KR101901133B1 - Cosmetic composition for skin anti-wrinkle comprising Heracleum moellendorffii extract as effective component - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 어수리 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition for improving skin wrinkles containing an aquatic extract as an active ingredient.
피부는 외부 자극으로부터 우리 몸을 보호해주는 인체 최전방의 방어 장기이며, 미적인 관점에서도 그 관심이 점점 높아지고 있다. 이에 따라 다양한 기능성 화장품에 대한 연구가 활발한데, 그 중에서도 주름완화 및 미백 기능에 대한 다양한 기능성 화장품들이 출시되고 있는 실정이다.Skin is the frontal defense body of the human body that protects our body from external stimuli, and its interest is increasing from an aesthetic point of view. Accordingly, various functional cosmetics have been actively researched. Among them, various functional cosmetics for wrinkle reduction and whitening function are being marketed.
주름의 생성 원인으로는 여러 가지가 보고되고 있는데, 우선 피부가 과다한 자외선에 노출되면 피부 구성성분인 콜라겐(collagen) 분해가 촉진되어 피부가 탄력을 잃고 주름이 생성될 수 있다. 또한, 피부가 과도한 온도변화 및 습도저하나 바람 등에 의해 지나치게 건조해지면 외부에 대한 방어벽으로서의 피부 기능이 저하되어 주름이 생기기도 한다. 그리고 피부가 활성 산소종이나 자유 라디칼에 노출되면 산화 작용에 의해 과산화 지질이 생성되고 그로 인해 콜라겐 등의 피부 구성 단백질이 변형되어 주름이 생성될 수 있다. 이러한 외부적 요인과 내부적 요인에 의한 주름 발생을 억제하고자 다양한 화장품 조성물이 연구되고 있다. 특히 화학성분이 함유된 기능성 화장품의 경우, 피부 자극을 유발하여 민감성 피부에 적합하지 않은 문제점이 있는바, 피부에 자극이 적고 친환경적인 천연 식물 유래의 기능성 화장품에 대한 관심이 집중되고 있다.Several causes of wrinkles have been reported. First, when the skin is exposed to excessive ultraviolet rays, collagen decomposition, which is a component of the skin, is accelerated, and the skin may lose elasticity and wrinkles may be formed. In addition, if the skin becomes excessively dry due to excessive temperature change, humidity reduction, wind or the like, skin function as a barrier against the outside may be deteriorated and wrinkles may occur. When the skin is exposed to reactive oxygen species or free radicals, lipid peroxidation is produced by the oxidative action, and skin texture proteins such as collagen may be deformed, resulting in wrinkles. Various cosmetic compositions have been studied to suppress wrinkles caused by external factors and internal factors. In particular, functional cosmetics containing chemical components cause skin irritation, which is not suitable for sensitive skin, and attention is focused on functional cosmetics derived from natural plants that are less irritating to skin and environmentally friendly.
한편, 어수리(Heracleum moellendorffii Hance)는 쌍떡잎식물 산형화목 미나리과의 여러해살이풀로, 분포지역은 한국, 중국 및 일본이다. 산과 들에서 자라고, 줄기는 곧게 서고 높이가 70∼150cm이며 속이 빈 원기둥 모양이고 세로로 줄이 있으며 거친 털이 있고 굵은 가지가 갈라진다. 잎은 어긋나고 3∼5개의 작은 잎으로 구성된 깃꼴겹잎(pinnately compound leaf)이며 털이 있고 줄기 위로 올라갈수록 잎자루가 짧아지며 밑 부분이 넓어 줄기를 감싼다. 끝에 달린 작은 잎은 심장 모양이고 3개로 갈라지며, 옆에 달린 작은 잎은 넓은 달걀 모양 또는 삼각형이고 길이가 7∼20cm이며 2∼3개로 갈라지고 가장자리에 깊이 패어 들어간 톱니가 있다. 꽃은 7∼8월에 흰색으로 피고 가지와 줄기 끝에 복산형 꽃차례를 이루며 달린다. 꽃차례는 20∼30개의 꽃자루가 다시 작은 꽃 자루로 갈라져서 각각 25∼30개의 꽃이 달린 모양이고, 가장자리에 달린 꽃이 가운데에 달린 꽃보다 크다. 꽃잎은 6개이고 크기가 서로 다른데, 바깥쪽의 꽃잎이 안쪽 꽃잎보다 크다. 열매는 분과(分果:분열과에서 갈라진 각 열매)이고 길이 7mm의 편평한 달걀을 거꾸로 세운 모양이며 윗부분에 독특한 무늬가 있다. 어린순을 나물로 먹으며, 한방에 있어서 한약의 약재로 주로 사용되며, 나물류의 식품으로도 이용되고 있다.On the other hand, eosuri (Heracleum moellendorffii Hance) is a perennial herbaceous herbaceous perennial herbaceous plant, distributed in Korea, China and Japan. It grows in mountains and fields, stems straight, 70-150cm high, hollow cylindrical, with vertical streaks, coarse hairs, and thick branches. It is a pinnately compound leaf composed of 3 to 5 leaves with alternate leaves. It has hairs. As it goes above the stem, the petiole becomes shorter and the lower part becomes wider and covers the stem. The small leaf