대해 1 mg/kg (유리 콘주게이트의 경우 주사용 물 중 10% 프로필렌 글리콜, 또는 나노입자 경우 10% 수크로오스), 또는 0.4 mg/kg으로 투여했다. 24 시간 시점을 콘주게이트에 걸쳐 기준점으로 사용했다.
종양 DM-1 수준을 액체 크로마토그래피 질량 분광분석법 (LC/MS-MS)으로 측정했다. 1 파트 종양 v/w에 대해 4 용적의 5 mM 6-말레이미도헥산산을 부가하고, 휴대용 균질기로 약 10-15 초 동안 균질화했다. 10 μL의 500 mM 트리스(2-카복시에틸)포스핀을 100uL의 종양 균질물에 부가하고, 잘 혼합하고, 실온에서 약 5-15 분 동안 인큐베이션했다. 200-300uL의 아세토니트릴을 사용하여 종양 균질물 중 단백질을 침전시키고, 샘플을 5 분 동안 원심분리하고, DM-1 분석을 위해 상청액을 LC/MS-MS 시스템에 주입했다. H69 종양 DM-1 수준은 표 15에서 보여졌다.
표 15: DM1 콘주게이트에 대한 H524 세포 검정 및 생체내 종양 흡수 결과
Figure 112017009030734-pct00137
Figure 112017009030734-pct00138
실시예 19: 종양 성장에 대한 콘주게이트 10 및 콘주게이트 10 NP6 화합물의 효과 및 약동학 연구
출원인은 콘주게이트 및 콘주게이트의 나노입자 제형의 생체내 활성을 평가했다. 이들 실험에서, 인간 NCI-H69 SCLC의 성장에 영향을 미치는 화합물의 능력을 시험했다. 생체내 연구를 위해, 8 주령 암컷 NCR 누드 마우스를 오른쪽 옆구리에 1:1 RPMI 1640 (Invitrogen, Carlsbad, CA)/Matrigel® (BD Biosciences, San Jose, CA) 중 2 백만개의 세포로 피하로 예방접종했다. 종양 측정을 버니어 캘리퍼스를 사용하여 매주 2회 실시했다. 종양 부피는 하기 식을 사용하여 계산되었다: V=0.5 x 폭 x 폭 x 길이.
종양이 200 mm3의 용적에 근접했을 때, 마우스를 10 마리 동물의 4 그룹으로 무작위 배정했다. 마우스를 비히클 대조군 (주사용 물 중 10% 프로필렌 글리콜), 2 mg/kg의 콘주게이트 10 (주사용 물 중 10% 프로필렌 글리콜), 2 mg/kg의 콘주게이트 10 NP6 나노입자 (10% 수크로오스), 또는 0.8 mg/kg의 DM1 (주사용 물 중 10% 프로필렌 글리콜)로 처리했다. 2회 용량에 대해 매주 1회 마우스에게 투여했다. 최종 종양 부피를 분산의 원-웨이 분석 및 터키(Tukey) 다중 비교 시험을 사용하여 분석했다. 종양 부피는 도 4에서 보여진 바와 같이 최대 100일의 기간에 걸쳐 추적되었다.
도 4에서 보여진 바와 같이, 종양 부피는 비히클 및 DM1 대조군의 경우 빠르게 증가했다. 콘주게이트 10 단독은 초기에 종양 퇴화를 나타냈지만, 연구 동안 종양이 재발되었다. 콘주게이트 10 NP6은 완벽한 치유를 제공했고, 즉, 9 마리의 마우스 중 9 마리가 1일 및 8일에 오직 2회 용량 투약 후 100일 후에 종양이 없었다. 도 5에서 종양 크기가 2000 mm3 미만인 마우스의 백분율의 카플란-마이어(Kaplan-Merier) 종양 부피 곡선은, 100 일까지 콘주게이트 10 NP6 그룹에서는 연구에 탈락한 동물이 없었지만 콘주게이트 10 마리의 단독 그룹에서는 3 마리의 동물이 큰 종양 크기 때문에 연구에서 제외되어야 했음을 보여준다.
종양 부피 연구를 비히클, 콘주게이트 10 (각각 0.7mg/kg), 및 콘주게이트 10 NP6 (각각 0.7mg/kg)에 대한 3 용량으로 반복했다. 종양 부피를 30 일 동안 추적했다. 결과는 도 6에서 보여졌다. 콘주게이트 10 NP6은 또한 유리 콘주게이트 10보다 유의미하게 우수한 효능을 나타냈다.
