KR102003934B1 - 넙치 유래의 펩타이드를 포함하는 항고혈압용 조성물 - Google Patents

넙치 유래의 펩타이드를 포함하는 항고혈압용 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR102003934B1
KR102003934B1 KR1020180023999A KR20180023999A KR102003934B1 KR 102003934 B1 KR102003934 B1 KR 102003934B1 KR 1020180023999 A KR1020180023999 A KR 1020180023999A KR 20180023999 A KR20180023999 A KR 20180023999A KR 102003934 B1 KR102003934 B1 KR 102003934B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
seq
hypertension
present
food
kda
Prior art date
Application number
KR1020180023999A
Other languages
English (en)
Inventor
고주영
이지혁
Original Assignee
제주대학교 산학협력단
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 제주대학교 산학협력단 filed Critical 제주대학교 산학협력단
Priority to KR1020180023999A priority Critical patent/KR102003934B1/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102003934B1 publication Critical patent/KR102003934B1/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
    • A23L33/18—Peptides; Protein hydrolysates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/56—Materials from animals other than mammals
    • A61K35/60—Fish, e.g. seahorses; Fish eggs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/01—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof
    • A61K38/012—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof from animals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/07—Tetrapeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00—Function of food ingredients
    • A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A23V2200/326—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having effect on cardiovascular health
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2250/00—Food ingredients
    • A23V2250/54—Proteins
    • A23V2250/542—Animal Protein
    • A23V2250/543—Fish protein
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2300/00—Processes
    • A23V2300/28—Hydrolysis, degree of hydrolysis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Marine Sciences & Fisheries (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

본 발명은 넙치(Paralichthys olivaceus) 근육의 가수분해물의 5 kDa 미만의 분획물에서 분리된 펩티드를 유효성분으로 포함하는, 고혈압 치료 또는 예방용 약학 조성물 또는 식품 조성물에 관한 것으로, 넙치(Paralichthys olivaceus) 근육의 가수분해물에서 분리된 펩티드가 안지오텐신 I 전환 효소 (Angiotensin I converting Enzyme, ACE) 저해 활성을 가지므로, 상기 넙치(Paralichthys olivaceus) 근육의 가수분해물의 분획물에서 분리된 펩티드들을 이용하여, 고혈압 치료 또는 예방용 약학 조성물 또는 식품 조성물에 사용할 수 있다.

