KR101491159B1 - 저실자 추출물 함유 피부외용제 조성물 - Google Patents

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Abstract

유효성분으로 저실자 추출물을 함유하는 피부외용제 조성물이 개시된다. 상기 피부외용제 조성물은, 피부장벽 강화 및 피부보습 효능이 우수하고, 해독 및 항염증 효능이 인정된다.
저실자, 피부장벽, 수분, 보습, PPAR, 필라그린, 트랜스글루타미네이즈, 히알루론산 합성 효소, 해독작용, 항염증, IL-1β, TNFα, 상처 치유

Description

저실자 추출물 함유 피부외용제 조성물{Compositions for Skin External Application Containing Extracts of Broussonetiae Fructus}
본 발명은 피부외용제 조성물에 관한 것이다.
PPARs(peroxisome proliferator-activated receptors)는 세포 증식/분화의 조절, 염증 매개체들의 조절 등에 있어 중요한 역할을 담당하며, 포도당, 지질, 호르몬의 대사 조절에도 중요한 역할을 하는 것으로 보고된 바 있다. 특히, 피부의 표피에서 각질형성세포 분화를 촉진하고 증식을 억제하며 지질대사를 통한 피부장벽 형성을 촉진하고 염증 반응을 억제하여 피부 기능의 항상성 유지에 중요한 역할을 수행함이 밝혀졌다. 또한, PPARs의 활성은 피부의 상처 치유에 중요한 역할을 하는 것으로 보고되고 있다. 그러나, PPARs에 대한 선행특허들은 주로 활성화제, 즉 신물질에 대한 내용과 검색방법, 또는 당뇨, 비만 등에 대한 용도에 관한 것에 한정되어 있다.
저실자에 관한 기존의 연구결과와 관련하여, 닥나무 추출물 (Paper Mulberry extract (Broussonetia kazinoke))을 포함하는 항노화 화장품 조성물에 대한 것이 일부 알려져 있다. 그러나, 이 경우 저실자가 아닌 닥나무 추출물을 이용하는 점 에서 본원발명과 차이가 있고, 특히, 본원발명에 따른 저실자의 효과인 보습, 피부장벽 강화, 해독 및 항염증 효과에 대한 내용은 개시되어 있지 않다.
본 발명의 일실시예의 목적은, 피부 장벽 강화, 피부 보습, 상처치유, 해독 및 항염증의 용도를 갖는 피부외용제 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명에 따른 피부외용제 조성물은, 유효성분으로 저실자 추출물을 함유하는 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 저실자 추출물 함유 피부외용제 조성물은, 피부장벽 강화 및 피부보습 효능이 우수하고, 해독 및 항염증 효능이 인정된다. 이는, 화장품 및 의약 분야 등에서 폭넓은 활용이 가능하다.
본 발명의 일실시예에 따른 피부외용제 조성물은, 저실자 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 한다.
본 발명자들은 퍼옥시즘 증식체 활성화 수용체(peroxisome proliferator-activated receptors, PPARs)에 대한 생물학적 정보와 PPARs의 피부에서의 효능 및 작용 기작, 특히 피부 표피 기능과의 관련성 등에 대해 살펴보고, 활성을 유도할 수 있는 리간드를 찾던 중, 저실자 추출물이 PPARα를 활성화시키고 그 유전자 발현 조절을 통해 피부 각질 세포의 분화를 유도하여 피부 장벽을 강화함을 발견하였다. 또한, 피부 보습을 담당하는 천연보습 인자(Natural Moisturizing Factor, NMF)의 전구 단백질인 필라그린(filaggrin) 유전자의 발현을 증가시키고, 피부 각화막(cornified envelope) 형성에 결정적인 역할을 수행하는 트랜스글루타미네이즈1(Transglutaminase1, TGase1) 유전자의 발현을 증가시키며, 피부 수분 유지 기능을 수행하는 세포외 기질 성분인 히알루론산의 합성을 담당하는 히알루론산합성효소2(hyaluronic acid synthase2, HAS2) 유전자의 발현을 증가시키는 효능을 확인하였다. 또한, 해독작용에 관여하는 유전자 HMOX1(heme oxygenase 1), PRDX1(peroxiredoxin 1) 및 NQO1(NAD(P)H quinone oxidoreductase 1)의 발현을 증가시키고, 염증인자인 IL-1β(interleukin-1beta), TNFα(tumour necrosis factor alpha)의 발현을 조절함으로써, 해독 및 항염증 기능을 가지는 것을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
일실시예에서, 상기 저실자 추출물은, 세포 배양 상태에서의 PPARs의 전사활성 측정을 위한 리포터 유전자 측정법(PPAR reporter gene assay)을 통해, 저실자 추출물이 PPARs를 활성화시키는 것을 확인하였다. 보다 구체적으로는, 상기 PPARs는 PPAR-α이다. 따라서, 상기 피부외용제 조성물은, PPARs의 유전자 발현 조절을 통해 피부 각질 세포의 분화를 유도함으로써, 피부장벽 강화의 용도를 갖는다.
