KR101369255B1 - 항균 및 항바이러스 활성을 갖는 오배자 및 목단피추출물을 함유하는 수의학적 조성물 - Google Patents
항균 및 항바이러스 활성을 갖는 오배자 및 목단피추출물을 함유하는 수의학적 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 항균 및 항바이러스 활성을 갖는 조성물에 관한 것으로, 상세하게는 오배자 및 목단피 추출물을 유효성분으로 함유하는 본 발명의 조성물은 돼지 호흡기 또는 소화기 질환에 대한 뛰어난 항균 및 항바이러스 효과를 나타내므로, 상기 질환의 예방 및 치료를 위한 수의학적 조성물 및 사료첨가제로 유용하게 이용될 수 있다.
오배자, 목단피, 항균, 항바이러스
Description
도 1은 대조군(A) 및 실시예 1-3의 GM-1 투여군(B)의 분변 상태를 나타낸 도이고,
도 2는 실시예 1-3의 GM-1 투여군(A) 및 대조군(B) 폐장의 육안 병변을 나타낸 도이며,
도 3은 대조군 폐장(A:흉막 폐렴,B:마이코플라즈마 폐렴)의 육안 병변을 나타낸 도이고,
도 4는 대조군(A) 및 실시예 1-3의 GM-1 투여군(B) 간의 병리조직검사결과를 나타낸 도이며,
도 5는 대조군(A) 및 실시예 1-3의 GM-1 투여군(B) 소장의 병리조직검사결과를 나타낸 도이고,
도 6은 대조군(A) 및 실시예 1-3의 GM-1 투여군(B) 대장의 병리조직검사결과를 나타낸 도이며,
도 7은 대조군 폐장조직(A:간질성 폐렴 병변, B:기관지성 폐렴 병변)의 병리 조직검사결과를 나타낸 도이고,
도 8은 실시예 1-3의 GM-1 투여군 폐장조직(A:정상 폐포를 포함한 폐장조직, B:다른 개체의 정상 폐장조직)의 병리조직검사결과를 나타낸 도이며,
도 9는 실시예 1-3의 GM-1 투여군(A) 및 대조군(B)의 장기로부터 조직을 채취한 후 세균분리를 수행한 결과를 나타낸 도이고,
도 10은 실시예 1-3의 GM-1 투여군(A) 및 대조군(B)의 장기와 분변으로부터 DNA와 RNA를 추출하여 수행한 증식성회장염에 대한 PCR결과를 나타낸 도이며,
도 11은 실시예 1-3의 GM-1 투여군(A) 및 대조군(B)의 장기와 분변으로부터 DNA와 RNA를 추출하여 수행한 결장염에 대한 PCR결과를 나타낸 도이고,
도 12는 대조군(A) 및 실시예 1-3의 GM-1 투여군(B) 간 조직의 고배율 관찰 결과를 나타낸 도이며, 도 13은 대조군(A) 및 실시예 1-3의 GM-1 투여군(B) 신장 조직의 고배율 관찰 결과를 나타낸 도이다.
본 발명은 오배자 및 목단피 추출물을 유효성분으로 함유하는 돼지 호흡기 또는 소화기 질환의 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다.
항생제가 가축의 질병예방에 만병통치약으로 인식되면서 사료첨가제 형태로 많은 양의 항생제들이 축산 동물에 급여되고 있다. 사료첨가제 항생제들은 전염병 의 예방과 그로 인한 증체율 향상 등의 긍정적 효과가 있으나, 공중보건학적으로 식육 중의 항생제 잔류와 그를 섭취한 사람들에서 항생제 내성 문제가 크게 대두되고 있는 실정이다. 현재 가축에서의 항생제 및 항균제 사용은 축산물의 안전성 문제로 인해 규제가 날로 강화되고 있으며 특히 배합사료에 첨가되는 항생제 사용규제가 향후 더욱 강화될 것으로 보이며 잔류검사 강화로 축산 농가들도 휴약 기간이 긴 항생제 사용을 기피하고 있다. 농가들이 이의 대체제로 생균제 사용을 선호하고 있지만 확실한 효력검증이 되지 않아 축산 농가들의 피해가 우려되는 상황이다.
이와같은 항생제로 인한 피해를 최소화하고 이를 대체할 물질이 절실히 필요하다.
오배자는 옻나무과(Anacardiaceae)에 속하는 붉나무(Rhus javanica L.)의 잎에 오배자진딧물(Aphis chinensis J. Bell)이 자상(刺傷)을 주어생긴 벌레집을 말하는데, 우리나라 각지 에 분포한다. 오배자의 형태를 보면, 외면은 회갈색으로 연한 털이 있고, 길이는 3 ∼ 7cm, 폭 2 ∼ 5cm, 두께 2mm 정도이며 단단하면서도 쉽게 부숴 진다. 속은 대개 비어 있거나 회백색의 죽은 벌레와 분비물이 남아 있을 때도 있고, 역겨운 냄새가 나기도 한다. 채집한 오배자는 햇볕에 말리거나 삶거나 찐다. 주성분은 피로가롤 탄닌 (pyrogalloltannin)이 50 ~ 70% 함유되어 있으며, 몰식자산, 갈산(gallic acid) 등이 있다. 약효로는 수렴, 지사, 지혈제로 설사, 가래, 당뇨, 하혈, 빈혈 등에 이용한다(정보섭 외, 향약대사전, pp 380~384, 영림사, 1998)
목단피(Moutan Cortex Radicis)는 작약과(Paeoniaceae) 목단의 뿌리껍질을 말하는 것으로, 중국 서부 원산이며 신라시대 선덕여왕의 기록으로 미루어 중국에서 도입된 귀화식물로 추측된다. 내한성이 강하여 함경북도를 제외한 전국에 분포하지만, 충북 단양군, 제원군과 전남 화순군에서 많이 재배되고 있다. 생김새는 관상의 껍질조각으로 바깥 면은 어두운 갈색 또는 자색을 띤 갈색이며 가로로 길고 작은 타원형의 곁뿌리 자국과 세로주름이 있다. 안쪽 면은 엷은 회갈색이나 어두운 자색을 띠고 편평하며 꺾은 면은 거칠다. 안쪽 면 및 꺾은 면에는 때때로 흰색의 결정이 붙어 있다. 성분은 파에오노사이드(paeonoside), 파에오놀라이드(paeonolide)와 파에오놀(paeonol)을 함유하며, 파에오노사이드는 저장중에 분해되어 당과 파에오놀을 생성한다. 파에오니프로린(paeoniflorin), 옥시파에오니프로린 (oxypaeoni florin), 벤조일파에오니프로린(benzoylpaeoniflorin), 파에오놀라이드 탄닌(paeon olide tannin), 프로시아니딘 B1(procyanidin B1). 벤조일옥시파에오니프로린(benzoyloxypaeoniflorin), 파에오닌(paeonin), 아스트라갈린(astragalin ), 페라고닌(pelargonin) 등의 성분이 함유되어 있다. 이러한 성분은 근피뿐만 아니라 목심부에도 존재함이 조직화학적으로 확인 되었다. 목단피는 혈열로 인한 생리불순, 생리통, 멍들었을 때, 토혈, 코피, 반점이 나타나는 증상, 허열로 인해 뼛골이 쑤시는 증상, 혈압상승, 어혈제거, 타박상, 소염진통, 종기치료, 맹장염초기 등에 사용하며 가슴답답증을 없애준다. 약리작용으로 진통, 진정, 해열, 항경련, 항염증, 항혈전, 항알레르기, 위액분비억제, 자궁점막충혈, 항균작용 등이 보고되었다(정보섭 외, 향약대사전, pp 521, 영림사, 1998).
