KR101753304B1 - A cosmetic composition for skin whitening - Google Patents

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Abstract

본 발명은 생지황, 구기자, 황금 및 백지 혼합 추출물을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 화장료 조성물은 안전한 천연 제제를 이용한 것으로 피부 적용시 부작용이 없으며, 티로시나제 활성 저해, 멜라닌 생합성 저해 등을 통해 피부 미백에 탁월한 효과를 가져, 피부 미백용 화장료 조성물로 적합하다.
The present invention relates to a cosmetic composition for whitening skin, which comprises a mixture of raw persimmon, Chinese cabbage, golden and white mixed extract.
The cosmetic composition according to the present invention uses a safe natural preparation and has no side effects when applied to skin. It has an excellent effect on skin whitening through inhibition of tyrosinase activity and inhibition of melanin biosynthesis, and is suitable as a skin whitening cosmetic composition.

Description

피부 미백용 화장료 조성물 {A cosmetic composition for skin whitening}[0001] The present invention relates to a cosmetic composition for skin whitening,

본 발명은 한약재 혼합 추출물을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition for skin whitening comprising a herbal mixed extract.

사람의 피부색을 결정하는 데는 여러 가지 요인들이 관여하는데, 그 중에서도 멜라닌 색소를 만드는 멜라노사이트(melanocyte)의 활동성, 혈관의 분포, 피부의 두께 및 카로티노이드와 빌리루빈 등의 인체 내외의 색소 함유 유무 등의 요인들이 중요하다.Several factors are involved in determining the skin color of a person. Among them, factors such as the activity of melanocytes that make melanin pigment, the distribution of blood vessels, the thickness of skin, and the presence or absence of pigment in and out of human body such as carotenoid and bilirubin Are important.

멜라닌 색소의 형성에는 유전적 요인, 호르몬 분비, 스트레스 등과 관련된 생리적 요인 및 자외선 조사 등과 같은 환경적 요인 등이 영향을 미친다.The formation of melanin pigment affects genetic factors, hormonal secretion, physiological factors such as stress, and environmental factors such as ultraviolet irradiation.

신체 피부의 멜라닌 세포에서 생성되는 멜라닌 색소는 검은 색소와 단백질의 복합체 형태를 갖는 페놀계 고분자 물질로서, 태양으로부터 조사되는 자외선을 차단하여 진피 이하의 피부기관을 보호해주는 동시에 피부 생체 내에 생겨난 자유 라디칼 등을 잡아주는 등 피부 내 단백질과 유전자들을 보호해주는 유용한 역할을 담당한다.The melanin pigment produced in melanocytes of body skin is a phenolic polymer substance having a complex form of black pigment and protein. It protects the subcutaneous skin organs by blocking ultraviolet rays irradiated from the sun, and at the same time, free radicals And protects proteins and genes in the skin.

이와 같이 피부 내, 외부의 스트레스적 자극에 의해 생겨난 멜라닌은 스트레스가 사라져도 피부 각질화를 통해서 외부로 배출되기 전까지는 없어지지 않는 안정한 물질이다. 그러나 멜라닌이 필요 이상으로 많이 생기게 되면 기미, 주근깨 및 점 등과 같은 과색소 침착증을 유발하여 미용상으로 좋지 않은 결과를 가져오게 된다.Melanin, which is produced by stress stimuli inside and outside the skin, is a stable substance that does not disappear until the skin is excreted through skin keratinization even if the stress disappears. However, when melanin is produced more than necessary, it induces hypercholesterolemia such as spots, freckles, and dots, resulting in poor cosmetic results.

이와 같은 요구에 부응하여 종전부터 아스코르빈산, 코지산, 알부틴, 하이드로퀴논, 글루타치온 또는 이들의 유도체, 또는 타이로시나제 저해활성을 가진 물질들을 화장료나 의약품에 배합하여 사용하여 왔으나, 이들의 불충분한 미백효과, 피부에 대한 안전성 문제, 화장료에 배합 시 나타나는 제형 및 안정성의 문제 등으로 인해 그 사용이 제한되고 있다. 이에 따라, 기존의 피부 미백용 조성물보다 생체에 안전하고 효과가 높은 새로운 피부 미백용 조성물의 개발이 절실히 요망되고 있다.In response to such demands, substances having ascorbic acid, kojic acid, arbutin, hydroquinone, glutathione, derivatives thereof, or tyrosinase inhibiting activity have been conventionally used in cosmetics or pharmaceuticals, The use thereof is limited due to a whitening effect, a safety problem to the skin, a problem of formulation and stability in combination with cosmetics, and the like. Accordingly, it is urgently required to develop a composition for skin whitening that is safer and more effective for a living body than a conventional skin whitening composition.

KR10-2013-0125878 2013.11.20KR10-2013-0125878 2013.11.20 KR10-2013-0090169 2013.08.13KR10-2013-0090169 2013.08.13

본 발명의 목적은 미백 효과를 가지는 화장료 조성물을 제공하는 데에 있다.It is an object of the present invention to provide a cosmetic composition having a whitening effect.

