KR101262813B1 - 소태나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 또는 알러지성 피부질환의 예방 및 치료를 위한 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 아토피 피부염 또는 알러지성 피부질환의 예방 및 치료를 위한 조성물에 관한 것으로서, 소태나무 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 것을 특징으로 하는바, 구체적으로는 소태나무 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 아토피 피부염 또는 알러지성 피부질환의 예방 및 치료를 위한 조성물, 상기 조성물을 포함하는 화장료 조성물 및 기능성 식품에 관한 것이다. 본 발명에 의한 상기 조성물은 조직 내에서 염증세포의 침윤과 비만세포의 탈과립화를 억제하고, 면역반응을 안정화시켜 아토피 피부염 또는 알러지성 피부질환의 예방 및 치료에 유용하게 사용될 수 있다.

아토피 피부염

Description

소태나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 또는 알러지성 피부질환의 예방 및 치료를 위한 조성물{THE COMPOSITION COMPRISING PICRASMA QUASSIOIDES EXTRACT FOR PREVENTING AND TREATING ATOPIC DERMATITIS OR ALLERGIC SKIN DISEASES}

본 발명은 아토피 피부염 또는 알러지성 피부질환의 예방 및 치료를 위한 조성물에 관한 것으로서, 보다 구체적으로는 소태나무의 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 또는 알러지성 피부질환의 예방 및 치료를 위한 조성물, 이를 포함하는 화장료 조성물 및 기능성 식품에 관한 것이다.

아토피 피부염은 면역기능의 불균형을 주된 원인으로, 환경적, 사회적, 심리적, 유전적 요인 등이 복합적으로 작용하여 증상의 호전과 악화를 반복하는 만성 염증성 피부질환이다. 한의학에서 흔히 태열이라고 하며, 심한 가려움증을 동반하는 홍반, 발진, 진물 및 가피형성의 피부장애를 특징으로 한다. 아토피 피부염은 전 세계적으로 계속 증가추세에 있으며, 보통 소아나 유년시절에 발생하지만 성인기에 나타나 지속되기도 한다. 심한 가려움으로 인한 집중력 저하나 수면부족으로 학습능력이나 업무능력이 떨어지고, 어릴 때부터 반복되는 증상의 치료를 위해 환 자와 가족이 짊어지는 많은 시간적, 경제적 손실은 물론, 외모에 의한 정신적 고통이 신체적 고통 이상으로 큰 질환이다.

최근 연구결과에 의하면 아토피 피부염의 주 원인은 면역체계의 불균형과 비정상적 면역반응이 관여하는 것으로 밝혀지고 있다. 우리 몸은 세포성 면역에 관여하는 Th1 세포와 체액성 면역에 관여하는 Th2 세포가 상호균형을 유지하며 항상성을 유지하는데, 아토피 피부염의 경우, 자연면역계를 활성화하는 Th1에 비하여 특이면역계에 관여하는 Th2의 면역세포가 활성화되는 것으로 알려져 있다. 아토피 피부염을 포함한 아토피 질환은 항원에 대한 IgE 항체 생산이 원인이 되며, IgE 항체로의 클래스 전환(class switch)을 유도하는 사이토카인인 IL-4와 호산구의 증식 및 분화를 촉진시키는 IL-5가 관여하기 때문에 Th2 세포반응이 아토피 피부염을 유도하는 주요한 원인이 된다. 따라서 Th1/Th2 면역세포의 조절과 면역반응을 유도하는 IgA, IgG 및 IgM을 조절하는 면역요법의 개발은 환자의 면역력을 증대시켜 아토피 피부염의 예방과 치료의 근원적인 방법이 된다.

"원인을 알 수 없는 이상한 질병"이라는 아토피(atopy)의 어원이 의미하듯 아토피 피부염은 서양의학적으로 근본적이고 적절한 치료가 되지 못하고 있는 실정이다. 다만 대중요법으로 사용되고 있는 스테로이드와 같은 비특이적 면역억제제, 항히스타민제 및 항생제의 경우 면역반응을 억제하여 일시적 증상의 완화를 나타내나, 약물치료를 중단할 경우 반동현상으로 인하여 아토피 피부염의 증상이 더욱 심해지는 경우가 많다. 또한 장기간 투여하는 경우 피부가 얇아져 2차 감염을 일으킬 가능성이 있음은 물론, 내성, 당뇨병, 백내장 유발 등 부작용의 우려가 상존한다. 따라서 부작용이 적고, 면역기능을 증강시키며, 항 알레르기 효과와 피부자극 억제 효과를 갖는 천연물질의 발굴은 기존의 비특이적이고 대중적인 약물을 대체할 수 있는 근원적 치료법이 될 수 있기에, 그에 대한 개발이 요구되는 실정이다.

