KR101309789B1 - 티로신 산화물이 결합된 바이오 물질을 포함하는 단백질 검출용 조성물 - Google Patents

티로신 산화물이 결합된 바이오 물질을 포함하는 단백질 검출용 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR101309789B1
KR101309789B1 KR1020110007969A KR20110007969A KR101309789B1 KR 101309789 B1 KR101309789 B1 KR 101309789B1 KR 1020110007969 A KR1020110007969 A KR 1020110007969A KR 20110007969 A KR20110007969 A KR 20110007969A KR 101309789 B1 KR101309789 B1 KR 101309789B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
protein
tyrosine
biomaterial
tyrosine oxide
oxide
Prior art date
Application number
KR1020110007969A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20120086616A (ko
Inventor
임국진
임진익
김범준
유경화
박수정
Original Assignee
(주)프로테옴텍
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by (주)프로테옴텍 filed Critical (주)프로테옴텍
Priority to KR1020110007969A priority Critical patent/KR101309789B1/ko
Priority to AU2012209627A priority patent/AU2012209627B2/en
Priority to US13/981,037 priority patent/US10041952B2/en
Priority to CN2012800064680A priority patent/CN103339510A/zh
Priority to PCT/KR2012/000560 priority patent/WO2012102535A2/ko
Publication of KR20120086616A publication Critical patent/KR20120086616A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR101309789B1 publication Critical patent/KR101309789B1/ko

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
    • G01N33/583—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances with non-fluorescent dye label
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

본 발명은 티로신 산화물이 결합된 바이오 물질을 포함하는 단백질 검출용 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 티로신 산화물이 결합된 바이오 물질을 포함하는 단백질 검출용 조성물은 생체 내에 존재하는 천연 색소인 티로신 산화물을 바이오 물질에 결합하고, 상기 티로신 산화물이 결합된 바이오 물질을 단백질과 결합하여 단백질의 색상을 육안 또는 광학현미경으로 쉽게 확인함으로써, 다양한 질병을 간편하고 빠르게 진단할 수 있다. 따라서, 본 발명의 단백질 검출용 조성물은 수술장 내에서도 간편하고 빠르게 실시간으로 각종 질병을 진단할 수 있으며, 2차 항체 반응 및 최종 발색 단계가 필요 없어 기존의 조직검사법을 유용하게 대체할 수 있다.

