KR101290579B1 - 벤조칼콘을 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물 - Google Patents

벤조칼콘을 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR101290579B1
KR101290579B1 KR1020110109128A KR20110109128A KR101290579B1 KR 101290579 B1 KR101290579 B1 KR 101290579B1 KR 1020110109128 A KR1020110109128 A KR 1020110109128A KR 20110109128 A KR20110109128 A KR 20110109128A KR 101290579 B1 KR101290579 B1 KR 101290579B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
prop
trimethoxyphenyl
benzochalcone
hydroxynaphthalen
compound
Prior art date
Application number
KR1020110109128A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20130044838A (ko
Inventor
이영한
신순영
고동수
박준철
현지예
임융호
Original Assignee
건국대학교 산학협력단
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 건국대학교 산학협력단 filed Critical 건국대학교 산학협력단
Priority to KR1020110109128A priority Critical patent/KR101290579B1/ko
Priority to PCT/KR2012/004183 priority patent/WO2013054998A1/ko
Publication of KR20130044838A publication Critical patent/KR20130044838A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR101290579B1 publication Critical patent/KR101290579B1/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C49/00—Ketones; Ketenes; Dimeric ketenes; Ketonic chelates
    • C07C49/76—Ketones containing a keto group bound to a six-membered aromatic ring
    • C07C49/84—Ketones containing a keto group bound to a six-membered aromatic ring containing ether groups, groups, groups, or groups
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/075—Ethers or acetals
    • A61K31/085—Ethers or acetals having an ether linkage to aromatic ring nuclear carbon
    • A61K31/09—Ethers or acetals having an ether linkage to aromatic ring nuclear carbon having two or more such linkages
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/12—Ketones
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C49/00—Ketones; Ketenes; Dimeric ketenes; Ketonic chelates
    • C07C49/76—Ketones containing a keto group bound to a six-membered aromatic ring
    • C07C49/82—Ketones containing a keto group bound to a six-membered aromatic ring containing hydroxy groups
    • C07C49/825—Ketones containing a keto group bound to a six-membered aromatic ring containing hydroxy groups all hydroxy groups bound to the ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C49/00—Ketones; Ketenes; Dimeric ketenes; Ketonic chelates
    • C07C49/76—Ketones containing a keto group bound to a six-membered aromatic ring
    • C07C49/82—Ketones containing a keto group bound to a six-membered aromatic ring containing hydroxy groups
    • C07C49/83—Ketones containing a keto group bound to a six-membered aromatic ring containing hydroxy groups polycyclic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C49/00—Ketones; Ketenes; Dimeric ketenes; Ketonic chelates
    • C07C49/76—Ketones containing a keto group bound to a six-membered aromatic ring
    • C07C49/82—Ketones containing a keto group bound to a six-membered aromatic ring containing hydroxy groups
    • C07C49/835—Ketones containing a keto group bound to a six-membered aromatic ring containing hydroxy groups having unsaturation outside an aromatic ring
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00—Function of food ingredients
    • A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A23V2200/308—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on cancer prevention

Abstract

본 발명은 암 질환의 예방 및 치료용 약학조성물에 관한 것이다.
상기와 같은 본 발명에 따르면, 세포사멸 조절 단백질인 카스파제(caspase)-7 활성에 의해 암세포의 성장억제 및 사멸작용을 갖는 신규 벤조칼콘(benzochalcone) 화합물(E-1-(2-히드록시나프탈렌-1-일)-3-(2,3,4-트리메톡시페닐)프로프-2-엔-1-온, (E)-1-(2-hydroxynaphthalen-1-yl)-3-(2,3,4-trimethoxyphenyl)prop-2-en-1-one) 및 이를 포함하는 암 질환의 예방 및 치료용 약학조성물을 제공함으로써, 암 질환을 예방 및 치료하는데 유용하게 사용될 수 있는 효과가 있다.

