KR102055287B1 - 발효산양삼과 숙성도라지를 이용한 조성물 및 그의 제조 방법 - Google Patents

발효산양삼과 숙성도라지를 이용한 조성물 및 그의 제조 방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 발효산양삼과 숙성도라지를 이용한 조성물 및 그의 제조 방법을 개시한다. 즉, 본 발명은 건조된 발효산양삼 및 건조된 숙성 도라지를 각각 분쇄한 후, 분말 형태의 발효산양삼 및 숙성 도라지를 혼합하여 혼합물을 준비하고, 상기 준비된 혼합물을 물과 섞어 반죽물을 준비하여 조성물을 제조함으로써, 항산화와 체내 면역력이 증진된 조성물을 소비자에게 제공할 수 있다.

Description

발효산양삼과 숙성도라지를 이용한 조성물 및 그의 제조 방법{Composition using fermented wood-cultivated ginseng and fermented balloon flower and manufacturing method thereof}
본 발명은 발효산양삼과 숙성도라지를 이용한 조성물 및 그의 제조 방법에 관한 것으로, 특히 건조된 발효산양삼 및 건조된 숙성 도라지를 각각 분쇄한 후, 분말 형태의 발효산양삼 및 숙성 도라지를 혼합하여 혼합물을 준비하고, 상기 준비된 혼합물을 물과 섞어 반죽물을 준비하여 조성물을 제조하는 발효산양삼과 숙성도라지를 이용한 조성물 및 그의 제조 방법에 관한 것이다.
인삼(Panax ginseng C. A. Meyer)은 약재로 사용되어 왔으며, 산에서 자연적으로 생장한 산삼(wild ginseng), 인삼(cultivated ginseng) 및 산 등의 서식지에서 재배된 산양삼(San-yang-sam)으로 구분할 수 있다. 상기 산양삼은 기존에 장뇌삼(Chang-nwae-sam)이라고 부르기도 했다.
또한, 기존의 경우 인삼을 가공하는 방법으로서 채취한 수삼을 건삼 또는 백삼으로 가공하여 건조시키거나, 증숙시킨 홍삼 또는 흑삼의 제조방법이 주를 이루어, 이러한 산양삼에 대한 가공 방법 및 그에 따른 산양삼의 활용 분양에 대한 연구가 활발하지 못한 상태이다.
한국등록특허 제10-0997054호 [명칭: 산양삼의 발효방법 및 이로부터 제조된 발효 산양삼]
본 발명의 목적은 건조된 발효산양삼 및 건조된 숙성 도라지를 각각 분쇄한 후, 분말 형태의 발효산양삼 및 숙성 도라지를 혼합하여 혼합물을 준비하고, 상기 준비된 혼합물을 물과 섞어 반죽물을 준비하여 조성물을 제조하는 발효산양삼과 숙성도라지를 이용한 조성물 및 그의 제조 방법을 제공하는 데 있다.
본 발명의 실시예에 따른 발효산양삼과 숙성도라지를 이용한 조성물의 제조 방법은 발효산양삼과 숙성도라지를 이용한 조성물의 제조 방법에 있어서, 분말 형태의 발효 산양삼 및 분말 형태의 숙성 도라지를 혼합한 후, 교반하여 혼합물을 준비하는 단계; 및 상기 준비된 혼합물과 물을 혼합한 후, 반죽하여 발효산양삼과 숙성도라지를 이용한 조성물을 준비하는 단계를 포함할 수 있다.
본 발명과 관련된 일 예로서 상기 혼합물은, 전체 혼합물 성분의 중량 비율에서 상기 발효 산양삼 5 중량% ~ 20 중량% 및 상기 숙성 도라지 80 중량% ~ 95 중량%로 조성할 수 있다.
본 발명과 관련된 일 예로서 상기 혼합물과 물을 혼합하여 상기 조성물을 준비하는 단계는, 상기 혼합물과 물의 혼합 비율은 1 : 0.7 ~ 2의 중량비율로 혼합하여 상기 조성물을 준비할 수 있다.
본 발명과 관련된 일 예로서 상기 조성물을 다른 부가 재료와 혼합하여, 환, 분말, 젤리 및 액상 형태 중 어느 하나의 형태의 최종 제품을 제조하는 단계를 더 포함할 수 있다.
