KR101538468B1

KR101538468B1 - 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본을 함유하는 피부 장벽 강화용 또는 보습용 피부 외용제 조성물

Info

Publication number: KR101538468B1
Application number: KR1020080114595A
Authority: KR
Inventors: 김수정; 민대진; 박준성; 노호식; 김은주; 문은정; 조가영; 김덕희; 김한곤
Original assignee: (주)아모레퍼시픽
Priority date: 2008-11-18
Filing date: 2008-11-18
Publication date: 2015-07-23
Also published as: KR20100055734A

Abstract

본 발명은 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본을 유효성분으로 함유하는 피부 장벽 강화용 또는 보습용 피부 외용제 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 오르토-디하이드록시이소플라본인 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본을 함유함으로써 생체 내 퍼옥시좀 증식체 활성화 수용체 알파(PPAR α)를 활성화시켜 그 발현을 증가시킬 뿐만 아니라, 필라그린 유전자, 트랜스글루타미네이즈 1 유전자 및 히알루론산합성효소 2 유전자의 발현을 증가시켜 피부 각질 세포의 분화를 유도하고 피부 장벽을 강화하며 피부 수분 함량을 증가시키는 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.

오르토-디하이드록시이소플라본, 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본, 피부장벽강화, 피부보습, 퍼옥시좀 증식체 활성화 수용체, 필라그린, 트랜스글루타미네이즈, 히알루론산합성효소

Description

7,3',4'-트리하이드록시이소플라본을 함유하는 피부 장벽 강화용 또는 보습용 피부 외용제 조성물 {Skin external composition for enhancing skin barrier or moisturizing skin containing 7,3',4'-trihydroxyisoflavone}

피부는 외부에서부터 순서대로 표피, 진피, 피하 조직의 3개 층으로 크게 구분되며, 체내의 제 기관을 기온 및 습도 변화, 자외선, 기타 물리적, 화학적인 외부 환경의 자극으로부터 보호해 주는 기능이 있다. 특히, 표피에서는 인체 내부의 수분 증발을 방지하는 중요한 역할을 한다.

상기 표피는 외부로부터 순서대로 각질층, 과립층, 유극층, 기저층으로 구분 되며, 각질층의 세포들은 벽돌과 같은 역할을 하고 각질세포 사이의 세포간 지질들은 모르타르와 같은 역할로 작용하여 피부 장벽을 구성한다(J. Invest. Dermatol. 80(Suppl.), 44-49. 1983). 또한, 건강한 사람의 각질세포에는 고농도의 자연보습인자(Natural Moisturing Factor, NMF)가 존재하여 피부의 수분 보유를 돕는데, 예를 들면 아미노산과 같은 물질은 수용성이기 때문에 효과적으로 수분과 결합하여 피부에서 수분이 건조되는 것을 억제한다(J. Invest. Dermatol. 54, 24-31, 1970).

그러나 요즘과 같이 환경의 변화나 생활 패턴의 변화에 따른 냉/난방의 인위적인 온도 조절, 사회 생활에서 발생되는 각종 스트레스와 환경 오염으로 인한 피부 스트레스, 화장 습관에 따른 잦은 세안 및 연령 증가에 따른 자연적인 피부 노화 등의 여러 가지 원인으로 인하여 각질층의 수분이 감소하여 피부가 건조해지고 표면이 거칠게 되며 피부가 푸석거리고 촉촉함을 잃어 생기가 없어 보이는 등의 현상이 발생하기 때문에 피부 장벽 강화용 또는 피부 보습용 조성물의 필요가 증가하고 있다.

