KR102049698B1 - 피부 개선용 화장료 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 아세틸글루코사민, 소듐하이알루로네이트, 하이알루로닉애씨드, 소듐하이알루로네이트크로스폴리머, 하이드롤라이즈드소듐하이알루로네이트, 하이드롤라이즈드하이알루로닉애씨드, 하이드록시프로필트라이모늄하이알루로네이트 및 소듐아세틸레이티드하이알루로네이트로 이루어지는 복합물과 겔리듐 카르틸라기네움, 감태, 납작파래, 모자반 및 자이언트켈프 혼합추출물을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로서, 상기 화장료 조성물은 우수한 피부탄력증진 및 보습활성을 나타낸다.

Description

피부 개선용 화장료 조성물{Cosmetic composition for improving skin conditions}
본 발명은 피부 개선용 화장료 조성물에 관한 것으로, 구체적으로는 아세틸글루코사민, 소듐하이알루로네이트, 하이알루로닉애씨드, 소듐하이알루로네이트크로스폴리머, 하이드롤라이즈드소듐하이알루로네이트, 하이드롤라이즈드하이알루로닉애씨드, 하이드록시프로필트라이모늄하이알루로네이트 및 소듐아세틸레이티드하이알루로네이트로 이루어지는 복합물과 겔리듐 카르틸라기네움, 감태, 납작파래, 모자반 및 자이언트켈프 혼합추출물을 함유하여 우수한 피부탄력 증진 및 피부보습 활성을 나타내는 화장료 조성물에 관한 것이다.
피부는 조직학적으로 표피(epidermis), 진피(dermis), 피하지방(subcutis)의 3층으로 구성되어 있는데, 외부로부터의 다양한 자극에 대한 방어와 피부를 통한 체내수분의 과도한 발산을 막는 보호 기능을 하며 가장 외부에 존재함으로써 피부노화의 측면에서 가장 중요한 역할을 한다.
표피에서도 최외각층인 각질층을 구성하는 성분은 각질세포와 피부지질로서 피부지질은 피부의 장벽 기능을 담당하는데, 외부 유해물질로부터 피부를 보호하고 체내 물질의 유출을 방지하며 피부 수분증발을 방지하는 중요한 기능이라고 할 수 있다.
그러나 피부는 스트레스, 햇빛, 대기오염, 담배 등의 외부환경에 노출되어 활성 산소종이 발생하여, 과산화 지질이 생성되고 콜라겐과 엘라스틴 등의 피부 구성 단백질이 변형이 된다. 또한 나이가 들어감에 따라 피부 세포의 활성이 저하되면서 콜라겐과 엘라스틴의 생성 능력이 저하되고, 그 결과로 피부의 진피층이 파괴되면서 피부 내부 구조가 약해지고 피부가 얇아지게 되면서, 지방층이 엷은 얼굴에 주름의 형성이 촉진된다. 또한 진피층 내에서 피부보습을 담당하는 점다당질(Glycosaminoglycans, GAGs)이 피부 노화로 인하여 감소하면서 피부가 건조해지며 색소 침착, 탄력 감소 등의 노화 피부의 특징이 나타나게 된다.
그리고 사람 피부의 노화는 나이가 많아짐에 따라 섬유아세포 수가 감소하게 되면서 나타나게 된다. 자외선, 기후, 흡연 등에 의해 여러 가지 신호체계가 활성화됨으로써 피부 구성성분이 손상되면서 피부노화가 진행된다. 자외선에 의해 손상 받은 피부는 콜라겐의 양이 감소되어 있는데, 이는 자외선에 의해 피부 내에서 MMPs(matrix metalloproteinase)의 발현이 증가하기 때문이며, 이러한 MMPs는 피부 광노화 발생에 중요한 역할을 한다(Fisher et al., 1999). MMPs는 피부의 세포들(keratinocytes, fibroblasts)로부터 분비되어 세포 외 기질(extracellular matrix, ECM)과 기저막(basement membrane, BM)을 구성하는 대부분의 단백질 성분을 분해함으로써 피부 탄력을 유지하는 결합조직을 파괴하여 주름과 탄력저하 및 피부 처짐의 원인이 되는 것으로 알려져 있다.
주름형성에 있어서 콜라겐 이외에 탄력섬유인 엘라스틴(elastin)과 엘라스틴 분해에 관여하는 효소인 엘라스타제(elastase)에 대해서도 많은 연구가 진행되고 있는 것으로 보고되고 있다(Antonicelli et al., 2007; Isenburg et al., 2004; Seite et al., 2006). 특히, 만성적인 UV 조사에 의해 사람의 피부 표피의 각질형성세포(keratinocytes)에서도 엘라스틴의 전구체인 tropoelastin mRNA 발현이 증가한다는 보고가 있었으며, 선택적인 엘라스타제 활성의 억제를 통한 주름형성에서 엘라스타제의 역할이 보고되기도 하였다.
생활수준 향상에 따라 피부노화와 같은 미용과 건강에 관한 관심이 급증하는 가운데 기능성 화장품을 개발하려는 연구가 활발해지고 있으며, 식품의약품안전청의 기능성화장품 고시 품목으로서 주름개선 소재로 대표적으로 사용되는 레티놀(비타민 A), AHA(a-hydroxy acid), 아데노신 등은 콜라겐의 합성을 증가시키는 물질로 많이 사용되고 있지만 빛과 열에 불안정하고 피부에 자극이 있는 것으로 알려져 있다.
이에 본 발명자들은 상기한 문제점을 해결하고자 여러 소재로부터 피부 탄력 증진 및 피부보습 효능을 확인하고 이에 따라 새로운 화장료 조성물을 개발하고자 하였으며, 이에 본 발명을 완성하였다.
(0001) 대한민국 공개특허 제10-2008-0069735호(2008.07.29) (0002) 대한민국 공개특허 제10-2012-0056594호(2012.06.04) (0003) 대한민국 공개특허 제10-2013-0023326호(2013.03.07) (0004) 대한민국 공개특허 제10-2008-0086060호(2008.09.01) (0005) 대한민국 공개특허 제10-2016-0173661호(2016.12.19)
본 발명은 아세틸글루코사민, 소듐하이알루로네이트, 하이알루로닉애씨드, 소듐하이알루로네이트크로스폴리머, 하이드롤라이즈드소듐하이알루로네이트, 하이드롤라이즈드하이알루로닉애씨드, 하이드록시프로필트라이모늄하이알루로네이트 및 소듐아세틸레이티드하이알루로네이트 복합물과 겔리듐 카르틸라기네움, 감태, 납작파래, 모자반 및 자이언트켈프 혼합추출물을 함유하여 피부탄력 증진 및 피부보습 효과가 우수한 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명에 따르면, 아세틸글루코사민, 소듐하이알루로네이트, 하이알루로닉애씨드, 소듐하이알루로네이트크로스폴리머, 하이드롤라이즈드소듐하이알루로네이트, 하이드롤라이즈드하이알루로닉애씨드, 하이드록시프로필트라이모늄하이알루로네이트 및 소듐아세틸레이티드하이알루로네이트 복합물과 겔리듐 카르틸라기네움, 감태, 납작파래, 모자반 및 자이언트켈프 혼합추출물을 함유하는 화장료 조성물이 제공된다.