본 발명자들은 미백 효과를 갖는 화장료 조성물을 개발하고자 예의 연구한 결과, 생지황, 구기자, 황금 및 백지가 우수한 피부 미백 효과를 가짐을 확인하여, 본 발명을 완성하였다. The inventors of the present invention have made intensive studies to develop a cosmetic composition having a whitening effect, and as a result, found that the raw whitish, gugija, golden and white papillae have excellent skin whitening effect and completed the present invention.

본 발명은 생지황, 구기자, 황금 및 백지 혼합 추출물을 제공한다. The present invention provides a mixed extract of green beans, bean curd, golden and white beans.

본 발명의 생지황, 구기자, 황금 및 백지 혼합 추출물은 상기 4 종의 약재의 혼합에 의한 시너지 효과에 따라, 각각의 약재를 사용하였을 때보다 낮은 세포 독성을 가지며 우수한 피부 미백 효과를 가진다. According to the synergistic effect of mixing the four kinds of medicinal materials, the mixed extract of Lilium persimmon, Gejia, Gugija, Golden and White ground of the present invention has cytotoxicity lower than that of each medicinal material and has excellent skin whitening effect.

본 발명에 있어서, 생지황(Rehmanniae Radix Recens)은 현삼과에 속하는 다년생 초본인 지황(Rehmannia glutinosa (Gaertner) Liboschitz ex Steudel)의 신선한 뿌리이며, 한국, 중국, 일본에 자생한다.In the present invention, saengjihwang (Rehmanniae Radix Recens) is a perennial plant belonging to the family Scrophulariaceae is Rehmannia (Rehmannia glutinosa (Gaertner) Liboschitz ex Steudel), and is native to Korea, China and Japan.

본 발명에 있어서, 구기자(Lycium Fruit)는 가지과에 속하는 덩굴성 낙엽관목인 구기자나무(Lycium chinense Miller) 또는 영하구기(Lycium barbarum Linne)의 열매이다. 성숙한 과실을 채취하여 서늘한 곳에서 말려 외피가 유연해지고 쭈글쭈글해지면 음건하여 사용한다. 한국, 중국, 일본 등지에서 자생한다. In the present invention, Lycium Fruit is a creeper deciduous shrub, Lycium chinense Miller) or Lycium barbarum Linne. Mature fruits are picked and dried in a cool place to make the outer skin soft and crumpled. It grows in Korea, China, and Japan.

본 발명에 있어서, 황금(Scutellaria Root)은 꿀풀과에 속하는 다년생 초본인 속썩은풀(Scutellaria baicalensis Georgi)의 뿌리이다. 한국, 중국, 몽골 및 시베리아 동부 등지에 분포한다. In the present invention, the golden (Scutellaria Root) is a perennial plant belonging to the family Lamiaceae, Scutellaria baicalensis Georgi). It is distributed in Korea, China, Mongolia and eastern Siberia.

본 발명에 있어서, 백지(Angelica Dahurica Root)는 산형과에 속하는 일년 또는 이년성의 초본인 구릿대(Angelica dahurica Bentham et Hooker f.) 또는 항백지(Angelica dahurica Bentham et Hooker f. var. formosana Shan et Yuan)의 뿌리이다. 한국, 중국, 일본 등지에 분포한다. In the present invention, the blank (Angelica Root Dahurica) is a dispersion type and belonging to one years or two years sex herbal guritdae (Angelica dahurica Bentham et Hooker f. ) Or anti-blank (Angelica dahurica Bentham et Hooker f. there is. formosana Shan et Yuan). It is distributed in Korea, China and Japan.

상기 약재들은 국내외에서 저비용으로 원료 확보가 용이하며 구입하거나 직접 채취한 것을 사용할 수 있다.The medicaments can be obtained at home or abroad at low cost, and can be purchased or directly collected.

본 발명에서 생지황, 구기자, 황금 및 백지 혼합 추출물은 이들 추출물을 먼저 혼합한 후 추출한 추출물이거나, 이들 각각을 추출한 후 이를 혼합한 혼합 추출물일 수 있으며, 바람직하게 본 발명의 혼합 추출물은 생지황, 구기자, 황금 및 백지를 혼합한 후 추출한 추출물을 사용한다. 본 발명에서 상기 혼합 추출물은 농축된 액상일수도 있고, 동결 건조된 분말 형태일 수도 있다. In the present invention, the mixed extracts of Bokbujang, Gugija, Golden and White Bark may be the extracts obtained by mixing these extracts first, or the mixed extracts obtained by extracting each of these extracts. Preferably, the mixed extracts of Bokbujang, Use the extracted extract after mixing gold and white paper. In the present invention, the mixed extract may be in a concentrated liquid form or in a lyophilized powder form.

