KR102057226B1 - 연잎 추출물을 포함하는 근기능 및 운동능 강화 기능성 식품 조성물 및 그 제조방법 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 근기능 및 운동능 강화 기능성 식품 조성물 및 그 제조방법에 관한 것으로, 본 발명에 따르면 에너지 대사 및 근육 생성 관련 인자의 생성을 향상시킬 수 있으므로 운동 능력 및 근기능을 향상시킬 수 있는 조성물을 제공할 수 있다. 구체적으로, 미토콘드리아 및 근육 세포의 합성을 증가시키고, 근육의 위축을 억제함으로써 근육 운동의 효율성을 향상시킬 수 있고 피로를 적게 느끼게 하는 효과를 나타낼 수 있다. 또한, 이러한 조성물을 사용하여 건강 기능성 조성물로서 식품 등 다양한 분야에 적용할 수 있다.

Description

연잎 추출물을 포함하는 근기능 및 운동능 강화 기능성 식품 조성물 및 그 제조방법{Functional food composition for enhancing myofunction and athletic function comprising lotus leaf extract and manufacturing method thereof}
본 발명은 연잎 추출물을 포함하는 근기능 및 운동능 강화 기능성 식품 조성물 및 그 제조방법에 관한 것이다.
최근 과학기술 및 현대 의학의 발달로 인하여 인간의 평균 수명은 점차 증가하고 있으며, 이에 따라 삶의 질 향상을 위하여 건강을 위한 관심이 증가되고 있다. 이러한 경향은 세대와 나이에 상관없이 증가하고 있다. 또한, 천연물을 포함하는 의약품, 건강보조식품 및 화장품에 많은 관심이 증가하면서 이에 대한 연구개발이 증가하고 있는 실정이다. 특히, 천연물 의약품의 효능 및 천연물을 포함하는 건강보조식품과 화장품의 기능은 항산화, 콜레스테롤 억제, 비만 예방 효과, 면역 및 질병예방 및 노화억제 등의 기초 의과학적 범위까지 확대되고 있다.
천연물에 사용되는 천연 식물 중, 연의 잎은 '하엽(荷葉)'이라고 하며, 항균작용과 혈압강하 작용을 하며 위장을 강화시키고, 출혈을 멎게 하고 어혈을 풀어주는 효과가 있다고 알려져 있다. 연잎은 잎의 생김새가 깨끗하고, 피부 미용에 좋다고 알려져 있어, 연잎 중에서 둥글고 큰 잎은 미녀를 상징하는 의미로 '부용(芙蓉)'이라고도 한다.
또한, 연잎은 더위와 습기로 인하여 설사가 나는 것을 멎게 하고 갈증을 해소시키며, 머리와 눈에 쌓인 풍과 열을 맑게 하여 어지럼증을 완화시키고, 각혈이나 코피, 뇨혈, 자궁출혈 등의 각종 출혈증의 치료에 좋다고 알려져 있다. 또한, 항산화작용, 해독작용 등의 효능을 가지며, 활성산소로 인해 발생하는 성인병의 예방과 노화 억제에 도움이 된다고 알려져 있다. 또한, 한방 문헌에서는 바닷게를 먹고 중독된 경우에 섭취하면 해독에 도움이 된다고도 기재되어 있다. 이러한 연잎의 효능이 알려지면서 연잎에 쌀을 싸서 밥을 짓거나 연잎을 우려낸 차를 마시는 등의 방법으로 연잎의 유효성분을 섭취하고 있다.
본 발명자들은 천연물로부터 기원하는 물질에 관하여 연구하던 중 연잎 추출물을 포함하는 조성물이 근기능 및 운동능을 향상시키는 효과를 확인하여 본 발명을 완성하게 되었다.
본 발명의 목적은 근기능 및 운동능 강화 기능성 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 근기능 및 운동능 강화 기능성 식품 조성물을 제조하는 방법을 제공하는 것이다.
