KR101952576B1 - 항균력을 갖는 콘택트렌즈용 식염수 및 이의 제조방법 - Google Patents
항균력을 갖는 콘택트렌즈용 식염수 및 이의 제조방법 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 감초의 성분인 천연물질의 글리시리진산 암모늄염을 유효성분으로 제조되는 항균력을 갖는 콘택트렌즈용 식염수 및 이의 제조방법에 관한 것으로 보다 상세하게는 정제수 1000g, 염화나트륨 5~10g, 붕산 1~5g, 붕사 0.01~0.2g을 혼합하여 제1혼합물을 생성하는 제1단계와 상기의 제1혼합물 99.9~99.99중량%에 2mM의 글리시리진산 암모늄염 0.01~0.1중량%를 넣고 30분간 300rpm으로 교반하는 제2단계와 상기의 제2단계가 완료된 후 글리시리진산 암모늄염 농도에 따른 세균 항균력을 검사하는 검사단계인 제3단계의 제조방법으로 구성되어 항생제처럼 내성을 지니지 않아 부작용이 나타나지 않고 각막 손상 및 결막에 자극이 거의 없으며 낮은 농도로도 세균과 진균에 대한 높은 항균력을 갖는 효과가 있는 항균력을 갖는 콘택트렌즈용 식염수 및 이의 제조방법에 관한 것이다.
Description
본 발명은 항균력을 갖는 콘택트렌즈용 식염수 및 이의 제조방법에 관한 것으로 보다 상세하게는 감초의 성분인 천연물질의 글리시리진산 암모늄염을 유효성분으로 하여 콘택트렌즈를 세척 및 보관하는 항균력을 갖는 콘택트렌즈용 식염수 및 이의 제조방법에 관한 것이다.
일반적으로, 생리식염수는 오래전부터 콘택트렌즈를 살균하고 세정하는데 사용되어왔다. 시판 중인 생리 식염수는 보존제, 비보존제, 분무형, 다회형 및 일회용 등으로 세분화 할 수 있고, 주로 콘택트렌즈를 헹구는 역할로 사용되며 콘택트렌즈를 살균하기에는 부족하다. 또한, 보존제 생리식염수는 첨가된 화학물질로 인한 부작용이 발생할 수 있고 비보존제 생리식염수는 미생물의 오염을 걱정할 필요가 있다. 연구에 따르면 시판 중인 생리식염수를 사용하는 동안 미생물 오염이 흔히 일어나며 보존제가 첨가된 다회용 생리식염수에서도 세균이 오염되는 것을 관찰할 수 있었다.
콘택트렌즈는 안구와 직접 접촉하기 때문에 착용자가 잘못 착용하거나 관리를 소홀히 할 경우 각막염, 각막궤양, 각막찰과상 등과 같은 감염의 원인이 될 수 있다. 이렇게 잘못 관리된 콘택트렌즈의 착용으로 발생하는 각막염은 세균, 진균, 바이러스, 가시아메바 등으로 다양하다. 그 중 포도상구균과 녹농균에 의한 세균각막염의 빈도가 가장 높으며 이러한 오염으로부터 콘택트렌즈를 세척하고 보존하기 위한 다목적 콘택트렌즈 보존액이 개발되고 있다.
대한민국 공개특허 특1999-0074047호에서는 폴록사민1107과 염산폴리헥사메칠렌비구아니드 및 히드록시프로필메칠 셀룰로오스를 함유하는 콘택트렌즈 세척, 소독 및 보존제의 조성물로 강한 세척력을 갖는 합성 보존제를 개시하고 있으며, 대한민국 등록특허 제10-1605145호에서도 역시 폴리아미노프로필비구아니드 또는 그의 수용성 염과 소르빈산칼륨 및 정제수를 조성물로 한 합성 보존제를 개시하고 있다.
그러나 비구아니드는 각막상피세포의 손상을 일으키고 세포 생존율을 낮추며, 각막과 결막 건조증 환자의 경우 장기간 사용시에 눈에 독성을 일으키는 것으로 알려져있으며, 항균효과를 나타내는 0.00002 내지 0.00005% 농도에서 각막 조직에 영향을 줄 수 있는 것으로 보고되고 있다. 더욱이 기존의 항균제가 안고 있는 가장 큰 한계점인 내성문제가 해결되지 않았다.
