KR101546897B1

KR101546897B1 - 항염증 활성 증진을 위한 구아바의 추출방법

Info

Publication number: KR101546897B1
Application number: KR1020140164302A
Authority: KR
Inventors: 김종찬; 정승원; 정진웅; 장미; 김소미; 안광석
Original assignee: 한국식품연구원
Priority date: 2014-11-24
Filing date: 2014-11-24
Publication date: 2015-08-24
Also published as: KR20150003123A

Abstract

본 발명은 항염증 활성을 높이기 위해 최적화된 구아바(Psidium guajava)의 추출방법에 관한 것이다. 본 발명은 또한 이러한 추출방법에 따라 추출된 항염증 활성이 증진된 구아바 추출물 및 이러한 구아바 추출물을 유효성분으로 함유하는 염증 개선, 치료 또는 예방용 약학 조성물 또는 기능성 식품 조성물을 제공한다.

Description

항염증 활성 증진을 위한 구아바의 추출방법{Extraction method of Psidium guajava for increasing anti-inflammation activity}

본 발명은 항염증 활성 증진을 위해 최적화된 구아바(Psidium guajava)의 추출방법에 관한 것이다. 본 발명은 또한 상기 추출방법에 따라 추출된 항염증 활성이 증진된 구아바 추출물 및 이를 포함하는 항염증 활성 증진용 약학 조성물 또는 식품 조성물에 관한 것이다.

구아바는 도금양과(Myrtaceae과) Psidium 속의 미국산 열대성 식물로서, 화분식물은 물론 잎, 나무껍질, 열매 등을 건강식 및 약용으로 이용할 수 있는 약용식물이다.

구아바에는 비타민 C, 마그네슘, 칼륨, 칼슘 등 비타민과 미네랄 등이 많이 함유되어 있으며, 과산화변이억제 작용(암예방), 과산화수소 소거 작용(노화방지), 활성산소발생억제작용(미백효과), 항비만 작용(아밀라제 억제), 항당뇨증작용 (당흡수억제, 유사 인슐린 작용-함유하고 있는 폴리페놀 성분), 항 알레르기 작용(히스타민류 억제) 등이 보고되어 있다.

최근 국내에서 구아바를 이용한 건강보조식품이나 건강음료에 관한 많은 연구가 이루어지고 있다.

예를 들어, 대한민국 공개특허공보 제10-2003-0005387호는 구아바 잎을 주성분으로 한 당뇨병 치료용, 비만개선용, 노화방지용 차의 효과적인 조성물 및 이를 함유한 건강식품을 개시한 바 있으며, 일본 특허출원공개 제10-2006-11762호는 구아바를 함유하는 항알레르기제를 개시한 바 있다.

그러나, 이러한 구아바가 함유하는 항염증 효과와 항염증 효과를 높일 수 있는 방법에 대해 개시한 특허문헌은 없으며, 특히 이러한 항염증 효과를 극대화시킬 수 있는 구아바의 추출방법에 대해 개시된 문헌은 아직 보고된 바 없다.

따라서, 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 항염증 활성을 증진시키기 위해 최적화된 구아바의 추출조건을 밝혀내어, 항염증 활성 증진효과를 갖는 구아바의 추출방법을 제공하는 것이다.

본 발명은 또한 이러한 구아바의 추출방법에 따라 추출된 항염증 활성이 증진된 구아바 추출물을 제공하기 위한 것이다.

또한, 본 발명은 이러한 구아바 추출물을 유효성분으로 함유하는 항염증 활성 증진용 약학 조성물 또는 식품 조성물을 제공한다.

상기 기술적 과제를 달성하기 위하여, 본 발명은 에탄올이 42 내지 68 부피%인 에탄올 수용액을 추출용매로 하여 38 내지 56℃의 추출온도에서 3 내지 6시간 동안 추출하는 것을 특징으로 하는 항염증 활성 증진을 위한 구아바의 추출방법을 제공한다.