퍼옥시좀 증식체 활성화 수용체(Peroxisome proliferator-activated receptors, PPARs)는 세포 증식/분화의 조절, 염증 매개체들의 조절 등에 있어 중요한 역할을 담당하며, 포도당, 지질 및 호르몬의 대사 조절에도 중요한 역할을 한다고 보고되어 있는 대표적인 핵호르몬 수용체이다(쿠엔즐리, 에스.(Kuenzli, S.), 사우랏, 제이. 에이치.(Saurat, J. H.), Peroxisome proliferator-activated receptors in cutaneous biology, Br. J. Dermatol., 149 (2003), 229-236; 데스베르그네, 비.(Desvergne, B.), 와흘리, 더블유.(Wahli, W.), Peroxisome proliferator-activated receptors: nuclear control of metabolism, Endocrine Reviews, 20 (1999) 649~688.). 특히, 피부의 표피에서 각질형성세포 분화를 촉진하고 증식을 억제하며 지질대사를 통한 피부장벽 형성을 촉진하고 염증 반응을 억제하여 피부 기능의 항상성 유지에 중요한 역할을 수행함이 밝혀졌다.

이소플라본은 주로 콩에 함유된 식물성 화합물로서, 이소플라본을 아글리콘(aglycon)으로 하는 배당체(glucosides)로 존재하다 발효과정 중 미생물의 대사에 의해 비당질 형태로 전환된다. 이러한 이소플라본은 항암, 항산화, 항동맥경화, 혈당강하 및 골다공증 예방 등의 효능이 있는 것으로 알려져 이에 대한 연구가 활발히 이루어지고 있다.

이에 본 발명자들은 오르토-디하이드록시이소플라본의 효능에 대하여 연구하던 중, 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본이 퍼옥시좀 증식체 활성화 수용체 알파(PPAR α)를 활성화시키고 그 유전자 발현 조절을 통해 피부 각질 세포의 분화를 유도하고 피부 장벽을 강화하며, 또한 피부 보습을 담당하는 천연보습 인자의 전구 단백질인 필라그린 유전자, 피부 각화막 형성에 결정적인 역할을 수행하는 트랜스글루타미네이즈 1 유전자, 및 피부 수분 유지 기능을 수행하는 세포외기질 성분인 히알루론산의 합성을 담당하는 히알루론산합성효소 2 유전자의 발현을 증가시킴을 발견하고 본 발명을 완성하였다.

따라서, 본 발명의 목적은 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본을 함유하여 피부 표피 분화 유도 효과, 피부 보습 부여 효과 및 피부 장벽 강화 효과를 갖는 피부 외용제 조성물을 제공하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명에서는 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본을 유효성분으로 함유하는 피부 장벽 강화용 피부 외용제 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명에서는 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본을 유효성분으로 함유하는 보습용 피부 외용제 조성물을 제공한다.

본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본을 유효성분으로 함유함으로써 PPARs 전사활성을 유도하거나 그 발현을 증가시켜 피부 각질 세포의 분화를 유도하고 피부 장벽을 강화하여 피부보습을 증가시켰다. 또한, 본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 피부 표면에서 보습을 담당하는 천연보습 인자의 전구 단백질인 필라그린 유전자, 피부 각화막 형성에 결정적인 역할을 수행하는 트랜스글루타미네이즈 1 유전자, 및 피부 수분 유지 기능을 수행하는 세포외기질 성분인 히알루론산의 합성을 담당하는 히알루론산합성효소 2 유전자의 발현을 증가시킴으로써 우수한 피부 표피 분화 유도 효과, 피부 보습 부여 효과 및 피부 장벽 강화 효과를 나타내었다.

본 발명은 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본을 유효성분으로 함유하는 피부 장벽 강화용 피부 외용제 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본을 유효성분으로 함유하는 보습용 피부 외용제 조성물을 제공한다.

이하 본 발명을 보다 상세히 설명한다.

본 발명에서 유효성분으로 사용되는 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본(7,3',4'-trihydroxyisoflavone)은 오르토-디하이드록시이소플라본(ortho-dihydroxyisoflavone, ODI)으로서 항산화 효과가 다른 이소플라본에 비해 높다.

본 발명의 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본은 하기 화학식 1로 표시된다.

