KR20110108687A - Skin whitening agent containing extracts of natural materials and composition of cosmetic - Google Patents

Skin whitening agent containing extracts of natural materials and composition of cosmetic Download PDF

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KR20110108687A
KR20110108687A KR20100028037A KR20100028037A KR20110108687A KR 20110108687 A KR20110108687 A KR 20110108687A KR 20100028037 A KR20100028037 A KR 20100028037A KR 20100028037 A KR20100028037 A KR 20100028037A KR 20110108687 A KR20110108687 A KR 20110108687A
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김동명
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Abstract

본 발명에 따른 미백제는 천연 원료로부터 추출한 추출물을 효소 처리 내지 효소 처리된 추출물을 유산균 또는 특정 미생물로 생물전환시켜 얻은 가공 추출물들로 이루어져 있어서, 티로시나제 효소 저해 활성 및 세포내 멜라닌 생합성 억제 등의 미백 효과뿐만 아니라, 자유 라디칼 소거 능력, 산화적 스트레스에 환경에 처한 세포의 면역활성(재생 효과) 증가 및 노화[또는, 아포토시스(apoptosis)]를 유발하는 것으로 알려진 단백질의 발현을 억제하는 기능 등의 높은 항산화 활성을 가진다. Whitening agents according to the present invention, the whitening effect, such as in made up of processing the extract obtained by biotransformation to extract the enzyme treatment to the enzyme-treated extract is extracted from natural sources by lactic acid bacteria or certain microorganisms, tyrosinase enzyme-inhibiting activity and intracellular melanin biosynthesis inhibiting in addition, free-radical scavenging ability, high in antioxidants, such as oxidative stress, immune activity of the cells facing the environment (regeneration effect) increase and aging [or, apoptosis (apoptosis)] the function of suppressing the expression of the known protein to cause It has the activity. 아울러 천연 원료로부터 추출되어 인체 피부에 대해 안전하고 급성 경구 독성이 없다. In addition, it extracted from natural sources safe and there is no acute oral toxicity on human skin. 또한, 효소 처리에 의해 탈색 및 탈취되고, 특정 유산균 또는 특정 미생물에 의해 생물전환된 가공 추출물들을 유효성분으로 포함하는 미백제는 제조 과정에서 고형 분말 형태, 액상 형태, 또는 에멀젼 형태로 쉽게 제조가 가능하다. In addition, the bleaching and deodorizing by an enzyme treatment, a whitening agent containing the biological in a conversion processing extracts by certain lactic acid bacteria, or particular microorganisms as the active ingredient is easy to be produced is available in the manufacture of a solid powder form and liquid form, an emulsion form . 또한, 본 발명에 따른 복합 천연 미백제는 다른 성분과의 양립성이 뛰어나 화장료 조성물 등의 제조시 제형상 매우 안정하다. In a composite according to the present invention, the whitening agent is natural shape when the highly stable production of the excellent compatibility with the other components of the cosmetic composition.

Description

천연 원료 추출물을 포함하는 미백제 및 이를 포함하는 화장료 조성물{Skin whitening agent containing extracts of natural materials and composition of cosmetic} A cosmetic composition comprising a whitening agent, and it comprises a natural material extract {Skin whitening agent containing extracts of natural materials and composition of cosmetic}

본 발명은 미백제 및 이의 용도에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 바이오스크리닝에 의해 선별된 천연 원료로부터 추출된 추출을 효소 처리 내지 효소 처리된 추출물을 발효 처리하여 얻은 가공 추출물을 포함한 미백제 및 이의 화장료 첨가제로서의 용도에 관한 것이다. The invention as a whitening agent, and relates to their use, more particularly, including the processing extract obtained an extract extracted from a natural source selected by treating the fermentation the enzyme treatment to the enzyme-treated extract by the bio-screening whitening agents and their cosmetic additives It relates to the application.

현대인은 자외선, 인스턴트 가공식품, 공해 등의 유해물질, 스트레스 등으로 인해 체내 발생하는 산화물질로 각종 질병의 위험에 노출되어 있다. Modern people are at risk for various diseases with antioxidants to the body caused by ultraviolet rays, and instant foods, harmful substances, such as pollution and stress. 특히, 자외선에 의한 피부의 손상은 피부노화, 흑반 등을 일으켜, 미용상의 불편뿐만 아니라 심리적인 위축감을 가져와 사회생활에 있어 부정적인 영향을 주게 되며, 심하게는 피부암과 같은 질환에 이르는 문제를 야기하게 된다. In particular, damage to the skin caused by UV light is have a negative impact on social life causes such as aging, heukban, as well as the inconvenience of cosmetic Bring the psychological wichukgam, worse, will cause problems leading to diseases such as skin cancer . 이러한 문제를 해결하는 방법으로 적절한 자외선 차단제를 함유한 화장료의 사용 이외에도 자외선으로부터 생성되는 산화물질의 활성을 억제하여 피부의 손상을 억제하고, 세포내 멜라닌 생성을 차단하는 물질의 사용을 들 수 있다. In addition to the use of a cosmetic composition containing a suitable sunscreen as a way to solve this problem, there may be mentioned the use of a substance to inhibit the activity oxide query is generated from the ultraviolet light to inhibit the damage to the skin, to block the intracellular melanin production. 따라서 최근에는 이러한 문제점을 예방 및 개선하기 위한 신규 원료 및 제품 개발이 활발하게 진행되고 있다. Therefore, in recent years it has been going to the new raw material and product development to prevent and solve these problems actively.

자외선에 의해 일어나는 피부 현상 중 직접적인 영향으로 인한 화상 등의 피부손상 이외에도 자외선으로 인해 체내 생성되는 산화물질, 즉 활성산소에 의한 2차적인 현상들이 지속적으로 체내에서 이루어질 경우, 더 큰 문제를 발생시킬 수 있다. Case of skin symptoms caused by the ultraviolet rays in addition to skin damage to the image or the like due to the direct impact body due to ultraviolet rays generated oxide materials, that is a secondary phenomena caused by free radicals to continue to be made in the body, can generate a greater problem have. 피부 내 형성된 활성산소는 세포의 DNA 손상 및 이에 따른 면역세포의 손상, DNA 복제 및 회복 기능의 손상으로 인한 돌연변이 세포의 발생, 홍반 반응으로 인한 각질세포 변형을 일으키며, 결과적으로 피부 세포의 사멸과 광노화 진행을 발생시킨다. Active oxygen formed within the skin causes DNA damage in cells and thus the damage to the immune cells, DNA replication and occurs due to damage to the mutant cells of the recovery function, keratinocyte strain caused by the erythema reaction in accordance with, as a result, apoptosis and photoaging of skin cells It generates progress. 또한 색소 생성 세포를 자극하여 멜라닌 색소를 생성하여 색소 침착을 일으키는 원인이 된다. Also cause pigmentation to stimulate the pigment-producing cells generate melanin pigment. 피부 세포 내의 신호 전달 물질의 발현으로 나타나는 멜라닌 형성과정에 있어서, 자외선에 의해 발생된 활성산소에 의해 비정상적인 염증 물질이 케라티노사이트(Keratinocyte)에서 발현되며, 발현된 염증유발 물질은 멜라닌 생성세포인 멜라노사이트(Melanocyte)를 활성화시켜 멜라노좀(Melanosome) 내 멜라닌의 합성을 촉진시킨다. In the melanin formation process represented by the expression of signaling molecules in the skin cells, is expressed in an active abnormal inflammatory substances by oxygen keratinocytes (Keratinocyte) generated by the ultraviolet light, the expressed pro-inflammatory substances are melanin-producing cells in melanoma activating the site (melanocyte) promotes the synthesis of melanin, in a bit (Melanosome) melanoma. 또한 티로시나제(Tyrosinase) 및 TRP-1(Tyrosinase related protein-1), TRP-2 효소와 이들의 역할에 대한 연구가 진행되어짐에 따라 멜라닌 합성에서 이들의 활성을 억제하거나 발현을 저해하는 효과를 나타내는 물질의 연구가 활발히 진행되고 있다. In addition, material that exhibits the effect of suppressing or inhibiting the expression of the tyrosinase (Tyrosinase) and TRP-1 (Tyrosinase related protein-1), TRP-2 enzyme and their activity in melanin synthesis according to doeeojim research is in progress for their role It has become a research actively.

현재 미백 화장료로 사용되고 있는 하이드로퀴논(Hydroquinone), 아스코르브산(Ascorbic acid), 코직산(Kojic acid), 글루타치온, 알부틴(Arbutin) 등의 경우, 근본적인 원인이 되는 활성산소의 활성 억제가 아닌 멜라닌 색소의 생성 억제 또는 제거에 초점이 맞추어져 있어, 근본적인 해결방법이 될 수 없을뿐더러, 아스코르브산, 코직산, 글루타치온 등은 피부 흑색화나 피부병의 치료에 사용되어 왔지만, 피부의 안전성과 화장료 제형의 안정성에 문제점을 가지고 있어 그 사용이 제한되어 왔다. Generated in the case such as the present hydroquinone (Hydroquinone) being used as whitening cosmetic, ascorbic acid (Ascorbic acid), kojic acid (Kojic acid), glutathione, arbutin (Arbutin), not the inhibition of active oxygen to be the root cause melanin it is focused on the suppression or removal, nor it can not be a fundamental solution method, ascorbic acid, kojic acid, glutathione and the like has been used in the treatment of dermatological skin black mad, it has a problem in stability of the skin safety and cosmetic formulations There has been its use is limited. 또한 하이드로퀴논은 피부 자극성 있고, 아스코르브산은 광, 열에 대한 안정성의 문제와 사용 비용이 높으므로 제품 적용 시 제품 안정성 및 사용상에 어려움이 있었다. In addition, hydroquinone and skin irritation, ascorbic acid is light, because the problem of the stability and the high cost of using the heat was difficult for product stability and usability when applying the product.

따라서 피부에 손상을 주는 근본적인 원인인 활성산소를 제거하는 항산화효과와 미백효과를 두루 가지면서 안전한 신규 원료 및 이를 이용한 제품 개발이 필요한 실정이다. So that is the root cause of damage to the skin while throughout all kinds of antioxidant and whitening effect of removing active oxygen situation requiring secure raw materials and new products using the same development.

본 발명은 종래의 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로서, 본 발명의 일 목적은 종래의 미백제에서 나타난 부작용을 줄여 인체에 안전하고, 높은 미백 효과 및 제형상의 안정성 및 재연성을 가지며 동시에 뛰어난 항산화 활성을 가진 복합 천연 미백제를 제공하는데에 있다. The present invention is the work object of the present invention reduce the side effects seen in conventional whitening agent is safe to human body, has high whitening effect and the reliability and reproducibility of the shape excellent antioxidant activity at the same time as having been made in view of solving the conventional problems to provide it with a complex of natural whitening agent. 또한, 본 발명은 상기의 미백제의 화장료 첨가제로서의 용도를 제공하는데에 다른 목적이 있다. In addition, the present invention has a further object to provide a cosmetic composition for use as additives of said whitening agent.

상기의 목적을 해결하기 위하여, 본 발명의 발명자들은 식물 기원의 천연물 약 2500여종에 대해 항산화 활성에 대한 바이오스크리닝(Bioscreening)을 통해, 후보 물질로 칡, 콩나물 , 파래 , 표고버섯, 능이버섯, 호장근, 황금, 황백, 황연, 두향엽, 브로커리, 산초, 삼백초, 어성초, 싸리, 세신, 소리쟁이, 솔잎, 쇠무릎 뿌리, 인진쑥, 미나리, 생강, 독활, 야콘, 오미자, 인동초, 자몽, 장생 도라지, 저령, 적채, 질경이, 차조기, 참쑥, 목단피, 가자, 감초, 강향, 고삼, 석곡, 고수, 관중, 구맥, 구절초, 꾸지뽕, 금령자, 금앵자, 길경, 만가닥, 단삼, 당유자, 라벤더, 로즈마리, 마늘, 감태, 민들레, 백지 및 복령을 선별하고 이들 추출물의 효소 처리 내지 효소 처리된 추출물을 발효 처리시켜 얻은 가공 추출물의 조합에 따른 미백 효능 및 항산화 효능 등을 통해 본 발명을 In order to solve the above-mentioned object, the inventors of the present invention through a Bio-screening (Bioscreening) for the antioxidant activity to about 2,500 species of natural products of plant origin, arrowroot, bean sprouts, green laver, shiitake mushrooms, mushrooms capability, the call to the candidate substance muscle, golden, yellowish, chrome yellow, duhyang cute, beurokeori, Sancho, three hundred seconds, Houttuynia cordata, Hagi, slender, curly dock, pine needles, soemureup roots, injinssuk, parsley, ginger, Aralia cordata, yacon, Schisandra, indongcho, grapefruit, Jang bellflower, jeoryeong, Stack, plantain, basil, chamssuk, mokdanpi, let's go, licorice, ganghyang, Sophora, seokgok, coriander, spectators, gumaek, gujeolcho, kkujippong, geumryeongja gold aengja, gilgyeong, only strands, Salvia, citron party, lavender, rosemary , the present invention through the garlic, Ecklonia cava, dandelion, selecting a blank and Poria cocos, and whitening effect and antioxidant effect of the combination of the extract obtained by processing the fermentation process the enzyme treatment to the treated enzyme extract of these extracts, such as 성하였다. Castle was.

본 발명의 상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 칡 추출물, 콩나물 추출물, 파래 추출물, 표고버섯 추출물, 능이버섯 추출물, 호장근 추출물, 황금 추출물, 황백 추출물, 황연 추출물, 두향엽 추출물, 브로커리 추출물, 산초 추출물, 삼백초 추출물, 어성초 추출물, 싸리 추출물, 세신 추출물, 소리쟁이 추출물, 솔잎 추출물, 쇠무릎 뿌리 추출물, 인진쑥 추출물, 미나리 추출물, 생강 추출물, 독활 추출물, 야콘 추출물, 오미자 추출물, 인동초 추출물, 자몽 추출물, 장생 도라지 추출물, 저령 추출물, 적채 추출물, 질경이 추출물, 차조기 추출물, 및 참쑥 추출물로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 추출물과, 목단피 추출물, 가자 추출물, 감초 추출물, 강향 추출물, 고삼 추출물, 석곡 추출물, 고수 추출물, 관중 추출물, 구맥 추출물, 구절초 추출물, In order to achieve the above object, the invention kudzu extract, bean sprouts extract, laver extract, shiitake mushroom extract, mushroom ability extract, No. muscle extract, Gold extract, yellowish extract, chrome yellow extract, duhyang leaf extract, beurokeori extract, Japanese pepper extract, Houttuynia cordata extract, Houttuynia cordata extract, bush clover extract, slender extract, curly dock extract, pine needle extract, soemureup root extract, injinssuk extract, parsley extract, ginger extract, Aralia cordata extract, yacon extract, Schisandra extract, indongcho extract, grapefruit extract, Jang Saeng Doraji extract, jeoryeong extract, Stack extract, plantain extract, perilla extract, and chamssuk extract one or more extracts selected from the group consisting of and, mokdanpi extract, let extract, licorice extract, ganghyang extract, Sophora flavescens extract, seokgok extract, coriander extract, extract, spectators, gumaek extract, gujeolcho extract, 꾸지뽕 추출물, 금령자 추출물, 금앵자 추출물, 길경 추출물, 만가닥 추출물, 단삼 추출물, 당유자 추출물, 라벤더 추출물, 로즈마리 추출물, 마늘 추출물, 감태 추출물, 민들레 추출물, 백지 추출물 및 복령 추출물로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 추출물을 포함하는 제1 복합 추출물의 글리코시다아제 처리에 의해 얻은 제2 복합 추출물을 유효성분으로 포함하는 미백제를 제공한다. Is selected from the kkujippong extract, geumryeongja extract gold aengja extract, gilgyeong extract, only strands extract, Salvia miltiorrhiza extract, per citron extract, lavender extract, rosemary extract, garlic extract, Ecklonia cava extract, dandelion extract, the group consisting of white paper extract and Poria cocos extract It provides the whitening agent comprises a second composite extract obtained by glycosidase treatment of the first extract compound containing one or more extract as an active ingredient. 또한, 본 발명은 상기 제2 복합 추출물을 유산균 또는 특정 미생물로 생물전환시켜 얻은 제3 복합 추출물을 유효성분으로 포함하는 미백제를 제공한다. The present invention also provides the whitening agent comprises a third composite extract obtained by biotransformation of the second compound to extract lactic acid or specific microorganisms as an active ingredient. 본 발명에 따른 미백제는 티로시나제 효소 저해 활성 및 세포내 멜라닌 생합성 억제 등의 미백 효과뿐만 아니라, 자유 라디칼 소거 능력, 산화적 스트레스에 환경에 처한 세포의 면역활성(재생 효과) 증가 및 노화[또는, 아포토시스(apoptosis)]를 유발하는 것으로 알려진 단백질의 발현을 억제하는 기능 등의 높은 항산화 활성을 가진다. Whitening agents according to the invention tyrosinase enzyme-inhibiting activity and intracellular melanin biosynthesis as well as a whitening effect, such as inhibiting free radical scavenging ability, immune activity (regeneration effect) of the cell facing the environment oxidative stress increase and aging [or, Apoptosis has a high antioxidant activity, such as (apoptosis)] caused the function to suppress the expression of proteins known as. 본 발명에 따른 미백제는 고형 분말 형태, 에멀전 형태, 또는 액상 형태 등 다양한 형태로 존재할 수 있으며, 보관 안정성 및 취급의 용이성을 고려할 때 에멀젼 형태인 것이 바람직하다. Whitening agents according to the present invention can exist in a variety of forms such as solids in powder form, emulsion form, or liquid form, preferably in the form of emulsion, considering the ease of storage and handling stability. 본 발명에 따른 에멀젼 형태의 미백제 제조방법을 살펴보면 일 예로 제2 복합 추출물 또는 제3 복합 추출물에 유상 매질 및 유화 안정제를 첨가하고 전단력을 가하여 에멀젼화하고 나노 분산 시키는 단계;를 포함한다. Looking at the screen whitening agent preparation of emulsion according to the invention In one embodiment the second compound or extract the third addition of oil phase and emulsion stabilizer in the medium combined extracts were added to the emulsion and shear forces comprising nano-dispersion; includes.

본 발명의 상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 칡, 콩나물 , 파래 , 표고버섯, 능이버섯, 호장근, 황금, 황백, 황연, 두향엽, 브로커리, 산초, 삼백초, 어성초, 싸리, 세신, 소리쟁이, 솔잎, 쇠무릎 뿌리, 인진쑥, 미나리, 생강, 독활, 야콘, 오미자, 인동초, 자몽, 장생 도라지, 저령, 적채, 질경이, 차조기, 및 참쑥으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상과 목단피, 가자, 감초, 강향, 고삼, 석곡, 고수, 관중, 구맥, 구절초, 꾸지뽕, 금령자, 금앵자, 길경, 만가닥, 단삼, 당유자, 라벤더, 로즈마리, 마늘, 감태, 민들레, 백지 및 복령으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 포함하는 추출 원료로부터 용매 추출법, 또는 초임계 추출법에 의해 미백 활성 성분을 포함하는 추출물을 수득하는 단계; In order to achieve the above object, the invention arrowroot, bean sprouts, green laver, shiitake mushrooms, mushrooms capability, No. muscle, golden, yellowish, chrome yellow, duhyang lobe beurokeori, Japanese pepper, Houttuynia cordata, Houttuynia cordata, bush clover, slender, sound ivy, pine needles, soemureup roots, injinssuk, parsley, ginger, Aralia cordata, yacon, Schizandra, indongcho, grapefruit, Jang Saeng Doraji, jeoryeong, Stack, at least one selected from psyllium, the group consisting of perilla, and chamssuk and mokdanpi, go, from licorice, ganghyang, Sophora flavescens, seokgok, coriander, spectators, gumaek, gujeolcho, kkujippong, geumryeongja gold aengja, gilgyeong, only strands, Salvia miltiorrhiza, per owner, lavender, rosemary, garlic, Ecklonia cava, dandelion, white paper, and the group consisting of Poria cocos from the extraction raw material including a selected one or more to obtain an extract containing a bleaching active ingredient by solvent extraction, or supercritical extraction; 상기 미백 활성 성분을 포함하는 추출물에 글리코시다아제를 첨가하고 반응시켜 효소 처리하는 단계; The method comprising the extract glycosidase was added, and the kinase reaction in the enzyme treatment, including the whitening active ingredient; 상기 효소 처리된 추출물을 여과하여 추출액과 잔여 추출 원료 고형물로 분리하는 단계; The method comprising isolated by filtration to extract liquid and the residual solids extracted raw material the enzyme-treated extract; 상기 분리된 추출액을 농축시켜 제2 복합 추출물을 수득하는 단계; Step of concentrating the extract to give the separated complex to a second extract; 를 포함하는 미백제의 제조방법을 제공한다. A provides a process for the preparation of the whitening agent comprises. 또한, 본 발명은 상기 제2 복합 추출물을 유산균 배지 또는 특정 미생물 배지와 혼합한 혼합물을 형성하는 단계; In addition, the present invention includes forming a composite of the second extract, lactic acid bacteria medium or medium and a mixture of a particular microorganism mixture; 상기 혼합물에 유산균 또는 특정 미생물을 접종하고 발효시켜 제2 복합 추출물을 생물전환 시키는 단계; Subjecting the second composite extract was inoculated and fermented with lactic acid bacteria or a specific microorganism in the biological conversion mixture; 및 상기 생물 전환된 제2 복합 추출물을 여과시켜 제3 복합 추출물을 수득하는 단계;를 더 포함하는 미백제의 제조방법을 제공한다. It provides a process for the preparation of a whitening agent further comprising: a; and to obtain a third composite extract by filtering the bioconversion the second composite extract.

