KR101519192B1 - 칼시토닌 유전자-관련된 펩티드에 대해 지시된 길항제 항체의 투여에 의한 내장 통증의 치료 방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 항-CGRP 길항제 항체를 투여함으로써 기능성 장 장애, 염증성 장 질환 및 간질성 방광염과 연관된 통증을 포함하는 내장 통증을 예방하거나 또는 치료하는 방법을 특징으로 갖는다.

Description

칼시토닌 유전자-관련된 펩티드에 대해 지시된 길항제 항체의 투여에 의한 내장 통증의 치료 방법 {METHODS FOR TREATING VISCERAL PAIN BY ADMINISTERING ANTAGONIST ANTIBODIES DIRECTED AGAINST CALCITONIN GENE-RELATED PEPTIDE}

관련된 출원

본원은 2009년 8월 28일 출원된 미국 가 특허 출원 일련 번호 61/237,901의 우선권 이점을 주장하며, 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.

서열 목록에 대한 참조

본원은 전자 출원 되며, .txt 포맷의 전자 제출된 서열 목록을 포함한다. .txt 파일은 2010년 8월 11일에 만들어지고 28 KB의 크기를 갖는 "PC33920A_SeqList.txt"의 제목의 서열 목록을 함유한다. 이 .txt 파일에 함유된 서열 목록은 명세서의 일부이며, 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.

본 발명의 분야

본 발명은 항-CGRP 항체를 사용하여 내장 통증 및/또는 내장 통증의 증상을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이고, 내장 통증 및/또는 내장 통증의 증상을 예방하고/하거나 치료하는데 사용하기 위한 항-CGRP 항체에 관한 것이다.

본 발명의 배경

내장 통증은 병원에의 환자 방문의 주된 원인이지만, 내장 통증에 대한 효과적인 치료는 제한되어 있다. 내장 통증은 임상적으로 관리하기가 어려우며, 종종 아편제의 사용을 요구한다. 비록 널리 사용되지만, 아편제의 심한 선량-제한적 부작용은 종종 감소된 효능을 야기한다. 또한, 아편제는 많은 경우에 금지되고, 삶의 질을 저하시키는 남용 및 물리적 의존성의 위험을 수반하고, 변비 및 다른 원하지않는 부작용을 유도한다.

내장 통증은 몸의 내부 기관을 포함하는 내장과 연관된 통증이다. 이들 기관은 예를 들면, 심장, 폐, 생식 기관, 방광, 요관, 소화 기관, 간, 췌장, 비장 및 신장을 포함한다. 내장 통증이 존재할 수 있는 다양한 상태에는, 예를 들면 췌장염, 분만, 장폐쇄증과 연관된 복부 수술, 방광염, 월경 주기 또는 월경곤란증이 있다. 마찬가지로, 신장 통증, 상복부 통증, 흉막 통증, 및 통증성 담관 산통, 충수염 통증은 모두 내장 통증으로 고려될 수 있다. 흉골하 통증 또는 초기 심근경색증으로부터의 압력은 또한 내장성이다. 위, 십이지장 또는 결장의 질환은 내장 통증을 야기할 수 있다. 내장 통증을 야기하는 흔히 접하는 위장 (GI) 장애는 기능성 장 장애 (FBD) 및 염증성 장 질환 (IBD)을 포함한다. 이들 GI 장애는 FBD에 대해 위-식도 역류, 소화불량, 과민성 장 증후군 (IBS) 및 기능성 복부 통증 증후군 (FAPS), 및 IBD에 대해, 크론병 (Crohn's disease), 회장염 및 궤양성 대장염을 비롯하여 현재 적당하게만 조절되는 광범위한 질환 상태를 포함하며, 이들 모두는 규칙적으로 내장 통증을 생성한다.

IBS는 전세계의 10-20%의 성인 및 청년에 영향을 준다 (문헌 [Longstreth et al., 2006, Gastroenterology 130(5):1480-91]). 이들 환자가 의학적 치료를 찾는 주된 이유는 높아진 내장 민감도로 인한 것이라고 여겨지는 만성 내장 통증 때문이다 (문헌 [Aziz, 2006, Gastroenterology 131(2):661-4]). IBS가 있는 환자는 결장직장 팽창에 대해 더 낮은 내장 감각 역치를 갖는 것으로 나타났고, 이는 내장 통증 증상에 매우 연관성 있는 것으로 나타났다 (문헌 [Delafoy et al, 2006, Gut 55(7):940-5]). 래트에서의 트리니트로벤젠 술폰산 (TNBS) 유도된 대장염 후의 결장직장 팽창은 내장 과민성의 메카니즘을 탐구하기 위해 수많은 연구자에 의해 사용되어 온 동물 모델이다 (문헌 [Gay et al, 2006, Neuroimmunomodulation 23;13(2):114-121; Delafoy et al, 2006; Adam et al., 2006, Pain 123(1-2):179-86)].

간질성 방광염 (IC)은 요절박, 빈뇨 및 만성 골반 통증에 의해 병원에서 특징짓는 통증성 방광 증후군이다. 임상 연구는 간질성 방광염이 내장 감각 구심 신경 과민성에 관련된다는 것을 나타내며, 여기서 방광 충만의 감각이 방광의 점막하층에서의 신경 밀도의 증가 및 신경원성 염증의 증거를 나타내는 환자에서 보다 더 낮게 발생하며, 추가로 정상 부피 및 방광 충만은 통증이 있는 것으로 여겨진다. IC의 조직병리학은 내장 구심의 관여를 제시한다.

내장 통증은 예를 들면, 염증, 팽창, 또는 증가된 압력에 대응하여 생성될 수 있다. 이는 항상 내장 손상에 의해 야기되지는 않는다. 또한, 내장 통증은 확산되고, 다른 위치에 관련있을 수 있고; 다른 자율적 및 운동 반사 (예를 들면, 구역, 신산통으로 인한 하배부 근육 긴장)에 연관될 수 있다 (문헌 [Lancet 1999, 353, 2145-48]).

CGRP (칼시토닌 유전자-관련된 펩티드)는 칼시토닌, 아드레노메둘린 및 아밀린을 포함하는 펩티드의 족에 속하는 37개 아미노산 신경펩티드이다. 인간에서, 2개 형태의 CGRP (α-CGRP 및 β-CGRP)가 존재하며, 유사한 활성을 갖는다. 이들은 3개 아미노산에 의해 다르고, 차별된 분포를 나타낸다. 2개 이상의 CGRP 수용체 아형은 또한 차별된 활성을 설명한다. CGRP는 중추신경계에서의 신경전달물질이고, 주변부에서 강력한 혈관확장제인 것으로 나타났으며, 여기서 CGRP-함유 뉴론 절차가 혈관과 밀접하게 연관된다. CGRP-매개 혈관확장은 또한, 혈장의 혈관외유출 및 미세혈관의 혈관확장을 야기하는 사건의 캐스케이드의 일부로서 신경원성 염증에 연관되며, 편두통에서 존재한다.

척수 투여된 소분자 선택적인 CGRP 길항제는 신경병 및 통각 통증 상태의 치료에 유용한 것으로 나타났으며 (문헌 [Adwanikar et al, Pain, 2007, 132(1-2):53-66]), 이는 척수에서의 내인성 CGRP 신호전달의 제거는 항통각 효과를 갖는 것을 제시한다. CGRP 수용체 길항제인 CGRP 8-37을 전신적으로 주사함으로써 CGRP 신호전달을 차단하는 것은 내장 과민성 (VH)을 반전시키는데 효과적이라는 보고가 확립되었다 (문헌 [Delafoy et al., 2006; Plourde et al., 1997, Am J Physiol. 273(1 Pt 1):G191-6]; [Julia and Bueno, 1997, Am J Physiol. 272(1 Pt 1):G141-6]). 그러나, CGRP 8-37은 생체내에서 매우 짧은 반감기를 가지며, 따라서 유용한 치료제가 되지 못할 것이다. 따라서, 내장 통증의 치료 및 예방을 위한 신규한 치료제를 발견할 중요한 의학적 필요성이 있다.

본원에 걸쳐 다양한 간행물 (특허 및 특허 출원을 포함함)이 인용된다. 이들 간행물의 개시 전문이 본원에 참조로 포함된다.

본 발명의 요약

본 발명은 내장 통증을 앓고 있거나 또는 그에 대한 위험이 있는 개체에게 치료 유효량의 항-CGRP 길항제 항체를 투여하는 것을 포함하는, 개체에서 내장 통증 및/또는 내장 통증의 증상을 예방하고/하거나 치료하는 방법을 제공한다.

일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 말초 투여된다. 다른 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 경구 투여, 설하 투여, 흡입을 통한 투여, 경피 투여, 피하 투여, 정맥내 투여, 동맥내 투여, 관절내 투여, 관절주위 투여, 국소 투여 및/또는 근육내 투여된다.

일부 실시양태에서, 내장 통증은 기능성 장 장애 (FBD)와 연관된다. FBD는 위-식도 역류, 소화불량, 과민성 장 증후군 (IBS) 및 기능성 복부 통증 증후군 (FAPS)일 수 있다. 일부 실시양태에서, 내장 통증은 염증성 장 질환 (IBD)과 연관된다. IBD는 크론병, 회장염 또는 궤양성 대장염일 수 있다. 일부 실시양태에서, 내장 통증은 신산통, 월경곤란증, 방광염, 월경 주기, 분만, 폐경기, 전립선염 또는 췌장염과 연관된다. 일부 실시양태에서, 내장 통증은 간질성 방광염 (IC)과 연관된다.

일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 CGRP에 결합하거나; CGRP가 그의 수용체에 결합하는 것을 차단하거나; CGRP 수용체 활성화를 차단 또는 감소시키거나; CGRP 생물학적 활성을 억제, 차단, 저하 또는 감소시키거나; CGRP의 제거를 증가시키고/시키거나 CGRP 합성, 생성 또는 방출을 억제한다.

일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 인간 항체 또는 인간화 항체이다. 일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 모노클로날 항체이다. 일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 50 nM 이하의 K_D (37℃에서 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정된 바와 같고/같거나 생체내에서 7일 이상의 반감기를 갖음)로 CGRP에 결합할 수 있다.

일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 CGRP의 C-말단 영역에 특이적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 서열 GSKAF (서열 39)에 의해 정의된 에피토프를 특이적으로 인식한다. 일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 아미노산 서열에서 서열 1 또는 19에 적어도 90% 동일한 VH 도메인을 포함한다.

일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 아미노산 서열에서 서열 2 또는 20에 적어도 90% 동일한 VL 도메인을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 아미노산 서열에서 서열 1 또는 19에 적어도 90% 동일한 VH 도메인을 추가로 포함한다. 다른 실시양태에서, 항-CGRP 항체는 (a) 서열 3, 21, 33, 34, 36 또는 37에 제시된 바와 같은 CDR H1; (b) 서열 4, 22, 35 또는 38에 제시된 바와 같은 CDR H2; (c) 서열 5 또는 23에 제시된 바와 같은 CDR H3; (d) 서열 6 또는 24에 제시된 바와 같은 CDR L1; (e) 서열 7 또는 25에 제시된 바와 같은 CDR L2; (f) 서열 8 또는 26에 제시된 바와 같은 CDR L3; 및 (g) L1, L2 및 H2의 변이체로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 CDR을 포함한다.

일부 실시양태에서, 항-CGRP 항체는 C-말단 라이신이 있거나 또는 없는, 서열 11에 나타낸 항체 G1 중쇄 전체 항체 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-CGRP 항체는 서열 12에 나타낸 항체 G1 경쇄 전체 항체 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-CGRP 항체는 C-말단 라이신이 있거나 또는 없는, 서열 11에 나타낸 항체 G1 중쇄 전체 항체 아미노산 서열; 및 서열 12에 나타낸 항체 G1 경쇄 전체 항체 아미노산 서열을 포함한다.

일부 실시양태에서, 항-CGRP 항체는 C-말단 라이신이 있거나 또는 없는, 서열 29에 나타낸 항체 G2 중쇄 전체 항체 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-CGRP 항체는 서열 30에 나타낸 항체 G2 경쇄 전체 항체 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-CGRP 항체는 서열 29에 나타낸 항체 G2 중쇄 전체 항체 아미노산 서열; 및 서열 30에 나타낸 항체 G2 경쇄 전체 항체 아미노산 서열을 포함한다.

일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 아미노산 서열에서 서열 1에 적어도 90% 동일한 VH 도메인 및 아미노산 서열에서 서열 2에 적어도 90% 동일한 VL 도메인을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 ATCC 기탁 번호 (Accession Nos.) PTA-6867을 갖는 발현 벡터에 의해 생성된 중쇄를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 ATCC 기탁 번호 PTA-6866을 갖는 발현 벡터에 의해 생성된 경쇄를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 ATCC 기탁 번호 PTA-6867 및 PTA-6866을 갖는 발현 벡터에 의해 생성된다.

일부 실시양태에서, 항-CGRP는 1개월에 1회, 2회, 3회 또는 4회 사이로 피하 주사 또는 정맥내 주사에 의해 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 5 내지 100 mg/ml 사이의 농도에서 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 체중 1 kg 당 1 내지 100 mg 사이의 농도에서 투여된다.

일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 운동 협응 또는 주의력의 CNS 장애를 생성하지 않는다. 일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 중앙 투여, 척수 투여 또는 경막내 투여되지 않는다. 일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 중앙, 척수 또는 경막내로 침투하는 분자가 아니다.

일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 하나 이상의 추가의 약리학적 활성 화합물과 조합되어 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여된다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 추가의 약리학적 활성 화합물은 아편유사 진통제, 예를 들면 모르핀, 헤로인, 히드로모르폰, 옥시모르폰, 레보르파놀, 레발로판, 메타돈, 메피리딘, 펜타닐, 코카인, 코데인, 디히드로코데인, 옥시코돈, 히드로코돈, 프로폭시펜, 날메펜, 날로르핀, 날옥손, 날트렉손, 부프레노르핀, 부토르파놀, 날부핀 또는 펜타조신; 비스테로이드성 항염증성 약물 (NSAID), 예를 들면 아스피린, 디클로페낙, 디플루시날, 에토돌락, 펜부펜, 페노프로펜, 플루페니살, 플루르비프로펜, 이부프로펜, 인도메타신, 케토프로펜, 케토롤락, 메클로페남산, 메페남산, 나부메톤, 나프록센, 옥사프로진, 페닐부타존, 피록시캄, 술린닥, 톨메틴 또는 조메피락 또는 이들의 제약상 허용가능한 염; 바르비투르염 진정제, 예를 들면 아모바르비탈, 아프로바르비탈, 부타바르비탈, 부타비탈, 메포바르비탈, 메타르비탈, 메토헥시탈, 펜토바르비탈, 페노바르티탈, 세코바르비탈, 탈부탈, 테아밀랄 또는 티오펜탈 또는 이들의 제약상 허용가능한 염; 진정제 작용을 갖는 벤조디아제핀, 예를 들면 클로르디아제폭시드, 클로라제페이트, 디아제팜, 플루라제팜, 로라제팜, 옥사제팜, 테마제팜 또는 트리아졸람 또는 이들의 제약상 허용가능한 염; 진정제 작용을 갖는 H1 길항제, 예를 들면 디펜히드라민, 피릴라민, 프로메타진, 클로르페니라민 또는 클로를시클리진 또는 이들의 제약상 허용가능한 염; 진정제, 예를 들면 글루테티미드, 메프로바메이트, 메타쿠알론 또는 디클로랄페나존 또는 이들의 제약상 허용가능한 염; 근이완제, 예를 들면 바클로펜, 카리소프로돌, 클로르족사존, 시클로벤자프린, 메토카르바몰 또는 오르프레나딘 또는 이들의 제약상 허용가능한 염; NMDA 수용체 길항제, 예를 들면 덱스트로메토르판 ((+)-3-히드록시-N-메틸모르피난) 또는 그의 대사물 덱스트로르판 ((+)-3-히드록시-N-메틸모르피난), 케타민, 메만틴, 피롤로퀴놀린 퀴논 또는 시스-4-(포스포노메틸)-2-피페리딘카르복실산 또는 이들의 제약상 허용가능한 염; 알파-아드레날린성약, 예를 들면 독사조신, 탐술로신, 클로니딘 또는 4-아미노-6,7-디메톡시-2-(5-메탄술폰아미도-1,2,3,4-테트라히드로이소퀴놀-2-일)-5-(2-피리딜) 퀴나졸린; 트리시클릭 항우울제, 예를 들면 데시프라민, 이미프라민, 아미트립틸린 또는 노르트립틸린; 항경련제, 예를 들면 카르밤아제핀 또는 발프로에이트; 타치키닌 (NK) 길항제, 특히 NK-3, NK-2 또는 NK-1 길항제, 예를 들면 (αR,9R)-7-[3,5-비스(트리플루오로메틸)벤질]-8,9,10,11-테트라히드로-9-메틸-5-(4-메틸페닐)-7H-[1,4]디아조시노[2,1-g][1,7]나프트리딘-6-13-디온 (TAK-637), 5-[[(2R,3S)-2-[(1R)-1-[3,5-비스(트리플루오로메틸)페닐]에톡시-3-(4-플루오로페닐)-4-모르폴리닐]메틸]-1,2-디히드로-3H-1,2,4-트리아졸-3-온 (MK-869), 라네피탄트, 다피탄트 또는 3-[[2-메톡시-5-(트리플루오로메톡시)페닐]메틸아미노]-2-페닐-피페리딘 (2S,3S); 무스카린 길항제, 예를 들면 옥시부틴, 톨테로딘, 프로피베린, 트롭시움 클로라이드 또는 다리페나신; COX-2 억제제, 예를 들면 셀레콕지브, 로페콕지브 또는 발데콕지브; 비-선택적인 COX 억제제 (바람직하게는 GI를 보호함), 예를 들면 니트로플루르비프로펜 (HCT-1026); 석탄-타르 진통제, 특히 파라세타몰; 신경이완제, 예를 들면 드로페리돌; 바닐로이드 수용체 효능제 (예를 들면, 레신페라톡신) 또는 길항제 (예를 들면, 캅사제핀); 베타-아드레날린성약, 예를 들면 프로파놀롤; 국소 마취제, 예를 들면 멕실렌틴; 코르티코스테로이드, 예를 들면 덱사메타손; 세로토닌 수용체 효능제 또는 길항제; 콜린성 (니코틴) 진통제; 트라마돌(등록상표); PDEV 억제제, 예를 들면 실데나필, 바르데나필 또는 탈라다필; 알파-2-델타 리간드, 예를 들면 가바펜틴 또는 프레가발린; 및 카나비노이드로부터 선택된다.