또 다른 일실시예에서, 상기 추출물은, 피부 보습을 담당하는 천연보습 인자(NMF)의 전구 단백질인 필라그린(filaggrin) 유전자의 발현을 증가시키고, 피부 각화막(cornified envelope) 형성에 결정적인 역할을 수행하는 트랜스글루타미네이즈1(TGase1) 유전자의 발현을 증가시킨다. 또한, 상기 추출물은, 피부 수분 유지 기능을 수행하는 세포외 기질 성분인 히알루론산의 합성을 담당하는 히알루론산합 성효소2(HAS2) 유전자의 발현을 증가시키는 효능을 확인하였다. 따라서, 상기 피부외용제 조성물은 피부보습의 용도를 갖는다.
또 다른 일실시예에서, 상기 추출물은, 해독작용에 관여하는 유전자 HMOX1(heme oxygenase 1), PRDX1(peroxiredoxin 1) 및 NQO1(NAD(P)H quinone oxidoreductase 1)의 발현을 증가시키고, 염증인자인 IL-1β, TNFα의 발현을 조절하는 효능이 인정된다. 따라서, 상기 피부외용제 조성물은, 해독 및 항염증의 용도를 갖는다.
일실시예에서, 상기 저실자 추출물의 함량은, 조성물 전체 중량을 기준으로, 0.1 내지 10 중량%일 수 있다. 상기 저실자 추출물의 함량이 0.1 중량% 미만이면 상기 화합물에 의한 피부 표피 분화 유도 효과, 피부 보습력 부여 효과, 피부 장벽 강화 효과, 해독 및 항염증 효과 등을 효과적으로 얻을 수 없고, 10 중량%를 초과하면 함량 증가에 비해 효과의 증가가 크지 않기 때문에 오히려 비효율적이다.
따라서, 본 발명의 일실시예에 따른 피부외용제 조성물은, 피부 표피 분화 유도, 피부 보습력 부여, 피부 장벽 강화, 해독 및 항염증 효능이 인정된다.
본 발명에 사용되는 저실자는, 상업적으로 구입하거나 통상 사용되는 제조방법에 의하여 제조될 수 있다. 또한, 상기 저실자 추출물의 제조방법은, 특별히 한정되지 않으며, 구체적으로는 하기와 같은 방법으로 제조될 수 있다.
본 발명에서 사용하는 저실자 추출물은, 저실자를 물 또는 유기용매를 이용하여 추출함으로써 수득할 수 있다. 일실시예에서, 상기 유기용매는, 에탄올, 메탄올, 부탄올, 에테르, 에틸아세테이트 및 클로로포름으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상일 수 있으며, 또는 이들 유기용매와 물과의 혼합용매를 사용할 수 있다. 구체적으로는, 80% 에탄올을 이용하여 저실자를 추출할 수 있다.