Description

넙치 유래의 펩타이드를 포함하는 항고혈압용 조성물{Anti-hypertensive composition comprising peptides derived from Paralichthys olivaceus}
본 발명은 넙치(Paralichthys olivaceus) 근육의 가수분해물의 분획물에서 분리된 펩티드를 포함하는 고혈압 치료 또는 예방용 약학 조성물 또는 식품 조성물에 관한 것이다.
고혈압은 전 세계적으로 성인의 15~20%가 겪고 있는 만성 순환기계 질환 중 발생빈도가 가장 높은 질환으로 비교적 증상이 없는 편이지만, 높은 혈압으로 인해 정상적인 기능을 유지하던 기관들이 서서히 그 기능을 상실하여 뇌졸중, 심부전, 관상동맥질환 등 치명적인 합병증을 유발할 수 있기 때문에 보다 적극적이고 꾸준한 환자 관리와 치료가 요구되는 질환이다. 세계건강보건기구 (WHO)에서는 최고 혈압이 160 mmHg 이상이고 최저 혈압이 95 mmHg 이상인 경우를 고혈압으로 규정하고 있으며, 고혈압 질환의 종류로는 크게 원인이 불분명한 본태성 고혈압과 원인 질병에 의한 속발성 고혈압으로 구분되는데 이 중 90% 이상이 본태성 고혈압에 속하는 것으로 알려져 있으며, 전 세계적으로 약 6억명 이상의 사람들이 고혈압을 앓고 있으며, 이 고혈압 때문에 매년 3백만 명이 사망하고 있어 전 세계적인 과제로 떠오르고 있다.
생체 중에 존재하고 있는 불활성화 안지오텐신 I (Angiotensin I)은 안지오텐신 I 전환 효소 (Angiotensin I converting Enzyme, ACE)에 의하여 C-말단 His-Leu가 떨어져 나감으로써 혈관벽 수축 작용을 가지는 안지오텐신 II (Angiotensin II)로 전환되어 혈관을 수축하고, 신장에서 알도스테론의 분비를 증가시켜 체액량을 증가시킴으로써 혈압을 상승시키는 작용을 한다. 따라서 ACE의 활성을 억제시킴으로써 혈압상승의 원인이 되는 안지오텐신 II 생성 저하를 통해 혈압을 억제할 수 있다.
고혈압을 개선하기 위한 목적으로 에넬라프릴(enelapril)이나 라미프릴(Ramipril) 등의 ACE 저해제가 개발되어 상용되고 있으나 이러한 약제의 사용으로 인한 부작용으로 미각이상, 백혈구 감소, 혈관부종, 간기능 이상 등이 발견되었다.
따라서 천연물질로부터 항고혈압 효과를 가지는 연구에 대한 요구가 계속되었으며, 대두 단백질 가수분해물, 키토산, 밀크 카제인 등에서 분리된 ACE 저해제는 식품의약품안전처에 개별인정 기능성 식품으로 인정받았다.
생리활성 펩티드(Bioactive peptide)들은 다양한 단백질 가수분해효소를 통해 만들어질 수 있고, 천연물 유래의 펩티드들은 음식이 장내에서 소화되는 동안 신진대사 과정에서 잠재적인 생리적 조절자로 기능할 수 있다. 또한 구조, 조성, 아미노산 서열에 따라 항산화, 항균, 항고혈압 효능 등을 기대할 수 있다.
종래 화학 합성 방법 등을 통하여 제조되었던 고혈압 제제들이 부작용 등의 문제가 발생됨에 따라, 최근 세계 각국에서는 천연 물질로부터 항고혈압 효과를 갖는 물질을 얻기 위한 노력이 지속되고 있다. 또한, 각국에서는 의약품은 물론이고, 효소와 건강보조제와 같은 식품 소재 등 다양한 용도에 활용될 수 있는 새로운 물질을 탐색하기 위하여 자연 상태의 생물, 특히 대량 배양 및 번식이 용이한 생물에 대한 연구도 활발하게 진행하고 있다.
한편, 해양생물은 육상생물에 없는 특유의 대사과정과 독특한 환경으로 인하여 다양한 신규 생리활성물질의 탐색 기능성을 가지고 있다. 또한, 육상생물은 이미 많은 연구가 진행되었으나 해양생물은 아직 충분하게 연구되지 않아서 새로운 유용성을 가진 천연물질 개발에 대한 기대치가 높은 분야이기도 하다.
국내등록특허 제10-1150425호
본 발명의 목적은 서열번호 1 또는 서열번호 2로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 펩티드를 유효성분으로 포함하는, 고혈압 치료 또는 예방용 약학 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 서열번호 1 또는 서열번호 2로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 펩티드를 유효성분으로 포함하는, 고혈압 개선 또는 예방용 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명자는 가수분해 효소인 뉴트라제(neutrase)를 이용한 넙치(Paralichthys olivaceus) 근육의 가수분해물을 제조하였으며, 상기 가수분해물의 분획물에서 분리된 특정 아미노산 서열을 가지는 펩티드가 안지오텐신 I 전환 효소 (Angiotensin I converting Enzyme, ACE) 저해 활성이 있는 것을 확인하였다.
따라서, 상기 넙치(Paralichthys olivaceus) 근육의 가수분해물의 분획물에서 분리된 펩티드들을 이용하여, 고혈압 치료 또는 예방용 약학 조성물 또는 식품 조성물에 사용할 수 있음을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
