KR101736485B1 - 포름산염으로부터 수소생산능이 증가된 써모코코스 돌연변이체 및 이를 이용한 수소생산방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명에 따라 돌연변이화 된 Thermococcus onnurineus NA1는 야생형보다 포름산염을 포함하는 배지에서 수소생산 능력이 증가되었고, 생장 속도도 야생형에 비해 증가하였다. 본 발명에 따른 균주를 이용하면 포름산으로부터 고효율로 수소를 생산할 수 있다.
Description
도 1b는 돌연변이 균주의 제조 전략을 보이는 모식도이고 유전자재조합을 통하여 PgdhhmgPfu 카세트를 F420-reducing hydrogenase(F420-환원 수소화효소, frh)의 알파 서브유닛 유전자(Ton_1559) 앞에 넣었다. 확인을 위하여 사용되어진 프라이머의 위치를 해당되는 유전자들 아래의 검은색 화살표로 나타내었다.
도 2는 F420-환원 수소화효소(F420-reducing hydrogenase, frh)의 웨스턴 블랏 분석 및 단백질 수준을 측정하였다. 쿠마시 블릴리언트 블루 R-250으로 염색된 SDS-PAGE를 웨스턴 블랏 아래 나타냈다.
도 3은 포름산염을 기질로 이용한 CSTR 발효에서 야생형과 돌연변이체의 수소 생산의 변화. (a), 생장곡선; (b), 생산된 수소 누적 곡선.
도 4는 포름산염을 기질로 이용한 CSTR 발효에서 야생형 및 돌연변이체의 수소 생산의 동력학적 분석을 보인다.
Claims (9)
- F420-환원 수소화효소가 과발현된 Thermococcus onnurineus 돌연변이 균주.
- 제 1 항에 있어서, 상기 F420-환원 수소화효소가 과발현된 Thermococcus onnurineus 돌연변이 균주는 F420-환원 수소화효소 유전자 앞에 글루타메이트 디하이드로 게나아제(Pgdh)의 프로모터를 삽입하는 것을 특징으로 하는 Thermococcus onnurineus 돌연변이 균주.
- 제 1 항에 있어서, Thermococcus onnurineus 돌연변이 균주는 미생물기탁번호 KCTC12356BP인 것을 특징으로 하는 Thermococcus onnurineus 돌연변이 균주.
- Thermococcus onnurineus를 돌연변이 시켜 F420-환원 수소화효소의 발현율을 증가시키는 단계; 및
상기 균주를 배양하는 단계를 포함하는 수소생산 방법. - 삭제
- 제 4 항에 있어서, 상기 Thermococcus onnurineus는 미생물기탁번호 KCTC12356BP인 것을 특징으로 하는 수소생산 방법.
- 제 4 항에 있어서, 상기 F420-환원 수소화효소의 발현율 증가는 F420-환원 수소화효소 유전자의 복제수의 증가, 전사율의 증가, 번역율의 증가, 상기 F420-환원 수소화효소의 안정성의 증가 또는 이들의 조합에 의해 이루어지는 것을 특징으로 하는 수소생산 방법.
- 삭제
- 제 7 항에 있어서, 상기 F420-환원 수소화효소의 발현율의 증가는 상기 F420-환원 수소화효소 유전자에 글루타메이트 디하이드로 게나아제(Pgdh)의 프로모터를 이용하는 것을 특징으로 하는 수소생산 방법.
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