KR101552820B1

KR101552820B1 - 전립선 비대, 요실금 및 조루 치료에 효과가 있는 불개미의 항산화 물질 극대화된 환약 조성물

Info

Publication number: KR101552820B1
Application number: KR1020150086267A
Authority: KR
Inventors: 김용수; 백영미; 이수형; 한진택; 정택근; 김완영; 심태경; 장성일; 전용우; 이수정; 채종걸; 김대겸; 김병학; 정영목; 이대웅; 최한나; 고대경; 서지영; 박효진; 박성현
Original assignee: 김용수; 백영미; 이수형; 한진택; 정택근; 김완영; 심태경; 장성일
Priority date: 2015-06-18
Filing date: 2015-06-18
Publication date: 2015-09-16

Abstract

본 발명은 (a) 건조된 불개미를 알칼리 수용액에 침지한 후 꺼내는 단계; (b) 상기 (a)단계의 꺼낸 불개미에 에탄올 수용액을 첨가하여 추출하고 여과한 후 에탄올 추출물을 분리하는 단계; (c) 상기 (b)단계의 에탄올 추출물을 분리하고 남은 불개미 추출박에 정제수 및 단백질 분해 효소를 첨가하여 추출하는 단계; (d) 상기 (c)단계의 추출한 추출물과 상기 (b)단계의 에탄올 추출물을 혼합하고 여과한 후 동결건조하여 불개미 분말을 제조하는 단계; 및 (e) 상기 (d)단계의 제조한 불개미 분말에 천마 분말, 천궁 분말 및 꿀을 혼합하여 반죽을 만든 후 환 형태로 제환하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 항산화 활성이 증진된 불개미 환의 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 항산화 활성이 증진된 불개미 환에 관한 것이다.

Description

전립선 비대, 요실금 및 조루 치료에 효과가 있는 불개미의 항산화 물질 극대화된 환약 조성물{Pill composition with maximized antioxidant of Formica truncicola having treatment effect for prostate hypertrophy, urinary incontinence and premature ejaculation}

불개미(Formica truncicola)는 불개미 속에 속하는 개미의 한 종으로 몸 빛깔이 암적황색을 띠고 몸 전체에 연한 황색 털이 나있다. 불개미는 우리나라와 일본, 중국, 대만, 러시아 등지의 썩은 나무나 흙, 돌 밑에서 서식하고, 살아있는 나무 아래에서는 살지 않는다. 불개미는 우리나라에서는 내륙에 널리 분포하고 남부지방으로 갈수록 개체수가 적어진다. 현재 우리나라에는 집개미와 불개미를 비롯한 1과 26속 60여 종의 개미가 살고 있다.

불개미의 효능으로는 관절 통증, 심뇌혈관병, 호흡계통 기관지염, 비뇨 계통, 소화계통, 신경계통 등에 효과를 나타낸다고 알려져 있다. 말린 개미 100 g에는 70 g 이상의 단백질이 들어 있고, 28종의 유리 아미노산과 8종의 아미노산이 들어 있으며, 이소잔토프테린(isoxanthoppterin), 비오틴(biotin), 비타민 B2, 2-아미노-6-하이드로사이프테리딘 등이 들어 있다.

개미의 성분은 독낭에는 독액이 들어 있는데 그 가운데 가장 주요한 성분은 개미산이고, 90% 농도의 개미 알데히드가 들어 있다. 불개미는 상기와 같은 영양 성분 및 효능이 알려져 있으나, 불개미의 독성을 나타내는 개미산이 일본왕개미의 20배에 달할 정도로 강하고, 일반 가공공정으로는 개미산의 완전한 중화가 어려워 식품으로 이용하는 데 한계가 있어, 불개미를 이용한 가공식품의 개발은 미미한 실정이다.

기존의 공지된 불개미 관련 특허로는 한국공개특허 제2004-0023459호에는 자연건조한 불개미와 여러 가지 약재를 혼합하여 건강보조식품을 제조하는 기술이 공지되어 있고, 한국등록특허 제1136090호에는 불개미와 여러 가지 약재를 혼합한 후 가열해 우려낸 액을 포함하는 기능성 식품이 공지되어 있으나, 본 발명의 항산화 활성이 증진된 불개미 환의 제조방법과는 상이하다.

본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명의 발명자는 불개미를 이용하여 환을 제조하는 데 있어서, 불개미에 함유된 개미산을 효과적으로 중화시켜 섭취 시 인체 독성의 문제점을 해결하면서 기능성 성분이 다량 함유되도록 불개미를 추출하고 건조된 불개미 분말에 천마 분말 및 천궁 분말을 적정량 혼합하여 환으로 제환함으로써, 항산화 활성이 증진된 불개미 환의 제조방법을 확립하는 데 그 목적이 있다.