본 발명과 관련된 일 예로서 상기 발효산양삼은, 산양삼의 뿌리를 물에 1회 ~ 5회 세척하는 과정; 상기 세척된 산양삼의 뿌리를 90℃ ~ 100℃에서 50분 ~ 70분 동안 증자하는 과정; 상기 증자된 산양삼의 뿌리를 70℃ ~ 80℃에서 3일 ~ 5일 동안 숙성하는 과정; 상기 증자 과정과 숙성 과정을 3회 ~ 5회 반복하는 과정; 상기 증자 과정과 숙성 과정을 3회 ~ 5회 반복한 산양삼의 뿌리를 55℃ ~ 60℃에서 2일 ~ 3일 동안 열풍 건조하는 과정; 및 상기 열풍 건조된 산양삼의 뿌리에 유산균을 2% ~ 5%(v/v) 접종한 후, 45시간 ~ 52시간 동안 발효시키는 과정을 통해 제조된 상태일 수 있다.
본 발명과 관련된 일 예로서 상기 숙성도라지는, 도라지의 뿌리를 물에 1회 ~ 5회 세척하는 과정; 상기 세척된 도라지의 뿌리를 90℃ ~ 100℃에서 50분 ~ 70분 동안 증자하는 과정; 상기 증자된 도라지의 뿌리를 75℃ ~ 85℃에서 3일 ~ 5일 동안 숙성하는 과정; 및 상기 숙성된 도라지의 뿌리를 55℃ ~ 60℃에서 2일 ~ 3일 동안 열풍 건조하는 과정을 통해 제조된 상태일 수 있다.
본 발명의 실시예에 따른 발효산양삼과 숙성도라지를 이용한 조성물은 발효산양삼과 숙성도라지를 이용한 조성물에 있어서, 분말 형태의 발효 산양삼과 분말 형태의 숙성 도라지를 혼합한 혼합물 및 물을 혼합한 후 반죽하여 조성한 조성물을 포함할 수 있다.
본 발명은 건조된 발효산양삼 및 건조된 숙성 도라지를 각각 분쇄한 후, 분말 형태의 발효산양삼 및 숙성 도라지를 혼합하여 혼합물을 준비하고, 상기 준비된 혼합물을 물과 섞어 반죽물을 준비하여 조성물을 제조함으로써, 산양삼 만을 이용하는 경우와 유사한 유효 성분의 조성물을 저렴하게 제공할 수 있는 효과가 있다.
도 1은 본 발명의 실시예에 따른 발효산양삼과 숙성도라지를 이용한 조성물의 제조 방법을 나타낸 흐름도이다.
도 2는 본 발명의 실시예에 따른 산양삼에 포함된 다수의 성분들에 대한 효능을 정리한 도이다.
도 3은 본 발명의 실시예에 따른 발효산양삼의 제조 방법을 나타낸 흐름도이다.
도 4는 본 발명의 실시예에 따른 발효산양삼의 제조 과정에 따른 상태를 나타낸 도이다.
도 5는 본 발명의 실시예에 따른 숙성도라지의 제조 방법을 나타낸 흐름도이다.
도 6은 본 발명의 실시예에 따른 숙성도라지의 제조 과정에 따른 상태를 나타낸 도이다.
도 7은 본 발명의 실시예에 따른 발효 산양삼의 DPPH 라디칼 소거활성 측정 결과를 나타낸 도이다.
도 8은 본 발명의 실시예에 따른 발효 산양삼의 ABTS를 이용한 라디칼 소거활성 측정 결과를 나타낸 도이다.
도 9 본 발명의 실시예에 따른 발효 산양삼의 총 폴리페놀 함량을 나타낸 도이다.
도 10은 본 발명의 실시예에 따른 발효 산양삼의 총 플라보노이드 함량을 나타낸 도이다.
도 11은 본 발명의 실시예에 따른 최종 분석 결과 샘플에 함유된 진세노사이드에 대한 크로마토그램을 나타낸 도이다.
본 발명에서 사용되는 기술적 용어는 단지 특정한 실시예를 설명하기 위해 사용된 것으로, 본 발명을 한정하려는 의도가 아님을 유의해야 한다. 또한, 본 발명에서 사용되는 기술적 용어는 본 발명에서 특별히 다른 의미로 정의되지 않는 한, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 의미로 해석되어야 하며, 과도하게 포괄적인 의미로 해석되거나, 과도하게 축소된 의미로 해석되지 않아야 한다. 또한, 본 발명에서 사용되는 기술적인 용어가 본 발명의 사상을 정확하게 표현하지 못하는 잘못된 기술적 용어일 때에는 당업자가 올바르게 이해할 수 있는 기술적 용어로 대체되어 이해되어야 할 것이다. 또한, 본 발명에서 사용되는 일반적인 용어는 사전에 정의되어 있는 바에 따라, 또는 전후 문맥상에 따라 해석되어야 하며, 과도하게 축소된 의미로 해석되지 않아야 한다.
