KR101257993B1

KR101257993B1 - 효소를 이용한 흰목이버섯 추출물의 제조방법 및 이를 포함하는 기억증진용 조성물.

Info

Publication number: KR101257993B1
Application number: KR1020100089637A
Authority: KR
Inventors: 박금주; 최웅기; 강정일; 김태석; 여익현; 남승우
Original assignee: 풀무원건강생활 주식회사; (주)풀무원홀딩스
Priority date: 2010-09-13
Filing date: 2010-09-13
Publication date: 2013-04-24
Also published as: KR20120027835A; CN102397301B; CN102397301A

Abstract

본 발명은 효소를 이용한 흰목이버섯 추출물의 제조 방법 및 이를 포함하는 기억 증진용 조성물에 관한 것으로 보다 상세하게는 효소 처리를 통하여 제조 수율을 향상시킨 흰목이버섯 추출물의 제조 방법 및 이를 포함하는 신경세포 회복, 신경세포 손상 억제 및 기억 증진용 식품 조성물 및 약학적 조성물에 관한 것이다.

Description

효소를 이용한 흰목이버섯 추출물의 제조방법 및 이를 포함하는 기억증진용 조성물. {Producing Method of extract of Tremella fuciformis using enzymes and the composition for improving memory strength comprising the extract.}

본 발명은 효소를 이용한 흰목이버섯 추출물의 제조 방법 및 이를 포함하는 기억 증진용 조성물에 관한 것으로 보다 상세하게는 효소처리를 통하여 수율을 향상시킨 흰목이버섯 추출물의 제조 방법 및 이를 포함하는 기억 증진용 식품 조성물 및 약학적 조성물에 관한 발명이다.

신경성장인자(Nerve growth factor, NGF)는 중추신경계에서 신경세포의 손상을 보호하는 작용을 하고(J. Neurosci. Aug; 6(8); 2155-62; 1986) 성숙한 신경원 유지에 중요한 역할을 한다(Proc. Natl. Acad. Sci. USA vol. 46; 384-391; 1960). 따라서 신경세포가 정상상태에서 생존, 성장, 분화하기 위해서는 신경성장인자와 같은 성장인자들이 필수적으로 요구된다고 할 수 있으며 이러한 신경성장인자는 치매의 예방과 치료에 있어 기존의 치료제들이 가지는 부작용 없이 효과적으로 작용할 것으로 기대된다. 그러나 이러한 신경성장인자는 분자량이 크기 때문에 뇌에서의 뇌-혈관 장벽(Blood brain barrier, BBB)을 통과하지 못하여 실제 임상에서의 치료효과를 기대하기 어렵다. 따라서 내생하는 신경성장인자의 합성을 유도하거나, 혹은 신경성장인자와 유사한 역할을 하는 물질의 개발이 요구되는 실정이다. 실제로 많은 천연물로부터 이러한 물질을 탐색하고자 하는 연구가 진행되고 있으며 이와 같은 맥락으로 본 발명자들도 흰목이버섯 추출물에서 신경성장활성을 보고한 바 있다(kim et al.; Biol Pharm Bull.; 30(4); 708-714; 2007).

흰목이버섯(Tremella fuciformis)은 소위 젤리버섯(jelly mushroom)에 속하며, 젤 형태의 자실체(fruit body)를 형성한다. 흰목이(Tremellales) 목(order) 및 흰목이(Tremellaceae) 과(family)에 속하는 흰목이 버섯(Tremella fuciformis)은 식용버섯으로 유용하다. 주로 여름에 활엽수의 썩은 나무에서 자생한다. 한국, 일본 등을 포함한 전세계에 넓은 분포를 가진다. 또한 흰목이 버섯의 자실체는 흔한 음식이며, 중국에서 강장제로 임상적으로 사용되는 전통적인 약물이다(Li, S. S. Chinese medicinal herbs; Georgetown Press: San Francisc)자실체는 주머니 모양으로 생겨서 확대되고 서로 융합되어서 물결모양의 주름이 잡힌 덩어리로 된다. 황백색 또는 황색, 때로는 등황색이고 표면은 구불구불한 물결모양이지만 평활하고 그 표면 전체에 자실층을 만든다. 크기는 보통 지름 6㎝, 높이 3-4㎜이지만 습기가 많을 때는 그 이상 크게 자라기도 한다.