저실자(楮實子)는, 닥나무(Broussonetia kazinoki)의 열매를 의미하며, 다른 이름은 저실(楮實), 곡실(穀實), 저실자(楮實子), 저도(楮桃), 각수자(角樹子), 구포(構泡) 또는 곡목자(穀木子) 등이 있다. 저실자의 채취는 8~10월에 채취한다. 열매가 빨갛게 성숙하면 따서 햇볕에 말려 불순물을 제거한다. 열매에는 사포닌(0.51%), 비타민 B 및 유지가 함유되어 있고, 종자에는 지방유가 31.7% 함유되어 있는 것으로 알려져 있다. 상기 지방유에는 불감화물 2.67%, 포화 지방산 9.0%, 올레인산 15.0% 및 리놀산 76,0%가 함유되어 있다.
저실자에 대해 기록하고 있는 일부 문헌에 의하면, 저실자는 성질은 차고 맛이 달며 독이 없는 약재로, 음위를 주치하고, 근골(筋骨, 힘줄과 뼈)을 튼튼하게 하며, 양기(陽氣)를 돕고 허로(虛勞)를 보(補)하며 요슬(腰膝, 허리와 무릎)을 따뜻하게 하는가 하면, 안색(顔色)을 좋게 하며 피부와 살을 충실하게 하고 눈을 밝게 한다고 한다. 또한, 이뇨작용과 부종에 효과적이고, 기운을 북돋아 주는 효과가 있다고 한다.
본 발명에 따른 피부외용제 조성물은, 저실자 추출물을 그 유효량으로 포함하는 약제학적 조성물 형태로 제조될 수 있으며, 당업계에서 통상적으로 사용하는 하나 또는 그 이상의 무독성, 약제학적으로 허용 가능한 담체, 보조제 또는 희석액 또는 다른 활성성분을 포함할 수 있다.
또한, 본 발명에 의한 피부외용제 조성물은 약제학적으로 허용 가능한 담체 와 부형제를 이용하여 공지의 방법으로 제제화될 수 있다. 예를 들어, 상기 피부외용제 조성물은 오일 또는 수성매질에서 용액, 현탁액 또는 유화액의 형태로 제형화하거나, 사용하기 전에 무균상태이고 발열물질이 제거된 물에 녹여 사용하는 건조분말의 형태로 제형화될 수 있다.
상기 약제학적 조성물은, 방부제, 안정화제, 수화제 또는 유화 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염 및/또는 완충제 등의 약제학적 보조제 및 기타 치료적으로 유용한 물질을 추가로 함유할 수 있으며, 통상적인 방법에 따라 다양한 경구 또는 비경구 투여 형태로 제형화할 수 있다. 구체적으로는, 상기 조성물은, 투여양식에 따라, 고체, 반고체 또는 액체 투여 형태일 수 있다. 투여 형태의 예는 정제, 캡슐, 츄잉정, 작은 봉지, 과립, 분말, 액체 용액, 현탁액, 분산액, 에멀젼, 시럽, 좌약 등을 포함하지만 이에 한정되지 않는다. 활성성분은 리포솜, 미세입자 또는 마이크로 캡슐 등에 캡슐화 될 수 있다.
경구 투여용 제형으로는 예를 들면, 정제, 환제, 경질 및 연질 캅셀제, 액제, 현탁제, 유화제, 시럽제, 과립제 등이 있는데, 이들 제형은 유효성분 이외에 희석제(예: 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 만니톨, 솔비톨, 셀룰로즈 및 글리신), 활택제(예: 실리카, 탈크, 스테아르산 및 그의 마그네슘 또는 칼슘염 및 폴리에틸렌 글리콜)를 함유하고 있다. 정제는 또한 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 전분 페이스트, 젤라틴, 트라가칸스, 메틸셀룰로즈, 나트륨 카복시메틸셀룰로즈 및 폴리비닐피롤리딘과 같은 결합제를 함유할 수 있으며, 경우에 따라 전분, 한천, 알긴산 또는 그의 나트륨 염과 같은 붕해제, 흡수제, 착색제, 향미제, 및 감미제 등의 약 제학적 첨가제를 함유할 수 있다. 정제는 통상적인 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 의해 제조될 수 있다. 또한, 비경구 투여용 제형의 대표적인 것은 주사용 제형으로 등장성 수용액 또는 현탁액이 바람직하다.
