KR101918239B1 - 괭생이 모자반 가수분해물을 유효성분으로 함유하는 고혈압 예방 또는 치료용 약학적 조성물 - Google Patents
괭생이 모자반 가수분해물을 유효성분으로 함유하는 고혈압 예방 또는 치료용 약학적 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 괭생이 모자반 가수분해물을 함유하는 고혈압 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 천연원료인 괭생이 모자반에 효소를 처리함으로써 단백질 또는 당 가수분해 효소반응을 통해 제조한 괭생이 모자반 가수분해물을 함유하여, 독성 및 부작용 없이 인체에 안전하게 사용할 수 있는 고혈압 예방 또는 치료용 약학적 조성물로 응용할 수 있다.
Description
본 발명은 괭생이 모자반(Sargassum horneri) 가수분해물을 유효성분으로 함유하는 고혈압 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 천연원료인 괭생이 모자반에 효소를 처리함으로써 단백질 또는 당 가수분해 효소반응을 통해 제조한 괭생이 모자반 가수분해물을 함유하여, 독성 및 부작용 없이 인체에 안전하게 사용할 수 있는 고혈압 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 또는 고혈압 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제조하는 기술에 관한 것이다.
고혈압은 현대 성인병의 대표적 질환 중의 하나이며, 고혈압의 대부분을 차지하는 본태성 고혈압의 유발원인에 대해서는 아직까지 정확히 규명되고 있지 않으나, 다음의 2가지 기작들에 의해 주로 발병되는 것으로 추측되고 있다.
첫 번째 기작은 교감신경계가 활성화되어 압-Na이뇨 관계(pressure-diuresis)에 변화를 초래함으로써 혈압이 상승하는 기작으로, 여기에는 레닌-안지오텐신 시스템(renin-angiotensin system)의 활성이 관여하는 것으로 알려져 있다(비특허문헌 1). 두 번째 기작은 Na 방출호르몬 및 Na 운반기전에 이상이 발생하여 Na의 방출이 원활하지 못하고, 그로 인하여 카테콜아민(catecholamine)이나 안지오텐신 II의 농도가 증가하여 신장의 원심세동맥이 수축되기 때문에 발생하는 것으로 보고되고 있다(비특허문헌 2). 이들 이외에도 세포막의 이상으로 Na와 Ca 농도가 증가하게 되어 동맥압이 상승되는 기작에 의해 고혈압 증상이 나타나는 것으로 알려져 있다.
한편, 안지오텐신 전환효소(angiotensin converting enzyme, Kininase II, peptidyldipeptide hydrolase, EC 3.4.15.1, 이하 편의상 'ACE'이라 함)는 불활성인 안지오텐신 I의 C-말단 디펩타이드(His-Leu)를 가수분해하여, 혈관벽 평활근 수축등의 작용을 가지는 안지오텐신 II로 전환시키기도 하고, 부신피질(adrenal cortex)에서의 알도스테론(aldosterone) 분비를 촉진함으로써 물과 Na의 방출을 억제하기도 한다. 또한 혈관 이완작용을 갖는 브라디키닌(bradykinin)을 분해하여 불활성화시키기도 한다(비특허문헌 3). 이러한 ACE의 활성은 고혈압의 원인이 되고 있다.
상기 이유로 ACE의 특이적 저해제는 인체에서 혈압을 조절하는데 유용하며 ACE 활성은 고혈압 발생과 밀접하게 관련되기 때문에, ACE 의 시험관 내 저해는 항고혈압 치료제를 스크리닝하는데 이용되어 왔다. 치료적 혈관 감압제, 예를 들면 captopril, enalapril, ramipril 등의 ACE 저해제로서 합성되었으나 이러한 약제의 사용으로 인한 부작용으로 미각 이상, 백혈구 감소, 혈관 부종, 간 기능 이상 등이 보고되고 있어 천연물질을 이용한 항고혈압 효과를 가지는 물질 탐색에 대한 요구가 계속되고 있는 상황이다(비특허문헌 4).
