KR101948661B1 - 대나무 숯을 이용하여 저온 숙성된 천녀목란 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 대나무 숯을 이용한 저온 숙성 공정을 통하여 천녀목란 추출물의 피부 미백 효과가 증진된 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 저온 숙성된 천녀목란 추출물은 종래의 천녀목란 용매 추출물 또는 종래의 용매 추출 후 저온 숙성과정을 거친 추출물보다 우수한 티로시나아제 생성억제, 멜라닌 감소효과, MITF 발현 감소효과를 가짐으로써 피부 미백 효과가 우수하다.

Description

대나무 숯을 이용하여 저온 숙성된 천녀목란 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물{COSMETIC COMPOSITION FOR SKIN WHITENING CONTAINING MAGNOLIA SIEBOLDII EXTRACT RIPENED AT LOW-TEMPERATURE USING BAMBOO CHARCOAL}

본 발명은 저온 숙성된 천녀목란 추출물을 유효성분으로 포함하는 미백용 화장료 조성물에 관한 것으로서, 구체적으로 대나무 숯을 이용한 저온 숙성 공정을 통하여 천녀목란 추출물의 피부 미백 효과가 증진된 화장료 조성물에 관한 것이다.

사람의 피부는 노화 과정에서 다양한 물리·화학적인 변화가 일어난다. 그 원인으로는 크게 내적인 노화(intrinsic aging)와 광노화(photo-aging)로 구분되며 이에 관한 연구가 활발히 이루어져 왔다. 자외선, 스트레스, 질병 상태, 환경 인자, 상처, 나이가 들어감에 따라 자유라디칼이 활성화되어 야기될 수 있으며, 이런 상태가 심화될 경우 생체 내에 존재하는 항산화 방어망을 파괴하고, 세포 및 조직을 손상시켜 성인병 및 노화를 촉진하게 된다. 좀 더 구체적으로 말하자면, 피부의 주요 구성 물질인 지질, 단백질, 다당류 및 핵산 등이 산화되어 피부 세포 및 조직이 파괴되고, 결국 피부 노화 현상이 생겨나는 것이다.

피부색을 결정하는 인자에는 기본적으로 인종과 지역, 성별, 나이에 따른 차이를 배제하면 기미, 주근깨와 자외선 노출로 인한 태닝과 같은 부분, 또는 전체적인 색소침착, 그 외에 여드름 및 흉터, 각질의 분포상태와 혈액순환, 스트레스, 건강상태 등이 있다. 이상의 인자들 가운데에서도 가장 중요한 인자는 색소침착이다. 피부색에 영향을 주는 색소로는 멜라닌, 카로틴, 헤모글로빈 등이 있는데 이중 가장 중요한 것은 멜라닌으로서, 이 멜라닌의 생합성에 영향을 미치는 가장 큰 요인은 자외선과 체내 호르몬 분비 정도이다. 멜라닌은 자외선을 흡수 또는 산란시켜 자외선으로부터 피부가 손상되는 것을 방지하는데 큰 역할을 하는데, 특별한 최대흡수파장이 없으며 전 영역의 빛을 흡수한다. 또한 활성 산소종을 제거하는 기능이 탁월하나, 때로는 멜라닌 자체가 활성산소를 발생시키기도 하며, 멜라닌 구조 내의 카테콜이나 퀴논에 의하여 다른 물질을 환원시키거나 산화시키고, 멜라닌 자체가 자유라디칼의 성질을 나타내기도 한다.

멜라닌의 생합성은 아미노산의 일종인 티로신이 멜라닌형성세포의 멜라노좀에서 티로시나아제에 의해 산화되어 디하이드록시 페닐알라닌(dihydroxy phenylalanine)으로 전환되는 것을 시작으로 계속되는 일련의 산화과정을 거쳐 갈색(pheoelanin), 흑색(eumelanin)의 중합체로 형성된다. 이러한 생합성 과정은 멜라노좀이라는 특수한 형태의 갈색 세포내 소기관에서 진행되며 멜라닌 과립을 포함한 멜라노좀은 핵 주변 부위에서 수지상 돌기 끝부분으로 이동, 각질세포의 식세포작용에 의해 세포질 내로 이동하고 이들은 각질세포의 핵 주변에 축적된다. 멜라닌의 합성과 멜라노좀의 수, 주위의 각질세포로의 이동은 부분적으로 호르몬과 자외선 등에 영향을 받고 일차적으로는 유전적인 영향을 크게 받는다. 그 밖에 티로시나아제의 발현 및 멜라닌의 합성, 전송에 관여하는 세포내 조절인자인 싸이토카인(cytokine), 구리, 아연, 철 등의 금속 이온 및 인터페론, 프로스타글란딘, 히스타민 등이 관여하는 것으로 알려져 있다.

최근, 나고야의정서의 발효에 따라, 자국의 천연물 자원 보호에 대한 인식이 증가하고 있다. 화장품 산업 내 천연물 수입원료의 비중은 약 70%이고 이는 곧 나고야의정서에 의해 발생되는 수익에 대한 이익공유가 이루어짐에 따라 상품의 생산 단가가 증가하고 이는 곧 소비자가의 증가를 초래하게 될 것이다.

한국등록특허 제10-0946582호는 천녀목란 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물을 개시하고 있다. 또한, 한국등록특허 제10-1710005호는 8가지 한약재 추출물을 포함하는 화장료 조성물을 개시하고 있다.

본 발명자는 천녀목란 추출물의 미백 효과를 증진시키기 위하여 추출공정 후 숙성과정에서 대나무 숯을 첨가하여 숙성시킴으로써 천녀목란(Magnolia Sieboldii) 추출물이 일반 천녀목란 추출물보다 티로시나아제 생성억제, 멜라닌 감소효과, MITF 발현 감소효과 등이 우수하여 미백 효과를 증진시키는 것을 발견하고 본 발명을 완성하였다.