한편, 소태나무(picrasma quassioides)는 매우 쓴맛인 콰신(quassin)을 함유하고 있으며 나무껍질에 황색의 피복이 있고 높이는 약 20m 정도까지 자란다. 잎은 우상복엽으로 작은 잎은 광난형이고 밑은 둥글고 끝은 날카롭다. 꽃은 황록색의 자웅 이주로 5-6월경에 취산화서 형태로 액출하고 열매는 핵과로서 타원상 구형이고 9월경에 적색으로 익는다. 잎, 나무껍질, 줄기, 뿌리 등 각 부분을 약재로 사용하는데, 청열조습, 건위, 살충, 해독의 효능이 있어 소화불량, 세균성하리, 위장염, 담도감염, 편도선염에 효과가 있으며, 민간에서 건위제, 소화불량, 위염 및 식욕부진 등 주로 위장을 다스리는 약으로 이용되어 왔다. 그러나 현재까지 아토피 피부염이나 항알러지 효과에 대한 연구는 없다.

등록특허 제0905386호에는 아토피의 치료를 위한 생약조성물이 기재되어 있고, 이에 소태나무 추출물도 포함되어 있으나, 주된 성분을 우엉으로 하고 있어 단순히 개시된 내용만으로 소태나무 추출물이 아토피 피부염의 치료에 주된 효과를 갖는지 알 수 없고, 뚜렷한 효과도 기재되어 있지 않다. 즉, 상기 등록특허에서는 소태나무 추출물 자체에 대해서는 항균효과 실험만 행하였는데, 이러한 실험도 우엉추출물과의 효과 대비를 위한 하나의 비교예로 많은 생약 중 소태나무 추출물을 예로 든 것이라는 점에서, 소태나무 추출물이 면역글로블린, 사이토카인 및 히스타민 분비 조절능을 갖는다는 사실을 밝혀냄으로써 이를 아토피 피부염 또는 알러지 성 피부질환의 예방 및 치료에 적용하고자 하는 본 발명의 핵심적 기술 내용이 개시되었다고 볼 수 없다.

이에 본 발명자는 아토피성 피부염을 치료할 수 있는 천연물질에 대한 연구를 수행하던 중, 소태나무 추출물이 면역글로블린, 사이토카인 및 히스타민 분비 조절능을 나타냄을 관찰하고, 이를 실제 아토피 피부염 환자를 대상으로 적용한 결과, 증세가 상당히 완화됨을 확인하여 본 발명의 소태나무 추출물이 아토피 피부염 또는 알러지성 피부질환에 유용하게 사용될 수 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하기에 이르렀다.

본 발명은 Th1/Th2 면역세포를 조절하고, IgE, IgG 및 IgM의 수치는 낮추고 IgA의 농도를 증가시켜 정상적 면역반응을 유도함으로써 아토피 피부염을 치료하기 위해 창안된 것으로, 상기 정상적 면역반응을 유도하기 위해 소태나무 추출물 또는 분획물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 또는 알러지성 피부질환의 예방 및 치료용 조성물, 이를 포함하는 화장료 조성물 및 기능성 식품을 제공하는 것을 목적으로 한다.

상기 본 발명의 과제를 이루기 위하여, 본 발명의 제 1태양은 소태나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 또는 알러지성 피부질환의 예방 및 치료를 위한 조성물을 제공한다.

상기 본 발명의 과제를 이루기 위하여, 본 발명의 제 2태양은 소태나무 추출물의 헥산 분획물, 부탄올 분획물 및 에틸아세테이트 분획물로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나를 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 또는 알러지성 피부질환의 예방 및 치료를 위한 조성물을 제공한다.

상기 본 발명의 과제를 이루기 위하여, 본 발명의 제 3태양은 상기 제 1태양 및 제 2태양의 조성물을 포함하는 아토피 피부염 또는 알러지성 피부질환의 예방 및 치료를 위한 화장료 조성물을 제공한다.

상기 본 발명의 과제를 이루기 위하여 본 발명의 제 4태양은 상기 제 1태양 및 제 2태양의 조성물을 포함하는 아토피 피부염 또는 알러지성 피부질환의 예방 및 치료를 위한 기능성 식품을 제공한다.

본 발명에서 사용되는 소태나무는 생약의 전초, 가지, 잎, 뿌리, 내피 등을 사용할 수 있으며, 바람직하게는 이를 분말화하거나 추출물을 제조하여 사용할 수 있다.

이하, 본 발명을 보다 상세히 설명한다.

본 발명의 제 1태양에 의한 소태나무 추출물의 제조는 다음과 같다.

건조시킨 소태나무를 건조중량의 약 1~30배, 더욱 바람직하게는 3~15배 분량의 용매로 환류 추출기를 이용하여 약 1시간~10시간, 더욱 바람직하게는 2시간~8시간 동안 80~100℃의 온도로 가열하여 추출하고, 이후 1차 추출중량의 약 3~15배, 더욱 바람직하게는 5~10배 분량의 증류수를 다시 넣고 약 1시간~7시간, 더욱 바람직하게는 2시간~5시간 동안 80~100℃의 온도로 가열하여 재탕한다. 상기 재탕한 추출액을 55~80℃로 감압 농축한 후, 동결 건조하여 소태나무 추출물을 수득한다. 상기 추출물을 제조하는 용매로는 물, 탄소수 1~4의 저급 알코올, 더욱 바람직하게는 메탄올 또는 에탄올 등의 극성 유기용매, 에틸 아세테이트, 아세톤, 헥산, 디에틸에테르, 디클로로메탄 등의 유기용매를 사용하여 추출할 수 있으며, 이들 용매는 단독 또는 혼합되어 사용 가능하다. 또한 상기 추출물은 통상의 분획법 또는 크로마토그라피에 의해 보다 정제하여 사용할 수 있으며, 이러한 분획물 또는 정제물이 본 발명의 범위에 속함은 물론이다.