본 발명의 혼합 추출물은 생지황, 구기자, 황금 및 백지 혼합 추출물 총중량에 대하여 생지황 40 중량% 내지 50 중량%, 구기자 15 중량% 내지 25 중량%, 황금 15 중량% 내지 25 중량% 및 백지 10 중량% 내지 20 중량%를 포함할 수 있으며, 바람직하게 생지황 40 중량% 내지 50 중량%, 구기자 17 중량% 내지 25 중량%, 황금 17 중량% 내지 25 중량% 및 백지 15 중량% 내지 20 중량%의 중량%를 포함할 수 있다. The mixed extract of the present invention contains 40 to 50% by weight of raw persimmon, 15 to 25% by weight of ginger, 15 to 25% by weight of gold and 10 to 10% by weight of white ginger, Preferably from 20% to 40% by weight, preferably from 40% to 50% by weight of raw persimmon, from 17% by weight to 25% by weight, from 17% by weight to 25% by weight of gold and from 15% .

본 발명의 혼합 추출물은 상기 4종의 약재에 대하여 상기 기재된 중량 %를 포함함으로써 개별 추출물 내지 2이상의 조합추출물과 대비하여 피부 미백에 현저히 우수한 효과를 나타내며, 특히 티로시나제 활성 억제 및 멜라닌 생합성 저해에 기인한 피부 미백에 우수한 활성을 나타낸다. The mixed extract of the present invention contains the weight percentage described above for the above four kinds of medicinal materials, and thereby exhibits remarkably excellent effect on skin whitening compared with individual extracts or two or more combination extracts. In particular, And exhibits excellent activity for skin whitening.

본 발명에 있어서, 생지황, 구기자, 황금 및 백지 혼합 추출물의 제조는 열수 추출, 침지 추출, 환류 냉각 추출 및 초음파 추출 등의 추출 방법 등을 사용하여 제조할 수 있으며, 추출 회수는 1 내지 5회인 것이 바람직하다. 추출 용매는 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 이의 혼합물, 바람직하게는 물, 에탄올 수용액을 사용하는 것이 좋으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 상기 추출 용매의 양은 생지황, 구기자, 황금 및 백지의 총중량의 2 내지 15 배로 한다. 열수(물) 추출물의 경우 100~110℃에서 2~24시간 동안 바람직하게는 2~10시간 동안 수욕 환류 추출하는 것을 1 내지 4회 반복할 수 있다. In the present invention, the mixed extracts of raw persimmon, Chinese goji, golden and white mixed papers can be produced by using extraction methods such as hot water extraction, immersion extraction, reflux cooling extraction and ultrasonic extraction, and the extraction times are 1 to 5 times desirable. The extraction solvent is preferably water, an alcohol having 1 to 4 carbon atoms or a mixture thereof, preferably water or an aqueous solution of ethanol, but is not limited thereto. The amount of the above-mentioned extraction solvent is 2 to 15 times the total weight of the raw persimmon, Chinese cabbage, golden and white paper. In the case of the hydrothermal (water) extract, it may be repeated one to four times at 100 to 110 ° C for 2 to 24 hours, preferably for 2 to 10 hours by water-bath reflux extraction.

본 발명에서 상기 생지황, 구기자, 황금 및 백지 혼합 추출물을 추가로 분리하여 얻어진 생지황, 구기자, 황금 및 백지 추출물의 분획물을 제공한다. 분획분리는 당해 분야에 알려진 분리법에 의해 수행된다. 바람직하게는 생지황, 구기자, 황금 및 백지를 물에 현탁한 후, 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올 등의 용매를 이용하여 추출하여 생지황, 구기자, 황금 및 백지 가용 추출물을 수득할 수 있다. In the present invention, there is provided a fragrant extract of Leaf kiwifruit, Gugija, Golden and Bleach extract obtained by further separating the mixed extracts of Lilium, Liliaceae, Golden and White. Fractionation is carried out by separation methods known in the art. Preferably, the raw persimmon, Chinese cabbage, golden and white papers are suspended in water and extracted with a solvent such as hexane, chloroform, ethyl acetate, butanol or the like to obtain extracts of raw persimmon, Chinese goat, golden and white paper.

본 발명은 생지황, 구기자, 황금 및 백지 혼합 추출물을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공한다.The present invention provides a cosmetic composition for skin whitening comprising a mixture of raw persimmon, Chinese cabbage, golden and white mixed extracts.

본 발명의 생지황, 구기자, 황금 및 백지 혼합 추출물은 안전한 천연 제제를 이용한 것으로 피부 적용시 부작용이 없으며, 티로시나제 활성 저해, 멜라닌 생합성 저해 등을 통해 피부 미백에 탁월한 효과를 가져, 피부 미백용 화장료 조성물로 적합하다. The present invention relates to a cosmetic composition for whitening skin, which has an excellent effect on skin whitening through inhibition of tyrosinase activity and inhibition of melanin biosynthesis, Suitable.

특히, 본 발명의 생지황, 구기자, 황금 및 백지 혼합 추출물을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물은 이들 각각의 단독 추출물 내지 2 이상의 조합 추출물과 대비하였을 때, 생지황, 구기자, 황금 및 백지의 구성 약재 간 조합에 따른 시너지 효과 때문에 더욱 우수한 피부 미백 효과를 가진다. In particular, the cosmetic composition for skin whitening comprising the combination of the extract of Leekyangguk, Gejigae, Golden, and White Bland of the present invention, when compared with each of the single extracts and the combination extract of two or more thereof, And thus has a superior skin whitening effect.