상기 목적을 달성하기 위한 하나의 양태로서, 본 발명은 서열번호 1 또는 서열번호 2로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 펩티드를 유효성분으로 포함하는, 고혈압 치료 또는 예방용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명에서 서열번호 1 또는 서열번호 2로 표시되는 아미노산 서열은 Phe-L(FLLPPP) 또는 Asp-Val-Val-Phe (DVVF)로, 상기 고혈압 치료 또는 예방용 약학 조성물은 Phe-L(FLLPPP) 또는 Asp-Val-Val-Phe (DVVF)로 이루어진 펩티드를 유효성분으로 포함한다.
본 발명에서, 상기 약학 조성물은 서열번호 1 및 서열번호 2로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 펩티드를 모두 포함할 수 있다.
상기 펩티드는 넙치(Paralichthys olivaceus) 근육의 가수분해물에서 분리될 수 있으며, 상기 가수분해물은 뉴트라제(neutrase)의 가수분해물일 수 있다.
본 발명에서, 상기 펩티드는 넙치(Paralichthys olivaceus) 근육의 가수분해물의 5 kDa 미만의 분획물에서 분리될 수 있다.
본 발명의 일실시예에서는 넙치의 뉴트라제(neutrase) 가수분해물을 제조하였으며, 가수분해물을 >10 kDa(10 kDa 초과), 5-10 내지 kDa, <5 kDa(5 kDa 미만) 분자량별로 분리하였으며, <5 kDa(5 kDa 미만)의 분획물(fraction)에서 ACE(Angiotensin I converting Enzyme) 저해 효과를 보이는 IC50 값이 21.86 ㎍/ml로 가장 낮아서, 항고혈압 활성이 <5 kDa(5 kDa 미만)의 분획물(fraction)에서 가장 우수한 것을 확인하였다.
또한, 본 발명의 일실시예에서는 ACE 저해 효능이 가장 좋았던 <5 kDa(5 kDa 미만)의 분획물로 FPLC (Fast Protein Liquid Chromatography, AKTA START, GE Healthcare)를 실시하여 총 2개의 fractions을 얻었으며(F1, F2), 상기 2개의 fractions의 아미노산 서열을 확인하기 위해 펩티드들의 분자량 및 아미노산 서열을 Q-TOF mass spectrometer (Micromass, Altrincham, UK) electrospray ionization (ESI)을 사용하여 측정한 결과, 상기 펩티드의 아미노산 서열은 Phe-L(FLLPPP) 및 Asp-Val-Val-Phe (DVVF)으로 확인되었고, 분자량은 각각 683.44 Da, 479.29 Da으로 나타났다. 또한, 상기 Phe-Leu-Leu-Pro-Pro-Pro (FLLPPP) 및 Asp-Val-Val-Phe (DVVF) 펩티드의 ACE(Angiotensin I converting enzyme) 저해 효과를 평가한 결과, FLLPPP 서열의 펩티드가 ACE 저해 효능이 가장 높아 항고혈압 활성이 가장 우수한 것을 확인하였다. 상기 Phe-Leu-Leu-Pro-Pro-Pro (FLLPPP) 펩티드를 서열번호 1로 나타내었으며, 상기 Asp-Val-Val-Phe (DVVF) 펩티드를 서열번호 2로 나타내었다.
상기 ACE(Angiotensin I converting enzyme)는 데카펩티드(decapeptide)인 안지오텐신I으로부터 다이펩티드(dipeptide, His-Leu)를 절단함으로써 혈관 수축 작용을 갖는 안지오텐신Ⅱ로 전환시키는 역할을 하는 효소이다. 안지오텐신Ⅱ의 증가는 강한 혈압 상승 작용과 항이뇨 호르몬인 알도스테론(aldosterone)의 분비를 촉진하고 물과 나트륨의 배설을 억제하여 순환 혈액량을 증가시킴으로써 고혈압을 일으키게 한다. 또한 ACE는 혈관 이완 작용을 하는 브레디키닌(bradykinin)을 분해하여 불활성화시킴으로써 결과적으로 혈압 상승을 유발하는 역할을 한다.
본 발명에서 상기 넙치의 학명은 Paralichthys olivaceus이며, 몸길이는 60cm 가량이며, 모양은 위아래로 넓적한 긴 타원형이다. 입이 크고 이빨이 잘 발달되어 있으며, 눈은 몸의 왼쪽에 있다. 눈이 있는 쪽은 진한 황갈색 바탕에 흑색 및 백색 반점이 흩어져 있으나, 눈이 없는 쪽은 백색이다. 수심 10-200m 연안의 모래나 펄 지역에 서식하며, 2-6월에 산란한다. 우리나라 전 연안에 출현하며, 쿠릴 열도, 일본, 남중국해에 분포한다. 넙적한 체형 때문에 흔히 '광어'라고 부르며, 눈이 왼쪽에 있기 때문에 일반적으로 눈이 오른쪽에 있는 가자미류와 쉽게 구별된다.
본 발명의 용어 "고혈압(hypertension)"과 관련하여, 세계건강보건기구 (WHO)에서는 최고 혈압이 160 mmHg 이상이고 최저 혈압이 95 mmHg 이상인 경우를 고혈압으로 규정하고 있으며, 고혈압 질환의 종류로는 크게 원인이 불분명한 본태성 고혈압과 원인 질병에 의한 속발성 고혈압으로 구분되는데 이 중 90% 이상이 본태성 고혈압에 속하는 것으로 알려져 있다.