상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은
연잎 추출물을 포함하는 것인, 근기능 및 운동능 강화 기능성 식품 조성물을 제공한다.
일구현예에 따르면, 본 발명은 조성물 총 중량에 대하여 연잎 추출물을 1 내지 100중량% 포함할 수 있다.
일구현예에 따르면, 근육 관련 질환의 예방 또는 개선용 조성물로서, 긴장감퇴증(atony), 근위축증(muscular atrophy), 근이영양증(muscular dystrophy), 근육 퇴화, 근무력증(myasthenia), 근경직증(myotonia), 근위축성 축삭경화증(amyotrophic lateral sclerosis), 악액질(cachexia), 근육감소증(sarcopenia)으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 예방 또는 개선용으로 사용할 수 있다.
또한, 본 발명의 다른 구현예에 따르면, 연잎에 대하여 물, 탄소수 1 내지 6의 유기용매 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출하는 단계를 포함하는 것인, 근기능 및 운동능 강화 기능성 식품 조성물 제조방법을 제공할 수 있다.
또한, 일구현예에 따르면, 연잎으로부터 아임계 추출법, 초임계 유체 추출법 또는 초고압 추출법으로 연잎 추출물을 수득하는 단계를 포함할 수 있다.
기타 본 발명의 구현예들의 구체적인 사항은 이하의 상세한 설명에 포함되어 있다.
본 발명에 따른 근기능 및 운동능 강화 기능성 식품 조성물 및 그 제조방법에 따르면, 에너지 대사 및 근육 생성 관련 인자의 생성을 향상시킬 수 있으므로 운동 능력 및 근기능을 향상시킬 수 있는 조성물을 제공할 수 있다. 또한, 건강 기능성 조성물로서 식품 등 다양한 분야에 적용할 수 있다.
도 1은 실시예에 따른 mTOR의 활성을 나타내는 그래프이다.
도 2는 실시예에 따른 PPARδ의 활성을 나타내는 그래프이다.
도 3은 실시예에 따른 PGC-1α의 활성을 나타내는 그래프이다.
도 4는 실시예에 따른 근단백질 분해 억제 활성을 나타내는 전기영동 사진이다.
도 5는 실시예에 따른 미토콘드리아 생합성 및 근육분화 활성을 나타내는 전기영동 사진이다.
본 발명은 다양한 변환을 가할 수 있고 여러 가지 실시예를 가질 수 있는 바, 특정 실시예를 도면에 예시하고 상세한 설명에 상세하게 설명하고자 한다. 그러나, 이는 본 발명을 특정한 실시 형태에 대해 한정하려는 것이 아니며, 본 발명의 사상 및 기술 범위에 포함되는 모든 변환, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 본 발명을 설명함에 있어서 관련된 공지 기술에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 흐릴 수 있다고 판단되는 경우 그 상세한 설명을 생략한다.
이하, 본 발명의 구현예에 따른 근기능 및 운동능 강화 기능성 식품 조성물 및 그 제조방법에 대하여 보다 상세하게 설명한다.
본 명세서에 사용되는 용어 '근기능 및 운동능 강화'는 mTOR, PPARδ 및 PGC-1α의 활성을 향상키고, 근 단백질의 분해를 억제시키며, 미토콘드리아의 생합성을 촉진시키고, 근육의 분화를 촉진시키는 것을 의미한다. 구체적으로, 근 단백질 분해 억제는 atrogin-1 및 MuRF-1의 mRNA 발현이 감소하는 것으로 확인할 수 있다. 또한, 미토콘드리아 생합성 촉진 및 근육 분화 촉진 활성은 myogenin, NRF1, Tfam의 mRNA 발현이 증가하는 것으로 확인할 수 있다.
일구현예에 따르면, 근기능 및 운동능을 강화시킴으로써 근육 관련 질환을 예방, 치료 및 개선할 수 있다. 근육 관련 질환의 예방, 치료 및 개선은 mTOR, PPARδ 및 PGC-1α 등의 근육 및 운동 관련 인자에 대한 발현으로 확인할 수 있다.