상기 과제를 해결하기 위해, 본 발명은 (a) 건조된 불개미를 알칼리 수용액에 침지한 후 꺼내는 단계; (b) 상기 (a)단계의 꺼낸 불개미에 에탄올 수용액을 첨가하여 추출하고 여과한 후 에탄올 추출물을 분리하는 단계; (c) 상기 (b)단계의 에탄올 추출물을 분리하고 남은 불개미 추출박에 정제수 및 단백질 분해 효소를 첨가하여 추출하는 단계; (d) 상기 (c)단계의 추출한 추출물과 상기 (b)단계의 에탄올 추출물을 혼합하고 여과한 후 동결건조하여 불개미 분말을 제조하는 단계; 및 (e) 상기 (d)단계의 제조한 불개미 분말에 천마 분말, 천궁 분말 및 꿀을 혼합하여 반죽을 만든 후 환 형태로 제환하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 항산화 활성이 증진된 불개미 환의 제조방법을 제공한다.

또한, 본 발명은 상기 방법으로 제조된 항산화 활성이 증진된 불개미 환을 제공한다.

본 발명의 방법으로 불개미를 전처리하고 추출 및 분말화 과정을 통해 불개미에 포함된 개미산을 중화시키면서 기능성 성분이 다량 함유되도록 불개미를 추출하고 분말화할 수 있으며, 또한, 상기 제조된 분말에 천마 분말 및 천궁 분말을 적정량 혼합하여 환 형태로 제환하여 제조된 혼합환은 항산화 활성이 기존의 불개미 환에 비해 현저하게 증진되어 건강 지향의 새로운 형태의 기능성 식품을 제공할 수 있다.

본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은

(a) 건조된 불개미를 알칼리 수용액에 침지한 후 꺼내는 단계;

(b) 상기 (a)단계의 꺼낸 불개미에 에탄올 수용액을 첨가하여 추출하고 여과한 후 에탄올 추출물을 분리하는 단계;

(c) 상기 (b)단계의 에탄올 추출물을 분리하고 남은 불개미 추출박에 정제수 및 단백질 분해 효소를 첨가하여 추출하는 단계;

(d) 상기 (c)단계의 추출한 추출물과 상기 (b)단계의 에탄올 추출물을 혼합하고 여과한 후 동결건조하여 불개미 분말을 제조하는 단계; 및

(e) 상기 (d)단계의 제조한 불개미 분말에 천마 분말, 천궁 분말 및 꿀을 혼합하여 반죽을 만든 후 환 형태로 제환하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 항산화 활성이 증진된 불개미 환의 제조방법을 제공한다.

본 발명의 불개미 환의 제조방법에서, 상기 (a)단계의 알칼리 수용액은 바람직하게는 pH 8~9의 0.1~10 중량% 알칼리 수용액일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 pH 8.5의 0.1 중량% 알칼리 수용액일 수 있다. 상기 알칼리 수용액에 사용되는 알칼리는 바람직하게는 중탄산나트륨, 초산나트륨, 초산칼륨, 구연산나트륨, 구연산칼륨 및 탄산칼륨 등으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상을 사용할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 중탄산나트륨을 사용할 수 있다. 상기와 같은 알칼리 처리를 통해 불개미에 포함된 개미산을 부분적으로 중화시킬 수 있었다.

또한, 본 발명의 불개미 환의 제조방법에서, 상기 (c)단계의 단백질 분해 효소는 알칼라제(Alkalase)일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

또한, 본 발명의 불개미 환의 제조방법에서, 상기 (d)단계의 동결건조는 바람직하게는 -50~-60℃에서 20~28시간 동안 동결건조할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 -55℃에서 24시간 동안 동결건조할 수 있다. 전처리한 불개미를 상기 조건으로 건조하는 것이 다른 방법 및 조건으로 건조하는 것에 비해 항산화 활성 등과 같은 생리활성 효과가 향상된 불개미 분말로 제조할 수 있었다.

또한, 본 발명의 불개미 환의 제조방법에서, 상기 (e)단계의 혼합은 바람직하게는 불개미 분말, 천마 분말, 천궁 분말 및 꿀을 8~12:35~45:45~55:65~75 중량비율로 혼합할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 10:40:50:70 중량비율로 혼합할 수 있다. 상기와 같은 재료 및 배합비로 혼합하여 제조된 환은 불개미 분말, 천마 분말, 천궁 분말 단독 또는 불개미+천마 및 불개미+천궁 혼합환에 비해 항산화 활성이 증진된 불개미 환으로 제조할 수 있었다.

