KR101385234B1

KR101385234B1 - 간기능을 위한 오가피추출물을 천연배지로 하여 획득한 오가피-버섯 발효물과, 이의 제조방법

Info

Publication number: KR101385234B1
Application number: KR1020110040316A
Authority: KR
Inventors: 조주현; 백순옥; 김봉균; 김충식; 김동일; 김형하; 이재영; 김현경
Original assignee: (주)휴럼
Priority date: 2011-04-28
Filing date: 2011-04-28
Publication date: 2014-04-15
Also published as: KR20120122263A

Abstract

본 발명은 오가피추출물로 이루어진 천연배지에 버섯종균을 배양/발효시켜 발효물(발효소재)을 획득하고, 이를 이용한 간 기능 개선과 관련된 간기능 개선용 식품에 관한 것이다.
더욱 상세하게는 생물반응기로 추출된 오가피추출물로 이루어진 천연배지를 준비하고, 상기 오가피추출물로 이루어진 천연배지에 버섯균사체를 배양하여 발효물을 제조하고, 상기 제조된 발효물을 유효성분으로 하는 간 기능개선용 제제에 관한 것이다.

Description

간기능을 위한 오가피추출물을 천연배지로 하여 획득한 오가피-버섯 발효물과, 이의 제조방법{Manufacturing Method of Fermented Materials for liver function improvement using Acanthopanax sp.}

본 발명은 오가피추출물로 이루어진 천연배지에 버섯종균을 배양/발효시켜 발효물(발효소재)을 획득하고, 이를 이용한 간 기능 개선과 관련된 간기능 개선용 식품에 관한 것이다.

더욱 상세하게는 생물반응기로 추출된 오가피추출물로 이루어진 천연배지를 준비하고, 상기 오가피추출물로 이루어진 천연배지에 버섯균사체를 배양하여 발효물을 제조하고, 상기 제조된 발효물을 유효성분으로 하는 간 기능개선용 제제에 관한 것이다.

오가피는 잎이 다섯 개로 갈라져 있으며 하나의 가지에 다섯 개의 잎이 나는 것이 좋다 하여 오가(五佳)라고 하였다가 지금의 오가(五加)로 바뀌었다고 하며, 특이한 냄새가 있고 맛은 맵고 쓰며 성질은 따듯하다.

이러한 오가피는 간과 신장의 기운을 보하여 힘줄과 뼈를 튼튼하게 하므로 사지마비, 구련, 허리와 무릎의 연약증상, 하지무력감, 골절상, 타박상, 부종 등에 쓰이며, 약리작용은 면역증강, 항산화, 항피로, 항고온, 항자극작용, 내분비기능조절, 혈압조절, 항방사능, 해독작용이 있는 것으로 알려져 있다.

상기와 같은 약리작용에 의하여 오가피를 이용한 다양한 기술이 제공되어 있다.

국내등록특허 제399374호의 오가피추출물 및 이를 포함하는 성장기 뼈 형성 촉진 및 골다공증 예방 또는 치료용 약학적 조성물과, 국내공개특허번호 제2003-86749호의 가시오가피의 성분이 함유된 버섯 및 이의 제조방법과, 국내공개특허번호 제2004-23122호의 가시오가피를 주성분으로 하는 조성물 및 그 제조방법과, 국내공개특허번호 제2002-93672호의 한방타조.오가피 추축액을 주제로한 건강식품과, 국내등록특허 제605292호의 신규한 오가피 및 오가피 열매, 가시오가피 다당체, 그 제조방법 및 그를 활성성분으로 함유하는 항암제 조성물과, 국내등록특허 제463984호의 가시오가피 엑기스를 주원료로한 자양음료의 제조방법 및 국내공개특허번호 제2005-100890호의 오가피 및 녹차 추출물을 함유하는 숙취해소용 조성물 등이 제공되어 있다.

상기와 같이 다양한 약리작용이 있는 오가피를 이용한 기술이 제공되어 있으며, 최근에는 오가피가 숙취해소에 우수한 효능을 발휘하는 것으로 알려져 오가피를 이용한 다양한 숙취해소를 위한 식품(음료)이 개발되고 있다.