본 발명은 대나무 숯을 이용하여 저온 숙성된 천녀목란 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물에 관한 것이다.

바람직하게는, 상기 화장료 조성물은 구기자, 인삼, 황기, 감초, 오미자, 황정, 백작약 및 지황을 포함하는 한약재 추출물을 추가로 포함한다.

바람직하게는, 상기 저온 숙성된 천녀목란 추출물은 화장료 조성물의 전체 중량에 대하여 0.001 내지 30 중량% 함유된다.

바람직하게는, 상기 저온 숙성된 천녀목란 추출물은 4℃ 내지 20℃의 온도에서 5일 내지 7일간 숙성된 것이다.

바람직하게는, 상기 저온 숙성된 천녀목란 추출물은 천녀목란의 꽃 및 가지로부터 추출한 것이다.

바람직하게는, 상기 저온 숙성된 천녀목란 추출물은 물, 탄소수 1-4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 에틸 아세테이트 및 부틸 아세테이트로 구성된 군으로부터 선택되는 추출용매로 추출된 것이다.

바람직하게는, 상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 젤, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖는다.

본 발명의 천녀목란(Magnolia Sieboldii) 추출물은 대나무 숯과 함께 저온 숙성시켜 획득한 추출물로서, 종래의 천녀목란 용매 추출물 또는 종래의 용매 추출 후 저온 숙성과정을 거친 추출물보다 우수한 티로시나아제 생성억제, 멜라닌 감소효과, MITF 발현 감소효과를 가짐으로써 피부 미백 효과가 우수하다.

도 1은 실험예 5에 따른 Fontana-Masson stain을 나타내는 도면이다.

본 발명에서 사용되는 모든 기술용어는, 달리 정의되지 않는 이상, 하기의 정의를 가지며 본 발명의 관련 분야에서 통상의 당업자가 일반적으로 이해하는 바와 같은 의미에 부합된다. 또한, 본 명세서에는 바람직한 방법이나 시료가 기재되나, 이와 유사하거나 동등한 것들도 본 발명의 범주에 포함된다. 본 명세서에 참고문헌으로 기재되는 모든 간행물의 내용은 본 발명에 도입된다. 용어 약이라는 것은 참조 양, 수준, 값, 수, 빈도, 퍼센트, 치수, 크기, 양, 중량 또는 길이에 대해 30, 25, 20, 15, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 또는 1% 정도로 변하는 양, 수준, 값, 수, 빈도, 퍼센트, 치수, 크기, 양, 중량 또는 길이를 의미한다.

본 명세서를 통해, 문맥에서 달리 필요하지 않으면, 포함하다 및 포함하는 이란 말은 제시된 단계 또는 구성요소, 또는 단계 또는 구성요소들의 군을 포함하나, 임의의 다른 단계 또는 구성요소, 또는 단계 또는 구성요소들의 군이 배제되지는 않음을 내포하는 것으로 이해하여야 한다.

본 발명은 대나무 숯을 이용하여 저온 숙성된 천녀목란 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물에 관한 것이다.

본 발명에 사용되는 천녀목란(Magnolia Sieboldii)은 함박꽃나무라고도 불리며, 목련과의 낙엽 활엽 소 교목으로서, 높이는 7미터 정도이며, 잎은 어긋나고 긴 타원형으로 광택이 난다. 5~6월에 흰색의 큰 꽃이 밑을 향해 피고 열매는 9월에 익는다. 주로 관상용으로 사용되며 깊은 산의 중턱 골짜기에서 자라며 함북을 제외한 한국 각지와 일본, 중국 등지에 분포한다.

본 발명의 대나무 숯을 이용하여 저온 숙성된 천녀목란 추출물은 통상적인 식물 추출법을 이용한 추출 공정 후 대나무 숯을 첨가하여 저온에서 숙성시킨 후 여과한 추출물을 의미한다. 즉, 통상적인 식물 추출법을 이용하여 추출된 추출물을 저온에서, 바람직하게는 4 내지 20℃의 온도에서 5일 내지 7일간 숙성시킨 것을 의미한다.

대나무 숯을 이용하여 저온 숙성하는 경우에는 대나무 숯의 다공을 통해 미세먼지 또는 유해 먼지 등을 흡착하여 불순물을 제거하고 상대적으로 효능 및 피부에 유용한 성분을 증가시킬 수 있다.

대나무 숯은 당해 기술분야에서 사용되는 대나무 숯의 제조방법으로 제조할 수도 있고, 시중에 유통되는 대나무 숯을 사용할 수도 있다.

본 발명에 따른 천녀목란(Magnolia Sieboldii)의 추출 방법은 당업계에 공지된 통상의 방법에 따라, 즉, 통상적인 온도와 압력의 조건하에서, 통상적인 용매를 사용하여 제조될 수 있으나, 바람직하게는 (a) 물, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올(예를 들면, 메탄올, 에탄올, 프로판올 및 부탄올), 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 글리세린, 아세톤, 디에틸에테르, 에틸 아세테이트, 부틸아세테이트, 디클로로메탄, 클로로포름, 헥산 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 용매를 이용한 용매 추출법 (b) 이산화탄소에 의한 감압 및 고온에 의한 초임계 추출법 또는 (c) 초음파 추출법을 이용하여 추출할 수 있다.

본 발명에서는 바람직하게는 추출 용매를 이용한 용매 추출법을 이용하였다. 본 발명에서 천녀목란(Magnolia Sieboldii) 추출물은 다양한 추출용매, 예를 들어, 물, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올(예를 들면, 메탄올, 에탄올, 프로판올 및 부탄올), 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 글리세린, 아세톤, 디에틸에테르, 에틸 아세테이트, 부틸아세테이트, 디클로로메탄, 클로로포름, 헥산 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 1종 이상의 추출 용매를 사용하여 얻을 수 있으며, 바람직하게는 에탄올, 70%(v/v) 에탄올 또는 물을 사용하여 얻어진 것이고, 가장 바람직하게는 70%(v/v) 에탄올을 사용하여 얻어진 것이다.