본 발명의 상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 상기의 미백제를 포함하는 화장료 조성물을 제공한다. In order to achieve the above object of the present invention, there is provided a cosmetic composition comprising the above-whitening agent. 또한, 본 발명의 미백제는 화장료 조성물 외에 사료 조성물, 식품 조성물 또는 의약 조성물에도 적용될 수 있다. Further, the whitening agent of the present invention can be applied to a food composition, a food composition or a pharmaceutical composition in addition to the cosmetic composition. 본 발명의 미백제는 미백 효과뿐만 아니라, 자유 라디칼 소거능, 노화 억제 활성, 및 산화적 스트레스를 받은 세포의 재생 등의 항산화 효과를 가지므로, 화장료 첨가제, 사료 첨가제, 식품 첨가제, 또는 의약 첨가제로 사용되는 경우 각 제품에 피부 미백 기능뿐만 아니라, 항산화 활성에 의한 건강 기능을 부여할 수 있다. Whitening agent of the present invention because of the antioxidant activity, such as not only whitening effect, free radical scavenging, anti-aging inhibitory activity, and oxidative stress in the reproduction of received cells, a cosmetic additive, feed additive, to be used as a food additive, or a medicine additive If the skin whitening, as well as each product can be given to healthy function of the antioxidant activity.

본 발명에 따른 미백제는 천연 원료로부터 추출한 추출물을 효소 처리 내지 효소 처리된 추출물을 유산균 또는 특정 미생물로 생물전환시켜 얻은 가공 추출물들로 이루어져 있어서, 티로시나제 효소 저해 활성 및 세포내 멜라닌 생합성 억제 등의 미백 효과뿐만 아니라, 자유 라디칼 소거 능력, 산화적 스트레스에 환경에 처한 세포의 면역활성(재생 효과) 증가 및 노화[또는, 아포토시스(apoptosis)]를 유발하는 것으로 알려진 단백질의 발현을 억제하는 기능 등의 높은 항산화 활성을 가진다. Whitening agents according to the present invention, the whitening effect, such as in made up of processing the extract obtained by biotransformation to extract the enzyme treatment to the enzyme-treated extract is extracted from natural sources by lactic acid bacteria or certain microorganisms, tyrosinase enzyme-inhibiting activity and intracellular melanin biosynthesis inhibiting in addition, free-radical scavenging ability, high in antioxidants, such as oxidative stress, immune activity of the cells facing the environment (regeneration effect) increase and aging [or, apoptosis (apoptosis)] the function of suppressing the expression of the known protein to cause It has the activity. 아울러 천연 원료로부터 추출되어 인체 피부에 대해 안전하고 급성 경구 독성이 없다. In addition, it extracted from natural sources safe and there is no acute oral toxicity on human skin. 또한, 효소 처리에 의해 탈색 및 탈취되고, 특정 유산균 또는 특정 미생물에 의해 생물전환된 가공 추출물들을 유효성분으로 포함하는 미백제는 제조 과정에서 고형 분말 형태, 액상 형태, 또는 에멀젼 형태로 쉽게 제조가 가능하다. In addition, the bleaching and deodorizing by an enzyme treatment, a whitening agent containing the biological in a conversion processing extracts by certain lactic acid bacteria, or particular microorganisms as the active ingredient is easy to be produced is available in the manufacture of a solid powder form and liquid form, an emulsion form . 또한, 본 발명에 따른 복합 천연 미백제는 다른 성분과의 양립성이 뛰어나 화장료 조성물 등의 제조시 제형상 매우 안정하다. In a composite according to the present invention, the whitening agent is natural shape when the highly stable production of the excellent compatibility with the other components of the cosmetic composition.

도 1은 제2 복합 추출물(위쪽)과 제3 복합 추출물(아래쪽)의 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC) 분석 결과를 나타낸 것이다. Figure 1 shows the second composite extract (top) and a third combined extracts high performance liquid chromatography (HPLC) of the (bottom) of the analysis.
도 2는 본 발명의 제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제의 자유 라디칼 소거능을 나타낸 것이다. Figure 2 illustrates the free radical scavenging activity of the natural compound whitening agent prepared in Preparation Example 9 of the present invention.
도 3은 본 발명의 제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제에 의한 세포 재생 효과를 나타낸 형광 현미경 사진이다. 3 is a fluorescence micrograph showing the cell regeneration effect of the natural compound whitening agent prepared in Preparation Example 9 of the present invention.
도 4은 본 발명의 제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제에 의한 노화 유발 단백질의 발현 억제 효과를 나타낸 웨스턴 블랏 사진이다. Figure 4 is a Western blot photograph showing the expression of inhibitory effects of aging caused by the protein complex natural whitening agent prepared in Preparation Example 9 of the present invention.

본 발명의 일 측면은 천연 원료로부터 추출한 추출물들을 포함하는 미백제 및 이의 제조방법에 관한 것이다. One aspect of the invention relates to a whitening agent and a method comprising extracts extracted from natural sources.

본 발명의 미백제는 2종 이상의 천연 원료부터 추출한 추출물을 포함하는 제1 복합 추출물을 글리코시다아제로 처리하여 얻은 제2 복합 추출물 또는 상기 제2 복합 추출물을 유산균 또는 특정 미생물로 생물전환시켜 얻은 제3 복합 추출물을 유효성분으로 포함한다. Whitening agent of the present invention includes a obtained by biotransformation in the second composite extract or wherein the second composite extract lactic acid or specific microorganisms obtained by treating the first complex extract containing the extracted extracts from natural raw materials of two or more as a glycosidase 3 It includes a complex extract as an active ingredient. 이하, 본 발명에 따른 미백제 및 그 제조방법을 제1 복합 추출물, 제2 복합 추출물 및 제3 복합 추출물로 나누어 기술한다. Hereinafter be described by dividing the whitening agent and a method of manufacturing the same according to the present invention with a first compound extract, the second extract, and a third compound complex extract.

제1 복합 추출물 First composite extract

본 발명에 따른 제1 복합 추출물은 일 예로 칡 추출물, 콩나물 추출물, 파래 추출물, 표고버섯 추출물, 능이버섯 추출물, 호장근 추출물, 황금 추출물, 황백 추출물, 황연 추출물, 두향엽 추출물, 브로커리 추출물, 산초 추출물, 삼백초 추출물, 어성초 추출물, 싸리 추출물, 세신 추출물, 소리쟁이 추출물, 솔잎 추출물, 쇠무릎 뿌리 추출물, 인진쑥 추출물, 미나리 추출물, 생강 추출물, 독활 추출물, 야콘 추출물, 오미자 추출물, 인동초 추출물, 자몽 추출물, 장생 도라지 추출물, 저령 추출물, 적채 추출물, 질경이 추출물, 차조기 추출물, 및 참쑥 추출물로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 추출물과, 목단피 추출물, 가자 추출물, 감초 추출물, 강향 추출물, 고삼 추출물, 석곡 추출물, 고수 추출물, 관중 추출물, 구맥 추출물, 구절초 추출물, 꾸지뽕 First composite extract according to the invention kudzu extract an example, bean sprouts extract, laver extract, mushroom ability shiitake extract, extract, No. muscle extract, Gold extract, yellowish extract, chrome yellow extract, duhyang leaf extract, beurokeori extract, Japanese pepper extract , Houttuynia cordata extract, Houttuynia cordata extract, bush clover extract, slender extract, curly dock extract, pine needle extract, soemureup root extract, injinssuk extract, parsley extract, ginger extract, Aralia cordata extract, yacon extract, Schisandra extract, indongcho extract, grapefruit extract, Jang bellflower extract, jeoryeong extract, Stack extract, plantain extract, perilla extract, and chamssuk least one extract selected from the group consisting of extracts and, mokdanpi extract, let extract, licorice extract, ganghyang extract, Sophora flavescens extract, seokgok extract, coriander extract, The crowd extract, gumaek extract, extract gujeolcho, kkujippong 출물, 금령자 추출물, 금앵자 추출물, 길경 추출물, 만가닥 추출물, 단삼 추출물, 당유자 추출물, 라벤더 추출물, 로즈마리 추출물, 마늘 추출물, 감태 추출물, 민들레 추출물, 백지 추출물 및 복령 추출물로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 추출물을 포함한다. Chulmul, geumryeongja extract gold aengja extract, gilgyeong extract, only strands extract, Salvia miltiorrhiza extract, per citron extract, lavender extract, rosemary extract, garlic extract, 1 is selected from the Ecklonia cava extract, dandelion extract, the group consisting of white paper extract and Poria cocos extract It includes at least one extract. 또한, 제1 복합 추출물은 두향엽 추출물, 삼백초 추출물, 어성초 추출물, 인진쑥 추출물, 및 선택적으로 감태 추출물을 포함한다. In addition, the first compound extract comprises duhyang leaf extract, Houttuynia cordata extract, Houttuynia cordata extract, injinssuk extract, and, optionally, Ecklonia cava extract.

또한, 제1 복합 추출물은 두향엽 추출물, 삼백초 추출물, 어성초 추출물, 및 인진쑥 추출물을 포함하며, 바람직하게는 상기 제1 복합 추출물은 감태 추출물을 더 포함한다. In addition, the first compound comprises an extract of duhyang leaf extract, Houttuynia cordata extract, Houttuynia cordata extract, and injinssuk extract, preferably the extract of the first composite further comprises Ecklonia cava extract. 제1 복합 추출물이 감태 추출물을 포함하는 경우 미백제의 미백 활성이 보다 증가한다. The increases than the bleaching activity of the whitening agent when the first composite extract containing the Ecklonia cava extract. 각 천연 원료로부터 추출된 각 추출물의 복합 추출물 내에서의 함량은 크게 제한되지 않으며, 일반적으로 두향엽 추출물 100 중량부를 기준으로 삼백초 추출물 20~200 중량부, 어성초 추출물 20~200 중량부, 인진쑥 추출물 20~200 중량부 및 선택적으로 감태 추출물 20~200 중량부를 포함한다. Content in the complex extracts of each extract extracted from the respective natural sources is not greatly limited, generally duhyang leaves extract 100 parts by weight of the Houttuynia cordata extract 20 to 200 parts by weight, Houttuynia cordata extract, 20 to 200 parts by weight, injinssuk extract 20 reference includes to 200 parts by weight and, optionally, Ecklonia cava extract, 20 to 200 parts by weight.

본 발명에 따른 제1 복합 추출물의 주 원료에 대한 설명은 다음과 같다. Description of the major component of the first combined extract according to the present invention are as follows. 어생초는 삼백초과에 속하는 다년생 초본으로, 한국과 일본에 주로 분포하며, 산속, 또는 그늘지고 물기가 많은 땅에서 자란다. Uh grazing is a perennial plant belonging to saururaceae, mainly distributed in Korea and Japan, grows in the mountains, or the shade of a large dry land is. 어성초란 잎에서 고기 비린내가 나기 때문에 붙여진 이름이다. Houttuynia cordata is a name given because of the smell of meat smoking in the leaves. 삼백초는 쌍떡잎식물 후추목 삼백초과의 여러해살이풀로서, 한국, 일본, 중국 등에 주로 분포하며, 습지에서 자란다. Three hundred seconds is a perennial dicotyledonous piperales saururaceae, mainly distributed in Korea, Japan, China, and grows in wetlands. 삼백초란 뿌리, 잎, 및 꽃이 흰색이기 때문에 붙여진 이름이다. Three hundred seconds is a name given because the roots, leaves, and flowers are white. 인진쑥은 쌍떡잎식물 초롱꽃목 국화과의 여러해살이풀로서, 한국, 일본, 중국 등에 주로 분포하며, 냇가의 모래땅에서 흔히 자란다. Injinssuk is a perennial dicotyledonous campanulales Asteraceae, mainly distributed in Korea, Japan, China, and is often grown in sandy soil of the creek. 두향엽은 쌍떡잎식물 진달래목 진달래과의 상록 소관목으로서 한국의 백두산, 일본, 시베리아 동부 등에 주로 분포하며, 높은 산의 숲 밑에서 자란다. Duhyang evergreen conifer is a list of competent dicotyledon ericales Ericaceae mainly distributed in South Korea Mt. Paektu, Japan, Eastern Siberia, grow under the high mountain forest. 감태는 갈조식물 다시마목 미역과의 여러해살이 해조로서, 한국의 남해안, 일본 등지에 주로 분포하며, 점심대(漸深帶)의 깊은 곳에서 자란다. Ecklonia cava is a perennial plant of the seaweed and kelp seaweed galjo plants, mainly distributed in the southern coast, South Korea and Japan, grows in the depths of the lunch for (漸 深 帶). 기타 다른 원료들은 설명을 생략한다. Other raw materials are not described.

본 발명에 따른 복합 추출물은 활성 물질로서 추출 원료에 포함되어 있는 다양한 항산화 활성 물질, 항균 활성 물질, 미백 활성 물질 등을 포함한다. Combined extract according to the present invention includes a variety of antioxidant active material that is included in the extracted material as the active substance, antibacterial active substances, active substances, such as bleaching. 활성 물질은 주로 플라보노이드(Flavonoid), 폴리페놀, 또는 테르펜(Terpene)이며, 구체적으로 퀘르시트린(quercitrin), 이소퀘르시트린(isoquercitrin), 퀘르세틴(Quercetin), 루틴(rutin), 미르센(myrcene), 미리세틴(miricetin), 씨놀(Seanol), 메틸-N-노넨(methyl-N-nonene), 바이칼린(baicalin), 바이칼레인(bacicalein) 등이 있으나, 여기에 국한되지 않는다. Active material is mainly flavonoids (Flavonoid), a polyphenol, or a terpene (Terpene), specifically, quercitrin (quercitrin), isopropyl quercitrin (isoquercitrin), quercetin (Quercetin), a routine (rutin), myrcene (myrcene), pre-paroxetine (miricetin), ssinol (Seanol), methyl nonene -N- (N-methyl-nonene), Baikal Lin (baicalin), Baikal lane (bacicalein) but include, but are not limited to this.

본 발명에 따른 제1 복합 추출물을 제조하는 방법은 칡, 콩나물 , 파래 , 표고버섯, 능이버섯, 호장근, 황금, 황백, 황연, 두향엽, 브로커리, 산초, 삼백초, 어성초, 싸리, 세신, 소리쟁이, 솔잎, 쇠무릎 뿌리, 인진쑥, 미나리, 생강, 독활, 야콘, 오미자, 인동초, 자몽, 장생 도라지, 저령, 적채, 질경이, 차조기, 및 참쑥으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상과 목단피, 가자, 감초, 강향, 고삼, 석곡, 고수, 관중, 구맥, 구절초, 꾸지뽕, 금령자, 금앵자, 길경, 만가닥, 단삼, 당유자, 라벤더, 로즈마리, 마늘, 감태, 민들레, 백지 및 복령으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 포함하는 추출 원료로부터 용매 추출법, 또는 초임계 추출법에 의해 미백 활성 성분을 포함하는 추출물을 수득하는 단계; A first method for producing a composite extract arrowroot, bean sprouts, green laver, shiitake mushrooms, mushrooms capability, No. muscle, golden, yellowish, chrome yellow, duhyang lobe beurokeori, Japanese pepper, Houttuynia cordata, Houttuynia cordata, bush clover, slender, sound according to the invention ivy, pine needles, soemureup roots, injinssuk, parsley, ginger, Aralia cordata, yacon, Schizandra, indongcho, grapefruit, Jang Saeng Doraji, jeoryeong, Stack, at least one selected from psyllium, the group consisting of perilla, and chamssuk and mokdanpi, go, from licorice, ganghyang, Sophora flavescens, seokgok, coriander, spectators, gumaek, gujeolcho, kkujippong, geumryeongja gold aengja, gilgyeong, only strands, Salvia miltiorrhiza, per owner, lavender, rosemary, garlic, Ecklonia cava, dandelion, white paper, and the group consisting of Poria cocos from the extraction raw material including a selected one or more to obtain an extract containing a bleaching active ingredient by solvent extraction, or supercritical extraction; 상기 미백 활성 성분을 포함하는 추출물을 여과하여 추출액과 잔여 추출 원료 고형물로 분리하는 단계;및 상기 분리된 추출액을 농축시켜 제1 복합 추출물을 수득하는 단계;를 포함한다. Separating the extract containing the whitening active ingredient by filtration to extract liquid and the residual solids extracted material; and a; and to obtain a first extract combined and concentrated to the separated extract.

또한, 본 발명에 따른 제1 복합 추출물을 제조하는 방법은 두향엽, 삼백초, 어성초, 인진쑥, 및 선택적으로 감태를 포함하는 추출 원료로부터 용매 추출법, 또는 초임계 추출법에 의해 미백 활성 성분을 포함하는 추출물을 수득하는 단계; In addition, a method for preparing a first composite extract according to the invention the extract comprising the duhyang lobe, Houttuynia cordata, Houttuynia cordata, injinssuk, and, optionally, solvent extraction from the extraction raw materials containing Ecklonia cava, or the second whitening active ingredient by critical extraction to obtain a; 상기 미백 활성 성분을 포함하는 추출물을 여과하여 추출액과 잔여 추출 원료 고형물로 분리하는 단계;및 상기 분리된 추출액을 농축시켜 제1 복합 추출물을 수득하는 단계;를 포함한다. Separating the extract containing the whitening active ingredient by filtration to extract liquid and the residual solids extracted material; and a; and to obtain a first extract combined and concentrated to the separated extract.