상기 혼합추출물은 겔리듐 카르틸라기네움, 감태, 납작파래, 모자반 및 자이언트켈프가 각각 1~15:1~15:1~15:1~15:1~15의 중량비로 혼합되어 추출된 것이다.
유효성분으로서의 상기 아세틸글루코사민, 소듐하이알루로네이트, 하이알루로닉애씨드, 소듐하이알루로네이트크로스폴리머, 하이드롤라이즈드소듐하이알루로네이트, 하이드롤라이즈드하이알루로닉애씨드, 하이드록시프로필트라이모늄하이알루로네이트 및 소듐아세틸레이티드하이알루로네이트 복합물과 겔리듐 카르틸라기네움, 감태, 납작파래, 모자반 및 자이언트켈프 혼합추출물은 각각 1~15:0.1~3의 중량비로, 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.001~10 중량% 함유된다.
상기 화장료 조성물은 피부 탄력 증진 및 피부보습용인 것을 특징으로 한다.
본 발명 화장료 조성물은 아세틸글루코사민, 소듐하이알루로네이트, 하이알루로닉애씨드, 소듐하이알루로네이트크로스폴리머, 하이드롤라이즈드소듐하이알루로네이트, 하이드롤라이즈드하이알루로닉애씨드, 하이드록시프로필트라이모늄하이알루로네이트 및 소듐아세틸레이티드하이알루로네이트 로 이루어지는 복합물과 겔리듐 카르틸라기네움, 감태, 납작파래, 모자반 및 자이언트켈프 혼합추출물을 함께 함유함에 따른 상승작용에 의하여 우수한 피부상태 개선 효과를 나타낸다.
이하, 본 발명을 더욱 상세히 설명한다.
본 발명 화장료 조성물에 함유되는 아세틸글루코사민은 게, 새우 등의 갑각류와 버섯류, 연체동물 골격에 주로 존재하는 천연물질로 히알루론산의 전구체가 되며, 기저층에서 세포의 유착, 증식 및 활성을 촉진하는 기능이 있다. 아세틸글루코사민은 히알루론산의 생성을 촉진하는 것으로 알려져 있고, 진피층에서 피부 보습에 중요한 역할을 하고 있다.
소듐하이알루로네이트(Sodium Hyaluronate)는 안과(眼)수술에서 세포의 보호,조직간극의 유지, 조직윤활을 위해 사용되는 점성고분자 물질의 대표적인 물질로서, 화학구조는 N-아세틸글루코사민과 글루크론산으로 구성되는 장쇄상의 글리코사미노글리칸으로 대단히 큰 분자량(550~1,000kDa)의 다수의 친수기를 가지며 높은 점성 및 수분 보유능을 나타낸다. 안내 렌즈삽입술 등에 적용되며, 점조수술법 (viscosurgery)에 필요한 것으로 알려져 있다. 소듐하이알루로네이트는 분자량이 크므로 고분자 사슬이 서로 겹치게 되어 얽힌 사슬간의 상호작용(chain-chain interaction)을 통해 고유의 점탄성을 가지며 세포내에서 조직에 수분을 함유케 하고 윤활성을 주는 역할을 수행한다.
본 발명 화장료 조성물에 함유되는 하이알루로닉애씨드(Hyaluronic acid)는 황산콘드로이틴 등과 함께 주요한 뮤코다당류로 알려져 있다. N-아세틸 글루코사민과 글루쿠론산이 교대로 사슬 모양으로 결합한 분자량이 20만∼40만 되는 고분자 화합물이다. 눈의 초자체나 탯줄 등에 존재하며, 점성이 크고 세균의 침입이나 독물의 침투를 막는 데 중요한 물질로 알려져 있다. 이것은 식물의 펙틴질과 비슷하며, 히알루로니다아제에 의하여 가수분해된다. 1934년 소의 초자체막으로부터 마이어가 처음으로 얻었고, 초자체막(hyaloid)의 우론산이라는 뜻으로 이름을 붙였다. 하이알루로닉애씨드는 매우 강력한 친수성과 높은 점성을 가지며, 뛰어난 수분함유능력으로 수분 균형을 유지하는데 큰 역할을 한다. 또한 분자에 카르복실기(COO-)와 같은 음전하를 띠는 부분이 끊임없이 반복되기 때문에 물분자와 결합되는 능력이 매우 뛰어난 것이 특징으로, 온도나 습도와 같은 환경인자에 영향을 받지 않고 안정적이라는 또 다른 특징을 갖는다.
소듐하이알루로네이트크로스폴리머(Sodium Hyaluronate Crosspolymer)는 3차원의 Cross - Linked 된 소듐히알루론산이 서로 결합된 형태로, 체내 효소가 이들의 결합을 분해할 때마다 소듐히알루로산이 방출되어 자유롭게 활동하게 된다. 이러한 성질 때문에 소듐하이알루로네이트크로스폴리머는 피부에 흡착하여 지속적인 수분을 전달하며 주름개선 효능을 가진다. 특히 표피에서 주름/미세주름 부위 충진 역할을 수행함으로써, 즉각적인 주름개선 효능을 나타내는 것으로 알려져 있다.
일반 히알루론산에 비해 히알루론산 분해효소에 의한 분해가 쉽지 않아 보습능의 유지기간이 길다는 장점을 가지며 피부 탄력을 증대 시키고, 보습효과, 피부 진정 효과를 보이는 하이드롤라이즈드소듐하이알루로네이트(Hydrolyzed Sodium Hyaluronate)는 소듐하이알루로네이트를 산, 효소 혹은 다른 가수분해 방법으로 처리하여 얻은 것이다.
본 발명 화장료 조성물에 함유되는 하이드롤라이즈드 하이알루로닉애씨드(Hydrolyzed Hylauronic Acid)는 당-유사 분자로 많은 양의 물과 결합할 수 있다. 가수분해를 통하여 평균 50kDa 사이즈의 분자량이 작아진 히알루론산이 사용되며 가수분해로 인해 기존 하이알루론산에 비하여 더욱 피부 침투력이 향상되고 사용시 주름개선능이 향상된다는 보고가 있다(Anti- aging and filling efficacy of six types hyaluronic acid based dermo-cosmetic treatment: double blind, randomized clinical trial of efficacy and safety. Vincenzo Nobile et al, J Cosmet Dermatol. 2014 Dec; 13(4): 277287).
하이드록시프로필트라이모늄하이알루로네이트(Hydroxypropyltrimonium Hyaluronate)는 히알루론산과 4급 암모늄염의 화합물이며, 보습제, 피막형성제 등으로 사용된다.
본 발명의 소듐아세틸레이티드하이알루로네이트(Sodium Acetylated Hyaluronate)는 주로 화장품에서 보습제로 사용된다.
본 발명의 또 다른 유효성분으로 함유되는 겔리듐 카르틸라기네움(Gelidium Cartilagineum) 추출물은 조류(Algae)의 일종인 Gelidium cartilagineum에서 추출한 것이다.