본 발명에 의한 소태나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 또는 알러지성 피부질환의 예방 및 치료를 위한 조성물에 상기 소태나무 추출물은 전체 중량 중 0.0001~100중량%, 바람직하게는 0.01~50중량% 포함될 수 있다.

본 발명은 아토피 피부염 또는 알러지성 피부질환으로 인한 증상의 억제 및 완화 효과를 효과적으로 유지하는 범위 내에서 상기 소태나무 추출물과 금은화, 지골피, 청미래덩굴, 백선피, 황금, 토복령, 황백, 해동피, 오미자, 지유와 같은 다른 약재들을 첨가할 수 있으며, 본 발명의 목적에 적합하게 사용될 수 있는 것들을 포함할 수 있다. 상기 약재들을 혼합한 복합조성물 중 소태나무 추출물은 전체 중량에 대하여 0.1~99중량%일 수 있다.

본 발명의 제 2태양에 의한 소태나무 추출물의 분획물 제조는 다음과 같다.

상기 제 1태양에 의한 소태나무 추출물을 시료로 하여, 시료중량의 약 1~15배, 더욱 바람직하게는 5~10배 분량의 증류수에 녹인 후 분획여두에 넣고 비극성 용매에서 극성 용매 순으로 순차 추출하여 가용성 분획을 제조한다. 본 발명에서는 헥산, 에틸아세테이트, 부탄올 순으로 추출하여 분획한 층들을 진공회전 농축기에서 농축하고 동결 건조함으로써 헥산 분획, 에틸아세테이트 분획, 부탄올 분획을 수득한다.

본 발명에 의한 소태나무 추출물의 분획물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 또는 알러지성 피부질환의 예방 및 치료를 위한 조성물에 상기 소태나무 추출물의 분획물은 전체 중량 중 0.0001~100중량%, 바람직하게는 0.001~50중량% 포함될 수 있다.

이에 따라 본 발명에 따른 소태나무 추출물 또는 그 분획물은 그 자체로 아토피 피부염 또는 알러지성 피부질환의 치료에 이용해도 무방하지만, 상기 소태나무 추출물 또는 그 분획물을 다양한 투여 경로를 통하여 아토피 피부염 환자에게 전달하기 위해서 적어도 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 담체, 부형제 및 희석제에 혼입시키는 형태로 이용되는 것이 바람직하다.

본 발명의 소태나무 추출물 또는 그 분획물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀전, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 멸균 주사용액, 좌제 및 경피 투여용 제제, 훈연훈증기에 훈연하는 훈제로 제형화하여 사용될 수 있다. 추출물을 포함하는 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 필요에 따라 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 제형화한다.

본 발명의 소태나무 추출물 또는 그 분획물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 경구 투여용 고상 제제로 제형화될 수 있다. 경구 투여를 위한 고상 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되는데, 이러한 고상 제제는 상기 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 칼슘 카보네이트, 수크로오 스, 또는 락토오스, 젤라틴 등을 혼합하여 제형화된다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다.

또한, 소태나무 추출물 또는 그 분획물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 경구 투여용 액상제제로 제형화될 수 있다.

경구 투여를 위한 액상 제제는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 이러한 액상 제제에는 통상적으로 사용되는 불활성 희석제 (예를 들면 정제수, 에탄올, 리퀴드 파라핀) 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.

또한, 본 발명의 소태나무 추출물 또는 그 분획물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 비경구 투여를 위한 제제로 제형화될 수도 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 멸균된 수용액으로는 한스 용액 (Hank's solution), 링거 용액 (Ringer's solution) 또는 물리적으로 완충된 염수와 같은 적절한 완충 용액을 이용할 수 있으며, 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 이용될 수 있다.

필요에 따라 방부제, 안정화제, 습윤제 또는 유화제, 삼투압 조절을 위한 염 및/또는 완충제를 이용할 수도 있다. 한편, 좌제의 경우에는 이의 통상적인 기제인 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지,라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.

본 발명의 소태나무 추출물 또는 그 분획물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 아토피 피부염의 병변에 직접 적용하기 위하여 통상적인 경피 투여용 제제로 제형화될 수도 있다. 그러한 제제로는 이에 제한되는 것은 아니지만, 연고제, 겔제, 크림제, 리니멘트제, 로션제 등이 포함된다.