본 발명의 불개미 환의 제조방법은, 보다 구체적으로는

(a) 건조된 불개미를 pH 8~9의 알칼리 수용액에 50~70분 동안 침지한 후 꺼내는 단계;

(b) 상기 (a)단계의 꺼낸 불개미에 45~55%(v/v) 에탄올 수용액을 첨가하여 50~70℃에서 8~12시간 동안 추출하고 여과한 후 에탄올 추출물을 분리하는 단계;

(c) 상기 (b)단계의 에탄올 추출물을 분리하고 남은 불개미 추출박에 정제수 및 단백질 분해 효소를 첨가하고 pH 8~9로 유지하면서 40~50℃에서 65~80시간 동안 추출하는 단계;

(d) 상기 (c)단계의 추출한 추출물과 상기 (b)단계의 에탄올 추출물을 혼합하고 여과한 후 -50~-60℃에서 20~28시간 동안 동결건조하여 불개미 분말을 제조하는 단계; 및

(e) 상기 (d)단계의 제조한 불개미 분말에 천마 분말, 천궁 분말 및 꿀을 8~12:35~45:45~55:65~75 중량비율로 혼합하여 반죽을 만든 후 환 형태로 제환하는 단계를 포함할 수 있으며,

더욱 구체적으로는

(a) 건조된 불개미를 pH 8.5의 알칼리 수용액에 60분 동안 침지한 후 꺼내는 단계;

(b) 상기 (a)단계의 꺼낸 불개미에 50%(v/v) 에탄올 수용액을 첨가하여 60℃에서 10시간 동안 추출하고 여과한 후 에탄올 추출물을 분리하는 단계;

(c) 상기 (b)단계의 에탄올 추출물을 분리하고 남은 불개미 추출박에 정제수 및 단백질 분해 효소를 첨가하고 pH 9로 유지하면서 40~50℃에서 72시간 동안 추출하는 단계;

(d) 상기 (c)단계의 추출한 추출물과 상기 (b)단계의 에탄올 추출물을 혼합하고 여과한 후 -55℃에서 24시간 동안 동결건조하여 불개미 분말을 제조하는 단계; 및

(e) 상기 (d)단계의 제조한 불개미 분말에 천마 분말, 천궁 분말 및 꿀을 10:40:50:70 중량비율로 혼합하여 반죽을 만든 후 환 형태로 제환하는 단계를 포함할 수 있다.

본 발명의 불개미 환의 제조방법에서, 상기 (a) 내지 (c)단계의 과정을 통해 전처리한 불개미는 개미산과 같은 독성 물질을 효과적으로 제거하면서 추출 효율을 향상시키고, 항산화 활성과 같은 생리활성 효과가 증진된 추출물로 제조할 수 있었다.

본 발명은 또한, 상기 방법으로 제조된 항산화 활성이 증진된 불개미 환을 제공한다.

이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.

제조예 1: 불개미 동결건조 분말 제조

(1) 건조 불개미 1 kg을 pH 8.5의 0.1% 중탄산나트륨 수용액에 1시간 동안 침지한 후 건져내었다.

(2) 상기 건져낸 불개미에 50% 에탄올 수용액 5 kg을 넣고 60℃에서 10시간 동안 교반하고, 여과한 후 에탄올 추출물을 분리하였다.

(3) 상기 분리하고 남은 불개미 에탄올 추출박에 정제수 5 kg을 첨가하여 40~50℃에서 pH를 9로 유지하면서 단백질 분해 효소(알칼라제, 노보자임) 5 g을 첨가하고 72시간 동안 교반하여 효소를 분해하였다.

(4) 상기 (3)단계의 추출물과 상기 (2)단계에서 분리한 에탄올 추출물을 합하여 200 메쉬 마이크로 필터로 여과한 후 -55℃에서 24시간 동안 동결건조하여 분말화하였다.

비교예 1: 불개미 열풍건조 분말 제조

상기 제조예 1의 방법으로 제조하되, (4)단계에서 동결건조하지 않고, 50℃에서 6시간 동안 열풍건조하여 분말화하였다.

비교예 2: 불개미 분무건조 분말 제조

상기 제조예 1의 방법으로 제조하되, (4)단계에서 동결건조하지 않고, 여과한 추출물을 진공 농축하여 30 brix로 조정한 후, 인입온도 180℃, 배풍온도 110℃로 하여 분당 0.3 L의 속도로 분무건조를 실시하여 분말화하였다.