Description

벤조칼콘을 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물{ANTICANCER COMPOSITION CONTAINIG THE BENZOCHALCONE}
본 발명은 암 질환의 예방 및 치료용 약학조성물에 것으로서, 더욱 상세하게는 세포사멸 조절 단백질인 카스파제(caspase)-7 효소 활성에 의해 암세포의 성장억제 및 사멸작용을 갖는 하기 화학식 1로 표시되는 신규 벤조칼콘(benzochalcone) 화합물(E-1-(2-히드록시나프탈렌-1-일)-3-(2,3,4-트리메톡시페닐)프로프-2-엔-1-온, (E)-1-(2-hydroxynaphthalen-1-yl)-3-(2,3,4-trimethoxyphenyl)prop-2-en-1-one) 및 이를 포함하는 암 질환의 예방 및 치료용 약학조성물에 관한 것이다.
[화학식 1]
Figure 112011083405602-pat00001
카스파제(caspase)라는 이름은 cystein aspartate protease에서 유래한 것으로 세포자기사멸의 집행자 성격을 가진 단백질이다. 카스파제-7은 세포자기사멸 관련 시스테인 펩티다제(apoptosis related cystein peptidase)의 하나로 대부분의 포유동물과 사람에게서 발견된다. 카스파제-7은 비활성 상태의 프로단백질로 존재하다가 카스파제-9에 의해서 단백질 분해 과정을 진행하게 된다. 세포자기사멸과 관련된 신호가 제공되면 카스파제-7은 활성화 되어 세포자기사멸을 유도하게 된다. 따라서 카스파제-7의 절단 현상은 세포자기사멸의 유도와 밀접한 연관을 보여주는 결과이므로 세포자기사멸의 영향을 크게 받는 암세포의 사멸에 대한 신호로 인식되므로, 카스파제-7 절단효과를 보이는 물질은 항암제로서의 유용성을 갖는다고 할 수 있다.
플라보노이드는 C6-C3-C6의 구조적 골격을 갖는데 앞의 C6 골격에 벤젠고리가 하나 더 붙어서 나프탈렌기를 갖게 되는 경우를 벤조플라보노이드라고 부른다. 칼콘 역시 플라보노이드의 일종이므로 이와 유사하게 한 쪽의 벤젠고리가 나프탈렌기로 바뀌게 되면 벤조칼콘이 된다. 기존에 알려진 칼콘보다 벤조칼콘의 경우는 소수성이 증가하게 되므로 세포막 투과가 조금 더 용이하게 되어 세포내 생물학적 활성에서의 변화를 기대할 수 있게 된다. 따라서 본 발명자들은 벤조칼콘의 골격을 가지면서 세 개의 메톡시기와 한 개의 히드록시기를 덧붙여서 새로운 구조를 가진 화합물을 합성하였고 이를 DK78로 명명하였다. 벤조칼콘의 일종인 DK78 화합물은 현재까지 보고되지 않은 신규화합물로서 카스파제-7의 절단 효과를 보였기 때문에 세포주기 억제 관련실험을 추가적으로 더 수행하여 이 화합물이 항암제로서의 효능을 갖는지에 대해 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.
칼콘 또는 이의 유도체를 약학조성물로 이용한 종래기술로는 MMP 활성을 억제하여 혈관신생 억제효과가 있는 등록특허 제10-0567125호(칼콘 또는 이의 유도체를 함유하는 매트릭스메탈로프로테아제 활성 억제용 약학 조성물), 글리코시다아제에 의해 유발되는 질환을 예방 및 치료하는 효과가 있는 등록특허 제10-0751899호(신규한 칼콘 유도체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이들을 유효성분으로 함유하는 글리코시다아제에 의해 유발되는 질환의 예방 및 치료용 조성물) 등이 있다.
본 발명의 목적은, 세포사멸 조절 단백질인 카스파제(caspase)-7 효소 활성에 의해 암세포의 성장억제 및 사멸작용을 갖는 신규 벤조칼콘(benzochalcone) 화합물(E-1-(2-히드록시나프탈렌-1-일)-3-(2,3,4-트리메톡시페닐)프로프-2-엔-1-온, (E)-1-(2-hydroxynaphthalen-1-yl)-3-(2,3,4-trimethoxyphenyl)prop-2-en-1-one) 및 이를 포함하는 암 질환의 예방 및 치료용 약학조성물을 제공함에 있다.
또한, 본 발명의 다른 목적은 신규 벤조칼콘(benzochalcone) 화합물(E-1-(2-히드록시나프탈렌-1-일)-3-(2,3,4-트리메톡시페닐)프로프-2-엔-1-온, (E)-1-(2-hydroxynaphthalen-1-yl)-3-(2,3,4-trimethoxyphenyl)prop-2-en-1-one)을 포함하는 암 질환의 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공함에 있다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 벤조칼콘(benzochalcone) 화합물(E-1-(2-히드록시나프탈렌-1-일)-3-(2,3,4-트리메톡시페닐)프로프-2-엔-1-온, (E)-1-(2-hydroxynaphthalen-1-yl)-3-(2,3,4-trimethoxyphenyl)prop-2-en-1-one) 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 제공한다.
[화학식 1]
Figure 112011083405602-pat00002

