KR101921211B1 - Cosmetic composition for skin regeneration comprising Ainsliaea acerifolia extract or its fraction as effective component - Google Patents

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Abstract

본 발명은 단풍취 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 피부 재생용 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 본 발명의 천연 유래의 단풍취 추출물 또는 이의 분획물은 안전하고, 독성 및 부작용이 거의 없어 장기간 피부에 사용할 수 있으며, 피부 재생 효과가 우수하므로, 이를 유효성분으로 포함하는 본 발명의 조성물은 피부에 자극을 일으키지 않는 피부 재생을 위한 기능성 화장품의 소재로 유용하게 사용될 수 있을 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition for regenerating skin containing an extract of a single-puff extract or a fraction thereof as an active ingredient. More particularly, the present invention relates to a cosmetic composition for skin regeneration, which is safe and has little toxicity and side effects, And since the skin regeneration effect is excellent, the composition of the present invention containing it as an active ingredient may be usefully used as a material for functional cosmetics for skin regeneration which does not cause irritation to the skin.

Description

단풍취 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 피부 재생용 화장료 조성물{Cosmetic composition for skin regeneration comprising Ainsliaea acerifolia extract or its fraction as effective component}[0001] The present invention relates to a cosmetic composition for skin regeneration comprising an extract of A. pneumoniae or a fraction thereof as an active ingredient,

본 발명은 단풍취 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 피부 재생용 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition for skin regeneration, which comprises an extract of Artemisia oryzae or a fraction thereof as an active ingredient.

피부는 인체의 일차 방어막으로서 온도와 습도 변화, 자외선, 공해물질 등 외부환경의 자극으로부터 체내의 기관들을 보호해 주며, 체온조절 등의 생체 항상성 유지에 중요한 역할을 한다. 이런 피부의 맨 바깥에 있는 각질은 피부의 세포가 변화되어 생긴 조직이며 각질층은 완전히 죽은 세포로 구성되어있다. 진피층에서 피부 결합조직 안에 성기게 형성된 세포층은 표피층으로 올라가면서 세포의 생명력이 없어지고 견고하고 규칙적인 세포층으로 변한다. 핵과 세포질이 빠져나가서 벽돌과 같이 단단한 각질층을 형성하게 된다. 이러한 각질층은 피부를 견고하게 하면서 피부조직 가장 외부에서 우리 몸의 수분을 지켜주고 밖에서 들어오는 여러 가지 물질들을 방어하는 방어선과 같은 역할을 한다.Skin is the primary protective membrane of the human body. It protects the internal organs from external stimuli such as temperature and humidity changes, ultraviolet rays, and pollutants, and plays an important role in keeping the body homeostatic such as body temperature control. The keratin, which is located at the outermost part of the skin, is a tissue formed by the change of skin cells. The stratum corneum is composed of dead cells. In the dermal layer, the dermally formed cell layer in the connective tissue is lifted to the epidermis, and the cell becomes viable and changes into a firm and regular cell layer. The nucleus and cytoplasm escape and form hard stratum corneum like bricks. This stratum corneum acts as a defense line to protect the moisture of our body from the outermost part of the skin tissue and to protect the various substances coming in from outside while firmly supporting the skin.

피부 세포의 생성과 각질화 과정은 피부 건강을 유지하는 중요한 사이클이다. 피부 세포의 재생 능력이 좋을 경우에는 피부 세포가 진피층에서 빨리 생성되어 빨리 각질화되게 되고 외부 자극에 의해 손상되고 노화된 각질이 빨리 새롭게 생성된 각질로 대체되어 건강한 피부를 유지할 수 있도록 도와주게 된다. 피부 역시 인체의 다른 장기와 마찬가지로 나이가 들어감에 따라 재생 능력이 떨어지게 되고 점차 노화가 진행되게 되어서, 그 결과로서 피부의 탄력이 손실되고, 오래된 각질이 교체되지 않아 피부가 각질화되며, 탄력을 유지해주는 구조와 섬유가 줄어들어 주름이 생성되며, 피부가 위축되는 등의 현상이 나타나게 된다. Skin cell formation and keratinization are important cycles to maintain skin health. If the skin cell regeneration ability is good, the skin cells are rapidly formed in the dermis layer and quickly become keratinized, damaged by external stimuli, and aged keratin is replaced with newly formed keratin to help maintain healthy skin. As with other organs of the human body, the skin becomes less senile and aging progresses with age. As a result, the elasticity of the skin is lost, the old horny skin is not replaced, the skin becomes horny, The structure and fibers are reduced, wrinkles are generated, and the skin is shrunken.

