KR102031152B1

KR102031152B1 - 연어 유래 폴리디옥시리보뉴클레오티드를 갖는 코어쉘 나노캡슐을 함유하는 피부개선 기능성 화장료 조성물 및 그의 제조방법

Info

Publication number: KR102031152B1
Application number: KR1020180025705A
Authority: KR
Inventors: 한상철
Original assignee: 한상철
Priority date: 2018-03-05
Filing date: 2018-03-05
Publication date: 2019-10-15
Also published as: KR20190105313A

Abstract

본 발명은 연어 유래 폴리디옥시리보뉴클레오티드(PDRN, polydeoxyribonucleotide)-고분자복합체, 연어연골 추출물을 가수분해효소 처리하여 연어연골 효소분해물 및 연어오일을 포함하는 PDRN 코어쉘 나노캡슐를 함유하는 피부개선 기능성 화장료 조성물의 제조방법 및 그에 따라 제조된 화장료 조성물에 관한 것이다. 이에 따라, 연어의 피부 개선 성분 성분들을 보호하여 변성을 막고, 피부의 진피까지 침투하기에 용이하여 미백, 주름, 모공 개선효과를 향상시킬 수 있다.

Description

연어 유래 폴리디옥시리보뉴클레오티드를 갖는 코어쉘 나노캡슐을 함유하는 피부개선 기능성 화장료 조성물 및 그의 제조방법{COSMETIC COMPOSITION FOR IMPROVING SKIN COMPRISING CORE-SHELL NANOCAPSULE WITH POLYDEOXYRIBONUCLEOTIDE FROM SALMOM AND METHOD FOR PREPARING THE SAME}

본 발명은 연어 유래 폴리디옥시리보뉴클레오티드(PDRN) 코어쉘 나노캡슐을 함유하는 피부개선 기능성 화장료 조성물의 제조방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 연어정소 유래 폴리디옥시리보뉴클레오티드, 연어연골 추출물의 가수분해 효소분해물, 연어오일 및 알긴산을 코어쉘 구조의 나노캡슐에 함유하는 피부개선 기능성 화장료 조성물 및 그의 제조방법에 관한 것이다.

사람의 피부는 끊임없이 변화를 겪게 되는데, 가장 대표적인 변화가 노화에 의한 피부 기능 저하 및 시각적 아름다움의 감소이다. 피부 노화의 결과 나타나는 최종적인 피부 외관에서의 현상은 주름의 형성, 피부 탄력 저하, 노인성 반점 형성 등이 있으며, 주름의 형성이 가장 대표적인 현상으로 받아들여지고 있다.

피부노화는 내인성 노화(intrinsic, chronological aging)와 광노화(phtoaging) 두 가지로 구분할 수 있다. 내인성 노화는 연령이 증가함에 따라 생체의 생리적인 기능이 저하되어 자연적으로 유발되는 노화현상을 의미하며, 광노화는 피부가 광에 반복적으로 노출되어 피부의 외양 또는 기능이 변화되는 것을 의미한다. 피부노화는 자외선, 스트레스, 질병상태, 환경인자, 상처, 나이가 들어감에 따라 활성산소종이 활성화되어 야기될 수 있으며, 이는 생체 내에 존재하는 항산화 방어망을 파괴하고, 세포 및 조직을 손상시켜 성인병 및 노화를 촉진시킬 수 있다.

피부의 주요 구성물질인 지질, 단백질, 다당류 및 핵산 등은 산화되어 피부 세포 및 조직이 파괴될 수 있으며, 이에 따라 피부가 노화될 수 있다. 특히 단백질의 산화에 의해 피부의 결합조직인 콜라겐, 히알루론산, 엘라스틴, 프로테오글라이칸, 피브로넥틴 등이 절단되고 과다 염증반응이 나타날 수 있으며, 더욱 심화되는 경우 DNA 변이에 의한 돌연변이, 면역기능의 저하, 암의 유발이 촉진될 수도 있다.

따라서, 신체의 대사 과정 중 발생하는 활성산소종이나 자외선 조사, 염증반응에 의해 매개 되는 활성산소종을 소거하여 세포막을 보호하고, 활발한 신진대사를 통해 손상 받은 세포를 재생시켜 피부 건강을 회복시키는 것이 바람직하다. 피부노화에는 상기 활성산소 종뿐만 아니라 MMP(Matrix metalloproteinase)라는 효소가 관여한다. 생체 내에서

콜라겐과 같은 세포 외 기질의 합성과 분해는 적절하게 조절되지만, 노화 현상이 점차 진행됨에 따라 콜라겐을 분해하는 효소인 기질 금속단백질 분해효소(MMP)의 발현이 촉진되어 피부의 탄력이 저하되고 주름이 형성된다. 또한, 이와 같은 분해효소는 자외선에 의해 더욱 활성화될 수 있으며, 자외선에 의해 활성화가 유도되는 MMP 발현을 조절하거나 활성을 억제할 수 있는 물질의 개발이 필요하다. 그러나, 종래에 화장품의 소재로서 사용된 원료들은 대부분 분해효소(MMP)의 활성을 단순히 억제하는데 그쳤다.