또한, 본 발명에서 사용되는 단수의 표현은 문맥상 명백하게 다르게 뜻하지 않는 한 복수의 표현을 포함한다. 본 발명에서 "구성된다" 또는 "포함한다" 등의 용어는 발명에 기재된 여러 구성 요소들 또는 여러 단계를 반드시 모두 포함하는 것으로 해석되지 않아야 하며, 그 중 일부 구성 요소들 또는 일부 단계들은 포함되지 않을 수도 있고, 또는 추가적인 구성 요소 또는 단계들을 더 포함할 수 있는 것으로 해석되어야 한다.
또한, 본 발명에서 사용되는 제 1, 제 2 등과 같이 서수를 포함하는 용어는 구성 요소들을 설명하는데 사용될 수 있지만, 구성 요소들은 용어들에 의해 한정되어서는 안 된다. 용어들은 하나의 구성 요소를 다른 구성 요소로부터 구별하는 목적으로만 사용된다. 예를 들어, 본 발명의 권리 범위를 벗어나지 않으면서 제 1 구성 요소는 제 2 구성 요소로 명명될 수 있고, 유사하게 제 2 구성 요소도 제 1 구성 요소로 명명될 수 있다.
이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명에 따른 바람직한 실시예를 상세히 설명하되, 도면 부호에 관계없이 동일하거나 유사한 구성 요소는 동일한 참조 번호를 부여하고 이에 대한 중복되는 설명은 생략하기로 한다.
또한, 본 발명을 설명함에 있어서 관련된 공지 기술에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 흐릴 수 있다고 판단되는 경우 그 상세한 설명을 생략한다. 또한, 첨부된 도면은 본 발명의 사상을 쉽게 이해할 수 있도록 하기 위한 것일 뿐, 첨부된 도면에 의해 본 발명의 사상이 제한되는 것으로 해석되어서는 아니 됨을 유의해야 한다.
이하에서는, 본 발명에 따른 발효산양삼과 숙성도라지를 이용한 조성물의 제조 방법을 도 1 내지 도 11을 참조하여 상세히 설명한다.
도 1은 본 발명의 실시예에 따른 발효산양삼과 숙성도라지를 이용한 조성물의 제조 방법을 나타낸 흐름도이다.
먼저, 분말 형태의 발효 산양삼, 분말 형태의 숙성 도라지를 혼합한 후, 교반하여 혼합물을 준비한다(S110). 이때, 상기 분말 형태의 발효 산양삼, 숙성 도라지 등은 60 메쉬(mesh) ~ 150 메쉬 크기일 수 있다.
여기서, 전체 혼합물 성분의 중량 비율에서 상기 발효 산양삼 5 중량% ~ 20 중량% 및 상기 숙성 도라지 80 중량% ~ 95 중량%로 조성(또는 구성)한다(S120).
상기 산양삼(山養蔘)은 산지에서 차광막 등 인공시설을 설치하지 아니하고 생산되는 삼(건조된 것을 포함한다)을 의미한다.
또한, 성분과 효능에서는 일반적으로 알려진 인삼의 주요한 성분으로는 전체 유기물 중 질소를 함유한 성분이 12% ~ 16%이고, 약리효과가 높다고 알려진 사포닌성분이 3% ~ 6%이고, 이 밖에 다양한 유기물과 무기물을 함유하고 있다.
인삼의 여러 가지 유효성분 중 주된 약리작용을 하는 것이 사포닌이다.
상기 사포닌(saponin)은 식물계에 널리 분포하는 트리텔펜 및 스테로이드계의 배당체의 총칭으로, 예전에는 비영양물질로 알려졌으나, 항암, 항산화, 콜레스테롤 저하 효과가 밝혀지면서 생리활성물질로 각광받기 시작했다.
한방약에서는 강심제나 이뇨제로 사용되어 왔으며, 특히 인삼 사포닌은 다른 식물에서 발견되는 사포닌과는 다른 특이한 화학 구조를 가지고 있으며, 약리 효능도 특이하여 인산(Ginseng) 배당체(Glycoside)란 의미로 '진세노사이드(Ginsenoside)'라고 부르며, 일반적으로 알려진 효능은 다음과 같다.
산양삼 사포닌함량은 protopanaxadiol group(RD)과 protopanaxtriol group(RT)의 비율에 있어서 3.25%로, 재배삼 4 년생 2.45%와 6 년근 2.18%에 비하여 높은 것으로 알려져 있다. 특히, ginsenoside Rb1 과 ginsenoside Rg1 의 비율에 있어서 재배삼은 4 년근에서 3.51%, 6 년근에서 4.86%에 비하여 산양삼이 10.22%로 높은 것으로 알려져 있다. 이외에 ginsenoside Rb1, Rd, Re는 함량도 재배삼에 비하여 산양삼이 높게 나타나는 것으로 알려져 있다. 또한, 산양삼과 인삼, 산삼간의 항산화능력에 관한 비교연구를 통하여 TAC, ORAC, phenol 함량과 ROS 생성억제 등의 효과에서 산삼이 가장 높고, 산양삼이 인삼보다 높은 것으로 알려져 있다. 또한, SPME-GC(solid phase micro-extraction) 기법을 이용한 분석결과 β-oabasubsene과 Υ-muurolene을 한국 인삼과 중국 인삼 간의 구별지표로 제시하였다
도 2에 도시된 바와 같이, 산양삼에 포함된 다수의 성분들은 항염증 작용, 면역기능 증강 등에 효능이 있는 것으로 알려져 있다.