이전 보고에서 본 발명자들은 흰목이버섯 추출물에 신경세포의 회복 및 손상억제 효능이 있음을 발견하여 흰목이버섯 추출물이 함유된 기억증진용 조성물에 관한 발명을 완성한 바 있다. 그러나 기존에 보고된 흰목이버섯 추출물의 제조 방법에 의할 경우 생산 수율이 높지 않아 제품에 적용하는데 어려움이 존재하였다. 따라서 기존의 추출물과 비교하여 동일 또는 향상된 기억 증진 효과를 가지는 동시에 수율이 현저히 향상된 흰목이버섯 추출물의 제조 방법의 연구가 요구되는 실정이다.

이에 본 발명자들은 흰목이버섯 추출물의 제조 수율을 높일 수 있는 방법을 연구하던 중, 산성 조건에서 가압 열수 추출한 후, 효소를 처리하였을 때, 흰목이버섯 추출물의 수율이 현저히 증가하는 것을 발견하였다. 따라서 본 발명에서는 산성 조건에서 가압 열수 추출한 후, 효소를 처리하는 공정을 추가하여 수율이 향상된 흰목이버섯 추출물의 제조 방법에 관한 본 발명을 완성하였다.

따라서 본 발명의 목적은 (a) 흰목이버섯을 산성 조건에서 가압 열수 추출하는 단계; 및 (b) 상기 열수 추출물을 효소 처리하는 단계로 이루어진 흰목이버섯 추출물의 제조 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 상기 제조 방법에 따라 제조된 흰목이버섯 추출물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 흰목이버섯 추출물을 포함하는 기억 증진용 식품 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 흰목이버섯 추출물을 포함하는 기억력 장애 질환 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.

상기와 같은 본 발명의 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 (a) 흰목이버섯을 산성 조건에서 가압 열수 추출하는 단계; 및 (b) 상기 열수 추출물을 효소 처리하는 단계로 이루어진 흰목이버섯 추출물의 제조 방법을 제공한다.

본 발명의 다른 목적은 상기 제조 방법에 따라 제조된 흰목이버섯 추출물을 제공한다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 흰목이버섯 추출물을 포함하는 기억 증진용 식품 조성물을 제공한다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 흰목이버섯 추출물을 포함하는 기억력 장애 질환 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.

본 발명은 (a) 흰목이버섯을 산성 조건에서 가압 열수 추출하는 단계; 및 (b) 상기 열수 추출물을 효소 처리하는 단계로 이루어진 종래의 추출 방법에 비해 수율이 현저히 향상된 흰목이버섯 추출물의 제조 방법에 관한 것이다. 상기 각 단계를 구체적으로 살펴보면 다음과 같다.

(a) 단계는 흰목이버섯을 산성 조건에서 가압 열수 추출하는 단계이다.

흰목이버섯(Tremella fuciformis)은 흰목이과에 속하며, 여름과 가을에 죽은 활엽수에서 많이 발생한다. 백색, 젤라틴처럼 반투명한 모양으로 형성하며, 단백질, 지방, 탄수화물, 조섬유, 무기염류 등이 함유되어 있고, 피로 회복, 면역 증진, 변비, 설사, 위염, 혈당 강하 및 항 종양 효과가 있고, 산후 조리에도 효과적인 것으로 알려져 있다. 본 발명에서 흰목이버섯은 기억 증진 및 신경 세포 회복 효과를 가진다.

본 발명의 흰목이버섯 추출물은 열수 추출 시, 산성 조건에서 추출하는 것을 특징으로 한다. 본 단계에서 흰목이버섯은 추출을 용이하게 하기 위하여 미분쇄한 것을 사용한다. 본 발명에서 흰목이버섯은 건조 또는 생버섯 그대로를 사용할 수 있다. 상기 버섯은 추출을 용이하게 하기 위하여 분말 또는 분쇄하여 사용할 수 있고, 바람직하게는 미분쇄된 흰목이버섯을 사용한다. 분쇄 시, 이에 제한되지는 않으나 해머밀(Hammer mill)을 사용하는 것이 바람직하며, 입도 크기에 제한은 없으나, 75 내지 85 메쉬(mesh)가 바람직하다. 본 발명의 실시예에서 미분쇄한 흰목이버섯에 추출 용매로서 상기 흰목이버섯 질량의 40 내지 60배의 물을 가하고, 용매의 pH가 산성이 되도록 조절한다. 이는 흰목이버섯 추출물 제조 시, 흰목이버섯으로부터 용출되는 젤 성분에 의한 점성을 낮추기 위함이다. 점성이 낮은 추출물은 점성이 높은 추출물에 비하여 용해성 및 제품 적용성이 향상되어 가공이 용이한 장점을 가진다.