상기 국내공개특허번호 제2003-86749호의 가시오가피의 성분이 함유된 버섯 및 이의 제조방법은 본 출원인과 유사하게 가시오가피의 성분이 함유된 버섯에 관한 것이나, 상기 선행기술에서는 가시오가피추출물을 천연물배지로 사용하지 않고, 미분화된 가시오가피 세포 배양액 또는 가시오가피 자실체를 분쇄한 후 버섯 재재 배지에 첨가하여 버섯종균을 배양하도록 이루어져 있다.

이와 같이 종래기술들은 (가시)오가피를 천연물배지로 사용하지 않음으로써, 버섯에 함유되는 오가피의 성분이 저하되거나 버섯에 함유되는 성분이 달라지는 문제점을 가진다.

상기 문제점을 해소하고자 본 발명은 발명된 것으로,

본 발명의 출원인은 오가피와 버섯을 이용하여 간기능 개선에 효과가 있는 추출물을 획득함에 있어 오가피를 생물반응기로 추출하여 오가피추출물을 제조하고 제조된 오가피추출물을 천연물배지로 하고 버섯 균사체를 접종하여 획득되어지는 다양한 발효물 중에서 간 기능 개선효과를 가지는 발효물을 선정하였으며, 이들 발효물 제조에 사용되는 버섯을 선택하고, 발효물의 획득하는 방법에 대한 기술을 제공하는데 목적이 있다.

즉, 본 발명에서는 생물반응기(발효조)에서 추출되는 오가피추출물을 천연물배지로 하여 버섯을 배양발효시켜 간기능 개선용 제제에 사용되는 오가피추출물-버섯 발효물을 제공하는 목적과, 상기 오가피추출물-버섯 발효물로부터 추출되는 추출물을 유효성분으로 함유하는 간 기능을 개선 시킬 수 있는 제제를 제공하는데 목적이 있다.

상기 목적을 달성하고자 이루어진 본 발명인 간기능을 위한 오가피추출물을 천연배지로 하여 획득한 오가피-버섯 발효물은, 오가피를 가열하여 획득한 오가피추출액을 생물반응기에서 가열멸균처리하여 천연배지용 오가피추출물을 획득하고, 상기 천연배지용 오가피추출물에 버섯종균을 접종하여, 배양 및 발효시켜 획득되는 것을 특징으로 한다.

즉, 본 발명인 간기능을 위한 오가피추출물을 천연배지로 하여 획득한 오가피-버섯 발효물은, 오가피추출액을 원료로 하는 천연배지용 오가피추출물을 제조하는 천연배지제조단계(S1)와; 상기 단계(S1)에서 제조된 천연배지용 오가피추출물에 버섯종균을 접종하는 접종단계(S2)와; 상기 단계(S2)에서 버섯종균을 접종한 오가피추출물로 이루어진 천연배지를 온도 22~34℃에서 2~9일 동안 배양 및 발효시키는 배양/발효단계(S3)로 획득한다.

상기 단계(S1)에서는, 오가피를 80~90℃로 20~30시간 가열하여 추출된 오가피추출액을 여과하고, 여과된 오가피추출액을 생물반응기에 단독 또는 첨가물과 함께 투입하여 113~125℃로 10~60분간 가열멸균처리하고, 실온(25~30℃)으로 급냉 처리하여 천연배지용 오가피추출물을 제조하며,

상기 첨가물은 천연물 또는 정제수이며, 상기 천연물은 동아 파쇄물, 동아추출물, 홍삼추출물, 수삼추출물, 수삼 파쇄물, 오미자추출물, 오미자 파쇄물 중 어느 하나 또는 2개 이상을 선택사용된다.

상기 사용되는 버섯종균은 영지버섯(Ganoderma lucidum), 상황버섯(Phellinus linteus), 붉은 동충하초(Cordyceps militaris ), 누에 동충하초(Paecilomyces japonica), 노루궁뎅이버섯(Hericium erinaceum), 아가리쿠스 브라제(Agaricus blazei), 표고버섯으로 이루어진 군으로부터 1종을 선택하여 단독으로 사용된다.

상기 본 발명인 오가피추출물을 천연배지로 한 오가피 발효물을 동결건조시켜 발효소재로 제작한다.

상기 오가피추출물을 천연배지로 한 발효물 또는 발효소재를 주원료로 하여 음료형태 또는 캡술형태 또는 환과 같은 정제형태로 가공하여 간기능 개선용 식품과 간기능 개선용 재제로 만들 수 있다.