본 발명의 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본은 퍼옥시좀 증식체 활성화 수용체 알파(PPAR α)의 전사활성을 유도하거나, 그 발현을 증가시켜 피부 각질 세포의 분화를 유도하여 피부 장벽을 강화하고 피부보습을 증가시킨다. 또한, 피부 표면에서 보습을 담당하는 천연보습 인자(Natural Moisturizing Factor, NMF)의 전구 단백질인 필라그린(filaggrin) 유전자, 피부 각화막(cornified envelope) 형성에 결정적인 역할을 수행하는 트랜스글루타미네이즈 1(Transglutaminase 1, TGase 1) 유전자, 및 피부 수분 유지 기능을 수행하는 세포외기질 성분인 히알루론산의 합성을 담당하는 히알루론산합성효소 2(hyaluronic acid synthase 2, HAS 2) 유전자의 발현을 증가시킴으로써 우수한 피부 표피 분화 유도 효과, 피부 보습 부여 효과 및 피부 장벽 강화 효과를 제공한다.

본 발명의 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본은 당업계에 잘 알려진 공지의 방법으로 다이드제인을 생변환하여 제조할 수 있으나, 이에만 한정되지 않으며 통상적인 임의의 방법을 통해 생산이 가능하다.

본 발명의 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본을 조성물 총 중량에 대하여 0.001∼10중량%로 함유되는 것이 바람직하다. 그 함량이 0.001중량% 미만이면 피부 표피 분화 유도 효과, 피부 보습력 부여 효과 및 피부 장벽 강화 효과를 얻을 수 없고, 10중량%를 초과하면 함량 증가에 비해 효과의 증가가 크지 않기 때문에 오히려 비효율적이다.

본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본을 그 유효량으로 포함하는 약제학적 조성물 형태로 제조될 수 있으며, 당업계에서 통상적으로 사용하는 하나 또는 그 이상의 무독성, 약제학적으로 허용 가능한 담체, 보조제 또는 희석액 또는 다른 활성성분을 포함할 수 있다.

본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 약제학적으로 허용 가능한 담체와 부형제를 이용하여 공지의 방법으로 제제화될 수 있다.

또한, 본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 오일 또는 수성매질에서 용액, 현탁액 또는 유화액의 형태가 되거나, 사용하기 전에 무균, 발열물질이 제거된 물로 녹여 사용하는 건조분말의 형태로 제형화될 수 있다. 유중수형 유화액은 올리브유 같은 식물성 기름 또는 액상 파라핀 같은 광물성 오일을 유상으로 하고, 대두레시틴(soy bean lecithin) 등의 자연산 인지질 및 소르비탄모노올레이트와 같은 무수헤시톨이나 지방산의 에스테르에서 유래된 것, 리옥시에틸렌소르비톨모노올레이트와 같이 무수헥시톨(hexitol anhydride)과 지방산에서 유래한 부분 에스테르를 에틸렌 옥사이드와 축합한 화합물들을 유화제로 하여 활성성분을 유화시킨 것이다.

본 발명에 의한 피부 외용제 조성물이 화장료로 제형화될 경우, 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며, 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 아이 크림, 영양 크림, 마사지 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 파우더, 에센스 또는 팩 등의 제형을 가질 수 있다.

이하 본 발명을 하기 시험예에 의거하여 보다 구체적으로 설명한다. 그러나 이들 시험예는 본 발명에 대한 이해를 돕기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위가 이들 예로 한정되는 것은 아니다.

[제조예 1] 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본의 제조

7,3',4'-트리하이드록시이소플라본은 다이드제인(시그마사) 3g을 100㎖의 이온수에 용해시키고, 121℃에서 30분간 멸균하여 30℃로 냉각한 후 미리 배양된 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) KCCM 11732를 액체량 대비 5~10%로 접종하였다. 37℃에서 7일 동안 배양시킨 후에 반응을 종료시켰다. 배양액을 5,000 내지 10,000rpm으로 원심 분리하여 회수한 침전물을 증류수로 3회 세척하고 다시 원심 분리하여 침전물을 얻었다. 그 침전물에 에탄올(200㎖)을 가해 교반하고(3회), 침전된 염들을 여과를 통해 제거한 다음, 여과된 여액을 감압 농축하여 조 생성물을 수득하였다. 이후 상기 수득된 조 생성물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(클로로포름:메탄올=8:1~4:1)로 분리하여 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본 0.45g을 얻었다.

