KR101754645B1 - 바다제비집 복합 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부주름 개선용 조성물, 이를 이용한 피부주름 개선용 패치, 및 마스크 팩 - Google Patents

Abstract

본 발명은 차가버섯 균사체로 발효 처리된 바다제비집, 성모초, 안젤리카 및 적석지의 복합 발효 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부주름 개선용 조성물 및 이를 이용한 피부주름 개선용 패치와 마스크 팩에 관한 것이다.
본 발명의 조성물은 천연 물질로 구성되어 피부에 안전하고, 우수한 피부주름 예방 및 개선 효과를 갖는다. 또한, 본 발명의 조성물은 피부주름의 생성에 직접적으로 작용하는 MMP-1 및 MMP-3 단백질의 발현을 효과적으로 억제하고, 타입 I 프로콜라겐 단백질의 발현을 증가하여 피부주름의 예방 및 개선에 효과적으로 작용한다.
또한, 상기와 같은 장점을 갖는 상기 조성물을 유효성분으로 함유하는 본 발명의 피부주름 개선용 패치와 마스크 팩은 피부주름의 개선에 유용하게 사용될 수 있다.

Description

바다제비집 복합 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부주름 개선용 조성물, 이를 이용한 피부주름 개선용 패치, 및 마스크 팩{Composition for Preventing or Improving Skin Wrinkle Comprising Fermented Complex Extracts of Swallow's Nest as Active Ingredient, Patch, and Mask Pack Preventing or Improving Skin Wrinkle Using the Same}

본 발명은 피부주름 개선용 조성물, 및 이를 이용한 피부주름 개선용 패치와 마스크 팩에 관한 것으로, 더욱 구체적으로 차가버섯 균사체로 발효 처리된 바다제비집, 성모초, 안젤리카 및 적석지의 복합 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부주름 개선용 조성물, 및 이를 이용한 피부주름 개선용 패치와 마스크 팩에 관한 것이다.

피부 주름은 피부 수분함량, 콜라겐 함량 및 외부 환경에 대한 면역력 등 여러 가지 요소들에 의해 영향을 받는 것으로 알려져 있으며, 이중 주름의 형성에 가장 큰 영향을 미치는 것은 콜라겐의 생성량 및 콜라겐 분해 효소인 콜라게네이즈의 발현과 활성이다.

콜라겐은 피부 진피층에 존재하는데, 피부 전체 건조 중량의 약 70 내지 80%를 차지하는 엘라스틴과 함께 피부에 탄력을 부여하는 주요 성분으로 알려져 있다. 콜라겐은 자연 노화에 따른 세포활성 저하와 같은 내부 요인에 의해 감소되고, 여러 유해 환경에서의 스트레스 증가나 태양 광선에 의한 활성 산소 종의 증가와 같은 외부 요인에 의하여 생합성이 감소되거나, 분해가 촉진되고 있다.

한편, 활성산소종(reactive oxygen species, ROS)의 과생산은 UVB 노출 환경에서 보고된 바 있고, UVB 노출과 연관된 신호전달 체계는 MAPKs(mitogen activated protein kinases), ERK(extracellular signal-regulated kinase), p38 카이나아제, 및 JNK(c-Jun amino-terminal kinase) 등의 단백질과 관련되어 있는데, NF-ĸB 및 AP-1 전사인자의 발현증가를 유도한다. 또한, AP-1 단백질은 MMP(matrix metalloproteinase) 유전자의 활성과 관련되어 있고, NF-ĸB 단백질은 인터루킨과 같은 전염증 사이토카인(proinflammatory cytokines)의 발현에 영향을 미친다.

노화된 피부에서 콜라겐 및 엘라스틴의 붕괴는 주로 MMP 단백질과 같은 그 분해 효소의 증가된 발현에 의해 야기된다. 또한, 전염증 사이토카인은 콜라겐의 합성을 방해하고, 콜라겐의 붕괴를 촉진시킨다. 타입 I 콜라겐은 연결 조직의 세포외 기질에서 가장 풍부한 단백질이다. 세포외 기질에는 타입 III, V, 및 VII 콜라겐, 엘라스틴, 프로테오글라이칸, 파이브로넥틴과 같은 다른 유형의 단백질을 포함한다.

타입 I 콜라겐 단백질의 발현 수준을 조절하는 것은 피부 광노화를 예방하는데 있어서 가장 중요한 인자이다. UVB의 조사는 TGF-β/Smad 신호전달 체계의 억제를 통해 피부 섬유아세포에서 콜라겐 전구체인 프로콜라겐(procollagen)의 발현을 감소시키게 된다. 또한, TGF-β1 신호전달 체계는 인간 피부 섬유아세포에서 세포외 기질의 합성을 조절하는 중요한 인자의 하나이다.

따라서, AP-1 및 MAPKs 인자에 의해 조절되는 활성산소종(ROS)의 생성, 및 MMPs, ILs, TGF-β, 및 타입 I 프로콜라겐의 발현은 피부 광노화 연구에 있어서 유용한 마커로 작용한다.

이와 같이 콜라겐 감소를 저해하여 피부 주름개선에 효과가 있는 천연물질을 탐색하고자 하는 여러 다양한 시도가 있었다. 콜라겐의 주름개선 효과를 이용하기 위하여 화장품 또는 연고 등과 같은 피부외용제 조성물에 콜라겐을 배합한 제품들이 출시되었으나, 이들 제품들은 콜라겐 자체를 피부 표면에 도포하는 것으로 고분자 물질인 콜라겐의 경피 흡수가 어려워 본질적인 주름개선 효과를 나타낼 수 없었다. 이러한 문제를 해결하기 위하여 콜라겐합성 촉진물질에 대한 관심이 높아졌으며, 종래 알려진 콜라겐합성 촉진물질로는 비타민C, 레티노익산, 형질전환생장인자(transforming growth factor, TGF), 동물태반 유래의 단백질(JP8-231370), 베툴린산(betulinic acid, JP8-208424), 클로렐라 추출물(JP9-40523, JP10-36283, 섬유아세포 증식 촉진작용) 등이 있다. 그러나 상기 물질은 피부 적용시 자극과 발적 등 안전성 문제로 사용량에 제한이 있거나 그 효과가 미미하여 실질적으로 주름개선 효과를 기대할 수 없다는 문제점이 있었다. 따라서 종래 주름개선용 조성물보다 생체에 안전하고 주름개선 효과가 높은 새로운 주름개선 조성물의 개발이 절실히 요구되고 있다.

한편, 중국 남부를 비롯해 말레이 반도, 자바, 수마트라 등 동남아시아 여러 나라의 바다주변의 산과 절벽에 사는 바다제비의 일종인 금사연은 목구멍 속의 침샘에서 끈적이는 분비물을 뱉어내어 바다제비집을 만들며, 산란기에 발달한 금사연의 침샘으로부터 분비되는 타액이 깃털 등과 굳혀지게 되어 약 1 개월에 걸쳐 바다제비집이 만들어지게 된다. 본초강목에는 바다제비집이 '피부를 윤택하게 하며 혈액에 유익해서 생기가 나게 한다'라고 소개되고 있다. 또한 제비집은 보양효과에 탁월하며, 중국의 황태후는 자신의 미용과 젊음을 유지하기 위해 바다제비집과 진주가루를 섞어 피부 미용에 사용하기도 하였다. 제비집에는 피부에 자양분을 주는 단백질이 함유되어 있어 건조한 피부를 더욱 부드럽게 가꾸어주며, 지친 피부에 탄력을 주는 비타민 C, 비타민 E, 알부틴, 콜라겐이 함유되어 있다. 제비집 속에 함유된 주요 성분인 프로테오글리칸(proteoglycan)은 몸 전체, 피부, 장기 등 각각의 세포를 결합시키거나 지탱시키는데 큰 역할을 하여, 피부에서는 재생 효과가 뛰어나서 수분함유를 잃지 않게 함과 동시에 피부 노화 개선에 주요한 역할을 할 수 있다.