상기와 같이 본 발명은 오가피추출액으로 이루어진 오가피추출물을 기본 천연배지로 하여 (약용)버섯을 발효시켜 발효물을 제조함으로써 상기 오가피 버섯 발효물은 관능적인측면에서도 우수할 뿐만아니라 간 기능 개선 소재로 유용하게 사용될 수 있다.

또한, 발효미생물로 사용한 영지버섯 등과 같은 약용버섯 유래의 항산화효과, 면역증강효과, 콜레스테롤 개선효과, 항암효과 등 다양한 생리활성효과를 나타내는 효과가 있다.

또한, 오가피추출액과 인체에 이로운 작용을 하는 천연물의 혼합물로 천연배지용 오가피추출물을 제조하고 이를 천연배지로 사용함으로써 이로부터 획득되는 발효물은 인체에 다양한 생리활성효과를 나타내는 효과가 있다.

도 1은 본 발명의 바람직한 실시예에 따른 오가피추출물을 천연배지로 한 발효물 제조방법을 도시한 블럭도.
도 2는 본 발명의 실시예 1에 따른 오가피추출물을 이용하여 제조된 오가피추출물 천연배지에 영지버섯을 배양/발효시킨 발효물.
도 3은 본 발명의 실시예 2에 따른 오가피추출물을 이용하여 제조된 오가피추출물 천연배지에 노루궁뎅이버섯을 배양/발효시킨 발효물.
도 4는 본 발명의 실시예 3에 따른 오가피추출물을 이용하여 제조된 오가피추출물 천연배지에 상황버섯을 배양/발효시킨 발효물.
도 5는 오가피추출물-버섯발효물의 ADH의 활성측정비교표.
도 6은 오가피추출물-버섯발효물의 ALDH의 활성측정비교표

첨부된 도면을 참조로 본 발명의 바람직한 실시예를 상세히 설명하도록 한다. 이에 앞서, 본 명세서 및 청구범위에 사용된 용어나 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정해서 해석되어서는 아니되며, 발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 원칙에 입각하여 본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야만 한다.

본 발명인 오가피추출물을 천연배지로 하는 간기능을 위한 오가피 발효물의 제조방법은, 오가피추출액을 주원료로 하는 천연배지용 오가피추출물을 제조하는 천연배지제조단계(S1)와, 상기 단계(S1)에서 제조된 천연배지용 오가피추출물에 버섯종균을 준비하는 버섯종균준비단계(S1-1)에서 준비된 버섯종균을 접종하는 접종단계(S2)와, 상기 단계(S2)에서 버섯종균을 접종한 오가피추출물로 이루어진 천연배지를 온도 22~34℃에서 2~9일 동안 배양/발효시키는 배양/발효단계(S3)와, 상기 배양/발효단계(S3)에서 배양/발효된 발효물을 획득하는 획득단계(S4), 상기 획득단계(S4)에서 획득(습득)된 발효물을 숙성시키는 숙성단계(S5)로 구성된다.

도 1은 본 발명인 오가피추출물을 천연배지로 하는 간기능을 위한 오가피 발효물의 제조방법의 일 실시예를 도시한 단계도로 이를 참조한다.

상기 오가피추출액을 주원료로 하는 천연배지용 오가피추출물을 제조하는 천연배지제조단계(S1)는, 오가피를 선별-분쇄-세척 단계를 거쳐서 압력상태(대기압이상의 압력하(약 1.2~2.2기압)에서 80~90℃에서 20~30시간 추출하여 얻은 오가피추출액을 여과하여 생물반응기인 발효조에 여과된 오가피추출액을 단독 또는 첨가물과 혼합하여 투입하여 113~125℃로 10~60분간 가열멸균처리하고, 실온(25~30℃)으로 급랭 처리하여 천연배지로 사용될 오가피추출물을 제조한다.

상기와 같이 천연배지로 사용될 오가피추출물은 오가피추출액을 단독으로 발효조에 투입하여 제조되거나, 또는 오가피추출액에 다른 첨가물을 첨가한 혼합물을 발효조에 투입하여 제조된다.

상기 첨가물은 천연물과 정제수이며, 본 발명의 실시예에서는 발효조에 오가피추출액과 천연물을 투입하여 천연배지로 사용될 오가피추출물을 제조하였으나, 발효조에 오가피추출액만을 투입하여 오가피추출물을 제조하고, 제조된 오가피추출물과 천연물을 혼합하여 혼합된 혼합물을 천연배지로 사용될 수도 있다. 이 또한 오가피추출물로 이루어진 천연배지로 칭한다.