attached to the end is heart-shaped and is divided into 3 pieces. The small leaf attached to the side is broad egg-shaped or triangular, 7-20cm long, split into 2-3 pieces, and there are sawteeth deeply pitted. The flowers bloom in July to August in white, and they run on the tips of branches and trunks in a double-inflorescence. The inflorescence is divided into 20 ~ 30 flower stalks again divided into small flower sacks, each with 25 ~ 30 flowers, and the flowers on the edge are larger than those in the middle. There are 6 petals and they are different in size. Outer petals are larger than inner petals. The fruit is a division (fruit divided from the division) and has a flat egg with a length of 7mm upside down and a unique pattern on the upper part. It is mainly used as herbal medicines in oriental medicine, and it is also used as food of herbs.
한편, 한국등록특허 제1313255호는 어수리의 잎으로부터 추출된 어수리 천연정유를 포함하는 향장 조성물을 개시하고 있으나, 본 발명의 어수리 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물에 대해 아직까지 개시된 바가 없다.On the other hand, Korean Patent No. 1313255 discloses a flame-retardant composition comprising an aquatic natural essential oil extracted from a leaf of an aquarium, but the cosmetic composition for improving skin wrinkles containing the aquatic extract of the present invention as an effective ingredient There is no bar.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명은 어수리 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물을 제공하고, 상기 유효성분인 어수리 추출물이 콜라겐 생성을 현저하게 증가시켜 피부 주름 개선 효능이 우수한 것을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.The present invention provides a cosmetic composition for improving skin wrinkles containing an aquatic extract as an active ingredient. The present invention provides a cosmetic composition for improving skin wrinkles, wherein the active ingredient, aquatic extract, significantly increases collagen production, And confirming that the improving effect is excellent, the present invention has been completed.
상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 어수리(Heracleum moellendorffii) 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물을 제공한다.In order to achieve the foregoing object, the present invention eosuri (Heracleum The present invention provides a cosmetic composition for improving skin wrinkles, which comprises, as an active ingredient, an extract of Mellendorffii .
본 발명의 어수리 추출물은 천연 유래 추출물이기 때문에 피부에 부작용을 일으키지 않는 안전한 특징이 있고, 콜라겐 생성량을 현저하게 증가시킴으로써 피부 주름 개선에 효과가 있으므로, 이를 유효성분으로 포함하는 본 발명의 조성물은 피부에 자극을 일으키지 않는 피부 주름 개선을 위한 기능성 화장품의 소재로 유용하게 사용될 수 있을 것이다.Since the aquatic extract of the present invention is a natural-derived extract, it has a safety feature that does not cause side effects to the skin and remarkably increases the amount of collagen production, thereby improving skin wrinkles. Therefore, the composition of the present invention, It can be usefully used as a functional cosmetic material for improving skin wrinkles which does not cause irritation.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 어수리 에탄올 추출물과 효소 종류별 처리, 초고압 균질화 처리 및 효소 처리 후 초고압 균질 병행 처리하여 제조한 각각의 어수리 추출물들의 피부 주름 개선 효능을 비교한 결과이다. CON은 아무것도 처리하지 않은 대조군이다.FIG. 1 is a graph comparing the efficacy of aquaculture extracts prepared according to an embodiment of the present invention on the skin wrinkle-reducing effect of each of the aquatic extracts prepared by treatment with different types of enzymes, ultra-high pressure homogenization treatment, and enzyme treatment and ultrahigh pressure homogeneous concurrent treatment. CON is a control group with no treatment.