본 발명에서 생지황, 구기자, 황금 및 백지 혼합 추출물은 화장료 조성물의 총 중량에 대하여 분말형태 또는 액상 형태로 0.001% ~ 10중량%의 양으로 화장료에 첨가될 수 있으며, 바람직하게는 화장료 조성물 총 중량에 대하여 분말형태 또는 액상형태로 0.01∼5중량%의 양으로 화장료에 첨가될 수 있다.In the present invention, the mixed extract of green onion, garlic, golden and white can be added to the cosmetic in an amount of 0.001% to 10% by weight in powder or liquid form relative to the total weight of the cosmetic composition, May be added to the cosmetic in an amount of 0.01 to 5% by weight in powder form or in liquid form.

본 발명에서 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서의 생지황, 구기자, 황금 및 백지 혼합 추출물 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료, 색소 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.The components contained in the cosmetic composition according to the present invention include components commonly used in cosmetic compositions in addition to the raw extracts of Ganoderma lucidum, Gugija, golden and white mixed extracts as active ingredients, and examples thereof include antioxidants, stabilizers, solubilizers, vitamins, And customary adjuvants such as perfumes, and carriers.

본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 맛사지 크림, 에센스, 팩, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.The cosmetic composition of the present invention can be prepared into any of the formulations conventionally produced in the art and can be used as a solution, a suspension, an emulsion, a paste, a gel, a cream, a lotion, a powder, a soap, , Oil, powder foundation, emulsion foundation, wax foundation and spray, but is not limited thereto. More specifically, it can be manufactured in the form of a soft lotion, a nutritional lotion, a nutritional cream, a massage cream, an essence, a pack, an eye cream, a cleansing cream, a cleansing foam, a cleansing water, a pack, a spray or a powder.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, an animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, tracant, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc or zinc oxide may be used as the carrier component .

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.When the formulation of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as a carrier component. In the case of a spray, in particular, / Propane or dimethyl ether.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 폴리옥시에칠렌 경화피마자유, 글리세롤, 글리세린, 지방족 에스테르, 페녹시에탄올, 트리에탄올아민, 폴리에틸렌 글리콜, 밀납, 폴리솔베이트 60, 솔비탄세스퀴오레이드, 파라핀, 소르비탄 스테아레이트, 친유형 모노스테아린산 글리세린, 스테아린산, 글리세릴스테아레이트/피이지-400 스테아레이트, 카르복시폴리머, 시토스테롤, 폴리글리세릴 2-올레이트, 세라마이드, 콜레스테롤, 스테아레스-4, 디세틸포스페이트, 마카다미아 오일, 카르복시비닐폴리머, 산탄검 또는 소르비탄의 지방산 에스테르 등이 있다.When the formulation of the present invention is a solution or an emulsion, a solvent, a dissolving agent or an emulsifying agent is used as a carrier component, and examples thereof include water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, Glycerol, aliphatic esters, phenoxyethanol, triethanolamine, polyethylene glycol, beeswax, polysorbate 60, sorbitan sesquiolead, paraffin, polyoxyethylene sorbitan fatty acid esters, polyoxyethylene sorbitan fatty acid esters, Sorbitan stearate, glycerin monostearate, stearic acid, glyceryl stearate / fat-400 stearate, carboxy polymer, sitosterol, polyglyceryl 2-oleate, ceramide, cholesterol, , Macadamia oil, carboxyvinyl polymer, xanthan gum or sorbitan fatty acid Esters and the like.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올, 부틸렌글리콜 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 하이드록시에틸셀룰로오즈, 소디움히아루로네이트, 페녹시에탄올, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.When the formulations of the present invention are suspensions, the carrier component may be a suspending agent such as water, diluents such as ethanol, butylene glycol or propylene glycol, ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol esters and polyoxyethylene sorbitan esters Microcrystalline cellulose, hydroxyethylcellulose, sodium hyaruronate, phenoxyethanol, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tracant, etc. may be used.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is an interfacial active agent-containing cleansing, the carrier component may include aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, isethionate, imidazolinium derivative, methyltaurate, sarcosinate, fatty acid amide Ether sulfates, alkylamidobetaines, aliphatic alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanolamides, vegetable oils, lanolin derivatives or ethoxylated glycerol fatty acid esters.

본 발명의 생지황, 구기자, 황금 및 백지 혼합 추출물은 안전한 천연 제제를 이용한 것으로 피부 적용시 부작용이 없으며, 티로시나제 활성 저해, 멜라닌 생합성 저해 등을 통해 피부 미백에 탁월한 효과를 가져, 피부 미백용 화장료 조성물로 탁월한 효과를 가진다. The present invention relates to a cosmetic composition for whitening skin, which has an excellent effect on skin whitening through inhibition of tyrosinase activity and inhibition of melanin biosynthesis, It has excellent effect.