랫트 플라즈마에서 약동학 연구를 또한 수행했다. 콘주게이트 10 및 콘주게이트 10 NP6의 랫트 플라즈마 pK는 도 7에서 보여졌다. AUC 값은 표 16에서 보여졌다. 나노입자에 콘주게이트 10의 편입은 콘주게이트 10에 대한 AUC를 대략 10 배 증가시킨다.
표 16: 콘주게이트 10 및 콘주게이트 10 NP6에 대한 AUC
Figure 112017009030734-pct00139
NCI- H69 종양에서 포스포 - 히스톤 H3 반응은 도 8. 포스포 - 히스톤 H3 의 증가는 콘주게이트 10 및 콘주게이트 10 NP6으로의 처리 후 종양에서 관측되었다. 대략 50 시간에, 유리 콘주게이트 10에 대한 포스포-히스톤 H3 반응은 감소하기 시작했고, 반면 콘주게이트 10 NP6에 대한 포스포-히스톤 H3 반응은 여전히 높았다. 약동학 연구는 콘주게이트 10 NP6의 경우 지연되고 늘어난 반응을 시사했다.
따라서, 나노입자에 편입된 콘주게이트는 콘주게이트 단독 및 DM1 단독보다 훨씬 더 효과적이다.
본 발명의 범위는 상기 설명에 제한되는 것으로 의도되지 않으며, 오히려 첨부된 청구항들에 기재된 바와 같다.
청구항들에서, 관사 예컨대 "a," "an," 및 "the"는, 상반되게 명시되지 않는 한 또는 맥락상 달리 분명하지 않는 한, 하나 이상을 의미할 수 있다. 그룹의 하나 이상의 구성원들 사이에 "또는"을 포함하는 청구항들 또는 설명은, 상반되게 명시되지 않는 한 또는 맥락상 달리 분명하지 않는 한, 하나, 1 초과 또는 모든 그룹 구성원이 주어진 생성물 또는 공정에 존재하거나, 이에 이용되거나 또는 달리 이와 관련된다는 것을 만족시키는 것으로 간주된다. 본 발명은 그룹의 정확히 하나의 구성원이 주어진 생성물 또는 공정에 존재하거나 이에 이용되거나 또는 달리 이와 관련되는 구현예를 포함한다. 본 발명은 1 초과, 또는 모든 그룹 구성원이 주어진 생성물 또는 공정에 존재하거나 이에 이용되거나 또는 달리 이와 관련되는 구현예를 포함한다.
용어 "포함하는"은 개방형이고 허용하는 것으로 의도되지만 추가의 요소 또는 단계의 포함이 요구되지 않음이 또한 주지된다. 용어 "포함하는"이 본원에 사용되는 경우, 용어 "~로 구성된"도 이에 따라 또한 포함되고 개시된다.
범위가 주어지는 경우, 종료점을 포함한다. 더욱이, 다르게 명시되지 않는 한 또는 맥락상 및 당해 분야의 숙련가가 이해하는 바로부터 달리 분명하지 않는 한, 범위로 표현된 값은 본 발명의 상이한 구현예에서 언급된 범위 내 임의의 특정 값 또는 부분범위를, 맥락상 달리 명확히 지시되지 않는 한, 범위의 하한 단위의 1/10까지 추정할 수 있는 것으로 이해되어야 한다.
또한, 선행기술 내에 속하는 본 발명의 임의의 특정한 구현예가 임의의 하나 이상의 청구항들로부터 명백하게 제외될 수 있음이 이해되어야 한다. 그와 같은 구현예가 당해 분야의 숙련가에게 공지된 것으로 간주되기 때문에, 이들은 제외가 본원에 명백하게 기재되지 않더라도 제외될 수 있다. 본 발명의 조성물의 임의의 특정한 구현예는, 선행기술의 존재와 관련되는지 여부와 상관없이, 임의의 이유로 임의의 하나 이상의 청구항들로부터 제외될 수 있다.
모든 인용된 자료, 예를 들면, 참조문헌, 출판물, 데이터베이스, 데이터베이스 항목, 및 본원에 인용된 기술은, 인용문에서 명확히 언급되지 않더라도, 본원에 참고로 편입된다. 인용된 자료와 본원의 서술이 상충되는 경우에, 본원의 서술을 따를 것이다.
섹션 및 표 제목은 제한적인 것으로 의도되지 않는다.