본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 어수리(Osmunda japonica) 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물을 제공한다.According to an aspect of the invention, the invention is eosuri (Osmunda japonica ) extract as an active ingredient.
본 발명의 피부 주름 개선용 화장료 조성물에서, 상기 어수리 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합 용매를 이용하여 추출한 것일 수 있으며, 바람직하게는 에탄올을 이용하여 추출한 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.In the cosmetic composition for improving skin wrinkles of the present invention, the aquatic extract may be extracted with water, a lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms, or a mixed solvent thereof, preferably ethanol, It is not limited.
또한, 상기 어수리 추출물은In addition, the above-
1) 어수리 분말에 물을 첨가한 혼합물에 효소를 첨가한 후 가수분해하는 단계; 및1) adding an enzyme to a mixture of water of an aquatic powder and hydrolyzing the mixture; And
2) 상기 단계 2)의 가수분해물에 에탄올을 처리하는 단계;를 포함하여 추출한 것일 수 있으며,2) treating the hydrolyzate of step 2) with ethanol,
바람직하게는Preferably,
1) 어수리 분말에 pH 3.5~5.5로 조정된 물을 10~14배량(v/w) 첨가한 혼합물에 비스코자임(Viscozyme)을 첨가한 후 30~60℃에서 8~12시간 동안 가수분해하는 단계; 및1) adding Viscozyme to a mixture of 10- to 14-fold (v / w) of water adjusted to pH 3.5-5.5 in australia powder and hydrolyzing the mixture at 30 to 60 ° C for 8 to 12 hours ; And
2) 상기 단계 1)의 가수분해물에 100% 에탄올을 2~3배량(v/v) 첨가하여 20~30℃에서 1~3시간 동안 추출하는 단계;를 포함하여 추출한 것일 수 있으며,2) Extracting the hydrolyzate of step 1) by adding 2 to 3 times (v / v) 100% ethanol at 20 to 30 ° C for 1 to 3 hours,
더 바람직하게는More preferably,
1) 어수리 분말에 pH 4.5로 조정된 물을 13배량(v/w) 첨가한 혼합물에 비스코자임(Viscozyme)을 첨가한 후 50℃에서 10시간 동안 가수분해하는 단계; 및1) adding a viscozyme to a mixture of 13 times (v / w) of water adjusted to pH 4.5 in australia powder, and hydrolyzing the mixture at 50 ° C for 10 hours; And
2) 상기 단계 1)의 가수분해물에 100% 에탄올을 2~3배량(v/v) 첨가하여 20~30℃에서 2시간 동안 추출하는 단계;를 포함하여 추출한 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.2) Extracting the hydrolyzate of step 1) by adding 2 to 3 times (v / v) of 100% ethanol and extracting at 20 to 30 ° C for 2 hours, but the present invention is not limited thereto.
또한, 상기 피부 주름은 자외선 조사에 의해 유도된 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.In addition, the skin wrinkles may be induced by ultraviolet irradiation, but are not limited thereto.