본 발명자들은 추출용매로서 에탄올의 농도가 42 내지 68 부피%인 에탄올 수용액을 사용하고, 38 내지 56℃의 추출온도 및 3 내지 6시간의 추출시간으로 하는 추출조건을 사용하여 추출된 구아바 추출물이 항염증 활성 증진에 있어 매우 효과적이라는 사실을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.

본 발명에서 사용되는 구아바는 채취한 구아바 잎을 건조시킨 다음 분쇄하여 사용하는 것이 바람직하다.

본 발명의 구아바 추출방법에서 사용되는 추출용매인 에탄올 수용액에서 에탄올의 농도는 42 내지 68 부피%인 것이 바람직하며, 53 내지 57%인 것이 더욱 바람직하며, 55%인 것이 더욱더 바람직하다.

본 발명의 구아바 추출방법에서 추출온도는 38 내지 56℃의 범위인 것이 바람직하며, 45 내지 49℃의 범위인 것이 더욱 바람직하며, 47℃인 것이 더욱더 바람직하다.

본 발명의 구아바 추출방법에서 추출시간은 3 내지 6시간이 바람직하며, 4 내지 5시간이 더욱 바람직하며, 4.5시간이 더욱더 바람직하다.

본 발명에 따른 구아바 추출조건은 단순한 수율 또는 총 페놀성 화합물의 함량 측면에서는 최선의 추출조건이 아니나, 놀랍게도 항염증 활성과 관련이 있는 NO의 생성량 및 PGE₂의 생성량 측면에서는 본 발명에 따른 구아바 추출조건이 가장 최적이었다. 이러한 결과는 구아바 추출물의 함염증 효과를 높이기 위한 추출조건은 단순한 수율 또는 총 페놀성 화합물의 함량을 높이기 위한 추출조건과 실질적으로 다름을 의미한다.

본 발명에서는 또한 상기 추출방법에 따라 추출된 항염증 활성이 증진된 구아바 추출물을 제공하며, 이러한 구아바 추출물을 유효성분으로 함유하는 항염증 활성 증진용 약학 조성물 또는 기능성 식품 조성물을 제공한다.

본 발명의 구아바 추출물이 이용될 수 있는 기능성 식품으로는, 예를 들어, 음료류, 껌류, 차, 비타민 복합제, 건강보조식품, 빵류, 과자류, 캔디류 등이 있으나, 본 발명은 이러한 제품의 종류에 한정되는 것은 아니다.

즉, 본 발명에 따른 추출조건으로 제조된 염증 치료 또는 예방용 조성물은 의약품 및 기능성 식품의 형태로 제조될 수 있다. 이러한 의약품 및 기능성 식품은 약제학적으로 허용되는 부형제 또는 첨가제를 포함할 수 있다. 본 발명의 조성물은 단독으로 혹은 어떤 편리한 운반체, 부형제 등과 함께 혼합하여 투여될 수 있고, 그러한 투여 제형은 단회투여 또는 반복투여 제형일 수 있다.

본 발명의 조성물을 포함하는 의약품 또는 기능성 식품은 고형 제제 또는 액상 제제일 수 있다. 고형 제제는 산제, 과립제, 정제, 캅셀제, 좌제 등이 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 고형 제제에는 부형제, 착향제, 결합제, 방부제, 붕해제, 활택제, 충진제 등이 포함될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. 액상 제제로는 물, 프로필렌 글리콜 용액 같은 용액제, 현탁액제, 유제 등이 있으나, 이에 한정되는 것은 아니며, 적당한 착색제, 착향제, 안정화제, 점성화제 등을 첨가하여 제조할 수 있다.