Claims (65)

  1. 콘주게이트, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염으로서, 상기 콘주게이트는 링커에 의해 소마토스타틴 수용체(SSTR) 표적화 모이어티에 커플링된 활성제를 포함하고, 상기 SSTR 표적화 모이어티는 펩타이드이고, 상기 활성제는 메르탄신 (DM1)이고, 상기 링커는 공유 결합을 통해 펩타이드의 C-말단에 결합하고, 상기 콘주게이트는 5,000 Da 미만의 분자량을 가지는, 화합물 35, 화합물 37, 화합물 39, 화합물 41, 화합물 43, 화합물 45, 화합물 47, 화합물 49, 화합물 51, 화합물 53, 화합물 55, 화합물 57, 화합물 59, 화합물 61, 화합물 63, 및 화합물 65로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식을 포함하는, 콘주게이트:
    Figure 112019094940066-pct00166
    Figure 112019094940066-pct00167
    Figure 112019094940066-pct00168
    Figure 112019094940066-pct00169
    Figure 112019094940066-pct00170
    Figure 112019094940066-pct00171
    Figure 112019094940066-pct00172
    Figure 112019094940066-pct00173
    Figure 112019094940066-pct00174
    Figure 112019094940066-pct00175
    Figure 112019094940066-pct00176
    Figure 112019094940066-pct00177
    Figure 112019094940066-pct00178
    Figure 112019094940066-pct00179
    Figure 112019094940066-pct00180
    Figure 112019094940066-pct00181
    .
  2. 제1항에 있어서, 상기 콘주게이트가 하기 화학식을 가지는, 콘주게이트:
    Figure 112019094940066-pct00182
    .
  3. 제1항 또는 제2항의 콘주게이트 및 적어도 1종의 폴리머성 매트릭스를 포함하는 입자.
  4. 제3항에 있어서, 상기 폴리머성 매트릭스는 소수성 폴리머, 친수성 폴리머, 및 그것의 코폴리머로 구성된 군으로부터 선택된 1종 이상의 폴리머를 포함하는, 입자.
  5. 제4항에 있어서, 상기 소수성 폴리머는 폴리하이드록시산, 폴리하이드록시알카노에이트, 폴리카프로락톤, 폴리(오르토에스테르), 폴리무수물, 폴리(포스파젠), 폴리(락타이드-코-카프로락톤), 폴리카보네이트, 폴리에스테르아미드, 폴리에스테르, 및 그것의 코폴리머로 구성된 군으로부터 선택되는, 입자.
  6. 제4항에 있어서, 상기 친수성 폴리머는 폴리알킬렌 글리콜, 폴리알킬렌 옥사이드, 폴리(옥시에틸레이트화된 폴리올), 폴리(올레핀성 알코올), 폴리(비닐피롤리돈), 폴리(하이드록시알킬메타크릴아미드), 폴리(하이드록시알킬메타크릴레이트), 폴리(사카라이드), 폴리(하이드록시 산), 폴리(비닐 알코올), 폴리에틸렌 옥사이드, 폴리에틸렌 글리콜, 폴리(프로필렌 글리콜), 폴리옥사졸린, 및 그것의 코폴리머로 구성된 군으로부터 선택되는, 입자.
  7. 제3항에 있어서, 상기 폴리머성 매트릭스는 폴리(락트산), 폴리(글라이콜산), 폴리(락트산-코-글라이콜산), 및 그것의 코폴리머로 구성된 군으로부터 선택된 1종 이상의 폴리머를 포함하는, 입자.
  8. 제3항에 있어서, 상기 입자는 10 nm 내지 5000 nm의 직경을 갖는, 입자.
  9. 제8항에 있어서, 상기 입자는 30 nm 내지 70 nm, 70 nm 내지 120 nm, 120 nm 내지 200 nm, 200 nm 내지 5000 nm, 또는 500 nm 내지 1000 nm의 직경을 갖는, 입자.
  10. 제3항에 있어서, 상기 폴리머성 매트릭스는 2종 이상의 상이한 폴리머를 포함하는, 입자.
  11. 제3항에 있어서, 상기 콘주게이트는 상기 입자의 중량을 기준으로 0.05% 내지 50 %(w/w)의 양으로 존재하는, 입자.
  12. 제1항 또는 제2항의 콘주게이트 및 적어도 1종의 약제학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 약제학적 제형.
  13. 제3항의 입자 및 적어도 1종의 약제학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 약제학적 제형.
  14. 삭제
  15. 삭제
  16. 삭제
  17. 삭제
  18. 삭제
  19. 삭제
  20. 삭제
  21. 삭제
  22. 삭제
  23. 삭제
  24. 삭제
  25. 삭제
  26. 삭제
  27. 삭제
  28. 삭제
  29. 삭제
  30. 삭제
  31. 삭제
  32. 삭제
  33. 삭제
  34. 삭제
  35. 삭제
  36. 삭제
  37. 삭제
  38. 삭제
  39. 삭제
  40. 삭제
  41. 삭제
  42. 삭제
  43. 삭제
  44. 삭제
  45. 삭제
  46. 삭제
  47. 삭제
  48. 삭제
  49. 삭제
  50. 삭제
  51. 삭제
  52. 삭제
  53. 삭제
  54. 삭제
  55. 삭제
  56. 삭제
  57. 삭제
  58. 삭제
  59. 삭제
  60. 삭제
  61. 삭제
  62. 삭제
  63. 삭제
  64. 삭제
  65. 삭제
KR1020177002414A 2014-06-30 2015-06-30 표적화된 콘주게이트 및 입자 및 그것의 제형 KR102062025B1 (ko)