바다제비집의 채취는 현지에서도 허가받은 채취인에게만 채취를 허용할 만큼 엄중한 감시 아래 수행되며 연간 채취량도 제한되며, 매우 고가의 식재료로서 사용되고 있다. 바다제비집으로부터 추출한 추출물의 효능과 관련하여, 항바이러스 작용, 미백효과 등이 알려져 있다.

특허출원 제10-2015-0053874호 ‘바다제비집 추출물을 유효성분으로 포함하는 기능성 화장료 조성물’은 바다제비집, 해삼추출물 및 캐비어 추출물이 피부미백, 주름개선 등의 효과가 있어 기능성 화장료 조성물에 사용될 수 있음을 개시하고 있으나, 고가의 원료들을 조합하여 사용하는데 비해 그 효과가 충분하지 않아 경제성이 떨어지는 문제가 발생하는 단점이 있었다.

이에, 본 발명자들은 상기 종래기술들의 문제점들을 극복하기 위하여 예의 연구노력한 결과, 바다제비집에 성모초 및 안젤리카의 허브류와 적석지를 차가버섯 균사체로 발효 처리한 복합 발효 추출물을 피부주름개선에 사용하는 경우, UVB 조사에 의해 유도된 인간 섬유아세포(human dermal fibroblasts, NHDFs)의 광노화에 대응하여 피부 주름 예방 및 개선에 뛰어난 효과가 있음을 확인하고, 본　발명을 완성하게 되었다.

따라서, 본 발명의 주된 목적은 차가버섯 균사체로 바다제비집, 성모초, 안젤리카, 및 적석지의 복합 발효 추출물을 유효성분으로 하는 피부 주름 예방 또는 개선용 조성물을 제공하는 데 있다.

본 발명의 다른 목적은 상기 피부주름 개선용 조성물을 이용한 피부주름 개선용 패치 및 마스크 팩을 제공하는데 있다.

본 발명의 한 양태에 따르면, 본 발명은 차가버섯 균사체로 발효 처리된 바다제비집, 성모초 및 안젤리카의 복합 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명자들은 고가인 바다제비집의 피부주름개선 효과를 더욱 증대시켜 소재의 활용성을 증대시키기 위해 예의 연구노력한 결과, 바다제비집과 성모초, 안젤리카 및 적석지를 혼합하여 복합 추출하고, 이를 차가버섯 균사체로 발효 처리하는 경우, 피부주름 예방 및 개선에 탁월한 효과가 있음을 발견하였고, 또한, 피부에 적용시 안전성에도 문제가 없음을 확인하였다.

본 발명의 조성물은 세포독성이 없고(도 1), 기질 단백질 분해효소-1(matrix metallo-proteinase, 이하 'MMP'라 함) 및 기질 단백질 분해효소-3 단백질 발현 억제(도 2 및 도 3)와 타입 Ⅰ 프로콜라겐 단백질의 발현(도 4) 증가를 통해 피부주름 개선을 효과적으로 억제할 수 있는 특징이 있다.

따라서, 본 발명의 차가버섯 균사체로 발효 처리된 바다제비집, 성모초, 안젤리카 및 적석지의 복합 발효 추출물은 고가인 바다제비집의 사용을 최소화 하면서도 현저하게 개선된 피부주름 예방 및 개선 효과를 보유하고 있으므로 화장료 조성물에 효과적으로 사용될 수 있음을 알 수 있었다.

본 발명의 용어 "바다제비집"은 바다제비의 일종인 금사연(Collocalia fuciphaga)이 지은 둥지를 의미하며, 상기 바다제비집은 해초와 생선지느러미 등을 주재료로 금사연이 침샘에서 분비한 분비물로 엮어서 지어지게 된다. 상기 금사연은 해안 절벽 위에 둥지를 트는데 아직 소화되지 않은 음식물을 분비해 둥지를 만들고, 이때의 제비집은 새하얗고 빛나므로 백연이라고도 한다.

또한, 본 발명의 용어 "성모초(Alchemilla mollis)"는 유럽 원산의 장미과의 허브 식물을 의미하며, 레이디스 맨틀(lady's mantle)이라고도 한다.

본 발명의 용어 "안젤리카(Angelica archangelica)"는 유럽 원산의 산형과의 두해살이 식물을 의미한다.

본 발명의 용어 "적석지"는 규산염 한약으로서 규산알루미늄을 주성분으로 하는 붉은색 곱흙(Halloysitum rubrum)을 의미하고, 평안남도, 함경도, 강원도, 전라남도 등 전국 각지에서 생산된다. 맛은 달고, 시며, 따뜻한 성질을 갖는다. 예로부터, 한방에서는 위경, 소장경에 작용하여 지사와 지혈 작용을 하고 헌데를 잘 아물게 하는 것으로 알려졌으며, 약리 실험에서 독물질 흡착 작용, 위장 점막 보호 작용, 지혈 작용을 나타내는 것으로 알려졌으나, 피부주름 개선과 관련된 효과에 대해서는 아직까지 알려진 바 없다.

본 발명에서 사용되는 용어, "추출물"은 식물의 추출 처리에 의하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다. 본 발명의 상기 추출물은 바람직하게 추출 후 건조 분말 형태로 제조되어 사용될 수 있다.

본 발명의 상기 성모초 또는 안젤리카 추출물은, 성모초나 안젤리카의 천연, 잡종 또는 변종 식물로부터 추출될 수 있고, 식물 조직 배양물에서도 추출이 가능하며, 잎, 줄기, 뿌리, 꽃, 열매 등의 부위에서 추출한 추출물을 포함한다.

한편, 차가버섯의 학명은 이노노투스 오블리쿠아(Inonotus obliqua) 또는 퍼스코포리아 오블리쿠아(Fuscoporia obliqua)이다. 러시아에서는 차가(Chaga)로 불리우며, 일본에서는 카바노아나타케로 불린다. 균핵 형태는 표면이 검고, 종횡으로 균열이 많으며, 내부는 황갈색이다. 균사가 조밀하게 모여 만드는 딱딱한 덩어리인 균핵이 주로 약용으로 사용하는 부분이다. 균핵의 직경은 10 내지 20cm 정도로 대형이다. 자실체의 두께는 2 내지 8mm 정도이고 전면에 관공이 있으며 강모체는 여러개이다. 차가버섯은 자작나무류(Betula sp.), 특히 자작나무(Betula platyphylla var. japonica)에서 발생한다. 자작나무류에 검은 암 덩어리처럼 붙어 있다가 그 덩어리가 점차 커지면서 자작나무류가 점차 죽어가는 반활물, 반사물 기생버섯이다.

본 발명에서 사용되는 용어 '발효 추출물'이란, 차가버섯이 성장할 수 있는 배지에 차가버섯 균사체를 접종하고 배양한 배양물로부터 수득한 배양결과물을 의미한다. 본 발명에서는 바다제비집, 성모초, 안젤리카 및 적석지의 복합 추출물에 차가버섯 균사체를 접종하여 배양한 배양물로부터 수득한 배양 상등액 또는 배양 상등액의 건조물을 의미한다.