예를 들어, 산제는 본 발명의 유효 성분인 특정 추출조건으로 제조된 구아바 추출물과 유당, 전분, 미결정셀룰로오스 등 약제학적으로 허용되는 적당한 부형제를 단순 혼합함으로써 제조될 수 있다. 과립제는 본 발명의 구아바 추출물; 약제학적으로 허용되는 적당한 부형제; 및 폴리비닐피롤리돈, 히드록시프로필셀룰로오스 등의 약제학적으로 허용되는 적당한 결합제를 혼합한 후, 물, 에탄올, 이소프로판올 등의 용매를 이용한 습식과립법 또는 압축력을 이용한 건식과립법을 이용하여 제조될 수 있다. 또한 정제는 상기 과립제를 마그네슘스테아레이트 등의 약제학적으로 허용되는 적당한 활택제화 혼합한 후, 타정기를 이용하여 타정함으로써 제조될 수 있다.

본 발명의 조성물은 치료해야할 질환 및 개체의 상태에 따라 경구제, 주사제(예를 들어, 근육주사, 복강주사, 정맥주사, 주입(infusion), 피하주사, 임플란트), 흡입제, 비강투여제, 질제, 직장투여제, 설하제, 트랜스더말제, 토피칼제 등으로 투여될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 투여경로에 따라 통상적으로 사용되고 비독성인, 약제학적으로 허용되는 운반체, 첨가제, 비히클을 포함하는 적당한 투여 유닛 제형으로 제제화될 수 있다. 일정 시간 동안 약물을 지속적으로 방출할 수 있는 데포(depot) 제형 또한 본 발명의 범위에 포함된다.

염증 개선이라는 본 발명의 목적을 달성하기 위하여 본 발명의 방법에 따라 제조된 구아바 추출물은 매일 약 0.0001 mg/kg 내지 약 10 g/kg이 투여될 수 있으며, 약 0.001 mg/kg 내지 약 1 g/kg의 1일 투여 용량이 바람직하다. 그러나 상기 투여량은 구아바 추출물의 정제 정도, 환자의 상태(연령, 성별, 체중 등), 치료하고 있는 상태의 심각성 등에 따라 다양할 수 있다. 필요에 따라 편리성을 위하여 1일 총 투여량이 나누어지고 하루 동안 여러 번 나누어 투여될 수 있다.

본 발명은 항염증 활성이 뛰어난 구아바 추출물을 제조하는 제조 방법, 즉 추출 조건을 제공한다. 또한, 본 발명은 이러한 추출방법에 따라 추출된 항염증 활성이 증진된 구아바 추출물 및 이러한 구아바 추출물을 유효성분으로 함유하는 항염증 활성 증진용 약학 조성물 또는 기능성 식품 조성물을 제공한다.

도 1은 NO 생성량이 최소인 추출 조건 및 PGE₂ 생성량이 최소인 추출 조건을 겹쳐(superimposing) 3차원으로 나타낸 그래프이다.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예 등을 들어 상세하게 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명에 따른 실시예들은 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 하기 실시예들에 한정되는 것으로 해석되어서는 안 된다. 본 발명의 실시예들은 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.

<여러 추출 조건에 따른 구아바 추출>

구아바(Psidium guajava)는 제주대학교로부터 입수한 구아바 잎을 건조하여 분쇄기를 사용하여 마쇄한 후 20 mesh 체를 통과시켜 사용하였다.

상기 분쇄된 구아바 잎을 하기 표 1에 나타낸 바와 같은 추출온도, 추출용매인 에탄올의 농도 및 추출시간에 따라 추출하였다.

실시예번호	추출조건
실시예번호	추출온도 (℃)	EtOH 농도 (%)	추출시간 (hr)
1	42	20	3
2	78	20	3
3	42	80	3
4	78	80	3
5	42	20	9
6	78	20	9
7	42	80	9
8	78	80	9
9	30	50	6
10	90	50	6
11	60	0	6
12	60	100	6
13	60	50	1
14	60	50	11
15	60	50	6
16	60	50	6
17	60	50	6
18	60	50	6
19	60	50	6
20	60	50	6

<수율 평가>

상기 실시예 1 내지 20과 같은 추출조건별로 추출한 시료의 총 추출 수율은 다음과 같이 측정하였다. 추출액 10 mL을 취하여 105℃에서 증발 건조시킨 후 그 무게를 측정하였으며, 추출물 조제에 사용된 원료량(건물량)에 대한 백분율로써 추출 수율(%, 총 추출 수율)을 나타내었다.