상기 조성물에 있어서, 유효 성분의 투여량 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 일반적으로 투여량은 0.001 mg/kg/일 내지 2000 mg/kg/일, 바람직하게는 0.5 mg/kg/일 내지 2.5 mg/kg/일이다. 그러나, 실제 투여량은 증상의 중증도, 선택된 투여 경로, 대상의 연령, 성별, 체중 및 건강상태 등의 여러 관련 인자에 맞춰 결정되어야 하는 것으로 이해되어야 하며, 따라서 상기 투여량은 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하지 않는다.
본 발명에 따른 피부외용제 조성물을 화장료의 형태로 제형화할 경우, 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 아이 크림, 영양 크림, 마사지 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 파우더, 에센스 또는 팩 등의 형태로 제형화될 수 있으며, 그 제형이 특별히 한정되는 것은 아니다.
이하, 실험예 등을 통해 본 발명을 더욱 상술하지만, 하기의 실험예 등은 본 발명을 예시하기 위한 것이며, 본 발명의 범주가 이들만으로 한정되는 것은 아니다.
[실험예 1] PPARs 활성화 확인
인체 각질형성 세포주(human keratinocyte)인 HaCaT을 10% 우태아 혈청을 포 함하는 DMEM 배지에 계대 배양하였고, 페놀 레드의 에스트로겐에 의한 효과를 제거하기 위해 페놀 레드-프리(phenol red-free) 배지를 사용하였다. 플라스미드는, 일반적인 배양 조건에서도 발현되는 유니버설(universal) 프로모터 뒤에 PPARα, PPARβ/δ, PPARγ 유전자를 지닌 플라스미드와 리간드 결합형의 PPARs가 결합하여 활성화되는 PPARs 반응 요소((PPARs Response Element, PPRE)를 프로모터로 가지고 뒤에 리포터로써 역할을 하는 반디불(firefly) 루시퍼라제(luciferase) 유전자를 지닌 것을 사용하였다. 그리고 참조(reference)로 사용될 유니버설 프로모터에 β-갈락토시다제(β-galactosidase) 유전자가 결합된 플라스미드를 사용하였다.
HaCaT 세포를 5x104의 농도로 24 웰(well)형 플레이트에 분주하고 24 시간 배양한 후, 상기 플라스미드 유전자를 일시적 트랜스펙션(transient transfection)하였다. 24 시간 배양 후, 인산완충용약(PBS)으로 세척한 다음, 저실자 추출물과 양성대조군으로 기존에 알려진 PPARs 리간드(PPARα 리간드인 Wy-14,643, PPARγ 리간드인 troglitazone, TGZ)를 각각 10 ppm, 10 μM, 10 μM로 처리하였다. 음성대조군으로는 시료들을 녹일 때 사용한 DMSO를 처리한 군을 이용하였다. 24 시간 배양 후, PBS로 세척하고 세포를 수확하여 루시퍼라제 활성을 측정하여 도 1과 도 2에 나타내었다.
도 1은 HaCaT 세포주에 PPRE 프로모터 리포터 플라즈미드와 PPARα 발현 플라즈미드를 트랜스펙션 시킨 후, 약물을 처리하고 루시퍼라제 활성을 측정한 결과이다. 도 2는 PPARγ 발현 플라즈미드와 PPRE 프로모터 리포터 플라즈미드를 동시 에 트랜스펙션시킨 후, 약물을 처리하고 루시퍼라제 활성을 측정한 결과이다. 각 그래프의 첫 번째 칼럼은 음성 대조군으로서 DMSO를 처리한군의 루시퍼라제 활성을 나타낸 것이며, 두 번째 칼럼은 양성대조군으로 PPARα 리간드인 Wy-14643(도 1), 및 PPARγ 리간드인 TGZ(troglitazone, 도 2)를 처리한 것이다. 도 1과 도 2의 결과를 통해, 본 발명에 따른 저실자 추출물은 유의한 정도의 PPARα활성을 유도하여 높은 루시퍼라제 활성을 나타냄을 알 수 있다.