본 발명의 경피 투여용 제제의 한 태양은 연고제로 이 제제는 연고기제, 화피 추출물, 기타 첨가물 등을 적절히 배합 처리함으로써 제조할 수 있다. 연고기제는 예를 들면, 고급지방산 또는 그 에스테르류 (예, 아디프산, 미리스트산, 팔미트산, 스테아르산, 올레산, 아디프산에스테르, 미리스트산에스테르,팔미트산에스테르, 세바스산디메틸, 라우르산헥실, 이소옥탄산세틸), 납류 (예, 경랍, 밀랍, 셀레신), 계면활성제 (예, 폴리옥시에틸렌알킬에테르인산에스테르), 고급알코올 (예, 세탄올, 스테아릴알코올, 세토스테아릴알코올), 실리콘유 (예, 디메틸폴리실록산, 메틸페닐폴리실록산, 글리콜메틸폴리실록산, 실리콘글리콜폴리머), 탄화수소류 (예, 친수와세린, 백색와세린, 정제라놀린, 유동파라핀), 물, 보습제 (예, 글리세린, 프로필렌글리콜,부틸렌글리콜, 소르비톨), 감염방지제 등에서 적절히 선택하여 사용할 수 있다.

다른 태양은 겔제로 이 제제는 겔 기제, 화피 추출물, 기타 첨가물을 적절히 배합 처리함으로써 제조할 수 있다. 겔 기제는 예를 들면, 저급알코올 (예, 에탄올, 이소프로필알코올), 물, 겔화제 (예, 카르복시비닐중합체, 히드록시에틸셀룰로스, 에틸셀룰로스, 카르복시메틸셀롤로스, 알긴산프로필렌글리콜에스테르), 중화제(예, 트리에탄올아민, 디이소프로판올아민, 수산화나트륨), 계면활성제 (예, 세 스퀴올레산소르비탄, 트리올레산소르비탄, 모노올레산소르비탄, 모노스테아르산소르비탄, 모노라우르산소르비탄, 모노스테아르산폴리에틸렌글리콜, 폴리옥시에틸렌노닐페닐에테르, 폴리옥시에틸렌라우릴에테르), 감염방지제 등을 들 수 있으며, 이들 중에서 적절히 선택할 수 있다.

또 다른 태양은 크림제로, 이 제제는 크림기제, 화피 추출물, 기타 첨가물을 적절히 배합 처리함으로써 제조할 수 있다. 크림기제는 예를 들면, 고급지방산에스테르류 (예, 미리스트산에스테르, 팔미트산에스테르, 세바스산디에틸, 라우르산헥실, 이소옥탄산세틸), 저급알코올 (예, 에탄올, 이소프로판올), 탄수화물(예, 유동파라핀, 스쿠알란), 다가알코올 (예, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜), 고급알코올 (예, 2-헥실데칸올, 세탄올, 2-옥틸도데칸올), 유화제 (예, 폴리옥시에틸렌알킬에테르류, 지방산에스테르류, 폴리에틸렌글리콜지방산에스테르), 방부제 (예, 파라옥시벤조산에스테르), 감염방지제 등을 들 수 있고, 이들 중에서 적절히 선택할 수 있다.

본 발명에 따른 소태나무 추출물 또는 그 분획물을 유효성분으로 포함하는 조성물의 적합한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 제형 형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나, 본 발명의 추출물은 1일 0.01 내지 2000mg/kg으로, 바람직하게는 0.1 내지 1000mg/kg으로 투여할 수 있다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다.

본 발명의 제 3태양에 의한 화장료 조성물은 제 1태양에 의한 소태나무 추출 물 또는 소태나무 추출물의 분획물을 유효성분으로 포함하는데, 보다 상세하게는 소태나무 추출물 또는 소태나무 추출물의 분획물을 유효성분으로 하고 통상적인 화장품 제조용 기제물질과 혼합하여 제조한다.

상기 소태나무 추출물은 화장료 조성물의 전체 중량 중 0.0001~80중량% 포함되는 것이 바람직하다. 상기 함량이 0.0001중량% 미만일 경우에는 실질적인 아토피 또는 알러지성 피부질환의 개선 효과를 기대하기 어렵다는 문제가 있기 때문이다.

상기 소태나무 추출물의 헥산 분획물, 에틸아세테이트 분획물, 부탄올 분획물은 화장료 조성물로 사용할 수 있는데, 이들 분획물은 전체 중량 중 0.0001중량%~80중량% 포함되는 것이 바람직하다. 상기 함량이 0.0001중량% 미만일 경우에는 실질적인 아토피 개선 효과를 기대하기 어렵다는 문제가 있고, 80중량%를 초과하는 경우에는 피부에 자극을 일으킬 수 있다는 문제가 있기 때문이다.

