KR101303198B1 - 항염증 활성을 갖는 도토리 추출물 및 이 추출물을 함유하는 약리적 조성물 - Google Patents
항염증 활성을 갖는 도토리 추출물 및 이 추출물을 함유하는 약리적 조성물 Download PDFInfo
- Publication number
- KR101303198B1 KR101303198B1 KR1020100113306A KR20100113306A KR101303198B1 KR 101303198 B1 KR101303198 B1 KR 101303198B1 KR 1020100113306 A KR1020100113306 A KR 1020100113306A KR 20100113306 A KR20100113306 A KR 20100113306A KR 101303198 B1 KR101303198 B1 KR 101303198B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- acorn
- inflammatory
- extract
- present
- composition
- Prior art date
Links
- 239000000284 extract Substances 0.000 title claims abstract description 55
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 title claims abstract description 43
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title description 6
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 title 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 claims abstract description 13
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 claims abstract description 10
- 206010006451 bronchitis Diseases 0.000 claims abstract description 10
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 claims abstract description 10
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 claims abstract description 10
- 206010039083 rhinitis Diseases 0.000 claims abstract description 10
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 claims abstract description 9
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 claims abstract description 9
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 108010076864 Nitric Oxide Synthase Type II Proteins 0.000 claims description 35
- 102000011779 Nitric Oxide Synthase Type II Human genes 0.000 claims description 35
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 31
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 27
- 108010037462 Cyclooxygenase 2 Proteins 0.000 claims description 26
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 25
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 claims description 17
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 claims description 17
- 230000036541 health Effects 0.000 claims description 16
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 claims description 14
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 10
- 201000002661 Spondylitis Diseases 0.000 claims description 8
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 8
- 206010033078 Otitis media Diseases 0.000 claims description 6
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 6
- 206010023332 keratitis Diseases 0.000 claims description 6
- 206010034674 peritonitis Diseases 0.000 claims description 6
- 208000008423 pleurisy Diseases 0.000 claims description 6
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 5
- 206010060774 Chondrosis Diseases 0.000 claims description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 2
- 102000010907 Cyclooxygenase 2 Human genes 0.000 claims 2
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 claims 1
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 66
- 239000000469 ethanolic extract Substances 0.000 abstract description 52
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 25
- 102100038280 Prostaglandin G/H synthase 2 Human genes 0.000 abstract description 24
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 abstract description 19
- 239000008196 pharmacological composition Substances 0.000 abstract description 13
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 6
- 102100029438 Nitric oxide synthase, inducible Human genes 0.000 abstract description 2
- BFVQTKQTUCQRPI-YYEZTRBPSA-N LPS with O-antigen Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O[C@@H]4[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO[C@@H]5[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O5)O)O4)O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O3)NC(C)=O)[C@@H](O)[C@@H](CO[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)NC(C)=O)O2)NC(C)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)OC1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)OC([C@@H]1O)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H]([C@@H](O)COC2[C@H]([C@@H](O)[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H]([C@@H](O)CO)O2)O)OC([C@H]1O)O[C@H]1[C@H](OP(O)(=O)OP(O)(=O)OCCN)[C@@H]([C@@H](O)CO)OC([C@H]1O)O[C@H]1[C@H](O[C@]2(O[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O[C@]3(O[C@@H]([C@@H](O)[C@H](OP(O)(=O)OCCN)C3)[C@@H](O)CO)C(O)=O)C2)[C@@H](O)CO)C(O)=O)C[C@](O[C@@H]1[C@@H](O)CO)(OC[C@H]1O[C@@H](OC[C@@H]2[C@H]([C@H](OC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](OP(O)(O)=O)O2)O)[C@H](NC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCC)[C@H]([C@@H]1OP(O)(O)=O)OC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)C(O)=O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1NC(C)=O BFVQTKQTUCQRPI-YYEZTRBPSA-N 0.000 abstract 1
- 101710089543 Nitric oxide synthase, inducible Proteins 0.000 abstract 1
- 108050003267 Prostaglandin G/H synthase 2 Proteins 0.000 abstract 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 34
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 24
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 20
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 18
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 16
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 15
- 239000000463 material Substances 0.000 description 12
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 11
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 11
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 9
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 9
- 102000004005 Prostaglandin-endoperoxide synthases Human genes 0.000 description 8
- 108090000459 Prostaglandin-endoperoxide synthases Proteins 0.000 description 8
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 8
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 8
- 229940094443 oxytocics prostaglandins Drugs 0.000 description 8
- 102000008299 Nitric Oxide Synthase Human genes 0.000 description 7
- 108010021487 Nitric Oxide Synthase Proteins 0.000 description 7
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 7
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 7
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 7
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 7
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 6
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000013615 primer Substances 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 6
- 108010057466 NF-kappa B Proteins 0.000 description 5
- 102000003945 NF-kappa B Human genes 0.000 description 5
- 241000593922 Quercus acutissima Species 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 5
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 5
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 5
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 4
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 4
- 201000005569 Gout Diseases 0.000 description 4
- 206010018634 Gouty Arthritis Diseases 0.000 description 4
- 201000001263 Psoriatic Arthritis Diseases 0.000 description 4
- 208000036824 Psoriatic arthropathy Diseases 0.000 description 4
- 241000219492 Quercus Species 0.000 description 4
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 4
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 4
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 4
- 235000001465 calcium Nutrition 0.000 description 4
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 4
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 4
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 4
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 4
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 4
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 4
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 4
- -1 lipid peroxide Chemical class 0.000 description 4
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 4
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 201000003068 rheumatic fever Diseases 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 4
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 4
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 4
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 3
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 3
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 239000004386 Erythritol Substances 0.000 description 3
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 102100022397 Nitric oxide synthase, brain Human genes 0.000 description 3
- 102100028452 Nitric oxide synthase, endothelial Human genes 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 3
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 3
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N acetylcholine Chemical compound CC(=O)OCC[N+](C)(C)C OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 3
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 3
- 230000006020 chronic inflammation Effects 0.000 description 3
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 3
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 description 3
- 235000019414 erythritol Nutrition 0.000 description 3
- 229940009714 erythritol Drugs 0.000 description 3
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 229960001031 glucose Drugs 0.000 description 3
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 3
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N rebaudioside A Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O[C@]12C(=C)C[C@@]3(C1)CC[C@@H]1[C@@](C)(CCC[C@]1([C@@H]3CC2)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N 0.000 description 3
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 3
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 3
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 3
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 3
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 3
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 3
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 3
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 3
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 3
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 3
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 3
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- 108010011485 Aspartame Proteins 0.000 description 2
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 2
- 101150071146 COX2 gene Proteins 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- LRBQNJMCXXYXIU-PPKXGCFTSA-N Chinese gallotannin Chemical compound OC1=C(O)C(O)=CC(C(=O)OC=2C(=C(O)C=C(C=2)C(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)O2)OC(=O)C=2C=C(OC(=O)C=3C=C(O)C(O)=C(O)C=3)C(O)=C(O)C=2)O)=C1 LRBQNJMCXXYXIU-PPKXGCFTSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 2
- 108010037464 Cyclooxygenase 1 Proteins 0.000 description 2
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 2
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 2
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 2
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 2
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101150109636 Inos gene Proteins 0.000 description 2
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 2
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 2
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 2
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 2
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101710111444 Nitric oxide synthase, brain Proteins 0.000 description 2
- 101710090055 Nitric oxide synthase, endothelial Proteins 0.000 description 2
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100038277 Prostaglandin G/H synthase 1 Human genes 0.000 description 2
- 238000002123 RNA extraction Methods 0.000 description 2
- 244000228451 Stevia rebaudiana Species 0.000 description 2
- 244000299461 Theobroma cacao Species 0.000 description 2
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 2
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 2