이에 본 발명자들은 오배자 및 목단피 추출물을 유효성분으로 함유하는 항균 및 항바이러스 제재를 개발하였고 시험관내(in vitro ) 실험에서 돼지 호흡기 또는 소화기 질환에 대한 항균 및 항바이러스 효과를 확인하였다.
본 발명의 목적은 오배자 및 목단피 추출물을 유효성분으로 함유하는 돼지 호흡기 또는 소화기 질환의 예방 및 치료용 수의학적 조성물 및 사료첨가제를 제공하는 것이다.
상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 오배자 및 목단피 추출물을 유효성분으로 함유하는 돼지 호흡기 또는 소화기 질환의 예방 및 치료용 수의학적 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 오배자 및 목단피 추출물을 유효성분으로 함유하는 돼지 호흡기 또는 소화기 질환의 예방 및 개선용 동물사료 첨가제 및 이를 포함하는 사료를 제공한다.
본원에서 정의되는 오배자 및 목단피 추출물은 물, 탄소 수 1 내지 4의 저급알코올 또는 이들의 혼합용매로부터 선택된 용매, 바람직하게는 물로 추출한 것을 포함한다.
본원에서 정의되는 상기 추출물은 오배자 추출물 : 목단피 추출물이 1~10:1, 바람직하게는 1~5:1, 보다 바람직하게는 1~3:1의 중량배합비로 배합된 생약의 복합 추출물임을 특징으로 한다.
상기 질환은 포유동물, 가금류 및 어류에 발생하는 것을 특징으로 한다.
본원에서 정의되는 돼지 호흡기 질환 원인균은 맨하이미아 해모리티카(Mannheimia haemolytica), 해모필러스 솜너스(Haemopilus somnus), 파스튜렐라 멀토시다(Pasteurella multocida), 마이코 플라즈마(Mycoplasma hyopneumoniae) 및 흉막폐렴균(Actinobacillus pleuropneumonia)을 포함하고, 바람직하게는 파스튜렐라 멀토시다(Pasteurella multocida), 마이코 플라즈마(Mycoplasma hyopneumoniae) 및 흉막폐렴균(Actinobacillus pleuropneumonia)을 포함한다.
본원에서 정의되는 돼지 호흡기 질환 원인 바이러스는 PVC-2(Porcine circo virus type 2), PPV(Porcine parvovirus), PEV(Porcine entero virus), SIV(Swine influenza virus) 및 PRRSV(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus)를 포함하고, 바람직하게는 PRRSV(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus)를 포함한다.
또한 본원에서 정의되는 돼지 소화기 질환 원인균은 에르시니아(yersinia), 하이오디센테리아(hyodysenteriae), 캄필로박터(campylobacter), 클로스트리듐(clostridium), 살모넬라(Salmonella spp.), 로소니아 인트라셀룰라리스(Lawsonia intracellularis), 브라키스피라 필로시콜리(Brachyspira pilosicoli) 및 대장균(E.coli)을 포함하고, 바람직하게는 살모넬라(Salmonella spp.), 로소니아 인트라셀룰라리스(Lawsonia intracellularis), 브라키스피라 필로시콜리(Brachyspira pilosicoli) 및 대장균(E. coli)을 포함하며, 보다 바람직하게는 로소니아 인트라셀룰라리스(Lawsonia intracellularis) 및 브라키스피라 필로시콜 리(Brachyspira pilosicoli)를 포함한다.
본원에서 정의되는 돼지 소화기 질환 원인 바이러스는 TGE( Transmissible Gastroenteritis)바이러스, PEDV(Porcine epidemic diarrhea virus) 및 코로나바이러스 (coronaviridae)를 포함하고, 바람직하게는 PEDV(Porcine epidemic diarrhea virus)를 포함한다.
상기 돼지 호흡기 질환은 돼지 파스튜렐라 폐렴, 돼지 마이코플라즈마 폐렴, 돼지 위축성 비염, 돼지 흉막폐렴, 글래써병, PRRS(Porcine reproductive and respiratory syndrome, 돼지 생식기 호흡기 증후군), PMWS (Post-weaning Multisystemic Wasting Syndrome, 이유후 전신성 소모성증후군) 및 PRDC(Porcine Respiratory Disease Complex, 돼지호흡기 복합증후군)를 포함하고, 바람직하게는 돼지 파스튜렐라 폐렴, 돼지 마이코플라즈마 폐렴, 돼지 위축성 비염 및 돼지 흉막폐렴을 포함하며, 보다 바람직하게는 돼지 마이코플라즈마 폐렴 및 돼지 흉막폐렴을 포함한다.