상기 산성 조건은 이에 제한되지는 않으나 pH 2.5 내지 pH 3.5이며, 보다 바람직하게는 pH 2.7 내지 pH 3.2이다. pH 조절을 위하여 상기 용매에 첨가할 수 있는 산으로서, 이에 제한되지는 않으나, 구연산, 빙초산, 사과산, 젖산, 주석산, 호박산 및 푸마르산 등이 있다.

상기 열수 추출에서 추출 온도는 이에 제한되지는 않으나, 110℃ 내지 130℃가 적당하며, 보다 바람직하게는 120℃ 내지 125℃이다. 또한, 추출 시간은 15 내지 25분, 보다 바람직하게는 18 내지 22분 동안 추출한다.

(b) 단계는 상기 열수 추출물을 효소 처리하는 단계이다.

본 발명은 흰목이버섯의 열수 추출물을 효소로 처리하여 추출물의 수율을 향상시키는 것에 특징이 있다. 효소 처리시, 흰목이버섯 자실체를 이루는 다당체에 효소가 작용하여 이들간의 결합을 끊어줌으로써 흰목이버섯 추출물 제조 시 발생하는 특유의 점성을 낮추어 이후 제조공정에서 발생할 수 있는 손실을 줄이고, 결과적으로는 생산 수율을 높이는 효과를 가져오게 된다.

본 발명에서 사용될 수 있는 효소는 이에 제한되지는 않으나 셀룰라아제(cellulase), 펙티나아제(pectinase), 리그니아제(ligniase), 글루카나아제(glucanase) 및 헤미셀룰라아제(hemicellulase)이고 바람직하게는 셀룰라아제를 사용할 수 있다. 셀룰라아제는 곰팡이, 박테리아 및 원생동물에 의해 주로 생성되는 효소이며, 셀룰로오스를 분해시키는 역할을 한다. 본 발명에서 셀룰라아제는 흰목이버섯 자실체를 이루는 다당체간의 결합을 끊어주어 추출물의 점성을 낮춤으로써 생산 수율을 높이는 효과를 가져온다.

본 단계에서 상기 효소 처리는 효소의 최적 활성 조건에서 처리하는 것이 바람직하다. 효소의 최적 활성조건이란, 효소의 작용에 있어 활성이 최대로 나타나는 조건으로, 온도, pH 및 압력 등의 환경을 말한다. 본 발명에서는 pH 2.5 내지 pH 6.0 및 40℃ 내지 60℃에서 상기 효소를 처리한다. 또한, 본 발명에서 효소의 최적 활성조건은 특정 범위에 제한되지 않고 처리하는 효소에 따라 그 효소의 최적 조건을 설정할 수 있다. 즉, 본 발명에서 사용될 수 있는 효소의 최적 활성 조건으로서, 펙티나아제는 pH 2.5 내지 pH 6.0, 45℃ 내지 55℃에서, 리그니아제는 pH 2.5 내지 pH 6.0, 45℃ 내지 55℃에서, 글루카나아제는 pH 4.5 내지 pH 6.0, 50℃ 내지 60℃에서, 헤미셀룰라아제는 pH 4.5 내지 pH 5.0, 50℃ 내지 60℃에서 최적의 활성을 가진다. 특히 본 발명의 일 실시예에서 효소로서 셀룰라아제를 사용하였는 바, 셀룰라아제의 처리 전 pH를 pH 4.5 내지 pH 5.0으로, 온도를 50℃ 내지 60℃로 설정하였다.