한편, 멜라닌은 색소 세포 내에 존재하는 타이로시네이즈의 작용에 의해 타이로신으로부터 도파(dopa), 도파퀴논(dopaquinone)으로 변환되어 도파크롬(dopachrome) 등을 거쳐 생성된다. 멜라닌은 자외선 등 피부 유해 요소로부터 신체를 보호하고 체내 호르몬 분비를 조절하는 역할을 한다. 그러나, 멜라닌은 과잉 생산되어 기미, 주근깨의 형성 및 피부노화를 촉진시킬 수 있으며, 피부암의 유발에 관여할 수 있으므로, 멜라닌의 과잉생산을 억제하기 위한 연구개발이 활발하게 이루어지고 있다.

한편, 화장품 업계는 화학물질 등에 의한 피부 자극을 줄이기 위해 천연물을 사용한 제품을 활발히 개발하고 있다. 특히, 최근 화장품 업계는 피부에 부작용이 적을 뿐만 아니라, 피부 개선 효과가 우수한 천연 재료를 이용한 화장품의 개발에 많은 노력을 기울이고 있다. 천연 재료는 피부에 생체 안정성이 우수할 뿐만 아니라, 최근 천연 재료를 이용한 화장품에 대한 소비자들의 호응이 높아짐에 따라 화장품 원료로서 개발가치가 한층 늘어나고 있다. 따라서, 부작용이 적고, 소비자의 호응도가 높은 천연 재료를 이용한 화장품의 수요가 점차 증가하고 있으며, 생체 안전성 및 피부 개선 효과가 우수한 다기능성(multi-functional) 화장품 개발에 대한 다양한 연구가 활발하게 이루어지고 있다.

한국공개특허공보 제10-2014-0072016호 한국공개특허공보 제10-1810226호

본 발명의 목적은 연어 정소 유래 DNA 절편인 폴리디옥시리보뉴클레오티드(PDRN, polydeoxyribonucleotide)-고분자 복합체, 및 연어연골 추출물을 가수분해한 연어연골 효소분해물을 코어에 포함하고, 연어오일과 알긴산을 내측 쉘에 포함하며, 최외측에 음이온성 인화합물 및 고분자 유화제를 포함하는 외측 쉘을 포함함으로써 연어의 피부 개선 성분 성분들을 보호하여 변성을 막고, 피부의 진피까지 침투하기에 용이하도록 하는 코어쉘 구조의 나노캡슐을 포함하는 화장료 조성물을 제공하는 데 있다.

본 발명의 다른 목적은 연어의 정소 유래 폴리디옥시리보뉴클레오티드 외에도, 연어연골 추출물을 가수분해효소 처리하여 저분자화 함으로써 피부 침투율을 향상시켜 피부미백, 피지개선, 주름개선 및 모공축소 등의 피부개선 효과를 극대화할 수 있으며, 연어를 특정 부위가 제거된 연어육으로부터 추출된 연어오일을 사용하고, 알긴산 성분을 폴리올 성분으로 사용함으로써 노폐물 흡착 기능과 보습기능을 더욱 향상시킬 수 있는 코어쉘 구조의 나노캡슐을 포함하는 화장료 조성물을 제공하는 데 있다.

본 발명의 다른 목적은 연어의 정소, 연골, 연어육으로부터 추출되는 연어오일에 이르기 까지 연어의 모든 부위를 화장료 성분으로 다양하게 사용함으로써 폐기하는 부분이 거의 없어 제조비용을 절감할 수 있는 코어쉘 구조의 나노캡슐을 포함하는 화장료 조성물의 제조방법을 제공하는 데 있다.

본 발명의 일 측면에 따르면,

(a) 연어정소 유래 폴리디옥시리보뉴클레오티드(PDRN, polydeoxyribonucleotide)를 제조하는 단계; (b) 상기 폴리디옥시리보뉴클레오티드와 양이온성고분자를 혼합하여 PDRN-고분자복합체를 제조하는 단계; (c) 연어연골 추출물을 가수분해효소 처리하여 연어연골 효소분해물을 제조하는 단계; (d) 상기 PDRN-고분자 복합체와 연어연골 효소분해물을 에스테르계 오일에 용해시킨 후, 연어오일과 혼합하여 PDRN 용해물을 제조하는 단계; (e) 알긴산 또는 그의 염, 인지질, 피부컨디셔닝제, 콜레스테롤, 및 음이온성 인화합물을 혼합하여 지질용해물을 제조하는 단계; (f) 상기 PDRN 용해물과 지질용해물을 1차 유화시켜 예비 PDRN 코어쉘 나노캡슐을 제조하는 단계; 및 (g) 상기 예비 PDRN 코어쉘 나노캡슐과 고분자유화제를 혼합하고 2차 유화시켜 복수의 쉘을 포함하는 PDRN 코어쉘 나노캡슐을 제조하는 단계;를 포함하는 폴리디옥시리보뉴클레오티드(PDRN) 코어쉘 나노캡슐을 함유하는 피부개선 기능성 화장료 조성물의 제조방법이 제공된다.

상기 폴리디옥시리보뉴클레오티드의 분자량은 30kDa 내지 300kDa 일 수 있다.

단계 (a)는, (a-1) 상기 연어정소를 초음파 파쇄하여 연어정소 파쇄물을 제조하는 단계; 및 (a-2) 상기 연어정소 파쇄물을 여과하여 불순물을 제거하는 단계;를 포함할 수 있다.

상기 초음파 파쇄는 주파수 30 내지 70kHz, 초음파 에너지량 40 내지 1500W의 조건에서 수행할 수 있다.