상기 천연물(천연물추출물)은 동아추출물, 홍삼 추출물, 수삼 추출물[또는 수삼 파쇄물], 오미자 추출물[또는 오미자 파쇄물] 중 어느 하나 또는 2개 이상을 선택 사용한다.

상기 오가피추출물 천연배지를 형성하기 위한 혼합물은 오가피추출액(0.5~15birx)의 1~50중량%에 천연물 1~50중량%로 이루어지거나,

또는 상기 오가피추출물 천연배지를 형성하기 위한 혼합물은 오가피추출액(0.5~15birx)의 1~50중량%에 천연물과 정제수로 이루어진 혼합액 1~50중량%로 이루어진다.

상기 첨가물인 천연물(또는 천연물추출물)과 정제수로 이루어진 혼합액은 천연물(또는 천연물추출물) 1~99중량%와 정제수 1~99중량%로 이루어진다.

상기 버섯종균을 준비하는 버섯종균준비단계(S1-1)는, 버섯종균을 오가피추출물 천연배지에 접종할 수 있도록 최적조건에서 배양하는 것으로, 상기 버섯종균은 온도 22~34℃, 통기량은 0.3~0.8vvm의 조건에서 100~140 rpm으로 교반(Shaking Rate)하면서 3~8일간 배양한다.

이러한 상기 버섯종균은 영지버섯(Ganoderma lucidum), 상황버섯(Phellinus linteus), 붉은 동충하초(Cordyceps militaris ), 누에 동충하초(Paecilomyces japonica), 노루궁뎅이버섯(Hericium erinaceum), 아가리쿠스 브라제(Agaricus blazei), 표고버섯으로 이루어진 군으로부터 1종을 선택하여 단독으로 사용한다.

상기 버섯종균을 접종하는 접종단계(S2)는, 오가피추출물로 이루어진 천연배지가 들어있는 생물반응기인 발효조에 배양된 버섯종균(버섯 전배양액)을 접종하는 것으로, 상기 오가피추출물로 이루어진 천연배지에 5~15%(w/w)로 버섯종균을 접종한다.

상기 배양/발효 단계(S3)는, 버섯종균(전배양액)을 접종한 오가피추출물로 이루어진 천연배지를 최적조건(온도 22~32℃, 통기량 0.4~0.8vvm, 교반속도 100~140 RPM )에서 3~10일 동안 배양 및 발효시킨다.

상기 오가피추출물로 이루어진 천연배지가 들어있는 발효조(배양조)에 배양되는 버섯종균(전배양액)은 그 종균의 종류에 따라 배양 및 발효의 온도 및 기간에서 약간의 차이가 있다.

상기 오가피추출물로 이루어진 천연배지에 접종되는 버섯종균은 각각의 버섯종균의 특성 및 배양 정도에 따라 차이가 있으나, 보통 22~34℃의 온도와, 0.3~0.8vvm의 통기량, 그리고 80~140 rpm의 교반속도 조건하에서 3~8의 배양일수의 범위 내에서 조절하면서 발효조에 배양되는 버섯종균을 준비한다.

상세하게는, 영지버섯(Ganoderma lucidum)의 경우 종균접종 후 최적배양온도는 26~30℃, 통기량은 0.3 ~ 0.5vvm 조건하에서 배양하는 것이 적당하며, 붉은 동초하초(코디셉스 밀리타리스;Cordyceps militaris )의 경우 종균접종 후 최적배양온도는 22~26℃, 통기량은 0.3 ~ 0.5vvm 조건 하에서 배양하는 것이 적당하며, 상황버섯(페리누스 린테우스;Phellinus linteus)의 경우 종균접종 후 최적배양온도는 26~31℃, 통기량은 0.4 ~ 0.6vvm 조건 하에서 배양하는 것이 적당하며, 노루궁뎅이버섯(헤리시움 에리나세움;Hericium erinaceum)의 경우 최적배양온도는 22~25℃, 통기량은 0.4 ~ 0.6vvm 조건 하에서 배양하는 것이 적당하다.

상기 숙성 단계(S5)는 버섯종균이 접종된 오가피추출물로 이루어진 천연배지를 배양 및 발효시키는 배양/발효 단계(S3)와, 발효물을 획득하는 획득단계(S4)에 의하여 획득된 발효물(발효소재)을 사용하는 제품화 방법에 따라 추가되는 단계로써, 발효소재를 3~10℃ 저온에서 1~3일간 숙성시킨다.