이와 같이 약물요법에 따른 부작용으로 인하여 식품소재를 이용한 항고혈압 천연물질에 대한 관심이 증가하는 추세이다. 우유, 달걀, 닭, 돼지고기, 소고기, 어류, 콩, 옥수수 및 미세조류 등의 가수분해물이 항고혈압 효능을 갖는 것으로 보고 연구가 되었다.
따라서, 본 발명자는 괭생이 모자반 가수분해물을 제조할 수 있으면, 이를 이용하여 독성 및 부작용 없이 안전하게 사용할 수 있는 고혈압 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 또는 고혈압 예방 또는 개선용 건강기능식품으로 응용할 수 있음에 착안하여 본 발명을 완성하기에 이르렀다.
비특허문헌 1. Genest, Jacques. Hypertension, Physiopathology and Treatment: Physiopathology and Treatment. McGraw-Hill Companies, 1983.
비특허문헌 2. Kurtz, Theodore W., Hamoudi A. Al-Bander, and R. Curtis Morris Jr. "Salt-sensitive essential hypertension in men." New England Journal of Medicine 317.17 (1987): 1043-1048.
비특허문헌 3. Hall, John E., H. Leland Mizelle, and Lori L. Woods. "The renin-angiotensin system and long-term regulation of arterial pressure." Journal of hypertension 4.4 (1986): 387-397.
비특허문헌 4. Handbook of hypertension: clinical pharmacology of antihypertensive drug. Elsevier, Amsterdam, Netherlands.(1984): 246-271, 1984
본 발명은 상기와 같은 문제점을 고려하여 안출된 것으로, 본 발명의 목적은 괭생이 모자반을 효소 처리함으로써 단백질 또는 당 가수분해 효소 반응을 통하여, 우수한 ACE 저해 활성을 보이며, 고혈압의 개선, 예방 또는 치료에 효과적일 뿐만 아니라, 천연소재로서 인체 안정성이 높은 고혈압 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 또는 고혈압 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공하고자 하는 것이다.
상기한 바와 같은 목적을 달성하기 위한 본 발명의 고혈압 예방 또는 치료용 약학적 조성물은 괭생이 모자반 가수분해물을 함유할 수 있다.
상기 가수분해물은 단백질 가수분해 효소 및/또는 당 가수분해 효소 처리된 것일 수 있다.
상기 단백질 가수분해 효소는 상기 단백질 가수분해 효소는 바실러스(Bacillus) 유래 프로테아제(protease)일 수 있다.
상기 바실러스 유래 프로테아제는 프로타멕스(protamex)일 수 있다.
상기 당 가수분해 효소는 트리코더마 레세이(Trichoderma reesei) 유래 셀룰라아제(cellulase)일 수 있다.
상기 트리코더마 레세이 유래 셀룰라아제는 셀루클라스트(celluclast)일 수 있다.
또한, 상기한 목적을 달성하기 위한 본 발명의 고혈압 예방 또는 개선용 건강기능식품은 괭생이 모자반 가수분해물을 함유할 수 있다.
또한, 본 발명은 괭생이 모자반, 단백질 가수분해 효소 및 증류수를 혼합하는 단계; 및 상기 혼합물을 30 내지 70 ℃에서 2 내지 8 시간 동안 교반하는 단계; 를 포함하는 괭생이 모자반 가수분해물의 제조방법을 제공할 수 있다.
또한, 본 발명은 괭생이 모자반, 당 가수분해 효소 및 완충액을 혼합하는 단계; 및 상기 혼합물을 30 내지 70 ℃에서 2 내지 8 시간 동안 교반하는 단계;를 포함하는 괭생이 모자반 가수분해물의 제조방법을 제공할 수 있다.
또한, 본 발명은 괭생이 모자반, 당 가수분해 효소, 단백질 가수분해 효소 및 완충액을 혼합하는 단계; 및 상기 혼합물을 30 내지 70 ℃에서 2 내지 8 시간 동안 교반하는 단계;를 포함하는 괭생이 모자반 가수분해물의 제조방법을 제공할 수 있다.