용매 추출법을 살펴보면, 사용되는 용매로는 물, 탄소수가 1 내지 5인 알코올, 에틸아세테이트, 클로로포름, 아세톤, 1,2-헥산디올, 1,3-부탄디올, 부틸렌글리콜 등을 사용할 수 있으며, 물과 나머지 용매 중에서 선택된 1종 이상을 혼합한 혼합용매의 사용도 가능하다. Looking at the solvent extraction method, the solvent used may be water, alcohols having 1 to 5 carbon, ethyl acetate, chloroform, acetone, 1,2-hexanediol, 1,3-butanediol, butylene glycol, water, and it may also be used for the rest of the solvent a mixture of at least one selected from a mixed solvent. 이 중 인체에 대한 유해성 등을 고려할 때 물, 탄소수가 1 내지 5인 알코올 또는 물과 탄소수가 1 내지 5인 알코올을 혼합시킨 혼합 용매인 것이 바람직하다. At this time of considering the hazards to the human body of water, it is preferable that the carbon number is in the mixed solvent is from 1 to 5 carbon atoms in the alcohol or water and a mixture of 1-5 alcohols. 용매 추출법의 추출 온도는 크게 제한되지 않으며, 바람직하게는 40~80℃인 것을 특징으로 한다. Extraction temperature of the solvent extraction method is not greatly limited, it is characterized in that preferably is in the 40 ~ 80 ℃. 추출 온도가 40℃ 미만이면 추출 속도 내지 추출 수율이 낮게 되며, 추출 온도가 80℃를 초과하면 추출된 활성 성분이 열에 의해 변형될 우려가 있기 때문이다. The extraction temperature is because there is a fear to be transformed by the low and is less than 40 ℃ extract extraction rate to yield, when the extraction temperature is higher than 80 ℃ the extracted active ingredients column. 또한, 추출 원료 대 추출 용매의 사용비는 크게 제한되지 않으며, 통상적으로 추출 원료 100 중량부를 기준으로 추출 용매는 약 300~1000 중량부를 사용한다. Further, the extraction ratio is not used and greatly limited the raw material for the extraction solvent, typically by extracting raw material based on 100 parts by weight of extraction solvent is used in an about 300 ~ 1000 parts by weight. 추출 시간은 통상적으로 약 1~3시간을 필요로 하나, 여기에 제한되는 것은 아니다. Extraction time is usually one needs about 1 to 3 hours, but is not limited to this.

또한, 본 발명에 따른 제1 복합 추출물은 바람직하게는 초임계 추출법에 의해 추출될 수 있다. In addition, the first compound extract according to the invention can be preferably extracted by the second extraction threshold. 초임계 추출법을 사용하는 경우 추출 수율이 용매 추출법보다 높고, 초임계 추출법에 의해 추출된 제1 복합 추출물은 용매 추출법에 의해 추출된 것보다 이취가 감소되고 액상 형태의 투명성이 증가(또는 색상의 크기가 감소)하는 특징을 가진다. Second extraction yield is higher than the solvent extraction When using the threshold extraction method, and second the first composite extract extracted by the threshold extraction method and odor is reduced than that extracted by a solvent extraction method, the transparency of the liquid form of increased (or color size It has a characteristic that the reduction). 초임계 추출법은 주용매인 이산화탄소 100 부피부에 대해 보조 용매가 1~20 중량부로 혼합된 것을 반응 매질로 사용하여, 이때 보조 용매는 디에틸아민 또는 트리에틸아민이 메탄올, 에탄올, 물, 1,2-헥산디올, 1,3-부탄디올, 부틸렌글리콜, 또는 이들의 혼합용매에 2~20 %(부피%, v/v)로 용해된 알카리성 공용매로 구성된다. Supercritical extraction is based on 100 parts by the main solvent of carbon dioxide and the co-solvent is used as the reaction medium, the mixing amount of 1 to 20 parts by weight, wherein the co-solvent is diethylamine or triethylamine, methanol, ethanol, water, 1, 2-hexanediol, 1,3-butanediol is, butylene glycol, or a 2-20% (vol%, v / v) in a mixed solvent composed of an alkali dissolved in a co-solvent. 초임계 추출시 추출 온도는 약 70~90℃이고 추출 압력은 약 4000~6000 PSI이다. Supercritical extract from the extraction temperature is about 70 ~ 90 ℃ and extraction pressure is about 4000 ~ 6000 PSI.

용매 추출법 또는 초임계 추출법에 의해 추출된 추출물들은 기공 크기가 마이크로미터 단위인 여과포 또는 여과지에 의해 추출액과 잔여 추출 원료 고형물로 분리되는데, 이때 추출액은 농축되어 액상 형태의 제1 복합 추출물로 제조된다. Extracted by a solvent extraction or supercritical extraction extracts the pore size are separated into extract solution and residue extracted material solids by the filter cloth or filter paper micrometers, wherein the extract is concentrated is made of a first composite extract a liquid form. 또한, 상기 농축된 제1 복합 추출물은 건조에 의해 분말 형태의 제1 복합 추출물로 제조될 수 있다. In addition, the first compound with the concentrated extract can be prepared by drying of a first compound of the extract in powder form. 이때 건조 방법은 그 종류가 크게 제한되지 않으나, 활성 성분의 열적 변형을 최소화시키기 위해 동결 건조인 것이 바람직하다. The drying method, but not the type is severely limited, it is preferably lyophilized to minimize thermal deformation of the active ingredient. 한편, 잔여 추출 원료 고형물은 다시 용매 추출법 또는 초임계 추출법에 의해 활성 성분을 추출하는데 이용될 수 있다. On the other hand, the residual solid extracted material may be used to re-extract the active ingredient by solvent extraction or supercritical extraction.

제2 복합 추출물 Second composite extract

본 발명에 따른 제2 복합 추출물은 일 예로 칡 추출물, 콩나물 추출물, 파래 추출물, 표고버섯 추출물, 능이버섯 추출물, 호장근 추출물, 황금 추출물, 황백 추출물, 황연 추출물, 두향엽 추출물, 브로커리 추출물, 산초 추출물, 삼백초 추출물, 어성초 추출물, 싸리 추출물, 세신 추출물, 소리쟁이 추출물, 솔잎 추출물, 쇠무릎 뿌리 추출물, 인진쑥 추출물, 미나리 추출물, 생강 추출물, 독활 추출물, 야콘 추출물, 오미자 추출물, 인동초 추출물, 자몽 추출물, 장생 도라지 추출물, 저령 추출물, 적채 추출물, 질경이 추출물, 차조기 추출물, 및 참쑥 추출물로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 추출물과, 목단피 추출물, 가자 추출물, 감초 추출물, 강향 추출물, 고삼 추출물, 석곡 추출물, 고수 추출물, 관중 추출물, 구맥 추출물, 구절초 추출물, 꾸지뽕 Second composite extract kudzu extract an example, bean sprouts extract, laver extract, mushroom ability shiitake extract, extract, No. muscle extract, Gold extract, yellowish extract, chrome yellow extract, duhyang leaf extract, beurokeori extract, Japanese pepper extract according to the invention , Houttuynia cordata extract, Houttuynia cordata extract, bush clover extract, slender extract, curly dock extract, pine needle extract, soemureup root extract, injinssuk extract, parsley extract, ginger extract, Aralia cordata extract, yacon extract, Schisandra extract, indongcho extract, grapefruit extract, Jang bellflower extract, jeoryeong extract, Stack extract, plantain extract, perilla extract, and chamssuk least one extract selected from the group consisting of extracts and, mokdanpi extract, let extract, licorice extract, ganghyang extract, Sophora flavescens extract, seokgok extract, coriander extract, The crowd extract, gumaek extract, extract gujeolcho, kkujippong 출물, 금령자 추출물, 금앵자 추출물, 길경 추출물, 만가닥 추출물, 단삼 추출물, 당유자 추출물, 라벤더 추출물, 로즈마리 추출물, 마늘 추출물, 감태 추출물, 민들레 추출물, 백지 추출물 및 복령 추출물로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 추출물을 포함하는 제1 복합 추출물을 글리코시다아제로 처리하여 얻어진다. Chulmul, geumryeongja extract gold aengja extract, gilgyeong extract, only strands extract, Salvia miltiorrhiza extract, per citron extract, lavender extract, rosemary extract, garlic extract, 1 is selected from the Ecklonia cava extract, dandelion extract, the group consisting of white paper extract and Poria cocos extract a first complex extract containing at least one extract is obtained by treatment with glycosidase.

또한, 본 발명에 따른 제2 복합 추출물은 두향엽 추출물, 삼백초 추출물, 어성초 추출물, 인진쑥 추출물, 및 선택적으로 감태 추출물을 포함하는 제1 복합 추출물을 효소 처리하여 얻어진다. In addition, the second composite in accordance with the present invention the extract is obtained by enzymatic treatment to duhyang leaf extract, Houttuynia cordata extract, Houttuynia cordata extract, injinssuk extract, and extract the first composite optionally includes a Ecklonia cava extract.

이때 효소 처리를 위해 제공되는 제1 복합 추출물은 제조과정 상의 농축된 형태를 사용할 수도 있고, 고형 분말 형태를 사용하여도 무방하다. The combined extracts were first provided for the enzyme treatment may be used in concentrated form in the manufacturing process, it is also mubang using a solid powder form. 효소 처리시 사용되는 효소로는 글리코시다아제이며, 글리코시다아제는 글리코시드 가수분해효소(Glycoside hydrolase)라고도 하며, 글리코시드나 소당류의 글리코시드결합을 가수분해하는 기능을 가진다. The enzyme used in the enzyme treatment is a glycosidase kinase, glycosidase and is also known as glycoside hydrolases (Glycoside hydrolase), has a function of hydrolysis of the glycosidic bond of glycosides and out when a simple sugar. 본 발명에서 글리코시다아제 처리를 하는 경우 추출 원료 자체를 분해하여 추출을 보다 용이하게 하고 추출 수율을 높일 수 있으며, 다양한 형태의 활성 성분에 대한 추출을 가능하게 하여 복합 추출물의 미백 활성을 증가시킬 수 있다. It may increase glycosidase extracted material by decomposing itself facilitate the extraction and the extraction yield if the kinase treatment in the present invention, to enable the extraction of the various forms of active ingredient can increase the whitening activity of the combined extracts have. 또한, 글리코시다아제 처리는 용매 추출법 또는 초임계 추출법에 의해 추출된 추출물 내에 포함된 이취 성분 또는 색상 성분을 분해하여 추출물을 탈취 및 탈색시키는 역할을 한다. Further, it glycosidase treatment to decompose the offensive odor components, or the color components included in the extract extracted by the solvent extraction or supercritical extraction serves to extract deodorizing and decolorizing. 또한, 글리코시다아제 처리를 후술하는 멤브레인 필터에 의한 불순물 제거를 원활하게 한다. In addition, to facilitate the removal of impurities by a membrane filter, which will be described later the glycosidase treatment.

본 발명에 따른 제2 복합 추출물을 제조하는 방법은 칡, 콩나물 , 파래 , 표고버섯, 능이버섯, 호장근, 황금, 황백, 황연, 두향엽, 브로커리, 산초, 삼백초, 어성초, 싸리, 세신, 소리쟁이, 솔잎, 쇠무릎 뿌리, 인진쑥, 미나리, 생강, 독활, 야콘, 오미자, 인동초, 자몽, 장생 도라지, 저령, 적채, 질경이, 차조기, 및 참쑥으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상과 목단피, 가자, 감초, 강향, 고삼, 석곡, 고수, 관중, 구맥, 구절초, 꾸지뽕, 금령자, 금앵자, 길경, 만가닥, 단삼, 당유자, 라벤더, 로즈마리, 마늘, 감태, 민들레, 백지 및 복령으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 포함하는 추출 원료로부터 용매 추출법, 또는 초임계 추출법에 의해 미백 활성 성분을 포함하는 추출물을 수득하는 단계; The second process for preparing a compound extract arrowroot, bean sprouts, green laver, shiitake mushrooms, mushrooms capability, No. muscle, golden, yellowish, chrome yellow, duhyang lobe beurokeori, Japanese pepper, Houttuynia cordata, Houttuynia cordata, bush clover, slender, sound according to the invention ivy, pine needles, soemureup roots, injinssuk, parsley, ginger, Aralia cordata, yacon, Schizandra, indongcho, grapefruit, Jang Saeng Doraji, jeoryeong, Stack, at least one selected from psyllium, the group consisting of perilla, and chamssuk and mokdanpi, go, from licorice, ganghyang, Sophora flavescens, seokgok, coriander, spectators, gumaek, gujeolcho, kkujippong, geumryeongja gold aengja, gilgyeong, only strands, Salvia miltiorrhiza, per owner, lavender, rosemary, garlic, Ecklonia cava, dandelion, white paper, and the group consisting of Poria cocos from the extraction raw material including a selected one or more to obtain an extract containing a bleaching active ingredient by solvent extraction, or supercritical extraction; 상기 미백 활성 성분을 포함하는 추출물에 글리코시다아제를 첨가하고 반응시켜 효소 처리하는 단계; The method comprising the extract glycosidase was added, and the kinase reaction in the enzyme treatment, including the whitening active ingredient; 상기 효소 처리된 추출물을 여과하여 추출액과 잔여 추출 원료 고형물로 분리하는 단계; The method comprising isolated by filtration to extract liquid and the residual solids extracted raw material the enzyme-treated extract; 및 상기 분리된 추출액을 농축시켜 제2 복합 추출물을 수득하는 단계;를 포함한다. And obtaining a second extract combined and concentrated to the separated extract; includes.

또한, 본 발명에 따른 제2 복합 추출물을 제조하는 방법은 두향엽, 삼백초, 어성초, 인진쑥, 및 선택적으로 감태를 포함하는 추출 원료로부터 용매 추출법, 또는 초임계 추출법에 의해 미백 활성 성분을 포함하는 추출물을 수득하는 단계; Further, the method for producing a second composite extract according to the invention the extract comprising the duhyang lobe, Houttuynia cordata, Houttuynia cordata, injinssuk, and, optionally, solvent extraction from the extraction raw materials containing Ecklonia cava, or the second whitening active ingredient by critical extraction to obtain a; 상기 미백 활성 성분을 포함하는 추출물에 글리코시다아제를 첨가하고 반응시켜 효소 처리하는 단계; The method comprising the extract glycosidase was added, and the kinase reaction in the enzyme treatment, including the whitening active ingredient; 상기 효소 처리된 추출물을 여과하여 추출액과 잔여 추출 원료 고형물로 분리하는 단계; The method comprising isolated by filtration to extract liquid and the residual solids extracted raw material the enzyme-treated extract; 및 상기 분리된 추출액을 농축시켜 제2 복합 추출물을 수득하는 단계;를 포함한다. And obtaining a second extract combined and concentrated to the separated extract; includes.

이때 사용되는 글루코시다아제의 종류로는 크게 제한되지 않으며, 구체적으로 아밀라아제(amylae), 셀루라아제(cellulase), 자일라나아제(xylanase), 갈락토시다아제(galactose), 락타아제(lactase), 말타아제(maltase) 또는 이들을 혼합한 혼합 효소 등이 있으며, 바람직하게는 아밀라아제인 것을 특징으로 한다. At this time, a type of glucosidase to be used is not greatly limited, in particular amylase (amylae), cellulose la kinase (cellulase), xylene Rana dehydratase (xylanase), galactosidase (galactose), lactase (lactase), maltase (maltase), or preferably a mixture thereof and a mixed enzyme or the like, is characterized in that it is an amylase. 상업적으로 이용할 수 있는 글루코시다아제로는 비스코자임(Viscozyme ® ), 에코나아제(Econase ® ), 펑가밀(Fungamyl ® ), 세바밀(Sebamyl ® ), 클라리세브(Clariseb ® ) 등이 있다. Commercially glucosidase during daah agent that can be used is a Visco atom (Viscozyme ®), such as the echo came (Econase ®), peongga mill (Fungamyl ®), sebacic mill (Sebamyl ®), keulrarise probe (Clariseb ®).

제 1 복합 추출물을 글루코시다아제 처리시 반응 온도, 반응 pH, 및 반응 시간은 사용되는 효소에 의해 달라지며 통상적으로 반응 온도는 40~60℃, 반응 pH는 4~6, 및 반응 시간은 1~3시간이다. First composite extract the glucosidase treatment upon the reaction temperature, reaction pH, and reaction time will vary by the enzyme to be used typically the reaction temperature is 40 ~ 60 ℃, the reaction pH is 4-6, and the reaction time is from 1 to 3 hours. 또한 효소 투입량은 효소 처리 시간, 효소 비용 등의 경제성을 고려할 때 추출 원료 100 중량부를 기준으로 약 0.1~1 중량부이다. In addition, enzyme dosage is from about 0.1 to 1 parts by weight based on enzyme processing time, raw material extract 100 parts by weight when considering the economics, such as enzyme cost parts.

글루코시다아제로 처리된 추출물은 여과에 의해 추출액과 잔여 추출 원료 고형물로 분리되는데, 이때 여과는 기공 크기가 마이크로미터 단위인 여과포 또는 여과지에 의해 추출물을 추출액과 잔여 추출 원료 고형물로 분리하는 1차 여과와 1차 여과된 추출액을 기공 크기가 나노미터 단위인 멤브레인 필터로 여과하여 불순물(이취 성분이나 색상 성분)을 제거하는 2차 여과로 구성되는 것이 바람직하다. Treated with a glucosidase extract are separated by filtration to extract liquid and the residual extraction raw material solids, wherein the filter has a pore size of the first filtered to separate the extract to the extract and the remaining extracted material solids by the filter cloth or filter paper micrometers and the primary and the filtered extract was filtered through a membrane filter with a pore size in units of nanometers is preferably configured as a secondary filter for removing impurities (odor component and a color component). 추출 원료로부터 용매 추출법 또는 초임계 추출법에 의해 추출된 추출물 중 여과포 또는 여과지를 통과한 추출액을 기공 크기가 나노미터 단위인 멤브레인 필터로 여과시 부하가 커서 여과가 원활하게 이루어지지 않는 반면, 글루코시다아제로 효소 처리되고 1차 여과된 추출액은 멤브레인 필터에 의한 여과가 쉽게 이루어지기때문에, 이취나 색상에 기여하는 성분 등이 제거될 수 있다. While the extract was passed through a filter cloth or filter paper of the extract extracted by the solvent extraction or supercritical extraction from the extraction raw material pore size is the load on filtration through a membrane filter of unit nanometers cursor filtering does not smoothly, glucosidase a processing enzyme and a primary filtered extract may be because the filtering by the filter membrane being easily achieved, such as components that contribute to the odor and color removal. 글리코시다아제 처리된 추출물 중 여과에 의해 수득한 여과액은 농축되어 액상 형태의 제2 복합 추출물로 제조된다. Glycosidase filtrate obtained by the filtration of the kinase-treated extract is concentrated is made of a second composite of the extract liquid form. 또한, 상기 농축된 제2 복합 추출물은 건조에 의해 분말 형태로 제조될 수 있다. The second compound of the concentrated extract may be produced in powder form by drying. 이때 건조 방법은 그 종류가 크게 제한되지 않으나, 활성 성분의 열적 변형을 최소화 시키기 위해 동결 건조인 것이 바람직하다. The drying method, but not the type is severely limited, it is preferably lyophilized to minimize thermal deformation of the active ingredient. 한편, 잔여 추출 원료 고형물은 다시 용매 추출법 또는 초임계 추출법에 의해 활성 성분을 추출하는데 이용될 수 있다. On the other hand, the residual solid extracted material may be used to re-extract the active ingredient by solvent extraction or supercritical extraction.