상기와 같은 제조방법으로 제조된 발효물(발효소재)을 이용하여 직접 및 간접의 방식으로 섭취할 수 있도록 건강기능식품 및 일반식품으로 제조할 수 있는 것으로, 발효물(발효소재)을 이용한 간기능 개선용 식품 및 간기능 개선용 제제의 제조방법은,

첫째, 발효물(발효소재)을 직접섭취가 가능한 간기능 개선용 식품으로의 제조방법으로, 수득한 발효소재를 추출하여 직접 섭취가 가능하도록 포장하여 제품화한다.

둘째, 발효물(발효소재)을 추출 및 동결건조하여 건강기능식품 및 일반식품의 원료로 사용하는 방법으로, 획득(수득)한 발효물을 간접 섭취가 가능하도록 식품의 보조원료로 동결건조된 발효소재를 추출물을 첨가하여 식품을 제조한다.

셋째, 발효물(발효소재)을 음료의 주원료로 함으로써 간기능 개선용 식품의 음료로 제조한다.

즉, 상기와 같은 제조방법으로 제조된 발효물(발효소재)을 음료형태로 가공하거나, 캡술 형태로 가공하거나, 정제형태로 가공하여 제품화할 수 있는 것이다.

이하, 실시예를 통해 오가피추출물을 이루어진 천연배지로 한 발효물의 제조방법과 이를 이용한 간기능 개선용 식품을 상세히 설명한다.

1. 실시예 1

20L Bio-Reactor에서 오가피추출물로 이루어진 천연배지로 영지버섯(Ganoderma lucidum)을 이용한 발효소재 제조방법,

① 오가피추출물로 이루어진 천연배지를 준비하는 단계 : 오가피를 선별 - 절단 - 세척 단계를 거쳐서 압력하에 85℃에서 24시간 추출한 다음 여과하여 얻은 추출액을 90중량%와 동아마쇄액(선별-수세-절단-마쇄단계를 거친 마쇄액) 10중량%로 발효조에 투입한 다음 120℃에서 40분간 멸균한 다음 온도를 25℃까지 급랭하여 오가피추출물로 이루어진 천연배지를 준비한다.

② 영지버섯 종균을 준비하는 단계 : 영지버섯 균을 종균(전배양액)으로 사용하기 위해, 온도 26~30℃, Shaking Rate 120 RPM에서 4일간 배양하여 종균(전배양액)을 준비한다.

③ 영지버섯균을 접종하는 단계 : 상기 단계에서 준비된 오가피추출물 천연배지에 준비된 영지버섯 전배양액(종균)을 7%(w/w)를 접종한다.

④ 영지버섯 종균을 접종한 오가피추출물 천연배지를 배양 및 발효시키는 단계 : 상기 단계에서 영지버섯이 접종된 오가피추출물 천연배지를 최적조건(온도 : 26~30℃, 통기량 : 0.4 ~ 0.5vvm)에서 84시간 동안 배양 발효시킨다.

⑤ 마지막으로 발효물(발효소재)을 획득하는 단계 : 상기 단계에서 배양이 끝난 발효물을 도 2과 같이 획득한다.

2. 실시예 2

300L Bio-Reactor에서 오가피추출물로 이루어진 천연배지로 영지버섯(Ganoderma lucidum)을 이용한 발효소재 제조방법,

① 오가피추출물로 이루어진 천연배지를 준비하는 단계 : 오가피를 선별 - 절단 - 세척 단계를 거쳐서 압력하에 85℃에서 24시간 추출한 다음 여과하여 얻은 추출액을 90중량%와 동아마쇄액(선별-수세-절단-마쇄단계를 거친 마쇄액) 10중량%로 발효조에 투입한 다음 120℃에서 40분간 멸균한 다음 온도를 25℃까지 급랭하여 천연배지를 준비한다.

② 영지버섯 종균을 준비하는 단계 : 영지버섯 균을 종균(전배양액)으로 사용하기 위해, 30L Fermenter에서 최적온도 27℃, 통기속도 0.4vvm, Fermenter 교반속도 100 RPM에서 3.5일간 배양하여 종균(전배양액)을 준비한다.