따라서 균 오염으로 인한 콘택트렌즈의 감염을 막는 새로운 항균 성분의 활용이 필요하다.
상술한 바와 같은 문제점을 해결하기 위하여, 본원발명에서는 천연물질인 감초 성분의 글리시리진산 암모늄염을 적용하여 세균에 대한 항균력을 갖으며 각막 손상 및 결막 자극에 유해도가 낮은 항균력을 갖는 콘택트렌즈용 식염수 및 이의 제조방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
목적을 달성하기 위한 구성으로는 항균력을 갖는 콘택트렌즈용 식염수 및 이의 제조방법에 있어서 정제수 1000g, 염화나트륨 5~10g, 붕산 1~5g, 붕사 0.01~0.2g을 혼합하여 제1혼합물(A)을 생성하는 제1단계(S10)와 상기의 제1혼합물(A) 99.9~99.99중량%에 2mM의 글리시리진산 암모늄염 0.01~0.1중량%를 넣고 30분간 300rpm으로 교반하는 제2단계(S20)와 상기의 제2단계(S20)가 완료된 후 글리시리진산 암모늄염 농도에 따른 세균 항균력을 검사하는 검사단계인 제3단계(S30)의 제조방법으로 구성된다.
본 발명의 다른 특징으로는 제3단계(S30)는 PP재질의 1.5ml 튜브에 1.0×104 cfu/mL의 희석균 1mL를 넣고 13,500 rpm으로 1분간 원심분리한 후 상층액을 제거하는 제 3-1단계(S31)와 침전물 상태의 균에 1mM의 글리시리진산 암모늄염 용액 1mL를 넣고 잘 섞어 1시간 동안 노출시킨 후 다시 13,500rpm으로 1분간 원심분리하는 제 3-2단계(S32)와 다시 상층액을 제거하고 침전물 상태의 균에 PBS희석액 1mL를 넣고 잘 섞어 배지에 100㎕를 뿌려 도말한 후 30~40℃에서 15~25시간 동안 뒤집어서 배양하는 제3-3단계(S33)와 멸균된 플레이트에 1.0×105 cfu/ml의 포도상구균을 10㎕씩 놓은 후 PBS(Phosphate buffer saline)에 washing 후 배지에 균을 흡착시키는 제3-4단계(S34)와 상기의 제1혼합물(A)에 글리시리진산 암모늄염을 각각 0.001mM, 0.01mM, 0.1mM, 1mM, 2mM 넣고 혼합한 용액을 상기의 배지에 흡착된 균에 각각 도포하는 제3-5(S35)의 항균력 검사 단계로 제조되는 것을 특징으로 하는 항균력을 가지는 콘택트렌즈의 제조방법으로 구성된다.
본 발명의 또 다른 특징으로는 상기의 제1단계(S10)의 제1혼합물(A)은 ph가 7~8이며, 삼투압이 250~350mOsm 사이인 것을 특징으로 하는 항균력을 갖는 콘택트렌즈용 식염수의 제조방법으로 구성되는 것을 특징으로 하며, 상기의 방법으로 제조되는 항균력을 갖는 콘택트렌즈용 식염수를 제공하는 것을 특징으로 한다.
상기한 바와 같이, 본 발명에 따른 항균력을 갖는 콘택트렌즈용 식염수 및 이의 제조방법은 항산화, 항바이러스, 항궤양, 항암성 작용 등 약리학적 특성을 가진 감초의 천연 추출물인 글리시리진산 암모늄염의 항균활성에 의해 기존에 사용된 콘택트렌즈 보존액에 비하여 안전한 천연의 콘택트렌즈용 식염수를 제공하는 효과가 있다.
또한, 항생제처럼 내성을 지니지 않아 부작용이 나타나지 않고 각막 손상 및 결막에 자극이 거의 없으며 낮은 농도로도 세균과 진균에 대한 높은 항균력을 갖는 효과가 있다.
도 1은 본 발명에 따른 항균력을 갖는 콘택트렌즈용 식염수 제조방법의 순서도.
도 2는 본 발명에 항균력을 갖는 콘택트렌즈용 식염수 제조방법의 검사단계의 순서도.
도 2는 본 발명에 항균력을 갖는 콘택트렌즈용 식염수 제조방법의 검사단계의 순서도.