제3 복합 추출물 The third extract complex

본 발명에 따른 제3 복합 추출물은 일 예로 칡 추출물, 콩나물 추출물, 파래 추출물, 표고버섯 추출물, 능이버섯 추출물, 호장근 추출물, 황금 추출물, 황백 추출물, 황연 추출물, 두향엽 추출물, 브로커리 추출물, 산초 추출물, 삼백초 추출물, 어성초 추출물, 싸리 추출물, 세신 추출물, 소리쟁이 추출물, 솔잎 추출물, 쇠무릎 뿌리 추출물, 인진쑥 추출물, 미나리 추출물, 생강 추출물, 독활 추출물, 야콘 추출물, 오미자 추출물, 인동초 추출물, 자몽 추출물, 장생 도라지 추출물, 저령 추출물, 적채 추출물, 질경이 추출물, 차조기 추출물, 및 참쑥 추출물로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 추출물과, 목단피 추출물, 가자 추출물, 감초 추출물, 강향 추출물, 고삼 추출물, 석곡 추출물, 고수 추출물, 관중 추출물, 구맥 추출물, 구절초 추출물, 꾸지뽕 Third composite extract kudzu extract an example, bean sprouts extract, laver extract, mushroom ability shiitake extract, extract, No. muscle extract, Gold extract, yellowish extract, chrome yellow extract, duhyang leaf extract, beurokeori extract, Japanese pepper extract according to the invention , Houttuynia cordata extract, Houttuynia cordata extract, bush clover extract, slender extract, curly dock extract, pine needle extract, soemureup root extract, injinssuk extract, parsley extract, ginger extract, Aralia cordata extract, yacon extract, Schisandra extract, indongcho extract, grapefruit extract, Jang bellflower extract, jeoryeong extract, Stack extract, plantain extract, perilla extract, and chamssuk least one extract selected from the group consisting of extracts and, mokdanpi extract, let extract, licorice extract, ganghyang extract, Sophora flavescens extract, seokgok extract, coriander extract, The crowd extract, gumaek extract, extract gujeolcho, kkujippong 출물, 금령자 추출물, 금앵자 추출물, 길경 추출물, 만가닥 추출물, 단삼 추출물, 당유자 추출물, 라벤더 추출물, 로즈마리 추출물, 마늘 추출물, 감태 추출물, 민들레 추출물, 백지 추출물 및 복령 추출물로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 추출물을 포함하는 제1 복합 추출물을 글리코시다아제로 처리하여 얻은 제2 복합 추출물이 유산균 또는 특정 미생물에 의해 생물전환되어 얻어진다. Chulmul, geumryeongja extract gold aengja extract, gilgyeong extract, only strands extract, Salvia miltiorrhiza extract, per citron extract, lavender extract, rosemary extract, garlic extract, 1 is selected from the Ecklonia cava extract, dandelion extract, the group consisting of white paper extract and Poria cocos extract the first complex extract containing the extract of at least one second composite extract obtained by treatment with glycosidase is obtained is converted by the lactic acid bacteria organisms or certain microorganisms.

또한, 본 발명에 따른 제3 복합 추출물은 두향엽 추출물, 삼백초 추출물, 어성초 추출물, 인진쑥 추출물, 및 선택적으로 감태 추출물을 포함하는 제1 복합 추출물을 글리코시다아제로 처리하여 얻은 제2 복합 추출물이 특정 유산균 또는 특정 미생물에 의해 생물전환되어 얻어진다. Further, the third composite extracts the second composite extract particular obtained by treating the duhyang leaf extract, Houttuynia cordata extract, Houttuynia cordata extract, injinssuk extract, and the first composite extract optionally include Ecklonia cava extract with glycosidase according to the invention by lactic acid bacteria or certain microorganisms obtained is converted organisms.

이때 유산균(lactic acid bacteria) 또는 특정 미생물 발효를 위해 제공되는 제2 복합 추출물은 제조과정상의 농축된 형태를 사용할 수도 있고, 고형 분말 형태를 사용하여도 무방하다. The lactic acid bacteria (lactic acid bacteria) or may use a concentrated form on the second combined extracts manufacturing process to provide for a particular microbial fermentation, it is also mubang using a solid powder form. 제2 복합 추출물을 생물전환시키기 위해 사용되는 유산균(lactic acid bacteria) 또는 특정 미생물은 인체에 무해한 균이라면 그 종류가 크게 제한되지 않으며, 구체적으로 락토바실루스속(Lactobacillus), 스트렙토코쿠스속(Streptococcus), 페디오코쿠스속(Pediococcus), 류코노스톡속(Leuconostoc) 등이 있다. The second lactic acid bacteria is used a complex extract to transform organisms (lactic acid bacteria), or specific microorganism If fungus is harmless to the human body is not the type is severely limited, particularly Lactobacillus genus (Lactobacillus), Streptococcus genus (Streptococcus) , Phedi OKO and the like in Syracuse (Pediococcus), flow in the Pocono stock (Leuconostoc).

제 2 복합 추출물이 유산균 또는 특정 미생물 발효에 의해 생물전환되는 경우 다양한 활성 물질이 생산되어 복합 추출물의 미백 활성, 또는 항산화 활성이 증가한다. If the second composite extract is biologically transformed by lactic acid fermentation or specific microorganisms it has been produced a variety of active substance increases the whitening activity, antioxidant activity, or of a complex extract. 또한, 후술하는 에멀젼 형태의 항산화제 제조 내지 복합 천연 미백제를 포함하는 화장료 조성물 등의 제조시 다른 성분과의 양립성(Compatibility)이 증가하여 제형상의 안정성이 향상된다. In addition, the increased stability of the shape and compatibility (Compatibility) with the other components during manufacture of a cosmetic composition comprising an antioxidant compound to manufacture natural whitening agent in an emulsion form to be described later is increased.

본 발명에 따른 제3 복합 추출물을 제조하는 방법을 살펴보면, 제2 복합 추출물을 유산균 배지 또는 특정 미생물 배지와 혼합한 혼합물을 형성하는 단계; Looking at the third step of the process for preparing a compound extract, to form a compound of claim 2 extract of lactic acid bacteria medium or medium and a mixture of certain microbial mixtures according to the invention; 상기 혼합물에 유산균 또는 특정 미생물을 접종하고 발효시켜 제2 복합 추출물을 생물전환 시키는 단계; Subjecting the second composite extract was inoculated and fermented with lactic acid bacteria or a specific microorganism in the biological conversion mixture; 및 생물 전환된 제2 복합 추출물을 여과시켜 제3 복합 추출물을 수득하는 단계;를 포함한다. It includes; and bio-filtered to extract the converted second compound to obtain a third composite extract. 이때, 제3 복합 추출물을 제조하기 위해 사용되는 제2 복합 추출물이 제조 과정상에서 멤브레인 필터에 의한 나노 여과를 거친 경우 제3 복합 추출물을 수득하는 단계의 여과는 기공 크기가 마이크로미터 단위인 여과포 또는 여과지에 의한 여과만으로도 충분하다. At this time, the third case where the second combined extracts were used to prepare the composite extracts passed through the nano-filtration by a membrane filter on the manufacturing process, the filtration step to obtain a third composite extract the pore size of the filter fabric or filter paper micrometers just by filtration it is sufficient. 한편, 제3 복합 추출물을 제조하기 위해 사용되는 제2 복합 추출물이 제조 과정상에서 멤브레인 필터에 의한 나노 여과를 거치지 않은 경우 제3 복합 추출물을 수득하는 단계의 여과는 기공 크기가 마이크로미터 단위인 여과포 또는 여과지에 의한 1차 여과와 기공 크기가 나노미터 단위인 멤브레인 필터에 의한 2차 여과로 구성되는 것이 바람직하다. On the other hand, the third composite If extract second composite extract used to prepare the non-passing through the nano-filtration by a membrane filter on the manufacturing process, the third filtration to obtain a complex extract is a filter fabric or a pore size in the micrometer scale it is a primary filtration with a pore size of the filter paper, consisting of a secondary filtration by a membrane filter of nanometers are preferred. 여과에 의해 수득된 제3 복합 추출물은 이후 농축된 액상 형태의 제3 복합 추출물로 제조될수 있고, 상기 농축된 제3 복합 추출물은 건조에 의해 분말 형태로도 제조될 수 있다. The obtained extract by filtration third composite may be made of a third compound in the liquid extract was concentrated form since, of the third composite was concentrated extract it may be made of by a dry powder form. 이때 건조 방법은 그 종류가 크게 제한되지 않으나, 활성 성분의 열적 변형을 최소화시키기 위해 동결 건조인 것이 바람직하다. The drying method, but not the type is severely limited, it is preferably lyophilized to minimize thermal deformation of the active ingredient.

본 발명에 따른 복합 천연 미백제는 제2 복합 추출물 또는 제3 복합 추출물 자체로도 구성될 수 있으며, 바람직하게는 미백 활성을 저해하지 않는 한 보관 안정성, 제형으로의 가공성, 제품에서의 다른 성분과의 양립성 등을 향상시키기 위해 다양한 보조 첨가제를 더 포함할 수 있다. Complex natural whitening agents according to the invention with other components of the second composite extract or a third complex extracts and also be of a self, the storage stability, processability of the formulation preferably does not inhibit the whitening activity, the product to improve compatibility, etc. may further contain various auxiliary additives. 또한, 복합 천연 미백제는 액상 형태, 고형의 분말 형태, 또는 에멀젼 형태로 존재할 수 있으며, 보관 안정성 및 취급의 용이성을 고려할 때 에멀젼 형태인 것이 바람직하다. In a composite of natural whitening agent may be present in powder form, or an emulsion form of a liquid form, a solid, preferably in the form of emulsion, considering the ease of storage and handling stability. 에멀젼 형태의 복합 천연 미백제의 제조방법은 일 예로 제2 복합 추출물 또는 제3 복합 추출물에 유상 매질 및 유화 안정제를 첨가하고 전단력을 가하여 에멀젼화시키는 단계;를 포함한다. Method of manufacturing a composite of natural whitening agent in an emulsion form is added to the oil phase and emulsion stabilizer in the medium 2 or 3 combined extract composite extract an example, and applying a shear force emulsion solidifying step; and a.

사용되는 보조 첨가제는 보조 첨가제의 용도에 따라 그 종류가 다양하며, 구체적으로 글리세린(Glycerin), 캐스터 오일(Caster oil), 글리신(Glycine), 트윈(Tween), 덱스트린(Dextrin), 젖산(Lactic acid) 등이 있다. An auxiliary additive to be used is, and its type is varied according to the application of an auxiliary additive, specifically glycerin (Glycerin), castor oil (Caster oil), Glycine (Glycine), Tween (Tween), dextrin (Dextrin), lactate (Lactic acid ) and the like.

본 발명의 또 다른 측면은 상기의 복합 천연 미백제의 용도에 관한 것이다. Another aspect of the invention relates to the use of the composite of natural whitening agent.

본 발명에 따른 복합 천연 미백제는 다양한 천연 원료의 추출물들로 구성되며, 높은 미백 효과, 자유 라디칼 소거 내지 노화 방지 등의 항산화 효과, 인체 피부에 대한 안전성, 및 급성 경구 투여시 비독성을 가지며, 그 밖에 천연물 유래의 주름 개선, 항염증 작용, 아토피 개선, 여드름 치유 등의 효과를 가진다. Is composed of the invention compound of natural whitening agent is an extract of a variety of natural sources in accordance with, it has an antioxidant effect, safety, and acute oral administration of non-toxic to the human skin, such as a high whitening effect, free radical scavenging to prevent aging, and only has the effect of natural origin such as wrinkle, anti-inflammatory, atopic improving, pimples heal. 따라서, 본 발명에 따른 미백제는 화장료 조성물에 적용되어 미백 기능을 부여할 수 있으며, 아울러 의약 조성물, 식품 조성물, 또는 사료 조성물 등의 다양한 제품에서 항산화 강화에 따른 면역 기능의 향상, 또는 세포 재생, 노화방지 등의 목적으로도 사용될 수 있다. Therefore, the whitening agent of the present invention is applied to a cosmetic composition which can impart whitening, as well as improvement in the immune function of the antioxidant enhanced in a variety of products, such as pharmaceutical compositions, food compositions, or feed composition, or cell regeneration, aging It may also be used for the purpose of prevention. 본 발명에 따른 복합 천연 미백제가 화장료 조성물 등에 적용되는 경우 그 함량은 크게 제한되지 않으며, 독성 등을 고려하여 함량 등을 적절하게 선택할 수 있다. If the composite natural whitening agent according to the present invention is applied to a cosmetic composition that the content is not severely limited, it can be appropriately selected in the content, etc. in consideration of the toxicity and the like. 일 예로, 본 발명에 따른 복합 천연 미백제가 화장료 조성물에 적용되는 경우 그 사용량은 제품의 총 중량을 기준으로 약 0.05~5.0 중량%가 바람직하며, 식품용 조성물에 적용되는 경우 그 사용량은 제품의 총 중량을 기준으로 0.01~2.0 중량%가 바람직하다. For example, when the composite natural whitening agent according to the present invention is applied to a cosmetic composition for the amount of use thereof is, based on the total weight of the product, preferably from about 0.05 to about 5.0% by weight, and, when applied to the food composition. The amount is the total of the product 0.01 to 2.0% by weight is preferable, based on the weight.

이하, 본 발명에 따른 복합 천연 미백제가 화장료 조성물에 적용되는 경우에 대해 보다 상세히 설명한다. It will now be described in more detail for the case where the composite natural whitening agent according to the present invention is applied to a cosmetic composition. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 널리 공지된 바에 따라 적합한 제형 및 첨가제를 선택하여 본 발명의 복합 천연 미백제를 포함하는 화장료 조성물을 제조할 수 있을 것이다. Those of ordinary skill in the art will be able to prepare a cosmetic composition comprising a compound of natural whitening agent of the present invention to select the appropriate formulation and additives well known bar. 제조 가능한 화장료 조성물의 특정 양태로는 각종 크림, 로션, 스킨, 샴푸, 린스, 클렌징, 세안제, 비누, 트리트먼트, 미용액 등이 있으며, 구체예로서는 세안크림, 세안폼, 클렌징크림, 클렌징밀크, 클렌징로션, 마사지크림, 콜드크림, 모이스처크림, 유액, 화장수, 팩, 에프터세이빙크림, 썬텐방지크림, 썬텐용 오일, 비누, 보디샴푸, 헤어샴푸, 헤어린스, 헤어트리트먼트, 양모료, 육모료, 헤어크림, 헤어리퀴드, 세트로션, 헤어스프레이, 헤어브리지, 컬러린스, 컬러스프레이, 퍼머넌트웨이브액, 프레스파우더, 루스파우더, 아이섀도, 핸드크림, 립스틱 등을 들수 있다. Made of certain aspects of possible cosmetic composition has a variety of creams, lotions, shampoo, cleansing, cleanser, soap, treatment, serum or the like, Specific examples include cleansing cream, cleansing foam, cleansing cream, cleansing milk, cleansing lotion massage cream, cold cream, moisture cream, milky lotion, lotion, pack, after-shaving creams, tanning creams, for tanning oil, soap, body shampoo, hair shampoo, hair conditioner, hair treatment, wool fees, tonic fee, hair there deulsu cream, hair liquid, set lotion, hair spray, hair bridge, color rinse, color spray, permanent wave solution, pressed powder, loose powder, eye shadow, hand cream, lipstick, etc.

본 발명의 복합 천연 미백제가 포함되는 화장료 조성물은 수성 비타민, 유성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 등을 포함한다. A cosmetic composition which contains a complex of natural whitening agent of the present invention comprises an aqueous vitamin, oil-based vitamin, peptide polymer, polysaccharide polymer, Scotland pinggo lipid or the like.

수성 비타민으로서는 화장료 조성물에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 비타민 B1, 비타민 B2, 비타민 B6, 피리독신, 염산피리독신, 비타민 B12, 판토텐산, 니코틴산, 니코틴산아미드, 엽산, 비타민 C, 비타민 H 등을 들 수 있으며, 그들의 염(티아민염산염, 아스코르빈산나트륨염 등)이나 유도체(아스코르빈산-2-인산나트륨염, 아스코르빈산-2-인산마그네슘염 등)도 본 발명에서 사용할 수 있는 수용성 비타민에 포함된다. As the aqueous vitamin as long as possible it blended in a cosmetic composition to but be any, preferably vitamin B1, vitamin B2, vitamin B6, pyridoxine, pyridoxine hydrochloride, vitamin B12, pantothenic acid, niacin, nicotinamide, folic acid, vitamin C, vitamin H etc may be mentioned, salts thereof or derivatives thereof (thiamine hydrochloride, ascorbic acid, sodium salt) (ascorbic acid-2-phosphate sodium salt, ascorbic acid-2-phosphate magnesium salt, etc.), water-soluble vitamin which can be used in the present invention It is included in.

유성 비타민으로서는 화장료 조성물에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 비타민 A, 카로틴, 비타민 D2, 비타민 D3, 비타민 E(d1-α-토코페롤, d-α-토코페롤, d-δ-토코페롤) 등을 들 수 있으며, 그들의 유도체 (팔미틴산아스코르빈, 스테아르산아스코르빈, 팔미틴산아스코르빈, 아세트산dl-α-토코페롤, 니코틴산dl-α-토코페롤비타민 E, DL-판토테닐알코올, D-판토테닐알코올, 판토테닐에틸에테르 등) 등도 본 발명에서 사용되는 유용성 비타민에 포함된다. Oily vitamin as long as possible in the cosmetic composition formulation but be any, preferably Vitamin A, carotene, vitamin D2, vitamin D3, vitamin E (d1-α- tocopherol, d-α- tocopherol, d-δ- tocopherol), etc. the number, and their derivatives (ascorbic palmitate, a stearate, ascorbic, palmitic acid ascorbic acid, acetic acid dl-α- tocopherol, nicotinic acid dl-α- tocopherol vitamin E, DL- pantothenyl alcohol, pantothenyl D- also alcohol, pantothenyl ethyl ether and the like) are included in the availability of vitamin used in the present invention.

고분자 펩티드로서는 화장료 조성물에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 콜라겐, 가수 분해 콜라겐, 젤라틴, 엘라스틴, 가수 분해 엘라스틴, 케라틴 등을 들 수 있다. As the high molecular peptide can be given as long as possible in the cosmetic composition formulation but be any, preferably collagen, hydrolyzed collagen, gelatin, elastin, hydrolyzed elastin, keratin and the like.

고분자 다당으로는 화장료 조성물에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 히드록시에틸셀룰로오스, 크산탄검, 히알루론산나트륨, 콘드로이틴 황산 또는 그 염 (나트륨염 등) 등을 들 수 있다. Polysaccharide polymers include, and the like as long as possible in the cosmetic composition formulation but be any, preferably (as sodium salt), hydroxyethyl cellulose, xanthan gum, sodium hyaluronate, chondroitin sulfuric acid or its salt. 예를 들어, 콘드로이틴 황산 또는 그 염 등은 통상 포유 동물이나 어류로부터 정제하여 사용할 수 있다. For example, chondroitin sulfate or a salt thereof and the like can be purified from a normal mammal or fish.

스핑고 지질로서는 화장료 조성물에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 세라미드, 피트스핑고신, 스핑고당지질 등을 들 수 있다. 's pinggo lipids used may be mentioned as long as possible in the cosmetic composition formulation but be any, preferably from ceramide, sphingosine feet, Scotland pinggo glycolipid or the like.

또한, 본 발명의 화장료 조성물에는 상기 성분과 더불어 필요에 따라 통상 화장료에 배합되는 다른 성분을 배합해도 된다. In addition, the cosmetic composition of the present invention with the above components may be blended with other components to be incorporated in conventional cosmetic composition, if necessary. 이외에 첨가해도 되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료 등을 들 수 있다. Ingredients that may be added in addition as there may be mentioned holding component, a moisturizing agent, emollient agent, surfactant, organic and inorganic pigments, the organic powder, ultraviolet light absorber, antioxidant, plant extract, pH adjuster, alcohol, colorant, perfume, etc. .

유지 성분으로서는 에스테르계 유지, 탄화수소계 유지, 실리콘계 유지, 불소계 유지, 동물 유지, 식물 유지 등을 들 수 있다. As the holding element can be maintained the ester, hydrocarbon oil, silicone oil, fluorine-based oil, animal oil, vegetable oil and the like.

보습제로서는 수용성 저분자 보습제, 지용성 분자 보습제, 수용성 고분자, 지용성 고분자 등을 들 수 있다. As humectants there may be mentioned a water-soluble low molecular humectants, oil-soluble molecular humectants, water-soluble polymers, fat-soluble polymers and the like.

에몰리엔트제로서는 장쇄아실글루타민산콜레스테릴에스테르, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 12-히드록시스테아르산, 스테아르산, 로진산, 라놀린지방산콜레스테릴에스테르 등을 들 수 있다. Examples of the emollient claim may be mentioned long-chain acyl glutamic acid cholesteryl ester, cholesteryl hydroxy stearic acid, 12-hydroxystearic acid, stearic acid, rosin acid, lanolin fatty acid cholesteryl ester and the like.