도 1은 생지황, 구기자, 황금 및 백지 혼합 추출물 처리에 따른 세포 생존율 변화를 확인한 도이다.
도 2는 생지황, 구기자, 황금 및 백지 혼합 추출물 처리에 따른 티로시나제 활성 저해를 확인한 도이다.
도 3은 생지황, 구기자, 황금 및 백지 혼합 추출물 처리에 따른 멜라닌 생성 저해를 확인한 도이다.
도 4는 생지황, 황금, 백지 또는 구기자 개별 약재 추출물 처리에 따른 멜라닌 생성 변화를 확인한 도이다.
FIG. 1 is a view showing changes in cell survival rate according to the treatment with mixed extract of Leaf spp., Gugija, Golden and White spots.
FIG. 2 is a view showing the inhibition of tyrosinase activity by treatment with raw leaves, gingko leaves, golden and white mixed extracts.
FIG. 3 is a graph showing the inhibition of melanin formation by treatment with raw leaves, ginger, golden and white mixed extracts.
FIG. 4 is a graph showing changes in melanin production according to the treatment of raw medicinal herbs, gold, white papers or goji medicinal herb extracts.

이하, 하기 실시예 및 실험예에 의해 본 발명을 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 하기 실시예는 본 발명의 범위를 제한하는 것은 아니며, 이는 본 발명의 이해를 돕기 위한 것으로 해석되어야 할 것이다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to the following examples and experimental examples. However, the following examples should not be construed as limiting the scope of the present invention, but should be construed to facilitate understanding of the present invention.

실시예 1. 생지황, 구기자, 황금 및 백지 혼합 추출물의 제조 Example 1 Preparation of Mixed Extract of Leaf Spot, Gugija, Golden and White

생지황, 구기자, 황금 및 백지 혼합 추출물을 제조하기 위하여, 생지황(원산지: 경북산), 구기자(원산지: 충남산), 황금(원산지: 전남산) 및 백지(원산지: 경북산)를 (주)옴니허브에서 구입하여 물로 세척하고 음건한 후에 사용하였다.(Origin: Jeongbuk Mountain), gold (origin Jeonnam Mountain), and white ground (origin Jeongbuk Mountain) were mixed with omni It was purchased from the herb, washed with water and used after shading.

상기 생지황 100 g, 구기자 50 g, 황금 50 g 및 백지 35 g을 증류수 1L에 넣고, 환류관을 장착한 후 100 ℃에서 4 시간 동안 환류 추출한 후, 감압 농축하여 62.26g의 생지황, 구기자, 황금 및 백지 혼합 추출물을 제조하였다. 100 g of raw persimmon, 50 g of ginger, 50 g of gold and 35 g of white gum were placed in 1 L of distilled water, refluxed at 100 ° C. for 4 hours and concentrated under reduced pressure to obtain 62.26 g of raw persimmon, White fly mixed extracts were prepared.

대조군으로 생지황, 황금, 백지 또는 구기자 개별 약재 100 g을 증류수 1 L에 넣고 환류관을 장착한 후 100℃에서 4시간 동안 환류 추출하고, 감압 농축하여 생지황 41 g, 구기자 34 g, 황금 35 g 또는 백지 31 g을 제조하였다. As a control, 100 g of raw medicinal herbs, gold, white paper or goji medicine were added to 1 L of distilled water, refluxed at 100 ° C. for 4 hours, and concentrated under reduced pressure to obtain 41 g of raw persimmon, 34 g 31 g of white paper was prepared.

실시예 2. 생지황, 구기자, 황금 및 백지 혼합 추출물의 세포 독성 여부 확인Example 2. Confirmation of cytotoxicity of mixed extracts of Leaf spore, Gugija, Golden and White spots

MTT assay를 이용하여 생지황, 황금, 백지 및 구기자 혼합 추출물의 세포 독성 여부를 확인하였다. MTT assay was used to determine the cytotoxicity of the mixed extracts of Baiji, Golden, White and Gugija.

마우스 유래 B16F10 melanoma 세포를 24 well plate에 104 cells/well의 수가 되도록 1 ㎖ 의 세포 현탁액을 분주하고, 10% fetal bovine serum, 2 mM glutamine, 100 U/mL penicillin, 및 100 mg/mL streptomicin이 포함된 DMEM media을 이용하여 37℃, 5% CO2 세포배양기에서 24 시간 배양하였다. 배양된 세포에 농도별(0~400 ㎍/mL)로 생지황, 황금, 백지 및 구기자 혼합 추출물을 처리하였다. 48시간을 더 배양한 후 pH 7.4의 PBS로 2회 세척 후 배양액에 10배 희석한 MTT 시약 (0.5 mg/mL)을 1 mL 처리한 다음 4 시간 동안 37℃, 5% CO2 세포 배양기에서 반응시켰다. MTT 반응 4 시간 후 배양액을 제거한 후 DMSO 용액 1 mL 을 넣어 세포를 녹인 후, 이 때 나타나는 포르마잔염의 농도를 분광광도계를 이용하여 540nm 에서 흡광도를 측정하였다.B16F10 melanoma cells from mice were seeded in a 24-well plate at a density of 10 4 cells / well, and then incubated with 10% fetal bovine serum, 2 mM glutamine, 100 U / mL penicillin, and 100 mg / mL streptomycin And cultured in DMEM media at 37 ° C in a 5% CO 2 incubator for 24 hours. The cultured cells were treated with a mixture of fresh persimmon, golden, white and gugija extracts (0 ~ 400 ㎍ / mL). After further incubation for 48 hours pH and then washed twice with PBS in 7.4 to 10 times in the culture liquid diluted MTT reagent (0.5 mg / mL) with 1 mL treated with 37 ℃ for the next 4 hours, and the reaction in a 5% CO 2 cell incubator . After 4 hours of MTT reaction, the culture solution was removed, and 1 mL of DMSO solution was added to dissolve the cells. Then, the concentration of forma- tat salt was measured using a spectrophotometer at 540 nm.