또한, 상기 화장료 조성물은 스킨, 스킨 소프트너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐로션, 영양로션, 마사지크림, 영양크림, 아이 크림, 모이스쳐 크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 클렌징폼, 클렌징 워터, 클렌징 로션, 클렌징 크림, 바디로션, 바디클렌져, 비누 및 파우더로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형으로 제조되는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.In addition, the cosmetic composition may be in the form of a skin, a skin softener, a skin toner, an astringent, a lotion, a milk lotion, a moisturizing lotion, a nutrition lotion, a massage cream, a nutrition cream, an eye cream, a moisturizer cream, But is not limited to, one selected from the group consisting of a cleansing foam, a cleansing water, a cleansing lotion, a cleansing cream, a body lotion, a body cleanser, a soap and a powder.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라가칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is a paste, a cream or a gel, an animal fiber, a plant fiber, a wax, a paraffin, a starch, a tragacanth, a cellulose derivative, a polyethylene glycol, a silicone, a bentonite, Etc. may be used.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판-부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as a carrier component. Especially, in the case of a spray, Propellants such as carbon, propane-butane or dimethyl ether.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is a solution or an emulsion, a solvent, a solvent or an emulsifier is used as a carrier component, and examples thereof include water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, Glycol, 1,3-butyl glycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or fatty acid esters of sorbitan.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is a suspension, a carrier such as water, a liquid diluent such as ethanol or propylene glycol, a suspension such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester, Microcrystalline cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tracant, etc. may be used.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is an interfacial active agent-containing cleansing, it is preferable to use, as carrier components, aliphatic alcohol sulfates, aliphatic alcohol ether sulfates, sulfosuccinic acid monoesters, isethionates, imidazolinium derivatives, methyltaurate, sarcosinate , Fatty acid amide ether sulfate, alkylamidobetaine, aliphatic alcohol, fatty acid glyceride, fatty acid diethanolamide, vegetable oil, linolenic derivative or ethoxylated glycerol fatty acid ester.
또한, 상기 화장료 조성물은 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온 봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 중에서 선택된 하나 이상의 보조제를 추가로 포함하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
The cosmetic composition may further comprise at least one selected from the group consisting of fatty substances, organic solvents, solubilizers, thickening and gelling agents, softening agents, antioxidants, suspending agents, stabilizing agents, foaming agents, perfumes, surfactants, May further comprise one or more adjuvants selected from among emulsifying agents, fillers, sequestering agents and chelating agents, preservatives, vitamins, blocking agents, wetting agents, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic active agents, lipid vesicles, But is not limited thereto.
이하, 실시예를 이용하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들에 의해 제한되지 않는다는 것은 당해 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어 자명한 것이다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. It is to be understood by those skilled in the art that these embodiments are merely illustrative of the present invention and that the scope of the present invention is not limited thereto.
재료 및 방법Materials and methods
1. One. 어수리Aquarius 추출물 제조 Extract preparation
본 발명의 어수리 에탄올 추출물과 효소 종류별 처리 및 초고압 균질화 유무에 따른 어수리 추출물의 주름 개선 효능을 확인하기 위해, 에탄올 추출물과 효소 종류별 처리, 초고압 균질화 유무 및 효소처리+초고압 균질화 병행 처리에 따른 추출물들을 하기와 같이 제조하였다.
In order to confirm the wrinkle-reducing effect of the aquatic ethanol extract of the present invention and the treatment of each type of enzyme and the effect of high-pressure homogenization on the wrinkle, Respectively.
(1) 에탄올 추출(1) Ethanol extraction
3g의 어수리 분말에 70%(v/v) 에탄올 30㎖을 첨가한 뒤 실온에서 12시간 동안 추출한 에탄올 추출물을 여과지에 여과한 후, 농축하여 동결건조한 다음 사용하였다.
After adding 30 ml of 70% (v / v) ethanol to 3 g of aquatic flour, the ethanol extract extracted at room temperature for 12 hours was filtered through a filter paper, concentrated and freeze-dried.
(2) 효소처리(2) Enzyme treatment
2.5g의 어수리 분말에 pH 4.5로 조정한 증류수 30㎖와 효소인 비스코자임(Viscozyme) 및 펙티넥스(Pectinex)를 각각 50 unit/㎖ 및 500 unit/㎖으로 넣고 50℃ 및 37℃에서 180 rpm으로 교반하였다. 각각 최적의 시간(10시간과 2시간)으로 효소를 처리한 다음 100%(v/v) 에탄올 70㎖를 넣고 상온에서 180 rpm으로 2시간 추출 후 12,000 rpm에서 15분간 원심 분리한 뒤 필터 후 사용하였다.
30 ml of distilled water adjusted to pH 4.5 and 2.5 g of Viscozyme and Pectinex were added to 2.5 g of aquatic flour and 50 units / ml and 500 unit / ml, respectively. Lt; / RTI > After the enzymes were treated for optimal time (10 hours and 2 hours), 70 ml of 100% (v / v) ethanol was added, and the mixture was extracted at 180 rpm for 2 hours at room temperature. After centrifugation at 12,000 rpm for 15 minutes, Respectively.
