KR101970765B1 - 해양 진균 Penicillium sp. SF-5859 유래 커뷰라린 유형의 대사체를 함유하는 염증질환 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents

해양 진균 Penicillium sp. SF-5859 유래 커뷰라린 유형의 대사체를 함유하는 염증질환 예방 또는 치료용 조성물 Download PDF

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고원민
이승준
손재영
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Abstract

본 발명은 커뷰라린 유형의 대사체를 유효성분으로 함유하는 염증질환 예방 또는 치료용 약학 조성물, 및 염증질환 예방 또는 개선용 식품에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 해양 진균 Penicillium sp. SF-5859 유래 커뷰라린 유형의 대사체를 유효성분으로 함유하는 염증질환 예방 또는 치료용 약학 조성물, 및 염증질환 예방 또는 개선용 식품에 관한 것이다.
본 발명에 따른 해양 진균 Penicillium sp. SF-5859(KCTC 13354BP)로부터 유래된 커뷰라린(curvularin) 유형의 대사체를 함유하는 염증질환 예방 또는 치료용 약학 조성물은, 전 염증성 사이토카인 및 매개체 생성을 억제하므로, 염증질환의 예방 또는 치료 용도로 유용하게 사용될 수 있다.

Description

해양 진균 Penicillium sp. SF-5859 유래 커뷰라린 유형의 대사체를 함유하는 염증질환 예방 또는 치료용 조성물{Composition for Preventing or Treating Inflammatory Diseases Comprising Curvularin-Type Metabolites From a Marine Fungi Penicillium sp. SF-5859}
본 발명은 커뷰라린 유형의 대사체를 유효성분으로 함유하는 염증질환 예방 또는 치료용 약학 조성물, 및 염증질환 예방 또는 개선용 식품에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 해양 진균 Penicillium sp. SF-5859 유래 커뷰라린 유형의 대사체를 유효성분으로 함유하는 염증질환 예방 또는 치료용 약학 조성물, 및 염증질환 예방 또는 개선용 식품에 관한 것이다.
염증은 신체 면역 반응의 중요한 부분으로, 상해 또는 손상에 대한 유용한 방어 반응이며, 상해의 해로운 영향을 억제하도록 계획된다(Zhang, G et al., 2001. J. Clin. Invest, 107, 13-19). 하지만, 과도한 급성 또는 만성 염증은 관절염, 천식, 대장염, 파키슨병, 알츠하이머병 또는 패혈증과 같은 심각한 장애를 일으킬 수 있다(K. Lucas et al., 2013, Mol. Neurobiol. 48, 190-204). 이러한 질병의 치료에 있어서, 염증의 제어는 필수적이다.
지질다당류(lipopolysaccharides; LPS)로 알려진 그람음성균의 외막은 강력한 전염증 내독소이다. LPS 자극은 대식세포 및 미세아교세포에서, 유도성 산화질소 효소(inducible nitric oxide synthase; iNOS)-유래 산화질소(NO) 및 시클로옥시게나아제(cyclooxygenase-2; COX-2)-유래 프로스타글란딘 E2(prostaglandin E2; PGE2)를 포함하는 전염증성 매개체의 생성을 유도할 수 있다. 산화질소(NO)는 iNOS에 의해 생성되는 염증성 분자로, 과도한 iNOS의 활성 증가 또는 산화질소의 생성은 다양한 염증성 질환의 병인이다(McCartney-Francis et al., J. Exp. Med. 178, 749754, 1993; Szabo et al., New Horiz. 3, 232, 1995). COX-2 효소에 의해 합성되는 PGE2는 발열과 통증 같은 염증 증상의 중요한 매개체이므로(Samuelsson et al., Pharmacol. Rev. 59:207224, 2007; Simmons et al., Pharmacol. Rev. 56:387437, 2004), 이들 염증성 매개체의 생산 억제는 다양한 염증질환의 치료에 유용하다. 따라서, 염증성 사이토카인 및 매개물질의 억제는 염증 관련 만성 질병 예방에 대한 치료 표적일 수 있다.
또한, LPS에 의해 활성화된 대식세포는 종양괴사인자-α(tumor necrosis factor-α; TNF-α), 인터류킨-1β(IL-1β) 및 인터류킨-6(IL-6)를 포함하는 전염증 사이토카인을 유도하며(T. Kawai et al., 2010, Nat. Immunol. 11, 373-384), 이는 NF-κB에 의해 조절된다. NF-κB는 전사인자 p50 및 p65의 이종이량체(heterodimeric) 단백질로 구성된다. 이종이량체 도메인은 저해단백질 IκBα와 상호작용하고, 이는 NF-κB를 불활성시키며, 세포질 내에서 복합체를 유지한다. LPS에 의해 유도되는 NF-κB 시스템의 활성은 IκBα의 분해 및 핵으로 NF-κB의 이동을 초래한다. 핵으로 NF-κB의 이동은 iNOS와 COX-2 단백질 발현 및 TNF-α와 IL-1β의 mRNA 발현을 더욱 유도한다.
LPS로 유도된 대식세포 및 미세아교세포에서 활성화된 미토겐 활성 단백질 인산화효소(mitogen-activated protein kinase; MAPK) 캐스케이드는 염증반응에 필수적인 역할을 하는 것으로 나타났다. 3가지 MAPK 신호전달 경로가 있으며, c-Jun N-말단 인산화효소(JNK), 세포외 신호조절 인산화효소(ERK) 및 P38이다(M.Y. Peroval et al., 2013, PLoS ONE 8, e51243).
한편, 박테리아, 시아노박테리아, 미세조류 및 곰팡이를 포함한 해양 미생물은 새로운 약리학적 활성 이차대사산물의 중요한 원천이며(Bugni and Ireland et al., Nat. Prod. Rep. 21:143163, 2004), 특히 해양균류는 신규한 항바이러스, 항염증, 항균 및 항암제 물질의 풍부하고 유망한 근원이다(Bhadury et al., J. Ind. Microbiol. Biotechnol. 33:325337, 2006). 따라서, 다년간, 해양 유래 균류 연구는 새로운 2차 대사체 및 그들의 약리적 활성을 개시해왔다.
이에, 본 발명자들은 해양 진균 Penicillium sp. SF-5859로부터 커뷰라린 유형의 대사체들을 분리하여, RAW 264.7 대식세포에서 LPS에 의해 유도되는 염증반응에 대한 상기 화합물들의 항염증성 효과를 확인하고, 본 발명을 완성하였다.