본 발명은 추가로 내장 통증 및/또는 내장 통증의 증상의 예방 및/또는 치료용 의약의 제조를 위한 항-CGRP 길항제 항체의 용도를 제공한다. 일부 실시양태에서, 의약은 말초 투여되도록 제조된다. 일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 투여시 말초적 활성을 갖는다.

본 발명은 추가로 항-CGRP 길항제 항체 및 제약상 허용가능한 담체를 포함하는, 개체에서 내장 통증 및/또는 내장 통증의 증상을 치료하고/하거나 예방하기 위한 제약 조성물을 제공한다. 일부 실시양태에서, 조성물은 말초 투여되도록 제조된다.

본 발명은 추가로 개체에서 내장 통증 및/또는 내장 통증의 증상을 치료하고/하거나 예방하기 위한 제약 조성물, 및 내장 통증 및/또는 내장 통증의 증상을 치료하고/하거나 예방하기 위해 개체에게 치료 유효량의 상기 제약 조성물을 말초 투여하기 위한 설명서를 포함하는 키트를 제공한다.

도면의 간단한 설명

도 1a 및 1b는 내장 통증 모델을 나타낸다. (A) 항체 4901 ("4901") 또는 PBS 대조군 ("비히클")을 복부 개복술 후 트리니트로벤젠 술폰산 (TNBS)으로 주사하여 동물에게 정맥내 투여하였다. 동물에서의 내장 통증 역치를 풍선 팽창을 사용하여 시험하였다. 통증 역치는 mm Hg로 나타낸다 (y-축). 모의 (sham)는 개복술 후 TNBS 대신 대조군 (30% 에탄올) 용액으로 주사된 동물을 나타낸다. (B) CGRP 수용체 길항제 CGRP 8-37 또는 PBS 대조군 ("비히클")을 복부 개복술 후 TNBS-처리된 동물에게 정맥내 투여하였다. (A)에서와 같이, 동물에서의 내장 통증 역치를 풍선 팽창을 사용하여 시험하였고, 통증 역치는 mm Hg로 나타낸다 (y-축).

도 2는 내장 통증 모델을 나타낸다. 항체 4901 ("4901") 또는 PBS 대조군 ("비히클")을 동물에게 정맥내 투여하였다. 수축의 횟수 (y-축)로서 측정된 방광 운동성을 투르펜틴-유도된 방광 염증 후 1시간, 3시간 및 5시간에서 시험하였다.

본 발명의 상세한 설명

본원에 개시된 본 발명은 개체에게 치료 유효량의 항-CGRP 길항제 항체를 투여함으로써 개체에서 내장 통증을 치료하고/하거나 예방하는 방법을 제공한다.

본원에 개시된 본 발명은 또한 그 전문이 본원에 참조로 포함되는 WO2007/054809의 표 6 (하기 표 3)에 나타낸 G1 또는 그의 변이체로부터 유도된 항-CGRP 길항제 항체 및 폴리펩티드를 제공한다. 본 발명은 또한 이들 항체 및 폴리펩티드의 제조 및 사용 방법을 제공한다.
하기 표 3은, 래트 α-CGRP 및 인간 α-CGRP 둘다에 대한 G1 및 항체 G1 변이체의 친화도를 보여준다. 표 3에 나타낸 변이체의 모든 아미노산 치환은 G1의 서열에 대하여 기재되었다. Fab 단편의 결합 친화도는 SA 칩에서 CGRP에 이것들을 유동시켜서 비아코어(Biacore)로 측정하였다.

[표 3] 항체 G1 및 G1의 변이체의 아미노산 서열 및 37℃에서 비아코어로 측정된 이것들의 결합 친화도 데이터

일반적인 기술

본 발명의 실시는, 달리 언급하지 않는 한, 당업계의 기술에 속하는 분자 생물학 (재조합 기술을 포함함), 미생물학, 세포 생물학, 생화학 및 면역학의 통상적인 기술을 사용할 것이다. 그러한 기술은 문헌, 예를 들면 (문헌 [Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition (Sambrook et al., 1989) Cold Spring Harbor Press]; [Oligonucleotide Synthesis (M.J. Gait, ed., 1984)]; [Methods in Molecular Biology, Humana Press]; [Cell Biology: A Laboratory Notebook (J.E. Cellis, ed., 1998) Academic Press; Animal Cell Culture (R.I. Freshney, ed., 1987)]; [Introduction to Cell and Tissue Culture (J.P. Mather and P.E. Roberts, 1998) Plenum Press]; [Cell and Tissue Culture: Laboratory Procedures (A. Doyle, J.B. Griffiths, and D.G. Newell, eds., 1993-1998) J. Wiley and Sons]; [Methods in Enzymology (Academic Press, Inc.)]; [Handbook of Experimental Immunology (D.M. Weir and CC. Blackwell, eds.)]; [Gene Transfer Vectors for Mammalian Cells (J.M. Miller and M.P. Calos, eds., 1987)]; [Current Protocols in Molecular Biology (F.M. Ausubel et al., eds., 1987)]; [PCR: The Polymerase Chain Reaction, (Mullis et al., eds., 1994)]; [Current Protocols in Immunology (J.E. Coligan et al., eds., 1991)]; [Short Protocols in Molecular Biology (Wiley and Sons, 1999)]; [Immunobiology (C.A. Janeway and P. Travers, 1997)]; [Antibodies (P. Finch, 1997)]; [Antibodies: a practical approach (D. Catty., ed., IRL Press, 1988-1989)]; [Monoclonal antibodies: a practical approach (P. Shepherd and C. Dean, eds., Oxford University Press, 2000)]; [Using antibodies: a laboratory manual (E. Harlow and D. Lane (Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1999)]; [The Antibodies (M. Zanetti and J.D. Capra, eds., Harwood Academic Publishers, 1995)])에 충분히 설명되어 있다.

정의

"항체"는 면역글로불린 분자의 가변 영역 내에 위치한 1개 이상의 항원 인식 부위를 통하여 표적, 예를 들면 탄수화물, 폴리뉴클레오티드, 지질, 폴리펩티드 등에 특이적으로 결합할 수 있는 면역글로불린 분자이다. 본원에 사용된 바와 같이, 이러한 용어는 무손상 폴리클로날 또는 모노클로날 항체뿐만 아니라, 그의 단편 (예를 들면, Fab, Fab', F(ab')₂, Fv), 단일 쇄 (ScFv), 그의 돌연변이체, 항체 부분을 포함하는 융합 단백질 (예를 들면, 도메인 항체) 및 항원 인식 부위를 포함하는 변형된 형상의 임의의 다른 면역글로불린 분자를 포함한다. 항체는 임의의 부류의 항체, 예를 들면 IgG, IgA, 또는 IgM (또는 그의 하위부류)을 포함하며, 항체는 임의의 특정 부류일 필요는 없다. 중쇄 불변 도메인의 항체 아미노산 서열에 따라, 면역글로불린은 상이한 부류로 배정될 수 있다. 면역글로불린에는 IgA, IgD, IgE, IgG 및 IgM의 5가지 주요 부류가 있으며, 이들중 몇몇은 하위부류 (동종형), 예를 들면 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 및 IgA2로 더 분류될 수 있다. 상이한 부류의 면역글로불린에 상응하는 중쇄 불변 도메인은 각각 알파, 델타, 엡실론, 감마 및 뮤로 명명된다. 면역글로불린의 상이한 부류의 서브유닛 구조 및 3차원 형상은 잘 알려져 있다.

본원에 사용된 바와 같이, "모노클로날 항체"는 실질적으로 동종 항체 집단으로부터 수득된 하나의 항체를 가리키며, 즉, 상기 집단을 포함하는 개별 항체들은 최소량으로 존재할 수 있는 가능한 천연발생 돌연변이를 제외하면 동일한 것이다. 모노클로날 항체 집단은 고도로 특이적이며, 단일 항원 부위에 대해 지정된다. 추가로, 전형적으로는 상이한 결정기 (에피토프)에 대한 상이한 항체를 포함하는 폴리클로날 항체 제제와는 대조적으로 각각의 모노클로날 항체는 항원 상의 단일 결정기에 대해 지정된다. 수식어 "모노클로날"은 동종 항체 집단으로부터 수득된 항체의 특징을 나타내며, 이는 임의의 특정 방법에 의해 항체가 생상되어야 한다는 것으로 해석되어서는 안된다. 예를 들면, 본 발명에 따라 사용하고자 하는 모노클로날 항체는 먼저 문헌 [Kohler and Milstein, 1975, Nature, 256:495]에 처음 기재된 하이브리도마 방법에 의해 제조될 수 있거나, 또는 예를 들면 미국 특허 번호 제4,816,567호에 기재된 재조합 DNA 방법에 의해 제조될 수 있다. 모노클로날 항체는 또한 예를 들면, 문헌 [McCafferty et al., 1990, Nature, 348:552-554]에 기재된 기술을 사용하여 생성된 파지 라이브러리로부터 단리될 수 있다.

본원에 사용된 바와 같이, "인간화된" 항체는 비인간 면역글로불린으로부터 유도된 최소의 서열을 함유하는 특이적인 키메라성 면역글로불린, 면역글로불린 쇄, 또는 그의 단편 (예를 들면, Fv, Fab, Fab', F(ab')₂ 또는 항원의 다른 항원-결합 하위서열)인, 비인간 (예를 들면, 뮤린) 항체 형태를 가리킨다. 대개의 경우, 인간화 항체는 수용자의 상보성 결정 영역 (CDR)으로부터의 잔기가 원하는 특이성, 친화성 및 생물학적 활성을 갖는 마우스, 래트, 또는 래빗과 같은 비인간 종 (공여자 항체)의 CDR로부터의 잔기로 대체된 인간 면역글로불린 (수용자 항체)이다. 몇몇 일례로, 인간 면역글로불린의 Fv 프레임워크 영역 (FR) 잔기는 상응하는 비인간 잔기에 의해 대체된다. 추가로, 인간화 항체는 수용자 항체에서도, 유입된 CDR 또는 프레임워크 서열에서도 발견되지는 않지만, 항체 성능을 추가로 개선시키고 최적화하는데 포함되는 잔기를 포함할 수 있다. 일반적으로, 인간화 항체는 실질적으로 1개 이상, 및 전형적으로 2개의 가변 도메인 (예를 들면, 중쇄 가변 도메인 및 경쇄 가변 도메인) 모두를 포함하는데, CDR 영역 모두 또는 실질적으로 그들 모두는 비인간 면역글로불린의 것에 상응하고, FR 영역 모두 또는 실질적으로 그들 모두는 인간 면역글로불린 공통 서열의 것이다. 인간화 항체는 또한 최선으로는 면역글로불린 불변 영역 또는 도메인 (Fc)의 적어도 일부분을, 전형적으로는 인간 면역글로불린의 것을 포함할 것이다. 항체는 WO 99/58572에 기재된 바와 같이 변형된 Fc 영역을 가질 수 있다. 다른 형태의 인간화 항체는 원래의 항체와 관련하여 변경된 하나 이상의 CDR (1, 2, 3, 4, 5, 6개)를 가지며, 이는 또한 원래의 항체로부터의 하나 이상의 CDR로부터 "유도된" 하나 이상의 CDR로 명명된다.

본원에 사용된 바와 같이, "인간 항체"는 인간에 의해 생산된 항체의 서열에 상응하는 아미노산 서열을 갖는 항체를 의미하고/하거나, 당업계에 알려져 있거나 본원에 개시된 임의의 인간 항체 제조 기술을 사용하여 제조되었다. 인간 항체의 이러한 정의는 1개 이상의 인간 중쇄 폴리펩티드 또는 1개 이상의 인간 경쇄 폴리펩티드를 포함하는 항체를 포함한다. 하나의 그러한 일례로는 뮤린 경쇄 및 인간 중쇄 폴리펩티드를 포함하는 항체이다. 인간 항체는 당업계에 알려져 있는 다양한 기술을 이용하여 생산될 수 있다. 하나의 실시태양에서, 인간 항체는 인간 항체를 발현하는 파지 라이브러리로부터 선택된다 (문헌 [Vaughan et al., 1996, Nature Biotechnology, 14:309-314]; [Sheets et al., 1998, PNAS, (USA) 95:6157-6162]; [Hoogenboom and Winter, 1991, J. Mol. Biol., 227:381]; [Marks et al.,1991, J. Mol. Biol., 222:581]). 또한 인간 항체는 내인성 면역글로불린 유전자가 부분적으로 또는 완전히 불활성화된 트랜스제닉 동물, 예를 들면 마우스 내로 인간 면역글로불린 유전자좌를 도입함으로써 제조될 수 있다. 이러한 접근법은 미국 특허 번호 제5,545,807호; 제5,545,806호; 제5,569,825호; 제5,625,126호; 제5,633,425호; 및 제5,661,016호에 기재되어 있다. 별법으로, 인간 항체는 표적 항원에 대해 지시된 항체를 생산하는 인간 B 림프구를 불멸화시킴으로써 제조될 수 있다 (그러한 B 림프구는 개체로부터 회수될 수 있거나, 시험관 내에서 면역화될 수 있음). 예를 들면, 문헌 [Cole et al., Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, p.77 (1985)]; [Boerner et al., 1991, J. Immunol., 147(1):86-95]; 및 미국 특허 번호 제5,750,373호를 참조한다.

본원에 사용된 바와 같이, 용어 "칼시토닌 유전자-관련된 펩티드" 및 "CGRP"는 임의의 형태의 칼시토닌 유전자-관련된 펩티드 및 CGRP의 활성중 적어도 일부를 보유하고 있는 그의 변이체를 가리킨다. 예를 들면, CGRP는 α-CGRP 또는 β-CGRP일 수 있다. 본원에 사용된 바와 같이, CGRP는 모든 포유동물 종, 예를 들면 인간, 개, 고양이, 말 및 소의 천연 서열 CGRP을 포함한다.

본원에 사용된 바와 같이, "항-CGRP 길항제 항체" (상호교환적으로 "항-CGRP 항체"로도 명명됨)는 CGRP에 결합할 수 있고, CGRP 생물학적 활성 및/또는 CGRP 신호화에 의해 매개되는 하류 경로(들)을 저해할 수 있는 항체를 가리킨다. 항-CGRP 길항제 항체는 CGRP 신호화에 의해 매개되는 하류 경로, 예를 들면 수용체 결합 및/또는 CGRP에 대한 세포 반응의 유도를 비롯한 CGRP 생물학적 활성을 차단, 길항, 억제, 또는 경감 (현저히 하는 것을 포함함)시키는 항체를 포함한다. 본 발명의 목적을 위해, 용어 "항-CGRP 길항제 항체"는 앞서 확인된 용어, 표제 및 기능 상태, 및 CGRP 그 자체와, CGRP 생물학적 활성 (임의의 내장 통증 양상을 매개할 수 있는 그의 능력을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아님), 또는 생물학적 활성의 결과를 실질적으로는 의미있을 정도로 무효화하거나, 감소시키거나, 중화시키는 특징들을 포함한다고 명확히 이해될 것이다. 몇몇 실시태양에서, 항-CGRP 길항제 항체는 CGRP에 결합하고, CGRP가 CGRP 수용체에 결합하지 못하도록 한다. 다른 실시태양에서, 항-CGRP 항체는 CGRP에 결합하고, CGRP 수용체의 활성화를 막는다. 항-CGRP 길항제 항체의 일례는 본원에서 제공한다.

본원에 사용된 바와 같이, 용어 "G1" 및 "항체 G1"은 상호교환적으로 사용되며, 기탁 번호가 ATCC PTA-6867 및 ATCC PTA-6866인 발현 벡터에 의해 생산되는 항체를 가리킨다. 중쇄 및 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열은 서열 1 및 2에 나타낸다. 항체 G1의 CDR 부분 (초티아(Chothia) 및 카바트(Kabat) CDR을 포함함)은 WO2007/054809의 도 5에 도표로 나타나며, 그 전문이 본원에 참조로 포함된다. 중쇄 및 경쇄 가변 영역을 코딩하는 폴리뉴클레오티드는 서열 9 및 10에 나타낸다. 항체 G1의 특징화는 WO2007/054809의 실시예에서 기술한다.

본원에 사용된 바와 같이, 용어 "G2" 및 "항체 G2"는 상호교환적으로 사용되며, 문헌 [Wong HC et al. Hybridoma 12:93-106, 1993]에 기재된 바와 같은 항래트 CGRP 마우스 모노클로날 항체를 가리킨다. 중쇄 및 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열은 서열 19 및 20에 나타낸다. 중쇄 및 경쇄 가변 영역을 코딩하는 폴리뉴클레오티드는 서열 27 및 28에 나타낸다. 항체 G2의 CDR 부분은 서열 21 내지 26에 제공된다.

용어 "폴리펩티드," "올리고펩티드," "펩티드" 및 "단백질"은 본원에서 상호교환적으로 사용되며, 임의의 길이의 아미노산의 쇄, 바람직하게는 상대적으로 짧은 쇄 (예를 들면, 10-100개 아미노산)를 가리킨다. 쇄는 선형 또는 분지형일 수 있고, 변형된 아미노산을 포함할 수 있고/있거나, 비-아미노산이 개입될 수 있다. 또한 이 용어는 천연적으로, 또는 개재, 예를 들면 디설피드 결합 형성, 당화, 지질화, 아세틸화, 인산화, 또는 임의의 기타 조작 또는 변형, 예를 들면 표지화 성분의 접합에 의해 변형된 아미노산 쇄를 포함한다. 이러한 정의에는, 예를 들면 하나 이상의 아미노산 유사체 (예를 들면, 비천연 아미노산 등을 포함한다) 뿐만 아니라, 당업계에 알려져 있는 기타 변형을 함유하는 폴리펩티드가 또한 포함된다. 폴리펩티드는 단일 쇄 또는 회합 쇄로 발생할 수 있는 것으로 이해된다.