또한, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 벤조칼콘(benzochalcone) 화합물(E-1-(2-히드록시나프탈렌-1-일)-3-(2,3,4-트리메톡시페닐)프로프-2-엔-1-온, (E)-1-(2-hydroxynaphthalen-1-yl)-3-(2,3,4-trimethoxyphenyl)prop-2-en-1-one)의 제조방법에 있어서, (1) 2-히드록시-1-아세토나프톤(2-hydroxy-1-acetonaphthone)과 2,4,6-트리메톡시벤즈알데히드(2,4,6-trimethoxybens-aldehyde)를 에탄올에 용해시키는 단계;와 (2) 상기 (1)단계에 의한 혼합용액에 50% KOH 수용액을 첨가하는 단계;와 (3) 상기 (2)단계에 의해 제조된 혼합용액을 상온에서 교반한 후 냉각시키는 단계;와 (4) 상기 (3)단계에 의해 냉각된 혼합용액에 6 N HCl용액을 첨가하여 중화시키는 단계;와 (5) 상기 (4)단계의 중화과정에서 생성되는 벤조칼콘 화합물 고체를 감암여과하고, 에탄올로 세척하는 단계; 및 (6) 상기 (5)단계에 의해 세척된 벤조칼콘 화합물 고체를 에탄올에서 재경정시키는 단계;를 포함하는 벤조칼콘(benzochalcone) 화합물(E-1-(2-히드록시나프탈렌-1-일)-3-(2,3,4-트리메톡시페닐)프로프-2-엔-1-온, (E)-1-(2-hydroxynaphthalen-1-yl)-3-(2,3,4-trimethoxyphenyl)prop-2-en-1-one)의 제조방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 대장암, 위암, 전립선암, 유방암, 신장암, 간암, 뇌종양, 폐암, 자궁암, 결장암, 방광암, 췌장암, 혈액암으로 구성된 그룹에서 선택되는 암세포에 대하여 세포사멸 조절 단백질인 카스파제(caspase)-7 효소 활성에 의해 암세포의 성장억제 및 사멸작용을 갖는 상기 화학식 1로 표시되는 벤조칼콘(benzochalcone) 화합물(E-1-(2-히드록시나프탈렌-1-일)-3-(2,3,4-트리메톡시페닐)프로프-2-엔-1-온, (E)-1-(2-hydroxynaphthalen-1-yl)-3-(2,3,4-trimethoxyphenyl)prop-2-en-1-one)과 약학적으로 허용되는 염을 포함하여 이루어지는 암 질환의 예방 및 치료용 약학조성물을 제공한다.
상기 약학조성물은 약학적으로 허용 가능한 1종 이상의 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 것을 특징으로 한다.
상기 약학조성물은 제2의 항암제 또는 항암 보조제를 포함하는 것을 특징으로 한다.
상기 제2의 항암제는 인터페론(interferon), 인터루킨-2(interleukin-2), 파클리탁셀(paclitaxel), 빈크리스틴(vincristine), 빈블라스틴(vinblastin), 독소루비신(doxorrubicin), 에토포시드(etoposide), 이리노테칸 히드로클로라이드(irinotecan hydrochloride), 시스플라틴(cisplatin), 암사크린(amsacrine), 사이토신 아라비노시드(cytosine arabinoside), 플루오로우라실(fluoro uracil) 및 탁솔(taxol)로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상인 것을 특징으로 한다.
또한, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 벤조칼콘(benzochalcone) 화합물(E-1-(2-히드록시나프탈렌-1-일)-3-(2,3,4-트리메톡시페닐)프로프-2-엔-1-온, (E)-1-(2-hydroxynaphthalen-1-yl)-3-(2,3,4-trimethoxyphenyl)prop-2-en-1-one) 및 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 포함하는 암 질환의 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공한다.
상기 건강기능식품은 정제, 캡슐제, 환제 또는 액제 형태인 것을 특징으로 한다.
상기와 같은 본 발명에 따르면, 세포사멸 조절 단백질인 카스파제(caspase)-7 활성에 의해 암세포의 성장억제 및 사멸작용을 갖는 신규 벤조칼콘(benzochalcone) 화합물(E-1-(2-히드록시나프탈렌-1-일)-3-(2,3,4-트리메톡시페닐)프로프-2-엔-1-온, (E)-1-(2-hydroxynaphthalen-1-yl)-3-(2,3,4-trimethoxyphenyl)prop-2-en-1-one) 및 이를 포함하는 암 질환의 예방 및 치료용 약학조성물과 암 질환의 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공함으로써, 암 질환을 예방 및 치료하는데 유용하게 사용될 수 있을 뿐만 아니라, 암 질환의 예방 및 개선을 위한 건강기능식품에 유용하게 사용될 수 있는 효과가 있다.
도 1 은 본원발명 벤조칼콘 화합물(DK78)의 수소핵자기공명분광스펙트럼.(400MHz 브루커 핵자기공명분광기기 사용)
도 2 는 본원발명 벤조칼콘 화합물(DK78)의 탄소핵자기공명분광스펙트럼.(100MHz 브루커 핵자기공명분광기기 사용)
도 3 은 HCT116 세포에서 본원발명 벤조칼콘 화합물(DK78)의 카스파제 활성 효과를 웨스턴 블롯법으로 조서한 것.
도 4 는 본원발명 벤조칼콘 화합물(DK78)의 HCT116 대장암 세포 증식 억제능을 나타낸 것.
도 5 는 HCT116 세포에서 본원발명 벤조칼콘 화합물(DK78)의 세포사멸 효과를 유세포분리측정기(flow cytometer)로 분석한 것.(2N, dploid DNA; 4N, tetraploid DNA. M1, sub-G1; M2, G1; M3, S; M4, G2/M)
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 벤조칼콘(benzochalcone) 화합물(E-1-(2-히드록시나프탈렌-1-일)-3-(2,3,4-트리메톡시페닐)프로프-2-엔-1-온, (E)-1-(2-hydroxynaphthalen-1-yl)-3-(2,3,4-trimethoxyphenyl)prop-2-en-1-one) 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 제공한다.
[화학식 1]
Figure 112011083405602-pat00003