감태(Eckloma carva)는 점심대의 깊은 곳에서 자란다. 길이 1 내지 2m 이다. 줄기는 원기둥 모양이고 밑동은 뿌리 모양이다. 가운뎃 부분은 굵고 어릴 때는 속이 차 있으나 다 자란 뒤에는 속이 비기도 한다. 줄기 끝에는 곁잎 조각을 가진 납작한 1개의 가운뎃 잎이 달린다. 이 잎은 길이 1m정도이고 갈색이지만 말리면 검은 빛이 된다. 두꺼우며 혁질(가죽 같은 질감)이고 양쪽에 깃꼴의 작은 잎이 달린다. 어린 식물체는 봄에 나타나는데 초년에는 줄기 길이 5 내지 10㎝, 지름 약 5mm 이며 가운뎃 잎은 길이 20 내지 30㎝, 나비 4㎝ 정도 된다. 2년째의 가을에 가운뎃 잎에 만들어진 포자를 내보낸 뒤 잎은 떨어져 나가고 줄기만 있다가, 옛날 잎의 자리에 새 가운뎃 잎이 달린다. 한국(남해안, 제주도), 일본 등지에 분포한다.
납작파래(Enteromorpha Compressa)는 녹조식물 울로드릭스목 갈파래과의 해조류로서 한국을 비롯한 전세계에 널리 분포한다. 독특한 향기와 맛을 가지고 있으며 몸은 둥근 통 모양이고 약간 납작하며, 아래 부분에서 갈라지기도 하나 가지는 보통 하나이고, 윗부분은 크게 부풀거나 불규칙하게 꼬여서 창자처럼 된다. 주로 외해수의 영양이 없는 바닷가의 바위, 돌, 또는 말뚝 등에 붙어 살며, 식용으로 이용될 수 있다. 길이 약 40㎝, 지름 1~5㎝ 이다. 가지는 보통 하나로 하부에서 갈라지고 상부는 갈라지지 않고 넓게 부푼다. 일정한 순서 없이 세포배영이 되어 잇고 두껍지 않은 막을 가지고 있다. 크기는 개체에 따라 차이가 크다. 클로로필, 카로틴, 젠토필 등의 녹색소와 피로신 등의 색소 단백질이 있어 녹색을 띤다. 조간대 상부의 민물이 흘러 들어오는 곳에서 바위나 돌, 말뚝 등에 붙어 서식하며, 김발에도 잘 붙는다. 비타민 A와 메틸메티오닌이 많이 함유되어 있어 니코틴의 해독에 좋으며 비타민 U의 함량은 양배추의 70배 이상이다.
모자반(Sargassum Fulvellum)은 외견상 뿌리, 줄기, 잎의 구분이 뚜렷하고, 뿌리는 가반상이며 1개의 중심 가지를 내어 3m 이상 크게 자란다. 줄기는 세모진 기둥 모양 또는 삼각형이고 비틀린다. 잎은 줄기에서 기부 쪽으로 향하여 나며 휘어지고 주걱 모양 또는 타원형을 하고 잎 중앙부까지 중륵(中肋)이 생긴다. 상부의 잎은 바소 모양이고 가장자리에 톱니 모양의 돌기가 나며, 온몸에는 줄기로부터 기포가 생긴다. 짙은 황갈색을 하고 한국의 전 해안에서 볼 수 있다. 주요 성분은 알긴산, 클로로필, β-카로틴, 푸코잔틴, 라미나린, 만니톨이며 모자반을 날 것으로 분석했을 때는 식이섬유와 지방의 양이 아주 낮은 편이지만 분말 형태로 가공한 것을 분석했을 때는 식이섬유와 지방의 양이 30% 이상이나 된다. 모자반은 당질보다는 식이섬유가 상대적으로 많이 함유되어 있는 편이다. 국내에서는 보통 모자반속의 많은 종류가 식용되기도 하며, 알긴산 등 해조 공업의 원료로 이용되거나 화장료 조성물로 쓰인다. 알긴산이 위장의 소화작용을 돕고 장운동을 도와주어 변비에 좋고 대장암 예방에 효과가 있다고 한다. 무기질 함량이 많아 고혈압 및 골다공증에 좋고 요오드 함량이 많아서 갑상선 기능장애에 좋다.
자이언트켈프(Macrocystis pyrifera)는 미국 태평양 연안에 생육하는 갈조류로서 알래스카로부터 북멕시코까지 넓게 분포한다. 보통 60m 이상 자라며, 현존하는 해조류 중 가장 크다. 복잡하게 갈라진 기부가 노성체(老成體)에서는 지름 1m 정도 커지고, 4∼5회 차상(叉狀)으로 갈라지는 줄기는 길게 뻗어 엽상부(葉狀部)가 수면에 떠 있을 수 있게 한다. 알긴산의 원료로서 매우 중요하여 미국 태평양 연안에서는 연간 14만t이나 수확하여 해조산업의 주종을 이룬다.
본 발명에 따르면, 아세틸글루코사민, 소듐하이알루로네이트, 하이알루로닉애씨드, 소듐하이알루로네이트크로스폴리머, 하이드롤라이즈드소듐하이알루로네이트, 하이드롤라이즈드하이알루로닉애씨드, 하이드록시프로필트라이모늄하이알루로네이트 및 소듐아세틸레이티드하이알루로네이트 복합물과 겔리듐 카르틸라기네움, 감태, 납작파래, 모자반 및 자이언트켈프 혼합추출물을 함유하는 화장료 조성물이 제공된다.
상기 유효성분으로서의 아세틸글루코사민, 소듐하이알루로네이트, 하이알루로닉애씨드, 소듐하이알루로네이트크로스폴리머, 하이드롤라이즈드소듐하이알루로네이트, 하이드롤라이즈드하이알루로닉애씨드, 하이드록시프로필트라이모늄하이알루로네이트 및 소듐아세틸레이티드하이알루로네이트 복합물은 가장 바람직하게는 아세틸글루코사민, 소듐하이알루로네이트, 하이알루로닉애씨드, 소듐하이알루로네이트크로스폴리머, 하이드롤라이즈드소듐하이알루로네이트, 하이드롤라이즈드하이알루로닉애씨드, 하이드록시프로필트라이모늄하이알루로네이트 및 소듐아세틸레이티드하이알루로네이트가 각각 5:5:2:1:1:1:0.1:0.1의 중량비로 혼합되어 이루어지는 것이다.
상기 또 다른 유효성분으로서의 겔리듐 카르틸라기네움, 감태, 납작파래, 모자반 및 자이언트켈프 혼합추출물은 겔리듐 카르틸라기네움, 감태, 납작파래, 모자반 및 자이언트켈프가 각각 1~15:1~15:1~15:1~15:1~15의 중량비로 혼합되어 추출된 것이다. 더욱 바람직하게는 상기 겔리듐 카르틸라기네움, 감태, 납작파래, 모자반 및 자이언트켈프가 각각 1~2:1~2:1~3:1~2:1~3의 중량비로 혼합추출되어 얻어지는 것이며, 가장 바람직하게는 상기 겔리듐 카르틸라기네움, 감태, 납작파래, 모자반 및 자이언트켈프를 각각 1:1:3:2:3의 중량비로 혼합한 혼합물을 용매추출 후 에탄올 침전반응시켜 얻어지는 것이다. 상기 해조류의 혼합추출물에는 활성성분으로서의 항산화 성분 및 다당이 다량으로 함유되어 있음을 확인하였다.