상기 돼지 소화기 질환은 에르시니아 장염, 증식성 회장염, 결장염, 돈적리, 비감염성 결장염, 살모넬라성 장염, 대장균성 설사, TGE(Transmissible Gastroenteritis, 전염성 위장염) 및 PED(Porcine Epidemic Diarrhea, 돼지유행성설사)를 포함하고, 바람직하게는 증식성 회장염, 결장염, 대장균성 설사 및 살모넬라성 장염을 포함하며, 보다 바람직하게는 증식성 회장염 및 결장염을 포함한다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명의 오배자 및 목단피 추출물은, 건조된 오배자 및 모란 뿌리껍질인 목단피를 세절하여 건조 중량의 약 1 내지 20배, 바람직하게는 약 2 내지 6배의 물, C1 내지 C4의 저급 알콜 또는 이들의 혼합용매, 바람직하게는 물로, 20 내지 150℃, 바람직하게는 70 내지 120℃ 추출온도에서 약 1시간 내지 10일, 바람직하게는 약 2시간 내지 5시간동안 냉침추출, 열수추출, 초음파 추출, 환류냉각 추출 등의 추출방법, 바람직하게는 환류냉각 추출방법을 이용하여 수득한 1 내지 10회, 바람직하게는 2 내지 7회 반복 추출한 후 감압 농축하여 추출물을 수득할 수 있다.
본 발명의 오배자 및 목단피 추출물을 유효성분으로 함유하는 돼지 호흡기 또는 소화기 질환의 예방 및 치료용 조성물은, 조성물 총 중량에 대하여 상기 추출물을 0.1 ~ 50 중량% 포함한다.
본 발명은 상기의 제조공정으로 얻어진 돼지 호흡기 또는 소화기 질환에 대한 항균 및 항바이러스 효과를 갖는 오배자 및 목단피 추출물을 유효성분으로 함유하는 수의학적 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 오배자 및 목단피 추출물은 종류와는 상관없이 일정한 항균 및 항바이러스 효과를 나타내었다.
본 발명의 추출물은 독성 및 부작용이 거의 없으므로 예방 목적으로 장기간 투여시에도 안심하고 사용할 수 있다.
본 발명의 추출물을 포함하는 수의학적 조성물은 수의학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.
본 발명의 추출물의 수의학적 투여 형태는 이들의 수의학적 허용 가능한 염의 형태로도 사용될 수 있고, 또한 단독으로 또는 타 수의학적 활성 화합물과 결합뿐만 아니라 적당한 집합으로 사용될 수 있다.
본 발명의 추출물을 포함하는 수의학적 조성물에 포함될 수 있는 부형제 및 희석제로는, 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트, 세탄올, 스테아릴알콜, 유동파라핀, 솔비탄모노스테아레이트, 폴리소르베이트 60, 메칠파라벤, 프로필파라벤 및 광물유를 들 수 있다.
본 발명에 따른 추출물을 포함하는 수의학적 조성물은 충진제, 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향신료, 유화제, 방부제 등을 추가로 포함할 수 있는데, 본 발명에 의한 수의학적 조성물은 동물에 투여된 후 활성성분의 신속, 지속 또는 지연된 방출을 제공할 수 있도록 당업계에 잘 알려진 방법을 사용하여 제형화될 수 있고, 제형은 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 용액, 시럽, 에어로졸, 연질 또는 경질 젤라틴 캅셀, 좌제, 멸균 주사용액, 멸균 외용제 등의 형태일 수 있다.
본 발명에 의한 수의학적 조성물은 동물의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으나, 0.1 내지 100 mg/㎏의 양을 1일 1회 내지 수회 투여할 수 있다. 또한 오배자 및 목단피 추출물의 투여량은 투여경로, 질병의 정도, 성별, 체중, 나이 등에 따라서 증감될 수 있다. 따라서, 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범 위를 한정하는 것은 아니다.
또한, 본 발명은 상기 공정에서 얻어지는 오배자 및 목단피 추출물을 유효성분으로 함유하는 돼지 호흡기 또는 소화기 질환의 예방 및 개선에 유용한 동물사료 첨가제 및 이를 포함하는 사료를 제공한다.
상기의 동물사료 첨가제용 오배자 및 목단피 추출물은 20 내지 90 % 고농축액이거나 분말 또는 과립형태일 수 있다.
본 발명의 동물사료 첨가제용 추출물은 구연산, 후말산, 아디픽산, 젖산, 사과산 등의 유기산이나 인산나트륨, 인산칼륨, 산성피로인산염, 폴리인산염(중합인산염) 등의 인산염이나 폴리페놀, 카테킨(catechin), 알파-토코페롤, 로즈메리 추출물(rosemary extract), 비타민 C, 녹차 추출물, 감초 추출물, 키토산, 탄닌산, 피틴산 등의 천연 항산화제 중 어느 하나 또는 하나 이상을 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 추출물을 함유하는 동물사료 첨가제 및 이를 포함하는 사료는 보조성분으로 아미노산, 무기염류, 비타민, 항생물질, 항균물질, 항산화, 항곰팡이 효소, 살아있는 미생물 제제 등과 같은 각종보조제가 곡물, 예를 들면 분쇄 또는 파쇄된 밀, 귀리, 보리, 옥수수 및 쌀; 식물성 단백질 사료, 예를 들면 평지, 콩 및 해바라기를 주성분으로 하는 것; 동물성 단백질 사료, 예를 들면 혈분, 육분, 골분 및 생선분; 당분 및 유제품, 예를 들면 각종 분유 및 유장 분말로 이루어지는 건조 성분, 건조 첨가제를 모두 혼합한 후, 액체 성분과, 가열 후에 액체가 되는 성분, 즉, 지질, 예를 들면 가열에 의해 임의로 액화시킨 동물성 지방 및 식물성 지방 등과 같은 주성분 이외에 영양보충제, 소화 및 흡수향상제, 성장촉진제, 질병예방제 등과 같은 물질과 함께 사용될 수 있다.
상기 동물사료 첨가제용 오배자 및 목단피 추출물은 동물에게 단독으로 식용 담체 중에서 다른 사료 첨가제와 조합되어 투여될 수 있다.
또한, 상기 동물사료 첨가제용 오배자 및 목단피 추출물은 탑 드레싱으로서 또는 이들을 동물 사료에 직접 혼합하거나 또는 사료와 별도로, 별도의 경구 제형으로, 주사 또는 경피로 또는 다른 성분과 조합하여 쉽게 투여할 수 있다. 통상적으로, 당 업계에 잘 알려진 바와 같이 단독 일일 투여량 또는 분할 일일 투여량을 사용할 수 있다.