Applications Claiming Priority (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201462019001P 2014-06-30 2014-06-30
US62/019,001 2014-06-30
US201462077487P 2014-11-10 2014-11-10
US62/077,487 2014-11-10
US201562150413P 2015-04-21 2015-04-21
US62/150,413 2015-04-21
PCT/US2015/038569 WO2016004048A2 (en) 2014-06-30 2015-06-30 Targeted conjugates and particles and formulations thereof

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020197037860A Division KR20190143491A (ko) 2014-06-30 2015-06-30 표적화된 콘주게이트 및 입자 및 그것의 제형

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20170020923A KR20170020923A (ko) 2017-02-24
KR102062025B1 true KR102062025B1 (ko) 2020-01-03

Family

ID=55020088

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020197037860A KR20190143491A (ko) 2014-06-30 2015-06-30 표적화된 콘주게이트 및 입자 및 그것의 제형
KR1020177002414A KR102062025B1 (ko) 2014-06-30 2015-06-30 표적화된 콘주게이트 및 입자 및 그것의 제형

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020197037860A KR20190143491A (ko) 2014-06-30 2015-06-30 표적화된 콘주게이트 및 입자 및 그것의 제형

Country Status (15)

Country Link
US (4) US9750818B2 (ko)
EP (1) EP3160518A4 (ko)
JP (3) JP6602834B2 (ko)
KR (2) KR20190143491A (ko)
CN (2) CN110478495A (ko)
AU (2) AU2015284236B2 (ko)
BR (1) BR212016030926U2 (ko)
CA (1) CA2953371C (ko)
IL (1) IL249647B (ko)
MX (1) MX2017000080A (ko)
PH (1) PH12017500023A1 (ko)
RU (1) RU2695220C2 (ko)
SG (1) SG11201610880RA (ko)
WO (1) WO2016004048A2 (ko)
ZA (1) ZA201608432B (ko)

Families Citing this family (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9533054B2 (en) * 2013-03-11 2017-01-03 Shanghai Jiao Tong University Amphiphilic drug-drug conjugates for cancer therapy, compositions and methods of preparation and uses thereof
CA2953371C (en) * 2014-06-30 2021-08-24 Tarveda Therapeutics, Inc. Targeted conjugates and particles and formulations thereof
KR20180021742A (ko) * 2015-06-30 2018-03-05 타베다 세라퓨틱스, 인코포레이티드 표적화된 접합체 및 이의 입자 및 제형
JP2018521068A (ja) * 2015-07-15 2018-08-02 セレーター ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 改善されたナノ粒子送達系
EP3368546A4 (en) * 2015-10-28 2019-06-26 Tarveda Therapeutics, Inc. SSTR TARGETED CONJUGATES, AND ITS PARTICLES AND FORMULATIONS
US10039801B2 (en) 2016-02-16 2018-08-07 Strongbridge Ireland Limited Pharmaceutical compositions of water soluble peptides with poor solubility in isotonic conditions and methods for their use