Description

티로신 산화물이 결합된 바이오 물질을 포함하는 단백질 검출용 조성물 {Composition comprising oxidized tyrosine-coupled biomaterial for detecting protein}
본 발명은 티로신 산화물이 결합된 바이오 물질을 포함하는 단백질 검출용 조성물에 관한 것이다.
인체의 각종 질병을 진단하는 방법은 시대가 변함에 따라 끊임없이 발전하고 있으며, 최근에는 관련 분야에 첨단 영상기술을 접목시켜 조직에 대해 3차원 영상화 기술을 적용하고자 하는 방향으로 진화되고 있다.
질병의 진단방법 중 가장 보편적이고 널리 사용되고 있는 방법으로는 조직검사법(histological analysis)이 있다. 이 방법은 실험기법이 비교적 단순하며, 실험결과의 재연성과 그 결과에 대한 정확성이 높으므로, 그 사용처와 필요성이 꾸준히 증가되고 있다. 예를 들어, 종양수술이 진행되고 있는 수술장 내에서 종양조직을 제거한 후 주변 조직으로의 전이 여부를 판별하고자 할 때, 주변 조직의 일부를 절제하여 조직검사법으로 전이 여부를 판단하고 있다. 그러나, 이 방법은 채취된 시료의 전이 여부를 판정하므로 조직의 적절한 채취가 절대적으로 중요한데, 이는 숙련된 집도의의 경험에 의존할 수 밖에 없는 한계가 있다. 더불어 조직검사법은 절편 제작 및 염색 등의 과정을 거쳐야 하므로 수술장에서 바로 진단 결과를 얻을 수 없다는 단점이 있다. 따라서, 이러한 한계들을 극복하며 쉽고 빠르게 실시간으로 진단할 수 있는 방법의 개발이 절실히 필요하다.
새로운 생체 진단방법으로는 조직의 절제 및 여러 단계의 발색과 활성화 과정이 필요 없이 손쉽게 검출할 수 있는 방법이어야 하며, 또한 목적 세포나 생리활성 물질에 대한 특이성이 높아야 한다. 일반적으로 널리 사용되고 있는 조직검사법은 4~10% (v/v) 알데히드 용액에서 24시간 동안 고정시켜 단단해진 조직을 알콜로 탈수시키고 60℃로 녹여진 파라핀 용액에 2시간 이상 담궈 조직 내에 파라핀을 침투시키거나 혹은 조직을 냉동시킨 후 냉동용 레진을 이용하여 시료 조직과 레진이 잘 융합된 시료-레진 블록을 냉동고에서 만든다. 이후 시료 절편을 얻기 위해 절편 제조 장치인 마이크로텀(microtome) 내에서 예리한 칼날로 원하는 두께(4~10㎛)의 절편을 만들고 이를 유리 슬라이드에 붙인 다음, 레진을 제거하고 수화시킨다. 최종적으로 여러 가지 염색법을 실시하여 병리학적 소견을 관찰한다(Journal of Neuroscience Methods, 26, 2, 1988, P129-132; Atherosclerosis, 27, 3, 1977, P333-338).
그러나, 조직검사법은 절제한 조직에 한해서만 검사가 가능한 침습적인 진단방법으로, 비교적 절차가 복잡하여 신속성이 요구되는 질병 진단에는 적합성이 떨어지는 문제점이 있다. 이를 극복하고자 여러 연구자들이 양전자 단층촬영 (positron emission tomography, PET) 또는 컴퓨터 단층촬영(computed tomography, CT) 등의 생체 영상화 장비들을 이용하여 생체 내 조직을 직접 관찰하고자 하는 연구를 활발히 진행하고 있다. 그러나, 상기 장비들은 대부분 수술 전 진단용 장비로 사용되고 있는 것으로, 신속성이 요구되는 수술장 내에서는 병용이 쉽지 않다. 또한, 재료의 생체 친화성 문제 및 외부에서 에너지를 가해야 하는 문제로 말미암아 실용화된 생체 영상화 기술 등의 개발이 전무한 상태이다.
상기와 같은 문제점을 해결하기 위하여, 항체에 퀀텀닷(quantum dot)이나 형광 물질을 결합시킨 후 빛을 조사하여 발색시키는 방법에 대하여 연구되어 왔다(대한민국 등록특허공보 제 10-877187호 및 제 10-522086호, 대한민국 공개특허공보 제 10-2005-58431호). 그러나, 상기 특허문헌에 기재된 물질들은 합성된 금속입자 또는 화학물질로서 아직 인체 내에서의 안전성이 증명되지 않은 것으로, 실험실 수준의 연구방법으로 활용되는 단계라고 할 수 있다.
따라서, 생체 영상화 기술이 가진 근본적인 문제를 해결하고, 인체에 무해하여 안전성이 우수하며, 수술장 내에서도 사용될 수 있고, 기존의 조직검사법을 대체할 수 있으며, 실시간으로 쉽고 빠르게 각종 질병을 진단할 수 있는 방법에 관한 개발의 필요성이 절실히 요구되고 있다.