본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 벤조칼콘(benzochalcone) 화합물(E-1-(2-히드록시나프탈렌-1-일)-3-(2,3,4-트리메톡시페닐)프로프-2-엔-1-온, (E)-1-(2-hydroxynaphthalen-1-yl)-3-(2,3,4-trimethoxyphenyl)prop-2-en-1-one)의 제조방법에 있어서, (1) 2-히드록시-1-아세토나프톤(2-hydroxy-1-acetonaphthone)과 2,4,6-트리메톡시벤즈알데히드(2,4,6-trimethoxybens-aldehyde)를 에탄올에 용해시키는 단계;와 (2) 상기 (1)단계에 의한 혼합용액에 50% KOH 수용액을 첨가하는 단계;와 (3) 상기 (2)단계에 의해 제조된 혼합용액을 상온에서 교반한 후 냉각시키는 단계;와 (4) 상기 (3)단계에 의해 냉각된 혼합용액에 6 N HCl용액을 첨가하여 중화시키는 단계;와 (5) 상기 (4)단계의 중화과정에서 생성되는 벤조칼콘 화합물 고체를 감암여과하고, 에탄올로 세척하는 단계; 및 (6) 상기 (5)단계에 의해 세척된 벤조칼콘 화합물 고체를 에탄올에서 재경정시키는 단계;를 포함하는 벤조칼콘(benzochalcone) 화합물(E-1-(2-히드록시나프탈렌-1-일)-3-(2,3,4-트리메톡시페닐)프로프-2-엔-1-온, (E)-1-(2-hydroxynaphthalen-1-yl)-3-(2,3,4-trimethoxyphenyl)prop-2-en-1-one)의 제조방법을 제공한다.
본 발명은 대장암, 위암, 전립선암, 유방암, 신장암, 간암, 뇌종양, 폐암, 자궁암, 결장암, 방광암, 췌장암, 혈액암으로 구성된 그룹에서 선택되는 암세포에 대하여 세포사멸 조절 단백질인 카스파제(caspase)-7 효소 활성에 의해 암세포의 성장억제 및 사멸작용을 갖는 상기 화학식 1로 표시되는 벤조칼콘(benzochalcone) 화합물(E-1-(2-히드록시나프탈렌-1-일)-3-(2,3,4-트리메톡시페닐)프로프-2-엔-1-온, (E)-1-(2-hydroxynaphthalen-1-yl)-3-(2,3,4-trimethoxyphenyl)prop-2-en-1-one)과 약학적으로 허용되는 염을 포함하여 이루어지는 암 질환의 예방 및 치료용 약학조성물을 제공한다.
상기 약학조성물은 약학적으로 허용 가능한 1종 이상의 담체, 희석제 또는 부형제를 포함할 수 있다. 상기 담체, 희석제 또는 부형제로는 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로스, 메틸 셀룰로스, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있으나 이에 한정되지는 않는다.
상기 약학조성물은 제2의 항암제 또는 항암 보조제를 포함할 수 있다. 상기 제2의 항암제 또는 항암 보조제로는 인터페론(interferon), 인터루킨-2(interleukin-2), 파클리탁셀(paclitaxel), 빈크리스틴(vincristine), 빈블라스틴(vinblastin), 독소루비신(doxorrubicin), 에토포시드(etoposide), 이리노테칸 히드로클로라이드(irinotecan hydrochloride), 시스플라틴(cisplatin), 암사크린(amsacrine), 사이토신 아라비노시드(cytosine arabinoside), 플루오로우라실(fluoro uracil) 및 탁솔(taxol)을 들 수 있으나 이에 한정되지는 않는다.
본 발명의 벤조칼콘(benzochalcone) 화합물(E-1-(2-히드록시나프탈렌-1-일)-3-(2,3,4-트리메톡시페닐)프로프-2-엔-1-온, (E)-1-(2-hydroxynaphthalen-1-yl)-3-(2,3,4-trimethoxyphenyl)prop-2-en-1-one)을 함유하는 약학조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 또는 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 상세하게는 제제화할 경우에는 보통 사용되는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제, 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구투여를 위한 고형제제는 상기 벤조칼콘(benzochalcone) 화합물(E-1-(2-히드록시나프탈렌-1-일)-3-(2,3,4-트리메톡시페닐)프로프-2-엔-1-온, (E)-1-(2-hydroxynaphthalen-1-yl)-3-(2,3,4-trimethoxyphenyl)prop-2-en-1-one)에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트, 수크로스, 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 및 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔, 마크로골, 트윈 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 벤조칼콘(benzochalcone) 화합물(E-1-(2-히드록시나프탈렌-1-일)-3-(2,3,4-트리메톡시페닐)프로프-2-엔-1-온, (E)-1-(2-hydroxynaphthalen-1-yl)-3-(2,3,4-trimethoxyphenyl)prop-2-en-1-one)의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 벤조칼콘(benzochalcone) 화합물(E-1-(2-히드록시나프탈렌-1-일)-3-(2,3,4-트리메톡시페닐)프로프-2-엔-1-온, (E)-1-(2-hydroxynaphthalen-1-yl)-3-(2,3,4-trimethoxyphenyl)prop-2-en-1-one) 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 0.0001 내지 100㎎/㎏으로, 바람직하게는 0.001 내지 100㎎/㎏의 양을 일일 1회 내지 수회로 나누어 투여할 수 있다. 전체 약학조성물에서 본 발명의벤조칼콘(benzochalcone) 화합물(E-1-(2-히드록시나프탈렌-1-일)-3-(2,3,4-트리메톡시페닐)프로프-2-엔-1-온, (E)-1-(2-hydroxynaphthalen-1-yl)-3-(2,3,4-trimethoxyphenyl)prop-2-en-1-one) 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 0.0001 내지 10중량%, 바람직하게는 0.001 내지 1중량%로 포함되어야 한다.