각 실시예 1 내지 20에서의 추출조건에 따른 수율 측정결과는 하기 표 2에 나타내었으며, 26.81~83.14%의 범위로 측정되었다.

하기 표 2에서 보듯이, 구아바 추출물의 수율은 추출용매인 에탄올 농도와 추출온도가 높을수록 높아지는 것을 알 수 있으며, 추출온도와 추출용매에 대한 에탄올 농도에 가장 큰 영향을 받고 있는 것을 알 수 있었다.

<총 페놀성 화합물 함량 측정>

추출물의 총 페놀성 화합물 함량은 Folin-Ciocalteau 방법을 변형하여 측정하였다. 각 추출물 500μL에 1N Folin-Ciocalteau's 페놀 시약 500 μL 및 2% Na₂CO₃ 10 mL을 가하고 혼합한 다음 실온에서 1시간 정치한 후 750 nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때 표준물질로는 갈산(gallic acid)을 사용하여 구한 검량곡선으로부터 시료 중의 총 페놀성 화합물 함량을 구하였다.

각 실시예 1 내지 20에서의 추출조건에 따른 총 페놀성 화합물의 함량(mg/100g)을 측정한 결과는 하기 표 2에 나타낸 바와 같이 65.18~75.80 mg/100g의 범위로 측정되었다.

하기 표 2에서 보듯이, 총 페놀성 화합물의 함량은 추출용매인 에탄올 농도와 추출시간이 증가할수록 높아지는 것으로 나타났으며, 총 페놀성 화합물 함량은 추출시간과 추출용매에 대한 에탄올 농도에 가장 큰 영향을 받고 있는 것으로 나타났다.

NO의 농도는 배양액 내의 니트라이트 농도를 Griess regent를 이용하여 측정하였다. RAW 264.7 cells를 1× 10⁵cells/well로 96 웰 플레이트에 분주하여 24시간 배양한 후 추출물 30 μg/ml 농도로 전처리하고 2시간 후 지질다당류(LPS, lipopolysaccharide)(1 ug/mL)를 처리하여 24시간 동안 배양하였다. 세포배양 상등액 100 uL를 96 웰 플레이트에 취하고, 여기에 동량의 Griess regent를 넣어 10분간 상온에서 반응시킨 후 ELISA 마이크로플레이트 판독기를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하였다. 아질산나트륨의 농도별 표준곡선을 이용하여 배양액 내의 NO 농도를 결정하였다.

각 실시예 1 내지 20에서의 추출조건에 따른 NO 생산량 (%)을 측정한 결과는 하기 표 2에 나타낸 바와 같이 48.90~70.29%의 범위로 측정되었다.

하기 표 2에서 보듯이, NO의 생성량은 추출용매의 농도가 높을수록 추출온도와 추출시간은 낮을수록 NO 생성량이 감소하는 것으로 나타났다.

<PGE₂ 생성량 측정>

RAW 264.7 cells를 6 웰 플레이트에 1× 10⁶cells/ml의 세포수가 되도록 분주하여 37℃, 5% CO₂ 배양기에서 24시간 동안 배양하였다. 새로운 RPMI 1640배지로 교환 후 추출물 30 μg/ml 농도로 세포에 전처리하고 2시간동안 배양한 후 LPS(1 ug/mL)를 처리하여 24시간 배양하였다. 세포배양액을 5,000 rpm에서 3분 동안 원심분리하여 분리된 상층액을 PGE₂ 효소 면역 분석 (EIA) 키트 (R&D Systems, Abington, UK)를 사용하여 PGE₂ 양을 측정하였다.