상기 도라지(또는 장백 도라지)(Platycodon grandiflorum)는 초롱꽃(Campanulaceae)과 식물로 다년생 초본식물이고, 그 뿌리를 길경이라 하며 중국 및 일본 등지에서 널리 자생한다. 도라지의 약리작용으로는 거담, 진해작용이 뛰어난 것으로 알려져 있다. 상기 길경에는 다량의 사포닌이 존재하며 주성분으로는 platycodin A, C, D, polygalacin D, D2 등과 같은 saponin류가 알려져 있다.
국내에서 도라지 품종으로 등록된 계통은 국내 자생하는 도라지의 순계분석을 통하여 확보한 장백도라지와 으뜸백도라지가 대표적이다. 이 외에도 등록은 되지 않았지만 제주도, 밀양, 아산 등지에서 백도라지 식물체로부터 종자를 채집하여 대대로 재배하여 온 계통들도 알려져 있다.
현재 국내의 국립종자관리원에 등록된 장백도라지 계통은 밀양에서 수집한 재래종을 계통 분리하여 2002년도 농촌진흥청에서 품종화한 것으로 국내 순수 토종이다. 장백도라지 계통은 꽃이 백색이고 잎모양은 피침형이며, 개화기, 경장 및 경태는 재래종과 비슷하나 뿌리가 길고 굵다.
상기 도라지의 뿌리는 굵고 줄기는 곧게 자라며 자르면 흰색 즙액이 나온다. 흰색 꽃이 피는것을 백도라지, 꽃이 겹으로 되어 있는 것은 겹도라지, 흰색 꽃이 피는 겹도라지를 흰겹도라지라고 한다.
또한, 상기 도라지는 섬유질이 풍부하고 칼슘, 철 등이 풍부한 알칼리성 식품으로, 기관지 질환에 널리 이용되어 왔다. 상기 도라지는 쓴맛이 강하여 물에 담궈 쓴맛을 제거한 뒤에 식용으로 섭취하였으며, 도라지의 쓴맛은 플라티코딘(platycodin)이라는 성분으로 알려져 있으며 거담, 진해, 진통 등의 도라지 효능의 주요한 성분이다.
또한, 상기 도라지는 홍삼과 같은 사포닌 성분이 있어 가래삭힘에 효능이 있으며, 혈당 강하 작용을 하며, 콜레스테롤 저하에 효능이 있는 것으로 알려져 있다(S110).
이후, 상기 준비된 혼합물과 물(예를 들어 정제수 등 포함)을 혼합한 후, 반죽하여 발효산양삼과 숙성도라지를 이용한 조성물을 준비(또는 제조)한다. 이때, 상기 혼합물과 물의 혼합 비율은 1 : 0.7 ~ 2의 중량비율(또는 중량비)일 수 있다(S120).
이와 같이 준비된(또는 제조된) 발효산양삼과 숙성도라지를 이용한 조성물은 제조 용도에 따라 다른 부가 재료와 혼합하여 환, 분말, 젤리, 액상 등의 형태의 최종 제품(또는 최종 상품)으로 생산(또는 제조)될 수 있다.
도 3은 본 발명의 실시예에 따른 발효산양삼의 제조 방법을 나타낸 흐름도이다.
먼저, 도 4에 도시된 바와 같이, 산양삼의 뿌리를 물에 1회 ~ 5회(일반적으로 3회) 세척한다. 이때, 상기 산양삼(또는 산양삼의 뿌리)은 성상 검사, 변질 검사, 부패 검사, 이물질 검사 등을 통해 이상이 있는 제품은 제거된 상태일 수 있다(S310).
이후, 상기 세척된 산양삼의 뿌리를 90℃ ~ 100℃(일반적으로 95℃)에서 50분 ~ 70분(일반적으로 60분) 동안 증자한다(또는 찐다)(S320).
이후, 상기 도 4에 도시된 바와 같이, 상기 증자된(또는 찐) 산양삼의 뿌리를 70℃ ~ 80℃(일반적으로 75℃)에서 3일 ~ 5일(일반적으로 4일) 동안 숙성한다.
또한, 상기 증자 과정(S320)과 숙성 과정을 3회 ~ 5회 반복한다(S330).