본 발명의 화장료 조성물은 아토피 피부염 또는 알러지성 피부질환으로 인한 증상의 억제 및 완화 효과를 효과적으로 유지하는 범위 내에서 상기 소태나무 추출물 및 소태나무 추출물의 분획물과 금은화, 지골피, 청미래덩굴, 백선피, 황금, 토복령, 황백, 해동피, 오미자, 지유, 형개, 고삼, 삼백초, 도인, 포공영, 의의인, 박하, 한련초, 자초, 황련, 쌍백피, 우방자, 행인, 백지, 맥문동, 당귀, 천궁, 옥죽과 같은 다른 약재들을 첨가할 수 있으며, 본 발명의 목적에 적합하게 사용될 수 있는 것들을 포함할 수 있다. 상기 약재들을 혼합한 복합조성물 중 소태나무 추출물은 전체 중량에 대하여 0.001~99 중량%일 수 있다.

본 발명의 제 3태양의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효성분으로서 상 기 소태나무 추출물 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 사용 되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예를 들면, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제 및 담체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제 3태양의 아토피 피부염의 예방 및 치료 효과를 갖는 화장료 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없고, 용액, 유화물, 점성형 혼합물 등의 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어 유액, 크림, 화장수, 비누, 팩, 파운데이션, 로션, 미용액, 모발화장료 등을 들 수 있다.

본 발명의 제 3태양의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는, 담체 성분으로서 동물 섬유, 식물 섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라가칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제 3태양의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제 3태양의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는, 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소르 비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제 3태양의 제형이 현탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡시화이소스테아릴알코올, 폴리옥시에틸렌소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라가칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제 3태양의 제형이 계면활성제 함유 클렌징인 경우에는, 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성유 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제 4태양의 기능성 식품은, 상기 소태나무 추출물 및 그 분획물에 기호성 식품 성분을 첨가하여 통상적으로 알려진 방법에 의하여 제조할 수 있고, 일반적인 제형으로 제형화 될 수 있으며, 제형에 따라 당업자가 적절하게 선택하여 배합할 수 있다.

본 발명에 의한 소태나무 추출물 및 그 분획물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 예방 및 치료를 위한 기능성 식품에 상기 소태나무 및 그 분획물은 전체 중량 중 0.0001~70중량%, 바람직하게는 0.001~50중량% 포함될 수 있다.

소태나무 추출물은 IgE 및 IgG1, IgG2a, IgG2b, IgM의 혈청 내 수치를 억제하고, IgA의 혈청 내 수치를 증가시키며, IFN-γ의 증가, IL-1α, IL-4, IL-9 및 IL-13의 혈청 내 수치를 낮추고, 조직 내에서의 염증세포의 침윤과 비만세포의 탈과립화를 억제함으로써 아토피 피부염 및 알러지성 소양증의 치료에 활성이 있으면서도, 간세포에 어떤 독성도 유발하지 않는바, 본 발명에 의한 소태나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 아토피 피부염 또는 알러지성 피부질환의 예방 및 치료에 매우 효과적이다.

이하, 본 발명의 바람직한 실시예 및 비교예를 기재한다. 하기 실시예는 본 발명을 보다 명확하게 표현하기 위한 목적으로 기재되는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니며, 당업자는 하기의 특허청구범위에 기재된 본 발명의 목적 및 범위로부터 벗어나지 않는 범위 내에서 본 발명을 다양하게 수정 및 변형시킬 수 있음을 이해할 수 있을 것이다.

실험준비

1. 실험동물 및 시료의 준비

6주령의 NC/Nga 마우스를 1주일간 실험실 환경에 적응시킨 후 사용하였다.

본 실험에 사용한 소태나무는 건재상에서 건조된 것을 구입하여 사용하였다.

2. 아토피성 피부염의 유도

NC/Nga 마우스의 등 부위에 제모크림을 0.5g 도포하고 5분 후 상처가 나지 않도록 부드러운 티슈로 털을 제거하였다. 미세상처가 아물도록 24시간 방치한 후 1일 1회 2일간 1% DNCB 150㎕(아세톤:올리브유=3:1)를 처리하고, 2일 후 0.4% DNCB 150㎕를 주 2~3회씩 4주간 처리하여 아토피성 피부염을 유도하였다. 평가지표인 홍반, 가려움과 건조피부, 삼출 또는 진무름, 표피박리 및 태선화 정도에 따라 피부상태를 4단계(0=absence, 1=mild, 2=moderate, 3=severe)로 평가하여 10점 이상인 마우스를 실험에 사용하였다.

3. 소태나무 물 추출물 및 분획물의 제조

건조한 소태나무 200g에 2L의 증류수를 첨가하고 환류 추출기를 이용하여 100℃에서 3시간 가열하여 추출한 다음, 여기에 다시 1L의 물을 넣고 2시간 재탕한 추출액을 합하여 200㎖가 될 때까지 감압 농축한 후, -70℃에서 동결 건조하여 8.7g의 소태나무 물 추출물을 수득하였다.

상기 수득된 소태나무 물 추출물을 시료로 사용하여 분획물을 제조하였다. 시료 8.7g을 800㎖의 증류수에 녹인 후 분획여두에 넣고 비극성 용매에서 극성용매 순으로 순차 추출하여 가용성 분획을 제조하였다. 각 분획한 층들을 진공회전 농축기에서 농축하고 동결건조하여 헥산 분획 1.7g(0.69%), 부탄올 분획 0.6g(0.27%), 에틸아세테이트 분획 0.08g(0.028%)을 수득하고, 이를 실험에 사용하였다.