[실험예 2] PPARs, TGase 1, fillagrin, HAS2, HMOX1, TNFα 및 IL-1β 유전자 발현의 조절 효과
HaCaT를 10% 우태아혈청(fetal bovine serum)을 포함한 디엠이엠 배지(DMEM, Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium, 집코(Gibco) 1210-0038)에서 배양하였다. 75 ml 플라스크에 1x106 개씩 분주하여, 24 시간 동안 배양하였다. 그 후, 우태아혈청이 포함되지 않은 DMEM 배지를 처리하여 24 시간 동안 배양한 다음, 역시 우태아혈청이 포함되지 않은 배지에 저실자 추출물을 24 시간 동안 처리하였다.
세포를 회수하여 냉각된 인산완충용약(PBS)로 세척하고 트리졸 시약(TRIzol™reagent, 라이프 테크놀로지스, 인크.; Life Technologies, Inc.) 1 ml를 첨가하여 총 RNA를 추출하고 정량적인 역전사 PCR을 수행하였다. PCR을 수행을 위한 PPARα, γ, TGase 1, fillagrin, HAS2, HMOX1, PRDX1, NQO1, TNFα, IL-1β의 프라이머 서열은 하기 표 1과 같다.
총 RNA 4 μg을 50 mM 트리스-HCl(Tris-HCl, pH 8.3), 75 mM KCl, 3 mM MgCl2, 0.1 M DTT, 10 mM dNTP, 40 유닛/μl RNase 저해제가 함유된 역전사 반응 완충액 25 μl에 넣고, 0.5 μg/μl 올리고(dT)16의 프라이머와 200 유닛 수퍼스크립트 II(SuperScript II, 집코비알엘; GibcoBRL)의 역전사 중합효소를 첨가하여 42℃에서 1 시간 반응시켰다. 이후 역전사 반응 용액 2.5 μl를 엠플리택(AmpliTaq) DNA 중합효소(0.04U, 퍼킨 엘멀, 쉘튼, 씨티; Perkin Elmer, Shelton, CT), 50 mM 트리스(pH 8.3), 0.25 mg/ml 우혈청알부민, 3 mM MgCl2, 0.25 mM dNTPs, SYBR 그린 I의 1/50,000 희석액(몰레큘라 프로브, 유진, 오알; Molecular Probes, Eugene, OR)이 함유된 PCR 반응 완충액 50 리터에 섞어 주었다. 상기 반응용액에 10 μM의 프라이머를 첨가하여 94℃에서 30 초, 53℃에서 30 초, 72℃에서 1 분인 사이클을 30 사이클을 수행하였다.
상대적인 mRNA 레벨은 아이사이클러(ICycler) 소프트웨어를 이용하여 SYBR 그린 I 형광 변화를 측정함으로써 분석하여 도 3 내지 도 9에 나타내었다. 양성 대조군으로는 PPARα 리간드인 Wy-14643 또는 PPARγ의 리간드인 TGZ를 사용하였으며, 음성대조군인 DMSO 처리군의 값이 1인 때를 기준으로 상대적인 mRNA 레벨을 나타내었다.