이후, 상기 증자 과정과 숙성 과정을 3회 ~ 5회 반복한 산양삼의 뿌리를 55℃ ~ 60℃에서 2일 ~ 3일 동안 열풍 건조한다(S340).
이후, 상기 도 4에 도시된 바와 같이, 상기 열풍 건조된 산양삼의 뿌리에 Lactobacillus plantarum P1201, Lactobacillus brevis BNK484 등을 포함하는 유산균을 2% ~ 5%(v/v) 접종(첨가)한 후, 45시간 ~ 52시간(일반적으로 48시간) 동안 발효시켜, 발효 산양삼을 제조(또는 준비)한다(S350).
이때, 상기 유산균은 맥아배지(미도시)에서 Lactobacillus plantarum P1201 균주, Lactobacillus brevis BNK484 균주 등을 35℃ ~ 40℃(일반적으로 37℃)에서 45시간 ~ 50시간(일반적으로 48시간) 동안 각각 종균배양하여 각각의 배양액(또는 유산균)을 준비할 수 있다.
이와 같이 제조된 발효 산양삼은 분쇄기(미도시)를 통해 60 메쉬 ~ 100 메쉬 크기의 분말 형태로 분쇄되어 사용될 수 있다.
본 발명의 실시예에서는 산양삼의 뿌리를 이용하여 상기 발효 산양삼을 제조하는 것을 설명하고 있으나, 이에 한정되는 것은 아니며, 상기 산양삼의 뿌리 이외에도 산양삼의 줄기, 몸체 등을 함께 이용하여 상기 발효 산양삼을 제조할 수도 있다.
도 5는 본 발명의 실시예에 따른 숙성도라지의 제조 방법을 나타낸 흐름도이다.
먼저, 도 5에 도시된 바와 같이, 도라지(또는 장백 도라지)의 뿌리를 물에 1회 ~ 5회(일반적으로 3회) 세척한다. 이때, 상기 도라지(또는 도라지의 뿌리)는 성상 검사, 변질 검사, 부패 검사, 이물질 검사 등을 통해 이상이 있는 제품은 제거된 상태일 수 있다(S510).
이후, 상기 도 6에 도시된 바와 같이, 상기 세척된 도라지의 뿌리를 90℃ ~ 100℃(일반적으로 95℃)에서 50분 ~ 70분(일반적으로 60분) 동안 증자한다(또는 찐다)(S520).
이후, 상기 도 6에 도시된 바와 같이, 상기 증자된(또는 찐) 도라지의 뿌리를 75℃ ~ 85℃(일반적으로 80℃)에서 3일 ~ 5일(일반적으로 4일) 동안 숙성한다.
이때, 상기 증자 과정과 숙성 과정을 3회 ~ 5회 반복할 수도 있다(S530).
이후, 상기 숙성된 도라지의 뿌리를 55℃ ~ 60℃에서 2일 ~ 3일 동안 열풍 건조하여 상기 숙성 도라지를 제조(또는 준비)한다(S540).
이와 같이 제조된 숙성 도라지는 분쇄기(미도시)를 통해 60 메쉬 ~ 100 메쉬 크기의 분말 형태로 분쇄되어 사용될 수 있다.
본 발명의 실시예에서는 도라지의 뿌리를 이용하여 상기 숙성 도라지를 제조하는 것을 설명하고 있으나, 이에 한정되는 것은 아니며, 상기 도라지의 뿌리 이외에도 도라지의 줄기, 몸체 등을 함께 이용하여 상기 숙성 도라지를 제조할 수도 있다.
[실험예]
앞선 본 발명의 실시예에 따라 제조된 발효산양삼과, 시제품 A, 시제품 B, 시제품 C 및 시제품 D에 대해서, 각 시료 약 5g을 정밀히 달아 50% 주정 50ml을 넣어 20분 동안 초음파 추출한 후, 3000rpm에서 10분 간 원심분리하여 상층액만 0.45um 멤브레인 필터로 여과하여 시험용액으로 하였다.
도 7은 본 발명의 실시예에 따른 발효 산양삼의 DPPH 라디칼 소거활성 측정 결과를 나타낸 도이다.
시제품 추출물의 2,2'-diphenyl-1-picrylhydrazyl(DPPH)에 대한 DPPH 라디칼(radical) 소거능을 측정하였다. 즉, 96-well plate에 에탄올에 녹인 1.5×104M DPPH 용액 90㎕와 시료 10㎕를 첨가한 후 10분간 반응을 시킨 다음, microplate reader로 517 nm에서 흡광도를 측정하였다.
농도에 따른 DPPH 라디칼 소거활성을 다음의 [수학식 1]에 따라 계산하였으며, DPPH 용액 대신 에탄올을 첨가한 시료의 흡광도를 blank로 하였으며, 메탄올을 넣은 것을 대조구로 하였다.