근육 관련 질환은 근기능의 저하, 근육의 소모, 근육의 퇴화 등으로 인한 질환을 포함할 수 있다. 구체적으로, 긴장감퇴증(atony), 근위축증(muscular atrophy), 근이영양증(muscular dystrophy), 근육 퇴화, 근무력증(myasthenia), 근경직증(myotonia), 근위축성 축삭경화증(amyotrophic lateral sclerosis), 악액질(cachexia), 근육감소증(sarcopenia) 등의 질환을 예방, 치료 및 개선시킬 수 있다.
본 발명에 따른 근기능 및 운동능 강화 기능성 식품 조성물은 연잎 추출물을 포함한다.
일구현예에 따르면, 본 발명은 조성물 총 중량에 대하여 연잎 추출물을 1 내지 100중량%, 예를 들어 20 내지 70중량% 포함할 수 있다.
일구현예에 따르면, 연잎에 대하여 물, 탄소수 1 내지 6의 유기용매 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 연잎 추출물을 수득하는 단계를 포함하는 방법으로 상기 근기능 및 운동능 강화 기능성 식품 조성물을 제조할 수 있다. 예를 들어, 탄소수 1 내지 6의 유기용매는 메탄올, 에탄올, 에틸아세테이트, 헥산 등을 포함할 수 있다.
일구현예에 따르면, 발명에 따른 조성물은 연잎에 대하여 주정 추출 또는 열수 추출하는 단계를 포함하는 방법으로 제조될 수 있다.
일구현예에 따르면, 주정 추출 단계에서는 10 내지 95%, 예를 들어 20 내지 80%, 예를 들어 50%주정을 사용할 수 있다. 또한, 추출 대상 부피의 2 내지 20배의 주정을 가하여 추출하는 단계를 포함할 수 있다. 또한, 예를 들어 0.5 내지 10 시간, 예를 들어 2 내지 5시간 동안 추출 반응시킬 수 있으며, 예를 들어 4 내지 80℃, 예를 들어 20 내지 70℃, 예를 들어 40 내지 60℃에서 반응시킬 수 있다.
일구현예에 따르면, 열수 추출 단계는 추출 대상 부피의 2 내지 20배의 물을 가하여 추출하는 단계를 포함할 수 있다. 또한, 예를 들어 0.5 내지 12 시간, 예를 들어 2 내지 6시간 동안 추출 반응시킬 수 있으며, 예를 들어 4 내지 121℃, 예를 들어 50 내지 121℃, 예를 들어 80 내지 121℃에서 반응시킬 수 있다.
일구현예에 따르면, 연잎으로부터 아임계 추출법, 초임계 유체 추출법 또는 초고압 추출법을 사용하여 연잎 추출물을 수득하는 단계를 포함하는 방법으로 상기 근기능 및 운동능 강화 기능성 식품 조성물을 제조할 수 있다.
이하, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명의 실시예에 대하여 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다.
실시예 1: 열수 추출
연잎 100g에 증류수 1,500ml을 가한 후, 환류냉각장치를 부착한 히팅 맨틀(heating mantle, Extraction Rota-Mantle/KBT)을 이용하여 95℃에서 4시간 동안 열수 추출하고 이를 여과한 후 농축하고 동결건조하여 연잎 추출물을 수득하였다.
실시예 2: 주정 추출
연잎 100g에 각각의 10%, 30%, 50%, 70%, 90% 주정 1,500ml을 가한 후, 환류냉각장치를 부착한 히팅 맨틀(heating mantle, Extraction Rota-Mantle/KBT)을 이용하여 70℃에서 4시간 동안 주정 추출하고 이를 여과한 후 농축하여 추출용매를 제거하고 동결건조하여 연잎 추출물을 수득하였다.