본 배경기술 부분에 기재된 상기 정보는 오직 본 발명의 배경에 대한 이해를 향상시키기 위한 것이며, 이에 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가지는 자에게 있어 이미 알려진 선행기술을 형성하는 정보를 포함하지 않을 수 있다.
본 발명의 목적은 커뷰라린 유형의 대사체를 유효성분으로 함유하는 염증질환 예방 또는 치료용 약학 조성물, 및 염증질환 예방 또는 개선용 식품을 제공하는 데 있다.
본 발명은 하기 화학식 1 내지 4로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나의 커뷰라린(curvularin) 유형의 대사체를 유효성분으로 함유하는 염증질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
[화학식 1]
Figure 112017113975244-pat00001
[화학식 2]
Figure 112017113975244-pat00002
[화학식 3]
Figure 112017113975244-pat00003
[화학식 4]
Figure 112017113975244-pat00004
여기서, 상기 화학식 1의 R1 및 R2는 각각 독립적으로 H, OCH3 또는 OAc이고, 화학식 2의 R1 및 R2는 각각 독립적으로 H, OH 또는 OCH3이다.
본 발명은 또한, 상기 화학식 1 내지 4로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나의 커뷰라린(curvularin) 유형의 대사체를 유효성분으로 함유하는 염증질환 예방 또는 개선용 식품을 제공한다.
본 발명에 따르면 해양 진균 Penicillium sp. SF-5859(KCTC 13354BP)로부터 유래된 커뷰라린(curvularin) 유형의 대사체를 함유하는 염증질환 예방 또는 치료용 약학 조성물은, 염증반응과 관련하여 RAW264.7 대식세포에서 전 염증성 사이토카인 및 매개체 생성을 억제하므로, 염증질환의 예방 또는 치료 용도로 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 RAW264.7 대식세포에서 화학식 3의 화합물의 (a)는 iNOS와 COX-2 단백질 발현 수준에 대한 효과, (b)는 IL-1β, (c)는 IL-6, (d)는 TNF-α의 mRNA 발현 수준에 대한 효과를 나타낸 그래프이다. 3번의 독립적인 실험의 대표 데이터 또는 평균값을 표시하였다(*p < 0.05 는 LPS 처리된 군과 비교).
도 2는 LPS로 유도된 RAW264.7 대식세포에서 화학식 3의 화합물의 (a)는 NF-κB 활성화(핵-p50 및 p65)에 대한 효과, (b)는 IκBα 인산화 및 분해에 대한 효과, (c)는 NF-κB의 DNA 결합 활성에 대한 효과를 나타낸 그래프이다. 각 데이터는 3번의 독립적인 실험의 대표 데이터 또는 평균값을 나타낸다(*p < 0.05 는 LPS 처리된 군과 비교).
도 3은 LPS로 유도된 RAW264.7 대식세포에서 화학식 3의 화합물의 (a)는 p38, (b)는 JNK, (c)는 ERK의 인산화에 대한 효과를 나타낸 그래프이다. 3번의 독립적인 실험의 대표 데이터를 표시하였다.
다른 식으로 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어들은 본 발명이 속하는 기술분야에서 숙련된 전문가에 의해서 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 일반적으로 본 명세서에서 사용된 명명법은 본 기술분야에서 잘 알려져 있고 통상적으로 사용되는 것이다.
본 발명의 일 실시예에서, 해양 유래 진균 Penicillium sp. SF-5859(기탁번호: KCTC 13354BP)로부터 커뷰라린(curvularin) 유형의 대사체인 화학식 1 내지 4의 화합물을 분리하고 그 구조를 확인하였다. 또한, 상기 커뷰라린 유형의 대사체(화학식 1 내지 4의 화합물)가 RAW264.7 대식세포에서 NO 및 PGE2 생성을 억제하고, 화학식 3의 화합물이 iNOS 및 COX-2 발현을 억제하며, IL-1β, IL-6 및 TNF-α의 mRNA 발현을 억제시킴으로써, 염증질환의 예방 또는 치료 효과를 갖는 것을 확인하였다.
따라서, 본 발명은 일 관점에서, 하기 화학식 1 내지 4로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나의 커뷰라린(curvularin) 유형의 대사체를 유효성분으로 함유하는 염증질환 예방 또는 치료용 약학 조성물에 관한 것이다.
[화학식 1]
Figure 112017113975244-pat00005
[화학식 2]
Figure 112017113975244-pat00006
[화학식 3]
Figure 112017113975244-pat00007
[화학식 4]
Figure 112017113975244-pat00008
여기서, 상기 화학식 1의 R1 및 R2는 각각 독립적으로 H, OCH3 또는 OAc이고, 화학식 2의 R1 및 R2는 각각 독립적으로 H, OH 또는 OCH3이다.
본 발명에 있어서, 상기 화학식 1의 대사체는 curvularin(Elzner, S.; et al., Inhibitors of inducible NO synthase expression: total synthesis of (S)-curvularin and its ring homologues. ChemMedChem 2008, 3, 924-939.)으로 정의된다. 상기 화학식 1의 대사체는 하기 화학식 1a 내지 1e로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 할 수 있다.
[화학식 1a 내지 1e]
Figure 112017113975244-pat00009
여기서, 화학식 1a는 R1=H, R2=H이고, 1b는 R1=OCH3, R2=H이고, 1c는 R1=OCH3, R2=OCH3이며, 1d는 R1=OAc, R2=H, 1e는 R1=OAc, R2=OAc이다.
상기 화학식 2의 대사체는 하기 화학식 2a 내지 2d로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 할 수 있다.
[화학식 2a 내지 2d]
Figure 112017113975244-pat00010