당업계에 공지된 바와 같이, 본원에서 상호교환적으로 사용된 "폴리뉴클레오티드" 또는 "핵산"은 임의의 길이의 뉴클레오티드의 쇄를 가리키고, DNA 및 RNA를 포함한다. 뉴클레오티드는 데옥시리보뉴클레오티드, 리보뉴클레오티드, 변형된 뉴클레오티드 또는 염기 및/또는 그의 유사체, 또는 DNA 또는 RNA 중합효소에 의해 쇄 내로 혼입될 수 있는 임의의 기질일 수 있다. 폴리뉴클레오티드는 변형된 뉴클레오티드, 예를 들면 메틸화 뉴클레오티드 및 그의 유사체를 포함할 수 있다. 존재하는 경우, 뉴클레오티드 구조에 대한 변형은 쇄의 어셈블리 전 또는 후에 부여될 수 있다. 뉴클레오티드의 서열에 비-뉴클레오티드 성분이 개입될 수 있다. 폴리뉴클레오티드는 중합 후, 예를 들면 표지화 성분의 접합에 의해 추가로 변형될 수 있다. 또다른 유형의 변형은, 예를 들면 "캡," 하나 이상의 천연 발생 뉴클레오티드의 유사체로의 치환, 인터뉴클레오티드 변형, 예를 들면 전하를 띠지 않는 결합 (예를 들면, 메틸 포스포네이트, 포스포트리에스테르, 포스포아미데이트, 카바메이트 등) 및 전하를 띠는 결합 (예를 들면, 포스포로티오에이트, 포스포로디티오에이트 등)이 있는 것, 펜던트 부분, 예를 들면 단백질 (예를 들면, 뉴클레아제, 독소, 항체, 신호 펩티드, 폴리-L-라이신 등)을 함유하는 것, 인터칼레이터 (예를 들면, 아크리딘, 소랄렌 등)가 있는 것, 킬레이터 (예를 들면, 금속, 방사성 금속, 붕소, 산화성 금속 등)를 함유하는 것, 알킬레이터를 함유하는 것, 변형된 결합이 있는 것 (예를 들면, 알파 아노머 핵산 등) 뿐만 아니라, 변형되지 않은 형태의 폴리뉴클레오티드(들)을 포함한다. 또한, 슈가 내에 통상 존재하는 임의의 하이드록실 기가 포스포네이트 기, 포스페이트 기로 예를 들면 대체되거나, 표준 보호기로 보호되거나, 추가의 뉴클레오티드에 대한 추가의 결합이 제조되도록 활성화될 수 있거나, 고체 지지체에 접합될 수 있다. 5' 및 3' 말단 OH는 인산화되거나, 아민 또는 탄소수 1 내지 20의 유기 캡핑 기 부분으로 치환될 수 있다. 또다른 하이드록실이 또한 표준 보호기로 유도체화될 수도 있다. 폴리뉴클레오티드는 또한 2'-O-메틸-, 2'-O-알릴, 2'-플루오로- 또는 2'-아지도-리보스, 카보사이클릭 슈가 유사체, 알파- 또는 베타-아노머 슈가, 에피머 슈가, 예를 들면 아라비노스, 자일로스 또는 라이소스, 피라노스 슈가, 퓨라노스 슈가, 세도헵툴로스, 비고리형 유사체 및 비염기성 뉴클레오시드 유사체, 예를 들면 메틸 리보시드를 비롯한, 당업계에 일반적으로 알려져 있는 리보스 또는 데옥시리보스의 유사한 형태를 함유할 수 있다. 하나 이상의 포스포디에스테르 결합이 대체 연결기로 대체될 수 있다. 이러한 대체 연결기에는 포스페이트가 P(O)S ("티오에이트"), P(S)S ("디티오에이트"), (O)NR₂ ("아미데이트"), P(O)R, P(O)OR', CO 또는 CH₂ ("포름아세탈") (여기서, 각각의 R 또는 R'는 독립적으로 H 또는 에테르(-O-) 결합을 임의로 함유하는 치환 또는 비치환된 알킬 (1-20C), 아릴, 알케닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐 또는 아르알딜이다)로 대체된 실시태양을 포함하나, 이에 한정되지는 않는다. 폴리뉴클레오티드 내의 모든 결합이 동일할 필요는 없다. 상기 설명은 RNA 및 DNA를 비롯한 본원에서 언급된 모든 폴리뉴클레오티드에 적용된다.

항체의 "가변 영역"은 단독의 또는 조합된 항체 경쇄 가변 영역 또는 항체 중쇄 가변 영역을 가리킨다. 중쇄 및 경쇄의 가변 영역 각각은 초가변 영역으로도 알려져 있는 3개의 상보성 결정 영역 (CDR)에 의해 연결된 4개의 프레임워크 영역 (FR)으로 구성된다. 각 쇄에서의 CDR는 FR에 근접하게 함께 유지되고, 다른 쇄로부터의 CDR과 함께 항체의 항원-결합 부위를 형성하는데 기여한다. CDR을 결정하는 2가지 이상의 기술이 존재한다: (1) 교차-종 서열 가변성을 기초로 하는 접근법 (즉, 문헌 [Kabat et al. Sequences of Proteins of Immunological Interest, (5th ed., 1991, National Institutes of Health, Bethesda MD)]); 및 (2) 항원-항체 복합체의 결정학적 연구를 기초로 하는 접근법 (문헌 [Al-lazikani et al (1997) J. Molec. Biol. 273:927-948)]). 본원에 사용된 바와 같이, CDR은 상기 접근법중 하나 또는 두개의 접근법의 조합에 의해 정의된 CDR을 가리킬 수 있다.

항체의 "불변 영역"은 단독의 또는 조합된 항체 경쇄의 불변 영역 또는 항체 중쇄의 불변 영역을 나타낸다.

본원에 사용된 바와 같이, 항체의 "면역특이적" 결합은 항체의 항원-결합 부위 및 그 항체에 의해 인식되는 특이적인 항원 사이에서 발생하는 항원 특이적 결합 상호작용을 가리킨다 (즉, 항체는 ELISA 또는 다른 면역검정에서 단백질과 반응하며, 관련되지 않은 단백질과 검출되도록 반응하지 않는다).

항체 또는 폴리펩티드에 "우선적으로 결합" 또는 "특이적으로 결합" (본원에서 상호교환적으로 사용됨)하는 에피토프는 당업계에서 잘 이해되는 용어이고, 그러한 특이적 또는 우선적 결합을 측정하는 방법 또한 당업계에 잘 알려져 있다. 대체 세포 또는 물질보다 특정 세포 또는 물질과 더욱 빈번하게, 더욱 급속하게, 더 큰 지속력으로 및/또는 더 큰 친화력으로 반응하거나 회합하는 경우에, 분자는 "특이적 결합" 또는 "우선적 결합"을 나타내는 것으로 일컬어진다. 항체는, 다른 물질에 결합하는 것보다 더 큰 친화력, 결합력으로, 더욱 용이하게 및/또는 더 큰 지속력으로 결합하는 경우, 표적에 "특이적으로 결합"하거나 "우선적으로 결합"한다. 예를 들면, 하나의 CGRP 에피토프에 특이적으로 또는 우선적으로 결합하는 항체는 다른 CGRP 에피토프 또는 비-CGRP 에피토프에 결합하는 것보다 더 큰 친화력, 결합력으로, 더욱 용이하게 및/또는 더 큰 지속력으로 이러한 에피토프에 결합하는 항체이다. 이러한 정의를 판독함으로써, 예를 들면 제1 표적에 특이적으로 또는 우선적으로 결합하는 항체 (또는 부분 또는 에피토프)가 제2 표적에 특이적으로 또는 우선적으로 결합할 수 있거나, 결합하지 않을 수 있는 것으로도 이해된다. 따라서, "특이적 결합" 또는 "우선적 결합"은 배타적 결합을 (포함할 수는 있지만) 반드시 필요로 하지는 않는다. 일반적으로, 결합에 대한 언급은 우선적 결합을 의미하지만, 반드시 그러한 것은 아니다.

본원에 사용된 바와 같이, "실질적으로 순수한"은 50％ 이상 순수한 (즉, 오염물이 없는), 더욱 바람직하게는 90％ 이상 순수한, 더욱 바람직하게는 95％ 이상 순수한, 더욱 바람직하게는 98％ 이상 순수한, 더욱 바람직하게는 99％ 이상 순수한 물질을 가리킨다.

"숙주 세포"는 폴리뉴클레오티드 삽입물의 혼입을 위한 벡터(들)에 대한 수용자일 수 있거나 수용자인 개별적인 세포 또는 세포 배양물을 포함한다. 숙주 세포는 단일 숙주 세포의 자손을 포함하고, 자손은 자연적, 우연적, 또는 고의적 돌연변이로 인하여 원래의 모 세포와 반드시 완전하게 동일할 필요는 없다 (형태학적으로 또는 게놈 DNA 상보성 면에서). 숙주 세포는 본 발명의 폴리뉴클레오티드(들)로 생체 내에서 형질감염된 세포를 포함한다.

용어 "Fc 영역"은 면역글로불린 중쇄의 C-말단 부위를 규정짓기 위하여 사용된다. "Fc 영역"은 천연 서열 Fc 영역 또는 변이체 Fc 영역일 수 있다. 면역글로불린 중쇄의 Fc 영역의 경계는 다양할 수 있지만, 인간 IgG 중쇄 Fc 영역은 보통 Cys226 위치의 아미노산 잔기로부터, 또는 Pro230으로부터 중쇄의 카복실-말단까지 신장되어 있는 것으로 정의된다. Fc 영역에서의 잔기의 번호매김은 카바트. (문헌 [Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md., 1991])에서와 같은 EU 인덱스의 것이다. 면역글로불린의 Fc 영역은 일반적으로 2개의 불변 도메인, CH2 및 CH3을 포함한다.

본원에 사용된 바와 같이, "Fc 수용체" 및 "FcR"은 항체의 Fc 영역에 결합하는 수용체를 기술한다. 바람직한 FcR은 천연 서열 인간 FcR이다. 또한, 바람직한 FcR은 IgG 항체 (감마 수용체)에 결합하는 것이고, FcγRI, FcγRII 및 FcγRIII 하위부류의 수용체와, 이러한 수용체들의 대립유전자 변이체 및 별법으로 스플라이싱된 형태 포함하는 것을 포함한다. FcγRII 수용체는 FcγRIIA ("활성화 수용체") 및 FcγRIIB ("저해 수용체")를 포함하는데, 이들은 세포질 도메인에 있어서 주로 상이한, 유사한 아미노산 서열을 갖는다. FcR은 (문헌 [Ravetch and Kinet, 1991, Ann. Rev. Immunol., 9:457-92]; [Capel et al., 1994, Immunomethods, 4: 25-34]; 및 [de Haas et al., 1995, J. Lab. Clin. Med., 126:330-41])에서 개관된다. "FcR"는 신생아 수용체 FcRn을 포함하는데, 이는 모계 IgG의 태아로의 전달을 담당한다 (문헌 [Guyer et al., 1976, J. Immunol., 117:587]; 및 [Kim et al., 1994, J. Immunol., 24:249]).

"보체 의존성 세포독성" 및 "CDC"는 보체의 존재하에서의 표적의 용해를 가리킨다. 보체 활성화 경로는 동족 항원과 복합체를 형성한 분자 (예를 들면, 항체)에 보체 시스템의 제1 성분 (C1q)이 결합함으로써 개시된다. 보체 활성화를 평가하기 위해, 예를 들면 문헌 [Gazzano-Santoro et al., J. Immunol. Methods, 202:163 (1996)]에 기재되어 있는 바와 같은 CDC 검정법을 실시할 수 있다.

"기능성 Fc 영역"은 천연 서열 Fc 영역의 1가지 이상의 효과기 기능을 갖는다. 대표적인 "효과기 기능"은 C1q 결합; 보체 의존성 세포독성 (CDC); Fc 수용체 결합; 항체-의존성 세포-매개 세포독성 (ADCC); 식균작용; 세포 표면 수용체 (예를 들면, B 세포 수용체, BCR)의 하향-조절 등을 포함한다. 그러한 효과기 기능은 일반적으로 Fc 영역이 결합 도메인 (예를 들면, 항체 가변 도메인)과 조합되는 것을 필요로 하고, 그러한 항체 효과기 기능을 평가하는, 당업계 알려져 있는 다양한 검정법을 사용하여 평가할 수 있다.

"천연 서열 Fc 영역"은 천연에서 발견되는 Fc 영역의 아미노산 서열과 동일한 아미노산 서열을 포함한다. "변이체 Fc 영역"은 1개 이상의 아미노산 변형으로 인하여 천연 서열 Fc 영역의 아미노산과 상이한 아미노산 서열을 포함하나, 천연 서열 Fc 영역의 1가지 이상의 효과기 기능이 유지된다. 바람직하게는, 변이체 Fc 영역은 천연 서열 Fc 영역 또는 모체 폴리펩티드의 Fc 영역과 비교하여 1개 이상의 아미노산 치환을 갖고, 예를 들면 천연 서열 Fc 영역 또는 모체 폴리펩티드의 Fc 영역에서 약 1 내지 약 10개의 아미노산 치환, 바람직하게는, 약 1 내지 약 5개 아미노산 치환을 갖는다. 본원에서의 변이체 Fc 영역은 바람직하게는 천연 서열 Fc 영역 및/또는 모체 폴리펩티드의 Fc 영역과 서열 동일성이 약 80％ 이상일 것이고, 가장 바람직하게는 그와의 서열 동일성이 약 90％ 이상, 더욱 바람직하게는 그와의 서열 동일성이 약 95％ 이상, 약 96％ 이상, 약 97％ 이상, 약 98％ 이상, 약 99％ 이상일 것이다.

본원에 사용된 바와 같이, "항체-의존성 세포-매개 세포독성" 및 "ADCC"는 Fc 수용체 (FcR)를 발현하는 비특이적 세포독성 세포 (예를 들면, 자연 살해 (NK) 세포, 중성구 및 대식세포)가 표적 세포 상의 결합된 항체를 인식하고, 이어서 표적 세포의 용해를 야기하는 세포-매개 반응을 가리킨다. 관심의 대상이 되는 분자의 ADCC 활성을 시험관내 ADCC 검정법, 예를 들면 미국 특허 번호 제5,500,362호 또는 제5,821,337호에 기재되어 있는 것을 사용하여 평가할 수 있다. 그러한 검정법에 유용한 효과기 세포에는 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 NK 세포가 포함된다. 별법으로, 또는 추가적으로, 관심의 대상이 되는 분자의 ADCC 활성을 생체 내에서, 예를 들면 문헌 [Clynes et al., 1998, PNAS (USA), 95:652-656]에 개시된 것과 같은 동물 모델에서 평가할 수도 있다.

본원에 사용된 바와 같이, "치료"는 유리하거나 원하는 임상 결과를 수득하기 위한 접근법이다. 본 발명의 목적을 위해, 유리하거나 원하는 임상 결과는 중증도 감소, 통증 세기, 및 다른 관련 증상 경감, 재발 빈도 감소, 내장 통증을 앓는 환자의 삶의 질 향상, 및 내장 통증의 치료를 위해 필요한 다른 의약의 복용량 감소를 비롯한 임의의 양상의 내장 통증의 개선 중 하나 이상을 포함하나, 이에 한정되지는 않는다. 다른 연관된 증상으로는 경련, 통증, 확산된 통증, 압력, 풍만, 압축, 구역, 구토, 및 빛, 소음 및/또는 움직임에 관한 과민증이 포함되나, 이에 한정되지는 않는다.

내장 통증의 "발생률을 감소시키는 것"은 중증도를 감소시키는 것 (예를 들면, 아편제 (예를 들면, 옥시코돈, 모르핀, 부토르파놀, 날부핀 등)을 포함하는 상기 용태를 위해 일반적으로 사용되는 다른 약물 및/또는 요법에 대한 필요성 및/또는 양 (예를 들면, 이에 대한 노출)을 감소시키는 것을 포함할 수 있다), 기간을 감소시키는 것 및/또는 빈도를 감소시키는 것을 의미한다. 당업자가 이해하는 바와 같이, 개체는 치료에 대한 그의 반응의 관점에서 다양할 수 있고, 따라서, 예를 들면 "개체에서 내장 통증의 발생률을 감소시키는 방법"은 항-CGRP 길항제 항체의 투여가 그러한 특정 개체에서의 발생률의 감소를 야기할 수 있다는 합리적인 예상을 기초로 항-CGRP 길항제 항체를 투여하는 것을 반영한다.

내장 통증 및/또는 내장 통증에 연관된 증상을 "완화시키는 것"은 항-CGRP 길항제 항체를 투여하지 않는 것과 비교하여 내장 통증의 하나 이상의 증상 및/또는 내장 통증에 연관된 증상의 감소 또는 개선을 의미한다. "완화"는 증상의 지속 기간의 단축 또는 감소를 또한 포함한다.

내장 통증 및/또는 내장 통증에 연관된 증상을 "경감"시키는 것은 본 발명에 따라 항-CGRP 길항제 항체로 치료된 개체 또는 개체의 집단에서의 하나 이상의 원하지 않는 내장 통증의 임상적 징후의 정도를 감소시키는 것을 의미한다.

본원에 사용된 바와 같이, "내장 통증을 조절하는 것"은 (치료 전의 수준과 비교할 때) 개체에서 내장 통증의 하나 이상의 증상의 중증도 또는 지속 기간, 또는 내장 통증 발현 빈도를 유지시키거나 감소시키는 것을 가리킨다. 예를 들면, 개체에서 내장 통증의 지속 기간 또는 중증도, 또는 발현 빈도는 치료 전의 수준과 비교할 때 약 10％, 20％, 30％, 40％, 50％, 60％, 또는 70％ 이상중 임의의 값까지 경감된다.

본원에 사용된 바와 같이, 내장 통증의 발생을 "지연시키는 것"은 상기 질환의 진행을 미루고/미루거나, 지체시키고/시키거나, 느리게 하고/하거나, 저지하고/하거나, 안정화시키고/시키거나, 지연시키는 것을 의미한다. 이러한 지연은 병력 및/또는 치료될 개체에 따라서, 시간의 길이가 달라질 수 있다. 당업자에게 명백한 바와 같이, 충분한 또는 현저한 지연은, 개체에서 내장 통증 (예를 들면, 편내장 통증)이 발생되지 않는다는 점에서, 사실상 방지를 포함할 수 있다. 증상의 발생을 "지연시키는" 방법은 이러한 방법을 이용하지 않는 것과 비교할 때, 소정의 시간 프레임 내에 증상이 발생할 가능성을 감소시키고/시키거나 소정의 시간 프레임 내에 증상의 정도를 감소시키는 방법이다. 전형적으로 그러한 비교는 치료된 대상체 및 치료되지 않은 대상체 사이에서 통계학적으로 의미있는 차이를 나타내는데 충분한 수의 대상체를 사용하는 임상 연구를 기반으로 한다.