각 실시예 1 내지 20에서의 추출조건에 따른 PGE₂ 생산량 (%)은 아무런 약물이 처리되지 않고 LPS로만 자극한 대조군에 비해 하기 표 2에서 보듯이 48.95~73.38%의 범위로 나타났다.

하기 표 2에서 보듯이, PGE₂의 생산량은 추출용매의 농도는 높고 추출온도와 추출시간은 낮을수록 감소하는 것으로 나타났으며, 이는 NO 생산량과 유사한 경향이었다.

실시예 번호	수율 (%)	총 페놀성 화합물 (mg/100g)	LPS 유도된 NO 생성량 (%)	LPS 유도된 PGE₂ 생성량 (%)
1	37.43	69.45	48.90	55.14
2	41.63	71.39	67.69	68.32
3	36.82	72.29	49.65	56.47
4	56.72	74.88	51.25	59.23
5	38.57	73.04	65.34	68.32
6	42.51	71.84	70.29	73.38
7	38.43	73.16	58.97	59.32
8	60.05	74.34	58.55	63.61
9	41.11	70.70	49.74	48.95
10	83.14	75.44	67.69	68.65
11	30.70	69.18	69.79	70.47
12	26.81	70.32	59.51	60.22
13	47.33	72.54	56.11	57.69
14	46.70	75.80	59.39	57.83
15	44.99	65.18	50.41	49.19
16	45.11	67.88	50.07	50.98
17	45.59	65.18	50.24	51.34
18	45.16	68.33	50.32	51.71
19	45.36	67.65	50.16	52.58
20	45.32	69.36	52.57	52.30

상기 표 2에 나타낸 실험결과를 근거로 하여 항염증 활성 증진효과를 위한 NO 생성량 및 PGE₂ 생성량을 최소화할 수 있는 구아바 추출조건 즉, 추출 온도, 에탄올 농도 및 추출시간을 평가하였다. 참고를 위해 수율 및 총 페놀성 화합물의 함량을 최적화할 수 있는 추출조건도 평가하였다.

<회귀식 작성을 통한 최적의 추출 조건 수립>

상기 실시예 1 내지 20에서 이용한 추출조건 및 평가 결과를 바탕으로 최적의 추출조건을 확립하고자 하였다. 반응표면분석을 위해서는 SAS (statistical analysis system) 프로그램을 사용하였다.

독립변수로는 시료의 추출온도(X₁), 에탄올 농도(X₂) 및 추출시간(X₃)을 -1.68, -1, 0, 1 및 -1.68의 5단계로 하기 표 3과 같이 설정하였다.

추출조건	독립변수	인자 값
추출조건	독립변수	-1.682	-1	0	1	1.682
추출온도(℃)	X₁	30	42	60	78	90
EtOH 농도 (%)	X₂	0	20	50	80	100
추출시간 (hr)	X₃	1	3	6	9	11

독립변수(X_i)에 의한 영향을 받는 종속변수(Y_n)는 추출물의 품질인자로서 수율(Y₁), 총 폴리페놀 함량(Y₂), NO 생산량(Y₃) 및 PGE₂ 생산량(Y₄)으로 하였으며, 이들은 3회 반복 측정하여 그 평균값을 회귀분석에 사용하였다. 상기 실시예 1 내지 20에서 수득된 결과(표 2)를 이용하여 최적 추출조건을 얻고자 반응표면 회귀분석을 실시하여 하기 표 4에 나타낸 바와 같은 각 종속변수 즉, 수율, 총 페놀성 화합물 함량, NO 생산량 및 PGE₂ 생산량에 대한 회귀식을 얻었다.