(3) 초고압 균질화 처리(3) Ultra high pressure homogenization treatment
2.5g의 어수리 분말에 pH 4.5로 조정한 증류수 30㎖와 100%(v/v) 에탄올 70㎖을 첨가한 후 교반하여 12,000 rpm에서 15분간 원심 분리한 뒤 필터하여 여과액을 제조한 후, 120MPa의 압력으로 2회 오리피스관을 통과시켰다.
30 ml of distilled water adjusted to pH 4.5 and 70 ml of 100% (v / v) ethanol were added to 2.5 g of aquatic flour and stirred. The mixture was centrifuged at 12,000 rpm for 15 minutes and filtered to prepare a filtrate. Lt; RTI ID = 0.0 > of < / RTI > the orifice tube.
(4) 효소처리 및 초고압 균질화 병행 처리(4) Enzyme treatment and high pressure homogenization parallel treatment
2.5g의 어수리 분말에 pH 4.5로 조정한 증류수 30㎖와 효소인 비스코자임(Viscozyme) 및 펙티넥스(Pectinex)를 각각 50 unit/㎖ 및 500 unit/㎖으로 넣고 50℃ 및 37℃에서 180 rpm으로 교반하였다. 각각 최적의 시간(10시간과 2시간)으로 효소를 처리한 다음 100%(v/v) 에탄올 70㎖를 넣고 상온(25℃)에서 180 rpm으로 2시간 추출 후 12,000 rpm에서 15분간 원심 분리한 뒤 필터하여 여과액을 제조한 후, 120MPa의 압력으로 2회 오리피스관을 통과시켰다.
30 ml of distilled water adjusted to pH 4.5 and 2.5 g of Viscozyme and Pectinex were added to 2.5 g of aquatic flour and 50 units / ml and 500 unit / ml, respectively. Lt; / RTI > The enzyme was treated at the optimal time (10 hours and 2 hours), and then 70 ml of 100% (v / v) ethanol was added. The mixture was extracted at 180 rpm for 2 hours at room temperature (25 ° C) and centrifuged at 12,000 rpm for 15 minutes After filtration, the filtrate was passed through an orifice tube twice at a pressure of 120 MPa.
2. 세포배양2. Cell culture
본 발명에 사용한 세포는 사람의 정상 섬유아세포(HS68)로 ATCC(American Type Culture Collection, CRL-1635)에서 구입하였다. 세포배양은 10% FBS(fetal bovine serum)과 1% 페니실린/스트렙토마이신(100 U/mL)을 첨가한 DMEM(Dulbeco's modified eagle‘s medium, Gibco Co, Gaithersburg, MD, USA) 배지를 사용하였으며, CO2 배양기(37℃, 5% CO2, Sanyo, Japan)에서 배양하였다.
Cells used in the present invention were obtained from ATCC (American Type Culture Collection, CRL-1635) as human normal fibroblasts (HS68). Cell culture was done using 10% FBS (fetal bovine serum) and 1% penicillin / streptomycin (100 U / mL) to a DMEM was added (Dulbeco's modified eagle's medium, Gibco Co, Gaithersburg, MD, USA) medium, CO 2 And cultured in an incubator (37 ° C, 5% CO 2 , Sanyo, Japan).
3. PIP(3. PIP ( ProcollagenProcollagen typeⅠC-peptide) 측정 type I C-peptide measurement
PIP 함량은 PIP(procollagen typeⅠC-peptide) EIA 키트(Takara, Korea)를 이용하여 측정하였다. 세포를 1×105 cells/mL 농도로 24-웰 플레이트에 접종한 후, CO2 배양기에서 24시간 배양한 후에 배양액을 이용하여 측정하였다. 키트 안에 있는 96-웰 플레이트에 100㎕의 항체-POD 공액 용액(conjugate solution)과 20㎕의 어수리 추출물를 넣고 잘 섞어준 뒤 37℃에서 3시간 반응시킨 후 내용물을 제거하고 워싱 버퍼를 이용해 4번 씻어주었다. 다음으로, TMBZ(substrate solution)을 100㎕ 넣고 실온에서 30분 반응시키고 정지액(stop solution)을 100㎕ 넣어 반응을 정지시킨 후 450nm에서 흡광도를 측정하였다.