따라서, 이러한 피부 재생 능력을 높여 건강한 피부를 유지시키고 건강하고 탄력 있는 피부를 유지하기 위하여 피부 재생 촉진 효과가 있는 생리활성물질을 개발하고자 하는 노력이 꾸준히 있어 왔다. 트레티노인(tretinoin, trans-retinoic acid)이나 레티놀이 화장품 원료에 사용되기 시작하였고 그 이후로 여성 호르몬 유사 물질, 각종 식물에서 추출한 항산화제 등이 이러한 효능의 원료로서 화장품에 도입되었다. 그러나 이러한 화장품 원료들은 대부분 효능이 미진하거나 피부 자극 같은 부작용을 유발하는 등 여러 가지 문제점을 가지고 있었다. 이에, 피부 부작용을 유발하지 않으면서도 피부 재생 증진 효과를 갖는 원료에 대한 연구가 활발히 진행되고 있다. Accordingly, efforts have been made to develop physiologically active substances having skin regeneration-promoting effect in order to maintain healthy skin by maintaining skin regeneration ability and maintaining healthy and elastic skin. Tretinoin (trans-retinoic acid) and retinol have begun to be used in cosmetic raw materials and since then, female hormone-like substances and antioxidants extracted from various plants have been introduced into cosmetics as a raw material for such efficacy. However, most of these cosmetic raw materials have various problems such as insufficient effects or side effects such as skin irritation. Accordingly, researches on raw materials having skin regeneration improving effect without inducing skin side effects are actively proceeding.

한편, 단풍취(Ainsliaea acerifolia)는 우리나라 각처의 산에서 자라는 국화과의 다년생 초본이다. 생육환경은 습기가 많은 반그늘에서 자란다. 주로 어린순을 식용하며 한국, 중국 및 일본에 분포되어 자생한다. 민간요법이나 식용으로 단풍취 어린순를 이용하는 것 이외에 단풍취의 생리 기능성에 대한 연구는 현재까지 알려진 바가 없다.On the other hand, Ainsliaea acerifolia is a perennial herbaceous plant of Asteraceae which grows in mountains of each country. The growing environment grows in moist, partly cloudy. It is largely distributed in Korea, China and Japan. There are no studies on the physiological functioning of sweetweeds in addition to the use of lice blossoms in folk remedies and edible foods.

한편, 한국공개특허 제2017-0000888호는 단풍취 추출물을 이용한 건강 기능성 조성물 및 이를 포함한 기능성 음료를 개시하고 있으나, 본 발명의 단풍취 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 피부 재생용 화장료 조성물에 대해 아직까지 개시된 바가 없다.Meanwhile, Korean Patent Laid-Open Publication No. 2017-0000888 discloses a health functional composition using a single-puff extract and a functional beverage containing the extract, but it has not yet been found that the cosmetic composition for skin regeneration containing the extract of the present invention or the fraction thereof as an active ingredient .

본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명에서는 단풍취 에탄올 추출물 및 이의 에틸아세테이트 분획물을 섬유아세포(HS68) 세포에 각각 처리하였을 때, UV 조사로 인해 감소된 피부 재생능이 증가되었을 뿐만 아니라, 비스코자임 효소 처리 및 초고압 균질화 병행 처리로 제조된 단풍취 추출물이 상기 단풍취 에탄올 추출물보다 피부 재생 효과가 현저하게 우수한 것을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.The present invention has been made in view of the above-mentioned needs, and it is an object of the present invention to provide a skin regeneration ability reduced by UV irradiation when treated with fibroblast (HS68) cells, respectively, , The biscuit enzyme treatment, and the ultraviolet pressure homogenization treatment were superior in skin regeneration effect to that of the above-mentioned single-bladed ethanol extract, the present invention was completed.

상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 단풍취(Ainsliaea acerifolia) 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 피부 재생용 화장료 조성물을 제공한다.In order to achieve the foregoing object, the present invention danpungchwi (Ainsliaea acerifolia ) extract or a fraction thereof as an active ingredient.