상기 pH를 조절하기 위한 물질로서, 이에 제한되지는 않으나 산화마그네슘, 탄산수소나트륨, 탄산마그네슘, 침강 탄산칼슘, 합성 히드로탈사이트, 규산 알루미늄산마그네슘, 메타규산알루미늄산마그네슘, 규산마그네슘, 합성 규산알루미늄, 무수인산수소칼슘, 인산수소칼슘, 건조 수산화알루미늄 겔, 수산화마그네슘, 수산화알루미늄마그네슘, 수산화알루미늄 겔, 수산화알루미늄·탄산수소나트륨 공침 생성물, 수산화알루미늄·탄산마그네슘 혼합물 건조 겔, 수산화알루미늄·탄산마그네슘·탄산칼슘 공침생성물, 갑오징어 뼈, 석결명 및 아미노아세트산 중 하나를 선택하여 사용할 수 있다. 본 발명의 일실시예에서는 pH의 조절을 위하여 탄산수소나트륨을 사용하였다.

본 단계에서 효소 처리는 이에 제한되지는 않으나 10시간 내지 15시간, 보다 바람직하게는 12시간 내지 14시간동안 처리하는 것이 바람직하다.

또한 본 발명은 상기 (b) 단계에서 처리된 효소를 불활성화 시키는 단계를 포함할 수 있다. 본 발명에서 수율 향상을 위한 효소 처리는 상기와 같이 일정 시간동안만 진행하며, 이후에는 효소를 불활성화 시킨다. 이는 효소에 의해 일어날 수 있는 부작용을 제거하기 위한 과정으로, 효소는 열에 의해 변성되어 활성을 잃게 되므로 가열하여 불활성화시키는 것이 바람직하다. 본 발명의 일실시예에서는 셀룰라아제를 실활시키기 위하여 100℃에서 10분간 가열하였다.

본 발명은 상기 흰목이버섯의 추출물 제조 후, 불용성의 흰목이버섯 잔유물을 제거하는 과정을 포함할 수 있다. 흰목이버섯 잔유물 제거 시 응집제를 사용하여 잔유물을 침강시키는 과정을 거치는데, "응집제"란 액체 속에 현탁되어 있는 고체입자가 몇 개씩 모여 약간 큰 덩어리를 만들기 위해 액체에 첨가하는 약품이다. 응집되면 액체 속의 입자는 일반적으로 침강속도가 빨라지므로, 이는 부유물의 침강을 촉진시키는 데 이용된다.

상기 응집제로서 사용될 수 있는 물질은 이에 제한되지는 않으나, 폴리염화알루미늄, 황산알루미늄, 알긴산나트륨, 폴리황산규산알루미늄, 폴리수산화염화규산알루미늄, 황산제2철, 염화제2철(액체), 폴리아민, 폴리수산화염화황산알루미늄, 규조토 또는 제올라이트를 사용할 수 있으며, 바람직하게는 규조토 또는 제올라이트를 사용한다. 본 발명의 일실시예에서는 규조토를 사용하여 흰목이버섯의 잔유물을 침강시켜 여과가 용이하게 하였다. 또한 본 발명은 응집 물질을 첨가하여 흰목이버섯의 잔유물을 침강시킨 후 필터프레스를 이용하여 이를 여과하는 과정을 포함한다.

또한 본 발명은 상기 제조 방법에 의해 제조된 흰목이버섯 추출물의 사용을 용이하게 하기 위하여 이를 농축하는 과정을 포함할 수 있다. 농축 시, 이에 제한되지는 않으나 연속식 농축기를 이용할 수 있다.

아울러 본 발명은 상기 제조 방법에 따라 제조된 흰목이버섯 추출물에 관한 것이다. 본 발명의 흰목이버섯 추출물은 그대로 사용하거나 필요에 따라 건조시켜 사용할 수 있다. 상기 건조 시, 이에 제한되지는 않으나, 동결 건조 또는 열풍 건조 방법을 이용할 수 있으며, 열풍 건조시, 당업계에서 알려진 부형제를 첨가할 수 있다.

또한 본 발명은 상기 흰목이버섯 추출물을 포함하는 기억 증진용 식품 조성물에 관한 것이다.