[시험예 1] PPARs 활성화 효과

인체 각질형성 세포주(human keratinocyte)인 HaCaT을 10% 우태아 혈청을 포 함하는 DMEM 배지에 계대 배양하였고, 페놀 레드의 에스트로겐에 의한 효과를 제거하기 위해 페놀 레드-프리(phenol red-free) 배지를 사용하였다. 플라스미드는 일반적인 배양 조건에서도 발현되는 유니버설(universal) 프로모터 뒤에 PPARα, PPARβ/δ, PPARγ 유전자를 지닌 플라스미드와 리간드 결합형의 PPARs가 결합하여 활성화되는 PPARs 반응 요소(PPARs Response Element, “PPRE”)를 프로모터로 가지고 뒤에 리포터로써 역할을 하는 반디불(firefly) 루시퍼라제(luciferase) 유전자를 지닌 것, 그리고 참조(reference)로 사용될 유니버설 프로모터에 β-갈락토시다제(β-galactosidase) 유전자가 결합된 플라스미드가 사용되었다[클리워, 에스. 에이.(Kliewer, S. A.), 포만, 비. 엠.(Forman, B.M.), 블럼버그, 비.(Blumberg, B.), 옹, 이. 에스.(Ong, E. S.), 보르그메이어, 유.(Borgmeyer, U.), 만겔스도프, 디. 제이.(Mangelsdorf, D. J.), 우메소노, 케이.(Umesono, K.), 에반스, 알. 엠.(Evans, R. M.), Differential expression and activation of a family of murine peroxisome proliferator-activated receptors, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 91 (1994) 7355-7359.].

HaCaT 세포를 5x10⁴의 농도로 24웰(well)형 플레이트에 분주하고 24 시간 배양한 후, 상기 플라스미드 유전자를 일시적 트랜스펙션(transient transfection)하였다. 24 시간 배양 후 인산완충용약(PBS)으로 세척한 후, 상기 제조예 1에서 제조한 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본(3ODI)과 양성대조군으로 PPARα 리간드인 Wy-14,643 및 PPARγ 리간드인 트로글리타존(troglitazone, “TGZ”)을 각각 10μM 로 처리하였다. 음성대조군은 시료를 녹일 때 사용한 에탄올로 처리한 군을 사용하였다. 또한, 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본과 유사한 구조를 갖는 7,6,4'-트리하이드록시이소플라본(6ODI) 및 7,8,4'-트리하이드록시이소플라본(8ODI)을 각각 10μM로 처리하여 PPARs 활성화 효과를 비교하였다. 24 시간 배양 후 PBS로 세척하고 세포를 수확하여 루시퍼라제 활성을 측정하여 도 1a와 도 1b에 나타내었다.

도 1a는 HaCaT 세포주에 PPRE 프로모터 리포터 플라스미드와 PPARα 발현 플라스미드를 트랜스펙션 시킨 후, 약물을 처리하고 루시퍼라제 활성을 측정한 결과이다. 도1b에서는 HaCaT 세포주에 PPRE 프로모터 리포터 플라스미드와 PPAR γ 발현 플라스미드를 트랜스펙션 시킨 후, 약물을 처리하고 루시퍼라제 활성을 측정한 결과이다. 각 그래프의 첫 번째 칼럼은 음성 대조군으로서 에탄올 처리한 군의 루시퍼라제 활성을 나타낸 것이며, 두 번째 칼럼은 양성대조군으로 PPARα 리간드인 Wy-14,643과 PPARγ 리간드인 트로글리타존을 각각 처리한 것이다. 각 처리군들의 계산값은 음성대조군과의 비율로 나타내었다. 도 1a에서 알 수 있듯이, 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본으로 처리된 군은 높은 루시퍼라제 활성을 나타내어 유의한 정도의 PPAR α활성을 유도하였다. 그러나 7,6,4'-트리하이드록시이소플라본과 7,8,4'-트리하이드록시이소플라본에서는 PPAR α활성을 유도하는 효능이 확인되지 않았다. 도 1b에서 알 수 있는 바와 같이 PPAR γ 전사활성은 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본, 7,6,4'-트리하이드록시이소플라본 및 7,8,4'-트리하이드록시이소플라본 세 물질 모두에 의해 영향을 받지 않았다.