유전자/NCBI Gene ID 프라이머 서열 서열
번호		 증폭산물크기 (bp) PCR 반응온도(℃)
변성 어닐링 확장
β-actin 5'-ATC CCA TCA CCA TCT TCC AG-3' 1 579 94 58 72
5'-CCT GCT TCA CCA CCT TCT TG -3' 2
PPARα 5'-ATG TCC GAA GCA AAC ATC AC -3' 3 401 94 58 72
5'-TAA TGT CCA GGA AGT AGG TG -3' 4
PPARγ 5'-TGC AGA GTTCCC CAA CTG GTA CAT C -3' 5 387 94 58 72
5'-GTG CTG CCT AAT GTC CCC TTG AAT C -3' 6
TGase1 5'-CCT GTA GCC CAC GTC GTA GC -3' 7 374 94 58 72
5'-TTG ACC TCA GCG CTG AGT TG -3' 8
Fillagrin 5'-ACT CGG GGA TAA ATA GTT CCA A-3' 9 357 94 60 70
5'-CCT TAC ATA TAT ATT CCC CAG CAT-3' 10
HAS2 5'-TGA AGG ACC CTG CGA ACT TTC-3' 11 185 95 61 70
5'-GAA CAC TCG CTC AAA CCA GC-3' 12
HMOX1 5'-CAG TGC CAC CAA GTT CAA GC-3' 13 112 95 62 70
5'- GTT GAG CAG GAA CGC AGT CTT -3' 14
NQO1 5'- TGA AGG ACC CTG CGA ACT TTC-3' 15 185 95 61 70
5'- GAA CAC TCG CTC AAA CCA GC-3' 16
PRDX1 5'- CGG AGA TCA TTG CTT TCA GTG A-3' 17 113 95 61 70
5'- AGG TGT ATT GAC CCA TGC TAG AT-3' 18
TNFα 5'-CCT GTA GCC CAC GTC GTA GC -3' 19 374 94 58 72
5'-TTG ACC TCA GCG CTG AGT TG -3' 20
IL-1β 5'-TGC AGA GTTCCC CAA CTG GTA CAT C-3' 21 387 94 58 72
5'-GTG CTG CCT AAT GTC CCC TTG AAT C-3' 22
도 3 내지 9의 결과를 통해, 본 발명에 따른 저실자 추출물은, PPARs(peroxisome proliferator-activated receptors) 전사활성을 유도하거나 그 발현을 증가시킴으로써, 피부 각질 세포의 분화를 유도하여 피부 장벽을 강화하고 피부보습을 증가시키는 효과를 보였다. 또한, 피부 표면에서 보습을 담당하는 천연보습 인자(Natural Moisturizing Factor, NMF)의 전구 단백질인 필라그린(filaggrin) 유전자의 발현을 증가시키고, 피부 각화막(cornified envelope) 형성에 결정적인 역할을 수행하는 트랜스글루타미네이즈1(Transglutaminase1, TGase1) 유전자의 발현을 증가시키는 효과를 나타냈다. 이외에도, 피부 수분 유지 기능을 수행하는 세포외 기질 성분인 히알루론산의 합성을 담당하는 히알루론산합성효소2(hyaluronic acid synthase2, HAS2) 유전자의 발현을 증가시키는 것으로 확인되었다.
또한, 해독작용에 관여하는 유전자 HMOX1(heme oxygenase 1), PRDX1(peroxiredoxin 1) 및 NQO1(NAD(P)H quinone oxidoreductase 1)의 발현을 증가시키고, 염증인자인 IL-1β(interleukin-1beta), TNFα(tumour necrosis factor alpha)의 발현을 조절하였다. 이를 통해, 본 발명에 따른 조성물을 유효성분으로 함유하는 보습제, 피부장벽 강화제, 해독제 및 항염제를 제공할 수 있다.
[실험예 3] 육안적 형태를 통한 상처 치유 활성
인간의 각질형성 세포인 HaCaT 세포는 한국 세포주은행(Korean Cell Line Bank;Seoul, Korea)에서 분양받아 사용하였다. HaCaT 세포를 10%(v/v) FBS, 페니실린 100 U/ml 및 스트렙토마이신 100 ㎍/ml를 포함하는 DMEM 배지에 주입하고 37℃, 5% CO2 공급조건을 갖춘 동물세포배양기에서 배양하였다. 공(Well) 당 1.5x106 농도로 준비된 HaCaT 세포를 24 시간 배양하여 세포 단일층을 형성시킨 후, HaCaT 세포 단일층을 p200 피펫 팁으로 ‘긁힘-손상’을 유도하였다. 긁힘-손상된 세포층을 저실자 추출물 1 ppm, 양성대조군 에스트로젠 10 nM 농도로 처리한 배양 배지에서 24 시간 배양한 후 긁힘 상처가 회복되는 정도를 확인하였으며, 그 결과를 도 10에 나타내었다. 음성 대조군으로는 화합물을 녹이는데 사용한 DMSO를 동일량 처리하였다.