본 발명의 천연 유래의 단풍취 추출물 또는 이의 분획물은 안전하고, 독성 및 부작용이 거의 없어 장기간 피부에 사용할 수 있으며, 피부 재생 효과가 우수하므로, 이를 유효성분으로 포함하는 본 발명의 조성물은 피부에 자극을 일으키지 않는 피부 재생을 위한 기능성 화장품의 소재로 유용하게 사용될 수 있을 것이다.The extract of the present invention can be used for skin for a long period of time because it is safe, has little toxicity and side effects, and has excellent skin regeneration effect. Therefore, the composition of the present invention containing the extract as an active ingredient, It can be usefully used as a functional cosmetic material for skin regeneration that does not cause skin irritation.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 단풍취 에탄올 추출물 및 이의 분획물을 HS68 세포에 각각 처리하였을 때, 세포 생존율을 확인한 결과이다. CON은 아무것도 처리하지 않은 대조군이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 단풍취 에탄올 추출물 및 이의 분획물의 피부 재생 효능을 확인한 결과이다. CON은 아무것도 처리하지 않은 대조군이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 단풍취 에탄올 추출물과 효소 종류별 처리, 초고압 균질화 처리 및 효소 처리 후 초고압 균질 병행 처리하여 제조한 각각의 단풍취 추출물들의 피부 재생 효과를 비교한 결과이다. CON은 아무것도 처리하지 않은 대조군이다.
FIG. 1 is a graph showing the cell viability of HS68 cells treated with the ethanol extract of A. japonica and fractions thereof according to an embodiment of the present invention. CON is a control group with no treatment.
FIG. 2 is a result of examining the skin regeneration efficacy of the ethanol extract of A. bovis and its fractions according to an embodiment of the present invention. CON is a control group with no treatment.
FIG. 3 is a graph showing the skin regeneration effects of each of the single-puff extracts prepared by treating the single-bladed ethanol extract, the enzyme type treatment, the ultra-high pressure homogenization treatment, and the enzyme treatment with the ultra-high pressure homogenous combination treatment according to an embodiment of the present invention. CON is a control group with no treatment.

본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 단풍취(Ainsliaea acerifolia) 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 피부 재생용 화장료 조성물을 제공한다.In order to achieve the object of the present invention, the present invention provides a cosmetic composition for skin regeneration comprising an extract of Ainsliaea acerifolia or a fraction thereof as an active ingredient.

본 발명의 피부 재생용 화장료 조성물에서, 상기 단풍취 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합 용매를 이용하여 추출한 것일 수 있으며, 바람직하게는 에탄올을 이용하여 추출한 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.In the cosmetic composition for skin regeneration of the present invention, the above-mentioned single-puff extract can be extracted with water, a lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms, or a mixed solvent thereof, preferably ethanol, It does not.

본 발명의 피부 재생용 화장료 조성물에서, 상기 단풍취 추출물은In the cosmetic composition for skin regeneration of the present invention, the above-

1) 단풍취 분말에 물을 첨가한 혼합물에 펙티넥스(Pectinex)를 첨가한 후 가수분해하는 단계; 및1) adding Pectinex to a mixture of water and water, and then hydrolyzing the mixture; And

2) 상기 단계 1)의 가수분해물을 에탄올 추출하는 단계;를 포함하여 제조하는 것일 수 있으며, 2) extracting the hydrolyzate of step 1) with ethanol,

바람직하게는,Preferably,

1) 단풍취 분말에 pH 3.5~5.5로 조정된 물을 10~14배량(v/w) 첨가한 혼합물에 펙티넥스(Pectinex)를 첨가한 후 25~45℃에서 1~3시간 동안 가수분해하는 단계; 및1) Pectinex is added to a mixture of 10-14 times (v / w) of water adjusted to pH 3.5-5.5 and the hydrolysis is carried out at 25-45 ° C for 1-3 hours. ; And

2) 상기 단계 1)의 가수분해물에 100% 에탄올을 2~3배량(v/v) 첨가하여 20~30℃에서 2시간 동안 추출하는 단계;를 포함하여 제조하는 것일 수 있으며, 2) adding 2 to 3 times (v / v) 100% ethanol to the hydrolyzate of step 1), and extracting the mixture at 20 to 30 ° C for 2 hours.

더 바람직하게는,More preferably,

1) 단풍취 분말에 pH 4.5로 조정된 물을 13배량(v/w) 첨가한 혼합물에 펙티넥스(Pectinex)를 첨가한 후 37℃에서 2시간 동안 가수분해하는 단계; 및1) adding pectinex to a mixture obtained by adding 13 times (v / w) of water adjusted to pH 4.5 to a single-stranded powder, and then hydrolyzing the mixture at 37 ° C for 2 hours; And

2) 상기 단계 1)의 가수분해물에 100% 에탄올을 2~3배량(v/v) 첨가하여 20~30℃에서 2시간 동안 추출하는 단계;를 포함하여 제조하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.2) adding 100% ethanol to the hydrolyzate of step 1) in an amount of 2 to 3 times (v / v) and extracting the mixture at 20 to 30 ° C for 2 hours, but it is not limited thereto .