- 208000038016 acute inflammation Diseases 0.000 description 2
- 230000006022 acute inflammation Effects 0.000 description 2
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 2
- 229940124599 anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 2
- YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N arachidonic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N 0.000 description 2
- 239000000605 aspartame Substances 0.000 description 2
- 235000010357 aspartame Nutrition 0.000 description 2
- IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N aspartame Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)OC)CC1=CC=CC=C1 IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 2
- 229960003438 aspartame Drugs 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 2
- 235000014121 butter Nutrition 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 2
- COVFEVWNJUOYRL-UHFFFAOYSA-N digallic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(OC(=O)C=2C=C(O)C(O)=C(O)C=2)=C1 COVFEVWNJUOYRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 2
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 2
- 235000015203 fruit juice Nutrition 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N gallic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 229940028885 interleukin-4 Drugs 0.000 description 2
- 235000015110 jellies Nutrition 0.000 description 2
- 239000008274 jelly Substances 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 231100001083 no cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 2
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 2
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000014786 phosphorus Nutrition 0.000 description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- YIBNHAJFJUQSRA-YNNPMVKQSA-N prostaglandin H2 Chemical compound C1[C@@H]2OO[C@H]1[C@H](/C=C/[C@@H](O)CCCCC)[C@H]2C\C=C/CCCC(O)=O YIBNHAJFJUQSRA-YNNPMVKQSA-N 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 2
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 235000019204 saccharin Nutrition 0.000 description 2
- CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N saccharin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NS(=O)(=O)C2=C1 CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940081974 saccharin Drugs 0.000 description 2
- 239000000901 saccharin and its Na,K and Ca salt Substances 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 2
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 2
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 2
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 2
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 2
- AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide Chemical compound [Br-].S1C(C)=C(C)N=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 240000006108 Allium ampeloprasum Species 0.000 description 1
- 235000005254 Allium ampeloprasum Nutrition 0.000 description 1
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- PTHCMJGKKRQCBF-UHFFFAOYSA-N Cellulose, microcrystalline Chemical compound OC1C(O)C(OC)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC)C(CO)O1 PTHCMJGKKRQCBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 206010008685 Chondritis Diseases 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 239000003155 DNA primer Substances 0.000 description 1
- 206010012289 Dementia Diseases 0.000 description 1
- 229920002707 Digallic acid Polymers 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001512 FEMA 4601 Substances 0.000 description 1
- 239000004606 Fillers/Extenders Substances 0.000 description 1
- 206010018364 Glomerulonephritis Diseases 0.000 description 1
- 206010018367 Glomerulonephritis chronic Diseases 0.000 description 1
- 239000004378 Glycyrrhizin Substances 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101001128158 Homo sapiens Nanos homolog 2 Proteins 0.000 description 1
- 101001128156 Homo sapiens Nanos homolog 3 Proteins 0.000 description 1
- 101001124309 Homo sapiens Nitric oxide synthase, endothelial Proteins 0.000 description 1
- 101001124991 Homo sapiens Nitric oxide synthase, inducible Proteins 0.000 description 1
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 208000005615 Interstitial Cystitis Diseases 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 description 1
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 description 1
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 208000020358 Learning disease Diseases 0.000 description 1
- 240000007472 Leucaena leucocephala Species 0.000 description 1
- 235000010643 Leucaena leucocephala Nutrition 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 208000026139 Memory disease Diseases 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010008858 Nitric Oxide Synthase Type I Proteins 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 241000207836 Olea <angiosperm> Species 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- HELXLJCILKEWJH-SEAGSNCFSA-N Rebaudioside A Natural products O=C(O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)[C@@]1(C)[C@@H]2[C@](C)([C@H]3[C@@]4(CC(=C)[C@@](O[C@H]5[C@H](O[C@H]6[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O6)[C@@H](O[C@H]6[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O6)[C@H](O)[C@@H](CO)O5)(C4)CC3)CC2)CCC1 HELXLJCILKEWJH-SEAGSNCFSA-N 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 208000034189 Sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 206010039966 Senile dementia Diseases 0.000 description 1
- 235000005764 Theobroma cacao ssp. cacao Nutrition 0.000 description 1
- 235000005767 Theobroma cacao ssp. sphaerocarpum Nutrition 0.000 description 1
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 229960004373 acetylcholine Drugs 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000011149 active material Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 1
- 230000002785 anti-thrombosis Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 229940114079 arachidonic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000021342 arachidonic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 1
- 238000010805 cDNA synthesis kit Methods 0.000 description 1
- 235000001046 cacaotero Nutrition 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 235000012241 calcium silicate Nutrition 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 235000014171 carbonated beverage Nutrition 0.000 description 1
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 235000019219 chocolate Nutrition 0.000 description 1
- 230000002648 chondrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 208000013507 chronic prostatitis Diseases 0.000 description 1
- 206010009887 colitis Diseases 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N dinoprostone Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@H]1[C@H](O)CC(=O)[C@@H]1C\C=C/CCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N 0.000 description 1
- 229960002986 dinoprostone Drugs 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 229920001971 elastomer Polymers 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 1
- HELXLJCILKEWJH-UHFFFAOYSA-N entered according to Sigma 01432 Natural products C1CC2C3(C)CCCC(C)(C(=O)OC4C(C(O)C(O)C(CO)O4)O)C3CCC2(C2)CC(=C)C21OC(C1OC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)OC(CO)C(O)C1OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O HELXLJCILKEWJH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005542 ethidium bromide Drugs 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 235000020510 functional beverage Nutrition 0.000 description 1
- 235000004515 gallic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940074391 gallic acid Drugs 0.000 description 1
- 229920002824 gallotannin Polymers 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- LPLVUJXQOOQHMX-UHFFFAOYSA-N glycyrrhetinic acid glycoside Natural products C1CC(C2C(C3(CCC4(C)CCC(C)(CC4C3=CC2=O)C(O)=O)C)(C)CC2)(C)C2C(C)(C)C1OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1O LPLVUJXQOOQHMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004949 glycyrrhizic acid Drugs 0.000 description 1
- UYRUBYNTXSDKQT-UHFFFAOYSA-N glycyrrhizic acid Natural products CC1(C)C(CCC2(C)C1CCC3(C)C2C(=O)C=C4C5CC(C)(CCC5(C)CCC34C)C(=O)O)OC6OC(C(O)C(O)C6OC7OC(O)C(O)C(O)C7C(=O)O)C(=O)O UYRUBYNTXSDKQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019410 glycyrrhizin Nutrition 0.000 description 1
- LPLVUJXQOOQHMX-QWBHMCJMSA-N glycyrrhizinic acid Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]1O[C@@H]1C([C@H]2[C@]([C@@H]3[C@@]([C@@]4(CC[C@@]5(C)CC[C@@](C)(C[C@H]5C4=CC3=O)C(O)=O)C)(C)CC2)(C)CC1)(C)C)C(O)=O)[C@@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LPLVUJXQOOQHMX-QWBHMCJMSA-N 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 1
- 229940088592 immunologic factor Drugs 0.000 description 1
- 239000000367 immunologic factor Substances 0.000 description 1
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000000185 intracerebroventricular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 229960001375 lactose Drugs 0.000 description 1
- VMPHSYLJUKZBJJ-UHFFFAOYSA-N lauric acid triglyceride Natural products CCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCC VMPHSYLJUKZBJJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000003723 learning disability Diseases 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 229960003511 macrogol Drugs 0.000 description 1
- 239000000845 maltitol Substances 0.000 description 1
- 235000010449 maltitol Nutrition 0.000 description 1
- VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N maltitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]([C@H](O)CO)O[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N 0.000 description 1
- 229940035436 maltitol Drugs 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 229960001855 mannitol Drugs 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 1
- 235000021096 natural sweeteners Nutrition 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 1
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000002826 nitrites Chemical class 0.000 description 1
- 239000012454 non-polar solvent Substances 0.000 description 1
- 239000012457 nonaqueous media Substances 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 235000008935 nutritious Nutrition 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000021395 porridge Nutrition 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000007686 potassium Nutrition 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N prostaglandin E2 Natural products CCCCCC(O)C=CC1C(O)CC(=O)C1CC=CCCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000007094 prostatitis Diseases 0.000 description 1
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 description 1
- 235000019203 rebaudioside A Nutrition 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 239000003161 ribonuclease inhibitor Substances 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 1
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 229940032147 starch Drugs 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 229960004793 sucrose Drugs 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 235000013616 tea Nutrition 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/02—Nasal agents, e.g. decongestants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2250/00—Food ingredients
- A23V2250/20—Natural extracts
- A23V2250/21—Plant extracts
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/30—Extraction of the material
- A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Botany (AREA)
- Mycology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Ophthalmology & Optometry (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Otolaryngology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
본 발명은 염증질환을 예방 및 치료할 수 있는 항염증 활성을 갖는 도토리 추출물 및 이 추출물을 함유하는 약리적 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따르면, 대식세포에서 내독소인 LPS에 의해 증가된 iNOS, COX-2 그리고 nitric oxide의 생성량을 감소시키는 도토리 에탄올 추출물이 비염, 지관지염, 간염, 관절염, 천식, 아토피성 피부염 등 염증반응 관련 질병들에 대해 항염증 효과를 발휘하면서 이들 질병 예방과 치료에 도움을 줄 수 있다는 점을 확인하였다.