Figure 112017117431616-pat00001
상기 도 7에 나타낸 바와 같이, 컨트롤(또는 발효 산양삼)에 비하여 전반적으로 시제품에서 소거능이 약한 것을 확인할 수 있다.
도 8은 본 발명의 실시예에 따른 발효 산양삼의 ABTS를 이용한 라디칼 소거활성 측정 결과를 나타낸 도이다.
ABTS 라디칼을 이용한 항산화력 측정은 Re 등의 방법을 변형하여 측정하였다. 7mM의 2,2'-azinobis-(3-ethylbenzothiazolin-6-sulphonic-acid diammonium salt와 2.4mM potassium persulfate 용액을 혼합하여 4시간 동안 방치하여 ABTS+·를 형성시킨 후, 이 용액을 734 nm에서 흡광 값이 0.7 ~ 0.8이 되도록 몰 흡광계수(ε=3.6×104M-1cm-1)를 이용하여 에탄올로 희석하였다. 희석된 ABTS 용액 225㎕에 시료 25㎕를 가한 후, Multimicroplate reader-SpectraMax M5를 사용하여 734 nm에서 흡광도 값을 측정하였다. positive control(또는 대조구)로는 BHA와 아스코르브산(ascorbic acid)을 사용하였고, 흡광도가 50% 감소할 때 나타나는 시료의 라디칼 소거능(IC50)으로 표시하였으며, 각 실험은 다음의 [수학식 2]에 의하여 계산하였다.
Figure 112017117431616-pat00002
상기 도 8에 나타낸 바와 같이, ABTS 라디칼 소거능은 컨트롤(또는 발효 산양삼)에 비하여 전반적으로 시제품에서 ABTS 라디칼 소거능이 약한 것을 확인할 수 있다.
도 9 본 발명의 실시예에 따른 발효 산양삼의 총 폴리페놀 함량을 나타낸 도이다.
총 폴리페놀(Total polyphenol) 함량의 측정은 20㎕의 추출물을 96-well microtiter plate에 분주한 후, 1 N Folin-Ciocalteu 시약을 넣고 실온에서 3분간 반응시켰다. 이후, 10% sodium carbonate 용액을 80㎕ 가하여 1시간 반응시킨 후, Multimicroplate reader를 사용하여 765 nm에서 흡광도를 측정하였다.
또한, 총 폴리페놀의 함량은 0 ~ 200 ㎍/ml의 갈산(gallic acid)을 이용하여 표준곡선을 작성하고, 시료 1g당 갈산의 함량(GAE)으로 나타냈다.
상기 도 9에 나타낸 바와 같이, 시제품 A와 시제품 B가 컨트롤(또는 발효 산양삼)와 비슷한 수준의 총 폴리페놀 함량을 나타냈다.
도 10은 본 발명의 실시예에 따른 발효 산양삼의 총 플라보노이드 함량을 나타낸 도이다.
총 플라보노이드(Total flavonoid) 함량의 측정은 추출물 100㎕와 에탄올 400㎕를 섞은 후, 500㎕ 2% aluminum chloride 용액을 첨가하여 1시간 반응시킨 후, Multimicroplate reader를 사용하여 430 nm에서 흡광도를 측정하였다.
또한, 총 플라보노이드 함량은 0 ~ 250 ㎍/ml 농도의 quercetin 용액을 이용하여 작성한 표준곡선을 이용하여, 시료 1g당 quercetin의 함량(QE)으로 표시하였다.
상기 도 10에 나타낸 바와 같이, 컨트롤(또는 발효 산양삼)이 다른 시제품에 비해서 높은 총 플라보노이드 함량을 나타냈다.
본 발명의 실험예에 따를 전처리 방법은 다음과 같다.
즉, 본 실험에 사용한 표준물질은 ChemFaces사(chinese)의 제품을 구입하여 사용하였으며, 각각의 표준품을 메탄올(methanol)에 완전히 녹여, 1mg/ml 농도의 혼합표준원액을 제조한 후, 메탄올로 희석하여 10, 100, 500, 1000 ㎍/ml의 표준 용액을 제조하여 검량선을 작성하였다. 단, Rb3, Rd2, Rf1, Rf2, Rf3는 2, 20, 100, 200 ㎍/ml의 농도로 검량선을 작성하였다.
또한, 분석 조건은 다음의 [표 1]과 같다.