한편, 본 발명의 천녀목란 추출물은 상기한 추출 용매뿐만 아니라, 다른 추출 용매를 이용하여도 실질적으로 동일한 효과를 나타내는 추출물이 얻어질 수 있다는 것은 당업자에게 자명한 것이다.

또한, 본 발명의 천녀목란 추출물은 상술한 추출 용매에 의한 추출물뿐만 아니라, 통상적인 정제 및 발효 과정을 거친 추출물도 포함한다. 예컨대, 이산화탄소에 의한 감압, 고온에 의한 초임계추출법에 의한 추출, 초음파를 이용한 추출법에 의한 추출, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 이용한 분리, 다양한 크로마토그래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리하거나 자연 상태나 각종 미생물을 이용한 발효산물에 의한 추출물 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 및 추출방법을 통해 얻어진 활성 분획도 본 발명의 추출물에 포함된다.

본 발명에 따른 천녀목란 추출물은 발효과정을 거친 추출물도 포함하는 데 천녀목란의 발효추출물은 다음과 같이 제조할 수 있다. 천녀목란 전초, 바람직하게는 꽃과 가지를 100~500메쉬 정도로 미세하게 파쇄한 다음 통상적인 미생물 배양액을 1~50g/L를 첨가하고 효모 균주 또는 유산균등의 미생물을 10,000~100,000 cfu/L의 양으로 첨가한다. 배양온도는 30 내지 37℃의 통상적인 미생물 배양조건으로 배양한다. pH는 5~7로 호기적 또는 통상 혐기(anaerobic)적인 조건으로 약 5 내지 10일간 배양한다. 이후 저온 숙성 및 여과를 통해 얻을 수 있다.

본 발명에 따르면, 상기 저온 숙성된 천녀목란 추출물은 화장료 조성물의 전체 중량에 대해서 0.0001 ~ 30.0 중량% 함유될 수 있으며, 더욱 바람직하게는 상기 저온 숙성된 천녀목란 추출물은 화장료 조성물의 전체 중량에 대해서 0.01 ~ 10 중량% 함유되는 것을 특징으로 한다. 상기 추출물의 함량이 0.001 중량% 미만인 경우에는 피부개선 효과가 나타나지 않으며, 30.0 중량%를 초과하는 경우에는 함유량 증가에 대한 피부 개선 효과 증대 정도가 미미하며, 제형상의 안전 및 안정성에 문제가 있으며 경제적이지도 못하다.

또한, 본 발명은 구기자, 인삼, 황기, 감초, 오미자, 황정, 백작약 및 지황을 포함하는 한약재 추출물을 추가로 포함할 수 있다. 구기자, 인삼, 황기, 감초, 오미자, 황정, 백작약 및 지황의 8가지 한약재 성분은 본 발명에서 "천정팔진단"이란 용어로 간단하게 나타내었다. 천정팔진단과 관련해서는 본 출원인의 한국등록특허 제10-171005호에 기재된 내용을 모두 포함한다.

본 발명에 따른 천정팔진단 추출물은 상기 기재된 (a) 용매 추출법, (b) 이산화탄소에 의한 감압 및 고온에 의한 초임계 추출법, (c) 초음파 추출법을 이용하여 추출법 및 (d) 발효 추출법을 이용하여 추출된 한약재 추출물을 의미한다.

본 발명에 따른 천정팔진단 추출물은 화장료 조성물의 전체 중량에 대해서 0.0001 ~ 30.0 중량% 함유되며, 더욱 바람직하게는, 상기 천정팔진단 추출물은 화장료 조성물의 전체 중량에 대해서 0.01 ~ 10 중량% 함유될 수 있다. 상기 추출물의 함량이　0.0001 중량% 미만인 경우에는 피부 개선 효과가 나타나지 않으며, 30.0 중량%를 초과하는 경우에는 함유량 증가에 대한 피부 개선 효과 증대 정도가 미미하며, 제형상의 안전 및 안정성에 문제가 있으며 경제적이지도 못하다.

따라서, 본 발명에 따른 대나무 숯을 이용하여 저온 숙성된 천녀목란 추출물 및/또는 대나무 숯을 이용하여 저온 숙성된 천녀목란 추출물과 천정팔진단 추출물을 포함하는 화장료 조성물은 우수한 티로시나아제 생성억제, 멜라닌 감소효과, MITF 발현 감소효과를 갖아 미백용 화장료 조성물로 유용하다.

화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.

본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 팩, 마사지크림 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다. 본 발명의 제형이 계면활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물이 비누, 계면활성제 함유 클렌징 제형 또는 계면활성제 비함유 클렌징 제형일 경우, 피부에 도포한 후 닦아내거나 떼거나 물로 씻어낼 수도 있다. 구체적인 예로서, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누이며, 상기 계면활성제 함유 클렌징 제형은 클렌징 폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩이며, 상기 계면활성제 비함유 클렌징 제형은 클렌징크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔이며, 이에 한정되는 것은 아니다.

한편, 본 발명의 화장 방법은 본 발명의 화장료 조성물을 이용하는 모든 화장 방법을 일컫는다. 즉, 화장료 조성물을 이용하는 당업계에 공지된 모든 방법이 본 발명의 화장 방법에 속한다. 본 발명의 화장료 조성물은 단독 또는 중복하여 사용하거나, 본 발명 이외의 다른 화장료 조성물과 중복하여 사용할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 화장료 조성물은 통상적인 사용방법에 따라 사용될 수 있으며, 사용자의 피부 상태 또는 취향에 따라 그 사용횟수를 달리할 수 있다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다.