본 발명의 약학조성물은 위, 마우스, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있으며, 투여의 방식은 경구, 직장, 정맥, 근육, 피하 등 다양한 방법으로 주사에 의해 투여될 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 벤조칼콘(benzochalcone) 화합물(E-1-(2-히드록시나프탈렌-1-일)-3-(2,3,4-트리메톡시페닐)프로프-2-엔-1-온, (E)-1-(2-hydroxynaphthalen-1-yl)-3-(2,3,4-trimethoxyphenyl)prop-2-en-1-one) 및 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 포함하는 암 질환의 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공한다. 예를 들면, 건강기능식품으로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등에 벤조히드록시메톡시칼콘 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 그의 염을 첨가하여 제조할 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
실시예 1. 벤조칼콘 화합물(DK78)의 합성
본 발명에서는 상기 화학식 1로 표시되는 벤조칼콘 화합물(DK78)(E-1-(2-히드록시나프탈렌-1-일)-3-(2,3,4-트리메톡시페닐)프로프-2-엔-1-온, (E)-1-(2-hydroxynaphthalen-1-yl)-3-(2,3,4-trimethoxyphenyl)prop-2-en-1-one)을 아래 반응식 1에 나타낸 방법을 사용하여 다음과 같이 합성하였다.
[반응식 1]
Figure 112011083405602-pat00004
2-히드록시-1-아세토나프톤 (I, 1.86 g, 10 mmol)과 2,4,6-트리메톡시벤즈알데히드 (II, 1.96 g, 10 mmol)을 50 ml 에탄올에 교반하면서 녹인 후 온도를 약 3 oC 낮춘 후에 50 % KOH용액 3 ml를 천천히 가하였다. 그 다음 상온에서 48시간 교반 후 얼음물에 가하여 냉각시키고, 6N 염산(HCL)으로 중화시켰으며, 중화과정에서 형성된 고체를 감압여과하고 차가운 에탄올로 세척하여 목적화합물 벤조칼콘 화합물(DK-78)(E-1-(2-히드록시나프탈렌-1-일)-3-(2,3,4-트리메톡시페닐)프로프-2-엔-1-온, (E)-1-(2-hydroxynaphthalen-1-yl)-3-(2,3,4-trimethoxyphenyl)prop-2-en-1-one)을 얻었다. 이 벤조칼콘 화합물을 에탄올에서 재결정하여 순수한 벤조칼콘 화합물(DK-78)을 79 %의 수율로 얻었다 (2.87 g). M.p ; 91-93 oC.
벤조칼콘 화합물(DK-78)의 생성여부를 확인하기 위하여 수소핵자기공명분광스펙트럼(Bruker 400㎒)과 탄소핵자기공명스펙트럼(Bruker 100㎒)을 통해 확인 하였다. 사용한 기기는 브루커사 400MHz 기기였다. 수소핵자기공명분광스펙트럼과 탄소핵자기공명스펙트럼은 각각 도 1. 및 도 2.에 나타낸 바와 같고, 화학적이동도는 아래와 같다.
1H-NMR(400MHz) δ (다중도, 커필링상수/Hz) : 2.80(dd, 16.5, 3.0), 3.43(dd, 16.5, 13.8), 3.79(s), 3.84(s), 3.86(s), 5.87(dd, 13.8, 3.0), 6.91(d, 8.8), 7.25(d, 9.0), 7.32(d, 8.8), 7.49(ddd, 8.0, 6.9, 1.1), 7.68(ddd, 8.5, 6.9, 1.1), 7.93(d, 8.0), 8.15(d, 9.0), 9.39(d, 8.5)
13C-NMR(100MHz) δ : 43.7, 56.0, 60.4, 61.4, 74.2, 108.0, 111.7, 119.0, 122.1, 123.8, 124.7, 125.0, 128.7, 128.8, 129.5, 130.9, 137.6, 141.7, 151.3, 154.0, 163.5, 193.2
상기 벤조칼콘 화합물(DK78)(E-1-(2-히드록시나프탈렌-1-일)-3-(2,3,4-트리메톡시페닐)프로프-2-엔-1-온, (E)-1-(2-hydroxynaphthalen-1-yl)-3-(2,3,4-trimethoxyphenyl)prop-2-en-1-one)은 현재까지 보고되지 않은 새로운 물질로서 C22H20O5의 분자식을 갖고, 분자량은 364.1이다.
실시예 2. 벤조칼콘 화합물(DK78)의 카스파제(caspase)-7 절단 효과
세포사멸을 유도하는 씨스테인 단백분해 효소 (cystein protease)인 카스파제-9과 카스파제-7 효소는 통상 비활성형의 전구체로 존재하다가 세포사멸 자극 신호가 전달되면 절단되어 활성형이 된다. 본 발명에서는 벤조칼콘 화합물(DK78)의 항암 효과를 확인하기 위하여, 웨스턴 블롯 분석법을 이용하여 활성형태의 절단형 카스파제-7과 카스파제-9을 활성화 시키는 카스파제-7 및 카스파제-9의 기질 단백질인 폴리(ADP-리보스) 중합효소(poly(ADP-ribose) polymerase; PARP)의 단편 생성 정도를 조사하였다.