도 10의 결과에서, 음성 대조군이 처리된 세포의 ‘긁힘-손상’은 24 시간 후에 상대적으로 치유되지 않은 상태로 남아있는데 반해, 저실자 추출물이 처리된 세포에서는 상처 가장자리의 세포 증식과 이동으로 ‘긁힘-손상’이 치유되어 24 시간 후 긁힌 면적이 감소되었다.
[제형예 1] 영양화장수
하기 표 2에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양화장수를 제조하였다.
성분 함량(중량 %)
정제수 잔량
글리세린 8.0
부틸렌글리콜 4.0
히알루론산 추출물 5.0
베타글루칸 7.0
카보머 0.1
저실자 추출물 0.1
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 8.0
스쿠알란 5.0
세테아릴 글루코사이드 1.5
소르비탄 스테아레이트 0.4
세테아릴 알코올 1.0
트리에탄올아민 0.1
[제형예 2] 영양크림
하기 표 3에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양크림을 제조하였다.
성분 함량(중량%)
정제수 잔량
글리세린 3.0
부틸렌글리콜 3.0
유동파라핀 7.0
베타글루칸 7.0
카보머 0.1
저실자 추출물 3.0
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 3.0
스쿠알란 5.0
세테아릴 글루코사이드 1.5
소르비탄 스테아레이트 0.4
폴리솔베이트 60 1.2
트리에탄올아민 0.1
[제형예 3] 마사지 크림
하기 표 4에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 마사지 크림을 제조하였다.
성분 함량(중량%)
정제수 잔량
글리세린 8.0
부틸렌글리콜 4.0
유동파라핀 45.0
베타글루칸 7.0
카보머 0.1
저실자 추출물, 1.0
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 3.0
밀납 4.0
세테아릴 글루코사이드 1.5
세스퀴올레인산 소르비탄 0.9
바세린 3.0
파라핀 1.5
[제형예 4] 팩
하기 표 5에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 팩을 제조하였다.
성분 함량(중량%)
정제수 잔량
글리세린 4.0
폴리비닐알콜 15.0
히알루론산 추출물 5.0
베타글루칸 7.0
알란토인 0.1
저실자 추출물 0.5
노닐페닐에테르 0.4
폴리솔베이트 60 1.2
에탄올 6.0
[제형예 5] 피부외용제 중 연고
하기 표 6에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 연고를 제조하였다.
성분 함량(중량%)
정제수 잔량
글리세린 8.0
부틸렌글리콜 4.0
유동파라핀 15.0
베타글루칸 7.0
카보머 0.1
저실자 추출물 1.0
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 3.0
스쿠알란 1.0
세테아릴 글루코사이드 1.5
소르비탄 스테아레이트 0.4
세테아릴 알코올 1.0
밀납 4.0
도 1과 2는, 각각, PPARα와 PPARγ 리포터 유전자 측정법을 이용하여, 일실시예에 따른 저실자 추출물의 PPARα와 PPARγ 전사활성을 측정한 결과이다;
도 3 내지 7는, 실시간 역전사 DNA 중합반응을 이용하여, HaCaT 세포에서 일실시예에 의한 저실자 추출물이 PPARα, PPARγ, TGase1, fillagrin 및 HAS2 mRNAs의 발현량에 미치는 영향을 측정한 그래프이다;
도 8은 해독 유전자인 HMOX1의 발현량에 미치는 저실자 추출물의 영향을 보여주는 그래프이다;
도 9는 LPS에 의해 유도된 TNFα 및 IL-1β mRNAs의 발현량에 미치는 저실자 추출물의 영향을 보여주는 그래프이다;
도 10은 in vitro 상처 치유 모델에서 상처 치유를 촉진시키는 저실자의 효능을 나타낸 것이다.