반응	Second order Polynomials	R²	유의수준
수율	Y_Y= 83.272705-2.004304X₁-0.281121X₂-0.522449X₃+0.017386X₁ ²+0.007755X₁X₂-0.007081X₂ ²+0.003472X₁X₃+0.004028X₂X₃+0.021894X₃ ²	0.9086	0.0004
총 페놀성 화합물	Y_TP= 93.542465-0.690086X₁-0.082600X₂-2.165496X₃+0.006409X₁ ²+0.000704X₁X₂+0.000979X₂ ²-0.010556X₁X₃-0.005139X₂X₃+0.274716X₃ ²	0.8964	0.0007
LPS 유도된 NO 생성량	Y_NO = 51.658160-0.099846X₁-0.283024X₂+0.992187X₃+0.006716X₁ ²-0.005222X₁X₂+0.004944X₂ ²-0.036713X₁X₃-0.003361X₂X₃+0.200393X₃ ²	0.9062	0.0005
LPS 유도된 PGE₂ 생성량	Y_P=79.995882-0.663475X₁-0.458842X₂-1.232247X₃+0.009340X₁ ²-0.002569X₁X₂+0.005980X₂ ²-0.015046X₁X₃-0.015417X₂X₃+0.294641X₃ ²	0.9244	0.0002

변수별 최적 추출조건과 품질특성 값을 예측하여 표 5에 나타내었다.

상기 표 5의 계산된 추출조건은 상기 실시예 1 내지 20에서의 실질적인 실시를 통해 수득된 최적화된 추출조건과 거의 유사하였다.

구체적으로, 수율에 있어서, 결과에 대한 반응표면 회귀식의 R²값은 0.9086으로 유의성이 5%이내의 유의수준에서 인정되었다(표 6). 예측된 정상점은 안장점(saddle point)으로 시료에 대한 추출온도는 89.53℃, 추출용매의 에탄올 농도는 58.72%, 추출시간은 6.15 hr에서 최대값 77.02%로 예측되었다.

또한, 추출조건에 따른 추출물의 총 페놀성 화합물 함량을 측정한 결과에 대한 회귀식의 R²값은 0.8964이었으며 총 페놀성 화합물 함량의 예측된 정상점은 최소점(minimum point)으로 시료에 대한 추출온도가 59.52℃, 추출용매의 에탄올 농도는 50.17%, 추출시간은 11.0 hr일 때 최대값 75.26 mg/100g으로 예측되었다.

또한, NO 생성량에 있어서, 결과에 대한 반응표면 회귀식의 R²는 0.9062로 유의성이 5%이내의 유의수준에서 인정되었다(표 6). 세균성 염증유발물질인 지질다당류(LPS, lipopolysaccharide)에 의한 염증반응이 일어나면 여러 가지 염증인자들(pro-inflammatory mediators)이 만들어지는데, 염증인자에는 유도성 산화질소 합성효소(iNOS)에 의해 만들어지는 산화질소(NO)와 사이클로옥시게나제-2(COX-2)에 의해서 만들어지는 프로스타글란딘 E₂ (PGE₂) 등이 있다. LPS로 자극한 세포배양액의 NO 생성량을 측정한 결과 예측된 정상점은 최소점(minimum point)으로 추출온도가 38.66℃, 추출용매의 에탄올 농도는 49.90%, 추출시간은 2.50 hr일 때 NO 생성량이 가장 낮은 값인 45.71%로 나타났다.

PGE₂ 생성량에 있어서, 결과에 대한 반응표면 회귀식의 R²는 0.9244로 유의성이 5%이내의 유의수준에서 인정되었다(표 6). 염증반응에는 사이토카인, 프로스타글란딘 E2 (PGE₂), 리소좀 효소, 유리 라디칼 등 다양한 매개물질이 관여하고 있는 데 특히, 대식세포에서 사이토카인, 종양 괴사 인자-α (TNF-α), 지다당류 (LPS)와 같은 자극에 의해 염증반응의 전사인자인 핵산 인자-κB (NF-κB)를 활성화시키며 그 결과 사이클로옥시게나제-2 (COX-2)를 발현시켜 과량의 PGE₂를 생성하여 염증을 일으킨다. 구아바 추출물을 처리한 후 LPS로 자극한 세포의 배양액에서 생성된 PGE₂양을 측정한 결과 예측된 정상점은 최소점(minimum point)으로 추출온도가 47.24℃, 추출용매의 에탄올 농도는 54.58%, 추출시간은 4.77 hr일 때 PGE₂생성량이 가장 낮은 값인 49.07%로 나타났다.