US20190085034A1 (en) * 2016-03-16 2019-03-21 Tarveda Therapeutics, Inc. Antibody mimic conjugates and particles
WO2017180834A1 (en) * 2016-04-13 2017-10-19 Tarveda Therapeutics, Inc. Neurotensin receptor binding conjugates and formulations thereof
WO2017210246A2 (en) * 2016-05-31 2017-12-07 Tarveda Therapeutics, Inc. Penicillamine conjugates and particles and formulations thereof
EP3507295A1 (en) * 2016-08-31 2019-07-10 Mireca Medicines GmbH New polymer linked multimers of guanosine-3', 5'-cyclic monophosphates
WO2018081521A1 (en) * 2016-10-28 2018-05-03 Tarveda Therapeutics, Inc. Sstr-targeted conjugates and particles and formulations thereof
WO2018222987A1 (en) * 2017-06-01 2018-12-06 Tarveda Therapeutics, Inc. Targeted constructs
AU2018300080A1 (en) * 2017-07-11 2020-02-13 Sustained Nano Systems Llc Hypercompressed pharmaceutical formulations
CN107422021B (zh) * 2017-07-14 2019-11-19 北京朗阅科技有限公司 琼脂糖胶囊及其制备方法与应用
JP2020532505A (ja) * 2017-08-25 2020-11-12 エヌエーエル ファーマシューティカル グループ リミティド 薬剤の送達のための組成物および方法
CN111479572A (zh) * 2017-10-27 2020-07-31 塔弗达治疗有限公司 Sstr靶向缀合物及其制剂
CA3085759A1 (en) * 2017-12-14 2019-06-20 Tarveda Therapeutics, Inc. Hsp90-targeting conjugates and formulations thereof
EP3801506A4 (en) * 2018-06-01 2022-08-10 Tva (Abc), Llc COMBINATION THERAPY
CN109124096B (zh) * 2018-08-23 2021-08-06 广州百隆威尔精密五金制品有限公司 一种升降橱柜
CN111433188B (zh) * 2018-12-17 2023-08-01 荣昌生物制药(烟台)股份有限公司 一种用于抗体药物偶联物的连接子及其应用
WO2020191011A1 (en) * 2019-03-18 2020-09-24 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Non-hydrolyzable, non-cleavable, stable linkers for precision therapeutics and uses thereof
CN109848440A (zh) * 2019-04-10 2019-06-07 燕山大学 一种钯纳米立方体的制备方法
EP3989941A4 (en) * 2019-06-25 2023-05-10 Tva (Abc), Llc SSTR-TARGETING CONJUGATES AND RELATED FORMULATIONS
CN112250647A (zh) * 2020-06-30 2021-01-22 浙江大学 紫杉烷类药物前体、制备方法和应用
WO2022140289A1 (en) 2020-12-21 2022-06-30 Cornell University Peptide-linked drug delivery system
WO2022174171A1 (en) * 2021-02-15 2022-08-18 Anp Technologies, Inc. Pharmaceutical composition containing taxane nanoaggregates and use thereof
WO2022197988A1 (en) * 2021-03-18 2022-09-22 National Taiwan University Lipid-based nanoparticle delivery system for hydrophilic charged compound
CN117320678A (zh) * 2021-04-01 2023-12-29 R·P·谢勒技术有限公司 药物制剂中作为阴离子螯合剂的磷脂
IT202100014330A1 (it) * 2021-06-01 2022-12-01 The Ubeauty Com Llc Prodotto per la cura della pelle e procedimento per la sua realizzazione.