상기 완충액은 아세트산 완충액, 인산염 완충액 및 글리신-HCl 완충액 중에서 선택되는 1종 이상일 수 있다.
상기 완충액의 pH는 2.0 내지 8.0일 수 있다.
본 발명에 따르면, 괭생이 모자반을 효소 처리함으로써 단백질 또는 당 가수분해 효소 반응을 통하여, 우수한 ACE 저해 활성을 보이며, 고혈압의 개선, 예방 또는 치료에 효과적일 뿐만 아니라, 천연소재로서 인체 안정성이 높은 고혈압 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 또는 고혈압 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공할 수 있다.
도 1은 본 발명의 실시예 1 내지 3 및 비교예 1 내지 2로부터 제조된 가수분해물 및 추출물들의 안지오텐신 전환 효소(Angiotensin converting enzyme, ACE) 저해 활성을 나타낸 그래프이다.
본 발명은 천연원료인 괭생이 모자반 가수분해물을 제조하고, 이를 이용하여 독성 및 부작용 없이 인체에 안전하게 사용할 수 있는 고혈압 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 또는 고혈압 예방 또는 개선용 건강기능식품으로 응용하는 기술에 관한 것이다.
본 발명에서 "고혈압(hypertension)"은 정상 혈압보다 높게 즉, 수축기 혈압이 140mmHg 이상, 확장기 혈압이 90 mmHg 이상 지속적으로 유지되는 순환계 질환으로, 전세계적으로 총인구의 15%, 특히 65 세 이상의 고령 인구의 50%에서 발생하는 매우 중요한 심혈관계 질환이다. 고혈압은 심혈관계, 신장, 신경계 등 조직·장기에 손상을 일으키는 중요한 사망원인의 하나이다. 고혈압의 원인은 매우 다양하여, 그 원인이 아직 밝혀지지 않는 본태성 고혈압이 전체 고혈압 환자의 90∼95%를 차지하고 있으며, 당뇨병, 신장질환, 약물복용 등의 원인으로 제이차적으로 발생하는 고혈압이 나머지 5%를 차지한다. 치료 방법 역시 그 원인별, 고혈압의 정도, 환자의 연령, 치료 수락에 따라 매우 다양하다.
혈압은 심장의 혈액 박출량(Cardiac output)과 말초혈관의 저항(Periphenal vascular resistance)에 의해서 결정된다. 따라서 이들 두 인자를 저하시킬 수 있는 약물들을 사용하여 고혈압을 전통적으로 치료해 왔다. 예로 이뇨제(Thiazides) 또는 교감 신경계 억제 물질(α,β-Adrenergic antagonists; Clonidine, Prazocin)들을 사용해 왔다. 근래에는 고혈압 치료제로서 강력한 혈관수축 물질인 안지오텐신II(angiotensin II)의 생리적 작용을 억제하는 안지오텐신 수용체 길항제(angiotensin receptorblocker) 또는 불활성 상태의 안지오텐신 I을 활성형인 안지오텐신 II로 전환시키는 안지오텐신 전환 효소(angiotensin coverting enzyme)의 작용을 억제하는 약물 등이 항고혈압제로 많이 사용되고 있는 추세이다.
고혈압과 같은 만성질환자를 살펴보면, 여러가지 유전적, 환경적 혹은 어떤 질병의 이차적인 원인에 의해서 혈관평활근세포내의 Ca2+ 농도가 지속적으로 정상치보다 높은 수치를 나타내며, 그 결과 혈관평활근의 수축을 유발시켜 말초혈관의 저항이 증가되어, 이로 인해 혈압이 정상혈압보다 상승된 상태로 지속적으로 유지되어 고혈압이 초래된다. 이와 같이 상승된 혈압은 이차적으로 혈관평활근세포와 섬유조직의 증식과 비대를 초래하고 그 결과, 말초 혈관 저항과 혈압을 더욱 증가시켜, 심·혈관계, 뇌 및 신장 등의 장기 기능을 저해시켜 심근경색, 협심증, 중풍 및 만선 심부전증 등으로 사망에 이르게 한다고 알려져 있다(Cowley, A.W.Jr. Physiol. Rev. 72:231-300, 1992).