본 발명자들은 기존의 조직검사법을 대체할 수 있으며 실시간으로 쉽고 빠르게 각종 질병을 진단할 수 있는 방법에 대하여 연구하던 중, 생체 내에 존재하는 천연 색소인 티로신 산화물을 바이오 물질에 결합하고, 상기 티로신 산화물이 결합된 바이오 물질을 단백질과 결합하여 단백질의 색상을 육안 또는 광학현미경으로 쉽게 확인할 수 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 티로신 산화물이 결합된 바이오 물질을 포함하는 단백질 검출용 조성물을 제공하고자 한다.
도 1은 본 발명의 멜라닌-결합 항체를 이용하여 닷 블롯(dot blotting) 방법으로 단백질의 색상을 확인한 도이다 [(가) 실시예 1, (나) 실시예 2, (다) 실시예 3].
도 2는 기존의 2차 항체를 이용하여 항원 농도별[(가)0.1ng/㎕, (나)0.025㎍/㎕, (다)0.05㎍/㎕, (라)0.1㎍/㎕, (마)0.2㎍/㎕]로 닷 블롯 방법으로 단백질의 색상을 확인한 도이다.
본 발명은 티로신 산화물이 결합된 바이오 물질을 포함하는 단백질 검출용 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은
1) 티로신 산화물을 바이오 물질에 결합하는 단계, 및
2) 상기 티로신 산화물이 결합된 바이오 물질을 단백질과 결합하여 단백질의 색상을 확인하는 단계를 포함하는, 단백질의 검출방법을 제공한다.
이하, 본 발명에 대해 상세히 설명한다.
본 발명에 따른 단백질 검출용 조성물은 티로신 산화물과 바이오 물질이 결합된 것을 특징으로 한다.
상기 티로신 산화물은 티로신을 과산화수소와 같은 과산화물 또는 티로시나제로 산화시킨 인위적인 티로신 산화물 또는 생체 내에 존재하는 티로신 산화물을 포함한다. 상기 티로신 산화물은 분자량 범위가 1000~7,000,000 이며, 색상이 검은색, 노란색, 주황색 보라색, 적색 중 어느 하나 또는 하나 이상이 혼합된 색상을 나타내는 멜라닌 계열의 화합물이다. 상기 티로신 산화물은 멜라닌, 도파(dopa), 도파퀴논(dopaquinone), 도파크롬(dopacrom), 5,6-디옥스인돌(5,6-dioxindole), 5,6-인돌퀴논(5,6-indolequinone), 5,6-디히드록시인돌(5,6-dihydroxyindole; DHI) 및 5,6-디히드록시인돌-2-카르복실산(5,6-dihydroxyindole-2-carboxylic acid; DHICA)으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
상기 바이오 물질은 항체, 수용체 단백질, RNA, DNA, PNA(peptide nucleic acid) 및 앱타머(aptamer)로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
상기 티로신 산화물과 바이오 물질은 우레탄 결합, 에스테르 결합, 펩티드 결합, 소수성 흡착 또는 이온 결합 등에 의해 결합될 수 있다.
상기 티로신 산화물이 결합된 바이오 물질은 단백질과 결합하여 단백질의 색상을 육안 또는 광학현미경으로 쉽고 빠르게 확인할 수 있다. 이때, 결합반응은 닷 블롯(dot blotting) 방법을 이용하여 수행하는 것이 바람직하다.
상기 티로신 산화물이 결합된 바이오 물질과 단백질의 결합반응을 위한 고정체로는 니트로셀룰로오스 막, PVDF 막(polyvinylidene difluoride membrane), 폴리비닐 수지 또는 폴리스티렌 수지로 합성된 96 웰 플레이트, 및 유리로 된 슬라이드글라스 등이 사용될 수 있다.
상기한 바와 같이, 본 발명에 따른 티로신 산화물이 결합된 바이오 물질을 포함하는 단백질 검출용 조성물은 생체 내에 존재하는 천연 색소인 티로신 산화물을 바이오 물질에 결합하고, 상기 티로신 산화물이 결합된 바이오 물질을 단백질과 결합하여 단백질의 색상을 육안 또는 광학현미경으로 쉽게 확인함으로써, 다양한 질병을 간편하고 빠르게 진단할 수 있다. 따라서, 본 발명의 단백질 검출용 조성물은 수술장 내에서도 간편하고 빠르게 실시간으로 각종 질병을 진단할 수 있으며, 2차 항체 반응 및 최종 발색 단계가 필요 없어 기존의 조직검사법을 유용하게 대체할 수 있다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 실시예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.
실시예 1 : 티로신 산화물이 결합된 항체의 제조