여기서 화학식 2a는 R1=OH, R2=H로서, (11R,15S)-11-hydroxycurvularin이며, 2b는 R1=H, R2=OH로서 (11S,15S)-11-hydroxycurvularin이다(Greve, H.; et al., Apralactone A and a new stereochemical class of curvularins from the marine fungus Curvularia sp.. Eur. J. Org. Chem. 2008, 2008, 5085-5092.). 화학식 2c는 R1=OCH3, R2=H로서, (11R,15S)-11-methoxycurvularin이며, 2d는 R1=H, R2=OCH3로서, (11S,15S)-11-methoxycurvularin이다(Liang, Q.; et al., First total syntheses and spectral data corrections of 11-α-methoxycurvularin and 11-β-methoxycurvularin. J. Org. Chem. 2007, 72, 9846-9849.).
또한, 상기 화학식 3의 대사체는 (10E,15S)-10,11-dehydrocurvularin(Greve, H.; et al., Apralactone A and a new stereochemical class of curvularins from the marine fungus Curvularia sp.. Eur. J. Org. Chem. 2008, 2008, 5085-5092.), 상기 화학식 4의 대사체는 (10Z,15S)-10,11-dehydrocurvularin(Lai, S.; et al., Novel curvularin-type metabolites of a hybrid strain ME 0005 derived from Penicillium citreo-viride B. IFO 6200 and 4692. Tetrahedron Lett. 1989, 30, 2241-2244.)으로 정의된다.
커뷰라린 유형의 대사체들은 Curvularia , Penicillium 및 Alternaria 속의 여러 가지 진균에 의해 생성되는 macrocyclic lactones이며, 다양한 생물학적 활성을 갖는다고 보고되어 있다.
본 발명에 있어서, 상기 커뷰라린 유형의 대사체는 해양 진균 Penicillium sp. SF-5859(기탁번호: KCTC 13354BP)에서 분리된 것을 특징으로 할 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 염증질환은 관절염, 비염, 간염, 각막염, 위염, 장염, 신장염, 기관지염, 흉막염, 복막염, 척추염, 췌장염, 염증성 통증, 요도염, 방광염, 화상 염증, 피부염, 치주염, 치은염 및 퇴행성 신경염증으로 구성되는 군에서 선택되는 것을 특징으로 할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서, 상기 염증질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물은 하기 특성 중 어느 하나 이상을 가지는 것을 특징으로 할 수 있다.
1) 산화질소(NO) 및 프로스타글란딘 E2(PGE2)의 생성 억제;
2) 유도성 산화질소 효소(inducible nitric oxide synthase; iNOS) 및 시클로옥시게나아제-2(COX-2)의 발현 억제;
3) IL-1β, IL-6 및 TNF-α의 발현 억제;
4) IκB-α(inhibitor kappa B-α)의 인산화 및 분해 억제; 및
5) NF-κB(nuclear factor kappa B)의 활성화 억제.
본 발명에 있어서, 상기 염증질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물은 산화질소(NO) 및 프로스타글란딘 E2(PGE2)의 생성 억제 특성을 갖는 것을 특징으로 할 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서, 화학식 1 내지 4의 화합물이 NO 및 PGE2의 과잉 생성을 억제하는 것을 확인하였다(표 1). NO는 다양한 면역 세포에서 생성되는 세포 내 매개체인 작은 분자이며, 염증 증상의 생리학적 및 병리학적 상태에 중추적인 역할을 한다. 또한, PGE2는 면역 반응과 염증 반응을 조절할 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 염증질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물은 유도성 산화질소 효소(inducible nitric oxide synthase; iNOS) 및 시클로옥시게나아제-2(COX-2)의 발현 억제 특성을 가지는 것을 특징으로 할 수 있다.
본 발명의 일 실시예에서, 화학식 3의 화합물이 LPS로 유도된 세포에서 iNOS 및 COX-2의 과도한 단백질 발현을 용량-의존적으로 감소시키는 것을 확인하였다(도 1(a)). iNOS 및 COX-2는 전 염증성 매개체로서, iNOS는 NO를 생성하는 염증성 분자이며, COX-2는 PGE2를 생성한다. iNOS 및 COX-2의 과도한 활성 증가는 다양한 염증질환의 병인일 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 염증질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물은 IL-1β, IL-6 및 TNF-α의 발현 억제 특성을 가지는 것을 특징으로 할 수 있다.
본 발명의 일 실시예에서, LPS로 유도된 세포에서 화학식 3의 화합물이 IL-1β, IL-6 및 TNF-α의 mRNA 발현을 용량-의존적으로 현저하게 억제하는 것을 확인하였다(도 1(b) 내지 도 1(d)). 이러한 결과는 화학식 3의 화합물이 전사 수준(transcriptional level)에서 전 염증성 사이토카인의 유전자 발현을 약화시킨다는 것을 의미한다. TNF-α, IL 등과 같은 전 염증성 사이토카인의 과잉 생성은 염증질환의 발병에 기여한다.
본 발명에 있어서, 상기 염증질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물은 IκB-α(inhibitor kappa B-α)의 인산화 및 분해 억제 및 NF-κB(nuclear factor kappa B)의 활성화 억제 특성을 가지는 것을 특징으로 할 수 있다.
본 발명의 일 실시예에서, 가장 활성이 있는 대사체인 (10E,15S)-10,11-dehydrocurvularin(화학식 3의 화합물)이 IκB-α의 인산화를 약화시키고, 농도-의존적으로 IκB-α의 분해를 막는 것을 확인하였다(도 2(b)). 또한, NF-κB 신호 전달 경로의 하향 조절을 통해 전 염증성 매개체 및 사이토카인의 유도를 억제할 수 있는 것을 확인하였다.
많은 세포 신호 전달 경로와 전사 인자가 면역 세포에서 전 염증성 유전자 및 효소의 발현에 관련이 있다고 보고되어 왔다. NF-κB는 염증 관련 질환과 관련된 중요한 전사 인자이며, 염증성 유전자와 iNOS 및 COX-2와 같은 전 염증성 매개체의 발현을 조절하는 것으로 알려져 있다. 정상 세포에서 NF-κB는 IκB-α에 결합된 p50과 p65의 불활성화된 서브유닛으로 구성된다. NF-κB 신호 전달 경로는 LPS 또는 다른 자극에 의해 활성화될 수 있으며, IκB-α가 인산화되면서 NF-κB의 분해 및 핵으로의 전이를 유도한다.