Description
본 발명은 도토리 추출물을 함유하는 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 항염증 효과를 갖는 도토리 에탄올 추출물 및 이를 유효 성분으로 함유하는 약리학적 조성물을 포함하는 조성물에 관한 것이다.
도토리(acorn, Quercus acutissima CARR)는 상수리나무, 갈참나무, 졸참나무, 떡갈나무 등의 열매를 총칭하는데, 우리나라에서는 주로 도토리의 전분을 묵으로 만들어 사용하였으나, 세계 여러 나라에서는 죽, 떡 뿐만 아니라 다양한 분야에 활용되고 있다. 도토리가 열리는 나무의 종류에 따라 차이는 있으나, 도토리는 상당량의 단백질, 탄수화물과 지방은 물론이고 칼슘, 인, 칼륨, 니아신(niacin)과 같은 비타민을 다량 함유하고 있어서 영양학적으로 볼 때 매우 우수한 작물이다.
도토리에 함유된 gallic acid, digallic acid, gallotannin 등은 항산화 성분으로 알려져 있고, 도토리 전분 및 도토리묵에 대한 이화학적 특성, 물리적 특성, 관능적 특성이 보고되고 있다.
예를 들어, 도토리의 과육과 내피의 분말로부터 얻어진 추출물을 쥐에 투여하면 혈장 내의 총 지방 수준을 감소시키는 동시에 혈장과 간에서의 과산화지질의 농도를 감소시키지만 항혈전 효과는 사실상 없다고 보고하고 있으며(육근정 등. 2002. 한국영양학회지 35(2): 171~182, 비특허문헌 1), 도토리 가루를 물과 같은 극성 용매를 사용하여 추출한 경우에 항산화 효과가 양호해서 전통기호식품 또는 건강기능식품 소재로서의 활용성을 제시하고 있다(Shim TH. et al. 2004. Korean J. Food Sci . Technol . 36(5): 800~803, 비특허문헌 2)
기억·학습 장애를 유발시킨 마우스에 도토리 분말을 투여하였을 경우에 뇌의 주요한 신경전달 물질로서 카테롤아민계 물질인 아세틸콜린(Ach)의 합성이 증가하고 Ach 분해 효소의 활성라든가 카테롤아민계 신경전달물질의 파괴에 관여하는 효소의 활성이 억제되는 것을 확인하여 도토리 분말이 노인성 치매와 같은 치매 예방에 효과가 있다는 연구 결과가 있다(Lee SH. et al. 2005. J. Korean Soc. Food Sci. Nutr. 34(5). 738~742, 비특허문헌 3).
아울러, 대한민국등록특허 제10-0453608호(특허문헌 1)에서는 껍질을 제거한 도토리를 이용하여 건강기능식품을 제조하는 공정을 제시하고 있으며, 대한민국 공개특허공보 제10-2000-0048440호(특허문헌 2)에서는 도토리 외에 올리브, 부추, 무화과 등의 혼합물을 분말화하고 정제화한 형태의 항암 기능을 가지는 건강기능 식품 조성물 및 제조 방법을 개시하고 있다. 아울러, 대한민국등록특허 제10-0567564호(특허문헌 3)에서는 도토리의 유효 성분으로서 비만조절 물질을 추출하는 방법 및 이 추출물을 포함하는 음료를 제시하고 있다.
하지만, 국내에서 폭 넓게 서식하고 있는 나무에서 비교적 손쉽게 얻을 수 있는 도토리의 활용 방안을 모색할 필요성은 여전히 남아 있다 하겠다.
1. 육근정 등. 2002. 한국영양학회지 35(2): 171~182
2. Shim TH. et al. 2004. Korean J. Food Sci. Technol. 36(5): 800~803
3. Lee SH. et al. 2005. J. Korean Soc. Food Sci. Nutr. 34(5). 738~742
본 발명은 전술한 문제점을 해결하기 위하여 제안된 것으로, 본 발명은 도토리의 추출물이 다른 약리학적 효과를 규명한 것이다.
즉, 본 발명은 도토리 에탄올 추출물의 항염증 효과에 대한 것으로, 본 발명의 목적은 도토리의 의약 및 산업분야 활용을 위해 아직 알려져 있지 않은 도토리 에탄올 추출물의 항염증 효과를 발명한 것이다.
결국, 본 발명의 목적은 항염증 효과를 규명하여 염증과 관련이 있는 질병, 예를 들어 비염, 각막염, 기관지염, 간염, 흉막염, 복막염, 관절염(류머티즘성 관절염, 건선성 관절염, 급성 통풍성 관절염), 천식, 연골연화, 유착 척추염, 중이염 아토피성 피부염과 같은 질환을 예방 또는 치료할 수 있는 효과를 가진 도토리 추출물을 유효 성분으로 함유하는 약리학적 조성물을 제공하고자 하는 것이다.
본 발명의 다른 목적 및 이점은 후술하는 발명의 상세한 설명 및 도면을 참고하면 더욱 분명해질 것이다.
전술한 것과 같이 우리나라에서 손쉽게 구입할 수 있는 도토리를 활용하여 약제학적 유효 성분이나 건강기능식품으로의 활용 가능성을 검토할 필요가 있다.
이에, 본 발명은 항염증 활성을 갖는 도토리의 알코올 추출물을 유효 성분으로 함유하는 조성물, 예를 들어 약제학적 조성물 또는 식품공학적 조성물이다. 항염증 활성을 갖는 도토리 추출물을 얻기 위해서 바람직하게는 탄소수 1 내지 4의 알코올과 같은 비극성 유기용매를 사용할 수 있다.
이때, 상기 도토리 추출물은 시클로옥시게나아제-2(cyclo-oxygenase-2, COX-2), 유도성 산화질소 합성효소(inducible nitric oxide synthase, iNOS)의 발현을 억제하는 방법으로 항염증 활성에 관여하며, 바람직하게는 상기 도토리 추출물은 0.1 ~ 250 ㎍/㎖의 농도로 상기 조성물에 함유될 수 있다.
본 발명에 따른 항염증 활성을 가지는 도토리 추출물을 유효 성분으로 사용함으로써, 비염, 각막염, 기관지염, 간염, 흉막염, 복막염, 관절염(류머티즘성 관절염, 건선성 관절염, 급성 통풍성 관절염), 천식, 연골연화, 유착 척추염, 중이염 아토피성 피부염에서 선택되는 염증 질환을 예방 또는 치료할 수 있다.
이때, 전술한 조성물 중에 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 더욱 포함할 수 있다. 아울러, 본 발명은 도토리의 물 또는 알코올 추출물 (도토리 추출물)을 유효 성분으로 함유하는 염증의 억제 또는 개선용 건강기능식품에 관한 것이다.
본 발명에서는 도토리 에탄올 추출물이 항염증 효과가 있다는 것을 규명하였으며, 이에 따라 간단한 추출 방법을 통해 도토리가 의약 및 식품 산업과 같은 다양한 산업 분야에 활용될 수 있을 것으로 기대된다.
구체적으로, 본 발명에서 사용된 도토리 에탄올 추출물은 대식세포에서 염증반응과 밀접한 관련이 있는 COX-2, iNOS 그리고 nitrites의 발현 및 생성을 조절할 수 있는 항염증 소재라는 것을 증명하였다.
이에 따라, 항염증 활성을 갖는 도토리 추출물 및 이 추출물을 함유하는 약리적 조성물은 염증질환의 예방 및 치료제로 활용 가능하며, 경우에 따라서는 건강기능식품이나 건강음료 등에서도 주목을 받을 것으로 예상된다.