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2012138911A2 (en) * 2011-04-05 2012-10-11 The Administrators Of The Tulane Educational Fund Conjugates of anti-hiv drugs and somatostatin analogs

Family Cites Families (48)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5208020A (en) 1989-10-25 1993-05-04 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use
US5595756A (en) * 1993-12-22 1997-01-21 Inex Pharmaceuticals Corporation Liposomal compositions for enhanced retention of bioactive agents
US5702717A (en) * 1995-10-25 1997-12-30 Macromed, Inc. Thermosensitive biodegradable polymers based on poly(ether-ester)block copolymers
US5843903A (en) * 1995-11-27 1998-12-01 The Administrators Of The Tulane Educational Fund Targeted cytotoxic anthracycline analogs
AT405906B (de) 1997-03-14 1999-12-27 Irene Dr Virgolini Radiomarkierte somatostatin rezeptor-liganden zur diagnose und therapie
US6358491B1 (en) * 1999-08-27 2002-03-19 Berlex Laboratories, Inc. Somatostatin analogs
CA2389304A1 (en) * 1999-11-01 2001-05-10 Corinne S. Lengsfeld Compositions and methods for controlled-release delivery and increased potency of pharmaceuticals via hydrophobic ion-pairing
AU4267700A (en) * 2000-01-13 2001-07-19 Academia Sinica Application of somatostatin analogs to specific delivery of anti-tumor drugs into tumor cells
DE10006572A1 (de) * 2000-02-14 2001-08-23 Deutsches Krebsforsch Oligonucleotid-Konjugate
FR2824563B1 (fr) * 2001-05-10 2004-12-03 Bio Merieux Particules composites, conjugues derives, procede de preparation et applications
US6441163B1 (en) * 2001-05-31 2002-08-27 Immunogen, Inc. Methods for preparation of cytotoxic conjugates of maytansinoids and cell binding agents
US8877901B2 (en) * 2002-12-13 2014-11-04 Immunomedics, Inc. Camptothecin-binding moiety conjugates
EP1531846A4 (en) 2002-02-27 2006-04-19 Us Gov Health & Human Serv CONJUGATES OF LIGAND, LINK AND CYTOTOXIC AGENS, AND RELATED COMPOSITIONS AND USE PROCESSES
DK1487493T3 (da) 2002-03-01 2010-05-25 Univ Tulane Konjugater af cytotoksiske midler og biologisk aktive peptider
ATE533513T1 (de) * 2002-09-06 2011-12-15 Cerulean Pharma Inc Polymere auf basis von cyclodextrin zur verabreichung von an diese kovalent gebundene arzneimittel
TWI260228B (en) * 2002-12-31 2006-08-21 Ind Tech Res Inst Delivery carrier of presenting cell of somatostatin receptor
US20040247527A1 (en) 2003-03-10 2004-12-09 Mpa Technologies, Inc. Multifunctional photodynamic agents for treating of disease
SG173223A1 (en) * 2003-04-22 2011-08-29 Ipsen Pharma Sas Peptide vectors
US8088387B2 (en) * 2003-10-10 2012-01-03 Immunogen Inc. Method of targeting specific cell populations using cell-binding agent maytansinoid conjugates linked via a non-cleavable linker, said conjugates, and methods of making said conjugates
SI1651162T1 (sl) * 2003-05-20 2016-02-29 Immunogen, Inc. Izboljšani citotoksični agenti, ki vsebujejo nove majtanzinoide
US7276497B2 (en) 2003-05-20 2007-10-02 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising new maytansinoids
JP4318985B2 (ja) * 2003-08-21 2009-08-26 日本メジフィジックス株式会社 ソマトスタチンアナログ誘導体およびその利用
US20060182750A1 (en) * 2005-02-11 2006-08-17 Immunogen, Inc. Process for preparing stable drug conjugates