본 발명의 일 구체예에 따르면 상기 해조류 혼합추출물은 다음과 같은 방법으로 제조된다. 건조 후 분쇄된 겔리듐 카르틸라기네움, 감태, 납작파래, 모자반 및 자이언트켈프를 중량 기준 각각 1~15:1~15:1~15:1~15:1~15의 비로 혼합한 후 물로 추출한다. 추출 후 1㎛ Filter를 이용하여 찌꺼기 및 불순물을 걸러내고, 여과액 대비 4~5배의 에탄올을 넣고 4℃에서 12시간 냉장실에서 침적시킨다. 상등액을 버리고 침전물만 회수하고 다시 정제수로 용해한 후 농축한다. 농축된 시료를 동결 건조하여 혼합추출물을 제조한다.
유효성분으로 함유되는 상기 아세틸글루코사민, 소듐하이알루로네이트, 하이알루로닉애씨드, 소듐하이알루로네이트크로스폴리머, 하이드롤라이즈드소듐하이알루로네이트, 하이드롤라이즈드하이알루로닉애씨드, 하이드록시프로필트라이모늄하이알루로네이트 및 소듐아세틸레이티드하이알루로네이트 복합물과 겔리듐 카르틸라기네움, 감태, 납작파래, 모자반 및 자이언트켈프 혼합추출물은 그 상승작용에 의하여 우수한 피부 탄력 증진 및 피부보습 효과를 나타낸다.
상기 유효성분으로서의 복합물과 혼합추출물을 각각 1~30:0.1~3의 중량비율로, 더욱 바람직하게는 1~15:0.1~3의 중량비율로, 가장 바람직하게는 각각 13.5:1의 중량비율로 혼합하여 사용하는 경우에 더욱 우수한 엘라스타제 활성 억제 활성(시험예 2), 콜라겐 생합성 촉진 활성(시험예 3), 항산화 활성(시험예 4), 피부보습활성(시험예 5, 6)을 나타냄을 확인하였다.
상기 유효성분으로서의 복합물과 혼합추출물의 혼합물은 화장료 조성물의 전체 중량에 대하여 분말형태 또는 액상형태로 0.001~10 중량%의 양으로 함유된다.
본 발명의 화장료 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며, 예를 들면, 스킨로션, 스킨 소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 맛사지 크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 에센스, 팩, 비누, 샴푸, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 유액, 프레스파우더, 루스파우더 또는 아이섀도의 제형으로 이루어질 수 있다.
또한, 각 제형의 화장료 조성물에 있어서, 상기 아세틸글루코사민, 소듐하이알루로네이트, 하이알루로닉애씨드, 소듐하이알루로네이트크로스폴리머, 하이드롤라이즈드소듐하이알루로네이트, 하이드롤라이즈드하이알루로닉애씨드, 하이드록시프로필트라이모늄하이알루로네이트 및 소듐아세틸레이티드하이알루로네이트 복합물과 겔리듐 카르틸라기네움, 감태, 납작파래, 모자반 및 자이언트켈프 혼합추출물 이 외에 피부 탄력 증진 및 피부보습 효과를 나타내는 다른 유효 성분이나 첨가제를 화장료의 제형 또는 사용목적 등에 따라 임의로 선정하여 배합할 수 있다. 예를 들어, 착색제(색소), 착향제(향료), 현탁화제, 유화제, 용해보조제, 안정제, 등장제, pH조절제, 점도조절제, 용제 등을 포함할 수 있다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예를 들어 상세하게 설명하기로 한다. 다만 하기의 실시예는 본 발명의 내용을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 범위가 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 실시예는 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.
[실시예]
제조예 1: 아세틸글루코사민, 소듐하이알루로네이트, 하이알루로닉애씨드, 소듐하이알루로네이트크로스폴리머, 하이드롤라이즈드소듐하이알루로네이트, 하이드롤라이즈드하이알루로닉애씨드, 하이드록시프로필트라이모늄하이알루로네이트 및 소듐아세틸레이티드하이알루로네이트 복합물의 제조
아세틸글루코사민(Acetyl Glucosamine, 뉴트리코스) 5g, 소듐하이알루로네이트(Sodium Hyaluronate, 뉴트리코스) 5g, 하이알루로닉애씨드(Hyaluronic Acid, 뉴트리코스) 2g, 소듐하이알루로네이트크로스폴리머(Sodium Hyaluronate Crosspolymer, 뉴트리코스) 1g, 하이드롤라이즈드소듐하이알루로네이트 (Hydrolyzed Sodium Hyaluronate, 뉴트리코스) 1g, 하이드롤라이즈드하이알루로닉애씨드(Hydrolyzed Hyaluronic Acid, 뉴트리코스) 1g, 하이드록시프로필트라이모늄하이알루로네이트(Hydroxypropyltrimonium Hyaluronate, 뉴트리코스) 0.1g, 소듐아세틸레이티드하이알루로네이트(Sodium Acetylated Hyaluronate, 뉴트리코스) 0.1g을 혼합하여 복합물을 제조하였다.
비교예 1: 소듐하이알루로네이트, 하이알루로닉애씨드, 소듐하이알루로네이트크로스폴리머, 하이드롤라이즈드소듐하이알루로네이트, 하이드롤라이즈드하이알루로닉애씨드, 하이드록시프로필트라이모늄하이알루로네이트 및 소듐아세틸레이티드하이알루로네이트 복합물의 제조
소듐하이알루로네이트(Sodium Hyaluronate, 뉴트리코스) 5g, 하이알루로닉애씨드(Hyaluronic Acid, 뉴트리코스) 2g, 소듐하이알루로네이트크로스폴리머(Sodium Hyaluronate Crosspolymer, 뉴트리코스) 1g, 하이드롤라이즈드소듐하이알루로네이트 (Hydrolyzed Sodium Hyaluronate, 뉴트리코스) 1g, 하이드롤라이즈드하이알루로닉애씨드(Hydrolyzed Hyaluronic Acid, 뉴트리코스) 1g, 하이드록시프로필트라이모늄하이알루로네이트(Hydroxypropyltrimonium Hyaluronate, 뉴트리코스) 0.1g, 소듐아세틸레이티드하이알루로네이트(Sodium Acetylated Hyaluronate, 뉴트리코스) 0.1g을 혼합하여 복합물을 제조하였다.
비교예 2: 아세틸글루코사민, 소듐하이알루로네이트, 하이알루로닉애씨드, 하이드롤라이즈드소듐하이알루로네이트, 하이드롤라이즈드하이알루로닉애씨드, 하이드록시프로필트라이모늄하이알루로네이트 및 소듐아세틸레이티드하이알루로네이트 복합물의 제조
아세틸글루코사민(Acetyl Glucosamine, 뉴트리코스) 5g, 소듐하이알루로네이트(Sodium Hyaluronate, 뉴트리코스) 5g, 하이알루로닉애씨드(Hyaluronic Acid, 뉴트리코스) 2g, 하이드롤라이즈드소듐하이알루로네이트 (Hydrolyzed Sodium Hyaluronate, 뉴트리코스) 1g, 하이드롤라이즈드하이알루로닉애씨드(Hydrolyzed Hyaluronic Acid, 뉴트리코스) 1g, 하이드록시프로필트라이모늄하이알루로네이트(Hydroxypropyltrimonium Hyaluronate, 뉴트리코스) 0.1g, 소듐아세틸레이티드하이알루로네이트(Sodium Acetylated Hyaluronate, 뉴트리코스) 0.1g을 혼합하여 복합물을 제조하였다.