또한, 상기 단풍취 추출물은In addition, the above-

1) 단풍취 분말에 물을 첨가한 혼합물에 비스코자임(Viscozyme)을 첨가한 후 가수분해하는 단계;1) adding a viscozyme to the mixture to which water is added to the monodisperse powder and then hydrolyzing the mixture;

2) 상기 단계 1)의 가수분해물을 에탄올 추출하는 단계; 및2) extracting the hydrolyzate of step 1) with ethanol; And

3) 상기 단계 2)의 에탄올 추출물을 초고압 균질화하는 단계;를 포함하여 제조하는 것일 수 있으며, 3) subjecting the ethanol extract of step 2) to ultra-high pressure homogenization,

바람직하게는,Preferably,

1) 단풍취 분말에 pH 3.5~5.5로 조정된 물을 10~14배량(v/w) 첨가한 혼합물에 비스코자임(Viscozyme)을 첨가한 후 30~60℃에서 8~12시간 동안 가수분해하는 단계;1) adding Viscozyme to a mixture of 10-14 times (v / w) of water adjusted to pH 3.5-5.5 in the dried pale yellow powder and hydrolyzing the mixture at 30-60 ° C for 8-12 hours ;

2) 상기 단계 1)의 가수분해물에 100% 에탄올을 2~3배량(v/v) 첨가하여 20~30℃에서 1~3시간 동안 추출하는 단계; 및2) adding 2 to 3 times (v / v) 100% ethanol to the hydrolyzate of step 1) and extracting at 20 to 30 ° C for 1 to 3 hours; And

3) 상기 단계 2)의 에탄올 추출물을 110~130MPa 압력하에서 초고압 균질화하는 단계;를 포함하여 제조하는 것일 수 있으며,3) homogenizing the ethanol extract of step 2) at a pressure of 110 to 130 MPa under ultrahigh pressure,

더 바람직하게는,More preferably,

1) 단풍취 분말에 pH 4.5로 조정된 물을 13배량(v/w) 첨가한 혼합물에 비스코자임(Viscozyme)을 첨가한 후 50℃에서 10시간 동안 가수분해하는 단계;1) adding a viscozyme to a mixture obtained by adding 13-fold (v / w) of water adjusted to pH 4.5 to the odoriferous dry powder, and then hydrolyzing the mixture at 50 ° C for 10 hours;

2) 상기 단계 1)의 가수분해물에 100% 에탄올을 2~3배량(v/v) 첨가하여 20~30℃에서 2시간 동안 추출하는 단계; 및2) adding 2 to 3 times (v / v) 100% ethanol to the hydrolyzate of step 1) and extracting at 20 to 30 ° C for 2 hours; And

3) 상기 단계 2)의 에탄올 추출물을 120MPa 압력하에서 초고압 균질화하는 단계를 포함하여 제조하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.3) homogenizing the ethanol extract of step 2) at 120 MPa under high pressure, but the present invention is not limited thereto.

또한, 상기 분획물은 단풍취 에탄올 추출물의 에틸 아세테이트 분획물일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.In addition, the fraction may be, but is not limited to, the ethyl acetate fraction of the ethanol extract of A. pneumoniae.

또한, 상기 화장료 조성물은 스킨, 스킨 소프트너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐로션, 영양로션, 마사지크림, 영양크림, 아이 크림, 모이스쳐 크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 클렌징폼, 클렌징 워터, 클렌징 로션, 클렌징 크림, 바디로션, 바디클렌져, 비누 및 파우더로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형으로 제조되는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.In addition, the cosmetic composition may be in the form of a skin, a skin softener, a skin toner, an astringent, a lotion, a milk lotion, a moisturizing lotion, a nutrition lotion, a massage cream, a nutrition cream, an eye cream, a moisturizer cream, But is not limited to, one selected from the group consisting of a cleansing foam, a cleansing water, a cleansing lotion, a cleansing cream, a body lotion, a body cleanser, a soap and a powder.

본 발명의 화장료 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라가칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is a paste, a cream or a gel, an animal fiber, a plant fiber, a wax, a paraffin, a starch, a tragacanth, a cellulose derivative, a polyethylene glycol, a silicone, a bentonite, Etc. may be used.

본 발명의 화장료 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판-부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as a carrier component. Especially, in the case of a spray, Propellants such as carbon, propane-butane or dimethyl ether.

본 발명의 화장료 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is a solution or an emulsion, a solvent, a solvent or an emulsifier is used as a carrier component, and examples thereof include water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, Glycol, 1,3-butyl glycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or fatty acid esters of sorbitan.

본 발명의 화장료 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is a suspension, a carrier such as water, a liquid diluent such as ethanol or propylene glycol, a suspension such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester, Microcrystalline cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tracant, etc. may be used.

본 발명의 화장료 조성물의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is an interfacial active agent-containing cleansing, it is preferable to use, as carrier components, aliphatic alcohol sulfates, aliphatic alcohol ether sulfates, sulfosuccinic acid monoesters, isethionates, imidazolinium derivatives, methyltaurate, sarcosinate , Fatty acid amide ether sulfate, alkylamidobetaine, aliphatic alcohol, fatty acid glyceride, fatty acid diethanolamide, vegetable oil, linolenic derivative or ethoxylated glycerol fatty acid ester.