상기 여과는 회분식 여과, 크로스플로우 여과, 원심분리 및 연속여과 중에서 선택되는 어느 하나의 방법에 따라 수행할 수 있다.

단계 (b)에서, 상기 양이온성고분자는 폴리에틸렌이민, 폴리비닐 피롤리돈 및 키토산 중에서 선택된 1종 이상일 수 있다.

상기 폴리디옥시리보뉴클레오티드의 인(P)과 상기 양이온성고분자의 질소(N)의 비율이 10:1 내지 20:1가 되도록 혼합하여 PDRN-고분자 복합체를 제조하는 것이 바람직하다.

단계 (c)의 상기 연어연골 효소분해물은 수용성일 수 있다.

단계 (c)의 상기 가수분해효소는 프로테아제(protease) 또는 뉴클라아제(nuclease) 일 수 있다.

단계 (d)의 상기 연어오일은 연어육의 압착추출, 유기용매 추출 및 초임계 추출 중에서 선택된 어느 하나의 방법에 따라 수득할 수 있다.

상기 연어오일은 건조하여 분말화된 것을 사용할 수 있다.

상기 에스테르계 오일은 트리에칠헥사노인, 세틸에칠헥사노에이트, 세틸옥타노에이트, 세틸이소옥타노에이트, 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드, 부틸렌글라이콜디카프릴레이트/디카프레이트, 토코페롤아세테이트, 옥틸도데실미리스테이트, 펜타에리스리틸테트라에틸헥사노에이트, 이소프로필팔미테이트, 및 이소프로필미리스테이트 중에서 선택된 1종 이상일 수 있다.

단계 (d)에서 상기 PDRN 용해물은 연어오일 100중량부에 대하여, 에스테르계 오일 4 내지 750중량부, PDRN-고분자 복합체 0.04 내지 100중량부 및 연어연골 효소분해물 0.04 내지 100중량부를 포함할 수 있다.

단계 (d)는 40 내지 70℃에서 수행될 수 있다.

상기 알긴산(alginic acid) 또는 그의 염은 다시마, 미역, 녹미채, 대황, 톳 및 모자반 중에서 선택된 1종 이상의 갈조류로부터 수득한 것일 수 있다.

상기 알긴산의 염은 알긴산나트륨, 알긴산칼륨, 및 알긴산칼슘 중에서 선택된 1종 이상일 수 있다.

상기 음이온성 인화합물은 세틸포스페이트, 디이에이세틸포스페이트, 디세틸포스페이트, 및 포타슘세틸포스페이트 중에서 선택된 1종 이상일 수 있다.

상기 인지질은 포스파티딜콜린(phosphatidylcholin) 및 포스파티딜에탄올아민(phosphatidylethanolamine) 중에서 선택된 1종 이상일 수 있다.

상기 피부컨디셔닝제는 레티닐팔미테이트, 토코페롤아세테이트, 세라마이드, 알파비사볼롤, 코엔자임큐텐, 비타민 A, 비타민 D 및 비타민 E 중에서 선택된 1종 이상일 수 있다.

단계 (e)에서, 상기 지질용해물은 상기 연어오일 100중량부에 대하여, 알긴산 또는 그의 염 8 내지 1250중량부, 인지질 2 내지 250중량부, 피부컨디셔닝제 0.04 내지 100중량부, 콜레스테롤 0.04 내지 100중량부, 및 음이온성 인화합물 0.04 내지 50중량부를 포함할 수 있다.

단계 (e)는 70 내지 80℃에서 수행될 수 있다.

단계 (f)의 1차 유화는 진공유화조에서 1000 내지 4000rpm의 조건으로 수행될 수 있다.

단계 (f)의 1차 유화 이후, 40 내지 50℃로 냉각하는 단계를 추가로 수행할 수 있다.

단계 (g)의 상기 고분자유화제는 다당류, 아라비아 검, 카제인, 폴리아크릴산염, 및 폴리비닐 알코올 중에서 선택된 1종 이상일 수 있다.

단계 (g)의 상기 2차 유화는 코어쉘 나노캡슐의 평균직경이 350 내지 450nm가 되도록 복수 회 수행할 수 있다.

단계 (g)의 2차 유화는 500 내지 1500bar의 압력에서 수행할 수 있다.

단계 (g)의 2차 유화는 35 내지 60℃의 온도에서 수행할 수 있다.

단계 (g) 이후 점증제를 투입하고 점도를 조절하는 단계를 추가로 수행할 수 있다.

상기 점도를 조절하는 단계 이후 20 내지 30℃로 냉각시키는 단계를 추가로 수행할 수 있다.

본 발명의 다른 하나의 측면에 따르면,

상기 방법에 따라 제조된 폴리디옥시리보뉴클레오티드(PDRN) 코어쉘 나노캡슐을 함유하는 피부개선 기능성 화장료 조성물이 제공된다.

상기 코어쉘 나노캡슐은 상기 PDRN-고분자 복합체, 연어연골 효소분해물, 에스테르계 오일을 포함하는 코어; 상기 코어상에 위치하고, 상기 연어오일, 알긴산, 피부컨디셔닝제, 콜레스테롤, 및 인지질를 포함하는 내측 쉘; 및 상기 내측 쉘 상에 위치하고, 음이온성 인화합물 및 고분자 유화제를 포함하는 외측 쉘;을 포함할 수 있다.