③ 영지버섯균을 접종하는 단계 : 상기 단계에서 준비된 오가피추출물 천연배지에 종균 준비단계에서 준비한 영지버섯 전배양액(종균)을 7%(w/w)를 접종한다. 이때 종균 준비단계의 30L Fermenter에서 3.5일간 배양한 종균이 300L Fermenter로 자동으로 접종되어진다.

④ 영지버섯 종균을 접종한 오가피추출물 천연배지를 배양 및 발효시키는 단계 : 상기 단계에서 영지버섯이 접종된 오가피추출물 천연배지를 최적조건(최적온도 : 27℃, 통기량 : 0.5vvm, Fermenter 교반속도 110rpm)에서 84시간 동안 배양 발효시킨다.

⑤ 마지막으로 발효물(발효소재)을 수득하는 단계 : 상기 단계에서 배양이 끝난 발효물(발효소재)을 수득한다.

3. 실시예 3

20L Bio-Reactor에서 오가피추출물로 이루어진 천연배지로 상황버섯(Phellinus linteus)을 이용한 발효소재 제조방법,

① 오가피추출물 천연배지를 준비하는 단계 : 오가피를 선별 - 절단 - 세척 단계를 거쳐서 압력하에 85℃에서 24시간 추출한 다음 여과하여 얻은 추출액을 90중량%와 동아마쇄액(선별-수세-절단-마쇄단계를 거친 마쇄액) 10중량%로 발효조에 투입한 다음 120℃에서 40분간 멸균한 다음 온도를 25℃까지 급랭하여 천연배지를 준비한다.

② 상황버섯 종균을 준비하는 단계 : 상황버섯 균을 종균(전배양액)으로 사용하기 위해, 온도 26~30℃, Shaking Rate 125 RPM에서 5일간 배양하여 종균(전배양액)을 준비한다.

③ 상황버섯 종균을 접종하는 단계 : 상기 단계에서 준비된 동아천연배지에 준비된 상황버섯 전배양액(종균)을 7%(w/w)를 접종한다.

④ 상황버섯 종균을 접종한 오가피추출물 천연배지를 배양 및 발효시키는 단계 : 상기 단계에서 상황버섯이 접종된 오가피추출물 천연배지를 최적조건(최적온도: 26~30℃, 통기량 0.5 ~ 0.6vvm)에서 96시간 동안 배양 발효시킨다.

⑤ 마지막으로 발효물(발효소재)를 획득하는 단계 : 상기 단계에서 배양이 끝난 발효물(발효소재)을 도 3와 같이 수득한다.

4. 실시예 4

20L Bio-Reactor에서 오가피추출물로 이루어진 천연배지로 노루궁뎅이버섯(Hericeum erinaceum)를 이용한 발효소재 제조방법,

② 노루궁뎅이버섯 종균을 준비하는 단계 : 노루궁뎅이버섯 균을 종균(전배양액)으로 사용하기 위해, 온도 22~25℃, Shaking Rate 120 RPM에서 5일간 배양하여 종균(전배양액)을 준비한다.

③ 노루궁뎅이버섯 종균을 접종하는 단계 : 상기 단계에서 준비된 오가피추출물 천연배지에 준비된 노루궁뎅이버섯 전배양액(종균)을 8%(w/w)를 접종한다.

④ 노루궁뎅이버섯 종균을 접종한 오가피추출물 천연배지를 배양하는 단계 : 상기 단계에서 노루궁뎅이버섯을 접종한 오가피추출물 천연배지를 최적조건(최적온도: 22~25℃, 통기량 0.5 ~ 0.6vvm)에서 96시간 동안 배양 발효시킨다.

⑤ 마지막으로 발효물(발효소재)을 수득하는 단계 : 상기 단계에서 배양이 끝난 발효소재를 도 4와 같이 수득한다.

오가피추출물로 이루어진 천연배지로 한 발효물(발효소재)에 대한 관능평가

오가피추출물과 상기 실시예 1와 실시예 3 및 실시예 4와 같이 오가피추출물 천연배지에 영지버섯, 상황버섯, 노루궁뎅이버섯을 각각 배양하여 획득한 오가피추출물-발효물에 대한 관능평가를 실시하였다.

상기 4개의 종류를 각각 85℃에서 4시간 저온추출한 추출물을 시료로 사용하였으며, 관능평가에 참여한 패널은 식품연구개발에 3년 이상 종사한 자 6인이 5점 만점으로 맛 적인 측면, 향 적인 측면 및 식품소재로서의 종합적인 측면에 대하여 평가하였다.