특히, 본 발명에서 사용된 도토리는 예부터 식용되어져 오고 있고 추출 용매인 에탄올 역시 식용 가능한 용매이므로 도토리 에탄올 추출물은 안전성 평가 없이 기능성 식품 소재로 이용 가능할 것이고, 또한 다양한 분야에 기능성 소재로 활용할 수 있을 것이다.
결국, 도토리에 대한 항염증 효과에 대한 본 발명은 약 및 건강기능식품 소재로 도토리의 활용을 더욱 확대시킬 것이다. 현재 의약품으로 사용되고 있는 항염증제는 다양한 부작용을 가지고 있지만 천연 식물성 소재인 도토리 에탄올 추출물은 이들 부작용을 최소화할 수 있는 항염증 기능성 소재로 사용될 수 있으므로 항염증제를 필요로 하는 비염, 지관지염, 간염, 천식, 궤양성 대장염, 류마티스 관절염 등의 예방 및 치료를 위한 기능성 소재로 활용 가능하다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따라, lipopolysaccharide(LPS)로 처리한 세포에서 도토리 에탄올 추출물의 농도에 따른 세포 생존율 결과를 측정한 그래프로서, 도토리 에탄올 추출물이 대략 250 ㎍/㎖까지는 세포 독성이 없지만, 이를 초과하는 농도에서는 세포 독성이 나타난 것을 알 수 있다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따라, LPS로 처리한 대식세포에서 유도된 COX-2 mRNA 발현에 대하여 도토리 에탄올 추출물에 의한 효과를 보여주는 도면으로서, (a)는 전기영동 후의 gel 사진이고, (b)는 (a)에 도시된 gel 사진의 밴드 두께와 농도를 측정하여 그래프로 나타낸 것이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따라, LPS로 처리한 대식세포에서 유도된 iNOS mRNA 발현에 대하여 도토리 에탄올 추출물에 의한 효과를 보여주는 도면으로서, (a)는 전기영동 후의 gel 사진이고, (b)는 (a)에 도시된 gel 사진의 밴드 두께와 농도를 측정하여 그래프로 나타낸 것이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따라 대식세포에서 LPS에 의해 유도된 아질산염 생성에 대한 도토리 에탄올 추출물의 영향을 측정하여 그래프로 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따라, LPS로 처리한 대식세포에서 유도된 COX-2 mRNA 발현에 대하여 도토리 에탄올 추출물에 의한 효과를 보여주는 도면으로서, (a)는 전기영동 후의 gel 사진이고, (b)는 (a)에 도시된 gel 사진의 밴드 두께와 농도를 측정하여 그래프로 나타낸 것이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따라, LPS로 처리한 대식세포에서 유도된 iNOS mRNA 발현에 대하여 도토리 에탄올 추출물에 의한 효과를 보여주는 도면으로서, (a)는 전기영동 후의 gel 사진이고, (b)는 (a)에 도시된 gel 사진의 밴드 두께와 농도를 측정하여 그래프로 나타낸 것이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따라 대식세포에서 LPS에 의해 유도된 아질산염 생성에 대한 도토리 에탄올 추출물의 영향을 측정하여 그래프로 나타낸 것이다.
본 발명은 도토리 에탄올 추출물의 항염증 효과에 대한 것으로, 본 발명의 목적은 도토리의 의약 및 산업분야 활용을 위해 아직 알려져 있지 않은 도토리 에탄올 추출물의 항염증 효과를 규명한 것이다.
1. 도토리 에탄올 추출물의 항염증 효과 규명
하지만, 도토리 추출물이 항염증효과가 있는지 그리고 어떤 기전에 의해 항염증효과가 있는지에 대한 발명은 전무하다. 따라서 본 발명은 도토리의 새로운 생리활성 기능을 개발한 것이다. 항염증 효과를 나타내는 건강기능식품, 의약품, 화장품 등에 활용할 수 있는 천연 식물성 생리활성 소재로 도토리 에탄올 추출물이 적당한 소재라는 것을 규명한 것이다. 또한 염증반응은 비염, 지관지염, 간염, 관절염, 천식, 아토피성 피부염 등의 원인이 된다. 따라서 도토리 에탄올 추출물을 유효성분으로 한 염증질환 예방 및 치료에 효과가 있는 약리적 조성물을 발명하였는바, 본 발명에 대해서 상세하게 설명한다.
염증 반응은 병원균이나 손상된 세포와 같은 외부의 해로운 자극에 대하여 생명체가 이러한 자극을 제거하기 위한 복잡한 생물학적 면역 반응으로서, 외부의 자극에 대하여 손상된 조직을 손상시켜 궁극적으로 생명체의 생존을 위한 반응이다. 염증은 크게 급성 염증과 만성 염증으로 구분될 수 있으며, 급성 염증은 해로운 감염원에 대한 초기 반응으로서 대식세포(macrophage) 또는 백혈구(leukocyte)와 같은 면역 세포가 손상된 조직에서 일으키는 일련의 면역 반응으로서 홍반, 부종, 발열, 통증과 같은 증상을 야기하며, 만성 염증은 초기 염증 반응 이후에 손상된 조직의 파괴 및 치료를 의미한다.
특히, 만성적 염증 반응은 류머티즘성 관절염은 물론이고 암, 죽상동맥경화증(atherosclerosis), 천식(asthma), 류머티즘성 관절염과 같은 자기면역질환(autoimmune disease), 만성 전립선염(chronic prostatitis), 사구체신염(glomerulonephritis), 혈관염(Vasculitis), 간질성 방광염(interstitial cystitis), 비염, 각막염, 기관지염, 간염, 흉막염, 복막염, 연골연화, 유착 척추염, 중이염 아토피성 피부염 등과 같은 질환을 야기할 수 있기 때문에, 염증 반응은 숙주에 의해서 적절하게 제어될 필요가 있다.
특히, 생체내에서의 염증 반응과 관련해서 다양한 세포 유래의 인자들이 관여하는데, 인터페론-감마(interferon-γ, IFN-γ), 종양괴사인자-알파(tumor necrosis factor-α, TNF-α), 인터류킨-1(interleukin-1, IL1), 인터류킨-4(interleukin-4, IL4)와 같은 사이토카인(cytokine) 또는 케모카인(chemokine)인 일반적인 면역 인자들 외에도 특히 산화질소(nitric oxide)와 프로스타글란딘(prostaglandin)의 합성 역시 염증 반응에 관여하는 것으로 알려져 있다.
생체내에서의 염증 반응과 관련해서 구체적으로 살펴보면, L-아르기닌으로부터 산화질소(nitric oxide, NO)를 합성하는 산화질소 합성효소(nitric oxide synthase, NOS)와 아카키돈산(arachidonic acid)을 프로스타글란딘의 전구체인 프로스타글란딘 H2(PGH2)로 전환시키는 효소로서, 프로스타글란딘 합성효소라고도 불리는 시클로옥시게나아제(cyclo-oxygenase, COX)의 발현을 억제하는 것이 중요하다.
산화질소 합성효소(NOS)에는 몇 가지 종류가 있으며, 칼슘 의존적으로 활성화되는 신경원세포에 존재하는 nNOS(neuronal NOS, NOS1), 혈관 내피세포에서 칼슘 의존적으로 활성화되는 eNOS(endothelial NOS, NOS3)은 생체내에서 일정 수준으로 발현되어 신체의 항상성 유지에 관여하는 반면, 지질다당질(Lipopolysaccharide), TNF-α, IL-1β와 같은 각종 사이토카인에 의해서 칼슘 비의존적으로 합성, 유도되는 iNOS(inducibile NOS, NOS2)로 구분된다. 그 중에서 iNOS는 세포 독성이나 각종 염증 반응에서 NO를 급격히 발생시키는데, 만성 염증은 iNOS의 활성 증가와 밀접한 관련이 있다.
또한, 시클로옥시게나아제(COX)는 2가지 종류가 있는데, 시클로옥시게나아제-1(COX-1)은 세포 내에서 지속적으로 합성되어 세포 보호 작용에 필요한 프로스타글란딘의 합성에 관여하는 반면, 시클로옥시게나아제-2(COX-2)는 염증 반응에서 세포 내에서 지속적으로 증가하여 염증 반응과 밀접한 관련이 있다. 그런데, NO와 프로스타글란딘의 합성을 증가시키는 iNOS 및 COX-2와 같은 염증 인자는 다양한 경화, 알츠하이머, 결장암과 같은 만성 질환의 원인이기도 하다.