비교예 3: 아세틸글루코사민, 소듐하이알루로네이트, 하이알루로닉애씨드, 소듐하이알루로네이트크로스폴리머, 하이드롤라이즈드소듐하이알루로네이트, 하이드롤라이즈드하이알루로닉애씨드 및 소듐아세틸레이티드하이알루로네이트 복합물의 제조
아세틸글루코사민(Acetyl Glucosamine, 뉴트리코스) 5g, 소듐하이알루로네이트(Sodium Hyaluronate, 뉴트리코스) 5g, 하이알루로닉애씨드(Hyaluronic Acid, 뉴트리코스) 2g, 소듐하이알루로네이트크로스폴리머(Sodium Hyaluronate Crosspolymer, 뉴트리코스) 1g, 하이드롤라이즈드소듐하이알루로네이트 (Hydrolyzed Sodium Hyaluronate, 뉴트리코스) 1g, 하이드롤라이즈드하이알루로닉애씨드(Hydrolyzed Hyaluronic Acid, 뉴트리코스) 1g, 소듐아세틸레이티드하이알루로네이트(Sodium Acetylated Hyaluronate, 뉴트리코스) 0.1g을 혼합하여 복합물을 제조하였다.
제조예 2~6: 겔리듐 카르틸라기네움, 감태, 납작파래, 모자반 및 자이언트켈프 혼합추출물의 제조
건조 후 분쇄된 겔리듐 카르틸라기네움, 감태, 납작파래, 모자반 및 자이언트켈프를 각각 표 1의 중량비로 혼합(총 100g)한 후 물로 추출하였다. 추출 후 1㎛ Filter를 이용하여 찌꺼기 및 불순물을 걸러내고, 여과액 대비 4~5배의 에탄올을 넣고 4℃에서 12시간 냉장실에서 침적시켰다. 상등액을 버리고 침전물만 회수하였으며, 다시 정제수로 용해한 후 농축하였다. 농축된 시료를 동결 건조하였다.
중량비 겔리듐 카르틸라기네움 감태 납작파래 모자반 자이언트켈프
제조예 2 1 1 1 1 1
제조예 3 1 2 1 1 1
제조예 4 1 1 2 2 1
제조예 5 2 1 2 1 1
제조예 6 1 1 3 2 3
실시예 1~3: 혼합물의 제조
상기 제조예 1의 복합물, 제조예 6의 혼합추출물을 하기 표 2의 비로 혼합하여 혼합물을 제조하였다.
중량비 복합물(제조예 1) 혼합추출물(제조예 6)
실시예 1 2 1
실시예 2 5 2
실시예 3 13.5 1
시험예 1: 세포 생존율 측정 시험
세포 생존율 측정 실험(MTT assay)
MTT assay법은 MTT [3-(4,5-dimethythiasol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide] 시약이 세포 내로 흡수된 후 미토콘드리아의 숙신산 탈수소효소(succinate dehydrogenase)에 의해 포마잔(formazan)을 형성하는데 이 물질의 세포 내 축적은 미토콘드리아의 활성, 넓게는 세포의 활성을 의미하는 것으로써 세포의 생존율을 측정하는 대표적인 방법이다.
각각의 유전자 발현을 확인 하기 위해 세포를 1×105cell/well의 밀도로 96 well에 200㎕ 배지와 함께 분주한 뒤 5% CO2, 37℃ incubator에서 24시간 배양한 후 배지를 버리고 PBS로 씻어준 다음 같은 양의 배지와 PBS에 녹인 시료를 0.1%에서 5.0%까지 다양한 농도에 따라 각 well에 처리하여 24시간 배양하였다. 배양이 끝나기 4시간 전에 PBS에 녹인 5㎎/㎖ MTT를 20㎕씩 각 well에 첨가하고 알루미늄 호일로 차광시킨 후 3간 동안 5% CO2 및 37℃ 조건의 incubator에서 배양하였다. 배양액을 제거하고 DMSO용액 200㎕를 첨가하여 37℃ incubator에서 1시간 반응 시킨 후 ELISA reader를 이용하여 570nm에서 흡광도를 측정하여 비교하였다. 세포 생존율은 하기 식에 의해 산출되었고, 그 결과는 하기 표 3에 나타내었다.
구분 세포 생존율(%)
0.1 % 0.5 % 1 % 5.0 %
제조예 1 100 101 100 100
제조예 2 100 101 100 100
제조예 3 101 100 100 100
제조예 4 100 100 101 100
제조예 5 100 101 100 100
제조예 6 101 100 100 100
실시예 1 101 101 100 101
실시예 2 100 101 100 100
실시예 3 101 100 101 100
대조군Adenosine 100 100 101 101
구분 세포 생존율(%)
0.001 % 0.005 % 0.01 % 0.05 %
대조군
Hyaluronic Acid
100 100 101 101
상기 표 3에서 확인되는 바와 같이 제조예 1 내지 6 및 실시예 1 내지 3 모두 세포독성을 나타내지 않았다.
시험예 2: 엘라스타제 활성 억제 확인
0.1 중량% Elastin-Congo red(Sigma, USA)가 포함된 2.5 중량% agar에 시험시료 및 엘라스테이즈 효소 용액(1,000 units/mL, Sigma, USA)을 혼합하고 상온에서 10분간 반응시킨 용액 10 ul씩 주입 후 37℃에서 18시간 배양하였다. 배양 종료 후 엘라스테이즈의 활성에 의해 Elastin-Congo red agar 주변에 투명대가 형성되면 그 헤일로(halo)의 직경을 측정하여 엘라스테이즈 활성 저해 효과를 측정할 수 있다.
엘라스틴을 포함하는 한천배지에 엘라스타제만을 적가하는 한편, 제조예, 비교예, 실시예의 농도가 0.01, 0.05, 0.1 및 0.5% 되는 용액을 시료로 하여 엘라스타제와 함께 적가하여 배지 상에 나타나는 헤일로(halo)의 직경을 측정하여 시료의 엘라스타제 저해활성을 측정하였으며, 대조예로서 Retinol crystal을 엘라스타제와 함께 적가하여 비교하였다. 상기 시험결과를 하기의 표 4에 나타내었다.