특히, 본 발명에 따른 괭생이 모자반 가수분해물은 안지오텐신 전환 효소의 활성을 억제하는 효과를 갖음으로써 고혈압 질환을 예방, 치료 또는 개선하는 효과를 갖을 수 있다.
이하에서, 본 발명의 여러 측면 및 다양한 구현예에 대해 더욱 구체적으로 설명한다.
본 발명의 고혈압 예방 또는 치료용 약학적 조성물은 괭생이 모자반 가수분해물을 함유할 수 있다.
상기 괭생이 모자반은 갈조식물 모자반목 모자반과의 해조로서, 암초의 바다 밑에서 자라는 여러해살이이다. 길이는 3~5 m이고, 헛뿌리는 쟁반 모양이며 중심에서 원기둥 모양의 줄기가 나오고 곁가지를 친다. 줄기의 가운데와 윗부분은 원기둥 모양이고 미끈하지만 밑부분과 가지에는 가시가 있고, 잎은 긴 타원 모양이거나 줄 모양이며 가장자리가 깃꼴로 갈라진다. 공기주머니는 원기둥 모양이며 길이 10∼14 mm, 지름 2∼2.5 mm이고 짧은 자루가 있으며, 생식기탁(生殖器托)은 원기둥 모양이고 작은가지에 생기며 암수딴그루이다. 또한, 점심대(漸深帶) 윗부분의 바위 위에서 자라고 썰물 때 몸의 끝부분이 물 위에 떠다닌고, 사료로 쓰거나 식하며, 한국(남해안) 및 일본에 분포한다.
상기 가수분해물은 단백질 가수분해 효소 및/또는 당 가수분해 효소 처리된 것일 수 있다.
상기 단백질 가수분해 효소는 상기 단백질 가수분해 효소는 바실러스(Bacillus) 유래 프로테아제(protease)일 수 있다.
상기 바실러스 유래 프로테아제는 프로타멕스(protamex)일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 당 가수분해 효소는 트리코더마 레세이(Trichoderma reesei) 유래 셀룰라아제(cellulase)일 수 있다.
상기 트리코더마 레세이 유래 셀룰라아제는 셀루클라스트(celluclast)일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 괭생이 모자반 가수분해물은 0.001 내지 20 mg/ml의 농도로 사용되는데, 농도가 상기 하한치 미만인 경우에는 안지오텐신 전환 효소의 활성 억제효과를 기대할 수 없으며, 상기 상한치 초과인 경우에는 독성을 유발할 수 있다.
상기와 같이 제조된 괭생이 모자반 가수분해물은 가수분해물 자체로 이용하거나, 사용이 편리하도록 분말화하여 이용할 수 있다. 상기 가수분해물을 분말화하는 방법은 가수분해물을 감압 농축하여 부피를 줄인 후 동결건조, 분무건조 및 열풍건조로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종, 바람직하게는 동결건조하여 분말화한다.
본 발명의 괭생이 모자반 가수분해물을 유효성분으로 함유하는 고혈압 예방 또는 치료용 약학적 조성물은 괭생이 모자반 가수분해물을 약학적 조성물 총 중량을 기준으로 0.001 내지 20 중량%, 바람직하게는 0.01 내지 10 중량%로 포함한다.
상기 고혈압 예방 또는 치료용 약학적 조성물은 다양한 경구 또는 비경구 투여 형태로 제형화할 수 있다.