본 발명에 있어서, 상기 염증질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물은 MAPK 신호 전달 경로를 통해 매개되지 않는 것을 특징으로 할 수 있다.
본 발명의 일 실시예에서, 화학식 3의 화합물의 항염증 효과는 MAPK 신호 전달 경로를 통해 매개되지 않는 것을 확인하였다.
본 발명에 있어서, 상기 약학 조성물은 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 추가로 포함하는 것을 특징으로 할 수 있다.
상기 약학 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈,수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유가 있다.
본 발명에 있어서, 상기 약학 조성물은 이에 제한되는 것은 아니나, 통상의 방법에 따라 산제, 환제, 과립제, 캡슐제, 현탁액, 내용액제, 유제, 시럽제, 멸균된 수용액, 비수용액제, 현탁액, 동결 건조제 및 좌제로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가질 수 있다.
제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propyleneglycol), 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 60, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 약학 조성물은 목적하는 방법에 따라 경구 투여하거나 비경구 투여(예를 들어 정맥 내, 피하, 복강 내 또는 국소 적용)할 수 있으며, 투여량은 환자의 건강상태, 체중, 연령, 성별, 식이, 배설율, 질병의 정도, 약물형태, 투여시간, 투여경로 및 투여기간에 따라 그 범위가 다양하지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나, 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 대사체는 1일 0.001~1000mg/kg으로, 바람직하게는 0.01~100mg/kg으로 투여할 수 있다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 약학 조성물은 염증질환의 예방 또는 치료를 위하여 단독으로, 또는 수술, 방사선 치료, 호르몬 치료, 화학치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.
본 발명은 다른 관점에서, 상기 화학식 1 내지 4로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나의 커뷰라린(curvularin) 유형의 대사체를 유효성분으로 함유하는 염증질환 예방 또는 개선용 식품에 관한 것이다.
본 발명에 있어서, 상기 염증질환 예방 또는 개선용 식품은 영양 보조제(nutritional supplement), 건강 식품(health food) 및 식품 첨가제(food additives) 등의 모든 형태를 포함한다. 상기 유형의 식품은 당업계에 공지된 통상적인 방법에 따라 다양한 형태로 제조할 수 있다. 예를 들면, 건강식품으로는 본 발명의 커뷰라린 유형의 대사체를 차, 쥬스 및 드링크의 형태로 제조하여 음용하도록 하거나, 과립화, 캡슐화 및 분말화하여 섭취할 수 있다. 또한, 상기 식품은 음료(알콜성 음료 포함), 과실 및 그의 가공식품(예: 과일통조림, 병조림, 잼, 마말레이드 등), 어류, 육류 및 그 가공식품(예: 햄, 소시지 콘비프등), 빵류 및 면류(예: 우동, 메밀국수, 라면, 스파게티, 마카로니 등), 과즙, 각종 드링크, 쿠키, 엿, 유제품(예: 버터, 치즈 등), 식용식물유지, 마가린, 식물성 단백질, 레토르트 식품, 냉동식품, 각종 조미료(예: 된장, 간장, 소스 등) 등에 본 발명에 따른 커뷰라린 유형의 대사체를 첨가하여 제조할 수 있다.
본 발명에 있어서, 상세한 설명 등에서 사용되는 주요 용어의 정의는 다음과 같다.
본원에서 "염증"이란, 어떤 자극에 대한 생체조직의 방어반응의 하나로, 각종 유해한 자극에 의한 상해를 제거하여 원래의 상태로 회복하려는 생체방어 기전이다. 염증의 자극에는, 감염 혹은 화학적, 물리적 자극이 있으며, 염증의 과정은 급성과 만성 염증의 2가지로 나눌 수 있다. 급성염증은 수일 이내의 단기적인 반응이며, 혈장성분이나 혈구 등이 미소순환계를 게재하여 이물 제거에 관련한다. 만성염증은 지속시간이 길며, 조직의 증식 등이 보여진다.
본원에서 "산화질소(NO)"는 세포 내 염증반응 유발시 산화질소 합성효소에 의해 생성량이 증가하는 물질로, 염증반응의 지표가 되는 분자이다. 신경계에서 산화질소는 신경세포에 존재하는 신경계 산화질소 합성효소(NOS)에 의하여 합성된다. 상기 합성된 산화질소는 뇌세포에서 cGMP의 생성을 증가시키고, 이로 인하여 외부로부터 인지한 정보를 오랫동안 저장하는 기능을 수행한다. NO는 자유 라디칼로 생리학적, 병리학적 과정에 관련된 것으로 알려져 있다. NO는 산화질소 합성효소에 의해 엘-아르기닌(L-Arginine) 산화에 의해 합성된다(Atkan, et al., 75: 639-653, 2004).
본원에서 "COX-2"는 염증반응과 관련된 단백질인 프로스타글라딘을 생성하는데 관여하는 효소로, 세포내 COX-2 발현 수준의 증가는 염증반응이 진행되고 있음을 나타내는 지표가 될 수 있다.
본원에서 "프로스타글란딘 E2(PGE2)"는 프로스타글란딘 엔도페록시드 합성효소라고 불리는 COX-2에 의해 염증 부위에서 생성되는 염증 매개체이다. PGE2는 많은 심장혈관 질환, 관절염, 염증성 장 질환 및 만성 위궤양을 포함하는 만성 염증성 질환과 관련되어 있다(St-Onge, M. et al., Biochim.Biophys.Acta. 1771:1235-1245, 2007; Turini, M.E. et al., Annu.Rev.Med. 53:35-57, 2002; Rocca, B. et al., Int.Immunopharmacol. 2: 603-630, 2002; Singh, V.P. et al., Pharmacology 72:77-84, 2004).
본원에서 "MAPK"는 성장인자 등이 세포막에 위치한 수용체를 활성화하려면 이 신호를 세포막으로부터 핵으로 전달함으로써 세포의 성장과 분화를 조절하는 주요 신호전달계이다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.
실시예 1: 일반적인 실험 절차