상기 코어쉘 나노캡슐의 코어는 평균직경이 150nm 내지 250nm 일 수 있다.

상기 코어쉘 나노캡슐 전체의 평균직경이 350 내지 450nm 일 수 있다.

본 발명의 코어쉘 구조의 나노캡슐을 포함하는 화장료 조성물은 연어 정소 유래 DNA 절편인 폴리디옥시리보뉴클레오티드(PDRN, polydeoxyribonucleotide)을 코어에 포함하여 피부 세포의 자가성장을 촉진시켜 피부재생을 효과적으로 이루어질 수 있도록 할 수 있다.

본 발명의 코어쉘 구조의 나노캡슐을 포함하는 화장료 조성물은 폴리디옥시리보뉴클레오티드 이외에 연어연골 추출물을 가수분해효소 처리한 연어연골 효소분해물을 코어에 포함하고, 연어오일과 알긴산을 내측 쉘에 포함하며, 최외측에 음이온성 인화합물 및 고분자 유화제를 포함하는 외측 쉘을 포함함으로써 연어의 피부 개선 성분 성분들의 변성을 막고, 활성성분들이 피부의 진피까지 침투하여 피부재생 피부미백, 피부보습 등의 효과를 극대화할 수 있다.

본 발명의 코어쉘 구조의 나노캡슐을 포함하는 화장료 조성물은 연어의 정소 유래 폴리디옥시리보뉴클레오티드 외에도, 연어연골 추출물을 가수분해효소 처리하여 저분자화 함으로써 피부 침투율을 향상시켜 피부미백, 피지개선, 주름개선 및 모공축소 등의 피부개선 효과를 극대화할 수 있으며, 연어육으로부터 추출된 연어오일을 사용하고, 알긴산 성분을 폴리올 성분으로 사용함으로써 노폐물 흡착 기능과 보습기능을 더욱 향상시킬 수 있는 효과가 있다.

본 발명의 코어쉘 구조의 나노캡슐을 포함하는 화장료 조성물의 제조방법은 연어의 정소, 연골, 연어육으로부터 추출되는 연어오일에 이르기 까지 연어의 모든 부위를 화장료 성분으로 다양하게 사용함으로써 폐기하는 부분이 거의 없어 제조비용을 절감할 수 있는 효과가 있다.

도 1은 본 발명의 폴리디옥시리보뉴클레오티드(PDRN) 코어쉘 나노캡슐을 함유하는 피부개선 기능성 화장료 조성물의 제조방법을 순차적으로 나타낸 흐름도이다.
도 2는 실시예 1에 따라 제조된 연어정소 유래 PDRN의 분광 광도계(spectrophotometer) 분석결과이다.
도 3은 실시예 1에 따라 제조된 연어정소 유래 PDRN에 대해 DNA 전기 영동 결과를 나타낸 것이다.
도 4는 본 발명의 기능성 화장료의 피부톤 개선효과에 대한 시험결과이다.
도 5는 본 발명의 기능성 화장료의 피지 개선효과에 대한 시험결과이다.
도 6은 본 발명의 기능성 화장료의 주름 개선효과에 대한 시험결과이다.
도 7은 본 발명의 기능성 화장료의 모공 개선효과에 대한 시험결과이다.

본 발명은 다양한 변환을 가할 수 있고 여러 가지 실시예를 가질 수 있는 바, 특정 실시예들을 도면에 예시하고 상세한 설명에 상세하게 설명하고자 한다. 그러나, 이는 본 발명을 특정한 실시 형태에 대해 한정하려는 것이 아니며, 본 발명의 사상 및 기술 범위에 포함되는 모든 변환, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 본 발명을 설명함에 있어서 관련된 공지 기술에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 흐릴 수 있다고 판단되는 경우 그 상세한 설명을 생략한다.

도 1은 본 발명의 연어 유래 폴리디옥시리보뉴클레오티드(PDRN) 코어쉘 나노캡슐을 함유하는 피부개선 기능성 화장료 조성물의 제조방법을 순차적으로 나타낸 흐름도이다. 이하, 도 1을 참조하여 본 발명의 연어 유래 폴리디옥시리보뉴클레오티드(PDRN) 코어쉘 나노캡슐을 함유하는 피부개선 기능성 화장료 조성물의 제조방법에 대해 설명하도록 한다.

먼저, 연어정소 유래 폴리디옥시리보뉴클레오티드( PDRN , polydeoxyribonucleotide)를 제조한다(단계 a).

우선, 연어를 해체하여 연어정소, 연어연골 및 연어육으로 분리하여 재료를 준비한다. 상기 연어는 알래스카산 연어인 것이 바람직하다.

본 단계는 구체적으로 아래의 방법에 따라 수행될 수 있다.

상기 연어정소를 초음파 파쇄하여 연어정소 파쇄물을 제조한다(a-1).