과산화수소를 이용하여 합성된 티로신 산화물인 멜라닌 10㎎을 증류수 700㎕에 분산시키고, 여기에 EDC(1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide hydrochloride)와 NHS(N-hydroxysuccinimide)를 각각 4㎎씩 가한 다음 5분 동안 반응시켜 멜라닌의 카르복실기를 활성화 시켰다. 여기에 허셉틴(herceptin) 항체 50㎍을 가하고 5분 동안 반응시킨 다음, 반응 종결제인 1M 에탄올아민(ethanol amine, EA) 200㎕를 가하여 멜라닌-결합 항체를 제조하였다.
실시예 2 : 티로신 산화물이 결합된 항체의 제조
상기 실시예 1에서 티로신 산화물로 오징어 먹물로부터 분리한 멜라닌을 사용한 것을 제외하고는, 상기 실시예 1과 동일하게 하여 멜라닌-결합 항체를 제조하였다.
실시예 3 : 티로신 산화물이 결합된 항체의 제조
상기 실시예 2에서 티로신 산화물로 오징어 먹물로부터 분리한 멜라닌을 과산화수소로 24시간 산화시킨 후 건조한 멜라닌을 사용한 것을 제외하고는, 상기 실시예 1과 동일하게 하여 멜라닌-결합 항체를 제조하였다.
실시예 4 : 티로신 산화물이 결합된 항체의 제조
시스테인 10㎍/㎖에 무수 시트라콘산(citraconic anhydride) 20㎎을 가하여 시스테인의 아민을 차단하고, 나머지 카르복실기는 EDC(1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide hydrochloride)와 NHS(N-hydroxysuccinimide)를 각각 4㎎씩 가한 다음 5분 동안 반응시켜 활성화 시켰다. 여기에 허셉틴 항체 50㎍을 가하고 5분 동안 반응시켜 항체-시스테인 결합체를 제조하였다. 상기 제조한 항체-시스테인 결합체를 티로신 20㎎과 혼합하고, 티로시나제를 100 U가 되도록 가하여 티로신을 산화시키면서 시스테인과의 결합을 유도하였다. 이 방법에 의해 항체-페오멜라닌(pheomelanin) 결합체를 제조하였다.
실험예 1 : 본 발명의 티로신 산화물이 결합된 항체를 이용하여 단백질의 색상 확인: 닷 블롯(dot blotting) 방법
상기 실시예 1~3에서 제조한 멜라닌-결합 항체에 각각 5% 탈지우유(skim milk) 용액 100㎕를 가하여 항체 용액을 제조하였다. 항원으로 미리 준비해 둔 0.05㎍/㎕의 ERBB2-D1-D4-His 용액을 니트로셀룰로오스 막에 점적한 후 건조시키고, 여기에 상기 항체 용액을 가하였다. 1시간 후 니트로셀룰로오스 막을 0.05% Tween-20을 포함한 PBS 완충용액으로 세척하고 육안으로 관찰하였다.
결과는 도 1에 나타내었다.
도 1에 나타난 바와 같이, 검은색의 멜라닌-결합 항체가 항원이 점적되었던 부분에만 특이적으로 결합하여 검은색으로 나타나는 것을 확인하였다.
비교실험예 1 : 기존의 2차 항체를 이용한 단백질의 색상 확인: 닷 블롯 방법
허셉틴 항체 50㎍/900㎕에 5% 탈지우유 용액 100㎕를 가하여 항체 용액을 제조하였다. 항원으로 미리 준비해 둔 ERBB2-D1-D4-His 용액을 농도별[(가)0.1ng/㎕, (나)0.025㎍/㎕, (다)0.05㎍/㎕, (라)0.1㎍/㎕, (마)0.2㎍/㎕]로 니트로셀룰로오스 막에 점적한 후 건조시키고, 여기에 상기 항체 용액을 가하였다. 1시간 후 2차 항체로서 goat anti-human IgG-HRP를 가하고 1시간 동안 흔들어 준 후 세척한 다음, HRP(horseradish peroxidase)의 기질로 4CN(4-chloro-1-naphthol)과 과산화수소로 구성된 발색시약을 가한 후 30분 동안 흔들어 주고 육안으로 관찰하였다.
결과는 도 2에 나타내었다.
도 2에 나타난 바와 같이, 항원의 농도에 비례하게 항원이 점적되었던 부분에서 검은색이 나타나는 것을 확인하였다.
본 발명에 따른 티로신 산화물이 결합된 바이오 물질을 포함하는 단백질 검출용 조성물은 생체 내에 존재하는 천연 색소인 티로신 산화물을 바이오 물질에 결합하고, 상기 티로신 산화물이 결합된 바이오 물질을 단백질과 결합하여 단백질의 색상을 육안 또는 광학현미경으로 쉽게 확인함으로써, 다양한 질병을 간편하고 빠르게 진단할 수 있다. 따라서, 본 발명의 단백질 검출용 조성물은 수술장 내에서도 간편하고 빠르게 실시간으로 각종 질병을 진단할 수 있으며, 2차 항체 반응 및 최종 발색 단계가 필요 없어 기존의 조직검사법을 유용하게 대체할 수 있다.