선광성(optical rotation)은 Jasco P-2000 digital polarimeter(Jasco, Easton, PA, USA)을 사용하였다. NMR 스펙트럼(1D 및 2D)은 JEOL JNM ECP-400 spectrometer(400 MHz for 1H, 100 MHz for 13C, JEOL Ltd., Akishima, Japan)를 사용하였고, 화학적 이동(chemical shifts)은 상응하는 residual solvents signals에 대하여 표시되었다(δH 2.05/δC 29.8 for acetone-d 6, δH 7.26/δC 77.2 for CDCl3 및 δH 3.30/δC 49.0 for CD3OD).
HMQC 및 HMBC 실험은 각각 1JCH=140Hz와 nJCH=8Hz로 최적화되었다. HRESIMS 데이터는 ESI Q-TOF MS/MS 시스템(AB SCIEX Triple, SCIEX, Framingham, MA, USA)을 이용하여 얻었다. Flash column chromatography는 실리카 겔(Kieselgel 60, 70-230 mesh and 230-400 mesh, Merck, Kenilworth, NJ, USA)과 YMC octadecyl-functionalized silica gel(C18, YMC CO., Kyoto, Japan) 상에서 수행하였다. HPLC(YoungLin, Anyang, Korea) separations에는 YMC semiprep-C18 column(20 X 150mm; 4 μm particle size; 80 Å pore size, 5 mL/min, YMC CO., Kyoto, Japan) 및 Shodex Ohpak SB 802.5(8 X 300mm; 6μm particle size; 80 Å pore size, 0.6mL/min, Showa Denko K.K., Tokyo, Japan)가 사용되었다. TLC는 Kieselgel 60 F254(Merck, Kenilworth, NJ, USA) 또는 reversed-phase(RP)-18 F254s(Merck, Kenilworth, NJ, USA) 판에서 수행되었다. 스팟은 가열 후 10% aqueous H2SO4 solution에서 뿌려져 시각화되었다. 모든 화합물들은 210 및 254nm UV absorption에 의해 탐지되었다.
RPMI1640, fetal bovine serum (FBS) 및 다른 조직배양 시약은 Gibco BRL Co.(Grand Island, NY, USA)로부터 구입하였다. 다른 모든 화학 물질들은 Sigma-Aldrich Co.(St. Louis, MO, USA)을 통해 얻었다. 1차 항체(COX-2: sc-1745; iNOS: sc-650; IκB-α: sc-371; p-IκB-α: sc-8404; p50: sc-7178; p65: sc-8008, Santa Cruz Biotechnology, Dallas, TX, USA, p-ERK: #9101; ERK: #9102; p-JNK: #9251; JNK: #9252S; p-p38: #9211; p38: 9212S, Cell Signaling Technology, Danvers, MA, USA) 및 2차 항체(mouse: ap124p; goat: ap106p; rabbit: ap132p, Millipore, Billerica MA, USA). PGE2를 위한 효소면역측정법(Enzyme-linked immunosorbent assay; ELISA) 키트는 R and D Systems, Inc.(Minneapolis, MN, USA)로부터 구입하였다.
실시예 2: 해양 진균 Penicillium sp . SF -5859의 배양 및 확인
로스해(76 06.25635 S 169 12.6752 E)에서 수집한 정체불명의 해면동물로부터 Penicillium sp. SF-5859(기탁번호: KCTC 13354BP)를 분리하였다. 해면동물의 표면을 멸균하고, 시료 1g을 막자 사발로 분쇄한 후, 멸균된 바닷물(10mL)과 혼합하였다. 시료의 일부(0.1mL)를 부산 지역에서 채취한 멸균 해수를 함유한 potato dextrose agar (PDA) 배지에서 확산 판 방법을 사용하여 가공하였다. 플레이트를 25℃에서 14일동안 배양하였다. 분리 균을 몇 차례 계대 배양한 후, 순수 배양균을 선별하여 -70℃에서 보존하였다.
진균 균주 SF-5859는 rRNA 서열 분석에 기초하여 동정하였다. SF-5859(GenBank 수탁번호 KF745792) 28S rRNA 유전자로 검색한 GenBank 결과는 Penicillium chrysogenum (FJ890400), P. steckii (HM469415), P. paxilli (FJ890408) 및 P. citrinum (JN938950) 각각 99.48%, 98.69%, 98.69% 및 98.43%의 서열 동일성을 나타냈다. 따라서, 해양에서 유래된 진균 균주 SF-5859는 Penicillium sp.로 특정되었으나, 특정 종은 명확하게 확인되지 않았다.
실시예 3: Penicillium sp . SF -5859로부터 curvularin 유형의 대사체의 추출 및 분리
진균 균주 Penicillium sp. SF-5859는 10g의 Fernbach-style 플라스크에 100g의 semi-solid semi-solid vermiculite와 3%(w/v) NaCl을 함유한 400mL PDB가 들어있는 배지에서 배양되었다. 플라스크는 진균 균주의 2mL 종군 배양물을 개별적으로 접종하고, 25℃에서 14일동안 항온 처리한 다음, EtOAc(한 플라스크 당 4L)로 추출하였다. 추출 용액을 여과지를 통해 여과시키고 증발 건조시켜 조 추출물(crude extract) SF5859(2.2g)을 수득하였다. 조 추출물을 역상(reversed phase; RP) C18 플래시 컬럼 크로마토그래피(5X30cm)로 분획시키고, H2O(각각 500mL) 중의 20, 40, 60, 80 및 100%(v/v) MeOH의 단계적 구배로 용출시켜 SF5859-1에서 SF5859-6까지 6개의 분획을 연속적으로 얻었다. SF5859-3 분획을 실리카겔(2X30cm)이 충진된 크로마토그래피 컬럼에 적용시켰다. 이어서, 컬럼을 EtOAc(8/1 v/v, 200mL) 및 (4/1 v/v, 150mL) 중의 CH2Cl2의 구배로 용출시켜 화학식 3의 화합물(30.0mg) 및 7개의 다른 분획, SF5859-31에서 SF5859-38까지 얻었다. 이는 TLC 분석에 기초하여 모아졌다.
4번째 분획인 SF5859-34를 물(0.1% HCOOH) 중 MeOH(60% to 80% in 20min)의 구배로 용출시키는 semi-preparative reverse-phase HPLC에 의해 추가로 정제하여서 화학식 4의 화합물(1.5mg, t R = 13.5min)을 얻었다.