하기의 제조예는 상기에서 언급한 (a) 물, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올(예를 들면, 메탄올, 에탄올, 프로판올 및 부탄올), 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 글리세린, 아세톤, 디에틸에테르, 에틸 아세테이트, 부틸아세테이트, 디클로로메탄, 클로로포름, 헥산 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 용매를 이용한 용매 추출법 (b) 이산화탄소에 의한 감압 및 고온에 의한 초임계 추출법 또는 (c) 초음파 추출법, (d)발효공정을 이용하여도 실질적으로 동일한 효과를 나타내는 추출물을 얻어질 수 있다는 것은 당업자에게 자명한 사실이며, 하기에 언급한 제조예에 한정되는 것은 아니다.

제조예 1 - 천녀목란(Magnolia Sieboldii) 용매 추출물 제조

천녀목란의 꽃 및 가지를 포함하는 전초 200g을 깨끗한 물로 씻어 건조시킨 다음 일정한 크기로 절단하여 70%(V/V) 에탄올 수용액 1L로 5시간씩 3회 환류 추출하고 냉침한 후, 와트만(Whatman) #4 여과지로 여과하였다. 여과된 추출물을 50℃ 이하에서 감압농축 및 동결 건조하였다. 건조한 추출물 10.72g을 획득하였다.

제조예 2 - 천녀목란(Magnolia Sieboldii) 저온 숙성 추출물 제조

천녀목란의 꽃 및 가지를 포함하는 전초 200g을 깨끗한 물로 씻어 건조시킨 다음 일정한 크기로 절단하여 70%(V/V) 에탄올 수용액 1L로 5시간씩 3회 환류 추출하고 냉침한 후 저온(약 10℃)에서 5일간 숙성한 후, 와트만(Whatman) #4 여과지로 여과하였다. 여과된 추출물을 50℃ 이하에서 감압농축 및 동결 건조하였다. 저온 숙성 추출물 11.24g을 획득하였다.

제조예 3 - 천녀목란(Magnolia Sieboldii) 대나무 숯 저온 숙성 추출물 제조

천녀목란의 꽃 및 가지를 포함하는 전초 200g을 깨끗한 물로 씻어 건조시킨 다음 일정한 크기로 절단하여 70%(V/V) 에탄올 수용액 1L로 5시간씩 3회 환류 추출하고 냉침한 후 추출물 100 중량부에 대해 40 중량부의 대나무 숯을 첨가하여 저온(약 10℃)에서 5일간 숙성한 후, 와트만(Whatman) #4 여과지로 여과하였다. 여과된 추출물을 50℃ 이하에서 감압농축 및 동결 건조하였다. 저온 숙성 추출물 11.42g을 획득하였다.

제조예 4 - 천녀목란(Magnolia Sieboldii) 대나무 저온 숙성 추출물 제조

천녀목란의 꽃 및 가지를 포함하는 전초 200g을 깨끗한 물로 씻어 건조시킨 다음 일정한 크기로 절단하여 70%(V/V) 에탄올 수용액 1L로 5시간씩 3회 환류 추출하고 냉침한 후 추출물 100 중량부에 대해 40 중량부의 대나무를 첨가하여 저온(약 10℃)에서 5일간 숙성한 후, 와트만(Whatman) #4 여과지로 여과하였다. 여과된 추출물을 50℃ 이하에서 감압농축 및 동결 건조하였다. 저온 숙성 추출물 10.87g을 획득하였다.

제조예 5 - 천녀목란(Magnolia Sieboldii) 참나무 숯 저온 숙성 추출물 제조

천녀목란의 꽃 및 가지를 포함하는 전초 200g을 깨끗한 물로 씻어 건조시킨 다음 일정한 크기로 절단하여 70%(V/V) 에탄올 수용액 1L로 5시간씩 3회 환류 추출하고 냉침한 후 추출물 100 중량부에 대해 40 중량부의 참나무 숯을 첨가하여 저온(약 10℃)에서 5일간 숙성한 후, 와트만(Whatman) #4 여과지로 여과하였다. 여과된 추출물을 50℃ 이하에서 감압농축 및 동결 건조하였다. 저온 숙성 추출물 10.45g을 획득하였다.

제조예 6 - 천녀목란(Magnolia Sieboldii) 참나무 저온 숙성 추출물 제조

천녀목란의 꽃 및 가지를 포함하는 전초 200g을 깨끗한 물로 씻어 건조시킨 다음 일정한 크기로 절단하여 70%(V/V) 에탄올 수용액 1L로 5시간씩 3회 환류 추출하고 냉침한 후 추출물 100 중량부에 대해 40 중량부의 참나무를 첨가하여 저온(약 10℃)에서 5일간 숙성한 후, 와트만(Whatman) #4 여과지로 여과하였다. 여과된 추출물을 50℃ 이하에서 감압농축 및 동결 건조하였다. 저온 숙성 추출물 10.54g을 획득하였다.

제조예 7 - 천정팔진단 용매 추출물

제조예 7은 한국등록특허 제10-1710005호의 제조예 1과 동일하게 제조하여 얻었다. 구체적으로, 세절하여 음건한 8가지 약재- 구기자, 인삼, 황기, 감초, 오미자, 황정, 백작약, 지황 - 각각 50g을 혼합하여 70%(V/V) 에탄올 수용액으로 5시간씩 3회 환류 추출하고 냉침한 후, 와트만(Whatman) #4 여과지로 여과하였다. 여과된 각각의 추출물을 50℃ 이하에서 감압 농축 및 동결 건조하여 87.7g의 천정팔진단 용매 추출물을 얻었다.