<110> Kyung-Bae Suh; Amorepacific Corporation <120> Compositions for Skin External Application Containing Extracts of Broussonetiae Fructus <130> 08P687IND <160> 22 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 1 atcccatcac catcttccag 20 <210> 2 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 2 cctgcttcac caccttcttg 20 <210> 3 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 3 atgtccgaag caaacatcac 20 <210> 4 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 4 taatgtccag gaagtaggtg 20 <210> 5 <211> 25 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 5 tgcagagttc cccaactggt acatc 25 <210> 6 <211> 25 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 6 gtgctgccta atgtcccctt gaatc 25 <210> 7 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 7 cctgtagccc acgtcgtagc 20 <210> 8 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 8 ttgacctcag cgctgagttg 20 <210> 9 <211> 22 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 9 actcggggat aaatagttcc aa 22 <210> 10 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 10 ccttacatat atattcccca gcat 24 <210> 11 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 11 tgaaggaccc tgcgaacttt c 21 <210> 12 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 12 gaacactcgc tcaaaccagc 20 <210> 13 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 13 cagtgccacc aagttcaagc 20 <210> 14 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 14 gttgagcagg aacgcagtct t 21 <210> 15 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 15 tgaaggaccc tgcgaacttt c 21 <210> 16 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 16 gaacactcgc tcaaaccagc 20 <210> 17 <211> 22 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 17 cggagatcat tgctttcagt ga 22 <210> 18 <211> 23 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 18 aggtgtattg acccatgcta gat 23 <210> 19 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 19 cctgtagccc acgtcgtagc 20 <210> 20 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 20 ttgacctcag cgctgagttg 20 <210> 21 <211> 25 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 21 tgcagagttc cccaactggt acatc 25 <210> 22 <211> 25 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 22 gtgctgccta atgtcccctt gaatc 25

Claims (9)

  1. 유효성분으로 저실자 추출물을 함유하는 피부 장벽 강화용 화장료 조성물.
  2. 제 1 항에 있어서,
    상기 저실자 추출물은, 퍼옥시즘 증식체 활성화 수용체(peroxisome proliferator-activated receptors, PPARs), 필라그린(fillagrin), 트랜스글루타미네이즈1(Transglutaminase1, TGase1) 및 히알루론산합성효소2(hyaluronic acid synthase2, HAS2)로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 유전자 발현을 증가시키는 것을 특징으로 하는 피부 장벽 강화용 화장료 조성물.
  3. 제 1 항에 있어서,
    상기 저실자 추출물은, HMOX1(heme oxygenase 1), PRDX1(peroxiredoxin 1) 및 NQO1(NAD(P)H quinone oxidoreductase 1) 유전자의 발현을 증가시키고, TNFα(tumour necrosis factor alpha) 및 IL-1β(interleukin-1beta) 유전자의 발현을 조절하는 것을 특징으로 하는 피부 장벽 강화용 화장료 조성물.
  4. 제 2 항에 있어서,
    상기 PPARs는 PPAR-α인 것을 특징으로 하는 피부 장벽 강화용 화장료 조성물.
  5. 제 1 항에 있어서,
    상기 저실자 추출물의 함량은, 조성물 전체 중량을 기준으로, 0.1 내지 10 중량%인 것을 특징으로 하는 피부 장벽 강화용 화장료 조성물.
  6. 삭제
  7. 삭제
  8. 삭제
  9. 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 조성물은, 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 아이 크림, 영양 크림, 마사지 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 파우더, 에센스, 팩 또는 연고의 형태로 제형화된 것을 특징으로 하는 피부 장벽 강화용 화장료 조성물.
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