뿐만 아니라, iNOS의 활성과 관련해서 뉴클리어-팩터-카파-베타(Nuclear factor kappa beta, F-kB)의 활성에 의존하는 것으로 알려져 있다. NF-kB는 각종 사이토카인, 프리 라디칼, 자외선, LDL 또는 항원과 같은 다양한 자극에 대한 세포 반응에 관여하여 각종 단백질의 전사를 제어하는 복합 단백질로서, NF-kB가 제대로 제어되지 못하는 경우에 암, 면역 반응 및 자가면역 질환, 바이러스 감염에서의 면역 반응이 일어나지 못할 수 있다. NF-kB는 세포질에서는 IK-Ba라는 물질과 결합되어 불활성인 상태로 존재하지만, 세포 표면의 receptor에 적절한 리간드가 결합하여 시그널을 일어나 IK-Ba 인산분해효소가 활성화되어 IK-Bark 제거되면 활성화되어 핵으로 이동하여 염증 반응을 일으키는 유전자, 예를 들어 iNOS 유전자 등의 발현을 촉진시킨다.
이러한 점에 근거하여, 본 발명에서는 내독소 자극에 의해 활성화된 대식세포에서 염증반응과 밀접한 관련이 있는 COX-2, iNOS 그리고 nitric oxide의 발현 및 생성 증가가 도토리 에탄올 추출물에 의해 억제된 것을 보여주었고, 이들 결과를 근거하여 항염증 활성을 갖는 도토리 추출물 및 이 추출물을 함유하는 약리적 조성물을 발명하였다. 즉, 본 발명은 도토리 에탄올 추출물이 염증반응과 밀접한 관련이 있는 COX-2, iNOS 그리고 nitric oxide의 발현 및 생성에 관여하므로 염증질환의 예방 및 치료제를 위한 천연 식물 소재로 활용 가능하므로 도토리 추출물을 함유한 약리적 조성물 또는 식품공학적 조성물에 관한 것이다.
구체적으로, 본 발명에서는 대식세포에서 내독소인 lipopolysaccharide(LPS)를 처리하여 유도된 산화 스트레스에 대해 유발된 염증 반응에 도토리 (경상북도 의성군 신평농협에서 구입한 국산 상수리나무 도토리, Acorn of Quercus acutissima) 추출물이 염증 억제 활성이 있는지를 알아보기 위해 nuclear factor-kappa(NF-kB) 의존성 유전자인 cyclooxygenase-2(COX-2)와 inducible nitric oxide synthase(iNOS)의 발현 및 일산화질소(nitric oxide, NO) 생성 변화에 의해 항염증 효과를 측정하였다. 본 발명에 따르면 도토리 에탄올 추출물이 비염, 각막염, 기관지염, 간염, 흉막염, 복막염, 관절염(류머티즘성 관절염, 건선성 관절염, 급성 통풍성 관절염), 천식, 연골연화, 유착 척추염, 중이염 아토피성 피부염에서 선택되는 염증 질환을 예방 또는 치료하기 위한 조성물, 예를 들어 약제학적 조성물이나 건강기능식품과 같은 식품공학적 조성물 중에 유효 성분으로 함유될 수 있다.
내독소 자극은 대식세포와 반응하여 내독소를 제거하는데 기여하나 대식세포가 과도하게 자극되면 염증성 cytokine과 같은 내독소의 매개체와 단백질분해효소 및 활성 산소종 생성을 통해 염증반응과 산화적 스트레스를 증가시키게 된다. 염증의 발생 원인으로는 다양한 생화학적 현상이 관여하고 있으나, 특히 일산화질소(NO)를 생성하는 효소인 일산화질소 생성효소(NOS)와 다양한 프로스타글란딘(prostaglandins, PGs)의 생합성을 매개하는 효소인 COX가 염증반응을 조절하는 중요한 매개체로 알려져 있다.
이와 같이 NO 및 PGs가 염증반응과 밀접하게 관련되어 있어, 이들 생성과 생성에 관여하는 효소의 발현을 조절할 수 있는 물질이 염증질환의 예방 및 치료제로서 주목을 받고 있다. 특히 식품으로부터 분리·정제된 물질은 비교적 독성이 적어 의약품에 비해 장기간 섭취하여도 안전하다는 점 때문에 각종 염증성 질환 치료제 및 치료보조제로 각광을 받고 있다. 따라서 대식세포에 LPS 처리에 의해 생성되는 염증반응의 매개물질인 NO, PGE2, IL-6의 생성을 억제함으로 염증반응을 완화시켜 주는 물질로서 도토리 에탄올 추출물의 활성을 확인하였다.
본 발명에 따르면, 대식세포(Raw 264.7)에 LPS 처리에 의해 증가된 iNOS, COX-2 그리고 NO 생성을 도토리 에탄올 추출물이 이들 생성을 억제함으로 도토리 에탄올 추출물의 항염증 효과가 있다는 것을 알 수 있었다. 즉, 본 발명은 염증질환을 예방 및 치료할 수 있는 항염증 활성을 갖는 도토리 추출물 및 이 추출물을 함유하는 약리적 조성물에 관한 것이다.
구체적으로 본 발명에 따라 항염증 활성이 확인된 도토리 추출물을 얻기 위해서, 도토리의 껍질을 제거하고 파쇄한 뒤 적절한 용매를 사용할 수 있다. 이때, 항염증 활성을 가지는 추출물을 얻기 위해서 시료로 사용된 도토리에 대해서 대략 2 내지 20배, 바람직하게는 5 내지 15배 부피의 물이나, 메탄올, 에탄올, 부탄올과 같은 탄소수 1 내지 4 (C1 내지 C4)의 저급 알코올과 같은 비극성 용매를 사용할 수 있다. 본 발명의 실시예에 따르면 식용 가능한 추출 용매인 에탄올을 사용할 수 있으며, 항염증 효과를 알아보기 위해서 도토리 에탄올 추출물을 시료로 사용하였다. 에탄올을 사용하는 경우에는 50~90%의 에탄올을 사용할 수 있다.
이러한 방법에 따라 얻어진 도토리 추출물의 항염증 효과를 알아보기 전에, 이 추출물이 면역 세포, 예를 들어 대식세포의 독성에 미치는 영향을 확인하였다. 본 발명의 실시예에 따르면 대략 250 ㎍/㎖ 농도의 도토리 추출물을 사용하더라도 세포 독성이 발견되지 않았다(도 1 참조). 따라서, 본 발명의 도토리 에탄올 추출물은 0.1 ~ 250 ㎍/㎖, 바람직하게는 1 ~ 250 ㎍/㎖, 더욱 바람직하게는 10 ~ 250 ㎍/㎖의 농도로 세포 내에 투여되어 항염증 효과를 달성할 수 있다.
한편, 대식세포는 내독소 자극에 의해 염증반응의 전사인자인 NF-κB를 활성화시키며 그 결과 iNOS, COX-2를 발현시켜 염증을 일으킨다. 더하여 iNOS는 nitric oxide 생성하는 효소로 iNOS가 증가되면 nitric oxide도 증가하게 된다. 즉, 염증의 원인에 대한 생화학적 현상 중 nitric oxide를 생성하는 효소인 iNOS와 다양한 프로스타글란딘(prostaglandins, PGs)의 생합성을 매개하는 효소인 COX-2가 염증반응을 조절하는 중요한 매개체로 알려져 있다는 사실로부터, 본 발명에서는 내독소인 리포폴리사카라이드(lipopolysaccharide, LPS)로 처리한 대식세포에서 생성량이 증가된 nitric oxide, iNOS 그리고 COX를 저해하는지의 여부를 확인하였다.
이를 위해서, 전술한 도토리 에탄올 추출물(0, 10, 50, 100 ㎍/㎖)을 내독소인 LPS(1 ㎍/㎖)와 동시에 처리한 후 18시간 인공배양 하였다. 도토리 에탄올 추출물을 대식세포(macrophage)에 투여한 결과 LPS에 의해 유도된 COX-2의 발현 억제(도 2 참조)와 iNOS의 발현 억제(도 3 참조), nitrite 생성 억제(도 4 참조)를 확인하였다.