본 발명에서 이용되는 차가버섯은 자연산 또는 인공배양에 의한 것이다. 인공배양은 액체배양법과 고체배양법을 모두 사용할 수 있다. 액체배양은 차가버섯 균주를 포도당, 펩톤, 효모추출액을 필수 성분으로 포함하는 액체배지에서 3 내지 30일간 배양하여 균사체를 얻는다. 배지에는 상기 필수 성분 외에 인산 제2칼륨, 황산마그네슘, 염화칼슘 등의 무기물과 황산철, 황산아연, 황산구리 등의 미량원소를 첨가하여 균사체의 발육을 돕도록 할 수 있다. 배지의 pH는 5~7, 온도는 20℃ 내지 30℃ 정도로 조절한다. 고체배양법으로는 원목배양법을 이용하는데, 차가버섯 균주를 원목에서 배양하여 자실체를 얻는다, 원목배양을 위한 종균제조를 위하여 원목 톱밥에 미강을 첨가한 배지에, 맥아추출물배지에서 배양된 차가버섯균사를 떼어내 접종하고 20 내지 30 일간 25℃ 내지 30℃ 암 조건하에서 배양한다.

본 발명에서 용어, "피부 주름"이란, 피부가 쇠하여 생긴 잔줄을 의미하는데, 유전자에 의한 원인, 피부 진피에 존재하는 콜라겐의 감소, 외부 환경 등에 의해 유발될 수 있다.

본 발명에서 "피부 주름 예방 또는 개선"이란, 피부에 주름이 생성되는 것을 억제 또는 저해하거나, 이미 생성된 주름을 완화시키는 것을 말한다.

피부 섬유아세포의 주된 기능으로 세포외기질 합성과 증식을 통한 손상된 피부 조직 재생 등을 들 수 있는데, 광노화와 같은 외인성 노화 요인 또는 유리 산소에 의한 손상 누적, 텔로미어 단절로 인한 세포 노화 등에 따른 내인성 노화 요인들은 진피층 내에 있는 피부섬유아세포의 생리 활성 기능을 저하시키게 된다. 피부 세포외기질 중 95% 이상을 차지하고, 세포의 부착분자(adhesion molecule) 및 세포 골격(cytoskeleton) 등과의 상호 작용과 신호 교류를 통해 섬유아세포의 생리 활성에 매우 주요한 부분을 담당하는 제I형 콜라겐의 합성이 저하될 경우, 피부 조직 내 콜라겐 양이 감소되고, 이에 따라 표면 장력이 감소되어 피부 탄력이 저하되고 피부 주름이 형성될 뿐만 아니라, 세포의 증식 및 재생 기능을 포함하는 생리 활성 기능이 감소하는 악순환의 원인이 된다.

따라서, 피부섬유아세포의 콜라겐은 피부 재생, 피부 탄력, 피부 주름 형성 및 피부 손상 시 조직의 수복 또는 재생과 직접적인 관련이 있다고 볼 수 있다.

즉, 피부 섬유아세포의 콜라겐 또는 프로콜라겐의 합성이 촉진되거나, 콜라겐을 분해하는 기질 단백질 분해효소(matrix metallo-proteinase)의 합성이 저해되면, 피부 탄력 개선, 피부 재생, 피부 주름 개선, 상처 치유, 손상된 피부 조직의 수복 및 재생; 및 피부 노화 방지 등의 효과를 얻을 수 있다.

본 발명의 차가버섯 균사체로 발효 처리된 바다제비집, 성모초, 안젤리카 및 적석지의 복합 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 타입 I 프로콜라겐 단백질의 발현을 증가시키고, MMP-1 및 MMP-3 단백질의 발현을 억제하는 것을 특징으로 한다.

구체적으로, 본 발명의 상기 복합 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 자외선 조사된 정상 인간 진피 섬유아세포(NHDF)에서 세포 독성을 저감시키고, 콜라겐 분해를 촉진시키는 기질 단백질 분해효소-1 및 3(matrix metallo-proteinase)의 발현을 억제시키면서, 타입 Ⅰ 프로콜라겐의 생성을 증가시키는바, 피부 탄력 증가, 피부 재생, 피부 주름 개선, 상처 치유, 손상된 피부 조직의 수복 및 재생; 및 피부 노화 방지 등의 효과 등을 가질 수 있다. 구체적으로는 피부주름의 예방 또는 개선의 효과를 가질 수 있다(도 1 내지 도 4 참조).

본 발명의 피부 주름 예방 또는 개선용 화장료 조성물에 함유된 복합 발효 추출물은 그 자체로 피부 주름을 제거하는 효과가 있으며, 기존에 알려진 피부 주름 예방 및 개선에 효과가 있다고 공지된 물질들과 혼합하여 사용하는 경우에도 피부 주름의 예방 및 개선 효과를 지속적으로 유지할 수 있다.

상기 피부 주름개선에 효과가 있는 물질로는 이에 제한되지는 않으나, 캐모마일 꽃 추출물, 로즈마리 잎 추출물, 할미꽃 잎 추출물, 어스니어 추출물, 인삼 추출물, 제라늄 꽃 추출물, 고삼 추출물, 타임 추출물, 쐐기풀 추출물, 야로우 추출물, 클로브 추출물, 펜넬 추출물, 파파야 잎 추출물, 해바라기 추출물 등이 있다.

한편, 상기 조성물은 바다제비집, 성모초, 안젤리카 및 적석지을 조합하여 사용할 수 있는데, 상기 각 성분들을 조합하는 경우, 조합비는 특별히 이에 제한되지 않으나, 상기 바다제비집, 성모초, 안젤리카 및 적석지의 혼합비율은 중량기준으로 1 : 1 - 3 : 1 - 3 : 0.3 - 0.7의 중량비로 조합하여 사용할 수 있다.

이외에도 본 발명의 화장료 조성물은 수용성 비타민, 지용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스 등을 더 포함할 수 있다.

상기 수용성 비타민으로는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것도 될 수 있으나, 바람직하게는 비타민 B1, 비타민 B2, 비타민 B6, 피리독신, 염산피리독신, 비타민 B12, 판토텐산, 니코틴산, 니코틴산아미드, 엽산, 비타민 C, 비타민 H 등을 들 수 있으며, 그들의 염(티아민염산염, 아스코르빈산나트륨염 등)이나 유도체(아스코르빈산-2-인산나트륨염, 아스코르빈산-2-인산마그네슘염 등)도 본 발명에서 사용할 수 있는 수용성 비타민에 포함된다. 상기 수용성 비타민은 미생물 변환법, 미생물 배양물의 정제법, 효소법 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 수득할 수 있다.

상기 지용성 비타민으로는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것도 될 수 있으나, 바람직하게는 비타민 A, 카로틴, 비타민 D2, 비타민 D3, 비타민 E 등을 들 수 있으며, 그들의 유도체(팔미틴산아스코르빈, 스테아르산아스코르빈, 디팔미틴산아스코르빈, 아세트산dl-알파 토코페롤, 니코틴산dl-알파 토코페롤비타민 E, DL-판토테닐알코올, D-판토테닐알코올, 판토테닐에틸에테르 등) 등도 본 발명에서 사용되는 지용성 비타민에 포함된다.

상기 고분자 펩티드로는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것도 될 수 있으나, 바람직하게는 콜라겐, 가수 분해 콜라겐, 젤라틴, 엘라스틴, 가수 분해 엘라스틴, 케라틴 등을 들 수 있다. 상기 고분자 펩티드는 미생물 배양액의 정제법, 효소법 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 정제 취득할 수 있으며, 또는 통상 돼지나 소 등의 진피, 누에의 견 섬유 등의 천연물로부터 정제하여 사용할 수 있다.