HCT116 세포(사람 대장암 세포주)를 ATCC(American Type Culture Collection, 미국)에서 분양받아 10% FBS(Fetal Bovine Serum, Invitrogen Life Technologies)과 Antibiotic-Antimycotic solution(Invitrogen Life Technologies)이 포함된 DMEM(Invitrogen Life Technologies)에서 배양하였다. 배양액은 2일에 한 번씩 60-mm 세포배양접시에 첨가하였고, 1 x 106의 접종 밀도(seed density)를 유지하면서 37℃, 5% CO2 배양기에서 배양하였다. 배양된 세포에 20μM 농도의 벤조칼콘 화합물(DK78)을 처리하고, 0, 6, 12, 24 시간 경과 후 세포를 수확하였다. 수확된 세포에 20mM HEPES(pH 7.2), 1% Triton X-100, 10% glycerol, 150 mM NaCl, 10 μg/ml leupeptin, 1mM PMSF가 함유된 세포용해액(cell lysis buffer)을 첨가하여 30분 동안 반응시켜 세포를 용해시킨 후, 고속원심분리하여 세포 용해액을 수확하고, 동량의 단백질이 포함하도록 제조된 단백질 용해액을 SDS-폴리아크릴아마이드 겔(SDS-polyacrylamide gel) 전기영동을 실시하여 세포에 존재하는 단백질들을 분리하였다. 전기영동으로 분리된 단백질을 폴리스틸렌 막(polystyrene membrane)으로 옮긴 후, 절단형의 카스파제-7. 카스파제-9 단백질과 PARP 단백질에 결합하는 일차 항체(Cell Signaling Technology 회사에서 구입)와 대조군으로서 단백질 발현이 변화되지 않는 GAPDH(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase)를 인지하는 일차항체(Santa Cruz technology 회사에서 구입)를 각각 5시간 반응 시킨 후, 일차항체를 인자하는 이차항체(Cell Signaling Technology 회사에서 구입)를 1시간동안 반응시켰다. 화학형광감지 시스템 (Chemiluminescence detection system; Amersham Pharmacia Biotech, Piscataway, NJ)을 이용하여 X-ray 필름상에서 각 단백질들의 발현 변화를 분석하였다.
그 결과 도 3.에 나타낸 바와 같이 HCT116 대장암세포에 벤조칼콘 화합물(DK78)을 처리하면, 대조 단백질인 GAPDH의 양은 변하지 않았으나 절단형 카스파제-9과 카스파제-7 단백질은 처리 24 시간 후에 증가된다는 사실을 확인하였다. 또한, PARP 단백질은 카스파제-7 효소 활성에 의해 절단되는 기질 단백질로서, PARP 단백질 역시 벤조칼콘 화합물(DK78) 처리 24 시간 후부터 89-kDa 크기의 단편이 생성되는 것이 관찰되었다. 이러한 결과는, 본 발명의 벤조칼콘 화합물(DK78)이 카스파제-9과 카스파제-7 효소 활성을 유도한다는 사실을 의미하는 것이다.
실시예 3. 벤조칼콘 화합물(DK78)의 대장암세포주 성장 억제 효과
본 발명의 벤조칼콘 화합물(DK49)에 의한 HCT116 대장암 세포의 성장 억제능은 CCK-8 키트(Cell Counting Kit-8; Dojindo 회사, 일본)를 이용하여 측정하였다. HCT116 대장암세포를 96-well 세포 배양판에 1 x 104 개 되도록 분주한 후 0, 5, 10, 20μM 농도의 벤조칼콘 화합물(DK78)을 처리하고 각각 24시간과 48시간 후에 CCK-8 용액 10㎕를 첨가하였다. 2시간 후에 세포배양액의 흡광도를 450nm에서 측정하여 세포 생존능을 분석하였다.
그 결과 도 4.에 나타난바와 같이 아무 처리하지 않은 대조 세포군에서는 세포 성장능이 시간에 따라 증가하였지만, 벤조칼콘 화합물(DK78)을 처리한 세포군에서는 벤조칼콘 화합물(DK78) 처리 농도와 시간 의존적으로 세포 성장이 감소되었다. 이러한 결과는 벤조칼콘 화합물(DK78)에 의해 HCT116 대장암세포의 세포사멸이 유도되어 암세포 증식이 저해되었음을 의미하는 것이다.
실시예 4. 벤조칼콘 화합물(DK78)의 대장암세포주 세포사멸 유도 효과
약물처리에 의한 세포사멸의 주된 과정은 세포의 수축과 이를 동반하는 염색사(Chromatin)의 응축(chromatin condensation)과 DNA 단편(DNA gragmentation) 현상들로부터 확인할 수가 있다. 이러한 현상은 세포내 DNA 함량을 측정하였을 때 세포주기과정(Cell cycle)에서의 G1기 세포가 가지는 2N DNA함량보다 작은 DNA가 나타난다(sub-G1). 따라서 통상적으로 sub-G1 DNA 함량을 가지는 세포는 세포사멸이 진행되고 있는 세포라 간주된다. 본 발명에서는 대장암세포에서 벤조칼콘 화합물(DK78)에 의한 세포사멸 유도 효과를 측정하기 위하여 유세포분리측정기(Flow cytometer; BD Science, 미국)를 이용하여 세포내 DNA 함량을 측정하였다.
HCT116 세포에 벤조칼콘 화합물(DK78)을 처리하고 24시간 후에 세포를 수확하였다. 세포에 70%에탄올을 첨가하여 고정시키고, PI(Propidium Iodine)를 30분 동안 반응 시켜 DNA를 염색한 후, 유세포측정기로 sub-G1 DNA 양을 분석하였다.
그 결과 도 5.에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 벤조칼콘 화합물(DK78)을 20μM 농도로 처리하면, sub-G1 DNA 함량이 대조 세포의 4.73%에서 시간 의존적으로 10.09%와 69.44%로 각각 증가하였다. 따라서 본 발명에 따른 벤조칼콘 화합물(DK78)은 HCT116 대장암세포의 세포사멸을 유도한다는 사실을 확인할 수 있었다.
이상, 본 발명내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 실시태양일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의해 정의된다고 할 것이다.