Claims (8)

  1. 티로신 산화물이 결합된 바이오 물질을 포함하는 단백질 검출용 조성물.
  2. 제 1항에 있어서, 상기 티로신 산화물은 멜라닌, 도파(dopa), 도파퀴논 (dopaquinone), 도파크롬(dopacrom), 5,6-디옥스인돌(5,6-dioxindole), 5,6-인돌퀴논(5,6-indolequinone), 5,6-디히드록시인돌(5,6-dihydroxyindole; DHI) 및 5,6-디히드록시인돌-2-카르복실산(5,6-dihydroxyindole-2-carboxylic acid; DHICA)으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 단백질 검출용 조성물.
  3. 제 1항에 있어서, 상기 바이오 물질은 항체, 수용체 단백질, RNA, DNA, PNA (peptide nucleic acid) 및 앱타머(aptamer)로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 단백질 검출용 조성물.
  4. 1) 티로신 산화물을 바이오 물질에 결합하는 단계, 및
    2) 상기 티로신 산화물이 결합된 바이오 물질을 단백질과 결합하여 단백질의 색상을 확인하는 단계를 포함하는, 단백질의 검출방법.
  5. 제 4항에 있어서, 상기 1)단계에서 티로신 산화물은 멜라닌, 도파(dopa), 도파퀴논(dopaquinone), 도파크롬(dopacrom), 5,6-디옥스인돌(5,6-dioxindole), 5,6-인돌퀴논(5,6-indolequinone), 5,6-디히드록시인돌(5,6-dihydroxyindole; DHI) 및 5,6-디히드록시인돌-2-카르복실산(5,6-dihydroxyindole-2-carboxylic acid; DHICA)으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 단백질의 검출방법.
  6. 제 4항에 있어서, 상기 1)단계에서 바이오 물질은 항체, 수용체 단백질, RNA, DNA, PNA(peptide nucleic acid) 및 앱타머(aptamer)로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상을 포함하는 단백질의 검출방법.
  7. 제 4항에 있어서, 상기 1)단계에서 티로신 산화물과 바이오 물질의 결합은 우레탄 결합, 에스테르 결합, 펩티드 결합, 소수성 흡착 및 이온 결합으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 결합반응을 이용하여 결합된 것을 특징으로 하는 단백질의 검출방법.
  8. 제 4항에 있어서, 상기 2)단계에서 결합반응은 닷 블롯(dot blotting) 방법을 이용하여 수행하는 것을 특징으로 하는 단백질의 검출방법.
KR1020110007969A 2011-01-26 2011-01-26 티로신 산화물이 결합된 바이오 물질을 포함하는 단백질 검출용 조성물 KR101309789B1 (ko)

Priority Applications (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020110007969A KR101309789B1 (ko) 2011-01-26 2011-01-26 티로신 산화물이 결합된 바이오 물질을 포함하는 단백질 검출용 조성물
AU2012209627A AU2012209627B2 (en) 2011-01-26 2012-01-20 Composition for detecting proteins containing tyrosine oxide-coupled biomaterial
US13/981,037 US10041952B2 (en) 2011-01-26 2012-01-20 Composition for detecting proteins containing tyrosine oxide-coupled biomaterial
CN2012800064680A CN103339510A (zh) 2011-01-26 2012-01-20 含有酪氨酸氧化物偶联的生物材料的用于检测蛋白质的组合物
PCT/KR2012/000560 WO2012102535A2 (ko) 2011-01-26 2012-01-20 티로신 산화물이 결합된 바이오 물질을 포함하는 단백질 검출용 조성물

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020110007969A KR101309789B1 (ko) 2011-01-26 2011-01-26 티로신 산화물이 결합된 바이오 물질을 포함하는 단백질 검출용 조성물

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20120086616A KR20120086616A (ko) 2012-08-03
KR101309789B1 true KR101309789B1 (ko) 2013-09-23

Family

ID=46581274

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020110007969A KR101309789B1 (ko) 2011-01-26 2011-01-26 티로신 산화물이 결합된 바이오 물질을 포함하는 단백질 검출용 조성물