"기억 증진"이란 노화에 의한 알츠하이머 또는 다른 내인적, 외인적 요인에 의하여 손상된 신경세포의 활성을 촉진하여 기억력을 향상시키는 것을 말한다. 본 발명에서 기억 증진이란, 신경세포의 손상 억제 및 손상된 신경세포의 회복에 의해 이루어질 수 있고, 이는 신경성장인자의 작용에 의한 것이다. 본 발명의 흰목이버섯 추출물은 신경성장인자의 합성을 유도하거나 이와 유사한 작용을 하는, 신경 성장 활성을 가지는 물질로 알려져 있다.

상기 본 발명의 식품 조성물은 기능성 식품(functional food), 영양보조제(nutritional supplement), 건강식품(health food) 및 식품 첨가제(food additives) 등의 모든 형태를 포함한다.

상기 유형의 식품 조성물은 당업계에 공지된 통상적인 방법에 따라 다양한 형태로 제조할 수 있다. 이에 한정되지 않지만 예를 들면, 건강식품으로는 흰목이버섯 추출물을 차, 쥬스 및 드링크의 형태로 제조하여 음용할 수 있도록 액상화, 과립화, 캡슐화 및 분말화하여 섭취할 수 있다. 또한, 흰목이버섯 추출물과 신경세포 회복, 신경세포 손상 억제 및 기억 증진 효과가 있다고 알려진 공지의 활성 성분과 함께 혼합하여 조성물의 형태로 제조할 수 있다. 또한, 기능성 식품으로는 이에 한정되지 않지만 음료(알콜성 음료 포함), 과실 및 그의 가공식품(예: 과일통조림, 병조림, 잼, 마아말레이드 등), 어류, 육류 및 그 가공식품(예: 햄, 소시지 콘비이프 등), 빵류 및 면류(예: 우동, 메밀국수, 라면, 스파게티, 마카로니 등), 과즙, 각종 드링크, 쿠키, 엿, 유제품(예:버터, 치이즈 등), 식용식물유지, 마아가린, 식물성 단백질, 레토르트 식품, 냉동식품, 각종 조미료(예: 된장, 간장, 소스 등) 등에 흰목이버섯 추출물을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한, 흰목이버섯 추출물을 식품 첨가제의 형태로 사용하기 위해서는 분말 또는 농축액 형태로 제조하여 사용할 수 있다.

본 발명의 식품 조성물 중 흰목이버섯 추출물의 바람직한 함유량으로는 이에 한정되지 않지만 일반적으로는 최종적으로 제조된 식품 중 0.1 내지 5 중량%로 첨가될 수 있다. 본 발명의 추출물의 함유량은 건강 및 위행을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 범위 이하일 수 있으며, 유효 성분은 안전성면에서 아무런 문제가 없기 때문에 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있음은 확실하다. 또한, 본 발명의 흰목이버섯 추출물을 유효성분으로 함유하는 식품 조성물은 특히, 신경세포 회복, 신경세포 손상 억제 및 기억 증진에 효과가 있는 것으로 알려진 활성 성분과 함께 혼합하여 건강식품의 형태로 제조될 수 있다.

또한 본 발명은 상기 흰목이버섯 추출물을 포함하는 기억력 장애 질환 예방 및 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.

본 발명에서 기억력 장애 질환은 기억력이 저하되거나 감퇴되는 증상을 나타내는 질환을 말한다. 상기 질환의 예로는 알츠하이머병(Alzheimer's disease), 치매(dementia), 기억상실증(amnesia), 경도인지장애, 헌팅턴병 및 파킨슨병이 포함될 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물은 본 발명의 조성물을 단독으로 함유하거나 또는 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 추가로 함유할 수 있다. 상기에서 '약학적으로 허용되는'이란 생리학적으로 허용되고 인간에게 투여될 때, 통상적으로 알레르기 반응 또는 이와 유사한 반응을 일으키지 않는 조성물을 말한다.

본 발명의 기억 증진용 약학적 조성물은 포유동물에 어떠한 방법으로도 투여할 수 있다. 예를 들면, 경구 또는 비경구적으로 투여할 수 있다. 비경구적인 투여방법으로는 이에 한정되지는 않으나, 경피 투여, 피하 내, 정맥 내, 근육 내 또는 복강 내 투여할 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 상술한 바와 같은 투여 경로에 따라 경구 투여용 또는 비경구 투여용 제제로 제형화 할 수 있다.