또한, 상기 화장료 조성물은 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온 봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 중에서 선택된 하나 이상의 보조제를 추가로 포함하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
The cosmetic composition may further comprise at least one selected from the group consisting of fatty substances, organic solvents, solubilizers, thickening and gelling agents, softening agents, antioxidants, suspending agents, stabilizing agents, foaming agents, perfumes, surfactants, May further comprise one or more adjuvants selected from among emulsifying agents, fillers, sequestering agents and chelating agents, preservatives, vitamins, blocking agents, wetting agents, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic active agents, lipid vesicles, But is not limited thereto.

이하, 실시예를 이용하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들에 의해 제한되지 않는다는 것은 당해 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어 자명한 것이다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. It is to be understood by those skilled in the art that these embodiments are merely illustrative of the present invention and that the scope of the present invention is not limited thereto.

재료 및 방법Materials and methods

1. One. 단풍취A single blow 추출물 및 이의  Extract and its 분획물Fraction 제조 Produce

본 발명의 단풍취 에탄올 추출물 및 이의 분획물과 효소 종류별 처리 및 초고압 균질화 유무에 따른 단풍취 추출물의 피부 재생 효능을 확인하기 위해, 에탄올 추출물 및 이의 분획물과 효소 종류별 처리, 초고압 균질화 유무 및 효소처리+초고압 균질화 병행 처리에 따른 단풍취 추출물들을 하기와 같이 제조하였다.
In order to examine the skin regeneration efficacy of the ethanol extract of the present invention and its fractions, the treatment of each kind of enzyme, and the skin rehabilitation efficacy according to the presence or absence of the ultrahigh pressure homogenization, the ethanol extract and its fractions were treated according to the enzyme type, the presence of ultra high pressure homogenization, Deep-blotting extracts according to the treatments were prepared as follows.

(1) 에탄올 추출 및 이의 분획(1) Ethanol extraction and its fraction

3g의 단풍취 분말에 70%(v/v) 에탄올 30㎖을 첨가한 뒤 실온에서 12시간 동안 추출한 에탄올 추출물을 여과지에 여과한 후, 농축하여 동결건조한 다음 사용하였다.30 g of 70% (v / v) ethanol was added to 3 g of fresh-air dried powder, and the ethanol extract was extracted at room temperature for 12 hours, filtered through a filter paper, concentrated and freeze-dried.

상기 단풍취 에탄올 추출물의 분획물 제조는 상기 단풍취 에탄올 추출물에 헥산(hexane)을 가하여 분액 깔대기로 핵산층과 수층으로 분획한 다음 핵산층을 감압 농축하여 핵산 분획물을 얻었고, 다시 수층은 상기와 같은 방법으로 에틸 아세테이트, n-부탄올 및 물 순으로 분획하여 에틸 아세테이트 분획물, n-부탄올 분획물 및 물 분획물을 얻었다.
In order to produce the fraction of the above-mentioned single-blasted ethanol extract, hexane was added to the above-mentioned single-blasted ethanol extract, and the fraction was divided into a nucleic acid layer and an aqueous layer with a separating funnel. The nucleic acid fraction was concentrated under reduced pressure to obtain a nucleic acid fraction. Acetate, n-butanol and water were fractionated to obtain ethyl acetate fraction, n-butanol fraction and water fraction.

(2) 효소처리(2) Enzyme treatment

2.5g의 단풍취 분말에 pH 4.5로 조정한 증류수 30㎖와 효소인 비스코자임(Viscozyme) 및 펙티넥스(Pectinex)를 각각 50 unit/㎖ 및 500 unit/㎖으로 넣고 50℃ 및 37℃에서 180 rpm으로 교반하였다. 각각 최적의 시간(10시간과 2시간)으로 효소를 처리한 다음 100%(v/v) 에탄올 70㎖를 넣고 상온에서 180 rpm으로 2시간 추출 후 12,000 rpm에서 15분간 원심 분리한 뒤 필터 후 사용하였다.
30 ml of distilled water adjusted to pH 4.5 and 2.5 g of Viscozyme and Pectinex were added to 2.5 g of freshly pungent powder and 50 units / ml and 500 unit / ml, respectively, and the mixture was heated at 50 ° C and 37 ° C at 180 rpm Lt; / RTI > After the enzymes were treated for optimal time (10 hours and 2 hours), 70 ml of 100% (v / v) ethanol was added, and the mixture was extracted at 180 rpm for 2 hours at room temperature. After centrifugation at 12,000 rpm for 15 minutes, Respectively.