상기 고분자 다당에는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것도 될 수 있으나, 바람직하게는 히드록시에틸셀룰로오스, 크산탄검, 콘드로이틴 황산 또는 그 염(나트륨염 등) 등을 들 수 있다. 예를 들어, 콘드로이틴 황산 또는 그 염 등은 통상 포유동물이나 어류로부터 정제하여 사용할 수 있다.

상기 스핑고 지질로는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것도 될 수 있으나, 바람직하게는 세라미드, 피토스핑고신, 스핑고당 지질 등을 들 수 있다. 상기 스핑고 지질은 통상 포유류, 어류, 패류, 효모 또는 식물 등으로부터 통상의 방법에 의해 정제하거나 화학 합성법에 의해 취득할 수 있다.

상기 해초 엑기스로는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것도 될 수 있으나, 바람직하게는 갈조 엑기스, 홍조엑기스, 녹조 엑기스 등을 들 수 있으며, 또한, 이들의 해초 엑기스로부터 정제된 칼라기난, 아르긴산, 아르긴산나트륨, 아르긴산칼륨 등도 본 발명에서 사용되는 해초 엑기스에 포함된다. 해초 엑기스는 해초로부터 통상의 방법에 의해 정제하여 취득할 수 있다.

본 발명의 화장료에는 상기 필수 성분과 더불어 필요에 따라 통상 화장료에 배합되는 다른 성분을 배합할 수 있다.

이외에 첨가해도 되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 자외선 흡수제, pH 조정제, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한제, 정제수 등을 들 수 있다.

상기 유지 성분으로는 에스테르계 유지, 탄화수소계 유지, 실리콘계 유지, 불소계 유지, 동물 유지, 식물 유지 등을 들 수 있다.

상기 에스테르계 유지로는 트리2-에틸헥산산글리세릴, 2-에틸헥산산세틸, 미리스틴산이소프로필, 미리스틴산부틸, 팔미틴산이소프로필, 스테아르산에틸, 팔미틴산옥틸, 이소스테아르산이소세틸, 스테아르산부틸, 리놀레산에틸, 리놀레산이소프로필, 올레인산에틸, 미리스틴산이소세틸, 미리스틴산이소스테아릴, 팔미틴산이소스테아릴, 미리스틴산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 세바신산디에틸, 아디핀산디이소프로필, 네오펜탄산이소알킬, 트리(카프릴, 카프린산)글리세릴, 트리2-에틸헥산산트리메틸롤프로판, 트리이소스테아르산트리메틸롤프로판, 테트라2-에틸헥산산펜타엘리슬리톨, 카프릴산세틸, 라우린산데실, 라우린산헥실, 미리스틴산데실, 미리스틴산미리스틸, 미리스틴산세틸, 스테아르산스테아릴, 올레인산데실, 리시노올레인산세틸, 라우린산이소스테아릴, 미리스틴산이소트리데실, 팔미틴산이소세틸, 스테아르산옥틸, 스테아르산이소세틸, 올레인산이소데실, 올레인산옥틸도데실, 리놀레산옥틸도데실, 이소스테아르산이소프로필, 2-에틸헥산산세토스테아릴, 2-에틸헥산산스테아릴, 이소스테아르산헥실, 디옥탄산에틸렌글리콜, 디올레인산에틸렌글리콜, 디카프린산프로필렌글리콜, 디카프릴산프로필렌글리콜, 디카프린산네오펜틸글리콜, 디옥탄산네오펜틸글리콜, 트리카프릴산글리세릴, 트리운데실산글리세릴, 트리이소팔미틴산글리세릴, 트리이소스테아르산글리세릴, 네오펜탄산옥틸도데실, 옥탄산이소스테아릴, 이소노난산옥틸, 네오데칸산헥실데실, 네오데칸산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 이소스테아르산이소스테아릴, 이소스테아르산옥틸데실, 폴리글리세린올레인산에스테르, 폴리글리세린이소스테아르산에스테르, 시트르산트리이소세틸, 시트르산트리이소알킬, 시트르산트리이소옥틸, 락트산라우릴, 락트산미리스틸, 락트산세틸, 락트산옥틸데실, 시트르산트리에틸, 시트르산아세틸트리에틸, 시트르산아세틸트리부틸, 시트르산트리옥틸, 말산디이소스테아릴, 히드록시스테아르산 2-에틸헥실, 숙신산디2-에틸헥실, 아디핀산디이소부틸, 세바신산디이소프로필, 세바신산디옥틸, 스테아르산콜레스테릴, 이소스테아르산콜레스테릴, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 올레인산콜레스테릴, 올레인산디히드로콜레스테릴, 이소스테아르산피트스테릴, 올레인산피트스테릴, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소세틸, 12-스테알로일히드록시스테아르산스테아릴, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소스테아릴 등의 에스테르계 등을 들 수 있다.

상기 탄화 수소계 유지로는 스쿠알렌, 유동 파라핀, 알파-올레핀올리고머, 이소파라핀, 세레신, 파라핀, 유동 이소파라핀, 폴리부덴, 마이크로 크리스탈린 왁스, 와셀린 등의 탄화 수소계 유지 등을 들 수 있다.

상기 실리콘계 유지로는 폴리메틸실리콘, 메틸페닐실리콘, 메틸시클로폴리실록산, 옥타메틸폴리실록산, 데카메틸폴리실록산, 도데카메틸시클로실록산, 디메틸실록산 메틸세틸옥시실록산 공중합체, 디메틸실록산 메틸스테알록시실록산 공중합체, 알킬 변성 실리콘유, 아미노 변성 실리콘유 등을 들 수 있다.

상기 불소계 유지로는 퍼플루오로폴리에테르 등을 들 수 있다.

상기 동물 또는 식물 유지로는 아보카도유, 아르몬드유, 올리브유, 참깨유, 쌀겨유, 대두유, 옥수수유, 유채유, 행인유, 팜핵유, 팜유, 피마자유, 해바라기유, 포도종자유, 면실유, 야자유, 쿠쿠이너트유, 소맥배아유, 쌀 배아유, 시아버터, 월견초유, 마커데이미아너트유, 난황유, 우지, 마유, 밍크유, 오렌지라피유, 호호바유, 캔데리러왁스, 카르나바왁스, 액상 라놀, 경화피마자유 등의 동물 또는 식물 유지를 들 수 있다.

상기 보습제로는 수용성 저분자 보습제, 지용성 분자 보습제, 수용성 고분자, 지용성 고분자 등을 들 수 있다.

상기 수용성 저분자 보습제로는 세린, 글루타민, 솔비톨, 만니톨, 피롤리돈-카르복실산나트륨, 글리세린, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 에틸렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜B(중합도 n = 2 이상), 폴리프로필렌글리콜(중합도 n = 2 이상), 폴리글리세린B(중합도 n = 2 이상), 락트산, 락트산염 등을 들 수 있다.

상기 지용성 저분자 보습제로는 콜레스테롤, 콜레스테롤에스테르 등을 들 수 있다.

상기 수용성 고분자로는 카르복시비닐폴리머, 폴리아스파라긴산염, 트라가칸트, 크산탄검, 메틸셀룰로오스, 히드록시메틸셀룰로오스, 히드록시에틸셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 카르복시메틸셀룰로오스, 수용성키틴, 키토산, 덱스트린 등을 들 수 있다.

상기 지용성 고분자로는 폴리비닐피롤리돈 에이코센 공중합체, 폴리비닐피롤리돈 헥사데센 공중합체, 니트로셀룰로오스, 덱스트린지방산에스테르, 고분자 실리콘 등을 들 수 있다.