구분 Halo diameter (cm)
0.1% 0.5% 1%
제조예 1 1.8 1.7 1.8
비교예 1 1.7 1.5 1.6
비교예 2 1.6 1.5 1.8
비교예 3 1.5 1.3 1.5
제조예 2 1.6 1.5 1.5
제조예 3 1.4 1.2 1.7
제조예 4 1.4 1.1 1.5
제조예 5 1.3 1.2 1.1
제조예 6 1.5 1.1 1.0
실시예 1 1.4 1.3 1.2
실시예 2 1.2 1.1 1.1
실시예 3 1.1 1.0 0.9
Elastase 1.8
Retinol crystal 0.9
헤일로 직경(Halo diameter)이 클수록 엘라스틴의 분해가 많이 된 것인데, 상기 표 4에서 확인되는 바와 같이, 제조예 2 내지 6 및 실시예 1 내지 3을 처리했을 때 헤일로 직경(halo diameter)이 감소하는 것으로 나타나 엘라스타제 억제활성을 가짐을 알 수 있었다. 제조예 1의 복합물과 제조예 6의 혼합추출물을 혼합하여 제조한 실시예 1 내지 3의 혼합물은 더욱 우수한 엘라스타제 억제활성을 나타내었으며, 그 중에서도 실시예 3에서 가장 우수한 효과를 나타내었다.
시험예 3: 콜라겐 생합성 촉진 효과 확인
섬유아세포를 10% FBS를 첨가한 IMDM 배지에 5×105의 세포농도로 접종하여 37℃, 5% CO2배양기에서 24시간 동안 배양하였다. 24시간 배양하여 상기 제조예, 비교예 및 실시예의 추출물을 농도가 50, 100, 500, 1000㎍/㎖가 되도록 디메틸설폭시드에 희석하여 제조한 희석용액을 첨가하여 18시간 동안 동일 조건에서 배양 후 1시간 동안 UV를 조사시켜 세포에 스트레스를 주었다. 이후 Trizol reagent(invitrogen, USA)를 이용하여 섬유아세포를 회수하여 mRNA를 추출하여 일련의 과정을 거쳐 cDNA를 합성하였다. 합성된 cDNA로부터 PROCOLLAGEN TYPEⅠ유전자 부위를 증폭시켜 전기영동을 통해 유전자 발현 양을 확인하였으며, 유전자 증폭은 thermal cycler (GenePro, Hangzhou bioer tech., CHINA)를 사용하여 10x taq polymerase buffer, 10 mM dNTP, 10 pmol primer (F: AGC CAG CAG ATC GAG AAC AT, R: TCT TGT CCT TGG GGT TCT TG), taq polymerase를 혼합하고 증류수를 더하여 50 uL로 조정 후 95도 5분 1cycle/95도 1분/51도 2분/72도 1분 28 cycle 증폭, 72도에서 5분간 반응하는 조건으로 수행하였다. 생성된 procollagen의 발현율은 하기 식에 따라 계산하였으며, 대조군으로는 시료를 처리하지 않고 UV를 조사하지 않은 정상 섬유아세포를 사용하였다.
procollagen 발현율(%) = B/A x 100
A: 상기 대조군에서의 procollagen 발현 양
B: 시료 처리 및 UV조사 섬유아세포의 procollagen 발현 양
구분 시료 농도(㎍/㎖)
50 100 1000
제조예 1 50.35 60.35 68.32
비교예 1 26.56 28.60 31.52
비교예 2 30.21 35.68 38.65
비교예 3 31.54 36.52 36.80
제조예 2 31.04 34.35 37.68
제조예 3 25.48 31.04 34.30
제조예 4 38.65 39.56 45.63
제조예 5 47.65 53.26 60.35
제조예 6 38.51 45.97 47.65
실시예 1 78.57 78.57 85.61
실시예 2 80.30 83.50 90.30
실시예 3 151.47 160.03 182.53
상기 표 5에서 확인되는 바와 같이, 실시예 1 내지 3의 혼합물은 제조예 및 비교예의 시료와 비교하여 볼 때 더욱 우수한 콜라겐 생합성 촉진효과를 나타내었으며, 실시예 3의 혼합물은 가장 우수한 콜라겐 생합성 촉진 효과를 나타내었다.
시험예 4: 항산화 효과 시험
항산화 효능을 확인하기 위하여 프리라디칼 소거능을 시험하였다. 0.1 mL에 4.1×10-5M의 DPPH용액 0.9 mL를 가한 후 상온에서 30분간 반응시켜 517 nm에서 흡광도를 측정하였다. 대조군으로는 L-ascorbic acid(100㎍/㎖)를 사용하였으며, 각 시료의 라디칼 소거능은 아래의 식에 의해 라디칼 소거능으로 계산하여 나타내었다(표 6).
라디칼소거능(%)=(1-시료첨가구의 흡광도/무처리구의 흡광도)×100
구분 라디칼 소거능 (%)
0.1% 0.5 % 1 %
제조예 1 55.5 58.5 61.2
비교예 1 32.5 40.5 45.6
비교예 2 28.5 35.2 38.5
비교예 3 25.3 36.8 42.5
제조예 2 58.5 59.5 61.5
제조예 3 57.2 59.2 63.2
제조예 4 59.5 60.1 64.5
제조예 5 60.2 61.5 63.5
제조예 6 61.5 62.5 66.5
실시예 1 73.5 74.5 76.8
실시예 2 73.5 74.6 76.5
실시예 3 80.0 83.5 86.7
L-ascorbic acid
(100㎍/㎖)
90.6
상기 표 6에서 확인되는 바와 같이 상기 복합물과 혼합추출물을 혼합하여 적용한 상기 실시예들은 복합물(제조예 1)과 혼합추출물(제조예 6)에 비하여 더욱 우수한 라디칼 소거능을 나타내었다.
시험예 5: 히알루로니다제의 활성 억제 효과 확인
히알루로니다제 활성억제 효과를 측정하였다. 모르간 엘손(Morgan-Elson)법을 응용한 방법으로서, 히알루로니다제의 최종 효소 활성을 400NF unit/㎖, HA의 최종농도를 0.4㎎/㎖로 하고 활성제인 Compound 48/80 완충(buffer) 용액(0.1㎎/㎖)을 사용하여 불활성형 히알루로니다제의 활성화 단계의 저해작용을 중심으로 히알루로니다제 활성을 측정하였다. 시료는 완충용액(buffer)에 용해하여 시료 용액으로 하고 대조군은 시료 용액 대신에 완충 용액을 사용하였다. 대조군으로는 히알루론산(Hyaluronic Acid)을 사용하였다. 히아루로니다아제의 활성 저해율(%)은 아래의 수학식으로 계산하였다.
히알루로니다제 활성 저해율(%)= [(A-B)/A]×100
A: 시료를 첨가하지 않은 웰의 효소 활성
B: 시료를 첨가한 웰의 효소 활성
구분 히아루로니다제 활성 저해율(%)
0.1% 0.5 % 1 %
제조예 1 38.5 42.8 55.8
비교예 1 23.5 25.6 35.2
비교예 2 25.6 31.2 38.5
비교예 3 24.5 32.5 39.5
제조예 2 29.7 33.5 49.5
제조예 3 23.5 30.2 41.2
제조예 4 33.5 36.5 55.8
제조예 5 30.5 35.6 59.6
제조예 6 32.5 33.5 58.8
실시예 1 52.3 62.3 65.2
실시예 2 55.3 58.9 62.3
실시예 3 70.8 72.5 78.6
Hyaluronic Acid 73.2 73.2 75.6
상기 표 7에서 확인되는 바와 같이 상기 복합물과 혼합추출물의 혼합사용에 따른 상승작용에 의하여 실시예들에서 더욱 우수한 히아루로니다제 활성 억제 효과를 나타냄을 알 수 있었다.