실험예 1 - 저온 숙성된 천녀목란 추출물의 멜라닌 생성 저해 실험

B16F1 멜라닌 형성 세포를 6웰 플레이트에 각 웰당 2 X 10⁵ 농도로 분주하고 세포를 부착시킨 후 독성을 유발하지 않는 농도로 제조예 1 내지 7을 처리하여 72시간 동안 배양하였다. 72시간 배양 후 세포를 트립신-EDTA로 떼어낸 후 세포수를 측정한 다음 원심분리하여 세포를 회수하였다. 세포 내 멜라닌의 정량은 로탄(Lotan: Cancer Res., 40: 3345-3350, 1980)의 방법을 약간 변형하여 실시하였다. 셀 펠릿을 PBS로 1회 세척한 후 균질 화 버퍼액(50 mM 소듐 포스페이트, pH 6.8, 1% Triton X-100, 2 mM PMSF) 1ml를 첨가하여 5분간 와류하여 세포를 파쇄하였다. 원심분리(3,000 rpm, 10분)하여 얻은 세포 여액에 1N NaOH(10% DMSO)를 첨가하여 추출된 멜라닌을 용해시킨 후 마이크로 플레이트 판독기로 405 nm에서 멜라닌의 흡광도를 측정한 다음 멜라닌을 정량하여 시료의 멜라닌 생성 저해율(%)을 측정하였다. B16F1 멜라닌 형성 세포의 멜라닌 생성 저해율을 (%)은 하기 수학식 1에 의하여 계산하였으며, 그 결과를 표 1에 기재하였다.

A: 시료를 첨가하지 않은 웰의 멜라닌 양

B: 시료를 첨가한 웰의 멜라닌 양

처리 농도(ppm)	멜라닌 생성 억제율(%)
	제조예 1	제조예 2	제조예 3	제조예 4	제조예 5	제조예 6	제조예7
100	30.74%	35.21%	44.14%	40.51%	37.91%	40.72%	23.01%
50	21.09%	27.43%	37.72%	31.75%	29.64%	23.65%	9.74%
10	9.42%	13.54%	32.35%	17.70%	20.17%	11.34%	-

* 양성대조군 : 1% 알부틴 (60.41%)

상기 표 1에서 알 수 있는 바와 같이, 본 발명에 따라 대나무 숯을 이용하여 저온 숙성된 천녀목란 추출물(제조예 3)이 가장 우수한 멜라닌 생성 억제 효과를 나타내는 것을 알 수 있다.

또한, 본 발명에 따른 대나무 숯을 이용하여 저온 숙성된 천녀목란 추출물과 천정팔진단 용매 추출물을 함께 사용한 경우에 멜라닌 생성 억제 효과에 대하여 시너지 효과가 있는지 확인하기 위하여 50 ppm의 제조예 1 내지 6과 제조예 7(50 ppm 및 100 ppm)의 혼합물의 멜라닌 생성 억제율을 상기 방법과 동일한 방법으로 측정하였으며, 그 결과를 표 2에 나타내었다.

제조예 7 처리농도	멜라닌 생성 억제율(%)
	제조예 1 50 ppm	제조예 2 50 ppm	제조예 3 50 ppm	제조예 4 50 ppm	제조예 5 50 ppm	제조예 6 50 ppm
50ppm	37.12%	40.41%	57.75%	38.75%	33.59%	35.77%
100ppm	39.41%	35.74%	45.43%	42.15%	25.12%	31.09%

* 양성대조군 : 1% 알부틴 (60.41%)

상기 표 2에서 알 수 있는 바와 같이, 본 발명에 따른 대나무 숯을 이용하여 저온 숙성된 천녀목란 추출물(제조예 3)과 천정팔진단 용매 추출물(제조예 7)을 함께 사용한 경우에 멜라닌 생성 억제 효과가 가장 우수한 것을 알 수 있다.

실험예 2 - 티로시나아제 활성 억제 효과

B16F1 멜라닌 형성 세포를 배양하여 24 well plate에 각 웰당 세포를 1×10⁵ 농도로 분주하고 세포를 부착시킨 후 α-MSH(100nM)을 처리하고 독성을 유발하지 않는 농도로 제조예 1 내지 7을 처리하여 72시간 동안 배양하였다. 72시간 배양 후 각 웰을 PBS로 세척하였으며, 1% Triton X-100을 함유한 10mM PBS 100 ㎕에 현탁 시켰다. 현탁액을 볼텍싱(vortexing)한 후 1000 rpm에서 5 분간 원심 분리하여 상층액을 활성 효소액으로 사용하였다. 96 well plate에 이 효소액을 40 ㎕ 넣고 기질인 L-dopa(2 ㎎/㎖) 100 ㎕를 첨가하였다. 37℃에서 1 시간동안 반응을 진행시킨 뒤, 마이크로플레이트 리더(Molecular Devices, USA)를 이용하여 405 nm에서 흡광도를 측정하였다. B16F1 멜라닌 형성 세포의 티로시나아제 활성 억제율(%)은 대조군의 흡광도에 대한 백분율로 나타내었으며, 그 결과를 표 3에 기재하였다.

처리 농도(ppm)	티로시나아제 활성 억제율(%)
	제조예 1	제조예 2	제조예 3	제조예 4	제조예 5	제조예 6	제조예 7
100	34.71%	41.87%	61.07%	50.13%	51.75%	44.08%	19.12%
50	21.54%	26.13%	49.29%	31.78%	28.18%	25.73%	8.09%
10	7.10%	10.46%	37.81%	20.61%	19.37%	17.11%	-

상기 표 3에서 알 수 있는 바와 같이, 본 발명에 따라 대나무 숯을 이용하여 저온 숙성된 천녀목란 추출물(제조예 3)이 가장 우수한 티로시나아제 활성 억제 효과를 나타내는 것을 알 수 있다.