상기 동물사료 첨가제용 추출물을 동물 사료와 별도로 투여할 경우, 당 업계에 잘 알려진 바와 같이 추출물의 투여 형태는 이들을 비-독성 제약상 허용 가능한 식용 담체와 조합하여 즉석 방출 또는 서방성 제형으로 제조할 수 있다. 이러한 식용 담체는 고체 또는 액체, 예를 들어 옥수수 전분, 락토스, 수크로스, 콩 플레이크, 땅콩유, 올리브유, 참깨유 및 프로필렌 글리콜일 수 있다. 고체 담체가 사용될 경우, 추출물의 투여형은 정제, 캡슐제, 산제, 토로키제 또는 함당정제 또는 미분산성 형태의 탑 드레싱일 수 있다. 액체 담체가 사용될 경우, 연 젤라틴 캡슐제, 또는 시럽제 또는 액체 현탁액제, 에멀젼제 또는 용액제의 투여 형태일 수 있다. 또한, 투여 형태는 보조제, 예를 들어 보존제, 안정화제, 습윤제 또는 유화제, 용액 촉진제 등을 함유할 수 있다. 또한 이들은 바이러스로 인한 질환의 개선 및 예방상 유용한 다른 물질을 함유할 수 있다.
또한, 오배자 및 목단피 추출물이 동물사료 첨가제로 포함되는 동물사료는 동물의 식이 요구를 충족시키는데 통상적으로 사용되는 임의의 단백질-함유 유기 곡분일 수 있다. 이러한 단백질-함유 곡분은 통상적으로 옥수수, 콩 곡분 또는 옥수수/콩 곡분 믹스로 주로 구성되어 있다.
상기의 동물사료 첨가제는 침지, 분무 또는 혼합하여 상기 동물사료에 첨가하여 이용될 수 있다.
본 발명은 포유류, 가금 및 어류를 포함하는 다수의 동물 식이에 적용할 수 있다. 보다 상세하게, 식이는 상업상 중요한 포유류, 예를 들어 돼지, 소, 양, 염소, 실험용 설치 동물 (랫트, 마우스, 햄스터 및 게르빌루스쥐), 모피 소유 동물 (예, 밍크 및 여우), 및 동물원 동물 (예, 원숭이 및 꼬리 없는 원숭이), 뿐만 아니라 가축 (예, 고양이 및 개)에게 사용할 수 있다. 통상적으로 상업상 중요한 가금에는 닭, 터키, 오리, 거위, 꿩 및 메추라기가 포함된다. 송어와 같은 상업적으로 사육되는 어류도 포함될 수 있다.
본 발명에 따른 추출물을 포함한 동물용 사료 배합 방법은, 오배자 및 목단피 추출물을 동물 사료에 건조 중량 기준으로 사료 1 ㎏당 약 1 g 내지 100 g의 양으로 혼입한다.
또한, 사료 혼합물은 완전히 혼합한 후, 성분들의 분쇄 정도에 따라 경점성의 조립 또는 과립 물질이 얻어진다. 이것을 매시로서 공급하거나, 또는 추가 가공 및 포장을 위해 원하는 분리된 형상으로 형성한다. 이 때, 저장 중에 분리되는 것을 방지하기 위해, 동물 사료에 물을 첨가하고, 이어서 통상의 펠릿화, 팽창화, 또 는 압출 공정을 거치는 것이 바람직하다. 과잉의 물은 건조 제거될 수 있다.
이하, 본 발명을 하기의 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다.
단, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예 및 실험예에 의해 한정되는 것은 아니다.
실시예
1. 오배자 및 목단피 추출물의 제조
1-1. 오배자 추출물의 제조
익산시 대학한약국으로부터 구입한 건조된 오배자를 분쇄기를 이용하여 입자의 크기가 30메시(mesh) 이하가 되도록 분쇄하여 오배자 분말을 수득한 후, 상기에서 수득한 건조된 오배자 분말(1 kg) 질량의 3배에 해당하는 증류수를 가하여 100℃에서 3시간동안 환류 냉각 추출하고 여과 및 열풍건조하여 600 g의 오배자 추출물을 수득하였다.
1-2. 목단피 추출물의 제조
익산시 대학한약국에서 구입한 건조된 모란 뿌리껍질인 목단피를 분쇄기를 이용하여 입자의 크기가 30메시(mesh) 이하가 되도록 분쇄하여 목단피 분말을 수득한 후, 상기에서 수득한 건조된 목단피 분말(1 kg) 질량의 3배에 해당하는 증류수를 가하여 100℃에서 3시간동안 환류 냉각 추출하고 여과 및 열풍 건조하여 217 g의 목단피 추출물을 수득하였다.
1-3. 오배자 및 목단피 분말의 제조
상기 실시예 1-1 및 1-2에서 수득한 오배자 추출물: 목단피 추출물을 3:1의 배합비로 혼합하여 하기 실험예 1의 시료로 사용하였다. (이하 ‘GM-1'이라 명명함)
참고예 1. 실험준비
본 발명은 건강한 이유 자돈을 50두씩 2군으로 구분하여 전라축산(전북 익산시)에서 기존 문헌에 기재된 실험 방법(Hoflack G. et al..Journal of Veterinary Medicine Series B, 48, pp655-664, 2001)을 응용하여 하기와 같은 방법으로 실험을 수행하였다. 실험에 사용한 돼지는 질병이 없고 외관상 건강한 돼지로 군 구성 시 체중 평균이 유사하도록 분류하였고 사료는 퓨리나(한국)에서 구입하여 사용하였다.
상기 실시예 1의 공정으로 수득된 오배자 및 목단피 추출물을 일반 가축용 사료에 1%(w/w)만큼 넣어 균일하게 섞은 뒤 총 130 일 동안, 총 130 회, 자유급식 투여하여 하기 표 1에 나타난 바와 같이 처리군에 투여하였다.
| 군 | 개체수 | 기존사료 | 실시예 1-3의 GM -1 | 별도관리 |
| 대조군 (실시예 1-3의 GM-1 미첨가) |
50 |
0 |
X |
X |
| 처리군 (실시예 1-3의 GM-1 첨가) |
50 |
0 |
0 |
X |
상기 실험군에 따라 체중변화 및 사료소비량, 관찰기간동안 임상증상, 분변의 상태, 도축 검사 및 샘플링, 육안 검사, 병리조직학적 검사, 세균분리 검사, PCR에 의한 병원체 검사, 시험물질에 의한 독성여부 평가 등 9가지 항목을 평가 대상으로 실험을 실시하였다.