내장 통증의 "발생" 또는 "진행"은 질병의 초기 소견 및/또는 그 후의 진행을 의미한다. 내장 통증의 발생은 당업계에 잘 알려져 있는 표준 임상 기술을 사용하여 검출되고 평가될 수 있다. 그러한, 발생은 또한 검출될 수 없는 진행도 가리킨다. 본 발명의 목적을 위해, 발생 또는 진행은 증상의 생물학적 과정을 가리킨다. "발생"은 발생, 재발 및 개시를 포함한다. 본원에 사용된 바와 같이, 내장 통증의 "개시" 또는 "발생"은 초기 개시 및/또는 재발을 포함한다.

"생물학적 샘플"은 개체로부터 수득된 다양한 샘플 유형을 포함하며, 진단적 또는 모니터링 검정에서 사용될 수 있다. 정의는 생물학적 기원의 혈액 및 다른 액체 샘플, 고체 조직 샘플, 예를 들면 생검 검체 또는 조직 배양 또는 그로부터 유도된 세포, 및 그의 결과물을 포함한다. 정의는 또한 수득 후 임의의 방식, 예를 들면 처리 시약으로의 처리, 가용화, 또는 특정 성분, 예를 들면 단백질 또는 폴리뉴클레오티드를 위한 농축, 또는 절편의 목적을 위한 반-고체 또는 고체 매트릭스 중에서의 매립에 의해 다루어진 샘플을 포함한다. 용어 "생물학적 샘플"은 임상적 샘플을 포함하며, 또한 배양된 세포, 세포 상등액, 세포 용해물, 혈청, 혈장, 생물학적 유체 및 조직 샘플을 포함한다.

본원에 사용된 바와 같이, 약물, 화합물, 또는 약제학적 조성물의 "유효 투여량" 또는 "유효량"은 유리하거나 원하는 결과를 일으키는데 충분한 양이다. 예방적 용도를 위한 유리하거나 원하는 결과는 예를 들면, 본 질환, 그의 합병증 및 본 질환 발생시 출현되는 중간의 병적 표현형의 생화학적, 조직학적 및/또는 행동 증상을 비롯한 질병의 위험 제거 또는 경감, 질병의 중증도 감소, 또는 질병 개시의 지연시키는 결과를 포함한다. 치료적 용도를 위한 유리하거나 원하는 결과는 예를 들면, 통증 세기, 지속 기간 또는 내장 통증 발작 빈도를 감소시키는 것, 및 내장 통증 (생화학적, 조직학적 및/또는 행동)과 그의 합병증 및 통증의 발생시 출현되는 중간의 병적 표현형으로부터 유발된 하나 이상의 증상을 감소시키는 것, 통증을 앓는 환자의 삶의 질을 향상시키는 것, 통증의 치료에 필요한 다른 의약의 복용량을 감소시키는 것, 또다른 의약의 효과를 증진시키는 것, 및/또는 환자에서 통증의 진행을 지연시키는 것과 같은 임상 결과를 포함한다. 유효량은 1회 이상으로 투여될 수 있다. 본 발명의 목적을 위해, 약물, 화합물, 또는 약제학적 조성물의 유효량은 직접 또는 간접적으로 예방적 또는 치료적 요법을 수행하는데 충분한 양이다. 임상 환경에서 이해되는 바와 같이, 약물, 화합물, 또는 약제학적 조성물의 유효량은 또다른 약물, 화합물, 또는 약제학적 조성물과 함께 달성될 수 있거나, 그렇지 않을 수 있다. 따라서, 하나 이상의 치료제를 투여하는 환경에서 "유효량"이 고려될 수 있고, 하나 이상의 다른 제제와 함께 원하는 결과가 달성될 수 있거나 달성된다면, 단일 제제가 유효량으로 제공된 것으로 간주될 수 있다.

"개체" 또는 "대상체"는 포유동물, 더욱 바람직하게는 인간이다. 포유동물은 가축, 경기용 동물, 애완동물, 영장류, 말, 개, 고양이, 마우스 및 래트를 포함하나, 이에 한정되지는 않는다.

본원에 사용된 바와 같이, 본원에 사용된 바와 같이, "벡터"는 숙주 세포 내에 하나 이상의 관심의 대상이 되는 유전자(들) 또는 서열(들)을 전달할 수 있고, 바람직하게는 이를 발현시킬 수 있는 작제물을 의미한다. 벡터의 예로는 바이러스 벡터, 네이키드 DNA 또는 RNA 발현 벡터, 플라스미드, 코스미드 또는 파지 벡터, 양이온 응축제와 회합된 DNA 또는 RNA 발현 벡터, 리포좀 내에 캡슐화된 DNA 또는 RNA 발현 벡터 및 특정 진핵생물세포, 예를 들면 프로듀서 세포를 포함하나, 이에 한정되지는 않는다.

본원에 사용된 바와 같이, "발현 조절 서열"은 핵산의 전사를 지시하는 핵산 서열을 의미한다. 발현 조절 서열은 구성 또는 유도성 프로모터와 같은 프로모터, 또는 인핸서일 수 있다. 발현 조절 서열은 전사될 핵산 서열에 작동가능하게 연결된다.

본원에 사용된 바와 같이, "제약상 허용가능한 담체" 또는 "제약상 허용가능한 부형제"는 활성 성분과 조합될 때 상기 성분이 생물학적 활성을 유지하도록 하고, 대상체의 면역계와 비-반응성인 임의의 물질을 포함한다. 예로는 임의의 표준 약제학적 담체, 예를 들면 인산염 완충 염수 용액, 물, 에멀젼, 예를 들면 유/수 에멀젼 및 각종 유형의 습윤화제를 포함하나, 이에 한정되지는 않는다. 에어로졸 또는 비경구 투여를 위한 바람직한 희석제는 인산염 완충 염수 또는 생리식염수 (0.9％)이다. 그러한 담체를 포함하는 조성물은 잘 알려져 있는 통상적인 방법에 의해 제형화된다 (예를 들면, 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th edition, A. Gennaro, ed., Mack Publishing Co., Easton, PA, 1990]; 및 [Remington, The Science and Practice of Pharmacy 20th Ed. Mack Publishing, 2000]를 참조한다).

본원에 사용된 바와 같이, 용어 "K_온"은 항원/항체 결합에 대한 속도 상수를 가리키도록 의도된다.

본원에 사용된 바와 같이, 용어 "K_오프"는 항원/항체 복합체로부터 항체의 해리에 대한 속도 상수를 가리키도록 의도된다.

본원에 사용된 바와 같이, 용어 "K_D"는 항체-항원 상호작용의 평형 해리 상수를 가리키도록 의도된다.

내장 통증의 예방 또는 치료 방법

본원은 내장 통증 및/또는 내장 통증의 증상을 예방하고/하거나 치료하는 방법 및 개체에서의 내장 통증 및/또는 하나 이상의 내장 통증의 증상의 예방 및/또는 치료용 의약을 개시한다.

일부 실시양태에서, 본 발명은 개체에게 유효량의 항-CGRP 길항제 항체를 말초 투여하는 것을 포함하는, 개체에서 내장 통증 및/또는 하나 이상의 내장 통증의 증상을 예방하고/하거나 치료하는 방법을 제공한다.

다른 실시양태에서, 본 발명은 개체에게 유효량의 항-CGRP 길항제 항체를 말초 투여하는 것을 포함하는, 개체에서 내장 통증 및/또는 하나 이상의 내장 통증의 증상의 발생의 완하, 조절, 경감, 또는 발생 또는 진행의 지연 방법을 제공한다.

일부 실시양태에서, 본 발명은 내장 통증 및/또는 하나 이상의 내장 통증의 증상의 예방 및/또는 치료용 의약의 제조를 위한 항-CGRP 길항제 항체의 용도를 제공하며, 여기서 의약은 말초 투여를 위해 제조되거나, 또는 의약은 말초 투여된다.

다른 실시양태에서, 본 발명은 내장 통증 및/또는 내장 통증의 증상을 예방하고/하거나 치료하는데 사용하기 위한 항-CGRP 길항제 항체를 제공하며, 여기서 항체는 말초 투여를 위해 제조되거나, 또는 항체는 말초 투여된다.

다른 실시양태에서, 본 발명은 내장 통증 및/또는 내장 통증의 증상의 발생의 완화, 조절, 경감, 또는 발생 또는 진행의 지연을 위한 의약의 제조를 위한 항-CGRP 길항제 항체의 용도를 제공하며, 여기서 의약은 말초 투여를 위해 제조되거나, 또는 의약은 말초 투여된다.

일부 실시양태에서, 개체는 바람직하게는 포유동물, 예를 들면 반려 동물, 예를 들면 말, 고양이 또는 개, 또는 가축, 예를 들면 양, 소 또는 돼지이다. 가장 바람직하게는 포유동물은 인간이다.

일부 실시양태에서, 의약 및/또는 항-CGRP 길항제 항체는 경구 투여, 설하 투여, 구강 투여, 국소 투여, 직장 투여, 흡입 투여, 경피 투여, 피하 투여, 정맥내 투여, 동맥내 투여, 근육내 투여, 심장내 투여, 골내 투여, 피내 투여, 복막내 투여, 경점막 투여, 질 투여, 유리체내 투여, 관절내 투여, 관전주위 투여, 중앙 투여, 국소 투여 또는 피부 투여를 위해 제조된다.

일부 실시양태에서, 의약은 내장 통증의 발생 전 및/또는 도중 및/또는 후 말초 투여를 위해 제조된다.

일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 투여시 말초적 활성을 갖는다. 한 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 중앙 투여, 척수 투여 또는 경막내 투여되지 않는다.

일부 실시양태에서, 내장 통증은 질환, 예를 들면 기능성 장 장애 (FBD) 또는 염증성 장 질환 (IBD)에 연관되고/되거나 이들에 의해 야기되다. 내장 통증이 FBD에 연관된 실시양태에서, FBD는 예를 들면, 제한 없이, 위-식도 역류, 소화불량, 과민성 장 증후군 (IBS) 또는 기능성 복부 통증 증후군 (FAPS)일 수 있다. 가장 바람직하게는, 질환은 IBS이다. 내장 통증이 IBD에 연관된 실시양태에서, IBD는 예를 들면, 제한 없이, 크론병, 회장염 또는 궤양성 대장염일 수 있다. 다른 유형의 내장 통증은 예를 들면, 암, 신산통, 월경곤란증, 간질성 방광염 (IC)을 포함하는 방광염에 연관된 통증, 장폐색증, 월경 주기, 분만, 폐경기, 골절, 게실염, 복막염, 심장막염, 간염, 충수염, 대장염, 담낭염, 자궁내막증, 만성 및/또는 급성 췌장염에 연관된 수술, 심근경색증, 신장 통증, 흉막 통증, 전립선염, 골반 통증 및 기관에 대한 외상을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본 발명의 방법 및 사용은 FBD, IBD 또는 IC를 갖는 개체에서 내장 통증 및/또는 내장 통증에 연관된 하나 이상의 증상의 완화를 위한 것일 수 있다.

내장 통증의 진단 또는 평가는 당업계에 확립되어있다. 평가는 당업계에 공지된 방법, 예를 들면 다양한 통증 척도를 사용한 통증의 환자 특징화를 기반으로 하여 수행될 수 있다. 예를 들면, 문헌 [Katz et al, Surg Clin North Am., 1999, 79 (2):231-52]; [Caraceni et al. J Pain Symptom Manage, 2002, 23(3):239-55]을 참조한다.

예를 들면, 서술형 척도 (verbal descriptor scale, VDS), 시각 아날로그 척도 (visual analog scale, VAS), 프린스 헨리 호스피탈 통증 척도 (Prince Henry Hospital Pain Scale, PHHPS), 수치 등급 척도 (numeric rating scale, NRS), 및 안면 통증 척도 (Faces Pain Scale) 및 그의 변화는 통증을 평가하고, 치료에 대한 반응을 평가하는데 이용될 수 있다. 질환 상태를 측정하기 위해 통상적으로 사용되는 척도, 예를 들면 기능성 장 장애 중증도 인덱스 (FBDSI) (문헌 [Drossman et al., 1995, Digestive Diseasea and Sciences 40(5):986-995) 및 IBS 중증도 기록 시스템 (문헌 [Francis et al., 1997, Aliment Pharmacol Ther., 11(2):395-402])이 또한 존재한다. 상기 척도는 치료에 대한 반응을 평가하기 위해 이용될 수 있다.

일부 실시양태에서, FBD 통증 및/또는 FBD 통증의 증상의 발생 또는 진행의 완화, 조절, 감소 또는 지연은 하나 이상의 FBDSI, VDS, VAS, PHHPS, NRS 및 안면 통증 척도에 의해 측정된다. 또다른 실시양태에서, IBS 통증 및/또는 IBS 통증의 증상의 발생 또는 진행의 완화, 조절, 감소 또는 지연은 하나 이상의 IBS 중증도 기록, VDS, VAS, PHHPS, NRS 및 안면 통증 척도에 의해 측정된다.

일부 실시양태에서, IC 통증 및/또는 IC 통증의 증상의 발생 또는 진행의 완화, 조절, 감소 또는 지연은 하나 이상의 VDS, VAS, PHHPS, NRS 및 안면 통증 척도에 의해 측정된다.

항- CGRP 길항제 항체

일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 CGRP에 결합한다. 바람직하게는, 항-CGRP 길항제 항체는 CGRP에 결합하고, CGRP 수용체에 결합하는 CGRP의 능력을 억제한다. 일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 인간 및 설치류 CGRP 둘 다, 바람직하게는 인간 및 래트 CGRP에 결합한다. 보다 바람직하게는, 항체는 인간 CGRP에 결합한다. 바람직한 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 인간 α-CGRP 또는 인간 α-CGRP 및/또는 β-CGRP에 결합한다. 가장 바람직하게는, 항-CGRP 길항제 항체는 임의의 하나 이상의 하기 기능적 특징을 나타내는 항체이다: (a) CGRP에 결합하고; (b) CGRP가 그의 수용체(들)에 결합하는 것을 차단하고; (c) cAMP 활성화를 비롯하여 CGRP 수용체 활성화를 차단하거나 감소시키고; (d) CGRP 신호전달, 예를 들면 수용체 결합 및/또는 CGRP에 대한 세포 반응의 유도에 의해 매개된 하류 경로를 비롯하여 CGRP 생물학적 활성을 억제, 차단, 억압 또는 감소시키고; (e) 내장 통증의 임의의 측면을 예방, 완화 또는 치료하고; (f) CGRP의 클리어런스 (clearance)를 증가시키고; (g) CGRP 합성, 생성 또는 방출을 억제 (감소)시킴.

일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 CGRP의 단편에 결합하고, 보다 바람직하게는 CGRP의 단편 및 전장 CGRP에 결합한다. 바람직하게는, 항-CGRP 길항제 항체는 C-말단 영역 또는 CGRP의 단편에 결합한다. C-말단 영역 또는 CGRP의 단편은 바람직하게는 CGRP의 아미노산 19-37 또는 25-37 또는 29-37, 또는, 별법으로, 아미노산 30-37, 또는, 추가로 별법으로, 아미노산 31-37을 포함한다. 추가의 실시양태에서, C-말단 영역 또는 CGRP의 단편은 바람직하게는 CGRP의 아미노산 32-37, 가장 바람직하게는 아미노산 33-37을 포함한다. 바람직하게는, CGRP는 α-CGRP 또는 β-CGRP, 추가로 바람직하게는 인간 또는 설치류, 추가로 바람직하게는 인간 또는 래트, 보다 바람직하게는 인간, 추가로 바람직하게는 인간 α-CGRP 또는 β-CGRP, 가장 바람직하게는 인간 α-CGRP이다.

일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 아미노산 서열 GSKAF (서열 39)에 특이적으로 결합한다. 바람직하게는 CGRP의 서열 GSKAF (서열 39)는 항-CGRP 길항제 항체 결합인 에피토프이다.

일부 실시양태에서, CGRP의 아미노산 G33 내지 F37에 의해 정의된 에피토프에 특이적으로 결합하는 항-CGRP 길항제 항체가 제공된다. 항-CGRP 길항제 항체는 아미노산 서열 GSKAF (서열 39)에 의해 정의된 에피토프에 특이적으로 결합할 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 발명은 본 발명의 다양한 측면에서 정의된 용도 및 방법에서의 상기 항체의 용도를 제공한다.

일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 CGRP 수용체의 활성화를 억제 또는 방지한다. 바람직하게는 항-CGRP 항체는 약 0.0001 (0.1 nM) 내지 약 500 μM의 IC₅₀을 갖는다. 일부 바람직한 실시양태에서, IC₅₀은 시험관내 결합 검정법에서 측정된 바와 같이, 약 0.0001 μM 및 임의의 약 250 μM, 100 μM, 50 μM, 10 μM, 1 μM, 500 nM, 250 nM, 100 nM, 50 nM, 20 nM, 15 nM, 10 nM, 5 nM, 1 nM, 또는 0.5 nM이다. 일부 추가의 바람직한 실시양태에서, IC₅₀은 시험관내 결합 검정법에서 측정된 바와 같이, 임의의 약 500 pM, 또는 약 100 pM, 또는 약 50 pM 미만이다. 추가의 더 바람직한 실시양태에서, IC₅₀은 약 1.2 nM 또는 31 nM이다.

일부 실시양태에서, 사용된 항-CGRP 길항제 항체는 CGRP 또는 CGRP의 단편, 또는 CGRP의 단편 및 전장 CGRP, 바람직하게는 C-말단 영역 또는 CGRP의 단편에 결합하기 위해 상기 본원에 기재된 항체와의 경쟁이 가능하다. 바람직한 실시양태에서, C-말단 영역 또는 CGRP의 단편은 CGRP의 아미노산 19-37, 25-37, 29-37, 30-37, 또는 31-37을 포함한다. 추가의 실시양태에서, C-말단 영역 또는 CGRP의 단편은 바람직하게는 CGRP의 아미노산 32-37, 가장 바람직하게는 33-37을 포함한다.