또한, 본 발명에 따른 대나무 숯을 이용하여 저온 숙성된 천녀목란 추출물과 천정팔진단 용매 추출물을 함께 사용한 경우에 티로시나아제 활성 억제 효과와 관련하여 시너지 효과가 있는지 확인하기 위하여 50 ppm의 제조예 1 내지 6과 제조예 7(50 ppm 및 100 ppm)의 혼합물의 티로시나아제 활성 억제율(%)을 상기 방법과 동일한 방법으로 측정하였으며, 그 결과를 표 4에 나타내었다.

제조예7 처리농도	티로시나아제 활성 억제율(%)
	제조예 1 50 ppm	제조예 2 50 ppm	제조예 3 50 ppm	제조예 4 50 ppm	제조예 5 50 ppm	제조예 6 50 ppm
50ppm	25.70%	30.23%	58.17%	34.15%	32.12%	31.44%
100ppm	36.14%	32.10%	60.83%	35.80%	28.91%	30.47%

상기 표 4에서 알 수 있는 바와 같이, 본 발명에 따른 대나무 숯을 이용하여 저온 숙성된 천녀목란 추출물(제조예 3)과 천정팔진단 용매 추출물(제조예 7)을 함께 사용한 경우에 티로시나아제 활성 억제 효과가 가장 우수한 것을 알 수 있다.

실험예 3 - MITF 활성 억제 효과

MITF(microphthalmia-associated transcription factor)는 멜라닌 세포에서 특이적으로 발현되는 단백질로 멜라닌 생성에 중요한 조절 인자이다. 피부 색소 침착은 멜라닌 세포가 산화효소에 의해 산화되어 검은색을 내는 유멜라닌(eumelanin)과 황색 또는 적색을 내는 페오멜라닌(pheomelanin)을 생성함으로써 발생한다.

B16F1 멜라닌 형성 세포를 배양하여 24 well plate에 각 웰당 세포를 3×10⁵ 농도로 분주하고 세포를 부착시킨 후 독성을 유발하지 않는 농도로 제조예 1 내지 7을 처리하여 72시간 동안 배양하였다. 배양된 세포를 모두 수거하여 lysis 버퍼(1× RIPA buffer 1 ㎖, 1 mM PMSF, 1 ㎍/㎖ aprotinin, 1 ㎍/㎖ leupeptin, 2 mM DTT)로 30분간 용해시킨 후, 13,000 rpm에서 30분간 원심 분리하여 상층액을 취하였다. 단백질은 Bradford 시약을 이용하여 정량하였고, 계산된 단백질과 2× 샘플 버퍼(1 ㎖ glycerol, 0.5 ㎖ β-mercaptoethanol, 3 ㎖ 10% SDS, 1.25 ㎖ 1 M Tris-HCl, 2 ㎍ bromophenol blue)를 동량으로 혼합한 후 총 단백질 40 ㎍을 10% SDS 폴리아크릴아마이드 겔에서 전기영동 하였다. 나이트로 섬유소막으로 전이시키고 5% non-fat skim milk로 블로킹시킨 후, MITF 항체를 1:1000으로 희석하여 각각 실온에서 1시간 30분 동안 반응시켰다. TBST 로 3회 세척한 후, 2차 항체를 1:3000으로 희석하여 실온에서 1시간 동안 반응시켰다. TBST로 세척한 후 ECL 용액으로 발색 후 Blot 스캐너를 이용하여 정량분석을 실시하여 아래의 표 5에 나타내었다.

처리 농도(ppm)	MITF 발현 억제효과(%)
	제조예 1	제조예 2	제조예 3	제조예 4	제조예 5	제조예 6	제조예 7
100	27.18%	35.11%	50.72%	38.12%	41.51%	45.63%	9.17%
50	4.49%	14.27%	29.07%	20.45%	23.62%	21.22%	-

또한, 본 발명에 따른 대나무 숯을 이용하여 저온 숙성된 천녀목란 추출물과 천정팔진단 용매 추출물을 함께 사용한 경우의 MITF 발현 억제 효과를 확인하기 위하여 50 ppm의 제조예 1 내지 6과 제조예 7(50 ppm 및 100 ppm)의 혼합물의 티로시나아제 활성 억제율(%)을 상기 방법과 동일한 방법으로 측정하였으며, 그 결과를 표 6에 나타내었다.

제조예7 처리농도	MITF 발현 억제효과(%)
	제조예 1 50 ppm	제조예 2 50 ppm	제조예 3 50 ppm	제조예 4 50 ppm	제조예 5 50 ppm	제조예 6 50 ppm
50ppm	5.03%	15.88%	45.71%	22.71%	23.31%	26.01%
100ppm	11.74%	17.09	57.09%	27.63%	25.74%	31.07%

상기 표 5에서 알 수 있는 바와 같이, 본 발명에 따른 대나무 숯을 이용하여 저온 숙성된 천녀목란 추출물(제조예 3)의 MITF 발현 억제효과가 우수하였다. 또한, 상기 표 6에서 알 수 있는 바와 같이, 본 발명에 따른 대나무 숯을 이용하여 저온 숙성된 천녀목란 추출물(제조예 3)과 천정팔진단 용매 추출물(제조예 7)을 함께 사용한 경우에 MITF 발현 억제 효과가 가장 우수한 것을 알 수 있다.