경구 투여용 제형으로는 예를 들면 정제, 환제, 경질, 연질 캅셀제, 액제, 현탁제, 유화제, 시럽제, 과립제 등이 있는데, 이들 제형은 유효성분 이외에 희석제(예: 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 만니톨, 솔비톨, 셀룰로즈 및/또는 글리신), 활택제(예: 실리카, 탈크, 스테아르산 및 그의 마그네슘 또는 칼슘염 및/ 또는 폴리에틸렌 글리콜)를 추가로 포함할 수 있다. 또한, 상기 정제는 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 전분 페이스트, 젤라틴, 트라가칸스, 메틸셀룰로즈, 나트륨 카복시메틸셀룰로즈 및/또는 폴리비닐피롤리딘과 같은 결합제를 함유할 수 있으며, 경우에 따라 전분, 한천, 알긴산 또는 그의 나트륨 염과 같은 붕해제 또는 비등 혼합물 및/또는 흡수제, 착색제, 향미제 및 감미제를 함유할 수 있다. 상기 제형은 통상적인 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 의해 제조될 수 있다.
또한, 비경구 투여용 제형의 대표적인 것은 주사용 제제이며, 주사용 제제의 용매로서 물, 링거액, 등장성 생리식염수 또는 현탁액을 들 수 있다. 상기 주사용 제제의 멸균 고정 오일은 용매 또는 현탁 매질로서 사용할 수 있으며 모노-, 디-글리세라이드를 포함하여 어떠한 무자극성 고정오일도 이러한 목적으로 사용될 수 있다. 또한, 상기 주사용 제제는 올레산과 같은 지방산을 사용할 수 있다.
본 발명의 괭생이 모자반 가수분해물을 유효성분으로 함유한 고혈압 예방 또는 치료용 약학적 조성물의 투여량은 환자의 연령, 성별, 체중, 질환의 중증도에 따라 달라지나, 본 발명의 약학 조성물은 환자의 무게 1 kg 당 300 mg 이하, 바람직하게는 100 내지 200 mg을 1 일 1 내지 4회 투여하나 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 본 발명의 괭생이 모자반 가수분해물을 유효성분으로 함유하는 고혈압 예방 또는 개선용 건강기능식품은 괭생이 모자반 가수분해물을 건강기능식품 총 중량을 기준으로 0.0001 내지 10 중량%로 함유한다.
상기 건강기능식품은 일상식사에서 부족할 수 있는 영양소를 보충하거나 인체에 유용한 기능성 원료를 보충할 목적으로 캡슐, 정제, 분말, 과립, 액상, 환, 편상, 페이스트상, 시럽, 겔, 젤리 및 바로 이루어진 군에서 선택되어 1회 섭취가 용이하게 제조 및 가동된 것이다.
또한, 상기 건강기능식품은 제형에 따라 포도당, 구연산, 액상 올리고당, 옥수수 시럽(corn syrup), 대두 레시틴, 버터, 식물성 경화류, 탈지우유, 설탕, 마가린, 식염, 전분, 밀가루, 물엿, 맥아당, 중조 및 당 에스테르 등의 통상적으로 사용되는 성분들을 이용하여 제조될 수 있다.
또한, 본 발명은 괭생이 모자반, 단백질 가수분해 효소 및 증류수를 혼합하는 단계; 및 상기 혼합물을 30 내지 70 ℃, 바람직하게는 40 내지 60 ℃에서 2 내지 8 시간, 바람직하게는 3 내지 5 시간 동안 교반하는 단계; 를 포함하는 괭생이 모자반 가수분해물의 제조방법을 제공할 수 있다.
또한, 본 발명은 괭생이 모자반, 당 가수분해 효소 및 완충액을 혼합하는 단계; 및 상기 혼합물을 30 내지 70 ℃, 바람직하게는 40 내지 60 ℃에서 2 내지 8 시간, 바람직하게는 3 내지 5 시간 동안 교반하는 단계;를 포함하는 괭생이 모자반 가수분해물의 제조방법을 제공할 수 있다.
또한, 본 발명은 괭생이 모자반, 당 가수분해 효소, 단백질 가수분해 효소 및 완충액을 혼합하는 단계; 및 상기 혼합물을 30 내지 70 ℃, 바람직하게는 40 내지 60 ℃에서 2 내지 8 시간, 바람직하게는 3 내지 5 시간 동안 교반하는 단계;를 포함하는 괭생이 모자반 가수분해물의 제조방법을 제공할 수 있다.