이러한 점에 비추어 볼 때, 본 발명에 따른 도토리 에탄올 추출물이 염증반응과 밀접한 관계를 가지고 있는 COX-2와 iNOS의 발현을 억제함으로써 염증질환의 예방 및 치료가 가능한 천연식물성 소재일 것이라는 것을 추정할 수 있다.
2. 도토리 추출물의 응용
상기에서 살펴본 바와 같이 본 발명은 내독소 자극에 의해 활성화된 대식세포가 과도하게 자극되어 염증반응을 일으키는 것을 도토리 에탄올 추출이 억제한다는 것을 염증 관련 유전자 발현과 이들 발현에 의해 생성되는 nitric oxide 생성량을 측정함으로써 알아보았다.
대식세포는 내독소 자극에 의해 염증반응의 전사인자인 NF-κB를 활성화시키며 그 결과 iNOS, COX-2를 발현시켜 염증을 일으킨다. 더하여 iNOS는 nitric oxide 생성하는 효소로 iNOS가 증가되면 nitric oxide도 증가하게 된다.
따라서 iNOS, COX-2 그리고 nitric oxide의 생성량을 감소시키는 도토리 에탄올 추출물이 비염, 각막염, 기관지염, 간염, 흉막염, 복막염, 관절염(류머티즘성 관절염, 건선성 관절염, 급성 통풍성 관절염), 천식, 연골연화, 유착 척추염, 중이염 아토피성 피부염에서 선택되는 염증 질환에 대하여 항염증 효과를 발휘하면서 질병 예방과 치료에 도움을 줄 수 있을 것이다. 모든 결과들을 종합하면 염증질환을 예방 및 치료할 수 있는 항염증 활성을 갖는 도토리 추출물을 유효 성분으로 함유하는 약제학적(약리적) 조성물 또는 식품공학적 조성물(건강기능식품)에 활용될 수 있다.
예를 들어, 본 발명에 따라 항염증 활성을 갖는 도토리 에탄올 추출물을 유효 성분으로 함유하는 약리학적 조성물은 약리학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다. 이때, 본 발명의 염증 관련 질환의 예방 및 치료용 약학조성물은, 조성물 총 중량에 대하여 도토리 에탄올 추출물을 0.1 내지 50 중량%로 포함할 수 있다.
구체적으로, 본 발명에 따른 도토리 추출물을 포함하는 약학조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 도토리 추출물을 포함하는 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출액에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 도토리 추출물을 포함하는 약리학적 조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내 (intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다.
반면, 본 발명의 도토리 추출물을 유효 성분으로 함유하는 식품공학적 조성물로 활용하는 방법으로 건강기능식품으로 활용될 수 있다. 본 발명에 따른 도토리 추출물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강 기능성 식품류 등이 있다. 이때, 식품 또는 음료 중에 본 발명의 도토리 추출물의 양은 전체 식품 중량의 0.01 내지 15 중량%로 가할 수 있으며, 건강 음료 조성물은 100 ㎖를 기준으로 0.02 내지 5g, 바람직하게는 0.3 내지 1g의 비율로 가할 수 있다. 본 발명의 건강기능식품은 정제, 캡슐제, 환제, 액제 등의 형태를 포함한다.
예를 들어 건강기능식품으로 활용되는 경우에 본 발명의 도토리 추출물 외에 여러 가지 향미제 도는 천연 탄수화물과 같은 식품 보조 첨가제를 사용할 수 있다. 사용가능한 천연 탄수화물로에는 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토오스, 수크로오스 등과 같은 디사카라이드 및 덱스트린, 시클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 솔비톨, 에르트리톨 등의 당알코올이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 그 외에도 건강기능식품에 활용될 수 있는 성분으로 도토리 추출물 외에도 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 추출물은 천연 과일 주스 및 과일 주스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 추출물 100 중량부 당 0 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
반면, 본 발명에 따른 도토리 추출물을 함유하는 건강 기능성 음료 조성물에 포함될 수 있는 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 예를 들어, 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 사용할 수 있다.
결국, iNOS, COX-2 그리고 nitric oxide의 생성량을 감소시키는 활성을 가지는 것으로 확인된 본 발명의 도토리 추출물이 비염, 지관지염, 간염, 관절염, 천식, 아토피성 피부염 등 염증반응 관련 질병들에 대해 항염증 효과를 발휘하면서 질병 예방과 치료에 도움을 줄 수 있을 것이다. 모든 결과들을 종합하면 염증질환을 예방 및 치료할 수 있는 항염증 활성을 갖는 도토리 추출물 및 이 추출물을 함유하는 약리적 조성물을 발명한 것이다.
이하, 예시적인 실시예에 기초하여 본 발명을 상세하게 설명하지만, 본 발명이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1 : 도토리 에탄올 추출물 제조
본 실시예에서 사용한 도토리(Quercus acutissima CARR.)는 경상북도 의성군 신평농협에서 구입한 국산 상수리나무 도토리 (Acorn of Quercus acutissima) 400 ㎏을 탈피 및 파쇄하여 탈피된 도토리 300 ㎏을 얻었고, 동결 건조한 도토리 167 ㎏을 분쇄하여 시료의 10배인 80% 에탄올 1,670 L을 넣은 후 78ㅀC에서 2회 환류 냉각 추출 후, Whatman No. 2로 여과하였다. 감압 농축장치(EYELA: Rotary evaporator NE-SERIES, Tokyo, Japan)를 이용하여 여과된 상등액을 농축(Brix 30%)한 다음 동결 건조(Ilshin Lab. Co., Ltd., Yangju, Korea)하여 얻은 80% 에탄올 추출물 분말을 본 발명을 위한 시료로 사용하였다.
실시예 2 : 도토리 에탄올 추출물이 세포 독성에 미치는 영향 측정
본 실시예에서는 도토리 에탄올 추출물이 세포 독성에 미치는 농도 정도를 확인하였다. 도토리 에탄올 추출물의 세포 독성과 관련한 농도 결정을 위해서 MTT[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide) 환원 방법을 이용하여 측정하였다. 배양된 세포(Raw 264.7 cells)를 RPMI-1640 배지에 잘 혼합한 후 1 x 105 cells/㎖로 조정한 다음, 96-well 배양판에 준비된 세포를 200 ㎕씩 첨가한 후 24시간 배양시켰다. 세포가 어느 정도 성장 했을 때 우태아 혈청과 항생제를 첨가하지 않은 배지에 실시예 1에서 얻은 도토리 에탄올 추출물 시료(0, 50, 100, 250, 500, 1000 ㎍/㎖)로 처리하여 24시간 더 배양을 시켰다.
배양이 끝난 세포의 생존율은 Chung 등의 의한 MTT 환원 방법을 이용하여 측정하였다. 즉, 각 well에 MTT 용액(5 ㎎/㎖)을 성장배지의 1/10로 가해주고 다시 37℃에서 4시간 더 배양하여 MTT를 환원시켜 생성된 formazan이 배지에 따라 나가지 않도록 배지를 조심스럽게 제거하였다. 남아 있는 배지를 완전히 제거하기 위해 실온에서 30분간 방치한 후 DMSO를 이용하여 용해시킨 시료를 570 ㎚에서 흡광도를 측정하였다. 흡광도 측정시 공시료는 DMSO로 하고, 세포의 생존율은 다음과 같이 계산하였다.
세포 생존율 (%) = [시료처리군의 흡광도/대조군의 흡광도] x 100
본 실시예에 따라 도토리 에탄올 추출물이 대식세포(Raw 264.7 cells) 생존율에 미치는 영향에 대한 결과가 도 1에 도시되어 있다. 도시된 것과 같이, 대식세포주에 대하여 도토리 에탄올 추출물은 250 ㎍/㎖의 농도까지는 세포 독성이 없어 세포가 사멸하지 않았으나, 500 ㎍/㎖에서는 낮은 세포독성을 나타내었고 1000 ㎍/㎖에서는 약 50% 세포를 사멸시키는 것을 확인할 수 있었다.