시험예 6: Hyaluronan Synthase-3의 유전자 발현 효과
상기 제조예, 비교예 및 실시예의 시료들을 처리한 후 DMED/10 FBS에서 24시간 동안 5% CO2 및 37℃의 조건에서 배양하였다. 24시간 후 세포에서 RNA 분리, cDNA 합성 및 RT-PCR은 Komoroski 등(Drug Metab. Dispos. 32:512-518, 2004)이 기술한 방법에 따라 수행하였다. RT-PCR에서 측정한 유전자는 HAS-3의 발현을 확인하였다. 유전자 발현의 차이를 확인하기 위해 house keeping gene으로 GAPDH를 사용하였다.
각각의 유전자의 프라이머 서열은 표 8에 나타냈다. 추출된 RNA를 주형으로 올리고 dT-어댑터 프라이머(Oligo dT-adaptor primer)와 DEPC water를 이용하여 총량 15㎕로 하고 70℃ 10분 변성 후, M-MLV(Moloney murine leukemia virus) RNA의 역전사를 수행하여 42℃ 60분, 70℃ 15분 cDNA를 합성하였다. 합성된 cDNA는 PCR 반응을 통해 증폭하였으며, 총 반응액은 25㎕로 하였다. 각 반응물의 최종 농도는 프라이머 100 pmol, 1.0μM, dNTP 혼합액 0.2mM, 5x green or colorless GoTaq Reaction buffer 1x1.5mM, MgCl2(PCR완충액) 및 GoTaq DNA 폴리머라제 1.25units이었다. 변성(Denaturation), 어닐링(annealing) 및 익스텐션(extension)에 대한 PCR 반응 조건은 다음과 같으며, 95℃ 2분, 95℃ 30초, 60℃ 30초, 72℃ 1분, 72℃ 5분, 30~40 사이클로 수행하였다. PCR 반응 후 생성물의 10㎕를 2% 아가로즈 겔(agarose gel)에서 전기영동 하였다. Gel Documentation system(코리아랩텍, Cat. No DGS-200D)을 이용하여 발현양을 확인하였다.
프라이머 이름 염기서열
GAPDH Froward : GGCATTGCTCTCAATGACAA
Reverse : TGTGAGGGAGATGCTCAGTG
HAS-3 Forward : ACTGCCTTCAAGGCCCTTGG
Reverse : AATGTTCCAGATGCGGCCAC
그 결과는 표 9에 나타내었다.
처리농도(w/v%) HAS-3 증가율(%)
Control 0.1 90
제조예 1 0.1 42
비교예 1 0.1 25
비교예 2 0.1 32
비교예 3 0.1 33
제조예 2 0.1 20
제조예 3 0.1 22
제조예 4 0.1 26
제조예 5 0.1 28
제조예 6 0.1 30
실시예 1 0.1 56
실시예 2 0.1 62
실시예 3 0.1 75
PT-PCR 수행 후 관찰결과, 실시예 1 내지 3은 비교예 및 제조예 1 내지 6에 비하여 더욱 높은 HAS-3 증가율을 나타내었고, 실시예 3에서 가장 우수한 보습활성을 나타냄을 확인하였다.
제형 실시예 1: 스킨로션의 제조
하기 표 10의 조성에 따라, 하기의 방법으로 본 발명 실시예의 혼합물을 함유한 스킨로션 1kg을 제조하였다.
번호 원 료 함량(중량%)
1 혼합물(실시예 3) 1.0
2 글리세린 3.0
3 부틸렌글리콜 2.0
4 프로필렌글리콜 2.0
5 폴리옥시에칠렌 경화피마자유 1.0
6 에탄올 10.0
7 트리에탄올아민 0.1
8 방부제 미량
9 색소 미량
10 향료 미량
11 정제수 잔량
상기 표 10에서 11번 물질에 2, 3, 4, 8번 물질을 순서대로 반응용기에 투입하고 교반하여 용해시킨 후, 5번 물질을 60℃ 정도로 가열하여 용해시켰다. 이 후, 10번 물질을 투입하여 용해한 후 11번 물질에 투입하였다. 마지막으로 1, 6, 7, 9번 물질을 투입하여 충분히 교반시킨 뒤 25℃에서 3일간 숙성시켜 표제의 스킨로션을 제조하였다.
제형 실시예 2: 영양로션의 제조
하기 표 11의 조성에 따라, 하기의 방법으로 본 발명 실시예의 혼합물을 함유한 영양로션 1kg을 제조하였다.
번호 원 료 함량(중량%)
1 혼합물(실시예 3) 1.0
2 밀납 1.0
3 폴리솔베이트 60 1.5
4 솔비탄 세스퀴올레이트 0.5
5 유동 파라핀 10.0
6 소르비탄 스테아레이트 1.0
7 친유형 모노스테아린산 글리세린 0.5
8 스테아린산 1.5
9 글리세릴스테아레이트/피이지-400 스테아레이트 1.0
10 프로필렌글리콜 3.0
11 카르복시폴리머 0.1
12 트리에탄올아민 0.2
13 방부제 미량
14 색소 미량
15 향료 미량
16 정제수 잔량
상기 표 11에서 10, 11, 13, 16번 물질을 혼합 교반하면서, 80~85℃ 사이로 가열하여 제조부에 투입한 후 유화기를 작용시키고 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 12번 물질을 80~85℃사이로 가열 용해한 후 유화시켰다. 유화가 끝나면 교반기를 이용하여 교반하면서 50℃까지 냉각한 뒤 15번 물질을 투입하고 45℃까지 냉각한 뒤 14번 물질을 투입하고 35℃에서 1번 물질을 투입하여 25℃까지 냉각한 뒤 25℃에서 3일간 숙성시켜 표제의 영양로션을 제조하였다.
시험예 7: 제형안정도 확인
상기 제형 실시예 1~2에서 제조한 제형에 대하여 실온(25℃), 냉장(4℃) 및 항온(50℃)으로 일정하게 유지되는 실내, 냉장고 및 인큐베이터에서 불투명 초자 용기에 담아 12주 동안 보관 및 관찰(변색, 변취 및 분리)하며, 안정성을 확인하였다. 결과는 표 12에 나타내었다.
온도조건 1주 2주 3주 4주 5주 6주 7주 8주 9주 10주 11주 12주
제형예 1 실온(25℃) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
냉장(4℃) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
항온(50℃) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
제형예 2 실온(25℃) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
냉장(4℃) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
항온(50℃) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
< 제형안정등급>
0: 변화없음, 1: 미세한변화, 2: 변화, 3: 극심한변화
지금까지 본 발명에 대해서 상세히 설명하였으나, 그 과정에서 언급한 실시예는 예시적인 것일 뿐이며, 한정적인 것이 아님을 분명히 하고, 본 발명은 이하의 특허청구범위에 의해 제공되는 본 발명의 기술적 사상이나 분야를 벗어나지 않는 범위내에서, 균등하게 대처될 수 있는 정도의 구성요소 변경은 본 발명의 범위에 속한다 할 것이다.