구분	관능평점
구분	맛	향	종합적인 측면
오가피추출물	2.10/5.00	2.20/5.00	2.15/5.00
실시예 1	3.25/5.00	3.45/5.00	3.40/5.00
실시예 3	3.25/5.00	3.65/5.00	3.50/5.00
실시예 4	3.20/5.00	3.50/5.00	3.35/5.00

오가피추출물로 이루어진 천연배지로 한 발효소재에 대한 ADH 의 활성측정

① 효소준비 : 효소원은 동결 건조된 S9 rat liver homogenate(MOLTOX Co., USA)를 0.1% bovine serum albumin 용액 8ml에 녹여 0.45mcm syringe filter로 여과하여 사용.

② ADH활성의 측정 : Blandino가 사용한 방법을 변형한 것으로 흡광도 340nm에서 NADH의 생성속도를 지표로 사용하였다. 반응액의 조성은 증류수가 1.4ml, 1.0 M tris-HCl buffer(pH 8.8) 0.75ml, 20 mM NAD+ 0.3ml, ethanol 0.3ml, Sample 0.1ml의 혼합액과 효소원 0.15ml를 cuvette에 넣어 총 3ml가 되게 조절하여 30℃에서 5분간 pre-incubation 한 후, 5분간 340nm에서 흡광도의 변화를 측정하였다. 이때 시료를 첨가하지 않은 것을 대조군으로 하였다.

시료의 ADH활성은 control에 대한 상대활성(%)으로 측정하였다.

③ 결과 : 100ppm 농도에서 오가피추출물-영지버섯 발효물과 오가피추출물 - 상황버섯 발효물, 오가피추출물 -노루궁뎅이버섯 발효물의 ADH activity이 각각 107%, 108% 99%로 나타내었으며, 현재 숙취해소음료의 소재로 잘 알려진 구르메(Gurume)를 같은 방법으로 실험하여 ADH의 활성이 110%로 나타났음. 또 다른 숙취해소 음료의 소재로 알려진 지구자 및 갈화의 경우 각각 91% 및 86%의 ADH 활성을 나타내었음.

오가피추출물로 이루어진 천연배지로 한 발효소재에 대한 ALDH 의 활성측정

② ALDH의 활성측정 : Bostian의 방법을 변형하여 측정하는 것으로, 흡광도 340nm에서 ADH 생성속도를 지표로 사용하였다. 반응액의 조성은 증류수 2.1ml, 1.0M tris-HCl buffer(pH 8.0) 0.3ml, 20mM NAD+ 0.1ml, 1.0 M acetaldehyde 0.1ml, 3.0M KCl 0.1ml, 0.33 M 2-mercaptoethanol 0.1ml, Sample 0.1ml의 혼합액과 효소원 0.1ml를 cuvette에 넣어 총 3ml가 되게 조절하여 30℃에서 5분간 pre-incubation 한 후, 5분간 340nm에서 흡광도의 변화를 측정하였다. 이때 시료를 첨가하지 않은 것을 대조군으로 하였다. 시료의 ALDH활성은 control에 대한 상대활성(%)으로서 측정하였다.

③ 결과 : 100ppm 농도에서 오가피추출물-영지버섯 발효물과 오가피추출물 - 상황버섯 발효물, 오가피추출물 -노루궁뎅이버섯 발효물의 ALDH activity이 각각 92%, 92%, 86%로 나타내었으며, 현재 숙취해소음료의 소재로 잘 알려진 구르메(Gurume)를 같은 방법으로 실험하여 ALDH의 활성이 92%로 나타났음. 또 다른 숙취해소 음료의 소재로 알려진 지구자 및 갈화의 경우 각각 90% 및 81%의 ALDH 활성을 나타내었음.

오가피추출물로 이루어진 천연배지로 한 발효소재에 대한 ALT 와 AST 측정을 통한 간 기능 개선효과

가시오가피-영지버섯 발효물과 가시오가피-노루궁뎅이버섯 발효물과 가시오가피-상황버섯발효물과 실리마린(silymarin)에 대하여 0.13mg/ml 농도에서 ALT와 AST를 측정하였다. 세포 독성이 유도된 간세포의 배양액을 취해 Kit를 사용하여 측정하였다. 측정치(흡광도)를 계산식 1에 따라 unit/L로 수치를 계산하고, 음성대조군의 활성을 100% 활성으로 하여 CCl₄에 의한 간세포의 독성유도 시 ALT 생성을 억제하는 효과(%)를 수치화하여 측정하였다.