세포 생존율은 하기 [식 1]에 의해 산출되었으며, 그 결과는 하기 도 1에 나타내었다.The cell viability was calculated by the following formula 1, and the results are shown in FIG.

[식 1][Formula 1]

Figure 112014075923825-pat00001
Figure 112014075923825-pat00001

상기 실험 결과를 도 1에 나타내었다. 도 1에 나타낸 바와 같이, 생지황, 황금, 백지 및 구기자 혼합 추출물은 약 100 ug/ml를 처리하였을 때까지 세포 생존에 미치는 영향이 미비하였으나, 세포에 처리한 농도가 200 ㎍/mL 이상이 되었을 때부터 대조군과 대비하여 세포독성이 유의적으로 나타난 것을 확인하였다. The experimental results are shown in Fig. As shown in FIG. 1, the effect of the mixed extract of green onion, golden, white and gugija on cell survival was not significant until about 100 ug / ml, but when the cell concentration was 200 ㎍ / mL or more And the cytotoxicity was significantly higher than that of the control group.

실시예Example 3. 생지황, 황금, 백지 및 구기자 혼합 추출물의  3. Mixture of raw leaves, golden, white and goji mixed extract 티로시나제Tyrosinase 저해 활성 확인 Confirm inhibitory activity

마우스 유래 B16F10 melanoma 세포에서 추출한 티로시나제를 이용하여 생지황, 황금, 백지 및 구기자 혼합 추출물의 티로시나제 활성 저해를 확인하였다. Tyrosinase activity of B16F10 melanoma cells derived from mouse was investigated.

100 mm 세포 배양접시에 melanoma 세포가 95% confluency 될 때까지 배양하였다. 배양된 세포를 PBS (pH 7.4)로 2회 세척 후 0.1% triton 100이 포함된 0.1 M phosphate buffer (pH 6.8)를 이용하여 효소를 추출하였다. 효소액의 단백질 농도를 20 ㎍으로 정량한 후 농도별 (0~1 ㎎/mL)로 생지황, 황금, 백지 및 구기자 혼합 추출물을 처리하고, 37℃에서 10분간 반응시켰다. 반응액에 0.15% dopa (3,4-Dihydroxy-L-phenylalanine)용액을 분주한 후, 37℃에서 20분간 반응시킨 다음 분광광도계를 이용하여 475 nm에서 흡광도를 측정하였다. The cells were cultured in a 100 mm cell culture dish until melanoma cells were 95% confluent. The cultured cells were washed twice with PBS (pH 7.4), and the enzyme was extracted with 0.1 M phosphate buffer (pH 6.8) containing 0.1% triton 100. The protein concentration of the enzyme solution was quantitated to 20 ㎍, and then treated with the mixture of raw persimmon, gold, white and gugija at concentration (0 ~ 1 ㎎ / mL) and reacted at 37 ℃ for 10 minutes. The reaction solution was dispensed with 0.15% dopa (3,4-Dihydroxy-L-phenylalanine) solution, reacted at 37 ° C for 20 minutes, and then absorbance was measured at 475 nm using a spectrophotometer.

반응색이 갈색이기 때문에 0.15% dopa 용액 대신 증류수를 넣어 반응시킨 시료군 (a)을 준비하였으며, 0.15% dopa 용액과 농도별 생지황, 황금, 백지 및 구기자 처방을 함께 반응시킨 (b)군에서 (a)를 제외한 후 값을 산출하였다. Since the reaction color is brown, a sample group (a) was prepared by adding distilled water instead of 0.15% dopa solution. A sample group (a) prepared by reacting with 0.15% dopa solution and bamboo, golden, After excluding a), the value was calculated.

티로시나제 활성 저해는 하기 [식 2]에 의해 산출되었으며, 그 결과는 하기 도 2에 나타내었다.Tyrosinase activity inhibition was calculated by the following formula 2, and the results are shown in FIG. 2 below.

[식 2] [Formula 2]

Figure 112014075923825-pat00002
Figure 112014075923825-pat00002

상기 실험 결과를 도 2에 나타내었다. 도 2에 나타낸 바와 같이, 생지황, 황금, 백지 및 구기자 처방에 의해 0.1 ㎎/mL에서부터 대조군 대비 농도 의존적으로 감소하였으며, 0.1 및 1 ㎎/mL에서 각각 12.1 및 33.1%로 티로시나제 활성이 감소한 것을 확인하였다. The experimental results are shown in Fig. As shown in Fig. 2, it was decreased from 0.1 ㎎ / mL in a concentration-dependent manner in comparison with the control group due to the prescription of raw bamboo, gold, white paper and gujie, and the tyrosinase activity was decreased to 12.1 and 33.1% at 0.1 and 1 ㎎ / mL, respectively .