경구 투여용 제제의 경우에 본 발명의 조성물은 분말, 과립, 정제, 환제, 당의정제, 캡슐제, 액제, 겔제, 시럽제, 슬러리제, 현탁액 등으로 당업계에 공지된 방법을 이용하여 제형화될 수 있다. 예를 들어, 경구용 제제는 활성성분을 고체 부형제와 배합한 다음 이를 분쇄하고 적합한 보조제를 첨가한 후 과립 혼합물로 가공함으로써 정제 또는 당의정제를 수득할 수 있다. 적합한 부형제의 예로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨 및 말티톨 등을 포함하는 당류와 옥수수 전분, 밀 전분, 쌀 전분 및 감자 전분 등을 포함하는 전분류, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 나트륨 카르복시메틸셀룰로오즈 및 하이드록시프로필메틸-셀룰로즈 등을 포함하는 셀룰로즈류, 젤라틴, 폴리비닐피롤리돈 등과 같은 충전제가 포함될 수 있다. 또한, 경우에 따라 가교결합 폴리비닐피롤리돈, 한천, 알긴산 또는 나트륨 알기네이트 등을 붕해제로 첨가할 수 있다. 나아가, 본 발명의 약학적 조성물은 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제 및 방부제 등을 추가로 포함할 수 있다.

비경구 투여용 제제의 경우에는 주사제, 크림제, 로션제, 외용연고제, 오일제, 보습제, 겔제, 에어로졸 및 비강 흡입제의 형태로 당업계에 공지된 방법으로 제형화할 수 있다. 이들 제형은 모든 제약 화학에 일반적으로 공지된 처방서인 문헌(Remington's Pharmaceutical Science, 15th Edition, 1975. Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvania 18042, Chapter 87: Blaug, Seymour)에 기재되어 있다.

본 발명의 조성물의 총 유효량은 단일 투여량(single dose)으로 환자에게 투여될 수 있으며, 다중 투여량(multiple dose)으로 장기간 투여되는 분할 치료 방법(fractionated treatment protocol)에 의해 투여될 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 기억 증진 정도의 필요에 따라 유효성분의 함량을 달리할 수 있다. 바람직하게 본 발명의 조성물의 바람직한 전체 용량은 1일당 환자 체중 1 ㎏ 당 약 0.01 ㎍ 내지 1,000 mg, 가장 바람직하게는 0.1 ㎍ 내지 100 mg일 수 있다. 그러나 상기 조성물의 농도는 약학적 조성물의 투여 경로 및 치료 횟수뿐만 아니라 환자의 연령, 체중, 건강 상태, 성별, 질환의 중증도, 식이 및 배설율등 다양한 요인들을 고려하여 환자에 대한 유효 투여량이 결정되는 것이므로, 이러한 점을 고려할 때 당 분야의 통상적인 지식을 가진 자라면 상기 조성물의 기억 증진제로서의 특정한 용도에 따른 적절한 유효 투여량을 결정할 수 있을 것이다. 본 발명에 따른 약학적 조성물은 본 발명의 효과를 보이는 한 그 제형, 투여 경로 및 투여 방법에 특별히 제한되지 아니한다.

따라서, 본 발명에 따른 흰목이버섯 추출물은 기억력을 증강시키거나 기억력 장애 질환의 예방 또는 치료에 사용될 수 있다. 즉, 본 발명에 따른 흰목이버섯 추출물을 포함하는 조성물은 정상인의 기억을 증강시키거나 또는 기억력 장애 질환을 예방하는 목적으로 사용되거나 또는 기억력 장애 질환을 가지는 환자를 치료하기 위한 목적으로 사용될 수 있다. 상기 흰목이버섯 추출물은 생체에 독성을 거의 나타내지 않는 매우 안전한 물질이기 때문에 약학적 조성물 또는 식품 조성물 등의 형태로 제조될 수 있다.

이상 살펴본 바와 같이, 본 발명은 효소를 이용한 흰목이버섯 추출물의 제조 방법 및 이를 포함하는 기억 증진용 조성물에 관한 것으로 보다 상세하게는 효소처리를 통하여 수율을 향상시킨 흰목이버섯 추출물의 제조 방법 및 이를 포함하는 신경세포 회복, 신경세포 손상 억제 및 기억 증진용 식품 조성물 및 약학적 조성물에 관한 발명이다.