실험예
1. 체중변화 및 사료소비량
상기 실시예 1에서 수득한 오배자 및 목단피 추출물을 투여한 처리군과 기존사료만을 투여한 대조군의 체중변화 및 사료소비량을 측정하기위해 이유 후 입식할 때와 출하시 총 130 일 동안 총 2 회 각 실험군 돼지들의 체중과 사료소비량을 측정하여 평가해 보았다.
| 군 | 개시체중 | 종료체중 | 기간내 증체량 | 1일 증체량 |
| 대조군 | 35.6kg | 109.89kg | 74.29kg | 0.816kg |
| 처리군 | 34.9kg | 110.95kg | 76.05kg | 0.836kg |
실험결과, 상기 표 2에서 나타난 바와 같이 돼지군의 도입시 대조군 및 처리군의 체중은 각각 35.6, 34.9kg으로 평균체중이 유사하였으나, 실시예 1-3의 GM-1 투여 후 처리군이 대조군과 비교하여 평균1.76kg 더 증가하였다는 사실을 확인할 수 있었다.
| 군 | 총사료섭취량 | 사료요구율 |
| 대조군 | 11075kg | 3.27 |
| 처리군 | 10575kg | 3.04 |
실험결과, 상기 표 3에서 나타난 바와 같이 실시예 1-3의 GM-1 투여군이 대조군과 비교하여 500kg을 덜 섭취하였음을 알 수 있었다. 따라서 실시예 1-3의 GM-1은 돼지의 체중을 늘리고 사료섭취량을 줄이는데 탁월한 효과가 있다는 사실을 확인할 수 있었다.
실험예 2. 임상증상의 관찰
실험기간 (50일령 ~ 180일령) 동안에 각 군의 동물들의 기침, 폐렴 및 설사 등의 임상증상을 관찰하였고, 그 결과를 하기 표 4에 나타내었다.
실시예 1-3의 GM-1 투여군의 동물들은 대조군에 비교하여 활력도가 좋아 관리자가 돈방에 들어가기 힘들 정도였고 호흡기를 비롯한 임상증상 발현이 대조군에 비교하여 적게 발생한 것을 알 수 있었다. 대조군의 경우에 항생제를 이용한 치료가 임상증상이 심한 5두에서 수행되었으나 실시예 1-3의 GM-1 투여군에서는 치료가 수행되지 않았다. 폐렴으로 의심되는 경우는 실시예 1-3의 GM-1 투여군의 동물들이 대조군과 비교하여 실험기간 동안에 매우 적은 것을 관찰 할 수 있었다.
| 임상증상 |
대조군
(개체수=50) |
처리군
(개체수=50) |
| 감기(caugh) | 10 | 3 |
| 폐렴(Pneumonia) | 22 | 10 |
| 위축증(Atrophy) | 2 | 2 |
| 희생물(Sacrifice) | 6 | 5 |
| 묽은변(Soft stool) | 2 | 2 |
| 체온증가(Increased body temperature) | 1 | 0 |
| 항생치료(Antibiotic therapy) | 5 | 0 |
실험결과, 상기 표 4에서 나타난 바와 같이 감기는 대조군은 10회, 처리군은 3회 발생하였고, 폐렴은 대조군은 22회, 처리군은 10회 발생하였으며, 항생치료는 대조군은 5회, 처리군은 0회로 실시예 1-3의 GM-1 투여군은 호흡기 질환을 비롯한 임상증상 발현이 대조군에 비교하여 적게 발생한 것을 알 수 있었다.
실험예
3.
분변상태
관찰
실시예 1-3의 GM-1 투여군 및 대조군 동물들의 분변상태를 관찰하고 그 이상 유무를 알아보기 위해 시험 진행 과정 동안 정기적으로 샘플링하여 분변 상태를 관찰해 보았다.
그 결과, 실시예 1-3의 GM-1 투여군의 분변이 대조군보다 진한 초콜렛 색을 띠는 건강한 분변임을 관찰할 수 있었다. 따라서 실시예 1-3의 GM-1 투여시 돼지 호흡기 또는 소화기 질환의 예방 및 치료에 탁월한 효과가 있다는 사실을 확인할 수 있었다(하기 도 1 참조).
실험예 4. 도축 검사 및 샘플링
약 180일령의 출하시점에 각 군의 실험 돼지들을 도축하여 도체검사를 실시하였고, 각 개체의 등급을 점수화 하여 실험군간 평균과 표준편차를 구하여 그 결과를 하기 표 5에 나타내었다. (A등급; 5, B등급; 4, C등급; 3, D등급; 2)
도축 후 내부 장기의 이상 유무를 육안으로 관찰하여 특이 사항을 기록하였고, 육안검사 후 각 장기의 일부를 샘플링하여 하기 표 6에 나타내었다.
| 군 | 도체중 | 등지방 | 등심 | 수율 | 등급 |
| 대조군 (개체수=44) |
86.65±6.58 | 20.25±4.08 | 47.11±22.72 | 53.57±25.60 | 4.38±0.78 |
| 처리군 (개체수=45) |
87.11±8.38 | 19.88±4.42 | 51.59±16.71 | 59.72±18.99 | 4.13±0.91 |
실험 결과, 상기 표 5에서 나타난 바와 같이 각 군간 유의성은 찾을 수 없었지만 실시예 1-3의 GM-1 투여군의 체중이 대조군보다 높다는 사실을 확인할 수 있었다.
| 샘플 장기 | 병리조직용 | 세균분리용 | PCR용 | |
| DNA추출 | RNA추출 | |||
| 폐장 | 1 | 1 | 1 | 1 |
| 공장 | 1 | X | X | 1 |
| 결장 | 1 | 1 | 1 | X |
| 간장 | 1 | X | X | X |
| 신장 | 1 | X | X | X |
실험예
5. 육안검사
도축 후 내부 장기의 이상 유무를 알아보기 위해 하기 표 7에서 나타난바와 같이 육안으로 관찰해 보았다. 그 결과 폐에서만 이상을 확인하였고, 그 원인을 알아보고 대조군과 실시예 1-3의 GM-1 투여군의 폐렴병변 정도를 알아보기 폐장의 폐렴병변%를 구해보았다.