일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 약 0.00001 μM (0.01 nM) 내지 약 500 μM의 결합 친화도 (K_D)로 CGRP, CGRP의 영역, 또는 CGRP의 단편에 결합한다. 일부 실시양태에서, 결합 친화도 (K_D)는 시험관내 결합 검정법에 의해 측정된 바와 같이, 약 0.00001 μM 및 임의의 약 250 μM, 100 μM, 50 μM, 10 μM, 1 μM, 500 nM, 250 nM, 100 nM, 50 nM, 20 nM, 15 nM, 10 nM, 5 nM, 1 nM, 0.5 nM, 1 nM, 0.05 nM, 또는 0.01 nM이다. 일부 실시양태에서, 결합 친화도 (K_D)는 시험관내 결합 검정법에 의해 측정된 바와 같이 임의의 약 500 pM, 또는 100 pM, 50 pM, 또는 10 pM 미만이다. 추가의 더 바람직한 실시양태에서, 결합 친화도 (K_D)는 약 0.04 nM 또는 16 nM이다.

본 발명에 사용된 바와 같은 항-CGRP 길항제 항체는 항체의 글리코실화 변이체, 항체의 아미노산 서열 변이체, 및 공유적으로 변형된 항체를 비롯하여 모노클로날 항체, 폴리클로날 항체, 항체 단편 (예를 들면, Fab, Fab', F(ab')2, Fv, Fc, ScFv 등), 키메라 항체, 이중특이적 항체, 헤테로접합 항체, 단일 쇄 (ScFv) 항체, 그의 돌연변이체, 항체 일부 (예를 들면, 도메인 항체)를 포함하는 융합 단백질, 인간화 항체, 및 필요한 특이성을 갖는 항원 인식 부위를 포함하는 이뮤노글로불린 분자의 임의의 다른 변형된 배열과 같은 군으로부터 선택될 수 있다. 항-CGRP 길항제 항체는 뮤린, 래트, 인간, 또는 임의의 다른 기원 (키메라 또는 인간화 항체를 포함함)일 수 있다. 일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 인간화될 수 있지만 보다 바람직하게는 인간이다. 일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 단리된다. 일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 실질적으로 순수하다. 여기서 항-CGRP 길항제 항체는 항체 단편이고, 단편은 바람직하게는 오리지날 항체의 기능적 특징, 즉 CGRP 결합 및/또는 상기 기능적 특징에서 기재된 바와 같은 길항제 활성을 보유한다.

항-CGRP 길항제 항체의 예는 당업계에 공지되어 있다. 따라서, 본 발명의 바람직한 실시양태에 따라서, 본 발명에 사용된 바와 같은 항-CGRP 길항제 항체는 바람직하게는 임의의 (i) WO2007/054809, (ii) WO2007/076336, (iii) 문헌 [Tan et al., Clin. Sci. (Lond). 89:565-73, 1995], (iv) 시그마(Sigma) (미국 미주리주), 생산품 번호 C7113 (클론 #4901), (v) 문헌 [Plourde et al., Peptides 14:1225-1229, 1993]에 일반적으로 또는 특이적으로 개시된 바와 같은 항-CGRP 항체이거나 또는

(a) 상기 항체의 단편 (예를 들면, Fab, Fab', F(ab')2, Fv, Fc, ScFv 등),

(b) 상기 항체의 경쇄,

(c) 상기 항체의 중쇄,

(d) 상기 항체의 경쇄 및/또는 중쇄로부터의 하나 이상의 가변 영역(들),

(e) 상기 항체의 하나 이상의 CDR(들) (1, 2, 3, 4, 5 또는 6 CDR),

(f) 상기 항체의 중쇄로부터의 CDR H3,

(g) 상기 항체의 경쇄로부터의 CDR L3,

(h) 상기 항체의 경쇄로부터의 3 CDR,

(i) 상기 항체의 중쇄로부터의 3 CDR,

(j) 상기 항체의 경쇄로부터의 3 CDR 및 중쇄로부터의 3 CDR,

(k) (a) 내지 (j) 중 임의의 하나 이상

을 포함하거나 또는 이들로 구성된다.

일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 항체 G2 또는 항체 G1이다. 본 발명의 가장 바람직한 실시양태에 따라서, 사용된 항-CGRP 길항제 항체는 WO2007/054809에 특이적으로 개시된 바와 같은 항-CGRP 항체 G1이거나 또는 WO2007/054809의 표 6에 나타낸 그의 변이체를 포함하고, 또한 G1에 대해서 기능적으로 등가의 항체를 포함하고, 즉 그들의 기능적 특징, 예를 들면 CGRP 결합 또는 길항제 활성에 상당하게 영향을 미치지 않는 아미노산 잔기의 보전적 치환체 또는 하나 이상의 아미노산의 결실 또는 첨가, 및 증가되거나 또는 감소된 활성 및/또는 결합을 갖는 변이체를 포함한다. 본원에 사용된 바와 같은, 용어 "G1" 및 "항체 G1"은 WO2007/054809에 개시된 바와 같이 ATCC PTA-6867 및 ATCC PTA-6866의 기탁 번호를 갖는 발현 벡터에 의해 생성된 항체를 지칭하기 위해 상호교환적으로 사용된다. 항체 G1의 기능적 특징은 2009년 3월 3일에 제출된 PCT/IB2009/050849 및 PCT/IB2009/050852 둘 다에 기재되어 있고, 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.

본 발명의 추가의 실시양태에 따라서, 항-CGRP 길항제 항체는 (a) WO2007/054809의 표 6에 나타낸 항체 G1 또는 그의 변이체; (b) WO2007/054809의 표 6에 나타낸 항체 G1 또는 그의 변이체의 단편 또는 영역; (c) WO2007/054809의 표 6에 나타낸 항체 G1 또는 그의 변이체의 경쇄; (d) WO2007/054809의 표 6에 나타낸 항체 G1 또는 그의 변이체의 중쇄 (e) WO2007/054809의 표 6에 나타낸 항체 G1 또는 그의 변이체의 경쇄 및/또는 중쇄로부터의 하나 이상의 가변 영역(들); (f) WO2007/054809의 표 6에 나타낸 항체 G1 또는 그의 변이체의 하나 이상의 CDR(들) (1, 2, 3, 4, 5 또는 6 CDR; (g) WO2007/054809의 표 6에 나타낸 항체 G1 또는 그의 변이체의 중쇄로부터의 CDR H3; (h) WO2007/054809의 표 6에 나타낸 항체 G1 또는 그의 변이체의 경쇄로부터의 CDR L3; (i) WO2007/054809의 표 6에 나타낸 항체 G1 또는 그의 변이체의 경쇄로부터의 3 CDR; (j) WO2007/054809의 표 6에 나타낸 항체 G1 또는 그의 변이체의 중쇄로부터의 3 CDR; (k) WO2007/054809의 표 6에 나타낸 항체 G1 또는 그의 변이체의 경쇄로부터의 3 CDR 및/또는 중쇄로부터의 3 CDR; 및 (i) (b) 내지 (k)의 임의의 하나를 포함하는 항체로부터 선택되는 폴리펩티드를 포함하거나 또는 이들로부터 선택되는 폴리펩티드로 구성된다. 본 발명은 또한 상기의 임의의 하나 이상을 포함하는 폴리펩티드를 제공한다. 일부 실시양태에서, 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6 이상의 CDR(들)은 WO2007/054809의 표 6에 나타낸 G1 또는 그의 변이체의 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6 이상의 CDR(들)과 약 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 이상 동일하다. CDR 영역의 결정은 당업자의 능력 내에서 잘 이루어진다. 일부 실시양태에서, CDR은 카바트 및 초티아 CDR의 조합일 수 있다는 것이 이해된다. 일부 실시양태에서, CDR은 카바트 CDR이다. 다른 실시양태에서, CDR은 초티아 CDR이다.

항-CGRP 길항제 항체는 바람직하게는 WO2007/054809의 표 6에 나타낸 항체 G1 (예를 들면, Fab, Fab', F(ab')2, Fv, Fc, ScFv 등) 또는 그의 변이체의 단편 또는 영역을 포함하거나 또는 이들로 구성된다. 바람직하게는, 상기 단편 또는 영역은 항-CGRP 길항제 항체의 기능적 특징, 예를 들면, CGRP 결합 활성 및/또는 길항제 활성을 갖고, (i) 경쇄, (ii) 중쇄, (iii) 경쇄 및/또는 중쇄로부터의 하나 이상의 가변 영역을 함유하는 단편, 및 (iv) 항체 G1의 경쇄 및/또는 중쇄로부터의 하나 이상의 CDR을 포함하거나 또는 이들의 하나 이상으로 구성된다.

일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 WO2007/076336의 서열: 28-32로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 갖는 펩티드를 포함하는 경쇄 가변 영역 (LCVR)을 포함하고/하거나 서열: 34-38로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 갖는 펩티드를 포함하는 중쇄 가변 영역 (HCVR)을 포함한다.

더 바람직하게는, 항-CGRP 길항제 항체는 WO2007/076336의 표 1에 나타낸 바와 같은 서열의 LCVR 폴리펩티드를 포함하고, WO2007/076336의 표 1에 나타낸 바와 같은 서열의 HCVR 폴리펩티드를 추가로 포함한다.

본 발명의 추가의 실시양태에 따라서, 사용된 항-CGRP 길항제 항체는 WO2007/076336의 서열: 8-13으로 이루어진 군으로부터 선택된 경쇄 CDR (CDRL)을 포함하고/하거나 서열: 14-22로 이루어진 군으로부터 선택된 중쇄 CDR (CDRH)을 포함한다.

WO2007/076336의 항-CGRP 길항제 항체를 제조하고 단리하는 방법 및 항-CGRP 길항제 항체의 CGRP 결합 및 길항제 특성을 입증하는 데이터가 WO2007/076336에 기재되어 있다.

일부 실시양태에서, 본 발명에서 사용하기 위한 항-CGRP 길항제 항체는 본원에 제시된 서열 1 또는 서열 19에 대해서 아미노산 서열에서 약 85% 이상, 약 86% 이상, 약 87% 이상, 약 88% 이상, 약 89% 이상, 약 90% 이상, 약 91% 이상, 약 92% 이상, 약 93% 이상, 약 94% 이상, 약 95% 이상, 약 96% 이상, 약 97% 이상, 약 98% 이상, 약 99% 이상 또는 100% 동일한 VH 도메인을 포함한다.

일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 본원에 제시된 서열 2 또는 서열 20에 대해서 아미노산 서열에서 약 85% 이상, 약 86% 이상, 약 87% 이상, 약 88% 이상, 약 89% 이상, 약 90% 이상, 약 91% 이상, 약 92% 이상, 약 93% 이상, 약 94% 이상, 약 95% 이상, 약 96% 이상, 약 97% 이상, 약 98% 이상, 약 99% 이상 또는 100% 동일한 VL 도메인을 포함한다.

일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 본원에 제시된 서열 1 및 2 또는 서열 19 및 20 각각에 대해서 아미노산 서열에서 약 85% 이상, 약 86% 이상, 약 87% 이상, 약 88% 이상, 약 89% 이상, 약 90% 이상, 약 91% 이상, 약 92% 이상, 약 93% 이상, 약 94% 이상, 약 95% 이상, 약 96% 이상, 약 97% 이상, 약 98% 이상, 약 99% 이상 또는 100% 동일한 VH 도메인 및 VL 도메인을 각각 포함한다.

일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 본원에 제시된 서열 1에 대해서 아미노산 서열에서 90% 이상 동일한 VH 도메인을 포함하고, 서열 2에 대해서 아미노산 서열에서 90% 이상 동일한 VL 도메인을 포함한다.

별법으로, 항-CGRP 길항제 항체는 본원에 제시된 서열 19에 대해서 아미노산 서열에서 90% 이상 동일한 VH 도메인을 포함하고, 서열 20에 대해서 아미노산 서열에서 90% 이상 동일한 VL 도메인을 포함한다.

일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 (a). 서열 3, 21, 33, 34, 36 또는 37에 제시된 CDR H1; (b). 서열 4, 22, 35 또는 38에 제시된 CDR H2; (c). 서열 5 또는 23에 제시된 CDR H3; (d). 서열 6 또는 24에 제시된 CDR L1; (e) 서열 7 또는 25에 제시된 CDR L2; (f). 서열 8 또는 26에 제시된 CDR L3; 및 (g). WO2007/054809의 표 6에 나타낸 바와 같은 CDR L1, CDR L2 및 CDR H2의 변이체로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 CDR을 포함한다.

일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체 중쇄 불변 영역은 불변 영역의 임의의 유형, 예를 들면 IgG, IgM, IgD, IgA, 및 IgE; 및 임의의 동종형, 예를 들면 IgGI, IgG2, IgG3, 및 IgG4로부터 존재할 수 있다.

일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 ATCC 기탁 번호 PTA-6867을 갖는 발현 벡터에 의해 생성된 중쇄를 포함한다. 추가로 바람직하게는, 항-CGRP 길항제 항체는 ATCC 기탁 번호 PTA-6866을 갖는 발현 벡터에 의해 생성된 경쇄를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 C-말단 라이신을 갖거나 갖지 않는, 서열 11에 나타낸 항체 G1 중쇄 전체 항체 아미노산 서열 (본원에 기재된 바와 같은 변형된 IgG2를 포함함)을 포함한다. 항-CGRP 길항제 항체는 또한 중쇄 상에서 말단 라이신이 결핍된 항체를 포함하고, 제조 동안 항체의 일부에서 통상적으로 손실이 있다. 일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 서열 12에 나타낸 항체 G1 경쇄 전체 항체 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 서열 29에 나타낸 항체 G2 중쇄 전체 항체 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 서열 30에 나타낸 항체 G2 경쇄 전체 항체 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 ATCC 기탁 번호 PTA-6867 및 PTA-6866를 갖는 발현 벡터에 의해서 생성된다.

일부 실시양태에서, 본 발명에 사용하기 위한 항-CGRP 길항제 항체는 본원에 정의된 항체 G1 또는 항체 G2이다. 바람직한 실시양태에서, 본 발명에 사용하기 위한 항-CGRP 길항제 항체는 항체 G1, 또는 그의 항원 결합 단편이다.

추가의 본 발명의 실시양태에 따라서, 항-CGRP 길항제 항체는, 예를 들면 WO2007/054809에 기재된 바와 같은 변형된 불변 영역을 포함한다. 바람직하게는, 변형된 불변 영역은 부분적으로 면역학적으로 불활성을 포함하여 면역학적으로 불활성이고, 이는 즉 상보체 매개 용해를 촉발하지 않고, 항체-의존성 세포 매개 세포독성 (ADCC)을 자극하지 않고, 소교세포를 활성화시키지 않는다. 바람직하게는, 변형된 불변 영역은 하나 이상의 이들 활성에서 감소된다. 가장 바람직하게는, 불변 영역은 문헌 [Eur. J. Immunol., 1999, 29:2613-2624]; PCT/GB99/01441; 및/또는 UK 특허 출원 번호 9809951.8에 기재된 바와 같이 변형된다. 일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 하기 돌연변이 A330, P331 내지 S330, S331을 포함하는 인간 중쇄 IgG2 불변 영역을 포함한다 (야생형 IgG2 서열을 참조하여 번호매김한 아미노산). 문헌 [Eur. J. Immunol.,1999, 29:2613-2624].

WO2007/054809의 항-CGRP 길항제 항체를 제조하고 단리하는 방법 및 항-CGRP 길항제 항체의 CGRP 결합 및 길항제 특성을 입증하는 데이터가 WO2007/054809에 기재되어 있다. 상기 출원의 서열 1 내지 14의 서열이 각각 서열 1 내지 14와 같이 본원에 제공된다.

투여량 및 투여

일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 예를 들면, 매 주마다 약 1 회 내지 약 7 회, 더 바람직하게는 매 달마다 약 1 회 내지 약 4 회, 더 바람직하게는 매 6 개월 기간마다 약 1 회 내지 약 6 회, 더 바람직하게는 매 1 년마다 약 1 회 내지 약 12 회로 말초적으로 투여된다. 바람직하게는, 항-CGRP 길항제 항체는 일일 약 1 회, 매 2, 3, 4, 5 또는 6 일에 1 회, 매 주마다, 매 2 주에 1 회, 매 3 주에 1 회, 매 달마다, 매 2 달에 1 회, 매 3 달에 1 회, 매 4 달에 1 회, 매 5 달에 1 회, 매 6 달에 1 회, 매 7 달에 1 회, 매 8 달에 1 회, 매 9 달에 1 회, 매 10 달에 1 회, 매 11 달에 1 회 또는 매 년마다로부터 선택되는 기간 중에 말초적으로 투여된다. 바람직한 실시양태에 따라서, 항-CGRP 길항제 항체는 경구 투여, 설하 투여, 구강 투여, 국소 투여, 직장 투여, 흡입을 통한 투여, 경피 투여, 피하 투여, 정맥내 투여, 동맥내 투여 또는 근육내 투여, 심장내 투여를 통해, 골수내 투여, 진피내 투여, 복막내 투여, 경점막 투여, 질 투여, 유리체내 투여, 피부 투여, 관절내 투여, 관절주위 투여 또는 국소 투여로부터 선택된 하나 이상의 경로를 통해서 투여된다.

본 발명의 추가의 실시양태에 따라서, 의약은 매 주마다 약 1 회 내지 약 7 회, 더 바람직하게는 매 달마다 약 1 회 내지 약 4 회, 더 바람직하게는 매 6 개월 기간마다 약 1 회 내지 약 6 회, 더 바람직하게는 매 년마다 약 1 회 내지 약 12 회로 말초적으로 투여하기 위해 제조된다. 바람직하게는, 의약은 일일 약 1 회, 매 2, 3, 4, 5 또는 6 일에 1 회, 매 주마다, 매 2 주에 1 회, 매 3 주에 1 회, 매 달마다, 매 2 달에 1 회, 매 3 달에 1 회, 매 4 달에 1 회, 매 5 달에 1 회, 매 6 달에 1 회, 매 7 달에 1 회, 매 8 달에 1 회, 매 9 달에 1 회, 매 10 달에 1 회, 매 11 달에 1 회 또는 매 년마다로부터 선택된 기간 중에 말초적으로 투여되기 위해 제조된다. 바람직한 실시양태에 따라서, 의약은 경구 투여, 설하 투여, 구강 투여, 국소 투여, 직장 투여, 흡입을 통한 투여, 경피 투여, 피하 투여, 정맥내 투여, 동맥내 투여 또는 근육내 투여, 심장내 투여를 통해, 골수내 투여, 진피내 투여, 복막내 투여, 경점막 투여, 질 투여, 유리체내 투여, 피부 투여, 관절내 투여, 관절주위 투여 또는 국소 투여로부터 선택된 하나 이상의 경로를 통해서 말초적으로 투여되기 위해 제조된다.