[실험예 2] PPARs, TGase 1, 필라그린 및 HAS2 유전자 발현의 조절 효과

HaCaT를 10% 우태아혈청(fetal bovine serum)을 포함한 DMEM 배지[둘베코의 수정된 이글스 배지(Dulbecco’s modified Eagle’s Medium), 집코(Gibco) 1210-0038]에서 배양하였다. 75플라스크에 1x10⁶개씩 분주하여, 24시간 배양하였다. 그 후, 우태아혈청이 포함되지 않은 DMEM 배지를 처리하여 24시간 동안 배양한 다음 역시 우태아혈청이 포함되지 않은 배지에 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본을 24 시간 동안 처리하였다. 그 후 세포를 회수하여 냉각된 인산완충용약(PBS)로 세척하고 트리졸 시약[TRIzol™reagent, 라이프 테크놀로지스, 인크.(Life Technologies, Inc.)] 1ml를 첨가하여 총 RNA를 추출하여 정량적인 역전사 PCR을 수행하였다. PCR을 수행을 위한 PPARα, γ, TGase 1, filaggrin, HAS 2의 프라이머 서열은 하기 표 1과 같다.

총 RNA 4㎍을 50mM 트리스-HCl(Tris-HCl, pH 8.3), 75mM KCl, 3mM MgCl₂, 0.1M DTT, 10mM dNTP, 40유닛/㎕ RNase 저해제가 함유된 역전사 반응 완충액 25㎕에 넣고, 0.5㎍/㎕ 올리고(dT)₁₆의 프라이머와 200유닛 수퍼스크립트 II[SuperScript II, 집코비알엘(GiboBRL)]의 역전사 중합효소를 첨가하여 42℃에서 1시간 반응시킨다. 이후 역전사 반응 용액 2.5㎕를 엠플리택(AmpliTaq)DNA 중합효소[0.04U, 퍼킨 엘멀, 쉘튼, 씨티(Perkin Elmer, Shelton, CT)], 50mM 트리스(pH 8.3), 0.25mg/ml 우혈청알부민, 3mM MgCl₂, 0.25mM dNTPs, SYBR 그린 I의 1/50,000 희석액[몰레큘라 프로브, 유진, 오알(Molecular Probes, Eugene, OR)]이 함유된 PCR 반응 완충액 50L에 섞고, 10μM의 프라이머를 첨가하여 94℃에서 30초, 53℃에서 30초, 72℃에서 1분인 사이클을 30회 수행하였다.

상대적인 mRNA 레벨은 아이사이클러(ICycler) 소프트웨어를 이용하여 SYBR 그린 I 형광 변화를 측정함으로써 분석하여 도 2에 나타내었다. 양성 대조군으로는 PPARα 리간드인 Wy-14,643나 PPARγ의 리간드인 TGZ를 사용하였으며, 음성대조군인 에탄올 처리군의 값이 1일 때를 기준으로 상대적인 mRNA 레벨을 나타내었다.