(3) 초고압 균질화 처리(3) Ultra high pressure homogenization treatment

2.5g의 단풍취 분말에 pH 4.5로 조정한 증류수 30㎖와 100%(v/v) 에탄올 70㎖을 첨가한 후 교반하여 12,000 rpm에서 15분간 원심 분리한 뒤 필터하여 여과액을 제조한 후, 120MPa의 압력으로 2회 오리피스관을 통과시켰다.
30 ml of distilled water adjusted to pH 4.5 and 70 ml of 100% (v / v) ethanol were added to 2.5 g of freshly pungent powder and stirred. The mixture was centrifuged at 12,000 rpm for 15 minutes and filtered to prepare a filtrate. Lt; RTI ID = 0.0 > of < / RTI > the orifice tube.

(4) 효소처리 및 초고압 균질화 병행 처리(4) Enzyme treatment and high pressure homogenization parallel treatment

2.5g의 단풍취 분말에 pH 4.5로 조정한 증류수 30㎖와 효소인 비스코자임(Viscozyme) 및 펙티넥스(Pectinex)를 각각 50 unit/㎖ 및 500 unit/㎖으로 넣고 50℃ 및 37℃에서 180 rpm으로 교반하였다. 각각 최적의 시간(10시간과 2시간)으로 효소를 처리한 다음 100%(v/v) 에탄올 70㎖를 넣고 상온(25℃)에서 180 rpm으로 2시간 추출 후 12,000 rpm에서 15분간 원심 분리한 뒤 필터하여 여과액을 제조한 후, 120MPa의 압력으로 2회 오리피스관을 통과시켰다.
30 ml of distilled water adjusted to pH 4.5 and 2.5 g of Viscozyme and Pectinex were added to 2.5 g of freshly pungent powder and 50 units / ml and 500 unit / ml, respectively, and the mixture was heated at 50 ° C and 37 ° C at 180 rpm Lt; / RTI > The enzyme was treated at the optimal time (10 hours and 2 hours), and then 70 ml of 100% (v / v) ethanol was added. The mixture was extracted at 180 rpm for 2 hours at room temperature (25 ° C) and centrifuged at 12,000 rpm for 15 minutes After filtration, the filtrate was passed through an orifice tube twice at a pressure of 120 MPa.

2. 세포배양 및 세포독성 측정2. Cell culture and cytotoxicity measurement

본 발명에 사용한 세포는 사람의 정상 섬유아세포(HS68)로 ATCC(American Type Culture Collection, CRL-1635)에서 구입하였다. 세포배양은 10% FBS(fetal bovine serum)과 1% 페니실린/스트렙토마이신(100 U/mL)을 첨가한 DMEM(Dulbeco's modified eagle's medium, Gibco Co, Gaithersburg, MD, USA) 배지를 사용하였으며, CO2 배양기(37℃, 5% CO2, Sanyo, Japan)에서 배양하였다.Cells used in the present invention were obtained from ATCC (American Type Culture Collection, CRL-1635) as human normal fibroblasts (HS68). Cell culture was done using 10% FBS (fetal bovine serum) and 1% penicillin / streptomycin (100 U / mL) to a DMEM was added (Dulbeco's modified eagle's medium, Gibco Co, Gaithersburg, MD, USA) medium, CO 2 And cultured in an incubator (37 ° C, 5% CO 2 , Sanyo, Japan).

또한, 단풍취 추출물 및 이의 분획물의 세포독성에 미치는 농도범위를 조사하기 위해, 모스만(Mosmann, T., 1983, Journal of Immunological Methods, 65, 55-63)의 방법을 이용하여 MTT(3-(4,5-dimeth-ylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) 분석을 수행하였다. HS68 세포를 96-웰 플레이트에 1×105 cells/mL 농도로 100㎕ 접종하여 24시간 배양한 후 여러 농도의 단풍취 추출물 및 이의 분획물을 각각 처리하여 24시간 동안 더 배양하였다. 각 웰에 5mg/mL의 MTT 용액을 10㎕ 넣고 3시간 동안 반응시키면서 환원반응을 유도하였고, 상등액 제거 후 100㎕의 DMSO(dimethyl sulfoxide) 용액을 첨가하여 보라색의 포르마잔(formazan) 결정을 완전히 용해하였다. 분광광도계를 이용하여 570nm에서 흡광도를 측정하였으며, 세포독성은 아무것도 처리하지 않은 무처리군의 생존율(100%)을 기준으로 본 발명의 단풍취 추출물 및 이의 분획물 처리군의 상대적인 세포 생존율을 계산하였다.
In order to investigate the concentration range of cytotoxicity of the extract from the leaves and their fractions, MTT (3- ( 4,5-dimeth-ylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazolium bromide) analysis. HS68 cells were inoculated in a 96-well plate at a concentration of 1 × 10 5 cells / mL and cultured for 24 hours. Then, various concentrations of the dried leaf extract and its fractions were treated and further cultured for 24 hours. 10 μl of 5 mg / ml MTT solution was added to each well and the reaction was allowed to proceed for 3 hours. After removing the supernatant, 100 μl of DMSO (dimethyl sulfoxide) solution was added to completely dissolve purple formazan crystals Respectively. Absorbance was measured at 570 nm using a spectrophotometer. Relative cell viability was calculated for the single-puff extract of the present invention and its fraction-treated group based on the survival rate (100%) of the untreated group treated with no cytotoxicity.