제조예 2: 불개미, 천마 및 천궁 혼합환의 제조

상기 제조예 1의 방법으로 제조된 불개미 동결건조 분말 10 g, 천마 분말 40 g, 천궁 분말 50 g 및 꿀 70 g을 혼합하여 환 형태로 제환하였다.

비교예 3: 불개미 및 천궁 혼합환의 제조

상기 제조예 1의 방법으로 제조된 불개미 동결건조 분말 10 g, 천궁 분말 50 g 및 꿀 70 g을 혼합하여 환 형태로 제환하였다.

비교예 4: 불개미 및 천마 혼합환의 제조

상기 제조예 1의 방법으로 제조된 불개미 동결건조 분말 10 g, 천마 분말 40 g 및 꿀 70 g을 혼합하여 환 형태로 제환하였다.

실험방법

(1) SOD(Superoxide dismutase) 유사 활성

시험관에 트리스-HCl 완충액 3 ㎖, 0.2mM 피로갈롤 0.2 ㎖, 시료 0.2 ㎖를 가하고 25℃에서 10분간 방치한 후, 1N HCl 1 ㎖를 첨가하여 반응을 정지시키고, 420 nm에서 흡광도를 측정하였다.

SOD 유사 활성(%)= 100 - (A/B × 100)

A: 시료 첨가군의 흡광도

B: 시료 무첨가군의 흡광도

(2) ABTs 라디칼 소거능

시험관에 시료 0.2 ㎖를 채취한 후 0.1M 인산 완충액(pH 5.0) 1 ㎖ 가해준 후, 1mM H₂O₂ 0.2 ㎖를 첨가하고 37℃에서 5분간 방치하였다. 5분 뒤 1.25mM ABTs 0.3 ㎖와 페록시다아제(1U/㎖) 0.3 ㎖를 첨가하고, 다시 37℃에서 10분간 방치한 후 405 nm에서 흡광도를 측정하였다.

(3) 하이드록시 라디칼 소거능

시험관에 0.1mM FeSO₄/EDTA 용액 0.2 ㎖, 10mM 2-디옥시리보오스 0.2 ㎖, 시료 0.1 ㎖와 0.1M 인산 완충액(pH 7.4) 1.3 ㎖, 10mM H₂O₂ 0.2 ㎖를 가하고, 37℃ 항온기에서 2시간 반응시킨 후 20% TCA(trichloroacetic acid) 용액 1 ㎖를 가하여 100℃에서 15분간 가열한 후 급속히 냉각시켜 532 nm에서 흡광도를 측정하였다.

실시예 1: SOD 유사 활성

상기 제조예 및 비교예에 의해 제조된 불개미 분말과 혼합환의 SOD 유사 활성을 측정한 결과는 하기 표 1과 같다. 그 결과, 불개미 동결건조 분말이 77.11%를 나타내어, 불개미 열풍건조 및 분무건조 분말에 비해 높은 활성을 나타내었다.

또한, 혼합환 중에서는 불개미+천마+천궁 혼합환이 90.71%의 SOD 유사 활성을 나타내어, 불개미+천궁 혼합환과 불개미+천마 혼합환뿐만 아니라 불개미 단독 분말에 비해서도 높은 활성을 나타내었다.

SOD 유사 활성

시료	SOD 유사 활성(%)
불개미 동결건조 분말(제조예 1)	77.11
불개미 열풍건조 분말(비교예 1)	72.62
불개미 분무건조 분말(비교예 2)	75.11
불개미+천궁 혼합환(비교예 3)	86.91
불개미+천마 혼합환(비교예 4)	82.74
불개미+천마+천궁 혼합환(제조예 2)	90.71

실시예 2: ABTs 라디칼 소거능

상기 제조예에 의해 제조된 불개미 분말 및 혼합환의 ABTs 라디칼 소거능을 측정한 결과는 하기 표 2와 같다. 그 결과, 제조예 2의 불개미+천마+천궁 혼합환이 46.47%의 라디칼 소거능을 나타내어, 불개미 동결건조 분말 19.23%, 천궁 분말 19.09% 및 천마 분말 34.37%의 소거 활성에 비해 높은 활성을 나타냄을 확인할 수 있었다(표 2).