본 발명에서 사용되는 용어, "예방"이란, 본 발명에 따른 조성물을 개체에 투여하여 고혈압의 발병을 억제하거나 지연시키는 모든 행위를 의미할 수 있다. 본 발명에서 사용되는 용어, "치료"란, 본 발명의 상기 조성물을 고혈압 발병 의심 개체에 투여하여 고혈압에 의한 증세가 호전되도록 하거나 이롭게 되도록 하는 모든 행위를 의미할 수 있다.
또한 본 발명의 일실시예에서는 상기 넙치(Paralichthys olivaceus) 근육의 가수분해물의 분획물에서 분리된 서열번호 1과 2로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 펩티드들이 안지오텐신 I 전환 효소 (Angiotensin I converting Enzyme, ACE) 저해 활성을 가지는 것을 확인하여, 상기 펩티드들을 이용하여, 고혈압 치료 또는 예방용 약학 조성물에 사용할 수 있음을 확인하였다.
본 발명의 상기 펩티드들을 포함하는 약학 조성물은 약학 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형체 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있다. 이때, 상기 조성물에 포함되는 펩티드는 특별히 이에 제한되지 않으나, 조성물 총 중량에 대하여 0.001 중량% 내지 99 중량%로, 바람직하게는 0.01 중량% 내지 50 중량%를 포함할 수 있다.
상기 약학 조성물은 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결 건조제 및 좌제로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가질 수 있으며, 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다.
경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구투여를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여할 수 있다. 본 발명에서 용어, "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 개체 종류 및 중증도, 연령, 성별, 질병의 종류, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있다. 그리고 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 고혈압 치료를 목적으로 하는 개체이면 특별히 한정되지 않고, 어떠한 것이든 적용가능하다. 예를 들면, 원숭이, 개, 고양이, 토끼, 모르모트, 랫트, 마우스, 소, 양, 돼지, 염소 등과 같은 비인간동물, 인간, 조류 및 어류 등 어느 것이나 사용할 수 있으며, 상기 약학 조성물은 비 경구, 피하, 복강 내, 폐 내 및 비강 내로 투여될 수 있고, 국부적 치료를 위해, 필요하다면 병변 내 투여를 포함하는 적합한 방법에 의하여 투여될 수 있다. 본 발명의 상기 약학 조성물의 바람직한 투여량은 개체의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 예를 들어, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관 내 주사에 의해 투여될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
적합한 총 1일 사용량은 올바른 의학적 판단범위 내에서 처치의에 의해 결정될 수 있으며, 일반적으로 0.001 내지 1000 mg/kg의 양, 바람직하게는 0.05 내지 200 mg/kg, 보다 바람직하게는 0.1 내지 100 mg/kg의 양을 일일 1회 내지 수회로 나누어 투여할 수 있다.
다른 하나의 양태로서, 본 발명은 서열번호 1 또는 서열번호 2로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 펩티드를 유효성분으로 포함하는, 고혈압 개선 또는 예방용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명에서, 상기 식품 조성물은 서열번호 1 및 서열번호 2로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 펩티드를 모두 포함할 수 있다.
본 발명에서 서열번호 1 또는 서열번호 2로 표시되는 아미노산 서열은 Phe-L(FLLPPP) 또는 Asp-Val-Val-Phe (DVVF)로, 상기 고혈압 개선 또는 예방용 식품 조성물은 Phe-L(FLLPPP) 또는 Asp-Val-Val-Phe (DVVF)로 이루어진 펩티드를 유효성분으로 포함한다.
본 발명에서, 상기 펩티드와 고혈압, 넙치, 예방에 대해서는 전술한 바와 같다.
본 발명에서의 용어, "개선"은 상기 서열번호 1 또는 서열번호 2로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 펩티드를 이용하여 예방 또는 치료되는 고혈압과 같은 질환의 의심 및 발병 개체의 증상이 호전되거나 이롭게 되는 모든 행위를 말한다.
구체적으로, 본 발명의 상기 서열번호 1 또는 서열번호 2로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 펩티드를 고혈압의 예방 또는 개선을 목적으로 식품 조성물에 첨가할 수 있다.