실시예Example 4. 생지황, 황금, 백지 및 구기자 혼합 추출물의 멜라닌 생성 저해 확인 4. Confirmation of inhibition of melanin formation by mixed extracts of raw leaves, golden, white and goji

마우스 유래 B16F10 melanoma 세포를 이용하여 멜라닌 생합성 정도를 측정하였다. Melanin biosynthesis was measured by mouse derived B16F10 melanoma cells.

B16F10 melanoma 세포를 100 mm 배양 접시에서 10% fetal bovine serum, 2 mM glutamine, 100 U/mL penicillin 및 100 mg/mL streptomicin이 포함된 DMEM media를 이용하여 5% CO2를 포함하는 37℃ 배양기 내에서 세포가 90% confluency 될 때까지 배양하였다. Using the B16F10 10% of melanoma cells in 100 mm culture dishes fetal bovine serum, 2 mM glutamine, 100 U / mL penicillin and 100 mg / mL DMEM media the streptomicin includes within 37 ℃ incubator containing 5% CO 2 Cells were cultured until 90% confluency.

멜라닌 생성 저해능을 측정하기 위하여, B16F10 melanoma 세포를 24 well plate에 2104세포/웰로 분주하고 37℃, 5% CO2 배양기에서 24시간 배양하였다. 농도별 (0~100 ㎍/mL) 생지황, 황금, 백지 및 구기자 혼합 추출물, 개별 약재 각각의 추출물, 2 이상의 조합 추출물, 및 양성대조군으로 사용한 코직산(kojic acid) 200 μM 을 세포에 처리한 후 48 시간 배양하였다. 배양액을 제거한 후 PBS를 이용하여 2회 세척한 다음 1 N NaOH를 세포가 부착되어 있는 웰에 분주한 후 30분 동안 더 배양하였다. 배양한 녹은 세포를 튜브에 수거한 다음 100℃ 30분 동안 boiling을 실시하였다. 녹인 액을 분광광도계를 이용하여 415 nm에서 흡광도를 측정하였으며, 멜라닌 농도를 멜라닌 표준 곡선을 이용하여 산출하였으며, 녹인 액의 단백질 농도를 정량하여 멜라닌 농도를 보정하였다. 단백질 농도의 측정은 로우리법(Lowry method)을 기본으로 한 BCA protein assay kit(Thermo Scientific, 23225)를 사용하여 측정하였다. B16F10 melanoma cells were plated at 210 4 cells / well in a 24-well plate and cultured in a 5% CO 2 incubator at 37 ° C for 24 hours. The cells were treated with kojic acid (200 μM), which was used as a positive control, and extracts of each of the extracts, each of the individual medicines, the combination extracts of each of the extracts, Time. After removing the culture medium, the cells were washed twice with PBS, and 1 N NaOH was added to the wells to which the cells were attached, followed by further incubation for 30 minutes. The cultured melted cells were collected in a tube and boiling was carried out at 100 ° C for 30 minutes. Absorbance was measured at 415 nm using a spectrophotometer. The melanin concentration was calculated using the Melanin standard curve. The melanin concentration was corrected by quantifying the protein concentration of the melted liquid. The protein concentration was measured using a BCA protein assay kit (Thermo Scientific, 23225) based on the Lowry method.

그 결과를 도 3 및 4에 나타내었다. The results are shown in Figs. 3 and 4. Fig.

도 3의 (a)는 실시예 1에서 제조된 생지황, 황금, 백지 및 구기자 혼합 추출물을 처리한 결과이며, 도 3의 (b)는 생지황, 황금, 백지 또는 구기자 개별 추출물을 실시예 1과 동일 농도로 조합하여 처리한 결과이다. 도 3에 나타낸 바와 같이, 생지황, 황금, 백지 및 구기자 혼합 추출물 처리에 따라 농도 의존적으로 유의성 있게 멜라닌 생성량이 감소하는 것을 확인할 수 있었으며, 생지황, 황금, 백지 또는 구기자 추출물의 개별 약재 조합의 멜라닌 생합성 저해능도 비슷한 것을 확인하였다. FIG. 3 (a) is a result of treating the mixed extract of green onion yellow, golden, white and gugija prepared in Example 1, and FIG. 3 (b) Concentration in the solution. As shown in FIG. 3, it was confirmed that the melanin production was significantly decreased depending on the treatment with the mixture of raw leaves, golden, white and gugija extracts, and the melanin biosynthesis inhibitory effect of the individual medicinal preparations of the raw leaves, .

한편, 도 4는 생지황, 황금, 백지 또는 구기자의 개별 추출물 처리에 따른 멜라닌 생합성 변화를 나타낸다. 도 4에 나타낸 바와 같이, 생지황, 황금, 백지 또는 구기자의 개별 추출물은 멜라닌 생합성에 효과가 없음을 확인하였다. On the other hand, FIG. 4 shows the melanin biosynthesis change according to the individual extract treatment of raw leaves, golden, white or goji. As shown in Fig. 4, it was confirmed that the individual extracts of raw persimmon, gold, white paper or goji were not effective for melanin biosynthesis.