Claims (8)

  1. 삭제
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 삭제
  5. 삭제
  6. 하기 화학식 1로 표시되는 벤조칼콘(benzochalcone) 화합물(E-1-(2-히드록시나프탈렌-1-일)-3-(2,3,4-트리메톡시페닐)프로프-2-엔-1-온, (E)-1-(2-hydroxynaphthalen-1-yl)-3-(2,3,4-trimethoxyphenyl)prop-2-en-1-one) 화합물을 인 비트로에서 대장암 세포에 처리하여 상기 세포에서 카스파제(caspase)-7 및 -9 효소의 활성을 인 비트로에서 유도하는 방법.
    [화학식 1]
    Figure 112013015669847-pat00011


  7. 하기 화학식 1로 표시되는 벤조칼콘(benzochalcone) 화합물(E-1-(2-히드록시나프탈렌-1-일)-3-(2,3,4-트리메톡시페닐)프로프-2-엔-1-온, (E)-1-(2-hydroxynaphthalen-1-yl)-3-(2,3,4-trimethoxyphenyl)prop-2-en-1-one) 화합물을 인비트로에서 대장암 세포에 처리하여 상기 세포에서 폴리(ADP-리보스) 중합효소(poly(ADP-ribose) polymerase; PARP)의 89-kDa 크기의 단편을 인 비트로에서 생성하는 방법.
    [화학식 1]
    Figure 112013015669847-pat00012