PCR에 사용된 프라이머 서열

유전자/NCBI Gene ID	프라이머 서열	서열 번호	증폭 산물크기 (bp)	PCR 반응온도(℃)
				변성	어닐링	확장
β-actin/	5'-ATC CCA TCA CCA TCT TCC AG-3'	1	579	94	58	72
	5'-CCT GCT TCA CCA CCT TCT TG -3'	2
PPARα/	5'-ATG TCC GAA GCA AAC ATC AC -3'	3	401	94	58	72
	5'-TAA TGT CCA GGA AGT AGG TG -3'	4
PPARγ/	5'-TGC AGA GTTCCC CAA CTG GTA CAT C -3'	5	387	94	58	72
	5'-GTG CTG CCT AAT GTC CCC TTG AAT C -3'	6
TGase1/	5'-CCT GTA GCC CAC GTC GTA GC -3'	7	374	94	58	72
	5'-TTG ACC TCA GCG CTG AGT TG -3'	8
Filaggrin/	5'-ACT CGG GGA TAA ATA GTT CCA A-3'	9	357	94	60	70
	5'-CCT TAC ATA TAT ATT CCC CAG CAT-3'	10
HAS2/	5'-TGA AGG ACC CTG CGA ACT TTC-3'	11	185	95	61	70
	5'-GAA CAC TCG CTC AAA CCA GC-3'	12
	5'-AGG TGT ATT GAC CCA TGC TAG AT-3'	16

하기 도 2a 내지 2e는 본 발명에 의한 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본이 PPARα, PPARγ, TGase1, filaggrin, HAS 2의 mRNAs 발현량에 미치는 영향을 보여주는 결과이다. 각 그래프의 첫 번째 칼럼은 음성 대조군으로서 에탄올 처리한 군을 나타낸 것이며, 두 번째 칼럼은 양성대조군으로 Wy-14,643, 트로글리타존을 각각 처리한 것이다. Wy-14,643은 PPARα 리간드로서 각질세포의 분화를 유도하고 장벽을 강화시켜 주는 물질로 보고되어 있다. 도 2a 내지 2e에서 알 수 있듯이, 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본으로 처리된 군은 유의한 정도로 PPARα, PPARγ, 필라그린(filaggrin) 유전자, 트랜스글루타미네이즈 1(TGase 1) 유전자 및 히알루론산합성효소 2(HAS 2) 유전자의 발현을 증가시켰다. 7,6,4'-트리하이드록시이소플라본 및 7,8,4'-트리하이드록시이소플라본의 경우도 일부 유전자의 발현을 증가시켰지만, 본 발명의 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본에 비교하면 그 효과가 매우 적었다.

상기에서 살펴본 바와 같이, 본 발명에 의한 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본은 PPARs 전사활성을 유도하거나 그 발현을 증가시킴으로써, 피부 각질 세포의 분화를 유도하여 피부 장벽을 강화함으로써 피부보습을 증가시키는 효과를 보였다. 또한 피부 표면에서 보습을 담당하는 천연보습 인자(Natural Moisturizing Factor, NMF)의 전구 단백질인 필라그린(filaggrin) 유전자의 발현을 증가시키고, 피부 각화막(cornified envelope) 형성에 결정적인 역할을 수행하는 트랜스글루타미네이즈 1(Transglutaminase1, TGase 1) 유전자의 발현을 증가시키며, 피부 수분 유지 기능을 수행하는 세포외기질 성분인 히알루론산의 합성을 담당하는 히알루론산합성효소 2(hyaluronic acid synthase2, HAS2) 유전자의 발현을 증가시키는 효과를 보였다. 이를 통하여, 본 발명에서는 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본을 유효성분으로 함유하는 피부 장벽 강화용 또는 보습용 피부 외용제 조성물을 제공할 수 있었다.

[제형예 1] 영양화장수

하기 표 2에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양화장수를 제조하였다.

성분	함량(중량 %)
정제수	잔량
글리세린	8.0
부틸렌글리콜	4.0
히알루론산 추출물	5.0
베타글루칸	7.0
카보머	0.1
7,3',4'-트리하이드록시이소플라본	0.05
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드	8.0
스쿠알란	5.0
세테아릴 글루코사이드	1.5
소르비탄 스테아레이트	0.4
세테아릴 알코올	1.0
트리에탄올아민	0.1

[제형예 2] 영양크림

하기 표 3에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양크림을 제조하였다.