도 1은 본 발명의 흰목이버섯 추출물의 제조 과정의 일 실시예를 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명의 흰목이버섯 추출물의 신경 성장 활성 효과를 PC12h 세포주의 신경축색돌기의 성장 정도로서 나타낸 것으로, 도 2A는 대조군, 도 2B는 신경 성장인자 처리군, 도 2C는 본 발명의 흰목이버섯 추출물 처리군, 도 2D는 기존방법의 흰목이버섯 추출물 처리군을 나타낸 것이다.

이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다.

단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.

< 실시예 1>

셀룰라아제 효소처리를 통한 흰목이버섯 추출물의 제조

흰목이버섯 40kg을 미분쇄하고 흰목이버섯 질량에 대하여 50배 가수하였다. 여기에 4kg의 구연산을 첨가하여 pH가 3.0이 되도록 한 후, 온도를 높여 121℃에서 20분간 추출을 진행하였다. 여기에 탄산칼륨 2kg를 넣어 pH를 4.5 내지 5.0이 되도록 하였다. 추출액의 온도를 55℃까지 낮추고 셀룰라아제 4kg을 투입하여 효소반응을 12hr 이상 교반하면서 진행하였다. 이 후 효소를 실활시키기 위해 100℃로 10분간 재 가열하였다. 추출물 내 불용성 물질을 제거하기 위하여 규조토를 넣고 필터프레스(한국필터(주))로 여과시킨 후 연속식 농축기(한틀(주))에서 8 브릭스가 되도록 농축하였다. 이를 동결 건조하여 수득된 흰목이버섯 추출물의 함량을 확인하였다. 상기 과정을 도 1에 나타내었다.

한편 상기 추출방법과 수율을 비교하기 위하여 종래의 열수 추출방법을 통하여서도 흰목이버섯 추출물을 생산하여 추출물의 제조 수율을 확인하였다. 40kg의 흰목이 버섯을 미분쇄하고 흰목이버섯 질량에 대하여 50배 가수하고 90 내지 100℃에서 열수추출을 진행하였다. 이후 흰목이 버섯 잔유물을 여과하여 제거한 후 이를 농축하였다. 이후 동결건조를 통해 수득된 흰목이버섯 추출물의 함량을 확인하였다.

그 결과, 표 1에서 보듯이, 흰목이버섯 추출물의 수율은 기존의 열수 추출방법에 의할 경우 약 5%에 불과하였으나, 본 발명의 추출방법에 의할 경우 약 81.5%로 수율이 15배 이상 향상된 것을 알 수 있었다.

추출방법	생산수율(고형분기준)
효소처리 열수 추출방법(본발명)	81.5%
열수 추출방법	5%

< 실시예 2>

신경세포분화촉진효과( Neuritogenic Effect ) 측정

상기 실시예 1에서 제조된 본 발명 흰목이버섯 추출물(흰목이버섯 추출물 1)과 종래 추출방법에 따라 제조된 흰목이버섯 추출물(흰목이버섯 추출물 2)을 1㎍/mL의 농도로 조제하여 분화되지 않은 PC12h 세포(subclone of PC12 cells isolated by Dr. Hatanaka, Rat)에 처리하고 48시간동안 37℃, 5% CO2 배양기에서 배양하였다. 배양 후 0.1% 글루타르알데히드(glutaraldehyde) 용액을 이용하여 세포를 고정시키고 이미지분석기(Image analyzer)(Leica, Germany)를 이용하여 신장된 신경세포돌기의 길이를 측정하였다. 각 실험군당 다섯 부분씩 임의로 선정하여 그 부위에서 가장 긴 신경세포돌기 순으로 10개씩 측정하였다. 측정된 신경돌기의 길이는 ANOVA test와 T-test(Yamazaki et al.; Biol. Pharm. Bull.; vol. 19; page 791-795; 1996)를 통하여 유의성을 검증하였다.