계면 활성제로서는 비이온성 계면 활성제, 음이온성 계면 활성제, 양이온성 계면 활성제, 양성 계면 활성제 등을 들 수 있다. As the surface active agent and the like can be mentioned nonionic surfactants, anionic surfactants, cationic surfactants, amphoteric surfactants. 비이온성 계면 활성제로서는 자기 유화형 모노스테아르산글리세린, 프로필렌글리콜지방산에스테르, 글리세린지방산에스테르, 폴리글리세린지방산에스테르, 솔비탄지방산에스테르, POE(폴리옥시에틸렌)솔비탄지방산에스테르, POE 솔비트지방산에스테르, POE 글리세린지방산에스테르, POE 알킬에테르, POE 지방산에스테르, POE 경화피마자유, POE 피마자유, POE-POP (폴리옥시에틸렌-폴리옥시프로필렌) 공중합체, POE-POP 알킬에테르, 폴리에테르 변성 실리콘, 라우린산알카놀아미드, 알킬아민옥시드, 수소첨가대두인지질 등을 들 수 있다. A non-ionic surfactant as the self-emulsified monostearic acid glycerin, propylene glycol fatty acid esters, glycerin fatty acid esters, polyglycerol fatty acid esters, sorbitan fatty acid esters, POE (polyoxyethylene) sorbitan fatty acid esters, POE sorbitan bit fatty acid esters, POE glycerin fatty acid esters, POE alkyl ethers, POE fatty acid esters, POE hardened castor oil, POE castor oil, POE-POP (polyoxyethylene-polyoxypropylene) copolymer, POE-POP alkyl ether, polyether modified silicone, lauric acid Al can be given playing imide, alkyl amine oxide, hydrogen addition soybean phospholipid and the like. 음이온성 계면 활성제로서는 지방산비누, α-아실술폰산염, 알킬술폰산염, 알킬알릴술폰산염, 알킬나프탈렌술폰산염, 알킬황산염, POE 알킬에테르황산염, 알킬아미드황산염, 알킬인산염, POE 알킬인삼염, 알킬아미드인산염, 알킬로일알킬타우린염, N-아실아미노산염, POE 알킬에테르카르복실산염, 알킬술포숙신산염, 알킬술포아세트산나트륨, 아실화 가수분해 콜라겐펩티드염, 퍼플루오로알킬인산에스테르 등을 들 수 있다. Anionic surfactants as fatty acid soaps, α- acyl sulfonate, alkyl sulfonate, alkyl allyl sulfonates, alkyl naphthalene sulfonates, alkyl sulfates, POE alkyl ether sulfate, alkylamide sulfate, alkyl phosphate salt, POE alkyl ginseng salts, alkylamides phosphate, an alkyl taurine salts of alkyl, N- acyl amino acid salt, POE alkyl ether carboxylic acid salts, alkyl sulfosuccinate salts, alkyl sulfonate sodium acetate, acylated hydrolyzed collagen peptide salt, and the like alkyl phosphate ester perfluoroalkyl have. 양이온성 계면 활성제로서는 염화알킬트리메틸암모늄, 염화스테아릴트리메틸암모늄, 브롬화스테아릴트리메틸암모늄, 염화세토스테아릴트리메틸암모늄, 염화디스테아릴디메틸암모늄, 염화스테아릴디메틸벤질암모늄, 브롬화베헤닐트리메틸암모늄, 염화벤잘코늄, 스테아르산디에틸아미노에틸아미드, 스테아르산디메틸아미노프로필아미드, 라놀린 유도체 제 4급 암모늄염 등을 들 수 있다. The cationic surface active agent as the chloride, alkyl trimethyl ammonium chloride, stearyl trimethyl ammonium bromide, stearyl trimethyl ammonium chloride, cetostearyl trimethyl ammonium chloride, distearyl dimethyl ammonium chloride, stearyl dimethyl benzyl ammonium bromide, behenyl trimethyl ammonium chloride, benzalkonium, stearic acid diethyl aminoethyl amide, stearic acid dimethylaminopropyl amide, lanolin derivatives claim, and the like quaternary ammonium salts. 양성 계면 활성제로서는 카르복시베타인형, 아미드베타인형, 술포베타인형, 히드록시술포베타인형, 아미드술포베타인형, 포스포베타인형, 아미노카르복실산염 형, 이미다졸린 유도체형, 아미드아민형 등의 양성 계면 활성제 등을 들 수 있다. Such amphoteric surfactants as carboxy beta doll, amides beta doll, sulfonyl beta doll, a hydroxyl procedure Four beta doll, amide sulfonates BETA doll, phosphodiesterase beta doll, an amino carboxylic acid salt type, imidazoline derived body, amide amine type and the like can be mentioned amphoteric surfactants.

유기 및 무기 안료로서는 규산, 무수규산, 규산마그네슘, 탤크, 세리사이트, 마이카, 카올린, 벵갈라, 클레이, 벤토나이트, 티탄피막운모, 옥시염화비스무트, 산화지르코늄, 산화마그네슘, 산화아연, 산화티탄, 산화알루미늄, 황산칼슘, 황산바륨, 황산마그네슘, 탄산칼슘, 탄산마그네슘, 산화철, 군청, 산화크롬, 수산화크롬, 칼라민, 카본블랙 및 이들의 복합체 등의 무기 안료 ; Organic and inorganic pigments as silicic acid, silicic anhydride, magnesium silicate, talc, sericite, mica, kaolin, red iron oxide, clay, bentonite, titanium oxide coating mica, bismuth oxychloride, zirconium oxide, magnesium oxide, zinc oxide, titanium oxide, aluminum oxide , inorganic pigments such as calcium sulfate, barium sulfate, magnesium sulfate, calcium carbonate, magnesium carbonate, iron oxide, ultramarine, chromium oxide, chromium hydroxide, calamine, carbon black and a complex thereof; 폴리아미드, 폴리에스테르, 폴리프로필렌, 폴리스티렌, 폴리우레탄, 비닐수지, 요소수지, 페놀수지, 불소수지, 규소수지, 아크릴수지, 멜라민수지, 에폭시수지, 폴리카보네이트수지, 디비닐벤젠·스티렌 공중합체, 실크파우더, 셀룰로오스, CI 피그먼트옐로우, CI 피그먼트오렌지 등의 유기 안료 및 이들의 무기 안료와 유기 안료의 복합 안료 등을 들 수 있다. Polyamide, polyester, polypropylene, polystyrene, polyurethane, vinyl resin, urea resin, phenol resin, fluorine resin, silicon resin, acrylic resin, melamine resin, epoxy resin, polycarbonate resin, divinylbenzene-styrene copolymer, there may be mentioned silk powder, cellulose, CI pigment yellow, CI pigment orange, etc. of the organic pigments and composite pigments of these inorganic pigments and organic pigments.

유기 분체로서는 스테아르산칼슘 등의 금속비누 ; The organic powder as the metal soap such as calcium stearate; 세틸린산아연나트륨, 라우릴린산아연, 라우릴린산칼슘 등의 알킬인산금속염 ; Cetyl acid zinc, sodium lauryl acid, zinc lauryl alkyl phosphoric acid metal salts such as calcium; N-라우로일-β-알라닌칼슘, N-라우로일-β-알라닌아연, N-라우로일글리신칼슘 등의 아실아미노산 다가금속염 ; N- lauroyl -β- alanine calcium, N- lauroyl -β- alanine zinc, N- Lau acylamino acid polyvalent metal salts such as calcium glycine days; N-라우로일-타우린칼슘, N-팔미토일-타우린칼슘 등의 아미드술폰산 다가금속염 ; N- lauroyl-taurine, calcium, N- palmitoyl-amide acid polyvalent metal salts such as taurine calcium; Nε-라우로일-L-리진, Nε-팔미토일리진, Nα-파리토일올니틴, Nα-라우로일아르기닌, Nα-경화우지지방산아실아르기닌 등의 N-아실염기성아미노산 ; Nε- lauroyl -L- lysine, Nε- palmitoyl-lysine, Nα- N- acyl basic amino acid, such as Paris weekends come nitin, Nα- lauroyl arginine, Nα- hardened beef tallow fatty acid acyl arginine; N-라우로일글리실글리신 등의 N-아실폴리펩티드 ; N- acyl polypeptide, such as glycine ilgeul florisil N- Lau; α-아미노카프릴산, α-아미노라우린산 등의 α-아미노지방산 ; α- amino caprylic acid, α- amino Nora We α- amino acids of an acid, and the like; 폴리에틸렌, 폴리프로필렌, 나일론, 폴리메틸메타크릴레이트, 폴리스티렌, 디비닐벤젠·스티렌 공중합체, 사불화에틸렌 등을 들 수 있다. Polyethylene, polypropylene, nylon, polymethyl methacrylate, polystyrene, divinylbenzene-styrene copolymer, ethylene tetrafluoride and the like.

자외선 흡수제로서는 파라아미노벤조산, 파라아미노벤조산에틸, 파라아미노벤조산아밀, 파라아미노벤조산옥틸, 살리실산에틸렌글리콜, 살리친산페닐, 살리친산옥틸, 살리친산벤질, 살리친산부틸페닐, 살리친산호모멘틸, 계피산벤질, 파라메톡시계피산2-에톡시에틸, 파라메톡시계피산옥틸, 디파라메톡시계피산모노2-에틸헥산글리세릴, 파라메톡시계피산이소프로필, 디이소프로필·디이소프로필계피산에스테르 혼합물, 우로카닌산, 우로카닌산에틸, 히드록시메톡시벤조페논, 히드록시메톡시벤조페논술폰산 및 그 염, 디히드록시메톡시벤조페논, 디히드록시메톡시벤조페논디술폰산나트륨, 디히드록시벤조페논, 테트라히드록시벤조페논, 4- tert -부틸-4'-메톡시디벤조일메탄, 2,4,6-트리아닐리노-p-(카르보-2'-에틸헥실-1'-옥시)-1,3,5-트리아진, 2-(2-히드록 As the ultraviolet absorbing agent para-amino benzoic, para-amino benzoic acid ethyl, p-aminobenzoic acid, amyl para-aminobenzoic acid, octyl salicylate, ethylene glycol, salicylate chinsan phenyl salicylate chinsan octyl salicylate chinsan benzyl salicylate chinsan butylphenyl, salicylate chinsan homo menthyl, cinnamic acid benzyl para-methoxy cinnamate 2-ethoxyethyl, para-methoxy cinnamate, octyl methoxy cinnamate Defining Ramesh mono 2-ethylhexanoate glyceryl, para-methoxy cinnamic acid-isopropyl, diisopropyl-diisopropyl cinnamic acid ester mixture and right kanin acid and right kanin acid ethyl, hydroxy methoxybenzophenone, hydroxy methoxy benzophenone sulfonic acid and salts thereof, dihydroxy methoxy benzophenone, dihydroxy methoxy benzophenone nondi sulfonate, dihydroxy benzophenone, tetra hydroxybenzophenone, 4- tert - butyl-4'-methoxy benzoyl methane CD, Reno -p- not tree 2,4,6 (carbo-2'-ethylhexyl-1'-oxy) -1,3 , 5-triazine, 2- (2-hydroxyl -5-메틸페닐)벤조트리아졸 등을 들 수 있다. 5-methylphenyl) benzotriazole and the like.

알코올로서는 세틸 알코올(Cetyl Alcohol) 등의 고급 알코올을 들 수 있다. As the alcohol there may be mentioned a higher alcohol such as cetyl alcohol (Cetyl Alcohol).

또한, 본 발명의 복합 천연 미백제는 미백 기능과 더불어 항산화 효능을 제공함으로써 생체 방어, 질병의 예방, 질병의 회복 또는 노화 억제 등의 효과를 기대할 수 있으므로 기능성 식품 조성물에 적용될 수 있다. In a composite of natural whitening agent of the present invention can be expected effects such as bio-defense, prevention of diseases, recovery of the disease or aging suppression by providing an antioxidant together with whitening may be applied to a functional food composition. 기능성 식품 조성물로의 적용은 특별히 형태 제약은 없으며, 구체적으로 아이스크림, 분유, 요쿠르트, 건강 음료 및 술 (보드카 및 기타 주류)에 응용할 수 있다. Application of functional food composition is not particularly pharmaceutical form, it can be applied in particular ice cream, milk, yogurt, health drinks and alcohol (vodka and other liquor). 또한, 본 발명의 복합 천연 미백제는 사료 조성물, 의약 조성물 등에 적용될 수 있으며, 이때, 각 조성물은 당업계에서 통상적으로 사용하는 성분 및 제형 등으로 제조될 수 있다. In a composite of natural whitening agent of the present invention can be prepared in the feed composition, it can be applied to a medicinal composition, this time, including each component and the composition formulations commonly used in the art.

이하, 본 발명을 하기의 실시예를 통하여 보다 구체적으로 설명한다. It will now be more specifically described by the following examples of the invention. 다만, 하기의 실시예는 본 발명을 보다 명확히 설명하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 보호범위를 한정하는 것은 아니다. However, the following examples are only intended to clarify than the present invention and is not intended to limit the scope of the present invention.

1. 복합 추출물의 제조와 복합 추출물의 특성 1. Preparation and Properties of Composite Extract Composite Extract of

(1) 천연 원료로부터 제1 복합 추출물의 제조 (1) producing a first composite extracts from natural raw materials

제조예 1. Preparation 1.

추출 반응기에 칡 건조물 50㎏, 오미자 건조물 50㎏, 구절초 건조물 50㎏, 및 민들레 건조물 50㎏을 투입하고, 여기에 추출 용매로 물 1000kg을 투입하였다. In the dried form 50㎏ arrowroot, Schisandra 50㎏ dry product, dry product gujeolcho 50㎏, and dandelion 50㎏ dried material to the extraction reactor, where the water 1000kg was added to the extraction solvent in the. 추출 반응기의 온도를 약 80℃로 3시간 동안 유지하여 천연 원료의 미백 활성 성분을 추출하였다. The temperature of the extraction reactor at about 80 ℃ and maintained for 3 hours, to extract the whitening active ingredients of natural sources. 추출물을 여과포로 여과하여 추출액과 잔여 추출 원료 고형물을 분리한 후 여과된 추출액을 감압 증발기를 이용하여 약 2.0 브릭스(Brix)의 농도로 농축시켜 농축액 형태의 제1 복합 추출물 140㎏을 수득하였다. After the extract was filtered by the filter cloth separated the extract and the residual solids extracted material and concentrated to the filtered extract at a concentration of about 2.0 Brix (Brix) using an evaporator under reduced pressure to give the first extract 140㎏ composite of the concentrated liquid form. 또한, 농축액 형태의 제1 복합 추출물을 동결건조시켜 분말 형태의 제1 복합 추출물을 수득하였다. Further, the freeze-dried extract of the concentrate form the first composite to give the first composite extract in powder form.

제조예 2. Preparation 2.

추출 반응기에 두향엽 건조물 40㎏, 삼백초 건조물 40㎏, 어성초 건조물 40㎏, 인진쑥 건조물 40㎏, 및 감태 건조물 40㎏을 투입하고, 여기에 추출 용매로 물 1000kg을 투입하였다. In the dried material leaves duhyang 40㎏, three hundred seconds and Structures 40㎏, Houttuynia cordata 40㎏ dry product, dry product injinssuk 40㎏, and Ecklonia cava and Structures 40㎏ the extraction reactor, where the water 1000kg was added to the extraction solvent in the. 추출 반응기의 온도를 약 80℃로 3시간 동안 유지하여 천연 원료의 미백 활성 성분을 추출하였다. The temperature of the extraction reactor at about 80 ℃ and maintained for 3 hours, to extract the whitening active ingredients of natural sources. 추출물을 여과포로 여과하여 추출액과 잔여 추출 원료 고형물을 분리한 후 여과된 추출액을 감압 증발기를 이용하여 약 2 브릭스(Brix)의 농도로 농축시켜 농축액 형태의 제1 복합 추출물 140㎏을 수득하였다. After the extract was filtered by the filter cloth separated the extract and the residual solids extracted material and concentrated to the filtered extract at a concentration of approximately Brix (Brix) using an evaporator under reduced pressure to give the first extract 140㎏ composite of the concentrated liquid form. 또한, 농축액 형태의 제1 복합 추출물을 동결건조시켜 분말 형태의 제1 복합 추출물을 수득하였다. Further, the freeze-dried extract of the concentrate form the first composite to give the first composite extract in powder form.

(2) 천연 원료로부터 제2 복합 추출물의 제조 (2) Preparation of a second extract from a natural raw material compound

제조예 3. Preparation 3.

추출 반응기에 칡 건조물 50㎏, 오미자 건조물 50㎏, 구절초 건조물 50㎏, 및 민들레 건조물 50㎏을 투입하고, 여기에 추출 용매로 물 1000kg을 투입하였다. In the dried form 50㎏ arrowroot, Schisandra 50㎏ dry product, dry product gujeolcho 50㎏, and dandelion 50㎏ dried material to the extraction reactor, where the water 1000kg was added to the extraction solvent in the. 추출 반응기의 온도를 약 80℃로 3시간 동안 유지하여 천연 원료의 미백 활성 성분을 추출하였다. The temperature of the extraction reactor at about 80 ℃ and maintained for 3 hours, to extract the whitening active ingredients of natural sources. 이후 추출 반응기의 온도를 약 55℃로 낮추고 추출물의 pH를 약 5.5로 조정한 후 추출물에 글리코시다아제(Fungamyl ® , Sebamyl ® , 및 Clariseb ® ; Special Enzyme, USA)를 약 200g 투입하고 3시간 동안 반응시킨 후 추출물의 온도를 약 80℃로 상승시켜 효소를 실활시켰다. Since the temperature of the extraction reactor, the pH of the extract reduces by about 55 ℃ the extract was adjusted to about 5.5 glycosidase (Fungamyl ®, Sebamyl ®, and Clariseb ®; Special Enzyme, USA) the applied about 200g, and for three hours after the reaction raises the temperature of the extract to about 80 ℃ to deactivate the enzyme. 효소 처리된 추출물을 여과포로 1차 여과하여 추출액과 잔여 추출 원료 고형물을 분리한 후 여과된 추출액을 다시 멤브레인 필터(기공 크기 : 0.45 ㎛)에 통과시켜 로 2차 여과하여 감압 증발기를 이용하여 불순물(색이나 이취 등에 기여하는 성분을 포함)을 제거하였다. Enzyme a primary filtering the treated extract to the filter fabric to separate the extract and the remaining extracted raw solid after re-membrane filter, the filtered extract (pore size: 0.45 ㎛) to a by-pass to the second filter using a vacuum evaporator impurities ( It was removed containing components that contribute to color and odor, etc.). 멤브레인 필터를 통과한 추출액을 약 2.5 브릭스(Brix)의 농도로 농축시켜 농축액 형태의 제2 복합 추출물 140㎏을 수득하였다. Concentration of the extract was passed through a membrane filter at a concentration of about 2.5 Brix (Brix) to yield the second composite 140㎏ extract of the concentrated liquid form. 또한, 농축액 형태의 제2 복합 추출물을 동결건조시켜 분말 형태의 제2 복합 추출물을 수득하였다. Further, the freeze-dried extract of the concentrate form the second composite to yield the second composite extract in powder form.

제조예 4. Preparation 4.