4. 실험군

NC/Nga 마우스 6마리를 1군으로 하여 보통의 환경에서 사육한 정상군(Con), DNCB로 아토피성 피부염이 유도된 대조군(DNCB) 및 소태나무 물 추출물 또는 각 분획물로 처리한 실험군으로 나누었다. 실험군은 소태나무의 헥산 분획 도포군(Fr1), 디클로로메탄 분획 도포군(Fr2), 부탄올 분획 도포군(Fr3), 물 추출물 도포군(PQ)과 물 추출물의 경구투여군(OPQ) 및 스테로이드 제품과의 효능 비교를 위하여 덱사메타손을 도포한 양성대조군(Dex)으로 구분하였다.

5. 약물처리

아토피성 피부염이 유도된 이후 12주령부터 16주령까지 1일 3회, 1주 5일, 4주간 소태나무의 물 추출물과 각 분획물을 1% 농도의 수용액(H₂O:EtOH:Glycerol=10:5:1)으로 만들어 1회 200~300㎕씩 스프레이 분무방식으로 도포하였다. 정상군(Nor)과 대조군(DNCB)에는 동량의 수용액(H₂O:EtOH:Glycerol=10:5:1)을 분무하였다. 양성대조군(Dex)에 대하여는 1일 1회 덱사메타손을 4~5mg/mouse 도포하였고, 경구투여군(OPQ)에 대하여는 1일 1회 소태나무 물 추출물을 7.5mg/kg 투여하였다.

실험방법

1. 관능평가( skin severity score )

소태나무 물 추출물 및 분획물들의 치료 효과를 평가하기 위하여 관능평가를 실시하였다. 관능평가는 평가지표인 홍반, 가려움과 건조피부, 삼출 또는 짓무름, 표피박리 및 태선화 정도에 따라 피부상태를 4단계(0=absence, 1=mild, 2=moderate, 3=severe)로 평가하여 약 12~13점이면 피부염이 최고조에 달하는 것으로 판단하였다.

2. 긁는 횟수 측정

아토피 피부염의 주요 증상인 소양증에 대한 효능을 측정하기 위하여 소태나무 추출물을 도포한 1,2,3,4주째의 마우스가 앞발로 코, 귀 및 등 부위를 긁는 횟수를 10분간 측정하였다.

3. 사이토카인 측정

1) NC/Nga에서의 사이토카인 분비에 미치는 영향

DNCB로 아토피 피부염이 유도된 대조군 마우스와 소태나무 추출물을 처치한 마우스를 희생시키고 심장에서 채취한 혈액의 혈청을 분리하여 IFN-γ, TNFα, IL-2, IL-12 변화와 IL-1, IL-4, IL-5, IL-6, IL-9, IL-10, IL-13 변화를 측정하였다. 사이토카인의 측정을 위해 assay buffer와 1:1 비율로 희석하여 IFN-γ, IL-1α, IL-1β, IL-4, IL-5, IL-6, IL-9, IL-10, IL-12(p40), IL-12(p70), IL-13, TNFα 항체를 코팅한 후, ELISA reader를 이용하여 450nm에서의 흡광도를 관찰함으로써 혈청에 존재하는 단백질량을 측정하였다.

2) HaCaT 각질세포에서의 사이토카인 분비에 미치는 영향

인간 케라티노사이트(keratinocyte) 세포주인 HaCaT 세포를 사용하여 1% 스톡(stock) 용액의 SDS(sodium dodecyl sulfate, FW 288, Biosyn, Inc., 2.5×10^-4%)의 처리에 의한 소태나무 추출물의 사이토카인 분비에 미치는 영향을 확인하였다. HaCaT 세포를 1% 페니실린-스트렙토마이신 용액(Gibco BRL, Eggenstein, Germany)과 10% FBS(PAA)를 첨가한 DMEM(Dulbecco's modified Eagle's medium)배지를 이용하여 37℃, 5% CO₂의 환경에서 배양하였다. 수집한 세포를 96-웰 플레이트에서 24시간 배양한 후 소태나무 물 추출물을 100㎍/㎖ 농도로 도포하고 대조군에는 SDS를 도포하였다. 다시 24시간 배양 후 사이토카인의 농도를 ELISA 방법으로 측정하였다.