3. 3. 피부세포Skin cell 재생능Playability 측정 Measure

HS68 세포를 1×105 cells/mL 농도로 24-웰 플레이트에 접종한 후, CO2 배양기에서 24시간 배양한 후에 배지를 제거하고 PBS를 500㎕ 넣고 UVC(254nm)를 650mm 거리에서 1분 20초 동안 뚜껑을 열고 조사하였다. UVC 조사 후 무혈청 DMEM 배지, 단풍취 추출물 및 이의 분획물을 농도별로 각각 처리하고 48시간 동안 배양하였다. 배양이 끝나면 MTT 시약을 50㎕씩 넣고 3시간 동안 방치한 후 상등액을 제거하고 형성된 포르마잔(formazan)을 DMSO(dimethyl sulfoxide) 100㎕를 첨가하여 30분 후 570nm에서 흡광도를 측정하였다.
HS68 cells were plated at 1 x 10 < 5 > cells / mL , And then cultured in a CO 2 incubator for 24 hours. Then, the medium was removed, and 500 μl of PBS was added. The plate was irradiated with UVC (254 nm) at a distance of 650 mm for 1 minute and 20 seconds. After irradiation with UVC, the serum-free DMEM medium, the monocotyledonous extract and the fractions thereof were treated for each concentration and cultured for 48 hours. After incubation, 50 μl of MTT reagent was added and left for 3 hours. After removing the supernatant, 100 μl of DMSO (dimethyl sulfoxide) was added to the formed formazan, and the absorbance was measured at 570 nm for 30 minutes.

실시예Example 1.  One. 단풍취A single blow 추출물 및 이의  Extract and its 분획물Fraction 처리에 따른 세포독성Cytotoxicity by treatment 및 피부 재생 효과  And skin regeneration effect

본 실시예 1에서는 단풍취 추출물 및 이의 분획물을 농도별로 HS68 세포에 처리하여 세포독성을 확인하였다. 그 결과, 도 1에 개시한 바와 같이 100㎍/㎖의 헥산 분획물 및 100㎍/㎖의 에틸아세테이트 분획물을 제외한 단풍취 에탄올 추출물및 분획물들을 처리하였을 때, 세포 생존율이 크게 감소하지 않아 세포독성이 없는 것을 확인할 수 있었다. 또한, 단풍취 추출물 및 이의 분획물의 피부재생 효과를 확인한 결과, 100㎍/㎖의 단풍취 에탄올 추출물을 처리한 경우 UV 조사로 인해 감소된 피부 재생능이 증가되었으며, 분획물들 중에 에틸 아세테이트 분획물(20 및 50㎍/㎖)을 처리하였을 때, UV 처리로 인해 감소된 피부 재생능이 증가하는 것을 확인할 수 있었다(도 2).
In this Example 1, the extract of the single-puff extract and its fractions were treated with HS68 cells at different concentrations to confirm cytotoxicity. As a result, it was found that, when treated with the extracts and fractions of cutwax leaves other than 100 μg / ml of hexane fraction and 100 μg / ml of ethyl acetate fraction as shown in FIG. 1, cell survival rate was not significantly decreased, I could confirm. As a result of examining the skin regeneration effect of the extract from the leaves and the fractions thereof, it was found that when ethanol extract of 100 .mu.g / ml was treated with ethanol extract, the skin regeneration ability decreased due to UV irradiation and the ethyl acetate fraction / Ml), it was confirmed that the reduced skin regeneration ability was increased by the UV treatment (FIG. 2).

실시예Example 2. 효소 처리 및 초고압  2. Enzyme treatment and ultrahigh pressure 균질화Homogenization 공정을 거쳐 제조된  Processed 단풍취A single blow 추출물의 피부 재생 효과 Skin regeneration effect of extract