추출 반응기에 두향엽 건조물 40㎏, 삼백초 건조물 40㎏, 어성초 건조물 40㎏, 인진쑥 건조물 40㎏, 및 감태 건조물 40㎏을 투입하고, 여기에 추출 용매로 물 1000kg을 투입하였다. In the dried material leaves duhyang 40㎏, three hundred seconds and Structures 40㎏, Houttuynia cordata 40㎏ dry product, dry product injinssuk 40㎏, and Ecklonia cava and Structures 40㎏ the extraction reactor, where the water 1000kg was added to the extraction solvent in the. 추출 반응기의 온도를 약 80℃로 3시간 동안 유지하여 천연 원료의 미백 활성 성분을 추출하였다. The temperature of the extraction reactor at about 80 ℃ and maintained for 3 hours, to extract the whitening active ingredients of natural sources. 이후 추출 반응기의 온도를 약 55℃로 낮추고 추출물의 pH를 약 5.5로 조정한 후 추출물에 글리코시다아제(Fungamyl ® , Sebamyl ® , 및 Clariseb ® ; Special Enzyme, USA)를 약 200g 투입하고 3시간 동안 반응시킨 후 추출물의 온도를 약 80℃로 상승시켜 효소를 실활시켰다. Since the temperature of the extraction reactor, the pH of the extract reduces by about 55 ℃ the extract was adjusted to about 5.5 glycosidase (Fungamyl ®, Sebamyl ®, and Clariseb ®; Special Enzyme, USA) the applied about 200g, and for three hours after the reaction raises the temperature of the extract to about 80 ℃ to deactivate the enzyme. 효소 처리된 추출물을 여과포로 1차 여과하여 추출액과 잔여 추출 원료 고형물을 분리한 후 여과된 추출액을 다시 멤브레인 필터(기공 크기 : 0.45 ㎛)에 통과시켜 로 2차 여과하여 감압 증발기를 이용하여 불순물(색이나 이취 등에 기여하는 성분을 포함)을 제거하였다. Enzyme a primary filtering the treated extract to the filter fabric to separate the extract and the remaining extracted raw solid after re-membrane filter, the filtered extract (pore size: 0.45 ㎛) to a by-pass to the second filter using a vacuum evaporator impurities ( It was removed containing components that contribute to color and odor, etc.). 멤브레인 필터를 통과한 추출액을 약 2.5 브릭스(Brix)의 농도로 농축시켜 농축액 형태의 제2 복합 추출물 140㎏을 수득하였다. Concentration of the extract was passed through a membrane filter at a concentration of about 2.5 Brix (Brix) to yield the second composite 140㎏ extract of the concentrated liquid form. 또한, 농축액 형태의 제2 복합 추출물을 동결건조시켜 분말 형태의 제2 복합 추출물을 수득하였다. Further, the freeze-dried extract of the concentrate form the second composite to yield the second composite extract in powder form.

(3) 제3 복합 추출물의 제조 (3) producing a third composite extract

제조예 5. Preparation 5.

발효조에 LB 가변 배지(Luria-Bertani media) 1ℓ와 제조예 3에서 수득한 농축액 형태의 제2 복합 추출물 94ℓ를 투입하고 발효조를 스팀으로 멸균시켰다. In the variable LB medium (Luria-Bertani media) 1ℓ and a concentrated form of the second composite 94ℓ extract obtained in Production Example 3 was sterilized in the fermenter, and the fermentation tank with steam. 멸균된 발효조의 온도를 40℃로 유지하고, 유산균 배양액 5ℓ를 발효조에 투입하여 접종하였다. Maintaining the temperature of the sterilized fermentor to 40 ℃, which was then inoculated with a lactic acid bacteria added to the culture solution 5ℓ fermenter. 이때 접종된 유산균 배양액으로는 락토바실루스속(Lactobacillus)균을 LB 가변 배지(Luria-Bertani media)에 전배양(Preculture)하여 유산균의 균체수 농도가 1×10 7 cfu(Colony Forming Unit)/㎖ 인 것을 사용하였으며, LB 배지는 증류수 베이스 상에 트립톤(tryptone) 10 g/ℓ, 염화나트륨(NaCl) 10 g/ℓ, 효모 추출물(yeast extract) 5 g/ℓ로 구성된 것을 사용하였다. At this time, as the inoculation of lactic acid bacteria culture fluid is the Lactobacillus genus (Lactobacillus) bacteria the LB variable medium (Luria-Bertani media) in pre-culture (Preculture) by the cell number concentration of lactic acid 1 × 10 7 cfu (Colony Forming Unit) / ㎖ It was used to, LB medium was used consisting of tryptone (tryptone) 10 g / ℓ, sodium chloride (NaCl) 10 g / ℓ, yeast extract (yeast extract) 5 g / ℓ of distilled water on the base.

유산균 배양액이 접종된 발효조의 온도를 약 35℃로 조정하고 약 12시간 동안 발효시켜 제2 복합 추출물을 생물전환 시켰다. Adjusting the temperature of the lactic acid bacteria culture solution inoculated in the fermentor of about 35 ℃ and fermented for about 12 hours to a bioconversion second composite extract. 이후 발효조의 발효액을 여과포 및 멤브레인 필터를 이용하여 순차적으로 여과시켜 액상 형태의 제3 복합 추출물 100㎏을 수득하였다. After the fermentation broth by filtration of the fermentation tank in order to use the filter fabric and membrane filter to obtain a third composite 100㎏ extract a liquid form. 또한, 이를 농축 및 건조시켜 분말 형태의 제3 복합 추출물을 수득하였다. Further, by this, it concentrated and dried to give the third compound extract in powder form.

제조예 6. Preparation 6.

발효조에 LB 가변 배지(Luria-Bertani media) 1ℓ와 제조예 4에서 수득한 농축액 형태의 제2 복합 추출물 94ℓ를 투입하고 발효조를 스팀으로 멸균시켰다. In the variable LB medium (Luria-Bertani media) 1ℓ and a concentrated form of the second composite 94ℓ extract obtained in Preparation Example 4 in the fermentation vessel and the fermentation vessel was sterilized with steam. 멸균된 발효조의 온도를 40℃로 유지하고, 유산균 배양액 5ℓ를 발효조에 투입하여 접종하였다. Maintaining the temperature of the sterilized fermentor to 40 ℃, which was then inoculated with a lactic acid bacteria added to the culture solution 5ℓ fermenter. 이때 접종된 유산균 배양액으로는 락토바실루스속(Lactobacillus)균을 LB 배지(Luria-Bertani media)에 전배양(Preculture)하여 유산균의 균체수 농도가 1×10 7 cfu(Colony Forming Unit)/㎖ 인 것을 사용하였으며, LB 가변 배지는 증류수 베이스 상에 트립톤(tryptone) 10 g/ℓ, 염화나트륨(NaCl) 10 g/ℓ, 효모 추출물(yeast extract) 5 g/ℓ로 구성된 것을 사용하였다. At this time, the to the Lactobacillus genus (Lactobacillus) bacteria inoculated lactic acid bacteria culture fluid on LB medium (Luria-Bertani media) that the pre-culture (Preculture) to a the cell number concentration of lactic acid 1 × 10 7 cfu (Colony Forming Unit) / ㎖ was used, the variable LB medium was used consisting of tryptone (tryptone) 10 g / ℓ, sodium chloride (NaCl) 10 g / ℓ, yeast extract (yeast extract) 5 g / ℓ of distilled water on the base.

유산균 배양액이 접종된 발효조의 온도를 약 35℃로 조정하고 약 12시간 동안 발효시켜 제2 복합 추출물을 생물전환 시켰다. Adjusting the temperature of the lactic acid bacteria culture solution inoculated in the fermentor of about 35 ℃ and fermented for about 12 hours to a bioconversion second composite extract. 이후 발효조의 발효액을 여과포 및 멤브레인 필터를 이용하여 순차적으로 여과시켜 액상 형태의 제3 복합 추출물 100㎏을 수득하였다. After the fermentation broth by filtration of the fermentation tank in order to use the filter fabric and membrane filter to obtain a third composite 100㎏ extract a liquid form. 또한, 이를 농축 및 건조시켜 분말 형태의 제3 복합 추출물을 수득하였다. Further, by this, it concentrated and dried to give the third compound extract in powder form.

(4) 복합 추출물의 특성 (4) Characteristics of composite extract

1) 복합 추출물의 색상 및 냄새 평가 1) color and odor evaluation of the combined extracts

천연 원료의 용매 추출물, 용매 추출물을 효소로 처리한 효소 처리 추출물, 및 효소 처리 추출물을 유산균 발효로 생물전환 시킨 추출물의 색상 및 냄새를 관찰하였다. The solvent extract, a solvent, enzymatic treatment process the extract with the enzyme extracts, and enzyme-treated extracts of natural raw materials were observed in the color and odor were switched biological extract to lactic acid fermentation. 제조예 2, 제조예 4, 및 제조예 6에 의해 제조된 분말 형태의 복합 추출물을 2.5%(w/v)의 농도가 되도록 증류수에 녹이고 색상 및 냄새를 관찰하였다. Dissolve the combined extracts in the form of a powder prepared by Production Example 2 and Production Example 4 and Production Example 6 in distilled water to a concentration of 2.5% (w / v) was observed for color and odor. 색상의 경우 제조예 2는 진한 남색을 뛰었고, 제조예 4는 진한 황색을 띄었으며, 제조예 6은 연한 황색을 띄었다. For color Preparation 2 is jumped to a dark blue, was prepared Example 4 was stood a dark yellow, Preparation 6 was stood to pale yellow. 또한, 냄새의 경우 제조예 2는 추출 원료 고유의 이취가 강하게 났으나, 제조예 4 및 제조예 6의 경우 이취가 거의 발생하지 않았다. In the case of a smell Preparation 2 nateu strongly the specific extraction raw odor or, in the case of preparation 4 and preparation 6 odor is hardly generated. 상기의 결과로부터 용매로 추출된 복합 추출물이 효소 처리 및 발효 처리를 거치면서 탈색 및 탈취되는 것을 알수 있다. We can see that the extracts were combined and extracted with a solvent from the results of the bleaching and deodorization which goes through an enzyme treatment and fermentation processes.

2) 유산균 또는 특정 미생물 발효로 생물전환 시킨 제3 복합 추출물의 활성 물질 변화 2) The lactic acid fermentation or specific microbial biotransformation which the active material changes in the third composite extract was

제조예 4 및 제조예 6에서 얻은 분말 형태의 제2 복합 추출물 및 제3 복합 추출물의 활성 물질을 관찰하기 위하여 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC) 분석을 하였다. High performance liquid chromatography (HPLC) analysis in order to observe a powder form of the second and third extracts were combined active material of the composite extract obtained in Preparation Example 4 and Preparation Example 6. 이동상 용매로는 아세토니트릴(Acetonitrile)과 0.5% 농도의 인산(Phosphoric acid)을 27:73(v/v)로 혼합한 것을 사용하였고, 칼럼은 u-Bondapak C18 silica column을 사용하였으며, 샘플은 분말 형태의 추출물을 증류수에 용해 시킨 것을 사용하였다. As the mobile phase solvents were used a mixture of phosphoric acid (Phosphoric acid) in acetonitrile (Acetonitrile) and 0.5% concentration to 27:73 (v / v), column was used as u-Bondapak C18 silica column, sample powder the form of the extract used was obtained by dissolving in distilled water. 도 1은 제2 복합 추출물(위쪽)과 제3 복합 추출물(아래쪽)의 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC) 분석 결과를 나타낸 것이다. Figure 1 shows the second composite extract (top) and a third combined extracts high performance liquid chromatography (HPLC) of the (bottom) of the analysis. 도 1에서 보이는 바와 같이 유산균 발효에 의해 풍부한 활성 물질이 생성되는 것을 알 수 있다. As shown in Fig. 1 it can be seen that the substantial active substance produced by the lactic acid fermentation.

3) 제2 복합 추출물 및 제3 복합 추출물의 미백 효능 평가 3) a second whitening efficacy of the extracts combined and the combined extract 3

제조예 4 및 제조예 6에서 얻은 분말 형태의 제2 복합 추출물 및 제3 복합 추출물의 미백 효능을 티로시나제 활성 억제 효과를 통해 측정하였다. The whitening efficacy of the powder of the second compound and the third extract composite extract obtained in Preparation Example 4 and Preparation Example 6 was measured through a tyrosinase activity inhibiting effect.

먼저 기질인 티로신을 증류수에 0.3㎎/㎖의 용액으로 만들어서 그 용액을 1㎖씩 시험관에 넣고, 여기에 포타슘-포스페이트 완충용액(0.1M, pH 6.8) 1㎖와 시료 0.9㎖(복합 추출물을 물에 녹여 1㎎/㎖의 농도로 제조한 것으로, 이것을 w/v % 농도로 환산하면 0.1%임)를 넣은 뒤 37℃ 항온조에서 10분 동안 반응시켰다. First creating a solution of 0.3㎎ / ㎖ the substrate tyrosine in distilled water, placed in a test tube and the solution by 1㎖, here potassium-phosphate buffer (0.1M, pH 6.8) 1㎖ 0.9㎖ the sample (the compound water extract when converted to a melt prepared at a concentration of 1㎎ / ㎖ on, this as w / v% concentration was allowed to react for 0.1% Im) into 10 minutes in a constant temperature bath 37 ℃ the rear. 이때 대조군은 각 시료 대신 용매(물)만을 0.9㎖ 넣었다. The control group was put 0.9㎖ only the solvent (water) instead of each sample. 이 반응액에 2500unit/㎖ 의 버섯 유래 티로시나제(Sigma사) 용액 0.1㎖씩을 넣고 다시 37℃ 항온조에서 10분 동안 반응시켰다. Put ssikeul 2500unit / ㎖ mushroom-derived tyrosinase (Sigma) solution 0.1㎖ of the reaction solution was further reacted at 37 ℃ constant temperature bath for 10 minutes. 이 반응액이 든 시험관을 얼음물 속에 넣어서 급냉시켜 반응을 중지시키고 광전 분광분석계로 파장 475nm에서의 흡광도를 측정하였다. All this in vitro reaction solution was rapidly cooled to stop the reaction and put into ice water and measure the absorbance at a wavelength of 475nm with a photoelectric spectrophotometer. 각 시료의 티로시나제 활성 억제 효과는 다음의 수학식 1의 공식으로 구하였다. Tyrosinase activity inhibition effect of each sample was determined from the following formula of equation (1). 시험결과의 비교를 위해 양성 대조구로 동일 농도의 알부틴을 사용하였다. The arbutin of the same concentration was used as a positive control for comparison of the results.

Figure pat00001

시료 sample 티로시나제 활성 억제율(%) Tyrosinase activity inhibition rate (%)
제조예 4 Preparation 4 81.22 81.22
제조예 6 Preparation 6 88.7 88.7
알부틴 Albutin 34.3 34.3

표 1에서 나타나는 바와 같이 본 발명에 따른 제2 복합 추출물 및 제3 복합 추출물은 알부틴보다 높은 티로시나제 활성 억제율을 보였고, 특히, 유산균 발효에 의해 풍부한 활성 물질이 생성된 제3 복합 추출물에서 가장 높은 티로시나제 활성 억제율을 보였다. According to the invention as shown in Table 1, the second combined extract, and a third composite extract showed a high tyrosinase activity inhibition than arbutin, in particular, third composite extract the high tyrosinase activity in a substantial active substance by the lactic acid fermentation generated It showed a percent inhibition.

2. 제3 복합 추출물을 포함하는 복합 천연 미백제의 제조와 그 특성 2. Article 3 Preparation and properties of complex natural whitening products that contain complex extracts

(1) 복합 천연 미백제의 제조 (1) producing a composite of natural whitening agent

제조예 7.(분말 형태의 천연 미백제 제조) Preparation Example 7 (Preparation of powdery natural whitening agent)

제조예 6에서 수득한 액상 형태의 제3 복합 추출물에 완충제(Buffering agent)로 글리신(Glycine)을 소량 첨가하여 용해시키고, 농축한 후 분무건조기(Spray dryer) 또는 동결건조기로 건조하여 분말 형태의 복합 천연 미백제를 제조하였다. Preparation The liquid forms obtained in 6 buffer to the third complex extract (Buffering agent) in was dissolved in small amount of Glycine (Glycine), concentrated and then spray drier (Spray dryer) or freeze-dried in the dryer in powder form of the compound It was prepared in a natural whitening agent.

제조예 8.(액상 형태의 천연 미백제 제조) Production Example 8 (Preparation of whitening natural liquid form)

제조예 6에서 수득한 액상 형태의 제3 복합 추출물에 글리세린(Glycerin), 덱스트린(Dextrin)을 소량 첨가하고 용해시킨 후 젖산(Lactic acid)으로 pH를 5.0으로 조정하여 액상 형태의 복합 천연 미백제를 제조하였다. By addition of a small amount of glycerin (Glycerin), dextrin (Dextrin) a third compound extract of a liquid form obtained in Production Example 6 and the pH adjusted with lactic acid (Lactic acid) was dissolved to 5.0 producing a composite natural whitening agent in liquid form It was.

제조예 9.(에멀젼 형태의 천연 미백제 제조) Preparation Example 9 (Preparation of emulsion of natural whitening agent)

제조에 6에서 수득한 액상 형태의 제3 복합 추출물을 약 2.5 브릭스(Brix)로 농축하였다. And concentrated to a liquid form of the extract obtained in the third compound 6 in the production of about 2.5 Brix (Brix). 유화조에 농축된 제3 복합 추출물 18㎏. The third composite 18㎏ extract concentrated emulsion tank. 글리세린(Glycerin) 60㎏, 및 캐스터 오일(Caster oil) 22㎏을 투입한 후 유화조의 온도를 약 70~75℃로 승온시키고 호모게나이저(Homogenizer)로 교반하여(약 220~250 rpm) 균질화시켰다. Glycerin (Glycerin) 60㎏, and castor oil (Caster oil) was added after the heating of the emulsion 22㎏ bath temperature of about 70 ~ 75 ℃ was by stirring with a homogenizer to homo (Homogenizer) (approximately 220 ~ 250 rpm) homogeneous . 이후 유화조의 온도를 약 32~35℃로 내리고 젖산(Lactic acid)으로 균질화된 내용물의 pH를 약 3~5로 조정하여 에멀젼 형태의 복합 천연 미백제를 제조하였다. Since it lowers the emulsification bath temperature of about 32 ~ 35 ℃ adjusting the pH of the homogenized contents into lactic acid (Lactic acid) to about 3 to 5 to manufacture a composite of natural whitening agent in an emulsion form.

(2) 복합 천연 미백제의 미백 효능 평가 (2) The whitening efficacy of the natural compound whitening agent

복합 천연 미백제의 미백 효능은 티로시나제 활성 억제 효과 및 세포 내 멜라닌 생합성 억제 효과를 통하여 측정하였다. Whitening efficacy of the natural compound whitening agent was determined through the tyrosinase activity inhibition effect and cell inhibitory effect in melanin biosynthesis.

1) 티로시나제 활성 억제 효과 1) tyrosinase activity inhibition effect

먼저 기질인 티로신을 증류수에 0.3㎎/㎖의 용액으로 만들어서 그 용액을 1㎖씩 시험관에 넣고, 여기에 포타슘-포스페이트 완충용액(0.1M, pH 6.8) 1㎖와 농도별 시료 0.9㎖(복합 추출물을 물에 녹여 제조한 것으로, 만약 농도가 1㎎/㎖이라면 이것을 w/v % 농도로 환산하면 0.1%임)를 넣은 뒤 37℃ 항온조에서 10분 동안 반응시켰다. First creating a solution of 0.3㎎ / ㎖ the substrate tyrosine in distilled water, placed in a test tube and the solution by 1㎖, here potassium-phosphate buffer (0.1M, pH 6.8) 1㎖ and concentrations 0.9㎖ sample (composite extract to that prepared by dissolving in water, if the concentration is allowed to react for 1㎎ / ㎖ If translates this to w / v% concentration being 0.1%), 10 min at 37 ℃ back into the constant temperature bath. 이때 대조군은 각 시료 대신 용매(물)만을 0.9㎖ 넣었다. The control group was put 0.9㎖ only the solvent (water) instead of each sample. 이 반응액에 2500unit/㎖ 의 버섯 유래 티로시나제(Sigma사) 용액 0.1㎖씩을 넣고 다시 37℃ 항온조에서 10분 동안 반응시켰다. Put ssikeul 2500unit / ㎖ mushroom-derived tyrosinase (Sigma) solution 0.1㎖ of the reaction solution was further reacted at 37 ℃ constant temperature bath for 10 minutes. 이 반응액이 든 시험관을 얼음물 속에 넣어서 급냉시켜 반응을 중지시키고 광전 분광분석계로 파장 475nm에서의 흡광도를 측정하였다. All this in vitro reaction solution was rapidly cooled to stop the reaction and put into ice water and measure the absorbance at a wavelength of 475nm with a photoelectric spectrophotometer. 각 시료의 티로시나제 활성 억제 효과는 앞에서 서술한 수학식 1의 공식으로 구하였다. Tyrosinase activity inhibition effect of each sample was determined by the formula of equation (1) described above. 시험결과의 비교를 위해 양성 대조구로 동일 농도의 알부틴을 사용하였며, 시료 및 농도에 따른 티로시나제 활성 억제율을 표 2에 나타내었다. It said using arbutin was the same concentration as a positive control for comparison of the test results, showing the tyrosinase activity inhibition rate of the sample and the concentrations shown in Table 2.