실시예 3 : 도토리 에탄올 추출물의 염증관련 유전자 발현 억제 효과
본 실시예에서는 도토리 에탄올 추출물이 염증 관련 유전자의 발현을 억제하는지를 확인하였다. 이를 위해서, 대식세포(Raw 264.7 cells)에 1 ㎍/㎖의 LPS를 30분 동안 처리한 후, 실시예 2에서 확인된 세포 독성을 나타내지 않는 농도의 도토리 에탄올 추출물((0, 10, 50, 100 ㎍/㎖)을 처리하여 COX-2, iNOS 그리고 nitric oxide의 생성량을 RT-PCR과 흡광도를 측정하여 알아보았다.
(1) RT-PCR
가. 세포내의 RNA 추출
배지를 제거한 후 TRIzol Reagent(Invitrogen, Carlsbad CA, USA)를 1 ㎖씩 각 배양 well에 넣고 피펫으로 여러 번 혼합시켜 배양세포로부터 RNA 추출 시료를 얻었다. 5분간 실온에 방치한 후 1 ㎖의 TRIzol 용액 당 0.2 ㎖의 클로로포름을 넣고 15초간 잘 흔들어 준 후 실온에서 2-3분간 더 반응시켰다. 4℃에서 15분간 원심분리(12,000 x g)하면 가장 위층인 RNA, 중간층인 DNA, 그리고 가장 아래층인 단백질 층으로 분리되었다. DNA가 오염되지 않게 조심스럽게 위층을 잘 분리하여 다른 튜브로 옮긴 후 isopropyl alcohol를 0.5 ㎖ 넣고 10분간 반응시켜 RNA를 침전시켰다. 그 후 4℃에서 10분간 원심분리(12,000 x g) 후 상층액을 버리고 침전물을 75% DEPC-ethanol 1 ㎖를 넣고 몇 번 흔들어 준 후 다시 4℃에서 5분간 원심분리(12,000 x g) 하였다. 원심분리에 따라 분리된 상층액을 다시 버리고 실온에서 침전물을 5-10분간 말린 다음 RNase-free 증류수나 0.1% DEPC 증류수로 침전물을 녹였다. 0.1% DEPC 증류수 995.0 ㎕에 RNA 5 ㎕를 넣어 200 배 희석 후 260 nm와 280 nm에서 흡광도를 측정하였다. RNA의 농도는 260 ㎚에서의 흡광도값 x 40 ㎍/㎖ x (희석배수) 로 계산하고, 260 ㎚와 280 ㎚의 비가 1.6이상 일 때 순수한 RNA라고 보고 다음 단계를 진행하였다.
나. Oligonucleotide primers
본 실시예에서 염증 반응과 관련이 있는 COX-2, iNOS 및 비교실시예로 사용된 GAPDH 유전자를 발현시키기 위해 PCR에 사용된 프라이머의 염기서열을 표 1에 도시하였다. 표 1에서 모든 프라이머는 5 →3으로 표시하였다.
| 서열 | ||
| Sense(forward) | Antisense(reverse) | |
| GAPDH | CATTTTCTTCTCCTGCAGCC(서열번호1) | TCTCCATGGTGGTGGTGAAGACA(서열번호2) |
| COX-2 | CCCCCACAGTCAAAGACACT(서열번호3) | GAGTCCATGTTCCAGGAGGA(서열번호4) |
| iNOS | CTGCAGCACTTGGATCAGGAACCTG(서열번호5) | GGGAGTAGCCTGTGTGCACCTGGAA(서열번호6) |
다. cDNA 합성
본 실시예에 First-stand cDNA를 생산하기 위하여 Power cDNA synthesis kits(Invitrogen)를 이용하였다. 즉, RNase-free 튜브에 추출한 RNA(2 μg)와 RNase-free water로 최종 부피가 9.5 ㎕가 되도록 맞추고 oligo(dT)15 primer(500 ㎍/㎖) 1 ㎕를 더한 다음, 75℃에서 5분 동안 끓인 후 용액을 튜브 아래로 모운 다음 즉시 얼음에서 냉각시켰다. 1 ㎕ RNase inhibitor(10 U/㎕), 4.0 ㎕ 5 x RT buffer, 2 ㎕ dNTP Mix(10 mM: each 2.5 mM) 및 AMV RT enzyme(Invitrogen) 0.5 ㎕을 첨가한 후 피펫으로 골고루 섞었다. 그 후 42℃에서 60분, 70℃에서 15분간 반응시켰다.
라. PCR 반응
각 유전자 발현을 알아보기 위하여 PCR를 실시하였다. 2 x PCR Master mix Solution (i-StarTaqTM)(iNtRON BIOTECHNOLOGY, Korea) 10 ㎕, Forward Primer(10 pmol/㎕)와 Reverse Primer(10 pmol/㎕)를 각각 1 ㎕, 증류수 7 ㎕ 그리고 앞에서 합성한 first-strand cDNA(DNA template) 1 ㎕을 PCR tube에 넣은 후 잘 섞었다. 각 혼합물을 94℃에서 2분간 pre-denature시킨 후, 94℃에서 20초간, annealing 온도(51℃: GAPDH, 53℃: COX-2, 59℃: iNOS)에서 30초간, 72℃에서 40초간(각 유전자 마다 cycles가 다름) cycles를 실시하였고, 최종적으로 72℃에서 4분간 extension 반응을 하였다. PCR 산물은 0.002% ethidium bromide가 첨가된 2% agarose gel에 80 V에서 30시간 전기영동 한 후 자외선광으로 유전자 발현 정도를 알아보았다. 그 밴드의 강도를 SigmaGel(Jandel Scientific, San Rafael, CA, USA) 소프트웨어에 의해 분석 정량하였고, 내부 표준물로써 β-actin을 사용하였다.
(2) 도토리 추출물의 염증 관련 유전자 발현 억제
COX-2와 iNOS 유전자 mRNA의 발현을 측정한 결과(도 2 및 도 3) LPS에 의해 유도된 mRNA 발현 증가가 도토리 에탄올 추출물 처리에 의해 억제된 것을 보여 주고 있다. 구체적으로, COX-2 유전자의 mRNA 발현에서 LPS의 처리에 의해 활성화된 COX-2 유전자의 발현이 본 발명에 따라 얻어진 도토리 에탄올 추출물의 처리에 의하여 발현양이 현저하게 감소하였고(도 2 참조), iNOS의 발현 역시 유사한 양상을 보이는 것을 알 수 있다(도 4 참조).
상기의 결과로부터 본 발명은 LPS에 의해 생성량이 증가된 iNOS 그리고 COX를 저해하는 것을 보여주었으므로 도토리 에탄올 추출물이 천연 항염증 소재로 이용하여 항염증 활성을 갖는 도토리 추출물을 함유하는 약리적 조성물 발명이 가능할 것이라는 것을 추론 할 수 있었다.
실시예 4: 도토리 에탄올 추출물이 nitric oxide 생성에 미치는 영향 측정
LPS와 시료 처리 후 nitric oxide 생성량을 측정하기 위해 배지 100 ㎕에 Griess reagent(Sigma Chemical Co. St. Louis, MO, USA) 100 ㎕를 첨가하여 반응시킨 후 540 ㎚에서 흡광도를 측정하여 nitrite 함량을 알아보았다. NaNO2를 사용하여 검량선을 작성한 후 배지에 함유된 nitrite량을 측정하였다.
LPS, LPS와 함께 처리한 세포의 배지에 함유된 nitrite량을 측정한 결과(도 4)에서 알 수 있듯이, LPS 처리에 의해 nitrite 함량이 증가하였고 도토리 에탄올 추출물 처리는 LPS에 의해 증가되는 nitrite 생성을 억제하는 것으로 나타났다.
상기의 결과로부터 본 발명은 LPS에 의해 생성량이 증가된 nitric oxide 생성량을 도토리 에탄올 추출물이 저해시키는 것을 보여 주었고 이와 같은 결과는 iNOS 그리고 COX-2의 결과와 종합하여 도토리 에탄올 추출물이 천연 항염증 소재로 사용 가능하며 항염증 활성을 갖는 도토리 추출물 및 이 추출물을 함유하는 약리적 조성물에 활용될 수 있다.