폐렴병변%는 폐장의 배측면과 복측면의 폐렴병변 면적을 표기하여 하기 수학식1을 이용하여 구하였다. 그리고 각 개체의 폐렴병변%로부터 실험군의 폐렴병변%의 평균과 표준편차를 구하여 하기 표 8에 나타내었다.
| 기관 | 대조군 (개체수=44) | 처리군 (개체수=45) |
| 간 | 무손상 | 무손상 |
| 소장 | 무손상 | 무손상 |
| 대장 | 무손상 | 무손상 |
| 신장 | 무손상 | 무손상 |
| 폐 | 폐렴 | 폐렴 |
실험 결과, 상기 표 7에서 나타난 바와 같이 실시예 1-3의 GM-1 투여군과 대조군 모두에게서 폐장을 제외한 특이한 장기의 이상은 관찰되지 않았고, 폐장을 자세히 육안 검사한 결과 건강한 폐장에서는 분홍색의 반죽양 경도(doughy consitency)가, 그리고 폐렴병변 폐장에서는 암적색의 경화소가 관찰되었다 (하기 도 2 참조).
| 군 | 개체수 | 폐렴병변 % | 경우(case) |
| 대조군 | 44 | 20.10±17.82 | 34 |
| 처리군 | 45 | 3.97±5.83** | 23 |
| *p < 0.05, **p < 0.01 | |||
상기 표 8에서 나타난 바와 같이 폐장에서는 두 군의 개체 모두에게서 폐렴 병변이 관찰되었다. 하지만 실시예 1-3의 GM-1 투여군의 동물들은 대조군과 비교하여 폐렴 병변을 가진 개체의 수가 적고 병변의 면적 또한 현저히 적다는 사실을 확인할 수 있었다. 이러한 폐렴병변은 흉막폐렴과 마이코플라스마 폐렴의 소견들이 대부분인 것을 알 수 있었다(하기 도 3 참조).
실험예 6. 병리조직학적 검사
병리조직검사결과에서 각 병변의 상태에 따라 점수화 하여 개체 점수를 매긴 후 각 군의 평균 및 표준편차를 구하였다. 병리조직 점수는 "0; normal, 1; mild, 2; moderate, 3; sevre"로 하였다. 간의 병리조직학적 검사 결과 대조군의 2 개체에서 일부 소엽간결재직에 국소적인 염증세포 침윤을 제외하고는 모든 동물들이 정상적인 소견이 관찰되었다(하기 도 4 참조). 소장의 병리조직학적 검사 결과 대조군 및 실시예 1-3의 GM-1 투여군의 모든 개체에서 점막상피하 조직에 가벼운 염증세포 침윤을 제외하고는 다른 특이한 소견은 관찰되지 않았다 (하기 도 5 참조). 대장의 병리조직학적 검사 결과 대조군 및 실시예 1-3의 GM-1 투여군의 모든 개체에서 점막상피하 조직에 가벼운 염증세포 침윤을 제외하고는 다른 특이한 소견은 관찰되지 않았다 (하기 도 6 참조). 신장의 병리조직학적 검사 결과 대조군의 7 개체와 실시예 1-3의 GM-1 투여군의 2개체에서 간질의 결재직에 국소적인 염증세포 침윤 병소를 제외하고는 다른 특이한 소견은 관찰되지 않았다 . 폐장의 병변은 대조군의 8 개체와 실시예 1-3의 GM-1 투여군의 3개체에서 간질성폐염과 기관지성폐염의 소견 (하기 도 7 참조)을 관찰하였으며 실시예 1-3의 GM-1 투여군은 폐렴병변이 거의 없는 정상적인 폐장 조직이 관찰되었다 (하기 도 8 참조). 또한 폐장의 병변점수의 값은 실시예 1-3의 GM-1 투여군이 대조군에 비하여 현저히 적은 것을 알 수 있었다 (p < 0.01).
| 조직 | 대조군(개체수=10) | 처리군(개체수=10) |
| 간 | 0.2± 0.42 | 0± 0 |
| 소장 | 1.0± 0 | 1.0± 0 |
| 대장 | 1.0± 0 | 1.0± 0 |
| 신장 | 0.7± 0.67 | 0.2± 0.42* |
| 폐 | 1.2± 1.13 | 0.3± 0.48** |
| *p < 0.05, **p < 0.01 | ||
실험결과, 상기 표 9에서 나타난 바와 같이 실시예 1-3의 GM-1 투여군이 대조군과 비교하여 소장, 대장을 제외한 몸의 조직에서 병변점수가 낮음을 확인할 수 있었다.
실험예
7. 세균분리 검사
용혈성 박테리아, 파스튜렐라, 살모넬라 등과 같은 세균이 각 실험군에 얼마나 분포되어 있는지 알아보기 위해 하기와 같이 실험을 수행하였다. 각 실험군의 10두의 개체들의 장기로부터 조직을 무균적으로 채취한 후 세균분리를 수행하였다.
| 군 | 폐 | 장 | |
|
용혈성 박테리아
( Hemolytic bacteria ) |
파스튜렐라
( Pasteurella ) |
살모넬라( Salmonella ) | |
| 대조군(건) | 7 | 7 | 6 |
| 처리군(건) | 5 | 6 | 2 |
실험결과, 상기 표 10에 나타난 바와 같이 장에서 채취된 살모넬라(salmonella)의 경우 대조군은 6, GM-1 투여군은 2가 분리됨을 확인할 수 있었고, 이로부터 대조군의 동물이 실시예 1-3의 GM-1 투여군에 비교하여 세균 분리가 보다 많이 된다는 사실을 확인할 수 있었다 (하기 도 9 참조).
실험예
8.
PCR
에 의한 병원체 검사
돼지 호흡기 또는 소화기 질환의 원인균을 알아보기 위해 각 실험군의 10두의 개체들의 장기와 분변으로부터 DNA와 RNA를 추출하여 소화기 병원체와 호흡기 병원체에 대한 PCR검사를 수행하였다.