구분 division 시료 농도(㎎/㎖) Sample concentration (㎎ / ㎖)
0.1 0.1 1 One 5 5 10 10
제조예 9 Preparation 9 54.9% 54.9% 81.2% 81.2% 89.3% 89.3% 98.7% 98.7%
알부틴 Albutin 15.6% 15.6% 34.3% 34.3% 72.3% 72.3% 96.7% 96.7%

2) 세포 내 멜라닌 생합성 억제 효과 2) intracellular melanin biosynthesis inhibiting effect

마우스 유래 B16F10 멜라노마 세포 내 멜라민 생합성 억제 효과를 측정하기 위하여 다음과 같이 실험을 진행하였다. To mouse-derived B16F10 melanoma cells to measure the inhibitory effect in the melamine synthesis was carried out the experiment as follows.

96 웰 마이크로플레이트 (96 well micro plate)에 5,000/웰(well) 의 B16F10 멜라노마 세포를 분주하고, 24시간 후에 시료를 농도별로 처리한 후 72시간 후에 멜라닌 생성량을 475nm에서 흡광도를 측정하였으며, 대조군은 시료를 제외한 세포와 배지로만 하여 동시에 측정 하였다. 96 well after the microplate (96-well micro plate) divides the B16F10 melanoma cells of 5,000 / well (well) on, and the processing of the sample at different concentrations after 24 hours after 72 hours was measured and the absorbance of melanin production at 475nm, the control group It was measured by only the cells and culture medium except for the sample at the same time. 결과는 시료의 세포 독성을 측정하여 세포 독성이 없는 농도 범위 내에서 그리고 세포 수를 고려하여 멜라닌 생성억제 효과를 알부틴과 비교하였다. The results, taking into account the inside by measuring the cytotoxicity of the sample concentration range with no cytotoxicity and the cell number was compared to the arbutin melanogenesis inhibitory effect. 세포 독성 및 증식 실험은 다음과 같이 하였다. Cytotoxicity and proliferation experiments were as follows: 96 웰 마이크로플레이트에 5,000/웰 의 3T3 세포를 분주하고,24시간 후에 시료를 농도 별로 처리하였다. In a 96-well microplate dividing the 3T3 cells of 5000 / well and treated samples at different concentrations after 24 hours. 44시간 후에 티아졸린 블루(Thiazoline blue)를 투여하고 4시간 후에 570nm에서 흡광도를 측정하였다(시험시 10 % 소태아혈청(Fetal Bovine Serum, FBS) 배지를 함께 사용). 44 hours after sleepy thiazol blue (blue Thiazoline) administration, and the absorbance was measured at 570nm after 4 hours (using 10% fetal bovine serum during the test (Fetal Bovine Serum, FBS) culture medium with). 각 시료의 멜라닌 생성 억제 효과는 다음의 수학식 2로 구하였고, 그 결과를 표 3에 나타내었다. Melanogenesis inhibitory effect of each sample was obtain the following equation (2), the results are shown in Table 3.

Figure pat00002

구분 division 시료 농도(㎎/㎖) Sample concentration (㎎ / ㎖)
0.01 0.01 0.1 0.1 0.5 0.5 1 One
제조예 9 Preparation 9 21.6% 21.6% 42.6 42.6 51.3 51.3 57.8 57.8
알부틴 Albutin 8.67% 8.67% 21.7 21.7 12.6 12.6 10.3 10.3

(3) 복합 천연 미백제의 자유 라디칼 소거능 평가 (3) free radical scavenging activity evaluation of complex natural whitening

제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제의 자유 라디칼 소거능을 확인하기 위해 DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) 방법을 이용하였다. The DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) method was used to determine free radical scavenging activity of the natural compound whitening agent prepared in Preparation Example 9. DPPH은 색을 띄는 라디칼로서 이를 이용해 시료의 라디칼 제거능력을 직접 확인할 수 있다. DPPH radical can use it as a stand for the radical scavenging ability to see color samples directly. 시료(제조예 9에서 제조한 복합 천연 항산화제 및 비교 시료)를 용매(에탄올)에 녹여 농도별로 준비하고, 각 농도별 시료 1㎖에, 100 uM DPPH 1 ㎖을 섞은 후, 상온에서 30분 동안 반응시켰다. A sample (a composite of natural antioxidants and a comparative sample prepared in Preparation Example 9) prepared by the concentration dissolved in the solvent (ethanol), and to each concentration sample 1㎖, then mixed with 100 uM DPPH 1 ㎖, 30 min at room temperature for He reacted. 517 nm에서 흡광도를 측정하여 남아있는 DPPH의 양을 파악하였고 대조군을 기준으로 각 시료의 상대적 항산화 효과를 라디칼 소거능 백분율로 나타내었다(대조군: 시료를 넣지 않고 DPPH와 용매로만 구성된 시험군). DPPH was identify the amount of remaining by measuring the absorbance at 517 nm indicated the relative antioxidant activity of each sample relative to the control group to radical scavenging percentage (control: without placing the specimen consists of only DPPH test group and a solvent).

도 2는 본 발명의 제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제의 자유 라디칼 소거능을 나타낸 것이다. Figure 2 illustrates the free radical scavenging activity of the natural compound whitening agent prepared in Preparation Example 9 of the present invention. 도 2에서 보이는 바와 같이 본 발명의 제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제는 녹차 분말의 폴리페놀, BHA(butylated hydroxyanisole), 및 BHT(butylated hydroxytoluene) 보다 자유 라디칼 소거능이 더 높은 것으로 나타났다. Also a composite natural prepared in Preparation Example 9 of the present invention as shown in the second whitening agent showed that polyphenol, BHA (butylated hydroxyanisole) of green tea powder, and a free radical scavenging activity than BHT (butylated hydroxytoluene) is higher. 이러한 자유 라디칼 소거능 결과로부터 본 발명의 제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제가 식품 첨가제, 화장료 첨가제, 사료 첨가제, 의약 첨가제 등으로 사용되는 경우 미백뿐만 아니라 항산화 기능을 제공할 수 있음을 알 수 있다. If the composite natural whitening agent produced from such free-radical scavenging activity results in the preparation example 9 of the present invention is used as a food additive, cosmetic additive, food additive, medicament additive or the like can be whitening as well understood that to provide antioxidant properties.

(4) 복합 천연 미백제의 세포 재생 효과(Cell Recovery Test) (4) cell regeneration effect of the compound of natural whitening agent (Cell Recovery Test)

1) 세포 배양 1) Cell culture

Bovine aortic endothelial cells(BAEC; 일본 큐우슈우 대학으로부터 공급받음)을 10% fetal calf serum (FCS, GIBCO BRL)이 포함된 Dulbecco's Modified Eagle medium (DMEM, GIBCO BRL, Grand Island, NY)로 인큐베이터에서 배양하였다(37℃, 5% CO 2 ). Bovine aortic endothelial cells (BAEC; receiving supplies from Japan cue Wushu Wu College) as a 10% fetal calf serum (FCS, GIBCO BRL) with Dulbecco's Modified Eagle medium (DMEM, GIBCO BRL, Grand Island, NY) containing cultured in an incubator It was (37 ℃, 5% CO 2 ).

2) 배양된 세포의 처리 2) treatment of cultured cells

24시간 정도 배양한 BAEC 세포를 0.2μM 4-HNE(4-Hydroxynonenal, 산화제)로 처리하고 12시간 배양하였다. Treatment for 24 hours of incubation the BAEC cells with 0.2μM 4-HNE (4-Hydroxynonenal, oxidizing agent), and cultured for 12 hours. 4-HNE로 12시간 처리 배양 후 세포를 잘 씻어 산화제를 제거한 후 다시 배양하였다. After 12 hours incubation in 4-HNE treatment after washing the cells to remove the oxidizing agent well was further incubated. 여기에 제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제(에탄올에 녹여 농도를 10㎍/㎖로 조정함)를 첨가하고, 12시간 또는 24시간 배양한 후 세포를 수확하였다. Here a composite natural lightening agents added to (dissolved in ethanol in a concentration adjustment also 10㎍ / ㎖), and 12-hour or 24-hour incubation after the cells produced in Production Example 9 was harvested.

3) 세포 상태 변화 측정 3) The cell status change measurement

수확한 세포를 35㎜ Acas dishes(Mat-Tek, USA)에서 100㎍/㎖ acridine orange(Sigma Chemical Co.)와 100㎍/㎖ ethidium bromide (Sigma Chemical Co.)로 염색시키고, 염색된 세포들은 형광 현미경(reflected fluorescence microscopy; Olympus, Japan)으로 관찰하였다. The harvested cells 35㎜ Acas dishes (-Mat Tek, USA) and stained with 100㎍ / ㎖ acridine orange (Sigma Chemical Co.) and 100㎍ / ㎖ ethidium bromide (Sigma Chemical Co.) from, the stained cells are fluorescent It was observed; (Olympus, Japan reflected fluorescence microscopy) microscope. 형광 현미경으로 관찰하였을 때 초록색으로 보이는 세포들은 살아 있는 세포이고 붉은 색으로 관찰된 세포는 아포토시스(apoptosis)가 일어난 세포이다. When observed with a fluorescence microscope, the cells are shown in green and living cells the cells are observed in red cell apoptosis (apoptosis) has occurred.

도 3은 본 발명의 제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제에 의한 세포 재생 효과를 나타낸 형광 현미경 사진이다. 3 is a fluorescence micrograph showing the cell regeneration effect of the natural compound whitening agent prepared in Preparation Example 9 of the present invention. 도 3에서 "A"는 대조군으로서 4-HNE 처리및 제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제 처리를 하지 않고 배양한 것이고, "B"는 4-HNE로 12시간 처리 배양한 것이고, "C"는 4-HNE로 12시간 처리 배양한 후 제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제로 12시간 처리 배양한 것이고, "D"는 4-HNE로 12시간 처리 배양한 후 제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제로 24시간 처리 배양한 것이다. In Figure 3 "A" will cultured without a complex natural whitening treatment prepared in 4-HNE treatment and Production Example 9 As a control, "B" will for 12 hours treated culture to 4-HNE, "C" is after 12 hours treated culture to 4-HNE for 12 hours by a complex natural whitening agent prepared in Preparation example 9 would cultured, "D" is a complex natural whitening agent manufactured by 4-HNE example produced after 12 hours treatment incubated with 9 to be processed for 24 hours culture. 도 3에서 보이는 바와 같이 4-HNE로 산화적 스트레스를 가한 세포에 제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제를 처리하면 세포의 면역활성이 증가하여 산화적 스트레스를 처리하지 않은 대조군의 세포와 같이 세포가 회복됨을 알 수 있다. If the 4-HNE process the composite natural whitening agent prepared in Preparation Example 9, the cell is added to the oxidative stress, as shown in Figure 3 to the immune activity of the cells is increased, as in the control group not treated with oxidative stress in cells it can be seen Restored. 따라서, 본 발명의 제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제를 가축의 사료 첨가제, 기능성 식품 첨가제 등으로 사용할 경우 가축 내지 인체의 면역활성을 증가시켜 질병 저항성을 증가시키고 가축의 경우 개체의 증량을 기대할 수 있을 것이다. Therefore, when using a compound of natural whitening agent prepared in Preparation Example 9 of the present invention to livestock of feed additives, functional food additives and the like to increase the animals to immune activity can be expected to increase for increasing the disease resistance and the case of cattle object There will be.

(5) 복합 천연 미백제의 노화 억제 효과 (5) aging inhibition effect of the composite natural whitening agent

1) 세포 배양 1) Cell culture

Bovine pulmonary artery endothelial cells [BPAE; Bovine pulmonary artery endothelial cells [BPAE; Korean Cell Line Bank( KCLB0, Korea로부터 공급받음)을 10% fetal calf serum (FCS, GIBCO BRL)이 포함된 Dulbecco's Modified Eagle medium (DMEM, GIBCO BRL, Grand Island, NY)로 인큐베이터에서 배양하였다(37℃, 5% CO 2 ). The Korean Cell Line Bank (Supplied from KCLB0, Korea) 10% fetal calf serum (FCS, GIBCO BRL) was cultured in an incubator in Dulbecco's Modified Eagle medium (DMEM, GIBCO BRL, Grand Island, NY) containing the (37 ℃ , 5% CO 2).

2) 배양된 세포의 처리 2) treatment of cultured cells

24시간 정도 배양한 BPAE 세포를 0.2μM 4-HNE(4-Hydroxynonenal, 산화제)로 처리하고 6시간 배양하였다. Handle 24 hours a BPAE cells incubated with 0.2μM 4-HNE (4-Hydroxynonenal, oxidant) and incubated for 6 hours. 4-HNE로 12시간 처리 배양 후 세포를 잘 씻어 산화제를 제거한 후 다시 배양하였다. After 12 hours incubation in 4-HNE treatment after washing the cells to remove the oxidizing agent well was further incubated. 여기에 제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제(에탄올에 녹여 농도를 10㎍/㎖로 조정함)를 첨가하고, 12시간 또는 24시간 배양한 후 세포를 수확하였다. Here a composite natural lightening agents added to (dissolved in ethanol in a concentration adjustment also 10㎍ / ㎖), and 12-hour or 24-hour incubation after the cells produced in Production Example 9 was harvested.

3) 웨스턴 블랏 분석(Western blot anaylsis) 3) Western blot analysis (Western blot anaylsis)

웨스턴 블랏을 이용하여 수확한 세포의 PARP 분절형 단백질(PARP Cleaved form)의 발현 정도를 분석하였다. The expression level of PARP protein of the segmented cells harvested using a Western blot (Cleaved PARP form) was analyzed. PARP 분절형 단백질은 아포토시스(apoptosis)] 유도시 발현이 증가하는 단백질 형태, 즉 노화 유발 단백질로 알려져 있다. PARP segmented protein is known to form a protein, that is, the aging-induced protein to increase expression during apoptosis (apoptosis)] induction. 배양이 완료된 세포를 배양기에서 꺼내어 차가운 PBS로 두 번 세척한 후 PBS 1㎖을 배양접시에 넣고 세포를 스크랩퍼로 떼어내었다. After this is completed, remove the cell culture in an incubator and washed with cold PBS twice with PBS 1㎖ into a Petri dish was taken out of the cell to the scrap buffer. 세포를 원심분리 튜브에 옮겨 원심분리(3000rpm, 3min, 4℃)한 다음, 상등액을 버리고 1μg/㎖ aprotinin과 100μg/㎖ phenyl- methylsulfonyl fluoride(PMSF)를 포함하는 라이시스 완충액(lysis buffer; 1% Triton X-100. 50 mM Tris-HCL, 150mM NaCl, 0.2 % sodium azide)으로 단백질을 추출하고, 12,000 rpm으로 10 분간 원심분리하여 단백질 추출액을 분리하였다. Transferred centrifuge the cells into a centrifuge tube (3000rpm, 3min, 4 ℃), and then, discard the supernatant 1μg / ㎖ aprotinin and 100μg / ㎖ phenyl- methylsulfonyl fluoride Lai System buffer (lysis buffer containing (PMSF); 1% extracting the protein with Triton X-100. 50 mM Tris-HCL, 150mM NaCl, 0.2% sodium azide), and separated by 10 minutes centrifugation at 12,000 rpm to separate the protein extract. 분리된 단백질의 농도를 BSA assay(Bicinichonic acid solution)로 측정하였고, 20~40㎍의 단백질을 12% SDS-폴리아크릴아마이드 젤에서 전기영동하였다. We measured the concentrations of the separated proteins to a BSA assay (Bicinichonic acid solution), it was electrophoresed proteins of 20 ~ 40㎍ in 12% SDS- polyacrylamide gel. 전기영동된 젤 상의 단백질을 PVDF(polyvinylidene difluoride) 멤브레인에 280mA로 90분간 옮겼고, 멤브레인을 TBST(0.1% Tween-Tris-buffered saline)으로 세척하고 5% 스킴밀크로 1시간 동안 실온에서 블로킹하였다. Proteins on an electrophoresis gel, the plates are blocked for 1 hour at room temperature to a PVDF (polyvinylidene difluoride) moved 90 minutes at 280mA to the membrane, washing the membrane with TBST (0.1% Tween-Tris-buffered saline) and 5% skim milk. 1차 항체(희석 비율은 1 : 2000)는 2시간 실온에서 반응시킨 다음 TBST로 10분씩 3번 세척 후 HRP-컨쥬게이트된 2차 항체(희석 비율은 1 : 10000)를 1시간 반응시켰으며, 항체 반응이 끝난 멤브레인은 TBST로 1분씩 4번 세척한 후 형성된 면역복합체를 ECL(enhanced chemiluminescence) 발색시약을 이용하여 확인하였다. Stylized 1 h the primary antibody (dilution 1: 2000), and then washed for 10 minutes each with TBST and then reacted at room temperature for 2 hours 3 HRP- conjugated secondary antibodies (dilution ratio of 10,000: 1) membrane is reacted antibody was confirmed that the immune complexes formed were washed four times with TBST for 1 minute using an ECL (enhanced chemiluminescence) coloring reagent.

도 4는 본 발명의 제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제에 의한 노화 유발 단백질의 발현 억제 효과를 나타낸 웨스턴 블랏 사진이다. Figure 4 is a Western blot photograph showing the expression of inhibitory effects of aging caused by the protein complex natural whitening agent prepared in Preparation Example 9 of the present invention. 도 4에서 "A"는 4-HNE로 6시간 처리 배양한 후 제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제로 12시간 처리 배양한 것이고, "B"는 4-HNE로 6시간 처리 배양한 후 제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제로 24시간 처리 배양한 것이고, "C"는 4-HNE로 6시간 처리 배양한 것이고, "D"는 대조군으로서 4-HNE 처리및 제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제 처리를 하지 않고 배양한 것이다. In Figure 4 "A" will for 12 hours treated culture to 4-HNE in complex natural whitening agent prepared in Preparation Example 9 was cultured treatment 6 hours, "B" is for example, produced after treatment 6 hours of incubation with 4-HNE with a compound of natural whitening agent prepared in 9 treatment 24 hours will cultured, "C" will treated 6 hours of incubation with 4-HNE, "D" is a complex natural whitening agent manufactured by 4-HNE treatment and Preparation 9 as a control without treatment it was cultured. 도 4에서 나타나는 바와 같이 4-HNE로 산화적 스트레스를 가한 세포에 제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제를 처리하면 노화 유발과 관련된 단백질로 알려진 PARP 분절형 단백질의 세포 내 발현이 억제되는 것을 알 수 있다. Can be seen that even when processing a composite of natural whitening agent prepared in Preparation Example 9, the cell is added to the oxidative stress to the 4-HNE, as shown at 4 which are within the expressing cells of PARP segmented protein known as the related proteins and aging-induced inhibition have. 반면, 4-HNE로 산화적 스트레스를 가한 세포에서는 PARP 분절형 단백질이 다량 발현됨을 알 수 있다. On the other hand, the cells were added to 4-HNE oxidative stress it can be seen that a large amount PARP segmented protein expression. 따라서, 본 발명의 제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제를 가축의 사료 첨가제, 기능성 식품 첨가제, 기능성 화장료 첨가제 등으로 사용할 경우 가축 내지 인체의 항산화에 의한 면역력 증가뿐만 아니라 노화 억제도 기대할 수 있을 것이다. Thus, it will be expected when using a compound of natural whitening agent prepared in Preparation Example 9 of the present invention to livestock of feed additives, functional food additives, functional cosmetic additives and the like, as well as increased immunity by the antioxidant of cattle to human aging inhibition.

(6) 복합 천연 미백제의 급성 경구 독성 평가 6 is a composite natural Acute oral toxicity evaluation of whitening agent

제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제가 식품, 의약품 등에도 안전하게 적용될 수 있는가를 확인하기 위해 급성 경구 독성 시험을 실시하였다. Is a natural compound whitening agent prepared in Preparation Example 9 was subjected to acute oral toxicity test to determine whether or be applied safely for food, pharmaceutical products. 실험동물로서 5 내지 6주령 된 SPF SD계 랫드 20마리를 사용하여 하기와 같은 조건에서 급성독성시험을 실시하였다. As test animals were subjected to acute toxicity tests in the conditions as described below by using the SPF SD rats 20-based 5 to 6-week-old birds.