마찬가지로, 6번째 분획인 SF5859-36을 semi-preparative RP HPLC column(50-80% MeOH in H2O(0.1% HCOOH) over 30 min)에 적용시켜 2개의 하위 분획 SF5859-361 및 SF5859-362를 얻고, Shodex Ohpak SB 802.5 HPLC column(30-75% MeOH in H2O over 50 min)을 수행하여 하위 분획 SF5859-362로부터 화학식 2c의 화합물(3.5mg, t R = 46 min)을 분리하였다.
7번째 분획 SF5859-37은 semi-preparative RP HPLC column(30-60% MeOH in H2O (0.1% HCOOH) in 30 min)을 이용하여 화학식 2b의 화합물(1.5mg, t R = 28 min) 및 2개의 다른 하위 분획으로 분리되었다. 상기 하위 분획물 중 SF5859-373을 semi-preparative RP HPLC column (40-65% MeOH in H2O (0.1% HCOOH) in 25 min)으로 추가 분리하여 화학식 2a의 화합물(2.5mg, t R = 20.5 min)를 얻었다.
8번째 분획 SF5859-38은 MeOH in H2O(1/3 v/v)으로 용출하는 C18 크로마토그래피 컬럼(1.5X20cm)에 의해 먼저 분리되고, 분획 SF5859-4는 CH2Cl2 in EtOAc(7/1 v/v)로 용리하면서 실리카 겔 컬럼(3X30cm)에서 크로마토그래피 하였다. 이것으로부터 4개의 다른 분획물과 함께 주요 대사 산물인 화학식 1a의 화합물(450.0mg)을 얻었다.
5번째 분획 SF5859-45를 semi-preparative RP HPLC column 60-75% MeOH in H2O (0.1% HCOOH) over 15 min)에서 최종 정제하여 화학식 2d의 화합물(2mg, t R = 13 min)을 수득 하였다.
1mL MeOH의 curvularin(화학식 1a, 15mg) 용액에 N,N-diisopropylethylamine (50μL)을 추가하고, TMSCHN2 (110μL, 2.2M in n-hexane)을 추가한다. 반응 혼합물을 실온에서 15시간 동안 교반하였다. 이어서, 용액을 진공에서 농축시키고, 유기 상을 증발시키기 전에 EtOAc 및 H2O로 추출하였다. 그 후, 잔류물질을 18분에 걸쳐 70% 내지 86%의 메탄올 in water(0.1 % HCOOH)의 구배로 용출시키는 semi-preparative RP HPLC에 적용시켜 메틸화 생성물 화학식 1b(4mg, t R = 14 min) 및 화학식 1c(6mg, t R = 16 min)의 화합물을 얻었다.
Curvularin(화학식 1a, 10mg)을 600μL acetone에 용해시킨 후, acetic anhydride(600μL)을 첨가하였다. 촉매량의 N,N-dimethylpyridin-4-amine을 첨가하여 반응이 개시되었다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 진공에서 건조시킨 후, 유기 상을 증발시키기 전에 전에 EtOAc 및 H2O로 분할하였다. 그 후, 잔류물질을 19분에 걸쳐 62% 내지 80%의 methanol in water(0.1% HCOOH)의 구배로 용출시키는 semi-preparative RP HPLC에 적용시켜 아세틸화된 생성물 화학식 1d(2mg, t R = 14 min) 및 1e(3.5mg, t R = 16 min)의 화합물을 얻었다.
실시예 4: Penicillium sp . SF -5859 유래 curvularin 유형의 대사체의 구조 결정
4-1: 화학식 1b 및 1c 화합물
5-O-methylcurvularin(1b): white amorphous powder; 1H-NMR(CD3OD, 400MHz) 및 13C-NMR data(CD3OD, 100MHz); HRESIMS m/z 309.1667 [M + H]+ (calcd. for C17H21D2O5 due to deuterium exchange, 309.1671).
5,7-Di-O-methylcurvularin(1c): white amorphous powder; 1H-NMR (CD3OD, 400MHz) 및 13C-NMR data(CD3OD, 100MHz); HRESIMS m/z 321.1706 [M + H]+(calcd. for C18H25O5, 321.1702).
4-2: 화학식 1d 및 1e 화합물
5-O-acetylcurvularin(1d): white amorphous powder; 1H-NMR (acetone-d 6, 400MHz); HRESIMS m/z 357.1336 [M + Na]+ (calcd. for C18H22NaO6, 357.1314).
5,7-Di-O-acetylcurvularin(1e): white amorphous powder; 1H-NMR (acetone-d 6, 400MHz); HRESIMS m/z 399.1441 [M + Na]+ (calcd. for C20H24NaO7, 399.1420).
4-3: 화학식 4 화합물
화학식 4의 화합물은 음의 비선광도([α]20 D = -19.9 (c = 0.15, EtOH)를 갖는 반면, 화학식 4의 화합물과 동일한 평면 구조를 갖는 (10Z,15S*)-10,11-dehyrocurvularin은 양의 비선광도([α]22 D = +7.3 (c 0.78, EtOH); Lai, S et al., Novel curvularin-type metabolites of a hybrid strain ME 0005 derived from Penicillium citreo-viride B. IFO 6200 and 4692. Tetrahedron Lett. 1989, 30, 2241-2244.)를 갖는 Penicillium sp.에서 유래된 혼합 균주로부터 분리되었다는 것은 주목할 만하다. C-15에서의 비선광도의 부호와 절대적 구성 사이의 관계를 고려할 때, 화학식 4의 화합물은 자연적으로 발생한 (10Z,15S)-10,11-dehyrocurvularin의 첫번째 보고이며, 이전에 보고된 (10Z,15S*)-10,11-dehyrocurvularin은 화학식 4의 화합물의 거울상 이성질체였을 것이다.
실시예 5: 세포 배양 및 생존력 분석
본 실시예에서는 화학식 1 내지 4의 화합물의 세포독성을 MTT 분석법을 이용하여 RAW264.7 대식세포에서 확인하였다.