4. 면역글로블린 측정

ELISA kit를 사용하여 분리한 혈청으로부터 IgE, IgA 및 IgG 아이소타입의 단백질량을 측정하였다. 구체적으로 항체를 코팅 완충용액에 희석하여 마이크로웰 코팅한 후 4℃에서 밤샘 정치하고, 각 웰을 3회 세척 완충용액으로 세척한 후 IgE 측정을 위하여 0.1~0.01배 희석된 혈청을 100㎕씩 분주하였다. 이를 1시간 동안 실온에서 방치한 후 세척 완충용액으로 다시 2회 세척한 다음, 항체 avidin-HRP conjugated 100㎕를 처리하고 1시간 실온에서 방치하고 다시 세척하였다. 여기에 TMB 기질을 100㎕씩 분주하고 암상태에서 30분간 방치한 후, 50㎕의 종결 용액(1N HCl)을 처리하고 ELISA reader(450nm)에서 흡광도를 측정하였다. 또한 IgA 및IgG 아이소타입(IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG3, IgA, IgM) 정량을 위해서 1:25,000 희석된 혈청을 사용하였다.

5. 히스타민 농도 측정

혈청 중 히스타민의 농도 측정은 히스타민 정량 kit (Oxford Biomedical Research)를 이용하였다. 측정을 위해 standard 및 sample을 microplate에 50㎕씩 넣고 HRP가 접합(conjugation)된 히스타민을 같은 웰에 동일한 양으로 넣고 45분간 상온에서 배양한 후 washing buffer로 각 웰을 씻어준다. 150㎕의 TMB 기질을 각 웰에 넣은 후 상온에서 30분간 배양한 뒤 650nm에서 흡광도를 측정하였다.

6. 조직병리검사

등쪽 피부조직(1.5×1.5cm)을 떼어내어 10% 파라포름알데히드에서 24시간 고정하였다. 상기 조직을 파라핀에 충분히 굳힌 후 5㎛로 절편하여 슬라이드 글라스를 제작하였다. H&E(haematoxylin-eosin) 및 톨루이딘 블루로 염색을 실시하고, 광학현미경(100×)을 이용하여 표피와 진피의 두께, 비만세포의 침윤 및 탈과립화, 염증세포의 침윤정도를 관찰하였다. 각 슬라이드는 무작위로 선정된 4개 부위를 평가하였다.

7. 임상시험

소태나무 추출물의 아토피 피부염 치료효과 및 안전성에 미치는 임상적 평가를 위하여 임상연구를 시행하였다. 아토피 피부염을 가진 환자를 대상으로 소태나무 물 추출물을 도포하고, 아토피 피부염 증상의 개선 및 치유 여부를 관찰하였다. 임상시험 중 국소 혹은 전신 스테로이드 제제의 도포나 복용은 금하였다.

실험결과

1. 관능평가 결과

아토피성 피부염 유도후 12주령부터 16주령까지 소태나무 물 추출물을 1일 3회씩 4주간 주 5일 도포 또는 1일 1회 7.5mg/kg을 경구투여하면서 관능평가 지표를 이용하여 피부손상상태를 관찰하였다(도 1참조).

피부건조로 인한 인설(각질)의 지속적 발생, 전반적 홍반, 삼출성 가피의 형성과 탈락, 출혈, 부종 등의 증상이 초기 2주동안의 치료에서는 덱사메타손의 효능이 우수하게 관찰되었으나, 덱사메타손 도포 2주 이후에는 전반적 피부의 홍반, 지속적 삼출성 가피의 형성 및 탈락의 반복 현상을 보였고, 피부가 얇아지고 털의 자람이 억제되는 현상을 보였다(도 1d참조).

반면, 소태나무 물 추출물 및 그 분획물의 처리 2주 이후부터는 덱사메타손 보다 우세한 염증과 소양증의 완화 효능을 나타내고, 전신의 홍반이 현저히 억제되었으며, 정상군과 유사하게 피부가 윤택해졌고 털이 자라는 현상이 관찰되었다(도 1b~c, 1e~g 참조). 이러한 소태나무의 아토피 피부염 증상의 치료효과는 특히 소태나무의 부탄올 가용성 분획물 도포군에서 가장 좋았다(도 1g).

또한, 소태나무 물 추출물은 금은화, 지골피, 청미래덩굴, 백선피, 황금, 토복령과의 복합 조성물에 의하여도 임상적 아토피 피부염 개선효과를 나타내었다. 이들 복합조성물을 처리한 경우 DNCB에 의한 NC/Nga 마우스의 아토피성 피부손상을 유의하게 억제하거나 치유효능을 나타내었다(도 1h~n참조).

2. 긁는 횟수 측정결과

실험일로부터 1주~4주가 경과된 마우스의 긁는 횟수를 10분간 측정하여 비교 관찰하였다. 전체적으로 DNCB군 긁는 횟수와 비교하여 긁는 횟수가 감소함을 확인하였다(도 2참조).

소태나무 물 추출물의 도포군과 경구투여군은 스테로이드성 소염제인 덱사메타손 도포군과 동등한 소양증의 억제효과를 보였다. 특히 분획물에 있어서 부탄올 가용성 분획물 도포군(Fr3)은 소양증 억제 효능이 가장 우수하여 덱사메타손 보다 억제력이 높았다.

3. 사이토카인 측정결과

1) NC/Nga의 혈중 사이토카인 분비에 미치는 영향

소태나무 물 추출물 및 그 분획물의 도포는 염증, 면역 및 세포분화 등의 다양한 세포기능에 관여하는 혈중 IL-1α, IL-9 및 IL-13의 생성을 억제하였다(도 3a~c참조).