본 발명의 추가의 실시양태에 따라서, 약 0.1 내지 약 200 mg/ml; 바람직하게는 약 0.5, 1, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190 또는 200 mg/ml +/- 10% 에러 중 임의의 하나, 가장 바람직하게는 약 50 mg/ml의 항체 농도이다.

본 발명의 추가의 실시양태에 따라서, 의약은 0.1 내지 200 mg/kg의 체중; 바람직하게는 약 0.5, 1, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190 또는 200 mg/kg의 체중 +/- 10% 에러 중 임의의 하나, 가장 바람직하게는 약 10 mg/kg의 항체 농도를 갖는 말초적 투여를 위해 제조된다.

본 발명의 바람직한 실시양태에 따라서, 항-CGRP 길항제 항체는 약 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70, 72, 74, 76, 78, 80, 82, 84, 86, 88, 90, 92, 94, 96, 98, 100, 102, 104, 106, 108, 110, 112, 114, 116, 118, 120, 122, 124, 126, 128, 130, 132, 134, 136, 138, 140, 142, 144, 146, 148, 150, 152, 154, 156, 158, 160, 62, 164, 166, 168, 170, 172, 174, 176, 178, 180, 182, 184, 186, 188, 190, 192, 194, 196, 198, 200, 202, 204, 206, 208 또는 210 일 +/- 1 일 중 임의의 하나를 초과하는, 더 바람직하게는 약 7, 8, 9, 10, 11, 또는 12 달 중 어느 하나를 초과하는 생체내 반감기를 갖는다.

바람직하게는, 항-CGRP 길항제 항체는 6일을 초과하는 생체내 반감기를 갖는다.

본 발명의 추가의 바람직한 실시양태에 따라서, 의약 및/또는 항-CGRP 길항제 항체는 중추신경계 및/또는 인지 손상의 효과를 생성하지 않는다. 바람직하게는 의약 및/또는 항-CGRP 길항제 항체는 기억상실증, 혼란, 이인증, 감각저하, 비정상적 사고, 입벌림장애, 현기증, 정좌불능증, 무관심, 실조, 구강주위 감각이상, CNS 자극, 정서 불안정성, 이상행복감, 환각, 적개심, 감각과민증, 운동과다증, 저혈압, 협동장애, 리비도 증가, 조증 반응, 간대성근경련증, 신경통, 신경병증, 정신병, 발작, 이상 언어, 혼미, 자살 관념; 현기증, 기면, 불면증, 불안증, 떨림, 우울증 또는 감각이상 중 임의의 하나 이상을 포함하지 않는다. 가장 바람직하게는 의약 및/또는 항-CGRP 길항제 항체는 운동 협응 또는 주의력의 장애를 포함하지 않는다.

본 발명의 추가의 실시양태에 따라서, 의약 및/또는 항-CGRP 길항제 항체는 호흡성, 간 신장 또는 위장 장애를 발생시키지 않는다.

본 발명의 추가의 실시양태에 따라서, 의약 및/또는 항-CGRP 길항제 항체는 물리적 및/또는 정신적 의존의 효과를 발생시키지 않는다. 바람직하게는 의약 및/또는 항-CGRP 길항제 항체는 아편제, 벤조디아제핀, 펜시클리딘 (PCP), 또는 N-메틸-D-아스파르트산 (NMDA) 수용체, 또는 CNS 자극제에 대한 친화도를 입증하지 않거나, 또는 임의의 진정 또는 이상행복감 효과를 발생시키지 않는다.

일부 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 투여 상에서 중추성 통증 감각의 발생 또는 진행을 완화, 조절, 감소 또는 지연시킨다.

다른 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체의 효과는 내장 통증의 동일 모델에서 NSAIDS 및/또는 아편제의 효과와 같고/같거나 우수하다. 한 실시양태에서, 항-CGRP 길항제 항체는 내화 통증 집단 치료에서 효과적이다.

본 발명의 추가의 실시양태에 따라서, 본 발명의 임의의 다른 측면에 따른 용도 또는 방법이 제공되고, 항-CGRP 길항제 항체는 하나 이상의 추가의 약리학적 활성 화합물 또는 작용제, 바람직하게는 내장 통증의 치료에 유용한 화합물 또는 작용제와 조합하여 별개로, 순차적으로 또는 동시에 투여된다. 바람직하게는, 첨가제(들)은 하기의 하나 이상으로부터 선택된다:

(i) 아편 진통제, 예를 들면 모르핀, 헤로인, 히드로모르폰, 옥시모르폰, 레보르파놀, 레발로판, 메타돈, 메피리딘, 펜타닐, 코카인, 코데인, 디히드로코데인, 옥시코돈, 히드로코돈, 프로폭시펜, 날메펜, 날로르핀, 날옥손, 날트렉손, 부프레노르핀, 부토르파놀, 날부핀 또는 펜타조신;

(ii) 비스테로이드성 항염증성 약물 (NSAID), 예를 들면 아스피린, 디클로페나크, 디플루시날, 에토돌락, 펜부펜, 페노프로펜, 플루페니살, 플루르비프로펜, 이부프로펜, 인도메타신, 케토프로펜, 케토롤락, 메클로페남산, 메페남산, 나부메톤, 나프록센, 옥사프로진, 페닐부타존, 피록시캄, 술린닥, 톨메틴 또는 조메피락, 시클로옥시게나제-2 (COX-2) 억제제, 셀레콕지브; 로페콕지브; 멜록시캄; JTE-522; L-745,337; NS398;, 또는 그의 제약상 허용가능한 염;

(iii) 바르비투르염 진정제, 예를 들면 아모바르비탈, 아프로바르비탈, 부타바르비탈, 부타비탈, 메포바르비탈, 메타르비탈, 메토헥시탈, 펜토바르비탈, 페노바르티탈, 세코바르비탈, 탈부탈, 테아밀랄 또는 티오펜탈 또는 그의 제약상 허용가능한 염;

(iv) 진정제 작용을 갖는 벤조디아제핀, 예를 들면 클로르디아제폭시드, 클로라제페이트, 디아제팜, 플루라제팜, 로라제팜, 옥사제팜, 테마제팜 또는 트리아졸람 또는 그의 제약상 허용가능한 염;

(v) 진정제 작용을 갖는 H₁ 길항제, 예를 들면 디펜히드라민, 피릴라민, 프로메타진, 클로르페니라민 또는 클로를시클리진 또는 그의 제약상 허용가능한 염;

(vi) 진정제, 예를 들면 글루테티미드, 메프로바메이트, 메타쿠알론 또는 디클로랄페나존 또는 그의 제약상 허용가능한 염;

(vii) 근이완제, 예를 들면 바클로펜, 카리소프로돌, 클로르족사존, 시클로벤자프린, 메토카르바몰 또는 오르프레나딘 또는 그의 제약상 허용가능한 염;

(viii) NMDA 수용체 길항제, 예를 들면 덱스트로메토르판 ((+)-3-히드록시-N-메틸모르피난) 또는 그의 대사물 덱스트로르판 ((+)-3-히드록시-N-메틸모르피난), 케타민, 메만틴, 피롤로퀴놀린 퀴논 또는 시스-4-(포스포노메틸)-2-피페리딘카르복실산 또는 그의 제약상 허용가능한 염;

(ix) 알파-아드레날린성약, 예를 들면 독사조신, 탐술로신, 클로니딘 또는 4-아미노-6,7-디메톡시-2-(5-메탄술폰아미도-1,2,3,4-테트라히드로이소퀴놀-2-일)-5-(2-피리딜) 퀴나졸린;

(x) 트리시클릭 항우울제, 예를 들면 데시프라민, 이미프라민, 아미트립틸린 또는 노르트립틸린;

(xi) 항경련제, 예를 들면 카르밤아제핀 또는 발프로에이트;

(xii) 타치키닌 (NK) 길항제, 특히 NK-3, NK-2 또는 NK-1 길항제, 예를 들면 (αR,9R)-7-[3,5-비스(트리플루오로메틸)벤질]-8,9,10,11-테트라히드로-9-메틸-5-(4-메틸페닐)-7H-[1,4]디아조시노[2,1-g][1,7]나프트리딘-6-13-디온 (TAK-637), 5-[[(2R,3S)-2-[(1R)-1-[3,5-비스(트리플루오로메틸)페닐]에톡시-3-(4-플루오로페닐)-4-모르폴리닐]메틸]-1,2-디히드로-3H-1,2,4-트리아졸-3-온 (MK-869), 라네피탄트, 다피탄트 또는 3-[[2-메톡시-5-(트리플루오로메톡시)페닐]메틸아미노]-2-페닐-피페리딘 (2S,3S);

(xiii) 무스카린 길항제, 예를 들면 옥시부틴, 톨테로딘, 프로피베린, 트롭시움 클로라이드 또는 다리페나신;

(xiv) COX-2 억제제, 예를 들면 셀레콕지브, 로페콕지브 또는 발데콕지브;

(xv) 비-선택적인 COX 억제제 (바람직하게는 GI 보호를 갖음), 예를 들면 니트로플루르비프로펜 (HCT-1026);

(xvi) 석탄-타르 진통제, 특히 파라세타몰;

(xvii) 신경이완성, 예를 들면 드로페리돌;

(xviii) 바닐로이드 수용체 효능제 (예를 들면 레신페라톡신) 또는 길항제 (예를 들면 캅사제핀);

(xix) 베타-아드레날린성약, 예를 들면 프로파놀롤;

(xx) 국소 마취제, 예를 들면 멕실렌틴;

(xxi) 코르티코스테로이드, 예를 들면 덱사메타손;

(xxii) 세로토닌 수용체 효능제 또는 길항제;

(xxiii) 콜린성 (니코틴) 진통제;

(xxiv) 트라마돌;

(xxv) PDEV 억제제, 예를 들면 실데나필, 바르데나필 또는 탈라다필;

(xxvi) 알파-2-델타 리간드, 예를 들면 가바펜틴 또는 프레가발린;

(xxvii) 카나비노이드; 및

(xxviii) 항우울제, 예를 들면 아미트립틸린 (엘라빌(Elavil)(등록상표)), 트라조돈 (데시렐(Desyrel)(등록상표)), 및 이미프라민 (토프라닐(Tofranil)(등록상표)) 또는 항경련제, 예를 들면 페니토인 (딜란틴(Dilantin)(등록상표)) 또는 카르밤아제핀 (테그레톨(Tegretol)(등록상표)).

본 발명의 추가의 측면에 따라서, 항-CGRP 길항제 항체 및 제약상 허용가능한 담체 및/또는 부형제를 포함하는, 개체에서 내장 통증 및/또는 내장 통증의 증상의 예방 및/또는 치료, 또는 내장 통증의 발생 또는 진행 및/또는 내장 통증의 증상을 완화, 조절, 감소 또는 지연시키기 위한 제약 조성물이 제공되고, 여기서 상기 조성물은 말초 투여를 위해 제조된다.

키트

본 발명의 추가의 측면에 따라서, 상기 정의된 바와 같은 제약 조성물 및 내장 통증 및/또는 내장 통증의 증상의 예방 및/또는 치료, 또는 내장 통증의 발생 또는 진행 및/또는 내장 통증의 증상을 완화, 조절, 감소 또는 지연시키기 위한, 개체에게 유효량의 상기 제약 조성물의 말초 투여를 위한 설명서를 포함하는 키트가 제공된다.

키트는 본원에 기재된 항-CGRP 길항제 항체 또는 폴리펩티드를 함유하는 하나 이상의 용기 및 본 발명의 임의의 방법 및 용도에 따른 사용을 위한 설명서를 포함할 수 있다. 키트는 또한 내장 통증을 앓고 있거나 또는 내장 통증을 앓을 위험이 있는 개체를 확인하는 것을 기반으로 치료에 적합한 개체를 선택하는 기술을 추가로 포함할 수 있다. 제약 조성물의 말초 투여를 위한 설명서는 의도한 치료를 위한 투여량, 투여 스케쥴 및 투여 경로에 관한 정보를 포함할 수 있다.

본 발명의 각각의 측면의 바람직한 특징은 필요한 부분만 약간 수정하여 각각의 다른 측면에 동등하게 적용한다.

실시예

하기 실시예는 예시의 목적으로만 제공할 뿐, 어떠한 방식으로도 본 발명의 범위를 제한하고자 함은 아니다. 실제로, 본원에 나타내고 기재된 것에 더하여 본 발명의 다양한 변형은 상기 기술로부터 당업자에게는 명백할 것이고, 첨부한 청구항의 범위 내에 존재할 것이다.

실시예 1: 내장 통증 모델

이 실시예는 내장 통증 모델에서의 항-CGRP 길항제 항체 치료의 효과를 예시한다.

IBS를 갖는 환자는 결장직장 팽창에 대해서 더 낮은 내장 감각 역치를 갖는 것으로 나타났고, 이것은 내장 통증 증상에 대해 높은 상관관계가 있다 (문헌 [Delafoy et al, 2006]). 내장 과민성의 메카니즘을 밝혀내기 위해 많은 연구원에 의해 사용되는 동물 모델은 래트에서의 TNBS-유도된 대장염 후의 결장직장 팽창이다 (문헌 [Gay et al, 2006, Delafoy et al, 2006, Adam et al., 2006]). 이 실시예에 있어서, 래트 TNBS 대장염 모델은 CGRP에 대한 기능-차단 항체의 효과를 시험하기 위해 사용되었다. 모델에 있어서, 인간 IBS 연구에서와 같이 내장 통증 역치는 결장의 풍선 팽창에 대한 반응에 의해 측정된다.

밤새 단식한 다음, 1 ml/kg의 투여량에서 케타민 (80 mg/ml)/크실라진 (12 mg/ml)으로 래트를 마취시켰다. 복부 개복술을 수행하고, TNBS 용액 (30% 에탄올 중 1.5 ml/kg에서 50 mg, "TNBS 처리 군") 또는 30% 에탄올 용액 ("모의 군")을 막창자로부터 근위부의 결장 1 cm 말단으로 주사하였다. 모의 군을 비-대장염 대조군으로서 사용하였다. 수술 후 5일째에, TNBS 처리 군을 두 개의 군으로 세분하였다. 한 군은 10 mg/kg 정맥내에서 항-CGRP 길항제 모노클로날 항체 4901 (시그마(Sigma) (미국, 미주리주), 생성물 번호 C7113, 클론 #4901로 시판됨)를 받았다. 다른 군은 음성 대조군으로서 비히클 (PBS, 0.01% 트윈(tween) 20)을 받았다.

수술 후 7일째에, 2차로 밤새 단식한 다음, 11% 이하의 체중 손실을 유지하는 TNBS 처리된 래트를 풍선 팽창으로 내장 통증 역치를 시험하였다. 카테터에 부착된 5 cm 라텍스 풍선을 풍선 바닥이 항문으로부터 5 cm인 말단 결장으로 삽입하였다. 카테터를 풍선의 움직임을 방지하기 위해 테이프로 꼬리에 고정시켰다. 30-분의 순응 기간 후에 풍선을 30-초 간격으로 5 mmHg에서 80 mmHg으로 순차적으로 팽창시켰다. 알파 위치로 알려진 상투적인 설치류 내장 통증 자세를 유도하기 위해 필요한 역치 압력에서 풍선 팽창을 정지하고 (뒷발 (hindpaw)의 내향 회전을 갖는 사선의 근육계의 수축의 반복된 파장), 이는 내장 통증 역치로서 기록되었다.

모의 절차를 수행한 래트는 수술 후 7일에 36.8+/-2.6 (N=5, 평균+/-se)의 역치를 갖는다 (도 1a). 5일에 항체 4901 (10mg/kg)를 받은 TNBS 처리된 래트는 7일에 32.3+/-4.1 (N=9)의 역치를 가졌고, 5일에 비히클을 받은 TNBS 처리된 래트의 7일 역치 (21.0+/-3.0, N=10)와 통계적으로 상당하게 상이하였다 (시험 후 원-웨이 아노바 (ANOVA) 및 던넷(Dunnet)의 다발성 비교) (도 1a). 4901의 효과는 CGRP 수용체 길항제 CGRP 8-37과 비슷하였다 (도 1b). 이 결과는 내장 통증 모델에서 항-CGRP 길항제 항체가 내장 통증 역치를 모의 역치로 상당하게 이동시키는 것, 즉, 통증의 전환에 효과적이라는 것을 입증하였다.

실시예 2: 상호작용 분석 및 결합 검정법

상호작용 분석은 표준 비아코어 러닝(running) 완충액 (HBS-P 또는 HBS-EP)을 사용하여 스트렙타비딘-코팅된 (SA) 센서 칩 (비아코어 아베 (Biacore AB), 스웨덴 웁살라 소재)이 장착된 비아코어 (Biacore) 3000(상표명) 시스템 상에서 25℃ 및 37℃에서 수행하였다. N-LC-비오티닐화된 인간 및 래트 α- 및 β-CGRP는 낮은 수준 (전형적으로 100 반응 단위)에서 개인 유동 세포 상에서 캡쳐되어 반응 표면을 제공하는 반면에 비변형된 유동 세포는 레퍼런스 채널(reference channel)로서 제공된다. 항체 G1 및 G2의 정제된 Fab 단편이 발생되었다. 전형적으로, Fab는 최고 농도로써 0.5 μM을 사용하여 2-배 계열 희석함으로써 제조하였고, 해리 시간 동안 2시간까지 허용하여 100 μl/분에서 1-분 동안 주사하였다. G1 Fab에 대해서 50% v/v 에탄올 + 25 mM NaOH 및 G2 Fab에 대해서 2:1 v/v 피얼스 젠틀 일루션(Pierce Gentle Elution) 완충제/4M NaCl의 혼합물로 표면을 재생하였다. 검정이 재현되었다는 것을 입증하기 위해 Fab 주사를 2회 반복하였다. 결합 반응은 이중-참고되었고, 비아이밸류에이션(BiaEvaluation) v. 4.0 소프트웨어를 사용하는 단순한 모델에 대해서 세계적으로 적합하다. 친화도는 동력 비율 상수 (K_D=k_오프/k_온)의 몫으로부터 추론하였다.