이 실험에 이용한 병원체 특이 프라이머는 하기 표 11과 같으며, 하기 표 11의 F는 forward, R은 reverse, nF는 nested forward, nR은 nested reverse를나타낸다.
| 병원체 | PCR 종류 | 온도 | 반복주기 | 프라이머 종류 | 목표크기 | |
| 살모넬라 (Salmonella spp.) |
1차 PCR | 55℃ | 35 | Msal-F (서열번호1) |
AAATACAACAGGCCGCAGAG | 634bp |
| R (서열번호2) |
CGTAAAAGCTGGCCAAACTC | |||||
| 로소니아 인트라셀룰라리스(Lawsonia intracellularis) | n-PCR | 60℃ | 30*2 | LI1 nR (서열번호3) |
TGTGGCTGTCAAACACTCCG | 300bp |
| LI2 F (서열번호4) |
TGAAGGTATTGGTATTCTCC | |||||
| LI3nF (서열번호5) |
TGTCCCATAAGCTCAAGAGCACG | |||||
| 브라키스피라 필로시콜리(Brachyspira pilosicoli) | n-PCR | 60℃ | 30*2 | pilosicol-F (서열번호6) |
ATGGGCCATGAGGTAACAAA | 434bp |
| R (서열번호7) |
TTCGCTATTAGGTCTGAAACCA | |||||
| R2(nR) (서열번호8) |
CCTAAATGCAATTCTATA CCAGCA |
|||||
| 대장균(E.coli) STII 독성유전자 | 47℃ | 30 | F(서열번호9) | 5-TGCCTATGCATCTACACAAT-3 | ||
| R(서열번호10) | 5-TAGAGATGGTACTG CTGGAAG-3 | |||||
| PEDV (Porcine epidemic diarrhea virus) |
RNA virus RT-PCR |
55℃ | 40 | PEDV F (서열번호11) |
GGGCGCCTGTATAGAGTTTA | 412bp |
| R (서열번호12) |
AGACCACCAAGAATGTGTGTCC | |||||
| 파스튜렐라 (Pasturella multocida) |
1차 PCR (Pm A) |
58℃ | 30*2 | PM-F (서열번호13) |
TGCCAAAATCGCAGTCAG | 545bp |
| R (서열번호14) |
TTGCCATCATTGTCAGTGAT | |||||
| 2차 PCR (Pm A) |
PM-nF (서열번호15) |
TTCTCAGCATTAACACATGATT | ||||
| nR (서열번호16) |
TGAGCTAATAATACTGCATTGG | |||||
| 마이코 플라즈마(Mycoplasma hyo pheumonia) |
1차 PCR | 58℃ | 30*2 | M.hyo F (서열번호17) |
TTCAAATTATAACCTCGGTC | 706bp |
| R (서열번호18) |
AGCAAATTTAGTCTCTCTGC | |||||
| n-PCR | M.hyo-nF (서열번호19) |
CGCTTTAGTACCGATATGGG | ||||
| nR (서열번호20) |
GCCATTCGCTTATATGGTGA | |||||
| 흉막폐렴균 (Actinobacillus pleuropne umonia) 독소1형 |
1차 PCR | 58℃ | 35 | Apx 1 F (서열번호21) |
GTGCAATCACCGGTATTATT | 610bp |
| R (서열번호22) |
TTGACGTTTTTCACCTTTTT | |||||
| 흉막폐렴균 독소2형 |
1차 PCR | 58℃ | 35 | Apx 3 F (서열번호23) |
CATGTTCAAGGAGGACAAAT | 700bp |
| R (서열번호24) |
GCTCAGAGGCTAAAGAAACA | |||||
| PRRSV (Porcine reproductive and respiratory syndrome virus) |
RNA virus RT-PCR | 60℃ | 38 | F (서열번호25) |
5'-AGCTGAATGGCACAGATTGG-3' 13914 to 13933 | 365bp (유전자 은행 등록번호 U87392) |
| R (서열번호26) |
5'-TGTGGAGCCGTGCTATCAT-3' 14384 to 14402 | |||||
실험결과, 로소니아 인트라셀룰라리스(Lawsonia intracellularis)에 의한 증식성회장염의 경우 대조군의 샘플링된 분변으로부터 양성 반응이 검출되었고(하기 도 10 참조), 브라키스피라 필로시콜리(Brachyspira pilosicoli)에 의한 결장염의 경우 대조군의 샘플링된 분변으로부터 양성 반응이 검출되었으며 (하기 도 11 참조), 다른 병원체의 PCR 검사 결과 대조군과 실시예 1-3의 GM-1 투여군 간의 차이는 발견되지 않았다. 이로부터 돼지 호흡기 또는 소화기 질환의 주된 원인균은 로소니아 인트라셀룰라리스(Lawsonia intracellularis), 브라키스피라 필로시콜리(Brachyspira pilosicoli)라는 사실을 확인할 수 있었다.
실험예 9. 시험물질에 의한 독성여부 평가
실시예 1-3의 GM-1을 오랜 기간 섭취함으로 인해 독성발현으로 의심되는 세포 손상이 있는지 알아보기 위해 하기와 같은 실험을 수행하였다. 실시예 1-3의 GM-1 투여군과 대조군, 각각 10두의 개체들의 장기로부터 조직을 채취한 뒤 시험 약물에 의한 세포손상에 민감한 간세포를 고배율로 관찰해 보았다. 그 결과 별다른 세포손상은 관찰되지 않음을 확인할 수 있었다(하기 도 12 참조). 또한 신장의 세포에서도 특이한 병변은 관찰되지 않음을 확인할 수 있었다(하기 도 13 참조).
1. 사료조성물 예
실시예 1-3의 GM-1................................240g
부형제 (말분).........................................760g
상기의 성분을 가지고 대한약전 산제제법에 준하여 제조한다.
상기의 혼합물의 조성비는 비교적 사료조성물에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 사료조성물 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 대한약전 산제제법에 준하여 제조에 사용할 수 있다.
상기에 언급한 바와 같이, 본 발명의 오배자 및 목단피 추출물은 돼지 호흡기 또는 소화기 질환에 대하여 뛰어난 항균 및 항바이러스 효과를 나타내어 돼지 호흡기 또는 소화기 질환의 예방 및 치료를 위한 수의학적 조성물 및 동물사료 첨가제로 유용하게 이용될 수 있다.
<110> organization of wonkwang university for industry-academic cooperation
<120> a veterinary composition comprising extracts of Galla Rhois and
Moutan Cortex Radicis showing antibacterial and antiviral
activity
<160> 26
<170> KopatentIn 1.71
<210> 1
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> forward primer Msal-F for Salmonella spp.