상기 초음파 파쇄는 기계적 추출 방법으로 인간의 최대 가청 주파수인 20kHz 전후의 음파를 이용하여 세포를 파쇄하는 방법이다. 초음파 파쇄는 연어 정소를 초음속으로 가속시켜 파쇄할 수 있는 모든 기기를 사용할 수 있고, 바람직하게는 초음파 분산기를 사용할 수 있다. 일반적인 초음파 분산기는 역압전효과(inverse piezoelectric effect) 현상을 이용하여 전기에너지를 기계적인 진동에너지로 바꾸는 압전세라믹스와 초음파 진동자에 의해서 초음파를 발생시키고, 발생된 초음파의 진폭을 확대시키기 위해 진동자에 부스터와 혼(horn)을 부착하고 이를 구동시키기 위한 초음파 발진기로 구성될 수 있다. 초음파 분산기는 연어 정소에 초음파를 조사해 발생하는 높은 온도와 압력을 가지는 공동화기포(cavitation bubbles)들이 성장하여 파열될 때 발생하는 고온, 고압의 충격파를 에너지원으로 사용하여 연어 정소를 파쇄하여 폴리디옥시리보뉴클레오티드를 분리할 수 있다.

상기 초음파 파쇄는 주파수 30 내지 70kHz, 초음파 에너지량 40 내지 1500W의 조건에서 수행하는 것이 바람직하다.

이와 같은 초음파 파쇄는 파쇄를 수행하는 동안 열이 발생되어 연어 정소가 변성될 수 있으므로, 얼음이나 냉각 팬을 이용하여 저온을 유지하는 것이 바람직하다. 가열이 이루어질 경우 단백질이 물리적 또는 화학적으로 변성되어 폴리디옥시리보뉴클레오티드의 제조가 어려워 질 수 있다.

이후, 상기 연어정소 파쇄물을 여과하여 불순물을 제거한다(단계 a-2).

상기 초음파 파쇄된 연어 정소를 여과하는 단계는 폴리디옥시리보뉴클레오티드 외의 불순물을 제거하여 순도를 높이기 위한 단계이다. 상기 여과단계는 파쇄 후의 파편 또는 단백질 응고물 등의 데브리스(debris)를 제거하기 위해 수행될 수 있다. 상기 여과는 거름종이를 통해 거르는 방식으로 수행될 수 있으며, 대량의 여과시에는 바람직하게 회분식 여과, 연속 여과(continuous filter), 크로스 플로우 여과(cross flow filter) 및 원심분리(centrifugation) 중 어느 하나의 여과 방법으로 수행될 수 있다.

이에 따라 제조된 상기 폴리디옥시리보뉴클레오티드의 분자량은 30kDa 내지 300kDa이고, 바람직하게는 100 내지 200kDa 일 수 있다.

다음으로, 상기 폴리디옥시리보뉴클레오티드와 양이온성고분자를 혼합하여 PDRN-고분자 복합체를 제조한다(단계 b).

상기 양이온성고분자는 폴리에틸렌이민, 폴라아미도아민, 폴리비닐 피롤리돈 및 키토산 중에서 선택된 1종 이상일 수 있다.

상기 PDRN-고분자 복합체는 상기 폴리디옥시리보뉴클레오티드의 인(P)과 상기 양이온성고분자의 질소(N)의 비율이 10:1 내지 20:1가 되도록 혼합하여 제조할 수 있다.

상기 폴리디옥시리보뉴클레오티드를 PDRN-고분자 복합체로 형성함으로써 폴리디옥시리보뉴클레오티드의 변성 없이 진피까지 효과적으로 전달될 수 있다.

다음으로, 연어연골 추출물을 가수분해효소 처리하여 연어연골 효소분해물을 제조한다(단계 c).

상기 연어연골 효소분해물은 수용성일 수 있다. 저분자화되어 피부 침투율을 높일 수 있다.

상기 가수분해효소는 프로테아제(protease) 또는 뉴클라아제(nuclease) 일 수 있다.

다음으로, 상기 PDRN -고분자 복합체와 연어연골 효소분해물을 에스테르계 오일에 용해시킨 후, 연어오일과 혼합하여 PDRN 용해물을 제조한다(단계 d).

상기 연어오일은 연어육으로부터 추출된 것일 수 있다.

상기 연어오일의 추출은 압착추출, 유기용매 추출, 초임계 추출 등의 방법으로 수행될 수 있다.

상기 연어오일은 공기 중에서 변질되기 쉬우므로 건조하여 분말화된 것을 사용하는 것이 바람직하다.

상기 에스테르계 오일은 트리에칠헥사노인, 세틸에칠헥사노에이트, 세틸옥타노에이트, 세틸이소옥타노에이트, 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드, 부틸렌글라이콜디카프릴레이트/디카프레이트, 토코페롤아세테이트, 옥틸도데실미리스테이트, 펜타에리스리틸테트라에틸헥사노에이트, 이소프로필팔미테이트, 이소프로필미리스테이트 등일 수 있다.

상기 PDRN 용해물은 연어오일 100중량부에 대하여, 에스테르계 오일 4 내지 750중량부, PDRN-고분자 복합체 0.04 내지 100중량부 및 연어연골 효소분해물 0.04 내지 100중량부를 포함하는 것이 바람직하다.

본 단계는 40 내지 70?에서 수행되는 것이 바람직하다.

이후, 알긴산 또는 그의 염, 인지질, 피부컨디셔닝제 , 콜레스테롤, 및 음이온성 인화합물을 혼합하여 지질용해물을 제조한다(단계 e).

상기 알긴산(alginic acid) 또는 그의 염은 갈조류로부터 수득할 수 있다.

상기 갈조류는 다시마, 미역, 녹미채, 대황, 톳, 모자반 등일 수 있으나, 본 발명의 범위가 여기에 한정되지 않는다.