이러한 결과로부터, 본 발명의 목적인 항염증 효과가 최적인 추출 조건을 확립하기 위하여 NO와 PGE₂ 생성량의 반응표면을 superimposing하여 최적 추출조건의 범위를 설정할 수 있었다(도 1 참조). 그 결과를 하기 표 6에 나타내었으며, 추출온도 38~56℃, 에탄올 농도 42~68% 및 추출시간 3~6시간이 항염증 효과를 위한 최적의 추출조건이었다.

추출 조건	바람직한 범위	최적 값
추출온도 (℃)	38~56	47
EtOH 농도(%)	42~68	55
추출시간 (hr)	3~6	4.5

<실시예 21> 구아바 추출

상기 실시예 1 내지 20을 통하여 파악한 최적화된 구아바의 추출조건에 따라 구아바 잎을 추출하였다. 즉, 추출온도 47℃, 에탄올 농도 55 부피%인 에탄올 수용액 및 추출시간 4.5 hr의 추출조건으로 구아바 잎을 추출한 후 NO 및 PGE₂ 생성량을 측정하였다. 실험을 3회 반복하여 측정 값을 산술하였으며, 그 결과는 하기 표 7에 나타내었다.

NO 생성량 (%)	PGE₂생성량 (%)
45.81± 0.62	47.47± 0.27

상기 표 7에서 보듯이, 상기 실험을 통하여 최적화된 추출조건에서 구아바 잎을 추출하였을 때 NO 생성량 및 PGE₂ 생성량 측면에서 월등히 우수하였다.

하기 표 8에는 실질적인 실시를 통해 수득된 상기 실시예 21에서의 NO 생성량 및 PGE₂생성량과 상기 실시예 1-20을 통해 얻은 회귀식에서 계산한 NO 생성량 및 PGE₂생성량을 비교하여 나타내었다.

NO 생성량 (%)			PGE₂생성량 (%)
예측치 (A)	실험치 (실시예 21) (B)	B/A× 100 (%)	예측치 (A)	실험치 (실시예 21) (B)	B/A× 100 (%)
47.62	45.81± 0.62	96.21	49.08	47.47± 0.27	96.72

상기 표 8에서 보듯이, 실시에 21에서 실질적인 실시를 통해 수득된 NO 및 PGE₂생성량과 회귀식을 통해 계산한 NO 및 PGE₂생성량이 실질적으로 유사함을 파악할 수 있었다.

본 발명의 구아바 추출방법에서의 추출조건은 항염증 효과가 최적화된 추출 방법이다. 본 발명은 이러한 추출방법에 따라 추출된 구아바 추출물을 유효성분으로 함유하는 염증 개선, 치료 또는 예방용 약학 조성물 또는 기능성 식품 조성물을 제공한다. 본 발명에 따라 추출된 구아바 추출물은 항염증 활성을 크게 증진시킬 수 있으므로 당 분야에서 유용하게 이용될 수 있을 것으로 기대된다.

Claims

구아바를 에탄올의 농도가 53 내지 57 v/v%인 에탄올 수용액을 추출용매로 하여 45 내지 49℃의 추출온도에서 4 내지 5시간 동안 추출하는 것을 특징으로 하는 항염증 활성 증진을 위한 구아바의 추출방법.
제 1항에 있어서, 구아바는 구아바 잎을 건조시킨 다음 분쇄한 것임을 특징으로 하는 추출방법.
삭제
제 1항에 있어서, 에탄올의 농도는 55 v/v%인 것을 특징으로 하는 추출방법.
삭제
제 1항에 있어서, 추출온도는 47℃인 것을 특징으로 하는 추출방법.
삭제
제 1항에 있어서, 추출시간은 4.5시간인 것을 특징으로 하는 추출방법.