  8. 삭제
KR1020110109128A 2011-10-13 2011-10-25 벤조칼콘을 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물 KR101290579B1 (ko)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020110109128A KR101290579B1 (ko) 2011-10-25 2011-10-25 벤조칼콘을 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물
PCT/KR2012/004183 WO2013054998A1 (ko) 2011-10-13 2012-05-25 신규한 칼콘 유도체 및 이를 유효성분으로 하는 항암제 조성물

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020110109128A KR101290579B1 (ko) 2011-10-25 2011-10-25 벤조칼콘을 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20130044838A KR20130044838A (ko) 2013-05-03
KR101290579B1 true KR101290579B1 (ko) 2013-07-30

Family

ID=48657158

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020110109128A KR101290579B1 (ko) 2011-10-13 2011-10-25 벤조칼콘을 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR101290579B1 (ko)

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20090182058A1 (en) * 2006-01-17 2009-07-16 Ahcene Boumendjel Novel Chalcone Derivatives With Antimitotic Activity

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20090182058A1 (en) * 2006-01-17 2009-07-16 Ahcene Boumendjel Novel Chalcone Derivatives With Antimitotic Activity

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Journal of Medicinal Chemistry, 51(7), pp. 2307-2310, (2008) *
Journal of Medicinal Chemistry, 51(7), pp. 2307-2310, (2008)*
Magnetic Resonance in Chemistry, 49(1), pp. 41-45, (2011.01) *
Magnetic Resonance in Chemistry, 49(1), pp. 41-45, (2011.01)*

Also Published As

Publication number Publication date
KR20130044838A (ko) 2013-05-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR102207448B1 (ko) 세트라리아 속 지의류로부터 분리된 신규 지의류 내생 곰팡이의 추출물을 포함하는 대장암 줄기세포 성장억제용 조성물
KR101561552B1 (ko) 리그난 화합물을 유효 성분으로 포함하는 암의 예방 또는 치료용 조성물
KR20140005081A (ko) 하이드록시 챨콘 화합물을 유효성분으로 함유하는 항염 조성물
KR102145416B1 (ko) 베르베논 유도체를 포함하는 암 치료 또는 예방용 조성물
KR101333734B1 (ko) 벤조히드록시메톡시칼콘을 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물
KR101369997B1 (ko) 신규한 암 예방 및 치료용 약학적 조성물
KR101669759B1 (ko) 히드록시벤질리덴 크로마논계 화합물을 유효성분으로 함유하는 염증성 장질환의 예방 또는 치료용 조성물
KR102022279B1 (ko) 신선초 추출물을 함유하는 근육관련 질환의 예방 및 치료용 조성물
KR101290579B1 (ko) 벤조칼콘을 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물
KR100673574B1 (ko) 향나무로부터 분리된 세드롤을 함유하는 암 예방 및치료용 조성물
CN112513000A (zh) 新型联苯衍生物化合物及其用途
KR101787007B1 (ko) 플라보노이드 유도체 화합물을 유효성분으로 함유하는 남성 불임증 예방 및 치료용 조성물
KR101283004B1 (ko) 벤조칼콘을 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물
GB2579480A (en) Composition for preventing or treating cancer containing Triazolopyridine-based derivative as active ingredient
KR101325783B1 (ko) 나프탈레닐페닐디히드로피라졸을 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물
KR101290578B1 (ko) 히드록시메톡시벤조칼콘 화합물을 유효성분으로 포함하는 항암용 조성물
KR101333736B1 (ko) 히드록시메톡시칼콘 화합물을 유효성분으로 포함하는 항암용 조성물
KR20160069425A (ko) 암의 예방 또는 치료를 위한 카지놀 ｃ의 용도
US20240115537A1 (en) Composition for preventing or treating breast cancer comprising compound derived from dendropanax morbiferus
GB2579149A (en) Pharmaceutical composition for preventing or treating cancer containing receptor tyrosine kinase inhibitor as active ingredient
KR101641829B1 (ko) Hsp90 억제 활성을 갖는 신규한 티에노피리딘 화합물 및 이의 의학적 용도
KR101526055B1 (ko) Ｈｓｐ９０ 억제 활성을 갖는 신규 찰콘 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염 및 이의 의학적 용도
KR101697062B1 (ko) 물에 대한 용해도가 개선된 신규 제라닐 프라보노이드 유도체, 이의 제조 방법 및 이를 유효성분으로 포함하는 암 예방 및 치료용 약학적 조성물
KR102618160B1 (ko) 람부탄 씨 추출물, 분획물 또는 이로부터 분리된 플라보노이드를 세노모르픽 제제의 유효성분으로 함유하는 세포의 노화 관련 증상 억제 및 노화 관련 질환을 예방 또는 치료하는 조성물
KR101470613B1 (ko) 라티폴린을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant
FPAY Annual fee payment

Payment date: 20160701

Year of fee payment: 4

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20170703

Year of fee payment: 5

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20180723

Year of fee payment: 19