상기 에몰리엔트제로는 장쇄아실글루타민산콜레스테릴에스테르, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 12-히드록시스테아르산, 스테아르산, 로진산, 라놀린지방산콜레스테릴에스테르 등을 들 수 있다.

상기 자외선 흡수제로는 파라아미노벤조산, 파라아미노벤조산에틸, 파라아미노벤조산아밀, 파라아미노벤조산옥틸, 살리실산에틸렌글리콜, 살리신산페닐, 살리신산옥틸, 살리신산벤질, 살리신산부틸페닐, 살리신산호모멘틸, 계피산벤질, 파라메톡시계피산-2-에톡시에틸, 파라메톡시계피산옥틸, 디파라메톡시계피산모노-2-에틸헥산글리세릴, 파라메톡시계피산이소프로필, 디이소프로필ㆍ디이소프로필계피산에스테르 혼합물, 우로카닌산, 우로카닌산에틸, 히드록시메톡시벤조페논, 히드록시메톡시벤조페논술폰산 및 그 염, 디히드록시메톡시벤조페논, 디히드록시메톡시벤조페논디술폰산나트륨, 디히드록시벤조페논, 테트라히드록시벤조페논, 4-tert-부틸-4'-메톡시디벤조일메탄, 2,4,6-트리아닐리노-p-(카르보-2'-에틸헥실-1'-옥시)-1,3,5-트리아진, 2-(2-히드록시-5-메틸페닐)벤조트리아졸 등을 들 수 있다.

상기 pH 조정제로는 시트르산, 시트르산나트륨, 말산, 말산나트륨, 프말산, 프말산나트륨, 숙신산, 숙신산나트륨, 수산화나트륨, 인산일수소나트륨 등을 들 수 있다.

또한, 이외에 첨가해도 되는 배합 성분은 이에 한정되는 것은 아니며, 또, 상기 어느 성분도 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 배합 가능하지만, 총중량에 대하여 바람직하게는 0.01 내지 5 중량부, 보다 바람직하게는 0.01 내지 3 중량부로 배합될 수 있다.

본 발명의 조성물을 함유하여 제조된 화장료는 용액, 유화물, 점성형 혼합물 등의 형상을 취할 수 있다.

또한, 본 발명의 상기 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효성분으로서 상기 성분 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예를 들면, 안정화제, 안료 및 천연향료와 같은 통상적인 보조제 및 담체를 더 포함할 수 있다.

본 발명의 조성물은 피부 주름 예방 및 개선 효과를 갖는 화장품 또는 세안제 등에 다양하게 이용될 수 있다.

본 발명의 조성물을 첨가할 수 있는 제품으로는, 예를 들어, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스 등과 같은 화장품류와 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클린저 등이 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판, 부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 상기 차가버섯 균사체로 발효 처리된 바다제비집, 성모초, 안젤리카 및 적석지의 복합 발효 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부주름 개선용 패치(100)를 제공한다.

도 5 및 도 6을 참조하면, 본 발명의 상기 피부주름 개선용 패치(100)는 차가버섯 균사체로 발효 처리된 바다제비집, 성모초, 안젤리카 및 적석지의 복합 발효 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 예방 또는 개선용 화장료 조성물이 함침된 피부주름 개선층(110), 및 기재층(120)을 포함하여 이루어지고, 상기 피부주름 개선층(110)은, 일측면이 상기 기재층(120) 위에 코팅되고, 타측면이 인체 피부에 접촉하는 것을 특징으로 한다. 상기 피부주름 개선층(110)의 타측면은 상기 피부주름 개선층(110)을 덮으면서 제거가 가능한 불투과성의 보호필름(130, 미도시)을 더 포함할 수 있으며, 이는 보관이나 이동시 돌기(130)와 상기 피부주름 개선층(110)을 보호하기 위함으로써, 사용시에는 상기 보호필름(130)을 떼어낸 후 상기 피부주름 개선층(110)을 피부에 밀착시켜 사용하게 된다.

상기 피부주름개선용 패치(100)는 피부와 넓은 면적에서 고르게 접촉하여 피부주름을 개선할 수 있으며, 아울러 상기 차가버섯 균사체로 발효 처리된 바다제비집, 성모초, 안젤리카 및 적석지의 복합 발효 추출물의 피부주름 개선 등의 기능성 효과로 인하여 전반적으로 피부상태를 개선하는 역할을 수행하게 된다. 상기 피부주름개선용 패치(100)가 부착될 수 있는 부위로는 어깨, 머리, 팔꿈치, 손, 손가락, 가슴, 등, 복부, 허리, 대퇴 관절, 엉덩이, 허벅지, 무릎, 종아리부, 발 등 여러 부위에 사용할 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 따르면, 상기 피부주름 개선층(110)은 피부를 자극할 수 있게 돌기(112)가 형성될 수 있다. 이 경우 기재층(120)과 별도로 피부주름 개선층(110)에만 돌기(112)가 형성될 수 있으며, 또한 기재층(120)에도 피부주름 개선층(110)과 동일한 형상의 돌기(122, 미도시)가 형성될 수도 있다.

상기 돌기(112)를 이용하여 피부에 물리적인 자극을 가하는 과정에서 피부가 팽팽하게 당겨지면서 차가버섯균사체로 발효 처리된 바다제비집, 성모초 및 안젤리카의 복합 추출물의 피부침투가 더욱 원활하게 되어 피부주름 예방 및 개선이 더욱 효과적으로 이루어질 수 있다.

또한, 상기 돌기는 피부 자극 효과를 극대화시키기 위해 인체의 경혈점 부위에 매칭되어 형성될 수 있다. 상기 경혈점 부위는 사람의 인체에 질환이 발생했을 때 그 질환 발생 부위에 해당하는 경락 부위에서 일정한 병리 현상이 발생하게 되는데 이러한 경락 부위 중 병리 현상이 매우 두드러지게 나타나는 인체의 특정 부위를 말하며, 혈자리, 공혈 또는 혈 등으로 불린다. 상기 경혈점 부위는 한방의학 분야에서 잘 알려져 있다.

따라서, 상기 피부주름개선용 패치(100)가 안면부의 피부에 적용되는 경우에는 얼굴 피부를 전체적으로 고르게 자극하고, 혈액순환을 촉진하여 피부미용에 도움을 줄 수 있도록, 상기 돌기(112)가 얼굴의 혈자리, 예를 들어 천정, 사공, 인당, 산근, 비준, 인중, 승장, 대영, 염천, 지각, 태양, 사백, 지창, 협차, 영향, 권료, 사백, 하관 등에 위치하도록 하여 경혈을 자극함으로써 상승 등의 효과를 얻을 수도 있다.

본 발명에서 상기 돌기(112)는 상기 패치(100)가 피부에 부착될 때, 피부에 물리적인 자극을 가할 수 있도록 피부 방향으로 융기되어 형성되는데, 그 모양에는 특별한 제한이 없으며, 상기 돌기(112)의 형상으로는 도 2에서 도시한 바와 같이 반원형의 형상일 수 있으며, 이 밖에도 타원형, 삼각형, 사각형, 오각형, 육각형, 및 하트형 등 다양한 형상을 채택할 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 따르면, 상기 피부주름 개선층(110)은 상기 차가버섯 균사체로 발효 처리된 바다제비집, 성모초, 안젤리카 및 적석지의 복합 발효 추출물의 성분을 하이드로겔에 포집시켜 상기 기재층(120) 위에 도포시키는 방식으로 형성될 수 있다. 상기 "하이드로겔"은 수세성이 양호하고 끈적임이 없으며 물 또는 다른 액체에 의해 팽윤하여 어느 정도의 조도를 나타내는 무지방성 기제를 의미하며, 반고형 제제에 적합한 장점이 있다. 또한 피부부착력이 좋으면서도 착용 시 촉촉함을 느낄 수 있다.