Country Status (5)

Country Link
US (1) US10041952B2 (ko)
KR (1) KR101309789B1 (ko)
CN (1) CN103339510A (ko)
AU (1) AU2012209627B2 (ko)
WO (1) WO2012102535A2 (ko)

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10653779B2 (en) 2013-03-13 2020-05-19 Genentech, Inc. Formulations with reduced oxidation
US20140314778A1 (en) * 2013-03-13 2014-10-23 Genentech, Inc. Formulations with reduced oxidation
KR101696754B1 (ko) * 2016-05-02 2017-01-23 (주)큐브바이오 암 여부 및 암 종류의 측정이 가능한 티로신 검출 효소 이용 암 진단 장치
KR101685085B1 (ko) * 2016-05-03 2016-12-12 (주)큐브바이오 암 진단 키트
KR101696757B1 (ko) * 2016-05-13 2017-01-16 (주)큐브바이오 소변량 정밀 채취가 가능한 티로신 검출 효소 이용 멀티 암 진단 장치
KR101685091B1 (ko) * 2016-05-17 2016-12-12 (주)큐브바이오 고선명 윈도우를 갖는 암 진단 키트
KR101707123B1 (ko) * 2016-05-18 2017-02-15 (주)큐브바이오 변기투입용 암 진단 도구 및 그것을 포함하는 자가 암 진단 시스템
KR101685089B1 (ko) * 2016-05-18 2016-12-12 (주)큐브바이오 휴대형 암 진단 키트
KR101685086B1 (ko) * 2016-05-20 2016-12-12 (주)큐브바이오 암 마커 검출에 의한 암 진단 일괄 시스템
KR101694344B1 (ko) * 2016-05-23 2017-01-09 (주)큐브바이오 색상 왜곡 방지 구조의 윈도우를 갖는 암 진단 키트

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100232447B1 (ko) 1991-06-06 2000-03-15 스티븐 비. 페이지 메로시아닌 단백오차 지시제를 사용한 단백질 검출방법
KR20030052688A (ko) * 2001-12-21 2003-06-27 대한민국(관리부서 : 농림부 국립수의과학검역원) 아프리카 마역 바이러스의 ｖｐ7 항원 및 그에 대한모노클로날 항체를 이용하는 아프리카 마역의 진단방법
KR20050058431A (ko) * 2002-09-19 2005-06-16 하마마츠 포토닉스 가부시키가이샤 형광화 항체를 이용한 형광 분석 방법
KR20080058964A (ko) * 2006-12-23 2008-06-26 고려대학교 산학협력단 질병마커 인지 에피토프와 연결된 단백질 나노입자를포함하는 진단용 단백질 칩과 그의 초고감도 검출 방법

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4806344A (en) * 1987-01-05 1989-02-21 Gaskin Frances C Sun protectant composition and method
US5310539A (en) * 1991-04-15 1994-05-10 Board Of Regents, The University Of Texas System Melanin-based agents for image enhancement
US5561045A (en) * 1994-01-04 1996-10-01 Intracel Corporation Detection reagent, article, and immunoassay method
JPH1146761A (ja) 1997-08-05 1999-02-23 Jiyuu Denshi Laser Kenkyusho:Kk 遺伝子導入方法
JP4235279B2 (ja) * 1998-04-10 2009-03-11 生化学工業株式会社 新規酵素反応測定法
US7217410B2 (en) * 2003-06-17 2007-05-15 The Board Of Trustees Of The Universtiy Of Illinois Surface modified protein microparticles
WO2006124056A2 (en) * 2004-10-05 2006-11-23 Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshiva University Melanin nanoshells for protection against radiation and electronic pulses
WO2008124834A1 (en) * 2007-04-10 2008-10-16 Stanford University Photoacoustic probes and methods of imaging
WO2008127139A1 (fr) * 2007-04-11 2008-10-23 Institut Molekulyarnoi Biologii Im. V.A. Engeldardta Rossiiskoi Akademii Nauk Colorants d'indocyanine fluorescents et leurs dérivés destinés à l'analyse de macromolécules biologiques
US20090269733A1 (en) * 2008-04-23 2009-10-29 Azko, Inc. Devices and Methods for the Rapid Analysis of Pathogens in Biological Fluids
CN103116029B (zh) * 2013-01-29 2015-01-21 福州迈新生物技术开发有限公司 一种免疫组化用二抗显色系统灵敏度、亲和力的测定方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100232447B1 (ko) 1991-06-06 2000-03-15 스티븐 비. 페이지 메로시아닌 단백오차 지시제를 사용한 단백질 검출방법
KR20030052688A (ko) * 2001-12-21 2003-06-27 대한민국(관리부서 : 농림부 국립수의과학검역원) 아프리카 마역 바이러스의 ｖｐ7 항원 및 그에 대한모노클로날 항체를 이용하는 아프리카 마역의 진단방법
KR20050058431A (ko) * 2002-09-19 2005-06-16 하마마츠 포토닉스 가부시키가이샤 형광화 항체를 이용한 형광 분석 방법
KR20080058964A (ko) * 2006-12-23 2008-06-26 고려대학교 산학협력단 질병마커 인지 에피토프와 연결된 단백질 나노입자를포함하는 진단용 단백질 칩과 그의 초고감도 검출 방법