도 1은 도 1은 본 발명에 따른 항균력을 갖는 콘택트렌즈용 식염수 제조방법의 순서도이고, 도 2는 본 발명에 항균력을 갖는 콘택트렌즈용 식염수 제조방법의 검사단계의 순서도로서 이를 참고하여 본원발명의 상세 구성을 설명하면 하기와 같다.
항균력을 갖는 콘택트렌즈용 식염수 및 이의 제조방법에 있어서 정제수 1000g, 염화나트륨 5~10g, 붕산 1~5g, 붕사 0.01~0.2g을 혼합하여 제1혼합물(A)을 생성하는 제1단계(S10)와 상기의 제1혼합물(A) 99.9~99.99중량%에 2mM의 글리시리진산 암모늄염 0.01~0.1중량%를 넣고 30분간 300rpm으로 교반하는 제2단계(S20)와 상기의 제2단계(S20)가 완료된 후 글리시리진산 암모늄염 농도에 따른 세균 항균력을 검사하는 검사단계인 제3단계(S30)의 제조방법으로 구성된다.
제1단계(S10)의 제1혼합물(A)은 ph가 7~8이며, 삼투압이 250~350mOsm 사이인 것을 특징으로 하는 항균력을 갖는 콘택트렌즈용 식염수의 제조방법으로 구성되는 것을 특징으로 하며, 상기의 방법으로 제조되는 항균력을 갖는 콘택트렌즈용 식염수를 제공하는 것을 특징으로 한다.
상기의 글리시리진산 암모늄염은 감초의 성분으로 항산화, 항바이러스, 항균성, 항궤양, 항암성 작용 등 약리학적 특성을 가졌으며, 기존에 사용된 콘택트렌즈 보존액에 비하여 안전한 천연 성분이 함유된 콘택트렌즈용 식염수를 제공하며, 렌즈에 부착된 세균 및 진균에 흡착하여 항균활성을 띈다. 또한, 항생제처럼 내성을 지니지 않아 부작용이 나타나지 않고 각막 손상 및 결막에 자극이 거의 없으며 낮은 농도로도 세균과 진균에 대한 높은 항균력을 갖는 효과가 있다. 또한, 감초는 20개의 트리테르페노이드와 약 300여 개의 플라보노이드가 포함되어 있으며, 이 가운데 Glycyrrhizin(GL), 18β-Glycyrrhetinic acid(GA), liquiritigenin(LTG), licochal-cone A(LCA), licochal-cone E(LCE), glabridin(GLD)이 주요한 성분이며 이 성분들에서만 항바이러스성과 항균성이 나타난다.
상기의 항균력을 검사하는 검사단계인 제3단계(S30)는 PP재질의 튜브에 1.0×104 cfu/mL의 희석균 1mL를 넣고 13,500 rpm으로 1분간 원심분리한 후 상층액을 제거하는 제3-1단계(S31)와 침전물 상태의 균에 상기의 제1혼합물(A) 99.9~99.99중량%에 0.001mM, 0.01mM, 0.1mM, 1mM, 2mM의 글리시리진산 암모늄염 0.01~0.1중량%를 각각 넣고 30분간 300rpm으로 교반한 용액 1mL를 각각 넣어 1시간 동안 노출시킨 후 다시 13,500rpm으로 1분간 원심분리하는 제3-2단계(S32)와 다시 상층액을 제거하고 침전물 상태의 균에 PBS희석액 1mL를 넣고 잘 섞어 배지에 100㎕를 뿌려 도말한 후 30~40℃에서 18~24시간 동안 뒤집어서 배양하는 제3-3단계(S33)와 멸균된 플레이트에 제3-3단계(S33)에서 배양한 1.0×105 cfu/ml의 균을 10㎕씩 놓은 후 PBS(Phosphate buffer saline)에 washing 후 배지에 균을 흡착시키는 제3-4단계(S34)와 배지에 흡착된 균의 콜로니 수를 확인하는 제3-5단계(S35)로 구성된다.
상기의 희석균은 배지 전체 부피의 0.08 % 만큼 bacto agar(Beston Dickinson and company, USA)를 넣어 semi agar를 만들고, 이 semi agar를 유리튜브에 각각 5 ml 씩 넣어 멸균시켰다. 배양하기 위해 균을 루프를 이용하여 심어주었고 배양조건에 맞추어 희석균을 배양하였다.
배양하기 전 각 균의 배지와 전체 부피 200mL 당 3g의 Bacto Agar를 증류수와 섞어 0.1Mpa에서 110~130˚의 증기로 고온 고압 멸균하였다.