실시예 3: 메탄올 추출
메탄올을 사용한 것을 제외하고는 실시예 2와 동일한 방법으로 연잎 추출물을 수득하였다.
실시예 4: 에틸아세테이트 추출
에틸아세테이트을 사용한 것을 제외하고는 실시예 2와 동일한 방법으로 연잎 추출물을 수득하였다.
실시예 5: 헥산 추출
헥산을 사용한 것을 제외하고는 실시예 2와 동일한 방법으로 수행하였고, 연잎 추출물을 수득하였다.
실시예 6: 초고압 추출
연잎 18%, 에탄올 76 mL을 폴리에틸렌(polyethylene) 팩에 넣고 밀봉한 후 초고압 추출장치(Frescal MFP-7000; Mitsubishi Heavy Industries, Tokyo, Japan)를 이용하여 추출하였다. 초고압 추출조건으로 추출압력 320MPa, 추출시간 5분으로 설정하였다. 추출된 시료는 여과한 후 농축하여 추출용매를 제거하고, 동결건조하여 연잎 추출물을 수득하였다.
실시예 7: 초임계 추출
연잎을 시료 카트리지에 충전하고 초임계 추출장치(SFX 3560, Isco Inc., Lincoln, NE, USA)를 이용하여 추출하였다. 초임계 유체 추출조건은 추출압력 20MPa, 추출온도 60℃, 초임계 이산화탄소의 유속 60 mL/분, 추출시간 60분으로 설정하였다. 초임계 유체 추출이 완료되면, 추출장치의 압력을 낮추어 초임계 유체 상태를 해제하여 연잎 추출물을 수득하였다.
실험예 1: mTOR 활성
실시예 1에 따른 추출물에 대한 mTOR 활성을 평가하였다. mTOR는 근육 단백질 합성기전을 조절하는 역할을 하는 단백질로서, mTOR의 활성을 확인함으로써 근육량의 향상을 확인할 수 있다. 먼저, 근육모세포주인 L6 세포(ATCC)를 110% 우태아혈청(FBS; Hyclone, Logan, UT, USA)이 함유된 Dulbecco's modified Eagle's media (DMEM; Hyclone) 함께 6-웰 플레이트에 2 Х 105cell/mL이 되도록 접종 후 배양하였다. 세포 밀도가 약 80 내지 85%가 되었을 때, 웰(well)에 있는 배지를 제거하고 2% 말 혈청(HS; Hyclone)이 함유된 DMEM (Hyclone)으로 교환하여 L6 세포를 근관세포(myotube)로 분화시켰다. 2일에 한 번씩 새로운 배지로 교체하여 총 6일 동안 분화를 진행하였다. 분화 후, 50 ng/mL의 TNF-α가 함유된 DMEM 배지에 상기 실시예 1에서 제조한 추출물을 100 또는 200 ug/mL의 농도로 녹인 후, 세포에 처리하였다. 6시간 후, TRIzol시약(Takara, Osaka, Japan)을 사용하여 총 RNA를 분리하였다. 분리한 총 RNA는 나노드랍(NanoDrop 1000; Thermo Fisher Scientific Inc., Waltham, MA, USA)을 이용하여 정량하였다. 그 결과는 표 1에 나타내었다.
또한, 실시예 1에 따른 물질을 100 또는 300 ug/mL 농도로 세포에 처리한 결과는 도 1에 나타내었다.
Figure 112019093808710-pat00001
표 1 및 도 1에 나타난 바와 같이, 본 발명의 실시예 1에 따른 물질로 인하여 근육 단백질의 성장이 유도될 수 있음을 확인할 수 있다.