RAW264.7 대식세포를 10% 열-불활성화된 FBS, 페니실린 G(100 units/mL), 스트렙토마이신(100mg/mL) 및 L-글루타민(2mM)이 첨가된 RPMI1640 배지에서 5X105cells/mL의 농도로 유지하고, 5% CO2의 습기 내 37℃에서 배양하였다. 세포 생존력의 결정을 위해, 세포(1X105cells/well in 96-well plates)는 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT)와 함께 최종 농도 0.5mg/mL의 농도로 3시간 동안 배양하고, 형성된 formazan을 acidic 2-propanol에 용해시켰다. 광학밀도는 마이크로플레이트 판독기(BioRad, Hercules, CA, USA)로 540nm에서 측정하였다. 대조군(처리되지 않은) 세포에서 형성된 formazan의 광학밀도는 100% 생존력을 나타내는 것으로 간주되었다.
실시예 6: Penicillium sp . SF -5859 유래 curvularin 유형의 대사체가 아질산염 및 PGE 2 생성 억제에 미치는 영향
RAW264.7 대식세포에서 NO 생성의 지표로서 NO 산화의 안정한 최종 생성물 인 아질산염(nitrite)의 생성이 평가되었다. Conditioned media에서 아질산염의 농도는 그리스 반응(Griess reaction)에 기초하여 결정되었다.
본 실시예에서는 RAW264.7 대식세포를 각 화합물(화학식 1 내지 4)의 무독성 농도(표 1)가 함유된 배지에서 3시간 동안 전처리 한 다음 LPS(1μg/mL)를 24시간 동안 처리하였다. LPS에 의한 RAW264.7 대식세포의 자극에 따라, NO 및 PGE2의 생성이 증가하였고, NO 및 PGE2의 생성 수준에 대한 모든 화합물의 영향이 각각 Griess 반응 및 PGE2 키트에 의해 평가되었다.
결과적으로, 화학식 1 내지 4의 화합물은 LPS에 의한 NO 및 PGE2의 생성을 용량-의존적으로 저해하였고, 이들의 IC50 값을 표 2에 나타내었다. 화학식 1 내지 4의 화합물에 대한 IC50 값의 비교에 기초하여, 커뷰라린 유형의 대사체(curvularin-type metabolites)들이 구조-의존적인 항염증 특성을 나타내는 것을 확인하였다.
Figure 112017113975244-pat00011
실시예 7: Penicillium sp . SF -5859 유래 curvularin 유형의 대사체가 전 염증 효소 및 전 염증성 사이토카인 발현에 미치는 영향
본 발명의 curvularin 유형의 대사체 중에서 IC50 값에 근거하여 화학식 3의 화합물이 가장 우수한 항염증 활성을 갖는 대사체로 확인되었다(표 1).
따라서, 본 발명자들은 화학식 3의 화합물이 갖는 NO와 PGE2 생성에 대한 억제 효과가 LPS로 자극된 세포에서 NO 및 PGE들의 생성에 촉매 작용 하는 것으로 알려진 전 염증 효소(pro-inflammatory enzymes, 예를 들면 각각 iNOS 또는 COX-2)의 단백질 발현과 상관 관계가 있는지를 더 실험하였다. RAW264.7 대식세포를 3시간 동안 화학식 3의 화합물의 지시된 농도로 전처리 후, 24시간 동안 LPS로 자극하였다. 화학식 3의 화합물의 존재는 iNOS 및 COX-2의 과도한 단백질 발현을 용량-의존적으로 감소시켰다(도 1(a)).
또한, LPS에 의한 자극 시, 대식세포는 TNF-α, IL 등과 같은 전 염증성 사이토카인(pro-inflammatory cytokines)의 생성을 유발할 수 있다. 이 사이토카인의 과잉 생성은 염증질환의 발병에 기여한다. 따라서, 본 발명자들은, LPS로 유도된 세포에서 화학식 3의 화합물의 전 염증성 사이토카인의 mRNA 발현에 대한 효과를 추가로 평가하였다. 세포를 지시된 농도로 3시간 동안 전처리 한 다음, 6시간 동안 LPS 자극(1μg/mL)을 가했다. 전 염증성 사이토카인의 mRNA 발현은 RT-qPCR에 의해 결정되었다. 도 1(b) 내지 도 1(d)에서 설명되는 바와 같이, 화학식 3의 화합물은 IL-1β, IL-6 및 TNF-α의 mRNA 발현을 용량-의존적으로 현저하게 억제하였다. 이러한 결과는 화학식 3의 화합물이 전사 수준(transcriptional level)에서 전 염증성 사이토카인의 유전자 발현을 약화시킨다는 것을 의미한다.
실시예 8: IκB -α 인산화 및 NF - κB 활성에 대한 효과
많은 세포 신호 전달 경로와 전사 인자가 면역 세포에서 전 염증성 유전자 및 효소의 발현에 관련이 있다고 보고되어 왔다. 핵 인자-κB(Nuclear factor-κB; NF-κB)는 염증 관련 질환과 관련된 중요한 전사 인자이며, 염증성 유전자와 iNOS 및 COX-2와 같은 전 염증성 매개체의 발현을 조절하는 것으로 알려져 있다. 정상 세포에서 NF-κB는 NF-κB 억제 단백질(IκB-α)에 결합된 p50과 p65의 불활성화된 서브유닛으로 구성된다. NF-κB 신호 전달 경로는 LPS 또는 다른 자극에 의해 활성화될 수 있으며, IκB-α가 인산화되면서 NF-κB의 분해 및 핵으로의 전이를 유도한다.
본 실시예에서는 핵 추출물의 테스트 및 NF-κB의 결합 정도를 NF-κB ELISA kit(Active Motif)를 사용하여 측정하였다. 본 실시예의 데이터에 의하면, 화학식 3의 화합물의 전처리는 용량-의존적으로 p50 및 p65의 핵으로의 전이를 억제했다(도 2(a)). 나아가, 세포에 LPS를 단독으로 처리했을 때, IκB-α의 인산화 수준은 증가했지만, 화학식 3의 화합물은 IκB-α의 인산화를 약화시켰다. 또한, 화학식 3의 화합물은 농도-의존적으로 IκB-α의 분해를 막았다(도 2(b)). 이와 마찬가지로, 화학식 3의 화합물로 동시-처리된 세포의 핵 추출물에서 NF-κB의 LPS로 유도된 DNA 결합 활성이 감소하였다(도 2(c)). 종합하면, 화학식 3의 화합물은 NF-κB 신호 전달 경로의 하향 조절을 통해 전 염증성 매개체 및 사이토카인의 유도를 억제할 수 있다.
실시예 9: MAPK 경로에 대한 효과
Mitogen-activated protein kinase(MAPK) 경로는 대식세포에서 전 염증성 사이토카인의 발현에 관여하는 것으로 알려져 있다. 따라서, MAPK의 LPS로 유발된 인산화에 대한 화학식 3의 화합물의 효과를 조사하였다. 세포에 30분간 LPS를 처리하면 p38, c-Jun N-말단 인산화효소(JNK) 및 세포 외 신호조절 인산화효소(ERK)의 인산화가 일어나지만, 본 실시예의 데이터에 의하면 화학식 3의 화합물은 이들의 인산화를 억제하지 못한다(도 3(a) 내지 도 3(c)). 결과적으로, 화학식 3의 화합물의 항염증 효과는 MAPK 신호 전달 경로를 통해 매개되는 것으로 보이지 않으며, 화학식 3의 화합물의 항염증 활성에 관여하는 특정 표적을 밝히기 위해서는 더 많은 연구가 필요하다.
이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시 양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
한국생명공학연구원 KCTC13354BP 20170915