실험예 4 - 티로시나아제 단백질 발현양 측정

B16F1 멜라닌 형성 세포를 배양하여 24 well plate에 각 웰당 세포를 3×10⁵ 농도로 분주하고 세포를 부착시킨 후 독성을 유발하지 않는 농도로 제조예 1 내지 7을 처리하여 72시간 동안 배양하였다. 배양된 세포를 모두 수거하여 lysis 버퍼(1× RIPA buffer 1 ㎖, 1 mM PMSF, 1 ㎍/㎖ aprotinin, 1 ㎍/㎖ leupeptin, 2 mM DTT)로 30분간 용해시킨 후, 13,000 rpm에서 30분간 원심 분리하여 상층액을 취하였다. 단백질은 Bradford 시약을 이용하여 정량하였고, 계산된 단백질과 2× 샘플 버퍼(1 ㎖ glycerol, 0.5 ㎖ β-mercaptoethanol, 3 ㎖ 10% SDS, 1.25 ㎖ 1 M Tris-HCl, 2 ㎍ bromophenol blue)를 동량으로 혼합한 후 총 단백질 40 ㎍을 10% SDS 폴리아크릴아마이드 겔에서 전기영동 하였다. 나이트로 섬유소막으로 전이시키고 5% non-fat skim milk로 블로킹시킨 후, MITF 항체를 1:1000으로 희석하여 각각 실온에서 1시간 30분 동안 반응시켰다. TBST로 3회 세척한 후, 2차 항체를 1:3000으로 희석하여 실온에서 1시간 동안 반응시켰다. TBST로 세척한 후 ECL 용액으로 발색 후 Blot 스캐너를 이용하여 정량분석을 실시하여 아래의 표 7에 나타내었다.

처리 농도(ppm)	티로시나아제 단백질 발현억제효과(%)
	제조예 1	제조예 2	제조예 3	제조예 4	제조예 5	제조예 6	제조예 7
100	42.71%	45.01%	60.15%	53.71%	47.15%	49.36%	23.19%
50	25.89%	29.37%	48.49%	36.25%	31.06%	29.51%	9.74%

또한, 본 발명에 따른 대나무 숯을 이용하여 저온 숙성된 천녀목란 추출물과 천정팔진단 용매 추출물을 함께 사용한 경우의 MITF 발현 억제 효과를 확인하기 위하여 50 ppm의 제조예 1 내지 6과 제조예 7(50 ppm 및 100 ppm)의 혼합물의 티로시나아제 단백질 발현 억제 효과(%)을 상기 방법과 동일한 방법으로 측정하였으며, 그 결과를 표 8에 나타내었다.

제조예7 처리농도	티로시나아제 단백질 발현억제효과(%)
	제조예 1 50 ppm	제조예 2 50 ppm	제조예 3 50 ppm	제조예 4 50 ppm	제조예 5 50 ppm	제조예 6 50 ppm
50ppm	31.78%	30.07%	54.11%	39.18%	35.97%	33.91%
100ppm	35.19%	32.17%	67.48%	44.70%	37.19%	38.71%

상기 표 7에서 알 수 있는 바와 같이, 본 발명에 따른 대나무 숯을 이용하여 저온 숙성된 천녀목란 추출물(제조예 3)의 단백질 발현 억제 효과가 우수하였다. 또한, 상기 표 8에서 알 수 있는 바와 같이, 본 발명에 따른 대나무 숯을 이용하여 저온 숙성된 천녀목란 추출물(제조예 3)과 천정팔진단 용매 추출물(제조예 7)을 함께 사용한 경우에 단백질 발현 억제 효과가 가장 우수한 것을 알 수 있다.

상기 실험예 1 내지 4를 통하여 대나무 숯을 첨가하여 저온 숙성한 천녀목란 추출물의 미백 증진효과를 확인할 수 있다. 또한, 대나무 숯을 이용하여 저온 숙성된 천녀목란 추출물(제조예 3)과 천정팔진단 용매 추출물(제조예 7)을 혼합하여 사용한 경우에 미백과 관련하여 시너지 효과가 있음을 확인할 수 있다.

하기에 처방예는 제조예 3을 이용하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 하기의 처방예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 처방예에 의해 제한되지 않는다.

처방예 1 - 화장수

저온 숙성된 천녀목란 추출물을 함유한 화장료 중 화장수의 처방예는 다음 표 9와 같다.

(단위: 중량%)

성분	제형예 1	비교제형예 1
천녀목란 추출물(제조예 3) 글리세린 1.3-부틸렌글리콜 피이지1500 알란토인 DL-판테놀 EDTA-2Na 벤조페논-9 소듐 히아루로네이트 에탄올 옥틱도데세스-16 폴리솔베이트 20 방부제, 향, 색소 증류수	3.0 5.0 3.0 1.0 0.1 0.3 0.02 0.04 5.0 10.0 0.2 0.2 미량 잔량	- 5.0 3.0 1.0 0.1 0.3 0.02 0.04 5.0 10.0 0.2 0.2 미량 잔량
합계	100	100

처방예 2 - 에센스

저온 숙성된 천녀목란 추출물을 함유한 화장료 중 에센스의 처방예는 다음 표 10과 같다.

(단위: 중량%)

성분	제형예 2	비교제형예 2
천녀목란 추출물(제조예 3) 글리세린 베타인 피이지 1500 알란토인 DL-판테놀 이.디.티.에이-2Na 벤조페논 - 9 히드록시에칠 셀룰로오스 소듐히아루로네이트 카르복시비닐폴리머 트리에탄올아민 옥틸도데칸올 옥틸도데세스 -16 에탄올 방부제, 향, 색소 증류수	3.0 10.0 5.0 2.0 0.1 0.3 0.02 0.04 0.1 8.0 0.2 0.18 0.3 0.4 6.0 미량 잔량	- 10.0 5.0 2.0 0.1 0.3 0.02 0.04 0.1 8.0 0.2 0.18 0.3 0.4 6.0 미량 잔량
합계	100	100

처방예 3 - 크림

저온 숙성된 천녀목란 추출물을 함유한 화장료 중 크림의 처방예는 다음 표 11과 같다.