상기 완충액은 아세트산 완충액, 인산염 완충액 및 글리신-HCl 완충액 중에서 선택되는 1종 이상일 수 있으며, 바람직하게는 아세트산 완충액을 사용할 수 있다.
상기 완충액의 pH는 2.0 내지 8.0, 바람직하게는 pH 4.0 내지 6.0일 수 있다.
이하에서는 본 발명에 따른 제조예 및 실시예를 첨부된 도면과 함께 구체적으로 설명한다.
<실시예>
실시예 1: 괭생이 모자반 당 가수분해물의 제조
채취한 괭생이 모자반을 이물질 없이 잘 세척하고 1×1 cm2의 크기로 잘른 후, 괭생이 모자반 5 g에 당 가수분해 효소인 셀루클라스트(celluclast®, Novo Nordisk Co., Denmark) 100 μL가 첨가된 10 mM sodium acetate buffer(pH 5.0)를 250 mL 가하고, water bath에서 50 ℃, 4 시간 동안 100 rpm으로 교반하였다. 그후 부직포를 이용하여 괭생이 모자반을 1차로 거른 후 paper filter로 여과하여 여과액을 동결건조하여 괭생이 모자반 당 가수분해물을 제조하였다.
실시예 2: 괭생이 모자반 단백질 가수분해물의 제조
채취한 괭생이 모자반을 이물질 없이 잘 세척하고 1×1 cm2의 크기로 잘른 후, 괭생이 모자반 5 g에 단백질 분해 효소인 프로타멕스(protamex®, Novo Nordisk Co., Denmark) 100 mg이 첨가된 250 mL의 증류수를 가하여 water bath에서 50 ℃, 4 시간 동안 100 rpm으로 교반하였다. 그후 부직포를 이용하여 괭생이 모자반을 1차로 거른 후 paper filter로 여과하여 여과액을 동결건조하여 괭생이 모자반 단백질 가수분해물을 제조하였다.
실시예 3: 괭생이 모자반 당 및 단백질 가수분해물의 제조
상기 실시예 1과 동일하게 실시하되, 셀루클라스트 100 μL 대신 프로타멕스 50 mg 및 셀루클라스트 50 μL를 함께 첨가하여 괭생이 모자반 당 및 단백질 가수분해물을 제조하였다.
비교예 1: 괭생이 모자반 열수 추출물
채취한 괭생이 모자반을 이물질 없이 잘 세척하고 1×1 cm2의 크기로 잘른 후, 괭생이 모자반 5 g에 50 배의 증류수(250 mL)을 가하여 water bath에서 90 ℃, 2 시간 동안 100 rpm으로 교반하였다. 그후 부직포를 이용하여 괭생이 모자반을 1차로 거른 후 paper filter로 여과하여 여과액을 동결건조하여 괭생이 모자반 열수 추출물을 제조하였다.
비교예 2: 괭생이 모자반 50 부피% 에탄올 추출물
상기 비교예 1과 동일하게 실시하되, 증류수 대신 50 부피% 에탄올(250 mL)을 가하여 water bath에서 70℃, 2시간 동안 교반하여 괭생이 모자반 50 부피% 에탄올 추출물을 제조하였다.
<실험예>
실험예 1: 안지오텐신 전환 효소(Angiotensin converting enzyme, ACE) 저해 활성 평가
상기 실시예 1 내지 3 및 비교예 1 내지 2로부터 제조된 가수분해물 및 추출물들의 ACE 저해 활성을 평가하였다.
항고혈압능은 ACE kit (Enzo Life Sciences, Inc.,)를 사용하여 측정하였다. 먼저, 시료 20 μL와 기질 20 μL, enzyme working solution 20 μL 넣고 혼합 후 37 ℃에서 1 시간 동안 반응시킨 후, 반응액에 indicator working solution 200 μL를 넣고 실온에서 10 분간 반응 후 microplate reader를 사용하여 450 nm에서 흡광도를 측정하였다. 각 시료의 ACE 저해 활성은 하기 수학식 1을 이용하여 계산하였다.