상기에서는 본 발명의 바람직한 실시예에 기초하여 본 발명을 설명하였으나, 본 발명이 이들 실시예에 한정되는 것은 결코 아니다. 오히려 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 본 발명의 실시예에 기초하여 다양한 변형과 변경을 용이하게 생각해 낼 수 있을 것이다. 하지만, 그러한 변형과 변경은 모두 본 발명의 권리범위에 속한다는 사실은, 첨부하는 청구의 범위를 통해서 더욱 분명해질 것이다.
서열목록 전자파일 첨부
Claims (6)
- 항염증 활성을 갖는 도토리의 물 또는 알코올 추출물을 유효 성분으로 함유하는 조성물.
- 제 1항에 있어서,
상기 도토리의 물 또는 알코올 추출물은 시클로옥시게나아제-2(cyclo-oxygenase-2, COX-2), 유도성 산화질소 합성효소(inducible nitric oxide synthase, iNOS)의 발현을 억제하는 방법으로 항염증 활성에 관여하는 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제 1항 또는 제 2항에 있어서,
상기 도토리의 물 또는 알코올 추출물은 0.1 ~ 250 ㎍/㎖의 농도로 상기 조성물에 함유되는 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제 1항 또는 제 2항에 있어서,
상기 조성물은 비염, 각막염, 기관지염, 간염, 흉막염, 복막염, 관절염, 천식, 연골연화, 유착 척추염 및 중이염 아토피성 피부염에서 선택되는 염증 질환을 예방 또는 치료하기 위한 조성물.
- 제 1항 또는 제 2항에 있어서,
약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 더욱 포함하는 조성물.
- 도토리의 물 또는 알코올 추출물을 유효 성분으로 함유하는 염증의 개선용 건강기능식품.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020100113306A KR101303198B1 (ko) | 2010-11-15 | 2010-11-15 | 항염증 활성을 갖는 도토리 추출물 및 이 추출물을 함유하는 약리적 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020100113306A KR101303198B1 (ko) | 2010-11-15 | 2010-11-15 | 항염증 활성을 갖는 도토리 추출물 및 이 추출물을 함유하는 약리적 조성물 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20120051928A KR20120051928A (ko) | 2012-05-23 |
| KR101303198B1 true KR101303198B1 (ko) | 2013-09-03 |
Family
ID=46268794
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020100113306A KR101303198B1 (ko) | 2010-11-15 | 2010-11-15 | 항염증 활성을 갖는 도토리 추출물 및 이 추출물을 함유하는 약리적 조성물 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR101303198B1 (ko) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104225199A (zh) * | 2014-09-29 | 2014-12-24 | 麻江县生产力促进中心有限责任公司 | 一种治疗过敏性鼻炎的偏方 |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR102217731B1 (ko) | 2018-12-17 | 2021-02-19 | 대한민국 | 도토리 추출물을 포함하는 항산화용 조성물 및 이의 용도 |
| KR102247549B1 (ko) * | 2019-06-05 | 2021-05-03 | 대한민국 | 붉가시나무 도토리 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화 및 항균용 조성물 |
| KR20220142652A (ko) | 2021-04-15 | 2022-10-24 | 농업회사법인 주식회사 생명의나무 | 꾸지뽕 열매 추출물 및 굼벵이를 유효성분으로 포함하는 항염증용 조성물 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20100007521A (ko) * | 2008-07-14 | 2010-01-22 | 한국과학기술연구원 | 해조류 추출물을 유효성분으로 함유하는 염증성 질환 예방또는 치료용 조성물 |
| KR20100101258A (ko) * | 2009-03-09 | 2010-09-17 | 주식회사 엘씨에스바이오텍 | 천연 식물소재 또는 한약재의 발효방법 및 상기 방법으로 제조된 조성물 |
-
2010
- 2010-11-15 KR KR1020100113306A patent/KR101303198B1/ko active IP Right Grant
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20100007521A (ko) * | 2008-07-14 | 2010-01-22 | 한국과학기술연구원 | 해조류 추출물을 유효성분으로 함유하는 염증성 질환 예방또는 치료용 조성물 |
| KR20100101258A (ko) * | 2009-03-09 | 2010-09-17 | 주식회사 엘씨에스바이오텍 | 천연 식물소재 또는 한약재의 발효방법 및 상기 방법으로 제조된 조성물 |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104225199A (zh) * | 2014-09-29 | 2014-12-24 | 麻江县生产力促进中心有限责任公司 | 一种治疗过敏性鼻炎的偏方 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR20120051928A (ko) | 2012-05-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Khan et al. | Pharmacological activities of protocatechuic acid | |
| KR101225486B1 (ko) | 토복령 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만, 고지혈증 또는 지방간의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물 | |
| KR101732365B1 (ko) | 우산나물 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
| KR101026528B1 (ko) | 해조류 추출물을 유효성분으로 함유하는 염증성 질환 예방또는 치료용 조성물 | |
| KR101303198B1 (ko) | 항염증 활성을 갖는 도토리 추출물 및 이 추출물을 함유하는 약리적 조성물 | |
| KR101705547B1 (ko) | 도라지 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화, 항암, 항당뇨 또는 항균 활성을 가지는 약학적 조성물 | |
| KR20110130546A (ko) | 꽈리 추출물을 유효성분으로 함유하는 염증성 질환의 예방 및 치료용 조성물 | |
| KR101745338B1 (ko) | 톱니모자반 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증질환의 예방 또는 치료용 조성물 | |
| KR20190057225A (ko) | 부처손 추출물, 이의 분획물 또는 이로부터 분리된 화합물을 유효성분으로 함유하는 항산화 또는 항염증용 조성물 | |
| KR100679853B1 (ko) | 가죽나무 추출물을 포함하는 천식 및 알러지 질환의 예방또는 치료용 조성물 | |
| KR101692889B1 (ko) | 두메닥나무 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 조성물 | |
| KR101604347B1 (ko) | 피스타시아 웨인마니폴리아 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물 | |
| KR20180098737A (ko) | 부처손 추출물, 이의 분획물 또는 이로부터 분리된 화합물을 유효성분으로 함유하는 항산화 또는 항염증용 조성물 | |
| KR20140045161A (ko) | 외톨개모자반 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 염증성 질환 치료 또는 예방용 조성물 | |
| TW202128130A (zh) | 沉默調節蛋白1活化劑和用於活化沉默調節蛋白1的皮膚化妝品 | |
| KR20090003632A (ko) | 항염증 활성을 갖는 야국 추출물을 포함하는 조성물 | |
| KR101794924B1 (ko) | 퉁퉁마디 유래 비알코올성 지방간 질환 예방 또는 치료용 이소람네틴의 분리방법 | |
| KR100842054B1 (ko) | 구운감초 추출물 또는 이로부터 분리한 화합물을 포함하는혈당 강하용 조성물 | |
| KR100547560B1 (ko) | 항염증 활성을 갖는 해동피, 갈화, 옻나무 추출물을함유하는 약학조성물 | |
| KR20190054852A (ko) | 금어초 추출물을 유효성분으로 포함하는 항염증용 약학적 조성물 | |
| KR101052067B1 (ko) | 산채류 추출물을 유효성분으로 함유하는 염증성 질환 예방 또는 치료용 조성물 | |
| KR100694569B1 (ko) | 항염증 활성을 갖는 우묵사스레피 추출물 및 이로 부터분리된 화합물을 함유하는 조성물 | |
| KR20180088606A (ko) | 비알코올성 지방간 질환 예방 또는 치료능이 있는 이소람네틴(isorhamnetin)을 함유하는 퉁퉁마디(Salicornia SPP.) 물 추출물의 에틸아세테이트 분획물 | |
| Kim et al. | Flavonoid content, free radical scavenging and increase in xanthine oxidase inhibitory activity in Galgeun-tang following fermentation with Lactobacillus plantarum | |
| KR102626559B1 (ko) | 금화규 추출물을 유효성분으로 포함하는 면역증진용 조성물 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A201 | Request for examination | ||
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| E90F | Notification of reason for final refusal | ||
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
| GRNT | Written decision to grant | ||
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20160718 Year of fee payment: 4 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20170725 Year of fee payment: 5 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20180730 Year of fee payment: 6 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20190715 Year of fee payment: 7 |