본 발명의 식품 조성물은 환제, 분말, 과립, 침제, 정제, 캡슐 또는 액제 등의 형태를 포함할 수 있으며, 본 발명의 상기 펩티드들을 첨가할 수 있는 식품의 종류에는 별다른 제한이 없으며, 예를 들어 각종 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강보조 식품류 등이 있다.
상기 식품 조성물에는 상기 서열번호 1 또는 서열번호 2로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 펩티드 이외에도 다른 성분을 추가할 수 있으며, 그 종류는 특별히 제한되지 않는다. 예를 들어, 통상의 식품과 같이 여러 가지 생약 추출물, 식품학적으로 허용가능한 식품보조첨가제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있으며, 이에 제한되지 않는다.
본 발명에서 용어, "식품보조첨가제"란 식품에 보조적으로 첨가될 수 있는 구성요소를 의미하며, 각 제형의 건강기능식품을 제조하는데 첨가되는 것으로서 당업자가 적절히 선택하여 사용할 수 있다. 식품보조첨가제의 예로는 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 충진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등이 포함되지만, 상기 예들에 의해 본 발명의 식품보조첨가제의 종류가 제한되는 것은 아니다.
상기 천연 탄수화물의 예는 포도당, 과당 등의 단당류; 말토스, 수크로스 등의 이당류; 및 덱스트린, 시클로덱스트린 등의 다당류와, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이 있으며, 상기한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴 등), 스테비아 추출물(레바우디오시드 Ａ, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다.
본 발명의 식품 조성물에는 건강기능식품이 포함될 수 있는 바, 본 발명에서 상기 식품 조성물은 건강기능식품일 수 있다. 본 발명에서 사용된 용어 "건강기능식품"이란 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상 및 환 등의 형태로 제조 및 가공한 식품을 말한다. 여기서 기능성이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다. 본 발명의 건강기능식품은 당업계에서 통상적으로 사용되는 방법에 의하여 제조가능하며, 상기 제조시에는 당업계에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어날 수 있다.
유효성분의 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품의 제조 시에 본 발명의 상기 펩티드는 원료 조성물 중 1 내지 50 중량%, 바람직하게는 5 내지 10 중량%의 양으로 첨가될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하로도 사용될 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강기능식품을 모두 포함한다.
본 발명의 넙치(Paralichthys olivaceus) 근육의 가수분해물의 각 분자량별 분획물과 상기 분획물에서 분리된 펩티드는 안지오텐신 I 전환 효소 (Angiotensin I converting Enzyme, ACE) 저해 활성을 가지므로, 상기 넙치(Paralichthys olivaceus) 근육의 가수분해물의 분획물에서 분리된 펩티드들을 이용하여, 고혈압 치료 또는 예방용 약학 조성물 또는 식품 조성물에 사용할 수 있다.
도 1은 FPLC를 이용하여, 넙치 근육 가수분해물에서 2종의 분획물(fraction)을 분리한 결과를 나타낸다.
도 2는 넙치 근육 가수분해물의 분획물에서 분리된 Phe-Leu-Leu-Pro-Pro-Pro (FLLPPP) 서열의 펩티드와 분자량을 나타낸다.
도 3은 넙치 근육 가수분해물의 분획물에서 분리된 Asp-Val-Val-Phe (DVVF) 서열의 펩티드와 분자량을 나타낸다.
이하, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명의 실시예에 대하여 첨부한 도면을 참고로 하여 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다.
실시예 1. 넙치 근육의 가수분해물의 제조
본 발명에 사용된 재료는 제주도 수산시장에서 구입한 넙치(Paralichthys olivaceus)를 사용하였으며, 넙치 근육의 뼈를 발라내고 저미고(fillet) 수세 및 동결건조 후 균일하게 되도록 마쇄한 후 -70℃에 보관하면서 사용하였다.
넙치 근육의 가수분해물은 넙치 근육의 동결 건조물을 단백질 가수분해 효소 뉴트라제(neutrase)를 사용하여 기질 대 효소비 1000:1(중량비)로 18 시간 동안 가수분해하였다. 반응이 끝난 후에는 효소를 불활성화시키기 위해 100℃에서 10분간 끓이고, pH를 7.0으로 맞춰주었다. 3,500 rpm에서 20분간 원심분리하여 필터한 후에 동결건조하여 -70℃에 보관하면서 샘플로 사용하였다.