(단위: 중량%)

성분	제형예 3	제형예 4	비교제형예３
천녀목란 추출물 (제조예 3) 천정팔진단 추출물 (제조예 7) 친유형 모노스테아린산글리세린 세테아릴알콜 스테아린산 밀납 폴리솔베이트 60 솔비탄스테아레이트 경화식물유 스쿠알란 광물유 트리옥타노인 디메치콘 소듐마그네슘실리케이트 글리세린 베타인 트리에타올아민 소듐히아루로네이트 방부제, 향, 색소 증류수	3.0 - 2.0 2.2 1.5 1.0 1.5 0.6 1.0 3.0 5.0 5.0 1.0 0.1 5.0 3.0 1.0 4.0 미량 잔량 잔량	3.0 2.0 2.0 2.2 1.5 1.0 1.5 0.6 1.0 3.0 5.0 5.0 1.0 0.1 5.0 3.0 1.0 4.0 미량 잔량 잔량	- - 2.0 2.2 1.5 1.0 1.5 0.6 1.0 3.0 5.0 5.0 1.0 0.1 5.0 3.0 1.0 4.0 미량 잔량 잔량
합계	100	100	100

실험예 5 - 저온 숙성된 천녀목란 추출물을 함유하는 화장료 조성물의 멜라닌 감소효과

본 발명의 제조예 3의 대나무 숯을 이용하여 저온 숙성된 천녀목란 추출물을 함유하는 화장료 조성물의 피부미백효과를 분석하기 위하여 3D 인공피부 모델(Neoderm-ME, 테고사이언스(주))를 이용하여 멜라닌 감소효과를 확인하였다. Neoderm-ME(ME0144)는 테고사이언스㈜의 제조방법서에 따라 제조하였으며, 음성대조군과 양성대조군을 Neoderm-ME 표면 위로 well 당 100μl씩 처리하였다. 시험물질 중 크림 제형의 시험물질은 면봉을 이용하여 Neoderm-ME 표면 위로 well당 100 μg씩 처리하였다. CO₂ 인큐베이터(10% CO₂, 37℃)에서 48시간 배양 후 Neoderm-ME 표면 위에 남아있는 잔여 시험물질을 파이펫을 이용하여 제거하였다. 모든 군에 대하여 파라핀 블럭(paraffin block)을 제작한 후, 시험법에 따라 Fontana-Masson stain을 수행하였다. 염색 후 Image J 프로그램을 이용하여 멜라닌량 분석(Melanin content assay)을 실시하여 그 결과를 아래의 표 12 및 도 1에 나타내었다.

	Melanin(Area)	Melanin(%)	NC 대비 감소량(%)
무처리구	29329.3	100.0	-
양성대조군	15330.1	52.3	47.7
제형예3	23469.9	80.0	20.0
제형예4	20011.8	68.2	31.77

상기 표 12 및 도 1에서 알 수 있는 바와 같이, 본 발명에 따른 제형예 3 및 4는 멜라닌 감소효과가 우수하다.

실험예 6 - 저온 숙성된 천녀목란 추출물을 함유하는 화장료의 미백효과 실험

19 ~ 40세의 특히 피부가 검은 한국 여성 30명씩 두 그룹으로 하여 제형예 3의 크림 제형과 제형예 4의 크림 제형의 미백 효과 실험을 실시하였다. A 그룹의 여성 30명은 제형예 3의 크림 제형과 비교제형예 3의 크림 제형을 피검자의 얼굴 양쪽 면에 각각 사용하였다. Minolta CR 300을 사용하였으며 4주 동안 측정하였다. 실험 결과는 4주에 찍은 L 값과 0주에 찍은 L 값을 비교하였다. 또한 그룹 B의 여성은 제형예 4의 크림 제형과 비교제형예 3의 크림 제형을 피검자의 얼굴 양쪽 면에 각각 4주 동안 사용하여, 그룹 A와 같이 Minolta CR 300를 사용하여 L 값을 비교하였다.

실험 결과는 4주차에 찍은 L 값과 0주에 찍은 L 값을 비교하였으며 그 결과는 하기 표 13에 나타냈다.

구분	제형예3	제형예4	비교제형예 3
측정값(ㅿL)	0.374	0.442	0.218

상기 표 13에 나타난 바와 같이, 대나무 숯을 이용하여 저온 숙성된 천녀목란 추출물을 함유하는 크림(제형예 3)과 대나무 숯을 이용하여 저온 숙성된 천녀목란 추출물과 천정팔진단 추출물을 함유하는 크림 제형(제형예 4)이 이와 같은 성분을 포함하지 비교제형예 3의 크림 제형보다 우수한 미백 효과를 나타내었다.

Claims (7)

1. 대나무 숯을 이용하여 저온 숙성된 천녀목란 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물.
2. 제1항에 있어서,
   상기 화장료 조성물은 구기자, 인삼, 황기, 감초, 오미자, 황정, 백작약 및 지황을 포함하는 한약재 추출물을 추가로 포함하는, 피부 미백용 화장료 조성물.
3. 제1항 또는 제2항에 있어서,
   상기 저온 숙성된 천녀목란 추출물은 화장료 조성물의 전체 중량에 대하여 0.001 내지 30 중량% 함유되는 것인, 피부 미백용 화장료 조성물.
4. 제1항 또는 제2항에 있어서,
   상기 저온 숙성된 천녀목란 추출물은 4℃ 내지 20℃의 온도에서 5일 내지 7일간 숙성된 것인, 피부 미백용 화장료 조성물.
5. 제1항 또는 제2항에 있어서,
   상기 저온 숙성된 천녀목란 추출물은 천녀목란의 꽃 및 가지로부터 추출한 것인, 피부 미백용 화장료 조성물.
6. 제1항 또는 제2항에 있어서,
   상기 저온 숙성된 천녀목란 추출물은 물, 탄소수 1-4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 에틸 아세테이트 및 부틸 아세테이트로 구성된 군으로부터 선택되는 추출용매로 추출된 것인, 피부 미백용 화장료 조성물.
7. 제1항 또는 제2항에 있어서,
   상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 젤, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것을 특징으로 하는, 피부 미백용 화장료 조성물.

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