항체 G1에 대한 결과는 하기 표 1에 나타내었다. 항체 G1은 유사하고 밀착하는 친화도로 인간 α- 및 β-CGRP에 결합한다 (K_D = 163 및 155 pM, 각각 20-분 해리 시간을 허용하여 37℃에서 동일한 칩 상에서 나란히 분석된 경우임). 인간 및 게먹이 원숭이(cynomolgus monkey)는 동일한 서열을 갖고; 따라서, 인간 데이터는 또한 게먹이 원숭이에 대해 적용한다. G1은 또한 래트 CGRP과 결합하지만 α- 및 β-이소형으로 식별한다 (각각, 37℃에서 K_D = 2.57 nM 및 <150 pM).

α-인간, β-인간, 및 β-인간-CGRP로부터의 G1 Fab의 해리는 매우 느리게 발생한다. 따라서, 해리 상이 매우 긴 시간 동안 모니터링 되지 않는 한, 오프레이트 (offrate, k_오프)는 정확하게 측정될 수 없다. 일반적인 경험상으로, 정확한 오프레이트의 보고를 위한 허용된 해리 시간에 걸쳐서 5% 이상에서 결합 반응이 붕괴된다. 그러나, 비아코어 상에서 긴 해리 시간을 모니터링하는 것은 기저선(baseline) 드리프트에 의해 방해되고, 이는 특히 동력학 분석을 위해 필요한 낮은 표면 수용력에서 동작하는 경우에 도전적이 된다. 이 연구에서, 해리 상은 α-CGRP에 대해서는 2시간 넘게 이어지지만 β-CGRP에 대해서는 단지 20분 넘게 이어진다. 결과에서와 같이, β-CGRP에 대한 오프레이트는 α-CGRP의 오프레이트와 같이 정확하게 해결될 수 없다. 그러나, 동일한 조건 하에 20-분 해리 시간을 사용하여 동일한 칩 상에서 나란히 검정되는 경우, G1은 α-인간/cyno, β-인간/cyno, 및 β-래트 CGRP에 대해서 사실상 동일한 결합 동력학을 갖는다 (37℃에서 K_D = 150 pM).

항체 G2에 대한 결과는 표 2에 나타냈다. 항체 G2는 α- 및 β-인간 CGRP (25℃에서 각각 K_D = 19nM 및 20nM) 보다 더 밀착되는 친화도 (25℃에서 K_D = 0.9nM)로 α-래트 CGRP와 결합한다. G2 결합 β-래트 CGRP는 이 검정 포맷에서 조사되지는 않았지만 역 배향 검정 포맷에서의 α- 및 β-인간 CGRP에 대해 비슷한 결합 특징을 나타냈다 (데이터는 나타내지 않음).

인간 α-CGRP가 CGRP1-수용체에 결합하지 못하도록 차단하는 항-CGRP G1 항체의 IC₅₀을 측정하기 위하여 결합 검정법을 실시하였다. 총 용량 1 mL로 10 pM ¹²⁵I-인간 α-CGRP 및 항-CGRP 항체의 다양한 농도 (0.015 nM - 33 nM)를 함유하는 인큐베이션 완충액 (50 mM 트리스-HCl, pH 7.4, 5 mM MgCl₂, 0.1％ BSA)중에서 SK-N-MC 세포로부터의 막 (25 ㎍)을 90분 동안 25℃에서 인큐베이션시켰다. 0.5％ 폴리에틸렌이민으로 차단된 유리 미세섬유 필터 (GF/B, 1 ㎛)를 통해 여과시킴으로써 인큐베이션을 종결시켰다. 단백질-결합 방사활성을 감마 카운터에서 측정하였다. 용량 반응 곡선을 플롯팅하고, K_i 값은 식: K_i= IC₅₀/(1+([리간드]/K_D) (여기에서, 평형 해리 상수 K_D = 8 pM (SK-N-MC 세포에 존재하는 바와 같이 CGRP1 수용체에 대한 인간 α-CGRP의 경우)을 사용하여 측정하였다. 기록된 IC₅₀ 값 (IgG 분자에 대해서)을 결합 부위로 전환시켜 (비아코어가 Fab 단편의 분석이라는 사실을 허용하도록 2를 곱한다) 비아코어에 의해 측정된 친화력 (K_D)과 비교할 수 있도록 하였다. 관찰된 IC₅₀ (1.8nM)은 등가 온도에서 비아코어에 의해 관찰된 K_D (42 pM)보다 23 배 더 높았다. 이러한 미스매치는 결합 검정법의 감수성의 결핍 가능성을 반영한다.

실시예 3: 내장 통증 모델

이 실시예는 내장 통증 모델에서 항-CGRP 길항제 항체 치료의 효과를 예시한다.

이 실시예에서, 래트 간질성 방광염 모델은 CGRP에 대한 기능-차단 항체의 시험 효과를 테스트하기 위해 사용되었다. 모델에서, 내장 과민성은 방광의 투르펜틴 자극에 대한 반응에 있어서의 방광 운동성에 의해 측정된다.

암컷 래트는 방광내압측정법 동안 우레탄 마취 하에서 유지되고, 회복은 허용되지 않는다. 신체 온도는 직장 프로브(probe)의 사용에 의해서 37℃에서 유지되고, 자동온도조절적으로 온도 조절 열 패드에 연결된다. 래트의 한 군 (n = 7)은 10 mg/kg 정맥내에서 항-CGRP 길항제 모노클로날 항체 4901 (시그마 (미국, 미주리주), 생성물 번호 C7113, 클론 #4901로 시판됨)를 받았다. 또다른 군 (n = 7)은 음성 대조군으로서 비히클 (PBS, 0.01% 트윈 20)을 받았다.

4901 또는 비히클로 투여 후 24시간에서, 래트를 마취하고, PE50 튜빙(tubing) (1 mm OD)으로 요도를 경유하여 방광에 카테터를 꽂고, 일반 염수로 방광의 0.06 ml/분 충진 (실린지 펌프를 사용함)을 허용하였다. 튜빙은 방광 근위부에 T 연결부위를 갖고 있어서 압력 변환기로 방광의 압력을 모니터링하게 허용하였다. 압력 및 수축을 14-분 간격 (0.84 ml 총 부피) 동안 모니터링하여 방광 운동성을 측정하였다. 기저선 방광내압측정도를 확립한 후, 방광 자극을 1시간 동안 0.5 mL의 50% 투르펜틴 오일의 주입에 의해 창출하였다. 이어서 방광을 배수하고, 방광 운동성의 후속 시험을 사후 (1시간), 3시간 및 5시간 사후-투르펜틴에서 즉시 수행하였다.

방광내압측정도 절차 전 24시간에 항체 4901 (10 mg/kg)을 받은 래트는 비히클을 받은 래트에 비해 측정된 모든 시점에서 더 적은 방광 수축을 나타냈다 (도 2). 이 결과는 항-CGRP 길항제 항체가 내장 통증 모델에서 투르펜틴 자극에 대한 반응에서의 방광 운동성의 감소, 즉 통증의 전화에 있어서 효과적이라는 것을 입증한다.

생물학적 물질의 기탁

하기의 물질들은 미국 20110-2209 버지니아주 매나서스 유니버시티 불러버드 10801에 소재하는 아메리칸 타입 컬쳐 콜렉션 (ATCC)에 기탁되었다:

벡터 pEb.CGRP.hKGI는 G1 경쇄 가변 영역 및 경쇄 카파 불변 영역을 코딩하는 폴리뉴클레오티드이고; 벡터 pDb.CGRP.hFcGI는 하기 돌연변이: A330P331에서 S330S331로 (야생형 IgG2 서열을 참조하여 번호매김한 아미노산; (문헌 [Eur. J. Immunol. (1999) 29:2613-2624]를 참조할 수 있다))을 함유하는 G1 중쇄 가변 영역 및 중쇄 IgG2 불변 영역을 코딩하는 폴리뉴클레오티드이다.

이러한 기탁은 특허절차상 미생물 기탁의 국제적 승인에 관한 부다페스트 조약 및 이러한 조약 (부다페스트 조약) 하의 규정의 조항 하에 이루어졌다. 이는 기탁일로부터 30년 동안 기탁물의 생존 배양의 유지를 보장한다. 기탁물은 부다페스트 조약의 조건하에, 그리고 리나트 뉴로사이언스 코퍼레이션(Rinat Neuroscience Corp.)과 ATCC 간의 협약을 조건으로 ATCC로부터 입수가능할 것이고, 상기 협약은 관련된 미국 특허의 허여 시 또는 임의의 미국 또는 외국 특허 출원의 공개 시 (어느 것이든지 먼저인 것), 기탁된 배양물의 자손을 영구적이고 비제한적으로 공중이 입수할 수 있는 것을 보장하고, 35 USC 122항 및 이에 따른 특허상표청장의 규칙 (886 OG 638에 대한 특정 참조와 함께 37 CFR 1.14항 포함)에 따라 자격이 있는 것으로 미국 특허상표청장에 의해 결정된 이가 자손을 입수할 수 있는 것을 보장한다.

본 출원의 양도인은 기탁된 물질의 배양물이 적합한 조건 하에 배양되었을 때 사망하거나, 손실되거나 파괴되면, 물질이 공고시에 즉시 동일한 또다른 것으로 대체될 것이라는 것에 동의하였다. 기탁된 물질의 입수가능성은 어떠한 정부의 권한 하에 이의 특허법에 따라 수여된 권리를 위반하여 발명을 실행하는 자격증으로 해석되지 않아야 한다.

본원에 개시된 다양한 실시양태에 대해 유용한 항체 서열이 하기에 주어진다.

항체 서열

항체 G1 중쇄 가변 영역 아미노산 서열 (서열 1)

항체 G1 경쇄 가변 영역 아미노산 서열 (서열 2)

항체 G1 CDR H1 (확장된 CDR ) (서열 3)

항체 G1 CDR H2 ( 카바트 CDR 과 동일한 확장된 CDR ) (서열 4)

항체 G1 CDR H3 (서열 5)

항체 G1 CDR L1 (서열 6)

항체 G1 CDR L2 (서열 7)

항체 G1 CDR L3 (서열 8)

항체 G1 중쇄 가변 영역 뉴클레오티드 서열 (서열 9)

항체 G1 경쇄 가변 영역 뉴클레오티드 서열 (서열 10)

항체 G1 중쇄 전체 항체 아미노산 서열 (본원에 기재된 바와 같은 변형된 IgG2 를 포함함) (서열 11)

항체 G1 경쇄 전체 항체 아미노산 서열 (서열 12)

항체 G1 중쇄 전체 항체 뉴클레오티드 서열 (본원에 기재된 바와 같은 변형된 IgG2를 포함함) (서열 13)

항체 G1 경쇄 전체 항체 뉴클레오티드 서열 (서열 14)

인간 및 래트 CGRP (인간 α-CGRP (서열 15); 인간 β-CGRP (서열 16); 래트 α-CGRP (서열 17); 및 래트 β-CGRP (서열 18))의 아미노산 서열 비교:

항체 G2 중쇄 가변 영역 아미노산 서열 (서열 19)

항체 G2 경쇄 가변 영역 아미노산 서열 (서열 20)

항체 G2 CDR H1 ( 카바트 CDR ) (서열 21)

항체 G2 CDR H2 (확장된 CDR ) (서열 22)

항체 G2 CDR H3 (서열 23)

항체 G2 CDR L1 (서열 24)

항체 G2 CDR L2 (서열 25)

항체 G2 CDR L3 (서열 26)

항체 G2 중쇄 가변 영역 뉴클레오티드 서열 (서열 27)

항체 G2 경쇄 가변 영역 뉴클레오티드 서열 (서열 28)

항체 G2 중쇄 전체 항체 아미노산 서열 ( Fc 도메인을 포함하지 않음) (서열 29)

항체 G2 경쇄 전체 항체 아미노산 서열 (서열 30)

항체 G2 중쇄 전체 항체 뉴클레오티드 서열 ( Fc 도메인을 포함하지 않음) (서열 31)

항체 G2 경쇄 전체 항체 뉴클레오티드 서열 (서열 32)

항체 G1 CDR H1 ( 초티아 CDR ) (서열 33)

항체 G1 CDR H1 ( 카바트 CDR ) (서열 34)

항체 G1 CDR H2 ( 초티아 CDR ) (서열 35)

항체 G2 CDR H1 (확장된 CDR ) (서열 36)

항체 G2 CDR H1 ( 초티아 CDR ) (서열 37)

항체 G2 CDR H2 ( 초티아 CDR ) (서열 38)

비록 개시된 기술이 다양한 출원, 방법, 키트, 및 조성물을 참조하여 기재되었지만, 다양한 변화 및 변형이 본원의 기술 및 하기 청구된 발명으로부터 출발하지 않고 만들어질 수 있다는 것이 이해될 것이다. 상기 예는 개시된 기술을 더 예시하기 위해 제공되고, 본 원에 제시된 기술의 범위를 제한하고자 함이 아니다. 본 발명의 기술이 이들 예시적인 실시양태에 대해서 기재하고 있지만, 당업자는 이들 예시적인 실시양태의 수많은 변화 빛 변형이 과도한 실험없이 가능하다는 것을 쉽게 이해할 것이다. 모든 이러한 변화 및 변형은 현재의 기술의 범위 내에 존재한다.

본원에 사용된 섹션 헤딩 (section heading)은 유기적인 목적으로만 존재하고, 어떠한 방식으로든 기재된 대상체를 제한하고자 하는 것으로 해석되어서는 안된다. 본 발명의 기술에서 논의된 온도, 농도, 횟수 등의 앞에 '약'이 의미하는 것은 본원 발명의 기술의 범위 내에 약간의 편차 및 실체가 없는 편차가 존재하는 것이라고 이해될 것이다. 본원에서, 달리 특별히 언급하지 않는다면 단수의 사용은 복수를 포함한다. 또한, "포함하다(comprise)", "포함하다(comprises)", "포함하는(comprising)", "함유하다(contain)", "함유하다(contains)", "함유하는(containing)", "포함하다(include)", "포함하다(includes)", 및 "포함하는(including)"의 사용은 제한하고자 함이 아니다. 상기 일반적인 기술 및 하기 상술된 기술은 둘 다 예시 및 설명을 위한 것일 뿐, 본 발명을 제한하지는 않는다는 것이 이해된다.

특허, 특허 출원, 서류, 문서, 문헌 등을 비롯한 본원에 인용된 모든 참고문헌 및 그 안에 인용된 상기 참고문헌은 이미 인용하지 않는 정도로 그 전문이 본원에 참조로 포함된다. 하나 이상의 포함된 문헌 및 유사한 물질이 본 출원과 상이하거나 모순되는 경우에서, 본 출원 조절은 정의된 용어, 용어 사용, 기재된 기술 등을 포함하지만 이들로 한정되지는 않는다.

상기 기술 및 예는 본 발명의 어떠한 특정 실시양태를 상술하고, 본 발명자에 의해 고려되는 최상의 방식을 기재한다. 아무리 상기 상술된 내용이 본문 중 나타날지라도, 본 발명이 많은 방법으로 실행될 수 있고, 본 발명이 첨부된 청구항 및 임의의 그의 등가물에 따라서 해석되어 질 것이라는 것이 이해될 것이다.