[수학식 1]
도 1은 본 발명의 실시예 1 내지 3 및 비교예 1 내지 2로부터 제조된 가수분해물 및 추출물들의 안지오텐신 전환 효소(Angiotensin converting enzyme, ACE) 저해 활성을 나타낸 그래프이다.
상기 도 1을 참조하면, ACE 저해 활성은 당 및 단백질 가수분해물 > 단백질 가수분해물 > 당 가수분해물 > 열수 추출물 > 50 부피% 에탄올 추출물 순으로 나타나, 당 및 단백질 가수분해 효소를 모두 첨가하여 가수분해한 괭생이 모자반 당 및 단백질 가수분해물이 가장 높은 ACE 저해 활성을 나타냄을 확인하였다.
하기 표 1에는 본 발명의 실시예 1 내지 3 및 비교예 1 내지 2로부터 제조된 추출물들의 안지오텐신 전환 효소(Angiotensin converting enzyme, ACE)에 대한 저해 활성을 측정하여 50% 저해율을 보이는 농도(IC50 )를 나타내었다.
하기 표 1을 참조하면, ACE 저해 활성은 상기 도 1의 결과와 동일하게, 당 및 단백질 가수분해물 > 단백질 가수분해물 > 당 가수분해물 > 열수 추출물 > 50 부피% 에탄올 추출물 순으로 나타나, 당 및 단백질 가수분해 효소를 모두 첨가하여 가수분해한 괭생이 모자반 당 및 단백질 가수분해물이 가장 높은 ACE 저해 활성을 나타냄을 확인하였다.
| 시료명 | IC 50 (mg/mL) |
| 실시예 1 | 2.24 ± 0.1a |
| 실시예 2 | 2.24 ± 0.1a |
| 실시예 3 | 1.97 ± 0.1ab |
| 비교예 1 | 3.08 ± 0.2c |
| 비교예 2 | 2.41 ± 0.1b |
그러므로 본 발명에 따르면, 괭생이 모자반 가수분해물을 제공할 수 있으면, 이를 이용하여 독성 및 부작용 없이 안전하게 사용할 수 있는 항고혈압 조성로 응용할 수 있다.
하기에는 본 발명이 가수분해물을 함유하는 조성물의 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
제제예 1. 산제의 제조
실시예 1, 2 또는 3의 괭생이 모자반 당 및/또는 단백질 가수분해물 500 mg
유당 100 mg
탈크 10 mg
상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.
제제예 2. 정제의 제조
실시예 1, 2 또는 3의 괭생이 모자반 당 및/또는 단백질 가수분해물 300 mg
옥수수전분 100 mg
유당 100 mg
스테아린산 마그네슘 2 mg
상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.
제제예 3. 캅셀제의 제조
실시예 1, 2 또는 3의 괭생이 모자반 당 및/또는 단백질 가수분해물 200 mg
결정성 셀룰로오스 3 mg
락토오스 14.8 mg
마그네슘 스테아레이트 0.2 mg
통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.
제제예 4. 주사제의 제조
실시예 1, 2 또는 3의 괭생이 모자반 당 및/또는 단백질 가수분해물 600 mg
만니톨 180 mg
주사용 멸균 증류수 2974 mg
Na2HPO4,12H2O 26 mg
통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플 당 상기의 성분 함량으로 제조한다.
제제예 5. 액제의 제조
실시예 1, 2 또는 3의 괭생이 모자반 당 및/또는 단백질 가수분해물 4 g
이성화당 10 g
만니톨 5 g
정제수 적량
통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100g으로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조한다.