실험예 2: PPARδ 활성
실시예 1에 따른 추출물에 대한 PPARδ 활성을 평가하기 위하여, COS7 세포(ATCC)를 10% FBS(Gibco)가 함유된 DMEM 배지에 24-well 플레이트에 1Х105cell/mL이 되도록 넣었다. 세포밀도가 약 80~85%가 되었을 때, Lipofector EXT(Aptabio)를 사용하여 항염증 효과를 확인하기 위해 PPARδ 형질전환을 유도하였으며 형질전환 후, 각 추출물을 10㎍/mL의 농도로 함께 세포에 24 시간 처리하였다. 그리고 luciferase assay kit(Promega)를 사용하여 luciferase activity를 평가하였다.
PPARδ는 지방조직에서 세포분화, 간 조직에서의 당 생성과 관련할 수 있는 단백질로, PPARδ의 활성을 확인함으로써 운동 능력의 향상을 확인할 수 있다. 결과는 표 2에 나타내었다.
또한, 실시예 1에 따른 물질을 25 또는 50ug/mL로 세포에 처리한 결과는 도 2에 나타내었다.
Figure 112019093808710-pat00002
표 2 및 도 2에 나타난 바와 같이, 본 발명의 실시예 1에 따른 물질로 인하여 운동 능력이 향상됨을 확인할 수 있다.
실험예 3: PGC-1α 활성
실시예 1에 따른 추출물에 대한 PGC-1α 활성을 평가하기 위하여, COS7 세포(ATCC)를 10% FBS (Gibco)가 함유된 DMEM 배지에 24-well 플레이트에 1Х105cell/mL이 되도록 넣었다. 세포밀도가 약 80~85%가 되었을 때, Lipofector EXT(Aptabio)를 사용하여 항염증 효과를 확인하기 위해 peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator-1 alpha(PGC-1α) 형질전환을 유도하였으며 형질전환 후, 각 추출물을 10㎍/mL의 농도로 함께 세포에 24시간 처리하였다. 그리고 luciferase assay kit(Promega)를 사용하여 luciferase activity를 평가하였다.
PGC-1α는 당 조절 및 미토콘드리아 기능 복제와 관련한 단백질로서 PGC-1α의 활성을 확인함으로써 운동 능력의 향상을 확인할 수 있다. 결과는 표 3에 나타내었다.
또한, 실시예 1에 따른 물질을 25 또는 50ug/mL로 세포에 처리한 결과는 도 3에 나타내었다.
Figure 112019093808710-pat00003
표 3 및 도 3에 나타난 바와 같이, 본 발명의 실시예 1에 따른 물질로 인하여 운동 능력이 향상됨을 확인할 수 있다.
실험예 4: 근 단백질 분해 억제 활성
실시예 1의 근 단백질 분해 억제 활성을 확인하기 위하여, atrogin-1, MuRF1및 β-actin의 발현을 확인하였다. atrogin-1은 근육파괴단백질로서 근육이 손실될 때 활성화되는 유전자이고, MuRF1은 근육 내의 근육분해효소 단백질이며, β-actin은 근육을 구성하는 단백질로서 미오신과 함께 근육의 수축과 이완을 일으킨다.
먼저, 근육모세포주인 L6 세포(ATCC)를 110% 우태아혈청(FBS; Hyclone, Logan, UT, USA)이 함유된 Dulbecco's modified Eagle's media (DMEM; Hyclone) 함께 6-웰 플레이트에 2 Х 105cell/mL이 되도록 접종 후 배양하였다. 세포 밀도가 약 80 내지 85%가 되었을 때, 웰(well)에 있는 배지를 제거하고 2% 말 혈청(HS; Hyclone)이 함유된 DMEM (Hyclone)으로 교환하여 L6 세포를 근관세포(myotube)로 분화시켰다. 2일에 한 번씩 새로운 배지로 교체하여 총 6일 동안 분화를 진행하였다. 분화 후, 50 ng/mL의 TNF-α가 함유된 DMEM 배지에 상기 실시예 1에서 제조한 연잎 추출물을 100 또는 200 ug/mL의 농도로 녹인 후, 세포에 처리하였다. 6시간 후, TRIzol시약(Takara, Osaka, Japan)을 사용하여 총 RNA를 분리하였다. 분리한 총 RNA는 나노드랍(NanoDrop 1000; Thermo Fisher Scientific Inc., Waltham, MA, USA)을 이용하여 정량하였다. 16 uL RNA를 정량하여, 역전사효소 프리믹스(Reverse Transcriptase Premix, ELPIS-Biotech)와 혼합하여 PCR 기계(Gene Amp PCR System 2700; Applied Biosystems, Foster City, CA, USA)를 이용하여 42℃, 55분, 70℃, 15분의 조건에서 cDNA로 합성하였다. 합성된 cDNA 중 4 uL의 cDNA, 하기의 특정 프라이머쌍(Bioneer, Deajeon, Korea), 및 PCR 프리믹스(ELPIS-Biotech)를 혼합하여 PCR 시료를 제조한 뒤, 95℃에서 30초, 60℃에서 1분, 72℃에서 1분을 30번 반복하여 PCR을 수행하였다.