ABTs 라디칼 소거능

시료	ABTs 라디칼 소거능(%)
불개미 동결건조 분말(제조예 1)	19.23±8.9891
천궁 분말	19.09±4.2943
천마 분말	34.37±4.1205
불개미+천마+천궁 혼합환(제조예 2)	46.47±2.9874

실시예 3: 하이드록시 라디칼 소거능

하이드록시 라디칼 소거능은 2-디옥시리보오스 산화법에 의해 측정하였다. 하이드록시 라디칼은 활성산소 중에서 반응성이 강하여 생체 산화에 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 상기 제조예 및 비교예에 의해 제조된 불개미 분말 및 혼합환의 하이드록시 라디칼 소거능을 측정한 결과는 하기 표 3과 같다. 그 결과, 건조조건에 따른 불개미 분말에서는 불개미 동결건조 분말에서 53.13%의 라디칼 소거능을 나타내어, 불개미 열풍건조 및 분무건조 분말의 31.01% 및 13.41%에 비해 높은 소거능을 나타내었고, 천궁 분말 및 천마 분말은 각각 4.95% 및 4.61%의 소거능을 나타내어 항산화 효과가 미미하였다.

또한, 혼합환 중에서는 불개미+천마+천궁 혼합환이 65.18%의 하이드록시 라디칼 소거능을 나타내어, 불개미+천궁 혼합환과 불개미+천마 혼합환뿐만 아니라 불개미 단독 분말에 비해서도 가장 높은 활성을 나타내었다.

불개미 분말의 하이드록시 라디칼 소거능

시료	하이드록시 라디칼 소거능(%)
불개미 동결건조 분말(제조예 1)	53.13
불개미 열풍건조 분말(비교예 1)	31.01
불개미 분무건조 분말(비교예 2)	13.41
천궁 분말	4.95
천마 분말	4.61
개미+천궁 혼합환(비교예 3)	31.13
개미+천마 혼합환(비교예 4)	20.56
개미+천마+천궁 혼합환(제조예 2)	65.18

Claims

(a) 건조된 불개미를 알칼리 수용액에 침지한 후 꺼내는 단계;
(b) 상기 (a)단계의 꺼낸 불개미에 에탄올 수용액을 첨가하여 추출하고 여과한 후 에탄올 추출물을 분리하는 단계;
(c) 상기 (b)단계의 에탄올 추출물을 분리하고 남은 불개미 추출박에 정제수 및 단백질 분해 효소를 첨가하여 추출하는 단계;
(d) 상기 (c)단계의 추출한 추출물과 상기 (b)단계의 에탄올 추출물을 혼합하고 여과한 후 동결건조하여 불개미 분말을 제조하는 단계; 및
(e) 상기 (d)단계의 제조한 불개미 분말에 천마 분말, 천궁 분말 및 꿀을 혼합하여 반죽을 만든 후 환 형태로 제환하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 항산화 활성이 증진된 불개미 환의 제조방법.
제1항에 있어서, 상기 (d)단계의 동결건조는 -50~-60℃에서 20~28시간 동안 동결건조하는 것을 특징으로 하는 항산화 활성이 증진된 불개미 환의 제조방법.
제1항에 있어서, 상기 (e)단계의 혼합은 불개미 분말, 천마 분말, 천궁 분말 및 꿀을 8~12:35~45:45~55:65~75 중량비율로 혼합하는 것을 특징으로 하는 항산화 활성이 증진된 불개미 환의 제조방법.
제1항에 있어서,
(a) 건조된 불개미를 pH 8~9의 알칼리 수용액에 50~70분 동안 침지한 후 꺼내는 단계;
(b) 상기 (a)단계의 꺼낸 불개미에 45~55%(v/v) 에탄올 수용액을 첨가하여 50~70℃에서 8~12시간 동안 추출하고 여과한 후 에탄올 추출물을 분리하는 단계;
(c) 상기 (b)단계의 에탄올 추출물을 분리하고 남은 불개미 추출박에 정제수 및 단백질 분해 효소를 첨가하고 pH 8~9로 유지하면서 40~50℃에서 65~80시간 동안 추출하는 단계;
(d) 상기 (c)단계의 추출한 추출물과 상기 (b)단계의 에탄올 추출물을 혼합하고 여과한 후 -50~-60℃에서 20~28시간 동안 동결건조하여 불개미 분말을 제조하는 단계; 및
(e) 상기 (d)단계의 제조한 불개미 분말에 천마 분말, 천궁 분말 및 꿀을 8~12:35~45:45~55:65~75 중량비율로 혼합하여 반죽을 만든 후 환 형태로 제환하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 항산화 활성이 증진된 불개미 환의 제조방법.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항의 방법으로 제조된 항산화 활성이 증진된 불개미 환.