<400> 1
aaatacaaca ggccgcagag 20
<210> 2
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> reverse primer Msal-R for salmonella spp.
<400> 2
cgtaaaagct ggccaaactc 20
<210> 3
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nested reverse primer LI1 nR for lawsonia intracellularis
<400> 3
tgtggctgtc aaacactccg 20
<210> 4
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> forward primer LI2F FOR lawsonia intracellularis
<400> 4
tgaaggtatt ggtattctcc 20
<210> 5
<211> 23
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nested forward primer LI3nF for lawsonia intracellularis
<400> 5
tgtcccataa gctcaagagc acg 23
<210> 6
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> forward primer pilosicol-F for Brachyspirapilosicoli
<400> 6
atgggccatg aggtaacaaa 20
<210> 7
<211> 22
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> reverse primer pilosicol-R for Brachyspilosicoli
<400> 7
ttcgctatta ggtctgaaac ca 22
<210> 8
<211> 24
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nested reverse primer pilosicol-R2(nR) for Brachyspira pilosicoli
<400> 8
cctaaatgca attctatacc agca 24
<210> 9
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> forward primer F for E.coli ST II toxic gene
<400> 9
tgcctatgca tctacacaat 20
<210> 10
<211> 21
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> reverse primer R for E.coli STII toxic gene
<400> 10
tagagatggt actgctggaa g 21
<210> 11
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> forward primer PEDV F for PEDV
<400> 11
gggcgcctgt atagagttta 20
<210> 12
<211> 22
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> reverse primer PEDV R for PEDV
<400> 12
agaccaccaa gaatgtgtgt cc 22
<210> 13
<211> 18
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> forward primer PM-F for Pasturella multocida
<400> 13
tgccaaaatc gcagtcag 18
<210> 14
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> reverse primer PM-R for Pasturella multocida
<400> 14
ttgccatcat tgtcagtgat 20
<210> 15
<211> 22
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nested forward primer PM-nF for Pasturella multoicida
<400> 15
ttctcagcat taacacatga tt 22
<210> 16
<211> 22
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nested reverse primer PM-nR for Pasturella multocida
<400> 16
tgagctaata atactgcatt gg 22
<210> 17
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> forward primer M.hyo F for mycoplasma hyopheumonia
<400> 17
ttcaaattat aacctcggtc 20
<210> 18
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> reverse primer M.hyo R for mycoplasma hyopheumonia
<400> 18
agcaaattta gtctctctgc 20
<210> 19
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nested forward primer M.hyo-nF for mycoplasma hyopheumonia
<400> 19
cgctttagta ccgatatggg 20
<210> 20
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nested reverse primer M.hyo-nR for mycoplasma hyopheumonia
<400> 20
gccattcgct tatatggtga 20
<210> 21
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> forward primer Apx 1 F for actinobacillus pleurophneumonia
<400> 21
gtgcaatcac cggtattatt 20
<210> 22
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> reverse primer Apx 1 R for actinobacillus pleuropneumonia
<400> 22
ttgacgtttt tcaccttttt 20
<210> 23
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> forward primer Apx 3 F for actinobacillus pleuropneumonia
<400> 23
catgttcaag gaggacaaat 20
<210> 24
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> reverse primer Apx 3 R for actinobacillus pleuropneumonia
<400> 24
gctcagaggc taaagaaaca 20
<210> 25
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> forward primer F for PRRSV
<400> 25
agctgaatgg cacagattgg 20
<210> 26
<211> 19
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> reverse primer R for PRRSV
<400> 26
tgtggagccg tgctatcat 19
Claims (13)
- 오배자:목단피가 1~3:1의 중량배합비(%)로 배합된 오배자 및 목단피 추출물을 유효성분으로 함유하는 해모필러스 솜너스(Haemopilus somnus), 파스튜렐라 멀토시다(Pasteurella multocida), 마이코 플라즈마(Mycoplasma hyopneumoniae) 흉막폐렴균(Actinobacillus pleuropneumonia) 및 PRRSV(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus)으로 구성된 군으로부터 선택된 돼지 호흡기 질환 원인균 또는 바이러스에 기인한 돼지 파스튜렐라 폐렴, 돼지 마이코플라즈마 폐렴, 돼지 위축성 비염, 돼지 흉막폐렴, 글래써병, PRRS(Porcine reproductive and respiratory syndrome, 돼지 생식기 호흡기 증후군), PMWS (Post-weaning Multisystemic Wasting Syndrome, 이유후 전신성 소모성증후군) 및 PRDC(Porcine Respiratory Disease Complex, 돼지호흡기 복합증후군)로 구성된 군으로부터 선택된 돼지 호흡기 질환의 예방 및 치료용 수의학적 조성물.
- 제 1항에 있어서, 상기 추출물은 물, 탄소 수 1 내지 4의 저급알코올 또는 이들의 혼합용매로부터 선택된 용매에 가용한 추출물인 수의학적 조성물.
- 삭제
- 제 1항에 있어서, 상기 질환은 포유동물, 가금류 및 어류에 발생하는 질환인 수의학적 조성물.
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 오배자:목단피가 1~3:1의 중량배합비(%)로 배합된 오배자 및 목단피 추출물을 유효성분으로 함유하는 해모필러스 솜너스(Haemopilus somnus), 파스튜렐라 멀토시다(Pasteurella multocida), 마이코 플라즈마(Mycoplasma hyopneumoniae) 흉막폐렴균(Actinobacillus pleuropneumonia) 및 PRRSV(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus)으로 구성된 군으로부터 선택된 돼지 호흡기 질환 원인균 또는 바이러스에 기인한 돼지 파스튜렐라 폐렴, 돼지 마이코플라즈마 폐렴, 돼지 위축성 비염, 돼지 흉막폐렴, 글래써병, PRRS(Porcine reproductive and respiratory syndrome, 돼지 생식기 호흡기 증후군), PMWS (Post-weaning Multisystemic Wasting Syndrome, 이유후 전신성 소모성증후군) 및 PRDC(Porcine Respiratory Disease Complex, 돼지호흡기 복합증후군)로 구성된 군으로부터 선택된 돼지 호흡기 질환의 예방 및 개선용 동물사료 첨가제.
- 제 12항의 동물사료 첨가제를 첨가하는 것을 특징으로 하는 사료.
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