ATCC PTA-6866 20050715 ATCC PTA-6867 20050715

SEQUENCE LISTING <110> RINAT NEUROSCIENCE CORP. <120> Methods for Treating Visceral Pain by Administering Antagonist Antibodies Directed Against Calcitonin Gene-Related Peptide <130> PC33920A <150> US 61/237,901 <151> 2009-08-28 <160> 39 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 122 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic polypeptide, Antibody G1 heavy chain variable region <400> 1 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Trp Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Glu Ile Arg Ser Glu Ser Asp Ala Ser Ala Thr His Tyr Ala Glu 50 55 60 Ala Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser 65 70 75 80 Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Leu Ala Tyr Phe Asp Tyr Gly Leu Ala Ile Gln Asn Tyr Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 2 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic polypeptide, Antibody G1 light chain variable region <400> 2 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Lys Arg Val Thr Thr Tyr 20 25 30 Val Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Asn Arg Tyr Leu Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Ser Gln Ser Tyr Asn Tyr Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 3 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic polypeptide, Antibody G1 CDR H1 <400> 3 Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Trp Ile Ser 1 5 10 <210> 4 <211> 19 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic polypeptide, Antibody G1 CDR H2 <400> 4 Glu Ile Arg Ser Glu Ser Asp Ala Ser Ala Thr His Tyr Ala Glu Ala 1 5 10 15 Val Lys Gly <210> 5 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic polypeptide, Antibody G1 CDR H3 <400> 5 Tyr Phe Asp Tyr Gly Leu Ala Ile Gln Asn Tyr 1 5 10 <210> 6 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic polypeptide, Antibody G1 CDR L1 <400> 6 Lys Ala Ser Lys Arg Val Thr Thr Tyr Val Ser 1 5 10 <210> 7 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic polypeptide, Antibody G1 CDR L2 <400> 7 Gly Ala Ser Asn Arg Tyr Leu 1 5 <210> 8 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic polypeptide, Antibody G1 CDR L3 <400> 8 Ser Gln Ser Tyr Asn Tyr Pro Tyr Thr 1 5 <210> 9 <211> 366 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide, Antibody G1 heavy chain variable region <400> 9 gaagttcagc tggttgaatc cggtggtggt ctggttcagc caggtggttc cctgcgtctg 60 tcctgcgctg cttccggttt caccttctcc aactactgga tctcctgggt tcgtcaggct 120 cctggtaaag gtctggaatg ggttgctgaa atccgttccg aatccgacgc gtccgctacc 180 cattacgctg aagctgttaa aggtcgtttc accatctccc gtgacaacgc taagaactcc 240 ctgtacctgc agatgaactc cctgcgtgct gaagacaccg ctgtttacta ctgcctggct 300 tactttgact acggtctggc tatccagaac tactggggtc agggtaccct ggttaccgtt 360 tcctcc 366 <210> 10 <211> 321 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide, Antibody G1 light chain variable region <400> 10 gaaatcgttc tgacccagtc cccggctacc ctgtccctgt ccccaggtga acgtgctacc 60 ctgtcctgca aagcttccaa acgggttacc acctacgttt cctggtacca gcagaaaccc 120 ggtcaggctc ctcgtctgct gatctacggt gcttccaacc gttacctcgg tatcccagct 180 cgtttctccg gttccggttc cggtaccgac ttcaccctga ccatctcctc cctggaaccc 240 gaagacttcg ctgtttacta ctgcagtcag tcctacaact acccctacac cttcggtcag 300 ggtaccaaac tggaaatcaa a 321 <210> 11 <211> 448 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic polypeptide, Antibody G1 heavy chain <400> 11 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Trp Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Glu Ile Arg Ser Glu Ser Asp Ala Ser Ala Thr His Tyr Ala Glu 50 55 60 Ala Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser 65 70 75 80 Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Leu Ala Tyr Phe Asp Tyr Gly Leu Ala Ile Gln Asn Tyr Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro 115 120 125 Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr 130 135 140 Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr 145 150 155 160 Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro 165 170 175 Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr 180 185 190 Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp 195 200 205 His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys 210 215 220 Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser 225 230 235 240 Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg 245 250 255 Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro 260 265 270 Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala 275 280 285 Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val 290 295 300 Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr 305 310 315 320 Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr 325 330 335 Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu 340 345 350 Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys 355 360 365 Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser 370 375 380 Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp 385 390 395 400 Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser 405 410 415 Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala 420 425 430 Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 12 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic polypeptide, Antibody G1 light chain <400> 12 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Lys Arg Val Thr Thr Tyr 20 25 30 Val Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Asn Arg Tyr Leu Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Ser Gln Ser Tyr Asn Tyr Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 13 <211> 1347 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide, Antibody G1 heavy chain <400> 13 gaagttcagc tggttgaatc cggtggtggt ctggttcagc caggtggttc cctgcgtctg 60 tcctgcgctg cttccggttt caccttctcc aactactgga tctcctgggt tcgtcaggct 120 cctggtaaag gtctggaatg ggttgctgaa atccgttccg aatccgacgc gtccgctacc 180 cattacgctg aagctgttaa aggtcgtttc accatctccc gtgacaacgc taagaactcc 240 ctgtacctgc agatgaactc cctgcgtgct gaagacaccg ctgtttacta ctgcctggct 300 tactttgact acggtctggc tatccagaac tactggggtc agggtaccct ggttaccgtt 360 tcctccgcct ccaccaaggg cccatctgtc ttcccactgg ccccatgctc ccgcagcacc 420 tccgagagca cagccgccct gggctgcctg gtcaaggact acttcccaga acctgtgacc 480 gtgtcctgga actctggcgc tctgaccagc ggcgtgcaca ccttcccagc tgtcctgcag 540 tcctcaggtc tctactccct cagcagcgtg gtgaccgtgc catccagcaa cttcggcacc 600 cagacctaca cctgcaacgt agatcacaag ccaagcaaca ccaaggtcga caagaccgtg 660 gagagaaagt gttgtgtgga gtgtccacct tgtccagccc ctccagtggc cggaccatcc 720 gtgttcctgt tccctccaaa gccaaaggac accctgatga tctccagaac cccagaggtg 780 acctgtgtgg tggtggacgt gtcccacgag gacccagagg tgcagttcaa ctggtatgtg 840 gacggagtgg aggtgcacaa cgccaagacc aagccaagag aggagcagtt caactccacc 900 ttcagagtgg tgagcgtgct gaccgtggtg caccaggact ggctgaacgg aaaggagtat 960 aagtgtaagg tgtccaacaa gggactgcca tccagcatcg agaagaccat ctccaagacc 1020 aagggacagc caagagagcc acaggtgtat accctgcccc catccagaga ggagatgacc 1080 aagaaccagg tgtccctgac ctgtctggtg aagggattct atccatccga catcgccgtg 1140 gagtgggagt ccaacggaca gccagagaac aactataaga ccacccctcc aatgctggac 1200 tccgacggat ccttcttcct gtattccaag ctgaccgtgg acaagtccag atggcagcag 1260 ggaaacgtgt tctcttgttc cgtgatgcac gaggccctgc acaaccacta tacccagaag 1320 agcctgtccc tgtctccagg aaagtaa 1347 <210> 14 <211> 645 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide, Antibody G1 light chain <400> 14 gaaatcgttc tgacccagtc cccggctacc ctgtccctgt ccccaggtga acgtgctacc 60 ctgtcctgca aagcttccaa acgggttacc acctacgttt cctggtacca gcagaaaccc 120 ggtcaggctc ctcgtctgct gatctacggt gcttccaacc gttacctcgg tatcccagct 180 cgtttctccg gttccggttc cggtaccgac ttcaccctga ccatctcctc cctggaaccc 240 gaagacttcg ctgtttacta ctgcagtcag tcctacaact acccctacac cttcggtcag 300 ggtaccaaac tggaaatcaa acgcactgtg gctgcaccat ctgtcttcat cttccctcca 360 tctgatgagc agttgaaatc cggaactgcc tctgttgtgt gcctgctgaa taacttctat 420 ccgcgcgagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatccgg taactcccag 480 gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacc 540 ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggc 600 ctgagttctc cagtcacaaa gagcttcaac cgcggtgagt gctaa 645 <210> 15 <211> 37 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> Polypeptide, Alpha-CGRP <400> 15 Ala Cys Asp Thr Ala Thr Cys Val Thr His Arg Leu Ala Gly Leu Leu 1 5 10 15 Ser Arg Ser Gly Gly Val Val Lys Asn Asn Phe Val Pro Thr Asn Val 20 25 30 Gly Ser Lys Ala Phe 35 <210> 16 <211> 37 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> Polypeptide, Beta-CGRP <400> 16 Ala Cys Asn Thr Ala Thr Cys Val Thr His Arg Leu Ala Gly Leu Leu 1 5 10 15 Ser Arg Ser Gly Gly Met Val Lys Ser Asn Phe Val Pro Thr Asn Val 20 25 30 Gly Ser Lys Ala Phe 35 <210> 17 <211> 37 <212> PRT <213> Rattus norvegicus <220> <223> Polypeptide, Alpha-CGRP <400> 17 Ser Cys Asn Thr Ala Thr Cys Val Thr His Arg Leu Ala Gly Leu Leu 1 5 10 15 Ser Arg Ser Gly Gly Val Val Lys Asp Asn Phe Val Pro Thr Asn Val 20 25 30 Gly Ser Glu Ala Phe 35 <210> 18 <211> 37 <212> PRT <213> Rattus norvegicus <220> <223> Polypeptide, Beta-CGRP <400> 18 Ser Cys Asn Thr Ala Thr Cys Val Thr His Arg Leu Ala Gly Leu Leu 1 5 10 15 Ser Arg Ser Gly Gly Val Val Lys Asp Asn Phe Val Pro Thr Asn Val 20 25 30 Gly Ser Lys Ala Phe 35 <210> 19 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic polypeptide, Antibody G2 heavy chain variable region <400> 19 Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Ser 20 25 30 Val Met His Trp Val Lys Gln Lys Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Tyr Ile Asn Pro Tyr Asn Asp Gly Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ser Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Gly Gly Asn Asp Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 20 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic polypeptide, Antibody G2 light chain variable region <400> 20 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Thr Thr Met Ala Ala Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Lys Ile Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Ile Ser Ser Ile 20 25 30 Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Phe Ser Pro Lys Val Leu 35 40 45 Ile Tyr Arg Ala Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Gly Thr Met Glu 65 70 75 80 Ala Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Ser Thr Ile Pro 85 90 95 Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 21 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic polypeptide, Antibody G2 Kabat CDR H1 <400> 21 Ser Ser Val Met His 1 5 <210> 22 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic polypeptide, Antibody G2 CDR H2 <400> 22 Tyr Ile Asn Pro Tyr Asn Asp Gly Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 23 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic polypeptide, Antibody G2 CDR H3 <400> 23 Gly Gly Asn Asp Gly Tyr 1 5 <210> 24 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic polypeptide, Antibody G2 CDR L1 <400> 24 Ser Ala Ser Ser Ser Ile Ser Ser Ile Tyr Leu His 1 5 10 <210> 25 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic polypeptide, Antibody G2 CDR L2 <400> 25 Arg Ala Ser Asn Leu Ala Ser 1 5 <210> 26 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic polypeptide, Antibody G2 CDR L3 <400> 26 Gln Gln Gly Ser Thr Ile Pro Phe Thr 1 5 <210> 27 <211> 345 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide, Antibody G2 heavy chain variable region <400> 27 gaggtccagc tgcagcagtc tggacctgag ctggtaaagc ctggggcttc agtgaagatg 60 tcctgcaagg cttctggata cacattcact agctctgtta tgcactgggt gaagcagaag 120 cctgggcagg gccttgagtg gattggatat attaatcctt acaatgatgg tactaagtac 180 aatgagaagt tcaaaggcaa ggccacactg acttcagaca aatcctccag cacagcctac 240 atggaactca gcagcctgac ctctgaggac tctgcggtct attactgtgc aaaagggggt 300 aacgatggct actggggcca aggcactact ctcacagtct cctca 345 <210> 28 <211> 324 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide, Antibody G2 light chain variable region <400> 28 gaaattgtgc tcacccagtc tccaaccacc atggctgcat ctcccgggga gaagatcact 60 atcacctgta gtgccagctc aagtataagt tccatttact tgcattggta tcagcagaag 120 ccaggattct cccctaaagt cttgatttat agggcatcca atctggcttc tggagtccca 180 gctcgcttca gtggcagtgg gtctgggacc tcttactctc tcacaattgg caccatggag 240 gctgaagatg ttgccactta ctactgccag cagggtagta ctataccatt cacgttcggc 300 tcggggacaa agttggaaat aaaa 324 <210> 29 <211> 216 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic polypeptide, Antibody G2 heavy chain <400> 29 Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Ser 20 25 30 Val Met His Trp Val Lys Gln Lys Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Tyr Ile Asn Pro Tyr Asn Asp Gly Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ser Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Gly Gly Asn Asp Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr 100 105 110 Val Ser Ser Ala Lys Thr Thr Pro Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro 115 120 125 Gly Ser Ala Ala Gln Thr Asn Ser Met Val Thr Leu Gly Cys Leu Val 130 135 140 Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Thr Trp Asn Ser Gly Ser 145 150 155 160 Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu 165 170 175 Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val Thr Val Pro Ser Ser Thr Trp Pro Ser 180 185 190 Glu Thr Val Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val 195 200 205 Asp Lys Lys Ile Val Pro Arg Asp 210 215 <210> 30 <211> 215 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic polypeptide, Antibody G2 light chain <400> 30 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Thr Thr Met Ala Ala Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Lys Ile Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Ile Ser Ser Ile 20 25 30 Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Phe Ser Pro Lys Val Leu 35 40 45 Ile Tyr Arg Ala Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Gly Thr Met Glu 65 70 75 80 Ala Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Ser Thr Ile Pro 85 90 95 Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Ala Asp Ala 100 105 110 Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu Gln Leu Thr Ser 115 120 125 Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Asp 130 135 140 Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg Gln Asn Gly Val 145 150 155 160 Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met 165 170 175 Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu Arg His Asn Ser 180 185 190 Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser Pro Ile Val Lys 195 200 205 Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys 210 215 <210> 31 <211> 648 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide, Antibody G2 heavy chain <400> 31 gaggtccagc tgcagcagtc tggacctgag ctggtaaagc ctggggcttc agtgaagatg 60 tcctgcaagg cttctggata cacattcact agctctgtta tgcactgggt gaagcagaag 120 cctgggcagg gccttgagtg gattggatat attaatcctt acaatgatgg tactaagtac 180 aatgagaagt tcaaaggcaa ggccacactg acttcagaca aatcctccag cacagcctac 240 atggaactca gcagcctgac ctctgaggac tctgcggtct attactgtgc aaaagggggt 300 aacgatggct actggggcca aggcactact ctcacagtct cctcagccaa aacgacaccc 360 ccatctgtct atccactggc ccctggatct gctgcccaaa ctaactccat ggtgaccctg 420 ggatgcctgg tcaagggcta tttccctgag ccagtgacag tgacctggaa ctctggatcc 480 ctgtccagcg gtgtgcacac cttcccagct gtcctgcagt ctgacctcta cactctgagc 540 agctcagtga ctgtcccctc cagcacctgg cccagcgaga ccgtcacctg caacgttgcc 600 cacccggcca gcagcaccaa ggtggacaag aaaattgtgc ccagggat 648 <210> 32 <211> 648 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide, Antibody G2 light chain <400> 32 gaaattgtgc tcacccagtc tccaaccacc atggctgcat ctcccgggga gaagatcact 60 atcacctgta gtgccagctc aagtataagt tccatttact tgcattggta tcagcagaag 120 ccaggattct cccctaaagt cttgatttat agggcatcca atctggcttc tggagtccca 180 gctcgcttca gtggcagtgg gtctgggacc tcttactctc tcacaattgg caccatggag 240 gctgaagatg ttgccactta ctactgccag cagggtagta ctataccatt cacgttcggc 300 tcggggacaa agttggaaat aaaacgggct gatgctgcac caactgtatc catcttccca 360 ccatccagtg agcagttaac atctggaggt gcctcagtcg tgtgcttctt gaacaacttc 420 taccccagag acatcaatgt caagtggaag attgatggca gtgaacgaca aaatggtgtc 480 ctgaacagtt ggactgatca ggacagcaaa gacagcacct acagcatgag cagcaccctc 540 acattgacca aggacgagta tgaacgacat aacagctata cctgtgaggc cactcacaag 600 acatcaactt cacccatcgt caagagcttc aacaggaatg agtgttaa 648 <210> 33 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic polypeptide, Antibody G1 Chothia CDR H1 <400> 33 Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 1 5 <210> 34 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic polypeptide, Antibody G1 Kabat CDR H1 <400> 34 Asn Tyr Trp Ile Ser 1 5 <210> 35 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic polypeptide, Antibody G1 Chothia CDR H2 <400> 35 Arg Ser Glu Ser Asp Ala Ser Ala 1 5 <210> 36 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic polypeptide, Antibody G2 extended CDR H1 <400> 36 Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Ser Val Met His 1 5 10 <210> 37 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic polypeptide, Antibody G2 Chothia CDR H1 <400> 37 Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Ser 1 5 <210> 38 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic polypeptide, Antibody G2 Chothia CDR H2 <400> 38 Asn Pro Tyr Asn Asp Gly 1 5 <210> 39 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 39 Gly Ser Lys Ala Phe 1 5

Claims (18)

1. 항-CGRP 길항제 항체 및 제약상 허용가능한 담체를 포함하며 말초 투여되도록 제조되고, 상기 항-CGRP 길항제 항체는 시험관내 결합 검정에서 측정된, CGRP (Calcitonin Gene-Related Peptide, 칼시토닌 유전자-관련된 펩티드)에 대한 결합 친화도 (K_D)가 50 nM 이하인, 개체에서 내장 통증 또는 내장 통증의 증상의 치료 또는 예방을 위한 제약 조성물.
2. 제1항에 있어서, 내장 통증이 기능성 장 장애 (FBD)와 연관된 것인 제약 조성물.
3. 제2항에 있어서, FBD가 위-식도 역류, 소화불량, 과민성 장 증후군 (IBS) 및 기능성 복부 통증 증후군 (FAPS)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 제약 조성물.
4. 제1항에 있어서, 내장 통증이 염증성 장 질환 (IBD)과 연관된 것인 제약 조성물.
5. 제4항에 있어서, IBD가 크론병 (Crohn's disease), 회장염 및 궤양성 대장염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 제약 조성물.
6. 제1항에 있어서, 내장 통증이 신산통, 월경곤란증, 방광염, 월경 주기, 분만, 폐경기, 전립선염 또는 췌장염과 연관된 것인 제약 조성물.
7. 제6항에 있어서, 내장 통증이 간질성 방광염 (IC)과 연관된 것인 제약 조성물.
8. 제1항에 있어서, 항-CGRP 길항제 항체가 생체내에서 7일 이상의 반감기를 갖는 것인 제약 조성물.
9. 제1항에 있어서, 항-CGRP 길항제 항체가 CGRP의 C-말단 영역에 특이적으로 결합하는 것인 제약 조성물.
10. 제9항에 있어서, 항-CGRP 길항제 항체가 서열 GSKAF (서열 39)에 의해 정의된 에피토프를 특이적으로 인식하는 것인 제약 조성물.
11. 제1항에 있어서, 항-CGRP 항체가 서열 1 또는 19에 나타낸 아미노산 서열을 갖는 VH 도메인을 포함하는 것인 제약 조성물.
12. 제1항에 있어서, 항-CGRP 항체가 서열 2 또는 20에 나타낸 아미노산 서열을 갖는 VL 도메인을 포함하는 것인 제약 조성물.
13. 제1항에 있어서, 항-CGRP 항체가
    (a) 서열 3, 21, 33, 34, 36 또는 37에 제시된 바와 같은 CDR H1;
    (b) 서열 4, 22, 35 또는 38에 제시된 바와 같은 CDR H2;
    (c) 서열 5 또는 23에 제시된 바와 같은 CDR H3;
    (d) 서열 6 또는 24에 제시된 바와 같은 CDR L1;
    (e) 서열 7 또는 25에 제시된 바와 같은 CDR L2; 및
    (f) 서열 8 또는 26에 제시된 바와 같은 CDR L3
    으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 CDR을 포함하는 것인 제약 조성물.
14. 제1항에 있어서, 항-CGRP 항체가 서열 1에 나타낸 아미노산 서열을 갖는 VH 도메인 및 서열 2에 나타낸 아미노산 서열을 갖는 VL 도메인을 포함하는 것인 제약 조성물.
15. 제1항에 있어서, 항-CGRP 항체가 ATCC (American Type Culture Collection, 아메리칸 타입 컬쳐 콜렉션) 기탁 번호 (Accession Nos.) PTA-6867 및/또는 PTA-6866을 갖는 발현 벡터에 의해 생성되는 것인 제약 조성물.
16. 제1항에 있어서, 항-CGRP 항체가
    C-말단 라이신이 있거나 또는 없는, 서열 11에 나타낸 항체 G1 중쇄 전체 항체 아미노산 서열; 및
    서열 12에 나타낸 항체 G1 경쇄 전체 항체 아미노산 서열
    을 포함하는 것인 제약 조성물.
17. 제1항에 있어서, 항-CGRP 항체가
    서열 29에 나타낸 항체 G2 중쇄 전체 항체 아미노산 서열; 및
    서열 30에 나타낸 항체 G2 경쇄 전체 항체 아미노산 서열
    을 포함하는 것인 제약 조성물.
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