실시예 2: 넙치 근육의 가수분해물 유래 분자량별 분획물의 ACE 저해 활성
실시에 1에서 제조된 넙치 근육의 뉴트라제(neutrase) 가수분해물에서 ACE 저해 효과를 가지는 펩티드를 함유하는 분획물을 분리하고자 하였다. 이에, 한외여과막을 이용하여 실시에 1에서 제조된 넙치 근육의 뉴트라제 가수분해물을 >10 kDa(10 kDa 초과), 5-10 내지 kDa, <5 kDa(5 kDa 미만) 분자량별로 분리하였다.
표 1은 넙치 근육의 뉴트라제 가수분해물의 분자량별 분획물(fraction)에 따른 ACE(Angiotensin I converting Enzyme) 저해 효능을 평가하여 항고혈압 활성을 측정한 결과이다. 그 결과 <5 kDa(5 kDa 미만)의 fraction에서 ACE(Angiotensin I converting Enzyme) 저해 효과를 보이는 IC50 값이 21.86 ㎍/ml로 가장 낮아서 <5 kDa(5 kDa 미만)의 fraction에서 항고혈압 활성이 가장 우수한 것을 확인하였다.
분자량 수율 (%) 단백질 함량 (mg/g) ACE inhibition IC50 values (μg/mL)
Neutrase hydrolysate - 668.9±5.05d 33.93±1.50a
> 10 kDa 8.13±1.12a 75.1±1.09a 32.39±1.92a
5-10 kDa 9.86±1.84a 82.3±1.05b 30.53±1.89a
< 5 kDa 81.01±1.05b 495.4±3.33c 21.86±1.01b
실시예 3: 항고혈압 활성의 펩티드 분리 및 구조 분석
실시예 2에서 ACE 저해 효능이 가장 좋았던 <5 kDa(5 kDa 미만)의 분획물로 FPLC (Fast Protein Liquid Chromatography, AKTA START, GE Healthcare)를 실시하여 총 2개의 fractions을 얻었으며, 그 결과를 도 1에 나타내었다.
도 1은 FPLC를 이용하여, 넙치 근육 가수분해물에서 2종의 분획물(fraction)을 분리한 결과를 나타낸다.
2개의 Fractions의 아미노산 서열을 확인하기 위해 펩티드들의 분자량 및 아미노산 서열을 Q-TOF mass spectrometer (Micromass, Altrincham, UK) electrospray ionization (ESI)을 사용하여 측정하고 그 결과를 도 2와 3에 나타내었다. 상기 도 2 및 3을 참조하면, 상기 펩티드의 아미노산 서열은 Phe-L(FLLPPP) 및 Asp-Val-Val-Phe (DVVF)으로 확인되었고, 분자량은 각각 683.44 Da, 479.29 Da으로 나타났다.
실시예 4: ACE 저해 펩티드의 ACE 저해 효능 분석
상기 Phe-Leu-Leu-Pro-Pro-Pro (FLLPPP) 및 Asp-Val-Val-Phe (DVVF) 펩티드의 ACE(Angiotensin I converting enzyme) 저해 효과를 평가하고 그 결과를 표 2에 나타내었다. ACE 저해활성을 측정한 결과 FLLPPP 서열의 펩티드가 ACE 저해 효능이 가장 높아 항고혈압 활성이 가장 우수한 것을 확인하였다. 또한, FLLPPP의 경우, ACE(Angiotensin I converting Enzyme) 저해 효과를 보이는 IC50 값이 8.61 ㎍/ml, DVVF의 경우 70.53 ㎍/ml로 FLLPPP 서열의 펩티드가 ACE 저해효능이 가장 높음을 확인하였다.
분자량 ACE inhibition IC50 values (μg/mL)
< 5 kDa 33.93±1.50b
FLLPPP 8.61±0.94a
DVVF 70.53±1.74c
통계처리
실험결과는 3번 이상의 독립적인 실험의 데이터를 mean ± standard error (SE) 값으로 나타내었다. 실험군 사이의 통계적 유의성 검정은 Duncan test 분석방법을 사용하였다.
이상에서 본 발명의 바람직한 실시예에 대하여 상세하게 설명하였지만 본 발명의 권리범위는 이에 한정되는 것은 아니고 다음의 청구범위에서 정의하고 있는 본 발명의 기본 개념을 이용한 당업자의 여러 변형 및 개량 형태 또한 본 발명의 권리범위에 속하는 것이다.
<110> Jeju National University Industry-Academic Cooperation Foundation <120> Anti-hypertensive composition comprising peptides derived from Paralichthys olivaceus <130> DP20180050 <160> 2 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 6 <212> PRT <213> Paralichthys olivaceus <400> 1 Phe Leu Leu Pro Pro Pro 1 5 <210> 2 <211> 4 <212> PRT <213> Paralichthys olivaceus <400> 2 Asp Val Val Phe 1