Claims (6)

  1. 아세틸글루코사민, 소듐하이알루로네이트, 하이알루로닉애씨드, 소듐하이알루로네이트크로스폴리머, 하이드롤라이즈드소듐하이알루로네이트, 하이드롤라이즈드하이알루로닉애씨드, 하이드록시프로필트라이모늄하이알루로네이트 및 소듐아세틸레이티드하이알루로네이트 복합물과 겔리듐 카르틸라기네움, 감태, 납작파래, 모자반 및 자이언트켈프 혼합추출물을 함유하는 화장료 조성물에 있어서,
    상기 혼합추출물은 겔리듐 카르틸라기네움, 감태, 납작파래, 모자반 및 자이언트켈프가 각각 1:1:3:2:3의 중량비로 혼합되어 추출되는 것이며,
    상기 복합물과 상기 혼합추출물은 각각 13.5:1의 중량비로 혼합되어 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.001~10 중량% 함유되는 것임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 삭제
  5. 제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 피부 탄력 증진용임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  6. 제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 피부 보습용임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
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Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112402280A (zh) * 2020-11-25 2021-02-26 华熙生物科技股份有限公司 一种功效促进组合物及其应用
KR102291780B1 (ko) * 2020-12-22 2021-08-24 주식회사 꼼퍼니 천연 유래 물질을 포함하는 피부 노화 예방 및 상처 치유용 기능성 화장료 조성물 및 이의 제조방법
CN114209622A (zh) * 2021-12-08 2022-03-22 深圳七张王健康生物科技集团有限公司 一种渗透肌肤的小分子组合物及其制备工艺
CN114392210A (zh) * 2022-01-24 2022-04-26 广州维创技术开发有限公司 具有抗衰、淡纹及提升皮肤光泽感功效的组合物及其制备
FR3118712A1 (fr) * 2020-11-20 2022-07-15 L'oreal Composition pour le soin de matières kératiniques
CN115721579A (zh) * 2021-08-30 2023-03-03 华熙生物科技股份有限公司 一种促进皮肤长效保湿的组合物及其用途和保湿产品

Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20080069735A (ko) 2007-01-24 2008-07-29 신라대학교 산학협력단 갈파래 추출물을 포함하는 항균 조성물
KR20080086060A (ko) 2007-03-21 2008-09-25 엘지디스플레이 주식회사 액정표시장치 및 이의 구동방법
KR20090092899A (ko) * 2008-02-28 2009-09-02 이병수 해조류를 이용한 두피의 항균작용 및 모발의 성장을촉진하는 발모제 조성물
KR20120056594A (ko) 2010-11-25 2012-06-04 (주)아모레퍼시픽 모자반 추출물, 청각 추출물 및 참미역 추출물을 함유하는 화장료 조성물
KR101239393B1 (ko) * 2011-12-16 2013-03-05 바이허브 주식회사 자연추출물을 함유한 즉각적인 주름개선용 화장품 조성물
KR20130023326A (ko) 2013-02-17 2013-03-07 주식회사 내추럴솔루션 모자반, 우뭇가사리, 톳으로 구성된 해조류 추출물을 함유하는 항알러지, 진정 및 보습 효과가 우수한 화장료 조성물
KR101611930B1 (ko) * 2015-07-14 2016-04-12 주식회사 비오코스 해양식물 혼합추출물을 함유하는 세라마이드 생합성촉진 및 피부장벽강화 화장료 조성물
KR20190010795A (ko) * 2017-07-21 2019-01-31 (주)우성씨앤티 신규한 하이알폴 매트릭스 혼합물이 함유된 피부 보습 강화, 주름 개선 및 미백용 화장료 조성물 및 그 제조방법
KR101987559B1 (ko) * 2017-12-11 2019-06-10 주식회사 씨앤피코스메틱스 피부 보습 효과가 우수한 화장료 조성물

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20080069735A (ko) 2007-01-24 2008-07-29 신라대학교 산학협력단 갈파래 추출물을 포함하는 항균 조성물
KR20080086060A (ko) 2007-03-21 2008-09-25 엘지디스플레이 주식회사 액정표시장치 및 이의 구동방법
KR20090092899A (ko) * 2008-02-28 2009-09-02 이병수 해조류를 이용한 두피의 항균작용 및 모발의 성장을촉진하는 발모제 조성물
KR20120056594A (ko) 2010-11-25 2012-06-04 (주)아모레퍼시픽 모자반 추출물, 청각 추출물 및 참미역 추출물을 함유하는 화장료 조성물
KR101239393B1 (ko) * 2011-12-16 2013-03-05 바이허브 주식회사 자연추출물을 함유한 즉각적인 주름개선용 화장품 조성물
KR20130023326A (ko) 2013-02-17 2013-03-07 주식회사 내추럴솔루션 모자반, 우뭇가사리, 톳으로 구성된 해조류 추출물을 함유하는 항알러지, 진정 및 보습 효과가 우수한 화장료 조성물
KR101611930B1 (ko) * 2015-07-14 2016-04-12 주식회사 비오코스 해양식물 혼합추출물을 함유하는 세라마이드 생합성촉진 및 피부장벽강화 화장료 조성물
KR20190010795A (ko) * 2017-07-21 2019-01-31 (주)우성씨앤티 신규한 하이알폴 매트릭스 혼합물이 함유된 피부 보습 강화, 주름 개선 및 미백용 화장료 조성물 및 그 제조방법
KR101987559B1 (ko) * 2017-12-11 2019-06-10 주식회사 씨앤피코스메틱스 피부 보습 효과가 우수한 화장료 조성물

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
네이처리퍼블릭, 슈퍼 아쿠아 맥스 EX 수분크림* *
미샤, 수퍼아쿠아 울트라 히알론 크림* *

Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR3118712A1 (fr) * 2020-11-20 2022-07-15 L'oreal Composition pour le soin de matières kératiniques
CN112402280A (zh) * 2020-11-25 2021-02-26 华熙生物科技股份有限公司 一种功效促进组合物及其应用
CN112402280B (zh) * 2020-11-25 2022-02-11 华熙生物科技股份有限公司 一种功效促进组合物及其应用
WO2022110550A1 (zh) * 2020-11-25 2022-06-02 华熙生物科技股份有限公司 一种功效促进组合物及其应用
KR102291780B1 (ko) * 2020-12-22 2021-08-24 주식회사 꼼퍼니 천연 유래 물질을 포함하는 피부 노화 예방 및 상처 치유용 기능성 화장료 조성물 및 이의 제조방법
CN115721579A (zh) * 2021-08-30 2023-03-03 华熙生物科技股份有限公司 一种促进皮肤长效保湿的组合物及其用途和保湿产品
CN114209622A (zh) * 2021-12-08 2022-03-22 深圳七张王健康生物科技集团有限公司 一种渗透肌肤的小分子组合物及其制备工艺
CN114392210A (zh) * 2022-01-24 2022-04-26 广州维创技术开发有限公司 具有抗衰、淡纹及提升皮肤光泽感功效的组合物及其制备
CN114392210B (zh) * 2022-01-24 2023-09-12 上海上水和肌生物科技有限公司 具有抗衰、淡纹及提升皮肤光泽感功效的组合物及其制备

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