또한, 본 발명의 일 실시예에 따르면, 상기 피부주름 개선층(110)은 섬유질 성분에 상기 차가버섯 균사체로 발효 처리된 바다제비집, 성모초, 안젤리카 및 적석지의 복합 발효 추출물을 접착제 성분과 함께 혼합하고, 압착하는 방식으로 형성될 수 있다. 이 경우, 상기 피부주름 개선층(110)은 상기 기재층(120)과 접착제 성분 등을 이용하여 합지되는 방식으로 결합할 수 있다.

그리고, 상기 기재층(120)은 천연 섬유 또는 합성 섬유를 직조하여 사용하거나 부직포를 사용하여 제조될 수 있다. 부직포를 사용하는 경우에는 강도를 유지하기 위해 완성된 부직포의 건조 중량에 대하여 천연 섬유 또는 합성 섬유를 1 내지 80 중량%의 양으로 사용하여 부직포를 제조할 수 있다.

상기 천연 섬유로는 면, 마, 목재 펄프, 모, 견섬유와 같은 섬유가 사용될 수 있다.

또한, 상기 합성 섬유로는 아크릴, 폴리아미드(예를 들어, 나일론 6, 나일론 6/6, 나일론 12, 폴리아스파라긴산, 폴리글루타민산 등), 폴리아민, 폴리이미드, 폴리아미드, 폴리아크릴(예를 들어,폴리아크릴아미드,폴리아크릴로니트릴, 메타크릴산 및 아크릴산의 에스테르 등), 폴리카보네이트(예를 들어, 폴리비스페놀 A 카보네이트, 폴리프로필렌 카보네이트 등), 폴리디엔(예를 들어, 폴리부타디엔, 폴리이소프렌, 폴리노르보멘 등), 폴리에폭시드, 폴리에스테르(예를 들어, 폴리에틸렌 테레프탈레이트, 폴리부틸렌 테레프탈레이트, 폴리트리메틸렌 테레프탈레이트, 폴리카프로락톤, 폴리글리콜라이드, 폴리락타이드, 폴리히드록시부티레이트, 폴리히드록시발러레이트, 폴리에틸렌 아디페이트, 폴리부틸렌 아디페이트, 폴리프로필렌 숙시네이트 등), 폴리에스테르(예를 들어, 폴리에틸렌 글리콜(폴리에틸렌 옥사이드), 폴리부틸렌 글리콜, 폴리프로필렌옥사이드, 폴리옥시메틸렌 (파라포름알데히드), 폴리테트라메틸렌 에테르(폴리테트라히드로푸란), 폴리에피클로로히드린 등), 폴리플루오로카본, 포름알데히드 폴리머(예를 들어, 우레아-포름알데히드, 멜라민-포름알데히드,페놀 포름알데히드 등), 천연폴리머(예를 들어, 셀룰로스, 키토산, 리그닌, 왁시 등), 폴리올레핀(예를 들어, 폴리에틸렌, 폴리프로필렌, 폴리부틸렌, 폴리부텐, 폴리옥텐 등), 폴리페닐렌(예를 들어, 폴리페닐렌 옥사이드, 폴리페닐렌 설파이드, 폴리페닐렌 에테르 설폰 등), 실리콘 함유 폴리머(예를 들어, 폴리디메틸 실록산, 폴리카보메틸 실란 등), 폴리우레탄, 폴리비닐(예를 들어, 폴리비닐 부티랄, 폴리비닐 알콜, 폴리비닐 알콜의 에스테르 및 에테르, 폴리비닐 아세테이트, 폴리스티렌, 폴리메틸스티렌, 폴리비닐 클로라이드, 폴리비닐 피롤리돈, 폴리메틸 비닐 에테르, 폴리에틸 비닐 에테르, 폴리비닐 메틸 케톤 등), 폴리아세탈, 폴리아릴레이트, 및 코폴리머(예를 들어, 폴리에틸렌-코-비닐 아세테이트, 폴리에틸렌-코-아크릴산, 폴리부틸렌 테레프탈레이트-코-폴리에틸렌 테레프탈 레이트, 폴리라우릴락탐-블록-폴리테트라히드로푸란 등) 등도 사용될 수 있다.

그리고, 상기 접착제는 피부에 사용되는 피부주름 개선용 패치의 특성상 환경 친화적인 소재의 특성을 유지하기 위하여 수용성 고분자로 구성된 천연 물질을 이용할 수 있으며, 옥수수, 감자 등의 전분을 사용할 수 있다. 또한 폴리 초산비닐, 폴리 염화 비닐, 폴리비닐 알코올(Poly Vinyl Alcohol), 폴리 비닐 아세테이트(Poly Vinyl Acetate), 이소부텐(Isobutene), 무수말레인산공중합체, 폴리아크릴아미드(Polyacrylamide), 아크릴(Acryl) 공중합체 등도 접착제로서 사용될 수 있다.

본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 상기 차가버섯 균사체로 발효 처리된 바다제비집, 성모초, 안젤리카 및 적석지의 복합 발효 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부주름개선용 마스크 팩을 제공한다.

본 발명의 상기 피부주름개선용 마스크 팩은 차가버섯 균사체로 발효 처리된 바다제비집, 성모초, 안젤리카 및 적석지의 복합 발효 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 예방 또는 개선용 화장료 조성물이 함침된 피부주름 개선층(110), 및 기재층(120)을 포함하여 이루어지고, 상기 피부주름 개선층(110)은, 일측면이 상기 기재층(120) 위에 코팅되고, 타측면이 인체 피부에 접촉하는 것을 특징으로 한다. 상기 피부주름 개선층(110)의 타측면은 상기 피부주름 개선층(110)을 덮으면서 제거가 가능한 불투과성의 보호필름(130, 미도시)을 더 포함할 수 있으며, 이는 보관이나 이동시 돌기(130)와 상기 피부주름 개선층(110)을 보호하기 위함으로써, 사용시에는 상기 보호필름(130)을 떼어낸 후 상기 피부주름 개선층(110)을 얼굴에 밀착시켜 사용하게 된다.

본 발명의 피부주름 개선용 마스크 팩은 상기 피부주름개선용 패치를 얼굴 부위에 적합하게 가공하여 제조되는 것이기 때문에, 이 둘 사이에 공통된 내용은 반복 기재에 따른 명세서의 과도한 복잡성을 피하기 위하여, 그 기재를 생략한다.

본 발명의 피부주름 예방 및 개선용 조성물 및 이를 이용한 피부주름 개선용 패치와 마스크 팩은 피부에 자극이 없고, 피부 주름의 개선에 효과가 있으므로, 피부 상태 개선 효과를 좀 더 높여줄 수 있을 것으로 기대된다.

본 발명의 특징 및 이점을 요약하면 다음과 같다:

(ⅰ) 본 발명의 조성물은 천연 물질로 구성되어 피부에 안전하고, 우수한 피부주름 예방 및 개선 효과를 갖는다.

(ⅱ) 또한, 본 발명의 조성물은 피부주름의 생성에 직접적으로 작용하는 MMP-1 및 MMP-3 단백질의 발현을 효과적으로 억제하고, 타입 I 프로콜라겐 단백질의 발현을 증가하여 피부주름의 예방 및 개선에 효과적으로 작용한다.