Claims (6)

  1. 하기 화학식 2a 내지 2d 및 화학식 3 내지 4로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나의 커뷰라린(curvularin) 유형의 대사체를 유효성분으로 함유하는 염증질환 예방 또는 치료용 약학 조성물:

    [화학식 2a 내지 2d]
    Figure 112019023627284-pat00023


    [화학식 3]
    Figure 112019023627284-pat00014


    [화학식 4]
    Figure 112019023627284-pat00015


    여기서, 상기 화학식 2a 내지 2d의 R1 및 R2는 각각 독립적으로 H, OH 또는 OCH3임.
  2. 제1항에 있어서, 상기 커뷰라린 유형의 대사체는 해양 진균 Penicillium sp. SF-5859(KCTC 13354BP)에서 분리된 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 염증질환은 관절염, 비염, 간염, 각막염, 위염, 장염, 신장염, 기관지염, 흉막염, 복막염, 척추염, 췌장염, 염증성 통증, 요도염, 방광염, 화상 염증, 피부염, 치주염, 치은염 및 퇴행성 신경염증으로 구성되는 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 하기 특성 중 어느 하나 이상을 가지는 것을 특징으로 하는 약학 조성물:
    1) 산화질소(NO) 및 프로스타글란딘 E2(PGE2)의 생성 억제;
    2) 유도성 산화질소 효소(inducible nitric oxide synthase; iNOS) 및 시클로옥시게나아제-2(COX-2)의 발현 억제;
    3) IL-1β, IL-6 및 TNF-α의 발현 억제;
    4) IκB-α(inhibitor kappa B-α)의 인산화 및 분해 억제; 및
    5) NF-κB(nuclear factor kappa B)의 활성화 억제.
  5. 제1항에 있어서, 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  6. 하기 화학식 2a 내지 2d 및 화학식 3 내지 4로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나의 커뷰라린(curvularin) 유형의 대사체를 유효성분으로 함유하는 염증질환 예방 또는 개선용 식품:

    [화학식 2a 내지 2d]
    Figure 112019023627284-pat00024


    [화학식 3]
    Figure 112019023627284-pat00018


    [화학식 4]
    Figure 112019023627284-pat00019


    여기서, 상기 화학식 2a 내지 2d의 R1 및 R2는 각각 독립적으로 H, OH 또는 OCH3임.
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