상기 알긴산의 염은 알긴산나트륨, 알긴산칼륨, 및 알긴산칼슘 중에서 선택된 1종 이상인 것을 특징으로 하는 폴리디옥시리보뉴클레오티드(PDRN) 코어쉘 나노캡슐을 함유하는 것을 특징으로 한다.

상기 음이온성 인화합물은 세틸포스페이트, 디이에이세틸포스페이트, 디세틸포스페이트, 포타슘세틸포스페이트 등일 수 있다.

상기 인지질은 포스파티딜콜린(phosphatidylcholin), 포스파티딜에탄올아민(phosphatidylethanolamine) 등일 수 있다.

상기 피부컨디셔닝제는 레티닐팔미테이트, 토코페롤아세테이트, 세라마이드, 알파비사볼롤, 코엔자임큐텐, 비타민 A, 비타민 D, 비타민 E 등 일 수 있다.

상기 지질용해물은 상기 연어오일 100중량부에 대하여, 알긴산 또는 그의 염 8 내지 1250중량부, 인지질 2 내지 250중량부, 피부컨디셔닝제 0.04 내지 100중량부, 콜레스테롤 0.04 내지 100중량부, 및 음이온성 인화합물 0.04 내지 50중량부를 포함하는 것이 바람직하다.

본 단계는 70 내지 80℃에서 수행되는 것을 특징으로 한다.

이후, 상기 PDRN 용해물과 지질용해물을 1차 유화시켜 예비 PDRN 코어쉘 나노캡슐을 제조한다(단계 f).

상기 1차 유화는 진공유화조에서 1000 내지 4000rpm의 조건으로 수행되는 것이 바람직하다.

상기 1차 유화 이후, 40 내지 50℃로 냉각하는 단계를 추가로 수행하는 것이 바람직하다.

다음으로, 상기 예비 PDRN 코어쉘 나노캡슐과 고분자유화제를 혼합하고 2차 유화시켜 복수의 쉘을 포함하는 PDRN 코어쉘 나노캡슐을 제조한다(단계 g).

상기 2차 유화는 복수 회 수행하여 코어쉘 나노캡슐은 평균직경이 350 내지 450nm가 되도록 할 수 있다.

이하, 본 발명의 폴리디옥시리보뉴클레오티드(PDRN) 코어쉘 나노캡슐을 함유하는 피부개선 기능성 화장료 조성물에 대해 설명하도록 한다.

본 발명의 폴리디옥시리보뉴클레오티드(PDRN) 코어쉘 나노캡슐을 함유하는 피부개선 기능성 화장료 조성물은 상기 방법에 따라 제조될 수 있다.

상기 코어쉘 나노캡슐은 상기 PDRN-고분자복합체, 연어연골 효소분해물, 에스테르계 오일을 포함하는 코어; 상기 코어상에 위치하고, 상기 연어오일, 알긴산, 피부컨디셔닝제, 콜레스테롤, 및 인지질을 포함하는 내측 쉘; 및 상기 내측 쉘 상에 위치하고, 음이온성 인화합물 및 고분자 유화제를 포함하는 외측 쉘;을 포함할 수 있다.

상기 코어쉘 나노캡슐의 코어는 평균직경이 150nm 내지 250nm 이고, 상기 코어쉘 나노캡슐 전체의 평균직경은 350 내지 450nm 일 수 있다.

본 발명에서 이용되는 추출용매는 물, 탄소수 1-4의 저급 알코올, 상기 저급 알코올과 물과의 혼합용매, 아세톤, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 부틸아세테이트, 1,3-부틸렌글리콜, 헥산, 디에틸에테르 등을 사용할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 물, 에탄올을 사용하는 것이다.

본 명세서에서 사용되는 용어 ‘추출물’은 당업계에서 조추출물(crude extract)로 통용되는 의미를 갖지만, 광의적으로는 추출물을 추가적으로 분획(fractionation)한 분획물도 포함할 수 있다. 또한, 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물에는 상기의 화장료 조성물과 더불어 필요에 따라 통상 화장료에 배합되는 다른 성분을 배합할 수 있으며, 이러한 배합 성분으로서는 물, 유분, 계면활성제, 보습제, 점증제, 방향제, 보존제, 중화제, 에몰리언트제, 피부보호제 및 피부컨디셔닝제로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 들 수 있다.

또한, 상기 화장료 조성물은 당업계에서 통상 사용되는 유화 제형 및 가용화 제형의 형태로 제조될 수 있으며, 그 예로 스킨, 유액, 에센스, 앰플, 로션, 미용액, 바디로션, 바디젤, 바디에센스, 바디세정제, 클렌징폼, 클렌징크림, 클렌징 겔, 팩, 마사지크림, 마사지겔, 영양크림, 수면크림 및 수분크림으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 제형을 들 수 있다.

[실시예]

실시예

(1) 연어 유래 폴리디옥시리보뉴클레오티드(PDRN) 제조

알래스카 연어를 정소, 연골, 연어육으로 분리하고, 연어 정소는 외피, 핏줄, 혈관을 제거하고, 각 부위를 손질한 후 세척하였다.

분리된 연어정소를 초음파 파쇄기에 넣어 파쇄 처리하였으며, 초음파 파쇄는 25℃의 온도, 50 kHz의 주파수, 1000W 에너지량으로 수행하였다. 파쇄처리된 정소는 1mm 메쉬의 거름종이를 이용하여 불순물을 제거하였다.