PIP content was measured using PIP (procollagen type I C-peptide) EIA kit (Takara, Korea). The cells 1 × 10 5 cells / mL , And the cells were cultured in a CO 2 incubator for 24 hours and then measured using a culture solution. Add 100 μl of antibody-POD conjugate solution and 20 μl of aquatic extract to the 96-well plate in the kit, mix well and incubate at 37 ° C for 3 hours. Remove the contents and wash 4 times with Wash Buffer gave. Next, 100 μl of TMBZ (substrate solution) was added, reacted at room temperature for 30 minutes, and 100 μl of stop solution was added to stop the reaction, and the absorbance was measured at 450 nm.
실시예Example 1. One. 어수리Aquarius 추출물 처리에 따른 콜라겐 Collagen 생합성량Biosynthesis amount 증가 효과 Increase effect
본 실시예 1에서는 피부 섬유아세포에 자외선 조사처리한 후, 상기 제조한 어수리 에탄올 추출물과 효소 종류별 처리, 초고압 균질화 유무 및 효소 처리+초고압 균질화 병행 처리에 따라 제조된 어수리 추출물들의 PIP(Procollagen type Ⅰ C-petide) 함량 증가효과를 비교하였다. 그 결과, 하기 표 1 및 도 1에 개시한 바와 같이 에탄올 추출물(EtOH extract; 68.74±0.64)을 처리하였을 때, UV 처리로 인해 감소된 PIP 함량이 증가하였으며, 비스코자임 효소를 처리하여 제조된 어수리 추출물(Viscozyme; 71.58±1.16)을 처리한 경우, 에탄올 추출물보다 PIP 함량이 더 증가되는 것을 확인할 수 있었다. 또한, 초고압 균질(44.29±1.89) 또는 효소 처리 후 초고압 균질을 병행하여 제조된 어수리 추출물(Vis+초고압 균질; 55.97±3.96, Pec+초고압 균질; 63.40±2.37)의 경우, 효소처리 후 제조된 어수리 추출물들보다 PIP 함량이 더 감소되는 것을 확인할 수 있었다.In Example 1, ultraviolet rays were irradiated to skin fibroblasts, and then the PIP (Procollagen type I C) of the aquatic extracts prepared according to the enzyme water treatment, the treatment with the enzyme type, the presence of ultra high pressure homogenization and the enzyme treatment + -petide) content of the extract. As a result, when the ethanol extract (EtOH extract; 68.74 +/- 0.64) was treated as described in Table 1 and FIG. 1, the decreased PIP content due to the UV treatment was increased, and the paprika produced by treatment with the viscose enzyme When the extract (Viscozyme; 71.58 ± 1.16) was treated, the PIP content was found to be higher than that of the ethanol extract. In the case of aquaculture (Vis + ultrahigh pressure homogenate; 55.97 ± 3.96, Pec + ultrahigh pressure homogeneity; 63.40 ± 2.37) prepared by using ultra high pressure homogenization (44.29 ± 1.89) or high pressure homogenization after enzyme treatment, It was confirmed that the PIP content was further reduced.
Claims (7)
1) 어수리 분말에 물을 첨가한 혼합물에 효소를 첨가한 후 가수분해하는 단계; 및
2) 상기 단계 1)의 가수분해물을 에탄올 추출하는 단계;를 포함하여 추출한 것을 특징으로 하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물.The method according to claim 1, wherein the aquatic ethanol extract
1) adding an enzyme to a mixture of water of an aquatic powder and hydrolyzing the mixture; And
2) extracting the hydrolyzate of step 1) with ethanol, and extracting the extract with ethanol.
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KR20200122778A (en) | 2019-04-19 | 2020-10-28 | 재단법인 경북바이오산업연구원 | Pharmaceutical composition comprising the extract of heracleum moellendorffi as an effective component for prevention or treatment of thrombosis and health functional food comprising the same |
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US20060210524A1 (en) * | 2005-03-18 | 2006-09-21 | Mower Thomas E | Skin care composition |
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[네이버블로그] 어수리 효능(2011.06.13.)(인터넷URL: https://blog.naver.com/thtjr0916/130110967863)* |
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