구분	간 보호효과(%)		비고
구분	ALT	AST	비고
오가피추출물-영지버섯 발효물	23.21	22.36
오가피추출물-노루궁뎅이버섯 발효물	26.92	28.42
오가피추출물-상황버섯 발효물	24.42	18.48
실리마린(silymarin)	27.08	41.19

Claims

선별-분쇄-세척 단계를 거친 오가피를 대기압 이상인 1.2~2.2기압의 압력하에서 80~90℃의 온도로 20~30시간 가열하여 추출한 다음 여과하여 획득되는 추출액과, 동아마쇄액 또는 동아추출물로 이루어진 첨가물을 혼합한 혼합물을 생물반응기(발효조)에서 113~125℃의 온도로 10~60분간 가열멸균처리한 후 실온(25~30℃)으로 급냉 처리하여 천연배지용 오가피추출물을 획득하고,
상기 천연배지용 오가피추출물에 영지버섯(Ganoderma lucidum), 노루궁뎅이버섯(Hericium erinaceum), 상황버섯(Phellinus linteus) 중 선택되는 1개의 버섯종균을 접종하고, 이를 배양 및 발효시켜 획득되는 것을 특징으로 하는 간기능을 위한 오가피추출물을 천연배지로 하여 획득한 오가피-버섯 발효물.
제1항에 있어서,
상기 첨가물에는 홍삼추출물, 수삼추출물, 수삼 파쇄물, 오미자추출물, 오미자 파쇄물 중 어느 하나 또는 2개 이상을 더 포함함을 특징으로 하는 간기능을 위한 오가피추출물을 천연배지로 하여 획득한 오가피-버섯 발효물.
제1항 또는 제2항에 있어서,
상기 오가피는 Acanthopanax senticosus(RUPR. et MAX.) HARMS(가시오갈피나무), Acanthopanax senticosus var. subinermis KITAGAWA(왕가시오갈피나무), Acanthopanax sessiliflorus (RUPR. et MAX.) SEEM.(오갈피나무), Acanthopanax chiisanense NAKAI(지리산오갈피나무), Acanthopanax koreanum NAKAI(섬오갈피나무), Acanthopanax rufinerve NAKAI(털오갈피나무), Acanthopanax seoulense NAKAI(서울오갈피나무), Acanthopanax sieboldianum MAKINO(오가나무) 중 1종 이상을 선택하여 사용함을 특징으로 하는 간기능을 위한 오가피추출물을 천연배지로 하여 획득한 오가피-버섯 발효물.
선별-분쇄-세척 단계를 거친 오가피를 대기압 이상인 1.2~2.2기압의 압력하에서 80~90℃의 온도로 20~30시간 가열하여 추출된 추출액과, 동아마쇄액 또는 동아추출물로 이루어진 첨가물을 생물반응기에 투입하여 113~125℃로 10~60분간 가열멸균처리하고, 실온(25~30℃)으로 급냉 처리하여 천연배지용 오가피추출물을 제조하는 천연배지제조단계(S1)와;
상기 단계(S1)에서 제조된 천연배지용 오가피추출물에 영지버섯(Ganoderma lucidum), 노루궁뎅이버섯(Hericium erinaceum), 상황버섯(Phellinus linteus) 중 선택되는 1개의 버섯종균을 접종하는 접종단계(S2)와;
상기 단계(S2)에서 버섯종균을 접종한 오가피추출물로 이루어진 천연배지를 온도 22~34℃에서 2~9일 동안 배양 및 발효시키는 배양/발효단계(S3)를 포함하는 간기능을 위한 오가피추출물을 천연배지로 하여 획득한 오가피-버섯 발효물의 제조방법.
제4항에 있어서,
상기 단계(S1)에서, 상기 생물반응기에는 오가피추출액 50~99중량%에 첨가물 1~50중량%가 첨가되어 천연배지용 오가피추출물이 제조되며,
상기 단계(S2)에서, 접종되는 버섯종균은 천연배지용 오가피추출물에 5~15%(w/w)로 접종됨을 특징으로 하는 간기능을 위한 오가피추출물을 천연배지로 하여 획득한 오가피-버섯 발효물의 제조방법.
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