PCR 결과 증폭된 cDNA를 1.5% 아가로즈 젤로 전기영동으로 분리하였으며, G;BOX EF 영상화 시스템(Syngene, Cambridge, UK)을 이용하여 cDNA 밴드를 확인하였다. 사용한 서열은 표 4에 나타내었으며, 그 결과를 도 4에 나타내었다.
구분 Forward primer Reverse primer
Atrogin-1 5'-CCCTGAGTGGCATCGCCCAA-3' 5'-AGGTCCCGCCCATCGCTCA-3'
MuRF-1 5'-GAAATGCTATGCAGAACCTG-3' 5'-ATTCCTGCTTGTAGATGTCG-3'
β-Actin 5'-AGCCATGTACGTAGCCATCC-3' 5'-CTCTCAGCTGTGGTGCTGAA-3'
도 4에 나타난 바와 같이, 연잎 추출물을 처리함에 따라 L6 근육세포에서 atrogin-1 및 MuRF-1의 mRNA 발현이 감소함을 알 수 있다. 이는 본 발명의 연잎 추출물이 근육세포 내에서 근 단백질 분해를 억제하는 능력이 우수하다는 것을 의미한다.
실험예 5: 미토콘드리아 생합성 촉진 및 근육 분화 촉진 활성
실시예 1의 근 미토콘드리아 생합성 촉진 및 근육 분화 촉진 활성을 확인하기 위하여, myogenin, NRF1 및 Tfam의 발현을 확인하였다. Myogenin은 근관세포로의 분화와 성숙을 제어하고, NRF1는 미토콘드리아 단백질 생성에 관여하며, Tfam은 미토콘드리아 DNA 전사에 관여한다.
먼저, 근육모세포주인 L6 세포(ATCC)를 110% 우태아혈청(FBS; Hyclone, Logan, UT, USA)이 함유된 Dulbecco's modified Eagle's media (DMEM; Hyclone) 함께 6-웰 플레이트에 2 Х 105cell/mL이 되도록 접종 후 배양하였다. 세포 밀도가 약 80 내지 85%가 되었을 때, 웰(well)에 있는 배지를 제거하고 2% HS가 함유된 DMEM (Hyclone)에 상기 실시예 1에서 제조한 연잎 추출물을 100 또는 200 ug/mL의 농도로 녹인 후, 세포에 처리하여 근관세포로 분화를 유도하였다. 이 때, 시료 대신 0.01% DMSO를 처리한 군을 대조군으로 사용하였다. 이 과정을 2 일간 3회 반복, 총 6일 동안 진행하여 분화시킨 후, TRIzol시약(Takara, Osaka, Japan)을 사용하여 총 RNA를 분리하였다. 분리한 총 RNA는 나노드랍(NanoDrop 1000; Thermo Fisher Scientific Inc., Waltham, MA, USA)을 이용하여 정량하였다. 16 uL RNA를 정량하여, 역전사효소 프리믹스(Reverse Transcriptase Premix, ELPIS-Biotech)와 혼합하여 PCR 기계(Gene Amp PCR System 2700; Applied Biosystems, Foster City, CA, USA)를 이용하여 42℃, 55분, 70℃, 15분의 조건에서 cDNA로 합성하였다. 합성된 cDNA 중 4 uL의 cDNA, 하기의 특정 프라이머쌍(Bioneer, Deajeon, Korea), 및 PCR 프리믹스(ELPIS-Biotech)를 혼합하여 PCR 시료를 제조한 뒤, 95℃에서 30초, 60℃에서 1분, 72℃에서 1분을 30번 반복하여 PCR을 수행하였다.