CA2620343C (en) 2005-08-24 2013-01-08 Immunogen, Inc. Process for preparing antibody maytansinoid conjugates
AU2006294554B2 (en) 2005-09-26 2013-03-21 E. R. Squibb & Sons, L.L.C. Antibody-drug conjugates and methods of use
EP1864682A1 (en) * 2006-06-09 2007-12-12 Sanofi-Aventis Leptomycin derivatives
US10925977B2 (en) * 2006-10-05 2021-02-23 Ceil>Point, LLC Efficient synthesis of chelators for nuclear imaging and radiotherapy: compositions and applications
MX2009003635A (es) * 2006-10-06 2009-04-22 Amgen Inc Formulaciones de anticuerpos estables.
ES2545977T3 (es) 2008-03-18 2015-09-17 Genentech, Inc. Combinaciones de un conjugado de anticuerpo-fármaco anti-HER2 y agentes quimioterapéuticos, y métodos de uso
KR20100137585A (ko) 2008-04-30 2010-12-30 이뮤노젠 아이엔씨 강력한 복합체 및 친수성 링커
BRPI0912230A2 (pt) * 2008-05-06 2017-08-22 Glaxo Group Ltd Método para encapsular agentes biologicamente ativos em um carreador particulado, carreador particulado, e, composição farmacêutica
ES2548135T3 (es) 2008-05-13 2015-10-14 Novartis Ag Heterociclos condensados que contienen nitrógeno y composiciones de los mismos como inhibidores de quinasa
WO2010033207A1 (en) * 2008-09-19 2010-03-25 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of therapeutic peptides
FR2945211A1 (fr) * 2009-05-06 2010-11-12 Sanofi Aventis Combinaison antitumorale comprenant la cabazitaxel et la capecitabine
EP2449379B1 (en) * 2009-07-02 2017-05-17 Sloan-Kettering Institute for Cancer Research Fluorescent silica-based nanoparticles
WO2011078250A1 (ja) * 2009-12-25 2011-06-30 独立行政法人理化学研究所 生体内にて標的組織に指向する放射標識化合物およびその利用
AU2011245980A1 (en) * 2010-04-30 2012-11-08 Sanwa Kagaku Kenkyusho Co., Ltd. Peptide for improving in vivo stability of physiologically active substance or the like and physiologically active substance with improved in vivo stability
TW201302793A (zh) * 2010-09-03 2013-01-16 Glaxo Group Ltd 新穎之抗原結合蛋白
CA2810838C (en) * 2010-09-08 2021-07-06 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Somatostatin receptor-based cancer therapy
CA2828810A1 (en) * 2011-03-01 2012-09-07 Ge Healthcare Limited Radiolabelled octreotate analogues as pet tracers
WO2012145112A2 (en) 2011-04-18 2012-10-26 Immunogen, Inc. Novel maytansinoid derivatives with sulfoxide linker
AU2012257417B2 (en) * 2011-05-16 2017-09-14 Tagworks Pharmaceuticals B.V. Bio-orthogonal drug activation
BR112013032928A2 (pt) 2011-06-21 2017-01-24 Immunogen Inc "derivados de maitansinoide com ligante de peptídeo e conjugados dos mesmos, composição farmacêutica que os compreende e uso dos mesmos"
MX366864B (es) * 2012-02-27 2019-07-26 Amunix Operating Inc Composiciones de conjugados de xten y métodos para realizarlas.
EP2895146A1 (en) * 2012-09-17 2015-07-22 BIND Therapeutics, Inc. Therapeutic nanoparticles comprising a therapeutic agent and methods of making and using same
US9999680B2 (en) 2013-02-28 2018-06-19 Immunogen, Inc. Conjugates comprising cell-binding agents and maytansinoids as cytotoxic agents
CA2926698C (en) 2013-10-15 2021-06-22 The California Institute For Biomedical Research Chimeric antigen receptor t cell switches and uses thereof
CA2953371C (en) 2014-06-30 2021-08-24 Tarveda Therapeutics, Inc. Targeted conjugates and particles and formulations thereof