Claims (8)

  1. 서열번호 1 또는 서열번호 2로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 펩티드를 유효성분으로 포함하는, 고혈압 치료 또는 예방용 약학 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 약학 조성물은 서열번호 1 및 서열번호 2로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 펩티드를 모두 포함하는 것인, 약학 조성물.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 펩티드는 넙치(Paralichthys olivaceus) 근육의 가수분해물에서 분리된 것인, 약학 조성물.
  4. 제3항에 있어서, 상기 가수분해물은 뉴트라제(neutrase)의 가수분해물인 것인, 약학 조성물.
  5. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 펩티드는 넙치(Paralichthys olivaceus) 근육의 가수분해물의 5 kDa 미만의 분획물에서 분리된 것인, 약학 조성물.
  6. 서열번호 1 또는 서열번호 2로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 펩티드를 유효성분으로 포함하는, 고혈압 개선 또는 예방용 식품 조성물.
  7. 제1항에 있어서, 상기 식품 조성물은 서열번호 1 및 서열번호 2로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 펩티드를 모두 포함하는 것인, 식품 조성물.
  8. 제6항에 있어서, 상기 식품 조성물은 건강기능식품인 것인, 식품 조성물.
KR1020180023999A 2018-02-27 2018-02-27 넙치 유래의 펩타이드를 포함하는 항고혈압용 조성물 KR102003934B1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020180023999A KR102003934B1 (ko) 2018-02-27 2018-02-27 넙치 유래의 펩타이드를 포함하는 항고혈압용 조성물