즉, 생지황, 황금, 백지 또는 구기자의 개별 추출물은 멜라닌 합성 저해에 거의 영향을 미치지 못하나, 이들을 조합한 생지황, 황금, 백지 및 구기자 혼합 추출물은 각 약재간의 혼합에 따른 시너지 효과에 의해 멜라닌 생성 억제에 현저한 효과를 가졌다. In other words, the individual extracts of Baijiwang, Golden, White or Gugija have little effect on the inhibition of melanin synthesis, but the combined extracts of Baijiwang, Golden, White and Gugija combined with each other have a synergistic effect on the inhibition of melanogenesis Had a remarkable effect.

또한, 각각 개별 약재 추출물들이 가지는 세포 독성 등을 고려할 때, 상기 중량부로 조합된 생지황, 황금, 백지 및 구기자 혼합 추출물이 다른 어떠한 조합보다 현저한 미백 효과를 가지는 것을 확인하였다. In addition, considering the cytotoxicity and the like of each individual medicinal plant extract, it was confirmed that the combined extracts of raw persimmon, golden, white and gugija combined with the weight parts had remarkable whitening effect than any other combination.

제형예Formulation Example 1. 생지황, 구기자, 황금 및 백지 혼합 추출물을 함유한 화장수 제조 1. Production of cosmetic lotion containing bamboo leaves, gugija, golden and white mixed extracts

생지황, 구기자, 황금 및 백지 혼합 추출물(실시예 1)을 함유한 화장수(스킨로션)를 하기의 [표 1]의 함량으로 1kg을 제조하였다.1 kg of cosmetic lotion (skin lotion) containing the extract of Bokwanghwang, Gugija, golden and white mixed extract (Example 1) was prepared by the content of [Table 1] shown below.

[표 1] 생지황, 구기자, 황금 및 백지를 함유한 화장수 조성[Table 1] Composition of cosmetic lotion containing raw persimmon, Gujia, golden and white paper

Figure 112014075923825-pat00003
Figure 112014075923825-pat00003

제형예 2. 생지황, 구기자, 황금 및 백지 혼합 추출물을 함유한 영양로션 제조Formulation Example 2. Preparation of nutrition lotion containing mixed extract of bergisil, gugija, golden and white paper

생지황, 구기자, 황금 및 백지 혼합 추출물 (실시예 1)을 함유한 영양로션을 하기의 [표 2]의 함량으로 1kg을 제조하였다. 1 kg of nutritional lotion containing the raw extract of Guanxi, Guji, golden and white mixed extract (Example 1) was prepared by the content of [Table 2] shown below.

[표 2] 생지황, 구기자, 황금 및 백지 혼합 추출물을 함유한 영양로션 조성[Table 2] Composition of nutritional lotion containing mixed extract of Bean Sulfur, Gugija, Golden and White Blend

Figure 112014075923825-pat00004
Figure 112014075923825-pat00004

Claims (5)

생지황 40 중량% 내지 50 중량%, 구기자 15 중량% 내지 25 중량%, 황금 15 중량% 내지 25 중량% 및 백지 10 중량% 내지 20 중량%으로 이루어진, 생지황, 구기자, 황금 및 백지 혼합 추출물을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물.The present invention relates to a method for producing a fermented soybean curd refuse comprising a mixture of raw persimmon, Chinese goose, golden, and white paper, comprising 40 to 50% by weight of raw persimmon, 15 to 25% by weight of gypsum, 15 to 25% by weight of gold and 10 to 20% A cosmetic composition for skin whitening. 삭제delete 제1항에 있어서, 상기 생지황, 구기자, 황금 및 백지 혼합 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 이들의 혼합물 중에서 선택된 하나 이상의 용매로 추출된 것인 피부 미백용 화장료 조성물.The cosmetic composition for skin whitening according to claim 1, wherein the raw leafy goat, gugija, golden and white mixed extracts are extracted with at least one solvent selected from water, an alcohol having 1 to 4 carbon atoms, or a mixture thereof. 제1항에 있어서, 상기 피부 미백은 티로시나제 활성 저해, 멜라닌 생합성 저해 또는 이들 모두에 의한 것인 피부 미백용 화장료 조성물.The cosmetic composition for skin whitening according to claim 1, wherein the skin whitening is caused by inhibition of tyrosinase activity, inhibition of melanin biosynthesis, or both. 제1항에 있어서, 상기 화장료는 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 맛사지 크림, 에센스, 팩, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더 중에서 선택된 어느 하나의 제형을 가지는 화장료 조성물.The cosmetic composition according to claim 1, wherein the cosmetic material has any one of formulations selected from the group consisting of a soft lotion, a nutritional lotion, a nutritional cream, a massage cream, an essence, a pack, an eye cream, a cleansing cream, a cleansing foam, a cleansing water, a pack, Cosmetic composition.
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