본 실시예 2에서는 피부 섬유아세포에 자외선 조사처리한 후, 상기 제조한 단풍취 에탄올 추출물과 효소 종류별 처리, 초고압 균질화 유무 및 효소 처리+초고압 균질화 병행 처리에 따라 제조된 단풍취 추출물들의 피부 재생 효과를 비교하였다. 그 결과, 하기 표 1 에 개시한 바와 같이 단풍취 에탄올 추출물(77.10±2.88) 및 펙티넥스 효소를 처리하여 제조된 단풍취 추출물(Pectinex; 78.15±4.70)을 각각 처리하였을 때, UV 처리로 인해 감소되었던 피부 재생능이 증가하였으며, 특히 비스코자임(Viscozyme) 효소 처리 후 초고압 균질을 병행하여 제조된 단풍취 추출물(Vis+초고압 균질; 80.57±2.37)의 경우, 피부 재생능이 현저하게 우수한 것을 확인할 수 있었다(도 3).In Example 2, the skin regeneration effects of the single-bladed-ventilation ethanol extracts prepared according to the enzymatic type treatment, the presence / absence of ultra-high pressure homogenization, and the combined treatment with the enzyme treatment + ultra-high pressure homogenization were compared . As a result, as shown in Table 1, when treated with the ethanol extract of monocotyledonous bacterium (77.10 ± 2.88) and the monodods extract (Pectinex; 78.15 ± 4.70) prepared by treating pectinex enzyme, (Vis + ultrahigh pressure homogenisation: 80.57 +/- 2.37), which was prepared by using Viscozyme enzyme treatment and ultrahigh pressure homogenization in parallel, was remarkably superior in skin regeneration ability (FIG. 3).

단풍취 추출물(100㎍/㎖) 처리에 따른 피부 재생능 측정결과The result of measuring the skin regeneration ability by treatment with the single blight extract (100 μg / ml) 처리방법Processing method 피부 재생능(%)Skin regeneration (%) NO UVNO UV 100100 UVUV 55.24±1.0255.24 + - 1.02 에탄올 추출물Ethanol extract 77.10±2.8877.10 ± 2.88 ViscozymeViscozyme 72.19±3.1072.19 ± 3.10 PectinexPectinex 78.15±4.7078.15 + - 4.70 초고압 균질Ultrahigh pressure homogeneity 74.75±6.1374.75 ± 6.13 Viscozyme+초고압 균질Viscozyme + ultrahigh pressure homogeneity 80.57±2.3780.57 + - 2.37 Pectinex+초고압 균질Pectinex + ultrahigh pressure homogeneity 53.61±2.9253.61 ± 2.92

Claims (7)

단풍취(Ainsliaea acerifolia) 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 피부 재생용 화장료 조성물로서, 상기 추출물은 단풍취 분말에 펙티넥스(Pectinex)를 첨가하여 가수분해한 후 에탄올 추출하여 제조한 추출물이거나; 또는 단풍취 분말에 비스코자임(Viscozyme)을 첨가하여 가수분해한 후 에탄올 추출하고 초고압 균질화하여 제조한 추출물이고, 상기 분획물은 단풍취 에탄올 추출물의 에틸 아세테이트 분획물인 것을 특징으로 하는 피부 재생용 화장료 조성물.A cosmetic composition for regenerating skin comprising an extract of Ainsliaea acerifolia or a fraction thereof as an active ingredient, wherein the extract is an extract prepared by adding Pectinex to a pale breeze powder and hydrolyzing it after ethanol extraction; Or viscose is added to monodisperse powder to hydrolyze, followed by ethanol extraction and ultra-high pressure homogenization. The fraction is an ethylacetate fraction of ethanol extract A cosmetic composition for skin regeneration. 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 스킨, 스킨 소프트너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐로션, 영양로션, 마사지크림, 영양크림, 아이 크림, 모이스쳐 크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 클렌징폼, 클렌징 워터, 클렌징 로션, 클렌징 크림, 바디로션, 바디클렌져, 비누 및 파우더로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형으로 제조되는 것을 특징으로 하는 피부 재생용 화장료 조성물.The cosmetic composition according to claim 1, wherein the cosmetic composition is at least one selected from the group consisting of a skin, a skin softener, a skin toner, an astringent, a lotion, a milk lotion, a moisturizing lotion, a nutrition lotion, a massage cream, The cosmetic composition for skin regeneration according to any one of claims 1 to 3, wherein the composition is one selected from the group consisting of an essence, a pack, a cleansing foam, a cleansing water, a cleansing lotion, a cleansing cream, a body lotion, a body cleanser, a soap and a powder. 제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온 봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 중에서 선택된 하나 이상의 보조제를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 재생용 화장료 조성물.The cosmetic composition according to claim 1, wherein the cosmetic composition comprises at least one of a fatty substance, an organic solvent, a solubilizing agent, a thickening agent and a gelling agent, a softening agent, an antioxidant, a suspending agent, a stabilizer, a foaming agent, a perfume, Or one or more adjuvants selected from nonionic emulsifiers, fillers, sequestering and chelating agents, preservatives, vitamins, blocking agents, wetting agents, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic active agents, Wherein the cosmetic composition is a cosmetic composition for skin regeneration.
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