(2) PDRN-고분자복합체 제조

제조된 폴리디옥시리보뉴클레오티드(PDRN)와 폴리에틸렌이민(polyethyleneimine)에서 PDRN의 인(P)과 폴리에틸렌이민의 질소(N)의 비율이 1:5가 되도록 복합체를 제조하였다.

(3) 연어연골 효소분해물 제조

분리된 연어연골은 건조한 후 분쇄하여 분말로 만들고, 프로테아제와 뉴클라아제, 완충용액인 탄산나트륨 용액을 첨가한 후 50℃에서 5시간 동안 교반하여 저분자화한 후 원심분리하여 효소분해물을 수득하였다.

(4) PDRN 용해물을 제조

분리된 연어육을 파쇄한 후 연어육과 에탄올 수용액을 1:5의 비율로 혼합한 후, 50℃에서 10시간 동안 추출하고, 감압농축시켜 연어오일을 수득하였다.

이후, 상기 PDRN-고분자복합체, 연어연골 효소분해물, 트리에칠헥사노인을 50℃의 온도에서 1:1:15의 중량비로 혼합하여 용해시킨 후, 상기 연어오일을 트리에칠헥사노인과 동량으로 첨가하여 완전히 용해시켰다.

(5) 지질용해물 제조

알긴산, 포스파티딜콜린, 세라마이드, 콜레스테롤, 및 세틸포스페이트를 포함하고, 각각의 성분들은 상기 연어오일 100중량부에 대하여 알긴산 600중량부, 포스파티딜콜린 150중량부, 세라마이드 50중량부, 콜레스테롤 50중량부, 및 세틸포스페이트 25중량부을 75℃에서 혼합하여 용해시켰다.

(6) 1차 유화

상기 PDRN 용해물과 지질용해물을 1:1의 중량비로 혼합하고, 이를 진공유화조에서 2500rpm으로 교반하여 유화시킨 후, 45?로 냉각시켜 단일층의 쉘을 갖는 예비 PDRN 코어쉘 나노캡슐을 제조하였다.

(7) 2차 유화

1차 유화된 결과물을 고압형 유화기에서 45℃에서 1000bar의 압력으로 2회에 걸쳐 유화시켜 이중 쉘을 갖는 코어쉘 나노캡슐을 제조하였다.

[시험예]

시험예 1: PDRN 의 확인

실시예 1에 따라 제조된 연어정소 유래 PDRN을 확인하기 위하여 분광 광도계(spectrophotometer)를 이용하여 흡수 스펙트럼을 분석한 결과를 도 2에 나타내었다. 이에 따르면, 1/100 희석한 샘플에서 약 260nm 파장에서 높은 흡수율을 나타내어 PDRN의 수득을 확인할 수 있었다.

또한, 실시예 1에 따라 제조된 연어정소 유래 PDRN에 대해 DNA 전기 영동을 실시하여 그 결과를 도 3에 나타내었다. 이에 따르면, 존재하는 DNA는 50 내지 500 bp 의 분포를 가지고, 있으며, 분자량으로 환산할 경우 약 30 내지 300 kDa의 분자량을 가지는 것으로 확인되었다.

시험예 2: 피부톤 개선 효과 확인

실시예 1에 따라 제조된 나노캡슐에 방부제와 점증제를 투입하여 앰플과 크림으로 각각 제조하였다. 이때 앰플은 나노캡슐의 함량이 약 5000ppm이 되도록 하였으며, 크림은 나노캡슐의 함량이 약 1000ppm이 되도록 하였다.

앰플과 크림을 아침, 저녁으로 2회씩 4주간 사용한 후 사용 전후의 피부톤을 비교하여 도 4에 나타내었다. 이에 의하면, 사용 4주 후의 피부톤이 밝고, 균일하며 매끄러워진 것을 확인할 수 있다.

시험예 3: 피지 개선 효과 확인

시험예 2에서와 동일한 방법으로 4주간 사용 전후의 T-존, U-존 부위의 피지개선 효과를 살펴보았다. 이는 안면피부진단기 JANUS Ⅱ를 사용하여 측정하였으며 그 결과를 도 5에 나타내었다. 여기서 노란색 막대는 화장료 사용 전의 피지량을 나타낸 것이고, 초록색 막대는 화장료 사용 후의 피지량을 나타낸 것이며, 청색 막대(E)는 평균값을 나타낸 것이다.

이에 따르면, T-존, U-존 부위의 피지량이 사용 4주 후 현저히 줄어든 것으로 나타나 본 발명의 코어쉘 나노캡슐이 피지 개선에 효과적임을 확인할 수 있었다.

시험예 4: 주름 개선 효과 확인

시험예 2에서와 동일한 방법으로 4주간 사용 전후의 주름 개선효과를 관찰하여 그 결과를 도 6에 나타내었다. 여기서 노란색 막대는 화장료 사용 전의 주름량을 나타낸 것이고, 초록색 막대는 화장료 사용 후의 주름량을 나타낸 것이며, 청색 막대(E)는 평균값을 나타낸 것이다.

이에 따르면, 눈밑 주름이 확연하게 개선된 것으로 나타났다.