2) HaCaT 각질세포에서의 사이토카인 분비에 미치는 영향

표 1에서 보는 바와 같이 소태나무 물 추출물을 도포한 경우, SDS에 의해 증가된 IL-1α와 IL-4이 억제된 반면, IFN-γ는 현저하게 증가되었다.

표 1 소태나무 물 추출물 도포시의 사이토카인 변화

Group	Con(pg/ml)	SDS(pg/ml)	PQ(pg/ml)
IL-1α	59.4±11.8	81.45±10.11	60.87±6.4
IL-4	1.78±0.51	4.61±1.11	1.78±0.29
IFN-γ	4.12±1.83	1.41±0.91	9.83±2.93

4. 면역글로블린 측정결과

심장에서 채취한 혈액의 혈청을 분리하여 알러지성 질환을 매개하는 IgE, 정상적 면역반응에 중요한 IgA, IgG(IgG1, IgG2a, IgG2b 및 IgG3a) 및 IgM의 양을 측정(ELISA method)하였다.

아토피성 피부염이나 알러지성 질환을 매개하는 IgE는 Th2세포가 분비하는 IL-4, IL-5 및 IL-13 같은 사이토카인에 의해 활성화되는 체액성면역이 우세한 면역학적 조건에서 생성되기 쉽다. 아토피 피부염 환자의 대다수가 높은 IgE 혈증을 동반하는데, 소태나무 물 추출물 및 그 분획물을 도포한 NC/Nga 마우스는 IgE의 혈중농도가 저하되었다. 또한 정상적 면역반응에 중요한 IgA의 증가와 IgG 아이소타입(IgG1, IgG2a, IgG2b) 및 IgM의 유의미한 감소를 확인할 수 있었다(도 4a~g참고).

5. 조직 병리검사결과

DNCB의 처리로 아토피성 피부염이 유도된 마우스의 표피에서 각질의 탈락, 표피 비후, 각막비후증 및 비만세포의 증가나 탈 과립화와 더불어 염증세포의 침윤이 관찰되었다. 그러나 소태나무 물 추출물 및 분획물을 처리한 결과, 표피의 비후, 염증성 세포의 침윤 및 비만세포의 증가와 탈 과립화가 현저히 감소하였다(도 5a1~a3, b1~b3 참조).

NC/Nga 마우스 등 부위의 침윤 비만세포의 수는 이하의 표 2와 같다.

표 2 NC/Nga 마우스 등 부위의 침윤 비만세포의 수

Group	비만세포수
Nor	48.25±1.11
DNCB	181.08±3.39
PQ	117.5±2.27

6. NC / Nga 의 혈중 히스타민 분비에 미치는 영향

소태나무 물 추출물 및 그 분획물을 도포한 결과, 알러지 반응의 중요한 원인인 혈중 히스타민의 생성이 억제되었음을 확인할 수 있었다(도 6참조).

7. 임상시험결과

소태나무 물 추출물 도포 후 아토피 피부염의 증상 개선효과를 6개의 임상평가 항목, 즉 홍반, 소양증, 발진, 진무름, 표피박리, 태선화 및 건조 정도를 사용 전과 비교하였다. 모든 환자에서 추출물의 사용에 의한 이상반응은 없었으며, 가려 움증과 홍반의 감소, 진무름 감소, 태선화의 완화 및 각질층의 진정 등 증상의 개선과 치유를 관찰할 수 있었다(도 7a~f).

도 1은 NC/Nga 마우스의 피부손상 상태의 저해를 직접 촬영한 것이다.

도 2는 NC/Nga 마우스가 긁는 횟수를 10분간 측정하고 그 값을 나타내어 비교한 그래프이다.

도 3a~c는 정상군, DNCB군, 분획물군 (Fr1, Fr2, Fr3), PQ군, DEX군의 혈중 사이토카인 농도변화를 나타낸 그래프이다.

도 4a~f는 정상군, DNCB군, 분획물군 (Fr1, Fr2, Fr3), PQ군, DEX군의 혈중 면역글로블린 농도변화를 나타낸 그래프이다.

도 5는 정상군, DNCB군, PQ군별로 NC/Nga 마우스의 표피를 H&E(a1~a6) 및 톨루이딘 블루(b1~b6)로 염색하여 광학현미경으로 관찰한 모습을 나타낸 것이다.

도 6은 정상군, DNCB군, 분획물군 (Fr1, Fr2, Fr3), PQ군, DEX군의 혈중 히스타민 농도변화를 나타낸 그래프이다.

도 7a~f는 본 발명의 아토피 피부염 환자에 대한 임상시험 결과를 나타낸 사진이다.

Claims (4)

1. 삭제
2. 소태나무 부탄올 분획물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 또는 알러지성 피부질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
3. 삭제
4. 소태나무 부탄올 분획물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 또는 알러지성 피부질환의 예방 또는 개선용 기능성 식품.

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