Also Published As

Publication number Publication date
WO2012102535A2 (ko) 2012-08-02
US10041952B2 (en) 2018-08-07
WO2012102535A9 (ko) 2012-11-08
AU2012209627B2 (en) 2016-04-14
US20130302911A1 (en) 2013-11-14
WO2012102535A3 (ko) 2012-12-27
KR20120086616A (ko) 2012-08-03
CN103339510A (zh) 2013-10-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101309789B1 (ko) 티로신 산화물이 결합된 바이오 물질을 포함하는 단백질 검출용 조성물
Haun et al. Probing intracellular biomarkers and mediators of cell activation using nanosensors and bioorthogonal chemistry
Kumar et al. FLIM FRET technology for drug discovery: Automated multiwell‐plate high‐content analysis, multiplexed readouts and application in situ
Wang et al. Rapid ratiometric biomarker detection with topically applied SERS nanoparticles
Kim et al. A ratiometric two-photon probe for Ca2+ in live tissues and its application to spinal cord injury model
JP5836940B2 (ja) ソリシジン由来ペプチドならびにｔｒｐｖ−６がんの検出および薬剤送達のための方法
KR101969847B1 (ko) 동일 검체에서 여러 항원을 검출하기 위한 순차적 다중 면역염색법
DE60318415T2 (de) Verfahren zur unterscheidung von metaplasien von neoplastischen oder präneoplastischen läsionen
CN104316684A (zh) 一种用于检测宫颈癌的量子点免疫荧光试剂盒
CN107073065A (zh) 用于发育异常、早期癌症和癌症的检测和靶向的肽试剂和方法
JP5413818B2 (ja) 蛍光多重染色による蛋白定量法
WO2015038967A1 (en) Universal bio diagnostic, drug delivery device and marker for correlated optical and electron microscopy
DE69815394D1 (de) Verfahren zur untersuchung von nierenkrankheiten
CN103382499B (zh) 用于降低荧光原位杂交法中自体荧光干扰的检体前处理方法及其试剂套组
US20180184950A1 (en) Imaging device and method for detection of disease
WO2012002472A1 (ja) Ａｃｆ検出方法
KR20140008608A (ko) 입자 복합체 및 이를 이용한 표적 세포 분리 방법
WO2013099865A1 (ja) Ａｃｆ検出方法
WO2016135882A1 (ja) 十二指腸液試料の膵液由来成分検出用試料としての適性評価方法
US20180344164A1 (en) Raman spectroscopy reporters and methods for molecular imaging of tissue in vivo
US11813056B2 (en) Materials and methods for implementing immunoassay on microneedle patch for detection and quantification of bioanalytes in interstitial fluid
CN107607727A (zh) H3K23ac在胶质瘤诊断中的应用
Wang Plasmonically-enhanced ultrasensitive biodetection technologies
JP2021191238A (ja) がん細胞の評価方法および評価デバイス
FI126519B (en) SLEMHINNEANALYS

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant
FPAY Annual fee payment

Payment date: 20160720

Year of fee payment: 4

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20170907

Year of fee payment: 5

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20180910

Year of fee payment: 6

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20190725

Year of fee payment: 7