그 결과, 표 2에서 보듯이, 대조군으로 사용한 PBS 처리군의 평균 신경돌기 길이는 95.38±5.08㎛이었으며 본 발명의 흰목이버섯 추출물(흰목이버섯 추출물 1) 처리군에서는 평균 신경돌기의 길이가 107±3.63㎛로, 대조군인 PBS 처리군과 비교하였을 때 유의적으로 높은 신경 성장 활성 효과를 나타내었고, 이는 종래 방법으로 제조한 흰목이버섯 추출물(흰목이버섯 추출물 2)과는 유사한 수준임을 확인할 수 있었다. 이로써 본 발명을 통해 신경 성장 활성 효과가 뛰어난 흰목이버섯 추출물을 높은 수율로 제조하였음을 확인할 수 있었다. 상기 실험 결과를 도 2에 함께 나타내었다.

처리군	농도 (㎍/㎖)	신경세포의 길이 (Mean±S.E. ;㎛)¹⁾
PBS	-	95.38±5.08
흰목이버섯 추출물1¹⁾	1	107.79±3.63 ^*
흰목이버섯추출물 2²⁾	1	106.6±4.56^*
NGF	0.1	116.25±4.27 ^*

¹⁾흰목이버섯 추출물1 : 본발명 흰목이버섯 추출물

²⁾흰목이버섯 추출물2 : 기존보고 흰목이버섯 추출물

*P<0.01, Significantly different from the control group. (ANOVA, Scheffe's test, n=300)

1) 신경세포돌기의 평균길이 ± S.E. (㎛)

< 실시예 3>

흰목이버섯 추출물의 점도 측정

본 발명의 흰목이버섯 추출물과 종래 방법으로 제조한 흰목이버섯 추출물의 점도 특성 변화를 측정하였다. 두개의 추출물을 각각 50mg/mL의 농도로 용해시킨 후 회전형점도계를 이용하여 25℃, 100rpm에서 점도를 측정하였다.

그 결과, 표 3에서 보듯이, 기존의 열수 추출에 의한 흰목이버섯 추출물의 점도가 19,960인 것에 비해 본 발명을 통한 흰목이버섯 추출물은 점도가 120에 불과하여 종래의 흰목이버섯 추출물 보다 점성이 감소된 것으로 나타났다.

추출방법	점도(cps)
효소처리 열수 추출방법(본발명)	120
열수 추출방법(기존발명)	19,960

본 발명은 효소를 이용한 흰목이버섯 추출물의 제조 방법 및 이를 포함하는 기억 증진용 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 효소처리를 통하여 수율을 향상시킨 흰목이버섯 추출물의 제조 방법 및 상기 방법에 의하여 제조된 흰목이버섯 추출물을 제공하며, 이는 신경세포 회복, 신경세포 손상 억제 및 기억 증진용 식품 조성물 및 약학적 조성물로 사용이 가능하다.

Claims

(a) 흰목이버섯을 pH 2.5 내지 3.5인 산성 조건에서 가압 열수 추출하는 단계; 및
(b) 상기 (a) 단계의 열수 추출물에 셀룰라아제를 처리하는 단계를 포함하는 신경세포분화를 촉진시키는 효능이 우수한 흰목이버섯 추출물의 제조 방법.
삭제
제1항에 있어서, 상기 열수 추출 시 온도는 110℃ 내지 130℃인 것을 특징으로 하는 흰목이버섯 추출물의 제조 방법.
삭제
제1항에 있어서, 상기 셀룰라아제 처리는 pH 2.5 내지 pH 6.0 및 40℃ 내지 60℃에서 처리하는 것을 특징으로 하는 흰목이버섯 추출물의 제조 방법.
제1항, 제3항 및 제5항 중 어느 한 항의 제조 방법에 따라 제조된 흰목이버섯 추출물.
제6항의 상기 흰목이버섯 추출물을 유효성분으로 포함하는 기억 증진용 식품 조성물.
제6항의 상기 흰목이버섯 추출물을 유효성분으로 포함하는 기억력 장애 질환 예방 및 치료용 약학적 조성물.
제8항에 있어서, 상기 기억력 장애 질환은 알츠하이머병(Alzheimer's disease), 치매(dementia), 기억상실증(amnesia), 경도인지장애(mild cognitive impairment), 헌팅턴병 및 파킨슨병으로 이루어진 군에서 선택한 것임을 특징으로 하는 기억력 장애 질환 예방 및 치료용 약학적 조성물.