ㆍ온도 및 습도조건 : 온도 22 ± 2 ℃. And temperature and humidity conditions: temperature 22 ± 2 ℃. 상대습도 50 ± 10 % Relative humidity 50 ± 10%

ㆍ명암 사이클 : 형광등 조명 (08시 점등, 20시 소등) And contrast cycle: fluorescent light (08 hour light, 20 hour light-off)

ㆍ조도 : 200 내지 300 Lux And light intensity: 200 to 300 Lux

ㆍ자외선 처리된 음용수는 자유섭취 시킴 And UV-treated drinking water is consumed free Sikkim

ㆍ시험물질을 멸균증류수에 희석하여 투여시료를 제조하여 대조구로서 멸균 증류수를 사용하여 동량 투입 And the same amount added to the sample to prepare a diluted test substance administration in sterile distilled water using sterile distilled water as a control

투여 당일은 4시간까지 매 시간마다 일반상태를 관찰하고, 투여 다음날부터 14일까지는 매일 1회씩 일반상태의 변화, 중독증상, 운동성, 외관, 자율신경 및 사망동물의 유무를 주의깊게 관찰하고 여러 가지 병리 해부학적인 검증을 거쳐 독성 유무를 판단하였다. Administering the day to 4 hours each time and observe the general state administration from the next day until the 14th day once a change in the normal state, intoxication, movement, appearance, carefully observe the presence of the autonomic nervous system and death animals and several via the pathological anatomical verification was considered a toxic or not. 반수 치사량(LD 50 )은 20㎖/kg BW(Body weight)보다 높게 나타났으며, 독성은 없는 것으로 판단되었다. Half were lethal dose (LD 50) were higher than the 20㎖ / kg BW (Body weight) , toxicity was not considered.

(6) 복합 천연 미백제의 인체 피부에 대한 안전성 평가 (6) safety assessment of human skin in a natural whitening complex

제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제가 인체 피부에도 안전한지 확인하기 위하여, 피부 안전성 검증 실험을 수행하였다. For the composite natural whitening agent prepared in Example 9, to confirm that it is safe to human skin, and the skin was carried out safety verification tests. 시험방법으로는 피부누적자극 시험을 실시하였다. Test methods conducted a cumulative skin irritation test. 스쿠알렌을 베이스로 하여 제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제를 각각 0.1%(w/v), 1 %(w/v), 5%(w/v), 10%(w/v)를 첨가한 피부 외용제를 제조하고, 이를 사용하여 건강한 30명의 성인을 대상으로 윗팔뚝 부위에 격일로 총 9회의 24시간 동안 누적 첩포를 시행하는 것에 의하여 복합 천연 항산화제가 피부에 자극을 주는지의 여부를 측정하였다. One to the squalane as a base added to the preparation a compound of natural whitening agent prepared in 9 respectively 0.1% (w / v), 1% (w / v), 5% (w / v), 10% (w / v) whether the manufacturer of the external preparation for skin and use it to how a healthy 30 for adults, by what conduct a cumulative patch for a total of nine times for 24 hours every other day in the upper arm area complex natural antioxidant skin irritation was measured. 첩포 방법은 핀 챔버 (Finn chamber, Epitest Ltd, 핀란드)를 이용하였다. Patch method was used to pin the chamber (Finn chamber, Epitest Ltd, Finland). 챔버에 상기 각 피부 외용제를 15㎕씩 적하한 후 첩포를 실시하였다. Was dropped on each of the external preparation for skin according to the chamber by 15㎕ conducted a patch. 측정 결과 본 발명의 제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제는 뚜렷한 누적 자극 양상을 나타내지 않았고, 인체 피부에 안전한 것으로 판명되었다. Measurement results combined natural whitening agent prepared in Preparation Example 9 of the present invention did not show a pronounced accumulation stimulation pattern, it was found to be safe for human skin.

또한, 피험자 30명을 대상으로 IQ Chamber를 이용하여 상박에 피부 첩포시험 (Patch Test)을 실시하였다. In addition, we performed a skin patch test (Patch Test) to the upper arm by using the IQ Chamber targeting subjects 30. 단 건선(Psoriasis), 습진(Eczema), 기타 피부병변 보유자나 임신, 수유부 또는 피임제, 항히스타민제 등을 복용하고 있는 사람은 본 실험에서 제외 하였다. However Psoriasis (Psoriasis), eczema (Eczema), and other skin lesions holders or pregnancy, lactation or birth control, people are taking antihistamines, etc. were excluded from this study. 시험부위를 70% 에탄올로 닦아낸 뒤 건조시킨 다음 준비된 피험자 30명의 상박에 제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제 1%(w/v) 및 Gly 20%(w/v)인 시료들 만들고, 이것을 25㎕씩 IQ Chamber에 적하 시킨 후 시험 부위인 상박 부위에 얹어 고정시켰다. Creating in the test area of ​​70% and dried after the wiping with ethanol and then combined natural whitening agent prepared in Preparation Example 9, a prepared subject 30 upper arm 1% (w / v), and Gly 20% (w / v) sample, this It was dropped on the IQ Chamber by 25㎕ and fixed topped with the test site of the upper arm area. 첩포는 24시간 동안 도포하여 첩포를 제거한 후에는 Marking Pen으로 시험부위를 표시하여 각각 30분 경과 후, 24시간 경과 후, 48시간 경과 후에 시험부위를 관찰하였다. Patch was observed after the test area after 30 minutes, respectively, after removal of the patch was applied for 24 hours, by displaying the test area with a Marking Pen, after 24 hours, 48 ​​hours. 첩포 제거 30분 경과 후, 24시간 경과 후, 48시간 경과 후에 행하며 피부반응은 국제접촉피부염연구회 (International Contact Dermatitis Research Group: ICDRG)의 판정기준에 따라 자극 정도를 분류하였다. Patch was removed 30 minutes after 24 hours, walk in after 48 hours, the skin reaction International Contact Dermatitis Research Group: classified according to the degree of stimulation to the criteria of (International Contact Dermatitis Research Group ICDRG). 또한, 평균피부반응도 계산공식에 따라 Mean score를 산정한 후 피부첩포시험 (Patch Test) 결과 판정표에 따라 자극 유무를 판정하였다. Further, after calculating the Mean score according to the formula mean skin reactivity was determined in accordance with whether or not the magnetic pole skin patch test (Patch Test) result panjeongpyo. 표 4는 첩포 시험 결과를 나타낸 것이다. Table 4 shows the patch test results. 표 2에서 보이는 바와 같이 제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제 1%(w/v) 및 Gly 20%(w/v)인 시료의 경우 평균 피부반응도는 0.19로써 무자극으로 판정되었다. A natural compound whitening agent prepared in Preparation Example 9 as shown in TABLE 2 1% (w / v), and Gly 20% (w / v) of the sample when the average skin reaction has been determined to be non-stimulated by 0.19.

구분 division 시간 경과 Time
30분 30 minutes 24시간 24 hours 48시간 48 hours
반응도 Reaction - - 29 29 30 30 30 30
± ± 1 One 0 0 0 0
+ + 0 0 0 0 0 0
++ ++ 0 0 0 0 0 0
+++ +++ 0 0 0 0 0 0
Mean Score Mean Score 0.19 0.19
판정 Judgment 무자극 No irritation

※ 표 4에서 피부반응 판정기준 ※ skin reactions in Table 4. Criteria

1) Negative (-) : 무자극 1) Negative (-): no irritation

2) Doubtful or slight reaction and erythema (±) : 미자극 희미한 또는 가까스로 감지할 수 있는 가벼운 홍반 2) Doubtful or slight reaction and erythema (±): US stimulus faint or light erythema can be barely detected

3) Erythema + Induration (+) : 경자극 경계가 뚜렷하나 약한 홍반, 부종 및 구진 3) Erythema + Induration (+): If the border is stimulating a weak pronounced erythema, edema and papules

4) Erythema + Induration + Vesicle (++) : 중자극 뚜렷한 홍반, 구진 및 소수포 4) Erythema + Induration + Vesicle (++): stimulation of distinct erythema, papules and vesicles

5) Erythema + Induration + Bullae (+++) : 강자극 심한 홍반 및 대수포, 가피형성 5) Erythema Induration + + Bullae (+++): severe erythema and irritation steel bullae, crust formation

또한, Mean Score 가 0.00~0.75이면 무자극, 0.76~1.50이면 미자극, 1.51~2.50이면 경자극, 2.51~4.00이면 중자극, 4.01이상이면 강자극으로 판정한다. In addition, when the Mean Score 0.00 ~ 0.75 no irritation, when 0.76 ~ 1.50 is non-stimulated, 1.51 ~ 2.50 back light stimulus, the stimulus is of 2.51 ~ 4.00, 4.01 or higher is judged as steel stimulation.

3. 복합 천연 미백제를 포함한 화장료 조성물의 제조 3. Preparation of a cosmetic composition containing the composite natural whitening agent

제조예 10.(스킨 형태의 화장료 조성물 제조예) Production Example 10 (Skin type of cosmetic composition preparation)

제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제를 포함한 스킨 조성물을 표 5의 조성으로 제조하였다. A skin composition containing a composite of natural whitening agent prepared in Preparation Example 9 was prepared in the compositions shown in Table 5.

성분 ingredient 성분 함량(중량 %) Ingredients Amount (wt%)
제조예 9 Preparation 9 1.0 1.0
글리세린 glycerin 3.0 3.0
부틸렌글리콜 Butylene glycol 2.0 2.0
폴리옥시에틸렌(60) 경화피마자유 Polyoxyethylene (60) hydrogenated castor oil 0.5 0.5
에탄올 ethanol 6.0 6.0
향료 Spices 0.1 0.1
색소 Coloring 0.01 0.01
정제수 Purified water 잔량 Remaining

제조예 11.(로션 형태의 화장료 조성물 제조예) Production Example 11 (Production of lotion type cosmetic composition example)

제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제를 포함한 로션 조성물을 표 6의 조성으로 제조하였다. The lotion composition, including a complex natural whitening agent prepared in Preparation Example 9 was prepared in the compositions shown in Table 6.

성분 ingredient 성분 함량(중량 %) Ingredients Amount (wt%)
제조예 9 Preparation 9 2.0 2.0
스테아린산 Stearate 1.0 1.0
세틸알코올 Cetyl alcohol 1.0 1.0
글리세릴모노스테아레이트 Glyceryl monostearate 1.0 1.0
폴리옥시에틸렌소르비탄모노스테아레이트 Polyoxyethylene sorbitan monostearate 1.0 1.0
솔비탄세스퀴올레이트 Sorbitan process kwiol rate 1.0 1.0
유동파라핀 Liquid paraffin 4.0 4.0
스쿠알란 Squalane 3.0 3.0
카프릴릭/카프릭 글리세라이드 Caprylic / Capric Triglyceride 4.0 4.0
카르복시비닐폴리머 Carboxyvinylpolymer 0.1 0.1
부틸렌글리콜 Butylene glycol 4.0 4.0
트리에탄올아민 Triethanolamine 0.2 0.2
향료 Spices 0.1 0.1
색소 Coloring 0.01 0.01
정제수 Purified water 잔량 Remaining

제조예 10.(크림 형태의 화장료 조성물 제조예) Preparation Example 10 (Preparation Example cream in the form of a cosmetic composition)

제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제를 포함한 크림 조성물을 표 7의 조성으로 제조하였다. A cream composition comprising a compound of natural whitening agent prepared in Preparation Example 9 was prepared in the compositions shown in Table 7.

성분 ingredient 성분 함량(중량 %) Ingredients Amount (wt%)
제조예 9 Preparation 9 3.0 3.0
스테아린산 Stearate 1.5 1.5
세틸알코올 Cetyl alcohol 2.0 2.0
글리세릴모노스테아레이트 Glyceryl monostearate 2.0 2.0
폴리옥시에틸렌소르비탄모노스테아레이트 Polyoxyethylene sorbitan monostearate 1.0 1.0
솔비탄세스퀴올레이트 Sorbitan process kwiol rate 0.5 0.5
유동파라핀 Liquid paraffin 4.0 4.0
왁스 Wax 2.0 2.0
스쿠알란 Squalane 4.0 4.0
카프릴릭/카프릭 글리세라이드 Caprylic / Capric Triglyceride 4.0 4.0
카르복시비닐폴리머 Carboxyvinylpolymer 0.4 0.4
부틸렌글리콜 Butylene glycol 4.0 4.0
글리세린 glycerin 3.0 3.0
트리에탄올아민 Triethanolamine 0.5 0.5
향료 Spices 0.1 0.1
색소 Coloring 0.01 0.01
정제수 Purified water 잔량 Remaining

본 발명에 따른 미백제는 화장료 조성물에 적용되어 제품에 미백 기능을 부여할 뿐만 아니라, 높은 항산화 효과, 면역력 증가, 노화 억제 기능을 발휘할 수 있다. Whitening agents according to the invention not only is applied to the cosmetic composition giving a whitening product, it can exhibit a high antioxidant activity, increased immunity, aging suppression.

도 3에서 "A"는 대조군으로서 4-HNE 처리및 제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제 처리를 하지 않고 배양한 것이고, "B"는 4-HNE로 12시간 처리 배양한 것이고, "C"는 4-HNE로 12시간 처리 배양한 후 제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제로 12시간 처리 배양한 것이고, "D"는 4-HNE로 12시간 처리 배양한 후 제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제로 24시간 처리 배양한 것이다. In Figure 3 "A" will cultured without a complex natural whitening treatment prepared in 4-HNE treatment and Production Example 9 As a control, "B" will for 12 hours treated culture to 4-HNE, "C" is after 12 hours treated culture to 4-HNE for 12 hours by a complex natural whitening agent prepared in Preparation example 9 would cultured, "D" is a complex natural whitening agent manufactured by 4-HNE example produced after 12 hours treatment incubated with 9 to be processed for 24 hours culture. 도 4에서 "A"는 4-HNE로 6시간 처리 배양한 후 제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제로 12시간 처리 배양한 것이고, "B"는 4-HNE로 6시간 처리 배양한 후 제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제로 24시간 처리 배양한 것이고, "C"는 4-HNE로 6시간 처리 배양한 것이고, "D"는 대조군으로서 4-HNE 처리및 제조예 9에서 제조한 복합 천연 미백제 처리를 하지 않고 배양한 것이다. In Figure 4 "A" will for 12 hours treated culture to 4-HNE in complex natural whitening agent prepared in Preparation Example 9 was cultured treatment 6 hours, "B" is for example, produced after treatment 6 hours of incubation with 4-HNE with a compound of natural whitening agent prepared in 9 treatment 24 hours will cultured, "C" will treated 6 hours of incubation with 4-HNE, "D" is a complex natural whitening agent manufactured by 4-HNE treatment and Preparation 9 as a control without treatment it was cultured.

Claims (9)

  1. 칡 추출물, 콩나물 추출물, 파래 추출물, 표고버섯 추출물, 능이버섯 추출물, 호장근 추출물, 황금 추출물, 황백 추출물, 황연 추출물, 두향엽 추출물, 브로커리 추출물, 산초 추출물, 삼백초 추출물, 어성초 추출물, 싸리 추출물, 세신 추출물, 소리쟁이 추출물, 솔잎 추출물, 쇠무릎 뿌리 추출물, 인진쑥 추출물, 미나리 추출물, 생강 추출물, 독활 추출물, 야콘 추출물, 오미자 추출물, 인동초 추출물, 자몽 추출물, 장생 도라지 추출물, 저령 추출물, 적채 추출물, 질경이 추출물, 차조기 추출물, 및 참쑥 추출물로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 추출물과, 목단피 추출물, 가자 추출물, 감초 추출물, 강향 추출물, 고삼 추출물, 석곡 추출물, 고수 추출물, 관중 추출물, 구맥 추출물, 구절초 추출물, 꾸지뽕 추출물, 금령자 추출물, 금앵자 추출물, 길경 Kudzu extract, bean sprouts extract, greener extract, shiitake extract, ability mushroom extract, No. muscle extract, gold extract, yellowish extract, Royal extract, duhyang leaf extract, beurokeori extract, pepper extract, Houttuynia cordata extract, Houttuynia cordata extract, bush clover extract, slender extract, curly dock extract, pine needle extract, soemureup root extract, injinssuk extract, parsley extract, ginger extract, Aralia cordata extract, yacon extract, Schisandra extract, indongcho extract, grapefruit extract, Jang bellflower extract, jeoryeong extract, Stack extract, plantain extract, perilla extract, and chamssuk least one extract selected from the group consisting of extracts and, mokdanpi extract, let extract, licorice extract, ganghyang extract, Sophora flavescens extract, seokgok extract, coriander extract, spectators extract, gumaek extract, gujeolcho extract, kkujippong extract , geumryeongja extract gold aengja extract, gilgyeong 추출물, 만가닥 추출물, 단삼 추출물, 당유자 추출물, 라벤더 추출물, 로즈마리 추출물, 마늘 추출물, 감태 추출물, 민들레 추출물, 백지 추출물 및 복령 추출물로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 추출물을 포함하는 제1 복합 추출물을 글리코시다아제로 처리하여 얻은 제2 복합 추출물을 유효성분으로 포함하는 미백제. Extract, only strands extract, Salvia miltiorrhiza extract, citron extract, sugar, lavender extract, rosemary extract, garlic extract, Ecklonia cava extract, dandelion extract, blank extracts, and a first complex extract containing one or more extracts selected from the group consisting of a Poria cocos extract a whitening agent and a second composite extract obtained by treatment with glycosidase, as an active ingredient.
  2. 제 1항의 제2 복합 추출물을 유산균 또는 특정 미생물로 생물전환시켜 얻은 제3 복합 추출물을 유효성분으로 포함하는 미백제. The whitening agent and a third extract obtained compound of claim 1 for the second composite extract by biotransformation, or by lactic acid bacteria as an active ingredient a particular microorganism.
  3. 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 제1 복합 추출물은 용매 추출법, 또는 초임계 추출법에 의해 추출된 것을 특징으로 하는 항산화제. 3. A method according to claim 1 or 2, wherein the first combined extracts are antioxidants, wherein the extract by solvent extraction, or supercritical extraction.
  4. 제 3항에 있어서, 상기 용매 추출법의 용매는 물, 탄소수가 1 내지 5인 알코올, 및 물과 탄소수가 1 내지 5인 알코올을 혼합시킨 혼합 용매 중에서 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 미백제. The method of claim 3 wherein the solvent in the solvent extraction is water, a whitening agent, characterized in that any one having 1 to 5 carbon atoms alcohols, and water and carbon atoms is selected from a mixture solvent mixed with the alcohol 1-5.
  5. 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 글리코시다아제는 아밀라아제(amylase)인 것을 특징으로 하는 미백제. 3. A method according to claim 1 or 2, wherein the glycosidase is a whitening agent, characterized in that the amylase (amylase).
  6. 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 미백제제는 에멀젼 형태인 것을 특징으로 하는 미백제. 3. A method according to claim 1 or 2, wherein the whitening agent is a whitening agent, characterized in that the emulsion forms.
  7. 제 6항에 있어서, 상기 에멀젼 형태의 미백제는 제2 복합 추출물 또는 제3 복합 추출물에서 선택되는 어느 하나의 유효성분, 유상 매질 및 유화 안정제를 포함하는 것을 특징으로 하는 미백제. The method of claim 6, wherein the emulsion of the whitening agent is a whitening agent, comprising any one of the active ingredients, oily medium and emulsion stabilizer is selected from the second or the third combined extract composite extract.
  8. 제 1항 또는 제 2항의 미백제를 포함하는 화장료 조성물. The cosmetic composition of claim 1 or claim 2 comprising a whitening agent.
  9. 제 8항에 있어서, 제형이 스킨, 로션, 또는 크림인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물. The method of claim 8 wherein the cosmetic composition, characterized in that the formulation skin lotion, or cream.
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