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020180023999A KR102003934B1 (ko) 2018-02-27 2018-02-27 넙치 유래의 펩타이드를 포함하는 항고혈압용 조성물

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR102003934B1 true KR102003934B1 (ko) 2019-07-26

Family

ID=67469705

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020180023999A KR102003934B1 (ko) 2018-02-27 2018-02-27 넙치 유래의 펩타이드를 포함하는 항고혈압용 조성물

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR102003934B1 (ko)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20210050188A (ko) * 2019-10-28 2021-05-07 제주대학교 산학협력단 광어 가수분해물 유래의 펩티드를 포함하는 항고혈압용 조성물

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101150425B1 (ko) 2011-09-26 2012-06-01 제주대학교 산학협력단 미더덕 유래의 혈압조절용 조성물

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101150425B1 (ko) 2011-09-26 2012-06-01 제주대학교 산학협력단 미더덕 유래의 혈압조절용 조성물

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Process Biochemistry. Vol. 51, No. 4, pp. 535-541 (2016) *
한국수산과학회 양식분과 학술대회, Vol. 2015, No. 5, p. 228 (2015) *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20210050188A (ko) * 2019-10-28 2021-05-07 제주대학교 산학협력단 광어 가수분해물 유래의 펩티드를 포함하는 항고혈압용 조성물
KR102253996B1 (ko) 2019-10-28 2021-05-20 제주대학교 산학협력단 광어 가수분해물 유래의 펩티드를 포함하는 항고혈압용 조성물

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101449804B1 (ko) 홍어 껍질 유래 젤라틴 추출물 및 상기 추출물로부터 분리한 펩타이드를 유효성분으로 포함하는 항고혈압 조성물
JP2004091464A (ja) 肥満抑制剤
KR102003934B1 (ko) 넙치 유래의 펩타이드를 포함하는 항고혈압용 조성물
KR20160141027A (ko) 아위버섯 물 추출물을 유효성분으로 함유하는 대사성질환의 예방 및 치료용 약학적 조성물 또는 건강기능성식품
KR101847452B1 (ko) 피조개 추출물을 유효성분으로 함유하는 항고혈압용 조성물
KR20160016280A (ko) 타히보 추출물 또는 인삼잎 추출물을 포함하는 면역 증강용 조성물
KR101883096B1 (ko) 쿠퍼펩타이드를 포함하는 급성 폐 손상 또는 급성 호흡곤란 증후군 예방 또는 치료용 약학 조성물
KR101991880B1 (ko) 고혈압 치료 또는 예방용 조성물
KR20140129492A (ko) 꾸지뽕나무 잎 추출물을 유효성분으로 포함하는 관절염의 예방 또는 치료용 조성물
KR100686260B1 (ko) 장구채 추출물을 포함하는 간 기능 개선 및 간질환 치료용 조성물
KR101408101B1 (ko) 헛개나무 추출물을 첨가한 표고버섯 균사체 흑미 배양액을 유효성분으로 함유하는 간기능 개선용 식품
KR101302652B1 (ko) 알파-글루코시다아제 저해물질 및 맥주효모를 포함하는 당뇨병의 예방 또는 치료용 약학 조성물
KR101961921B1 (ko) 넙치 유래의 항고혈압 펩타이드 및 이를 포함하는 항고혈압용 조성물
KR102014413B1 (ko) 피조개 추출물을 유효성분으로 함유하는 항비만용 조성물
KR102203626B1 (ko) 포스비틴 및 리소자임을 포함하는 면역증강용 약학적 조성물 및 건강기능식품
KR101404850B1 (ko) 클로렐라 유래 항고혈압 활성을 갖는 펩티드
KR102253996B1 (ko) 광어 가수분해물 유래의 펩티드를 포함하는 항고혈압용 조성물
KR102045847B1 (ko) 관능성 및 항당뇨 활성이 증대된 옥미수·호박 가미 경옥고
KR101490794B1 (ko) 젖색손등버섯의 알코올 추출물을 포함하는 고지혈증 치료 또는 예방용 조성물
KR101730073B1 (ko) 삼채를 유효성분으로 함유하는 감염성 질환 예방 및 치료용 조성물
KR101715996B1 (ko) 톳 추출물의 디클로로메탄 또는 에틸 아세테이트 분획물을 유효성분으로 함유하는 항당뇨 활성 조성물
KR101921214B1 (ko) 항고혈압 효과를 가지는 광어 연육 및 이의 제조방법
KR101904819B1 (ko) 여주와 마늘을 바실러스 아밀로리퀴페시언스 Jis-1로 발효한 추출물을 유효성분으로 하는 혈당강하 또는 당뇨병 예방 또는 치료용 조성물
KR20180047659A (ko) 구멍쇠미역 추출물을 유효성분으로 함유하는 동맥경화증의 예방 또는 치료용 약학 조성물
EP2992890A1 (en) Pharmaceutical composition

Legal Events

Date Code Title Description
GRNT Written decision to grant