PCR 결과 증폭된 cDNA를 1.5% 아가로즈 젤로 전기영동으로 분리하였으며, G;BOX EF 영상화 시스템(Syngene, Cambridge, UK)을 이용하여 cDNA 밴드를 확인하였다. 사용한 서열은 표 5에 나타내었으며, 그 결과를 도 5에 나타내었다.
구분 Forward primer Reverse primer
Myogenin 5'-TGGGCTGCCACAAGCCAGAC-3' 5'-CAGCCCAGCCACTGGCATCA-3'
NRF1 5'-TGGACCCAAGCATTACGGAC-3' 5'-GGTCATTTCACCGCCCTGTA-3'
Tfam 5'-GCTTCCAGGAGGCTAAGGAT-3' 5'-CCCAATCCCAATGACAACTC-3'
β-Actin 5'-CTGTGTGGATTGGTGGCTCTAT-3' 5'-GTGTAAAACGCAGCTCAGTAACA-3'
도 5에 나타난 바와 같이, 실시예 1에 따른 연잎 추출물을 처리함에 따라 L6 근육세포에서 myogenin, NRF1, Tfam의 mRNA 발현이 증가함을 알 수 있다. 이는 본 발명의 연잎 추출물이 근육세포 내에서 근육 분화 촉진 및 미토콘드리아 생합성 능력이 우수하다는 것을 의미한다.
상기한 바와 같이, 실험예 1 내지 5에 따른 결과를 정리하면 표 6 및 7과 같다.
Figure 112019093808710-pat00004
Figure 112019093808710-pat00005
상기 결과에서 확인할 수 있는 바와 같이, 본 발명에 따르면 미토콘드리아 및 근육 세포의 합성을 증가시키고, 근육의 위축을 억제시킴으로써 근육 운동의 효율성을 향상시킬 수 있고, 피로감을 저하시키는 효과를 나타낼 수 있음을 확인할 수 있다.
이상의 설명은 본 발명의 기술 사상을 예시적으로 설명한 것에 불과한 것으로서, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 다양한 수정 및 변형이 가능하다. 또한, 본 발명에 개시된 실시 예들은 본 발명의 기술 사상을 한정하기 위한 것이 아니라 설명하기 위한 것이고, 이러한 실시 예에 의하여 본 발명의 기술 사상의 범위가 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 보호 범위는 아래의 청구범위에 의하여 해석되어야 하며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 기술 사상은 본 발명의 권리범위에 포함되는 것으로 해석되어야 할 것이다.

Claims (5)

  1. 연잎 추출물을 포함하는, 근육량 향상에 의한 근육 감소증의 예방 또는 개선용 기능성 식품 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 조성물 총 중량에 대하여 연잎 추출물을 1 내지 100중량% 포함하는 것인, 기능성 식품 조성물.
  3. 삭제
  4. 연잎에 대하여, 물, 탄소수 1 내지 6의 유기용매 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 연잎 추출물을 수득하는 단계를 포함하는, 제1항에 따른 기능성 식품 조성물의 제조방법.
  5. 연잎으로부터, 아임계 추출법, 초임계 유체 추출법 또는 초고압 추출법으로 연잎 추출물을 수득하는 단계를 포함하는, 제1항에 따른 기능성 식품 조성물의 제조방법.
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