시험예 5: 모공 개선 효과 확인

시험예 2에서와 동일한 방법으로 4주간 사용 전후의 모공 개선효과를 관찰하여 그 결과를 도 7에 나타내었다. 여기서 노란색 막대는 화장료 사용 전의 모공량을 나타낸 것이고, 초록색 막대는 화장료 사용 후의 모공량을 나타낸 것이며, 청색 막대(E)는 평균값을 나타낸 것이다.

이에 따르면, T-존, U-존 부위의 모공이 줄어들어 모공 개선효과가 있음을 확인할 수 있었다.

이상, 본 발명의 실시예들에 대하여 설명하였으나, 해당 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 특허청구범위에 기재된 본 발명의 사상으로부터 벗어나지 않는 범위 내에서, 구성 요소의 부가, 변경, 삭제 또는 추가 등에 의해 본 발명을 다양하게 수정 및 변경시킬 수 있을 것이며, 이 또한 본 발명의 권리범위 내에 포함된다고 할 것이다.

Claims

(a) 연어정소 유래 폴리디옥시리보뉴클레오티드(PDRN, polydeoxyribonucleotide)를 제조하는 단계;
(b) 상기 폴리디옥시리보뉴클레오티드와 양이온성고분자를 혼합하여 PDRN-고분자복합체를 제조하는 단계;
(c) 연어연골 추출물을 가수분해효소 처리하여 연어연골 효소분해물을 제조하는 단계;
(d) 상기 PDRN-고분자 복합체와 연어연골 효소분해물을 에스테르계 오일에 용해시킨 후, 연어오일과 혼합하여 PDRN 용해물을 제조하는 단계;
(e) 알긴산 또는 그의 염, 인지질, 피부컨디셔닝제, 콜레스테롤, 및 음이온성 인화합물을 혼합하여 지질용해물을 제조하는 단계;
(f) 상기 PDRN 용해물과 지질용해물을 혼합하여 1차 유화시키는 단계; 및
(g) 단계 (f)의 결과물에 고분자유화제를 혼합하고 2차 유화시켜 PDRN 코어쉘 나노캡슐을 제조하는 단계;를 포함하고,
상기 단계 (b)에서,
상기 양이온성고분자는 폴리에틸렌이민, 폴리아미도아민, 폴리비닐 피롤리돈 및 키토산 중에서 선택된 1종 이상이고,
상기 폴리디옥시리보뉴클레오티드에 포함된 인(P)의 원자수와 상기 양이온성고분자에 포함된 질소(N)의 원자수 비율이 10:1 내지 20:1가 되도록 혼합하여 PDRN-고분자 복합체를 제조하는 것을 특징으로 하는, 폴리디옥시리보뉴클레오티드(PDRN) 코어쉘 나노캡슐을 함유하는 피부톤, 피지, 주름 및 모공 개선 기능성 화장료 조성물의 제조방법.
제1항에 있어서,
상기 폴리디옥시리보뉴클레오티드의 분자량은 30kDa 내지 300kDa 인 것을 특징으로 하는 폴리디옥시리보뉴클레오티드(PDRN) 코어쉘 나노캡슐을 함유하는 피부톤, 피지, 주름 및 모공 개선 기능성 화장료 조성물의 제조방법.
제1항에 있어서,
단계 (a)는,
(a-1) 상기 연어정소를 초음파 파쇄하여 연어정소 파쇄물을 제조하는 단계; 및
(a-2) 상기 연어정소 파쇄물을 여과하여 불순물을 제거하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 폴리디옥시리보뉴클레오티드(PDRN) 코어쉘 나노캡슐을 함유하는 피부톤, 피지, 주름 및 모공 개선 기능성 화장료 조성물의 제조방법.
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제1항에 있어서,
단계 (d)에서 상기 PDRN 용해물은 연어오일 100중량부에 대하여, 에스테르계 오일 4 내지 750중량부, PDRN-고분자 복합체 0.04 내지 100중량부 및 연어연골 효소분해물 0.04 내지 100중량부를 포함하는 것을 특징으로 하는 폴리디옥시리보뉴클레오티드(PDRN) 코어쉘 나노캡슐을 함유하는 피부톤, 피지, 주름 및 모공 개선 기능성 화장료 조성물의 제조방법.
제1항에 있어서,
단계 (e)에서, 상기 지질용해물은 상기 연어오일 100중량부에 대하여, 알긴산 또는 그의 염 8 내지 1250중량부, 인지질 2 내지 250중량부, 피부컨디셔닝제 0.04 내지 100중량부, 콜레스테롤 0.04 내지 100중량부, 및 음이온성 인화합물 0.04 내지 50중량부를 포함하는 것을 특징으로 하는 폴리디옥시리보뉴클레오티드(PDRN) 코어쉘 나노캡슐을 함유하는 피부톤, 피지, 주름 및 모공 개선 기능성 화장료 조성물의 제조방법.
제1항에 있어서,
단계 (g)의 상기 2차 유화는 복수 회 수행하는 것을 특징으로 하는 폴리디옥시리보뉴클레오티드(PDRN) 코어쉘 나노캡슐을 함유하는 피부개선 기능성 화장료 조성물의 제조방법.
제1항 내지 제3항, 및 제6항 내지 제8항 중에서 선택된 어느 한 항에 따라 제조된 폴리디옥시리보뉴클레오티드(PDRN) 코어쉘 나노캡슐을 함유하는 피부톤, 피지, 주름 및 모공 개선 기능성 화장료 조성물.
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