Instrument WATES Acquity UPLC H-Class system
Detector PDA e Detector
Column Acquity UPLC BEH C18 (2.1 50 mm, 1.7 um)
Column temp 35
Wavelength 203 nm (UV)
Condition Time (min) Water ACN Flow (mL/min)
0 82 18 0.4
4 82 18 0.4
8 80 20 0.4
10 77 23 0.4
14.5 71 29 0.4
27 50 50 0.4
31 10 90 0.4
33 82 18 0.4
35 82 18 0.4
Injection volume
시료의 진세노사이드 분석을 위한 표준검량선의 직선식(E)과 상관계수(R^2) 및 머무름 시간(RT)은 다음의 [표 2]와 같다.
Name Equation R^2 RT
Rg1 Y = 1.46e+003 X + 1.52e+004 0.999598 5.703
Re Y = 1.32e+003 X + 1.36e+004 0.999630 6.118
Rf Y = 1.16e+003 X + 1.31e+004 0.999620 13.255
Rh1 Y = 1.67e+003 X + 1.90e+004 0.999630 14.878
Rg2 Y = 1.30e+003 X + 1.24e+004 0.999804 15.089
Rf3 Y = 7.71e+002 X + 2.08e+003 0.999655 15.654
Rb1 Y = 1.06e+003 X + 1.36e+004 0.999527 16.360
Rf1 Y = 1.95e+003 X + 4.43e+003 0.999672 17.247
Rc Y = 1.03e+003 X + 1.32e+004 0.999567 17.779
Rd2 Y = 9.34e+002 X + 2.50e+003 0.999657 22.053
Rf2 Y = 9.50e+002 X + 3.48e+003 0.999345 23.444
Rg3 Y = 1.64e+003 X + 1.87e+004 0.999536 24.759
CK Y = 1.75e+003 X + 2.09e+004 0.999490 27.662
Rh2 Y = 1.98e+003 X + 2.14e+004 0.999607 28.415
이와 같이 시험시료를 전처리 방법에 따라 분석하고, 표준검량선에 대입 후, 시험 용액에서 측정된 진세노사이드 함량은 다음의 [수학식 3]에 대입하여 최종 농도를 산출하였다.
Figure 112017117431616-pat00003
여기서, 상기 C는 검량선에서 구한 각각의 ginsenoside 농도(ug/ml)를 나타내고, 상기 V는 시험용액의 최종부피(ml)를 나타내고, 상기 S는 시료 채취량(g)을 나타내고, 상기 D는 시험용액의 희석배수를 나타낸다.
최종 분석 결과 샘플에 함유된 진세노사이드의 농도는 다음의 [표 3]과 같다.
또한, 도 11은 본 발명의 실시예에 따른 최종 분석 결과 샘플에 함유된 진세노사이드에 대한 크로마토그램을 나타낸 도이다.
발효산양삼 시제품A 시제품B 시제품C 시제품D
Rg1 218.3 N N 731.7 565.8
Re 337.2 N N 583.7 354.1
Rf 828.8 422.6 386 321.6 238.7
Rh1 610.3 29.4 N N N
Rg2 1119.5 212.9 109 N N
Rf3 9.4 7.1 9.2 N N
Rb1 2123.4 373.1 90.6 649.6 365
Rf1 188.5 31.3 N 86.3 43
Rc 713.6 54.9 N 135.1 46.5
Rb3 33.6 N N 3.3 N
Rb2 931.2 102.7 N N N
Rd 198.4 N N N N
Rd2 N N N N N
Rf2 58.3 N N N N
Rg3 2093.2 364.5 102 N N
CK N - N N N
Rh2 4378 900.9 370 N N
여기서, 상기 진세노사이드의 농도는 ug/g으로 나타내고, 상기 N은 not detected를 나타낸다.
삭제
전술된 내용은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 수정 및 변형이 가능할 것이다. 따라서, 본 발명에 개시된 실시예들은 본 발명의 기술 사상을 한정하기 위한 것이 아니라 설명하기 위한 것이고, 이러한 실시예에 의하여 본 발명의 기술 사상의 범위가 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 보호 범위는 아래의 청구범위에 의하여 해석되어야 하며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 기술 사상은 본 발명의 권리범위에 포함되는 것으로 해석되어야 할 것이다.
본 발명은 건조된 발효산양삼 및 건조된 숙성 도라지를 각각 분쇄한 후, 분말 형태의 발효산양삼 및 숙성 도라지를 혼합하여 혼합물을 준비하고, 상기 준비된 혼합물을 물과 섞어 반죽물을 준비하여 조성물을 제조함으로써, 항산화와 체내 면역력이 증진된 조성물을 소비자에게 제공할 수 있는 것으로, 산양삼 응용 분야, 도라지 응용 분야 등에서 광범위하게 이용될 수 있다.