(ⅲ) 또한, 상기와 같은 장점을 갖는 상기 조성물을 유효성분으로 함유하는 본 발명의 피부주름 개선용 패치와 마스크 팩은 피부주름의 개선에 유용하게 사용될 수 있다.

도 1은 바다제비집, 성모초, 안젤리카, 및/또는 적석지의 추출물과 차가버섯 균사체로 복합 발효한 발효 추출물을 인간 진피 섬유상세포들에 처리하여 세포 독성을 측정한 그래프이다.
도 2는 바다제비집, 성모초, 안젤리카, 및/또는 적석지의 추출물과 차가버섯 균사체로 복합 발효한 발효 추출물이 MMP-1 단백질의 발현에 미치는 영향을 나타내는 그래프이다.
도 3은 바다제비집, 성모초, 안젤리카, 및/또는 적석지의 추출물과 차가버섯 균사체로 복합 발효한 발효 추출물이 MMP-3 단백질의 발현에 미치는 영향을 나타내는 그래프이다.
도 4는 바다제비집, 성모초, 안젤리카, 및/또는 적석지의 추출물과 차가버섯 균사체로 복합 발효한 발효 추출물이 타입 I 프로콜라겐 단백질의 발현에 미치는 영향을 나타내는 그래프이다.
도 5는 본 발명의 구체예에 의한 다기능성 패치(100)의 단면을 나타낸 단면도이다.
도 6은 본 발명의 구체예에 의한 다기능성 패치(100)를 나타낸 모식도이다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시예는 단지 본 발명을 예시하기 위한 것이므로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는다.

실시예 1. 차가버섯균사체로 발효 처리된 복합추출물의 제조

차가버섯 균주를 PDA(potato dextrose agar) 배지에 접종하여, 30℃ 온도에서 7주간 배양하여 차가버섯 균사체를 준비하였다.

바다제비집 500g, 성모초 잎 1000g, 안젤리카 전초(잎과 줄기) 1000g 및 적석지 250g을 정제수로 세척한 후, 혼합 및 건조하여 혼합 시료를 준비하였다. 준비된 혼합시료의 수분함량을 20% 정도로 유지한 상태에서 PDA 배지에서 배양된 차가버섯 균사체를 코르크볼러로 펀칭하여 접종하고, 30℃에서 15일 간 배양하여 차가버섯균사체가 혼합시료를 덮을 때까지 발효 과정을 수행하였다.

발효산물에 10배 부피의 50%에탄올을 가하여 60℃에서 6시간 환류추출한 뒤 여과하고, 그 상등액을 감압농축기로 농축하여 실시예로 이용하였다.

상기와 같은 방식으로 추출하되, 차가버섯 균사체로 발효 처리되지 않은 바다제비집, 성모초, 안젤리카, 및 적석지의 단일 및 복합 추출물을 각각 감압농축기로 농축하여 비교예로 사용하였다.

실시예 2. 발효 복합 추출물의 세포 독성 확인

차가버섯균사체로 발효 처리된 바다제비집, 성모초, 안젤리카 및 적석지의 복합 발효 추출물이 인간 피부섬유아세포(NHDF, normal human dermal fibroblasts)의 생장에 미치는 효과를 아래와 같은 방법으로 확인하였다.

우선, 10% FBS(fetal bovine serum, Cambrex)가 포함된 전용 배지인 DMEM(Dulbeccos modified Eagles medium) 배지에 피부섬유아세포를 40mm 크기의 세포 배양 접시에 1.2×10⁵ 농도로 접종한 후 24시간 동안, 37℃, 5% CO₂ 습윤 조건 하에서 배양하였다. 이후, 배지를 제거하고 300㎕ 용량의 PBS를 가하고, UVB(UVB Peak range: 312nm, UV dose: 144mJ/cm2)를 조사하였다. 차가버섯균사체로 발효 처리된 바다제비집, 성모초, 안젤리카 및 적석지의 복합 발효 추출물 시료는 무혈청 DMEM 배지로 희석한 4-hydroxybenzyl-7-α-D-glucoside(A-5aG) 및 4-(α-D-glucopyranosyloxy)benzyl alcohol(A-5bG)을 각각 농도 별(1, 10, 100 ㎍/mL)로 처리하여 72시간 동안 배양하였고, 대조군으로 발효 처리되지 않은 바다제비집, 성모초, 안젤리카, 및 적석지의 단일 및 복합 추출물을 사용하였다. 72시간 후, 1 mg/mL의 MTT를 처리하고 2시간 후, 세포에 MTT 처리로 인해 생성된 포마잔(formazan)을 DMSO로 녹여 570nm에서 흡광도를 측정하였다.

그 결과, 인간 피부섬유아세포에 차가버섯균사체로 발효 처리된 본 발명의 복합추출물을 처리한 경우, 인간 피부섬유아세포의 생존율을 증가시키는 것으로 확인되었으며(도 1 참조), 이를 통해 차가버섯균사체로 발효 처리된 복합추출물이 인간 피부에 안전하게 사용할 수 있음을 확인할 수 있었다.

실시예 3. MMP -1 및 MMP -3 단백질의 합성 저해

40mm 세포 배양 접시에 2㎖의 DMEM 배양액을 넣고, 인간섬유아세포를 약 1.2x10⁵의 농도로 접종한 후, 37℃, 5% CO₂ 환경에서 24시간 동안 배양하였다. 그 후, UVB를 144mJ/cm² 조건으로 조사한 후, 실시예 1에서 제조된 차가버섯균사체로 발효 처리된 바다제비집, 성모초, 안젤리카 및 적석지의 복합추출물(각각 10, 및 100㎍/㎖)을 포함한 배지로 교체하여 3일간 배양하였다. 이후 배양액을 회수(harvest)하여 4℃, 7500rpm 환경에서 5분간 원심분리(centrifuge)하여 ELISA 방법을 이용하여 MMP-1 및 MMP-3(Human Total MMP-1/3 kit, R&D Systems, Inc., Minneapolis, MN, USA)의 단백질 발현량 변화를 확인하였다(도 2 및 도 3 참조).

먼저, 144mJ/cm² 용량으로 자외선 조사 처리한 인간섬유아세포는 자외선 무처리 군에 비해 MMP-1 단백질의 생성이 대략 2배 정도 증가하였다. 이렇게 자외선 조사 처리로 인한 MMP-1 단백질의 생성 증가는 차가버섯균사체로 발효 처리된 바다제비집, 성모초, 안젤리카 및 적석지의 복합추출물의 처리에 의해서 감소하는 현상을 나타내었다. 이 때, 차가버섯균사체로 발효 처리된 복합추출물 처리군은 발효 처리되지 않은 개별추출물 처리군 및 복합추출물 처리군과 비교할 때 월등한 효과를 나타내는데, 구체적으로 성모초 단일 추출물 처리군에 비해 각각 10, 및 100㎍/㎖ 용량에서 61% 및 53%; 안젤리카 단일 추출물 처리군에 비해 각각 10, 및 100㎍/㎖ 용량에서 63% 및 57%; 바다제비집 단일 추출물 처리군에 비해 각각 10, 및 100㎍/㎖ 용량에서 65% 및 59%; 적석지 단일 추출물 처리군에 비해 각각 10, 및 100㎍/㎖ 용량에서 65% 및 56%; 및 발효처리하지 않은 성모초, 안젤리카, 적석지 및 바다제비집의 복합추출물 처리군에 비해 각각 10, 및 100㎍/㎖ 용량에서 62% 및 55%; 개선된 MMP-3 단백질의 생성 저해 효과를 나타내었다(도 2).