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2012138911A2 (en) * 2011-04-05 2012-10-11 The Administrators Of The Tulane Educational Fund Conjugates of anti-hiv drugs and somatostatin analogs

Also Published As

Publication number Publication date
US9750818B2 (en) 2017-09-05
ZA201608432B (en) 2019-07-31
AU2015284236A1 (en) 2016-12-22
IL249647A0 (en) 2017-02-28
JP2021175757A (ja) 2021-11-04
US10322191B2 (en) 2019-06-18
BR212016030926U2 (pt) 2018-05-29
CN106573077B (zh) 2019-07-30
AU2018204037B2 (en) 2020-03-26
JP2020063241A (ja) 2020-04-23
AU2018204037A1 (en) 2018-06-21
RU2016151859A3 (ko) 2018-08-06
IL249647B (en) 2021-04-29
CA2953371C (en) 2021-08-24
EP3160518A2 (en) 2017-05-03
EP3160518A4 (en) 2018-05-23
AU2015284236B2 (en) 2018-03-08
US20180000959A1 (en) 2018-01-04
JP2017520585A (ja) 2017-07-27
RU2695220C2 (ru) 2019-07-22
US20170095569A1 (en) 2017-04-06
US20170312245A1 (en) 2017-11-02
PH12017500023A1 (en) 2017-05-15
CA2953371A1 (en) 2016-01-07
KR20170020923A (ko) 2017-02-24
US20200206356A1 (en) 2020-07-02
US10624967B2 (en) 2020-04-21
CN106573077A (zh) 2017-04-19
WO2016004048A2 (en) 2016-01-07
JP6932389B2 (ja) 2021-09-08
RU2016151859A (ru) 2018-08-06
MX2017000080A (es) 2017-05-30
WO2016004048A3 (en) 2016-03-24
JP6602834B2 (ja) 2019-11-06
KR20190143491A (ko) 2019-12-30
CN110478495A (zh) 2019-11-22
US11458206B2 (en) 2022-10-04
SG11201610880RA (en) 2017-01-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR102062025B1 (ko) 표적화된 콘주게이트 및 입자 및 그것의 제형
JP6118914B2 (ja) 放出制御型の固体ポリマーナノ粒子
US20220096646A1 (en) Sstr-targeted conjugates and particles and formulations thereof
US11510910B2 (en) HSP90 targeted conjugates and particles and formulations thereof
WO2017210246A2 (en) Penicillamine conjugates and particles and formulations thereof
US20190125888A1 (en) Targeted conjugates and particles and formulations thereof

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
AMND Amendment
E902 Notification of reason for refusal
AMND Amendment
E601 Decision to refuse application
AMND Amendment
X701 Decision to grant (after re-examination)