Claims (9)

  1. 발효산양삼과 숙성도라지를 이용한 조성물의 제조 방법에 있어서,
    분말 형태의 발효 산양삼 및 분말 형태의 숙성 도라지를 혼합한 후, 교반하여 혼합물을 준비하는 단계; 및
    상기 준비된 혼합물과 물을 혼합한 후, 반죽하여 발효산양삼과 숙성도라지를 이용한 조성물을 준비하는 단계를 포함하되,
    상기 혼합물은,
    전체 혼합물 성분의 중량 비율에서 상기 발효 산양삼 5 중량% ~ 20 중량% 및 상기 숙성 도라지 80 중량% ~ 95 중량%로 조성하고,
    상기 혼합물과 물을 혼합하여 상기 조성물을 준비하는 단계는,
    상기 혼합물과 물의 혼합 비율은 1 : 0.7 ~ 2의 중량비율로 혼합하여 상기 조성물을 준비하며,
    상기 발효산양삼은,
    산양삼의 뿌리를 물에 1회 ~ 5회 세척하는 과정;
    상기 세척된 산양삼의 뿌리를 90℃ ~ 100℃에서 50분 ~ 70분 동안 증자하는 과정;
    상기 증자된 산양삼의 뿌리를 70℃ ~ 80℃에서 3일 ~ 5일 동안 숙성하는 과정;
    상기 증자 과정과 숙성 과정을 3회 ~ 5회 반복하는 과정;
    상기 증자 과정과 숙성 과정을 3회 ~ 5회 반복한 산양삼의 뿌리를 55℃ ~ 60℃에서 2일 ~ 3일 동안 열풍 건조하는 과정; 및
    상기 열풍 건조된 산양삼의 뿌리에 유산균을 2% ~ 5%(v/v) 접종한 후, 45시간 ~ 52시간 동안 발효시키는 과정을 통해 제조된 상태이고,
    상기 숙성도라지는,
    도라지의 뿌리를 물에 1회 ~ 5회 세척하는 과정;
    상기 세척된 도라지의 뿌리를 90℃ ~ 100℃에서 50분 ~ 70분 동안 증자하는 과정;
    상기 증자된 도라지의 뿌리를 75℃ ~ 85℃에서 3일 ~ 5일 동안 숙성하는 과정; 및
    상기 숙성된 도라지의 뿌리를 55℃ ~ 60℃에서 2일 ~ 3일 동안 열풍 건조하는 과정을 통해 제조된 상태인 것을 특징으로 하는 발효산양삼과 숙성도라지를 이용한 조성물의 제조 방법.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 제 1 항에 있어서,
    상기 조성물을 다른 부가 재료와 혼합하여, 환, 분말, 젤리 및 액상 형태 중 어느 하나의 형태의 최종 제품을 제조하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 발효산양삼과 숙성도라지를 이용한 조성물의 제조 방법.
  5. 삭제
  6. 삭제
  7. 발효산양삼과 숙성도라지를 이용한 조성물에 있어서,
    분말 형태의 발효 산양삼과 분말 형태의 숙성 도라지를 혼합한 혼합물 및 물을 혼합한 후 반죽하여 조성한 조성물을 포함하되,
    상기 혼합물은,
    전체 혼합물 성분의 중량 비율에서 상기 발효 산양삼 5 중량% ~ 20 중량% 및 상기 숙성 도라지 80 중량% ~ 95 중량%로 조성하고,
    상기 발효산양삼은,
    산양삼의 뿌리를 물에 1회 ~ 5회 세척하는 과정;
    상기 세척된 산양삼의 뿌리를 90℃ ~ 100℃에서 50분 ~ 70분 동안 증자하는 과정;
    상기 증자된 산양삼의 뿌리를 70℃ ~ 80℃에서 3일 ~ 5일 동안 숙성하는 과정;
    상기 증자 과정과 숙성 과정을 3회 ~ 5회 반복하는 과정;
    상기 증자 과정과 숙성 과정을 3회 ~ 5회 반복한 산양삼의 뿌리를 55℃ ~ 60℃에서 2일 ~ 3일 동안 열풍 건조하는 과정; 및
    상기 열풍 건조된 산양삼의 뿌리에 유산균을 2% ~ 5%(v/v) 접종한 후, 45시간 ~ 52시간 동안 발효시키는 과정을 통해 제조된 상태이고,
    상기 숙성도라지는,
    도라지의 뿌리를 물에 1회 ~ 5회 세척하는 과정;
    상기 세척된 도라지의 뿌리를 90℃ ~ 100℃에서 50분 ~ 70분 동안 증자하는 과정;
    상기 증자된 도라지의 뿌리를 75℃ ~ 85℃에서 3일 ~ 5일 동안 숙성하는 과정; 및
    상기 숙성된 도라지의 뿌리를 55℃ ~ 60℃에서 2일 ~ 3일 동안 열풍 건조하는 과정을 통해 제조된 상태인 것을 특징으로 하는 발효산양삼과 숙성도라지를 이용한 조성물.
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