마찬가지로, 이렇게 자외선 조사 처리로 인한 MMP-3 단백질의 생성 증가는 차가버섯균사체로 발효 처리된 바다제비집, 성모초, 안젤리카 및 적석지의 복합추출물의 처리에 의해서 감소하는 현상을 나타내었다.

이 때, 차가버섯균사체로 발효 처리된 복합추출물 처리군은 발효 처리되지 않은 개별추출물 처리군 및 복합추출물 처리군과 비교할 때 월등한 효과를 나타내는데, 구체적으로 성모초 단일 추출물 처리군에 비해 각각 10, 및 100㎍/㎖ 용량에서 50% 및 37%; 안젤리카 단일 추출물 처리군에 비해 각각 10, 및 100㎍/㎖ 용량에서 47% 및 42%; 바다제비집 단일 추출물 처리군에 비해 각각 10, 및 100㎍/㎖ 용량에서 49% 및 45%; 적석지 단일 추출물 처리군에 비해 각각 10, 및 100㎍/㎖ 용량에서 48% 및 39%; 및 발효 처리하지 않은 성모초, 안젤리카, 적석지 및 바다제비집의 복합추출물 처리군에 비해 각각 10, 및 100㎍/㎖ 용량에서 47% 및 36% 개선된 MMP-3 단백질의 생성 저해 효과를 나타내었다(도 3).

상기와 같은 결과를 통해, 본 발명의 차가버섯균사체로 발효 처리된 본 발명의 복합 발효 추출물은 주름생성의 원인이 되는 MMP-1 및 MMP-3 단백질의 생성을 효과적으로 억제하여 피부 주름의 예방 및 개선에 효과적으로 사용될 수 있음을 알 수 있었다.

실시예 4. 타입 1 프로콜라겐 단백질의 합성 촉진

40mm 세포 배양 접시에 2㎖의 DMEM 배양액을 넣고, 인간섬유아세포를 약 1.2x10⁵의 농도로 접종한 후, 37℃, 5% CO₂ 환경에서 24시간 동안 배양하였다. 그 후, UVB를 144mJ/cm² 조건으로 조사한 후, 실시예 1에서 제조된 차가버섯균사체로 발효 처리된 바다제비집, 성모초, 안젤리카 및 적석지의 복합추출물(각각 10, 및 100㎍/㎖)을 포함한 배지로 교체하여 3일간 배양하였다. 이후 배양액을 회수(harvest)하여 4℃, 7500rpm 환경에서 5분간 원심분리(centrifuge)하여 ELISA 방법을 이용하여 타입 1 프로콜라겐(Procollagen Type I C Peptide EIA Kit, Takara, Shiga, Japan)의 단백질 발현량 변화를 확인하였다(도 4 참조).

144mJ/cm² 용량으로 자외선 조사 처리한 인간섬유아세포는 자외선 무처리 군에 비해 타입 1 프로콜라겐 단백질의 생성이 현저하게 감소하였다. 이렇게 자외선 조사 처리로 인한 타입 1 프로콜라겐 단백질의 생성 감소는 차가버섯균사체로 발효 처리된 바다제비집, 성모초, 안젤리카 및 적석지의 복합추출물의 처리에 의해서 다시 증가하는 현상을 나타내었다. 이 때, 차가버섯균사체로 발효 처리된 본 발명의 복합추출물은 발효 처리되지 않은 군과 비교할 때 월등한 증가 효과를 나타내는데, 구체적으로 성모초 단일 추출물 처리군에 비해 각각 10, 및 100㎍/㎖ 용량에서 225% 및 159%; 안젤리카 단일 추출물 처리군에 비해 각각 10, 및 100㎍/㎖ 용량에서 267% 및 177%; 바다제비집 단일 추출물 처리군에 비해 각각 10, 및 100㎍/㎖ 용량에서 218% 및 185%; 적석지 단일 추출물 처리군에 비해 각각 10, 및 100㎍/㎖ 용량에서 200% 및 182%; 및 발효 처리하지 않은 성모초, 안젤리카, 적석지 및 바다제비집의 복합추출물 처리군에 비해 각각 10, 및 100㎍/㎖ 용량에서 209% 및 159%; 개선된 타입 1 프로콜라겐 단백질의 생성 증가 효과를 나타내었다(도 4).

상기와 같은 결과를 통해, 본 발명의 차가버섯균사체로 발효 처리된 본 발명의 복합추출물을 포함하는 조성물은 TGF-β/Smad 신호전달체계에 작용하여 타입 1 프로콜라겐의 생성을 촉진시키고, 콜라겐 분해 효소인 MMP-1의 발현을 억제하는 작용을 통해, 주름 생성을 효과적으로 예방하고, 생성된 주름을 개선하는 효과가 있음을 확인할 수 있었다.

이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다.

따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims (9)

1. 차가버섯 균사체로 발효 처리된 바다제비집, 성모초, 안젤리카 및 적석지의 복합 발효 추출물을 유효성분으로 함유하고,
   상기 바다제비집, 성모초, 안젤리카 및 적석지의 혼합비율은 중량기준으로 1 : 1 - 3 : 1 - 3 : 0.3 - 0.7의 중량비를 갖는 것을 특징으로 하는 피부 주름 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
2. 제1항에 있어서,
   상기 차가버섯 균사체로 발효 처리된 바다제비집, 성모초, 안젤리카 및 적석지의 복합 발효 추출물은 타입 I 프로콜라겐 단백질의 발현을 증가시키고, MMP-1 및 MMP-3 단백질의 발현을 억제하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
3. 제1항에 있어서,
   상기 조성물은 캐모마일 꽃 추출물, 로즈마리 잎 추출물, 할미꽃 잎 추출물, 어스니어 추출물, 인삼 추출물, 제라늄 꽃 추출물, 고삼 추출물, 타임 추출물, 쐐기풀 추출물, 야로우 추출물, 클로브 추출물, 펜넬 추출물, 파파야 잎 추출물, 및 해바라기 추출물에서 선택된 하나 이상의 식물 추출물을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
4. 삭제
5. 제1항에 있어서,
   상기 조성물은 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클린저에서 선택된 어느 하나의 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
6. 피부주름 개선용 패치에 있어서,
   상기 패치는 제1항 내지 제3항, 및 제5항 중 어느 한 항의 피부주름 개선용 조성물이 함침된 피부주름 개선층, 및 기재층을 포함하여 이루어지고,
   상기 피부주름 개선층은,
   일측면이 상기 기재층 위에 코팅되고, 타측면이 인체 피부에 접촉하는 것을 특징으로 하는 피부주름 개선용 패치.
7. 제6항에 있어서,
   상기 기재층은 돌기를 형성하는 것을 특징으로 하는 피부주름 개선용 패치.
8. 제7항에 있어서,
   상기 돌기는 반원형, 타원형, 삼각형, 사각형, 오각형, 육각형, 및 하트형으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 형태인 것을 특징으로 하는 피부주름 개선용 패치.
9. 피부주름 개선용 마스크 팩에 있어서,
   상기 마스크 팩은 제1항 내지 제3항, 및 제5항 중 어느 한 항의 피부주름 개선용 조성물이 함침된 피부주름 개선층, 및 기재층을 포함하여 이루어지고,
   상기 피부주름 개선층은,
   일측면이 상기 기재층 위에 코팅되고, 타측면이 인체 피부에 접촉하는 것을 특징으로 하는 피부주름 개선용 마스크 팩.

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