성분	함량(중량%)
정제수	잔량
글리세린	3.0
부틸렌글리콜	3.0
유동파라핀	7.0
베타글루칸	7.0
카보머	0.1
7,3',4'-트리하이드록시이소플라본	3.0
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드	3.0
스쿠알란	5.0
세테아릴 글루코사이드	1.5
소르비탄 스테아레이트	0.4
폴리솔베이트 60	1.2
트리에탄올아민	0.1

[제형예 3] 마사지 크림

하기 표 4에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 마사지 크림을 제조하였다.

성분	함량(중량%)
정제수	잔량
글리세린	8.0
부틸렌글리콜	4.0
유동파라핀	45.0
베타글루칸	7.0
카보머	0.1
7,3',4'-트리하이드록시이소플라본	1.0
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드	3.0
밀납	4.0
세테아릴 글루코사이드	1.5
세스퀴올레인산 소르비탄	0.9
바세린	3.0
파라핀	1.5

[제형예 4] 팩

하기 표 5에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 팩을 제조하였다.

성분	함량(중량%)
정제수	잔량
글리세린	4.0
폴리비닐알콜	15.0
히알루론산 추출물	5.0
베타글루칸	7.0
알란토인	0.1
7,3',4'-트리하이드록시이소플라본	0.5
노닐페닐에테르	0.4
폴리솔베이트 60	1.2
에탄올	6.0

[제형예 5] 연고

하기 표 6에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 연고를 제조하였다.

성분	함량(중량%)
정제수	잔량
글리세린	8.0
부틸렌글리콜	4.0
유동파라핀	15.0
베타글루칸	7.0
카보머	0.1
7,3',4'-트리하이드록시이소플라본	1.0
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드	3.0
스쿠알란	1.0
세테아릴 글루코사이드	1.5
소르비탄 스테아레이트	0.4
세테아릴 알코올	1.0
밀납	4.0

도 1a와 1b는 PPARα와 PPARγ 리포터 유전자 측정법을 이용하여 본 발명에 의한 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본의 PPARα와 PPARγ 전사활성 효과를 확인한 결과이다.

도 2a 내지 2e는 실시간 역전사 DNA 중합반응을 이용하여 HaCaT 세포에서 본 발명에 의한 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본의 PPARα, PPARγ, TGase1, 필라그린 및 HAS2 mRNAs의 발현량에 미치는 영향을 보여주는 그래프이다.

Claims

7,3',4'-트리하이드록시이소플라본을 유효성분으로 함유하는 보습용 피부 외용제 화장료 조성물로서,

상기 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본이 (i) 퍼옥시좀 증식체 활성화 수용체(peroxisome proliferator-activated receptors, "PPARs")를 활성화시키고, (ii) 필라그린, 트랜스글루타미네이즈 1 및 히알루론산합성효소 2 유전자의 발현을 증가시키는 것을 특징으로 하는, 보습용 피부 외용제 화장료 조성물.
7,3',4'-트리하이드록시이소플라본을 유효성분으로 함유하는 피부 장벽 강화용 피부 외용제 화장료 조성물로서,

상기 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본이 (i) 퍼옥시좀 증식체 활성화 수용체(peroxisome proliferator-activated receptors, "PPARs")를 활성화시키고, (ii) 필라그린, 트랜스글루타미네이즈 1 및 히알루론산합성효소 2 유전자의 발현을 증가시키는 것을 특징으로 하는, 피부 장벽 강화용 피부 외용제 화장료 조성물.
제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 7,3',4'-트리하이드록시이소플라본이 조성물 총 중량에 대하여 0.001∼10 중량%로 함유되는 것임을 특징으로 하는 피부 외용제 화장료 조성물.
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제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 피부 외용제 조성물은 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 아이 크림, 영양 크림, 마사지 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 파우더, 에센스, 팩 또는 연고로 제형화됨을 특징으로 하는 피부 외용제 화장료 조성물.