제제예 6. 과립제의 제조
실시예 1, 2 또는 3의 괭생이 모자반 당 및/또는 단백질 가수분해물 1,000 mg
비타민 혼합물 적량
비타민 A 아세테이트 70 ㎍
비타민 E 1.0 mg
비타민 B1 0.13 mg
비타민 B2 0.15 mg
비타민 B6 0.5 mg
비타민 B12 0.2 ㎍
비타민 C 10 mg
비오틴 10 ㎍
니코틴산아미드 1.7 mg
엽산 50 ㎍
판토텐산 칼슘 0.5 mg
무기질 혼합물 적량
황산제1철 1.75 mg
산화아연 0.82 mg
탄산마그네슘 25.3 mg
제1인산칼륨 15 mg
제2인산칼슘 55 mg
구연산칼륨 90 mg
탄산칼슘 100 mg
염화마그네슘 24.8 mg
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 과립제에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 과립제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강기능식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
제제예 7. 기능성 음료의 제조
실시예 1, 2 또는 3의 괭생이 모자반 당 및/또는 단백질 가수분해물 1,000 mg
구연산 1,000 mg
올리고당 100 g
매실농축액 2 g
타우린 1 g
정제수를 가하여 전체 900 mL
통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1 시간 동안 85 ℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2 L 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 기능성 음료 조성물 제조에 사용한다.
상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 수요계층, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.
Claims (12)
- 괭생이 모자반 가수분해물을 유효성분으로 함유하는 고혈압 예방 또는 치료용 약학적 조성물로서,
상기 가수분해물은 단백질 가수분해 효소 및 당 가수분해 효소, 또는 당 가수분해 효소로 처리된 것이고,
상기 당 가수분해 효소는 트리코더마 레세이(Trichoderma reesei) 유래 셀룰라아제(cellulase)인 것을 특징으로 하는 고혈압 예방 또는 치료용 약학적 조성물. - 삭제
- 제1항에 있어서,
상기 단백질 가수분해 효소는 바실러스(Bacillus) 유래 프로테아제(protease)인 것을 특징으로 하는 고혈압 예방 또는 치료용 약학적 조성물. - 제3항에 있어서,
상기 바실러스 유래 프로테아제는 프로타멕스(protamex)인 것을 특징으로 하는 고혈압 예방 또는 치료용 약학적 조성물. - 삭제
- 제1항에 있어서,
상기 트리코더마 레세이 유래 셀룰라아제는 셀루클라스트(celluclast)인 것을 특징으로 하는 고혈압 예방 또는 치료용 약학적 조성물. - 괭생이 모자반 가수분해물을 유효성분으로 함유하는 고혈압 예방 또는 개선용 건강기능식품으로서,
상기 가수분해물은 단백질 가수분해 효소 및 당 가수분해 효소, 또는 당 가수분해 효소로 처리된 것이고,
상기 당 가수분해 효소는 트리코더마 레세이(Trichoderma reesei) 유래 셀룰라아제(cellulase)인 것을 특징으로 하는 고혈압 예방 또는 개선용 건강기능식품. - 삭제
- 괭생이 모자반, 당 가수분해 효소 및 완충액을 혼합하는 단계; 및
상기 혼합물을 30 내지 70 ℃에서 2 내지 8 시간 동안 교반하는 단계;를 포함하는 괭생이 모자반 가수분해물의 제조방법으로서,
상기 당 가수분해 효소는 트리코더마 레세이(Trichoderma reesei) 유래 셀룰라아제(cellulase)인 것을 특징으로 하는 괭생이 모자반 가수분해물의 제조방법. - 괭생이 모자반, 당 가수분해 효소, 단백질 가수분해 효소 및 완충액을 혼합하는 단계; 및
상기 혼합물을 30 내지 70 ℃에서 2 내지 8 시간 동안 교반하는 단계;를 포함하는 괭생이 모자반 가수분해물의 제조방법으로서,
상기 당 가수분해 효소는 트리코더마 레세이(Trichoderma reesei) 유래 셀룰라아제(cellulase)인 것을 특징으로 하는 괭생이 모자반 가수분해물의 제조방법. - 제9항 또는 제10항에 있어서,
상기 완충액은 아세트산 완충액, 인산염 완충액 및 글리신-HCl 완충액 중에서 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 하는 괭생이 모자반 가수분해물의 제조방법. - 제11항에 있어서,
상기 완충액의 pH는 2.0 내지 8.0인 것을 특징으로 하는 괭생이 모자반 가수분해물의 제조방법.
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