<표 1>
상기의 표 1은 상기의 제3단계(S30)의 글리시리진산 암모늄염 농도에 따른 세균 항균력 검사 결과로서 이를 참고하여 살펴보면, 제1혼합물(A) 99.9~99.99중량%에 2mM의 글리시리진산 암모늄염 0.01~0.1중량%를 혼합하였을 때 세균 및 진균의 콜로니 수가 0에 수렴하는 것을 확인하였으며, 상기의 결과를 보면 99.9~99.99중량%의 제1혼합물(A)에 2mM의 글리시리진산 암모늄염 0.01~0.1중량%가 혼합된 식염수가 항균활성에서 우수한 것을 확인할 수 있었다.
본 발명은 특정의 실시 예 및 적용 예와 관련하여 도시 및 설명하였지만, 첨부된 특허청구범위에 의해 나타난 발명의 사상 및 영역으로부터 벗어나지 않는 한도 내에서 다양한 개조 및 변화 가능하다는 것을 당 업계에서 통상의 지식을 가진 자라면 누구나 쉽게 알 수 있을 것이다.
S10. 제 1단계 S20. 제 2단계
S30. 제 3단계 S31. 제 3-1단계
S32. 제 3-2단계 S33. 제 3-3단계
S34. 제 3-4단계 S35. 제 3-5단계
A. 제1 혼합물
S30. 제 3단계 S31. 제 3-1단계
S32. 제 3-2단계 S33. 제 3-3단계
S34. 제 3-4단계 S35. 제 3-5단계
A. 제1 혼합물
Claims (4)
- 항균력을 갖는 콘택트렌즈용 식염수의 제조방법에 있어서,
정제수 1000g, 염화나트륨 5~10g, 붕산 1~5g, 붕사 0.01~0.2g을 혼합하여 제1혼합물(A)을 생성하는 제1단계(S10);와
상기에 제1혼합물(A) 99.9~99.99중량%에 2mM의 글리시리진산 암모늄염 0.01~0.1중량%를 넣고 30분간 300rpm으로 교반하는 제2단계(S20);와
상기의 제2단계(S20)가 완료된 후 글리시리진산 암모늄염 농도에 따른 세균 항균력을 검사하는 검사단계인 제3단계(S30);와
상기의 제3단계(S30)가 완료된 후 PP재질의 튜브에 1.0×104 cfu/mL의 희석균 1mL를 넣고 13,500 rpm으로 1분간 원심분리한 후 상층액을 제거하는 제3-1단계(S31);로 구성되되,
상기의 제1혼합물(A) 99.9~99.99중량%에 0.001mM, 0.01mM, 0.1mM, 1mM, 2mM의 글리시리진산 암모늄염 0.01~0.1중량%를 각각 넣고 30분간 300rpm으로 교반한 용액을 침전물 상태의 균에 1mL씩 각각 넣어 1시간 동안 노출시킨 후 다시 13,500rpm으로 1분간 원심분리하는 제3-2단계(S32);와
다시 상층액을 제거하고 침전물 상태의 균에 PBS희석액 1mL를 넣고 잘 섞어 배지에 100㎕를 뿌려 도말한 후 30~40℃에서 18~24시간 동안 뒤집어서 배양하는 제3-3단계(S33);와
멸균된 플레이트에 제3-3단계(S33)에서 배양한 1.0×105 cfu/ml의 균을 10㎕씩 놓은 후 PBS(Phosphate buffer saline)에 washing 후 배지에 균을 흡착시키는 제3-4단계(S34);와
배지에 흡착된 균의 콜로니 수를 확인하는 제3-5단계(S35);로 구성되고,
상기의 제1단계(S10)의 제1혼합물(A)은 ph가 7~8이며, 삼투압이 250~350mOsm 사이로 이루어지며,
상기 제3단계(S30)는 99.9~99.99중량%의 제1혼합물(A)에 2mM의 글리시리진산 암모늄염 0.01~0.1중량%를 혼합하였을 때 세균 및 진균의 콜로니 수가 0에 수렴하는 것을 특징으로 하는 항균력을 갖는 콘택트렌즈용 식염수의 제조방법. - 삭제
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- 제 1항의 제조방법으로 제조된 것을 특징으로 하는 항균력을 갖는 콘택트렌즈용 식염수.
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