KR101248056B1

KR101248056B1 - 노인 냄새 제거용 천연 한방 화장료 조성물

Info

Publication number: KR101248056B1
Application number: KR1020110035673A
Authority: KR
Inventors: 신영상
Original assignee: 상황미인(주)
Priority date: 2011-04-18
Filing date: 2011-04-18
Publication date: 2013-03-26
Also published as: KR20120118222A

Abstract

본 발명은 노인 냄새 제거용 천연 한방 화장료 조성물에 관한 것으로, 상황버섯 추출물, 고삼 추출물, 황금 추출물, 산초 추출물, 백두홍 추출물 및 이끼 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 노인 냄새 제거용 천연 한방 화장료 조성물이 제공된다.
본 발명의 화장료 조성물은 항산화 활성 및 항균/방부 효과가 우수하여 노령층에서 발생하는 가령취, 즉, 노인 냄새 제거용 화장료 조성물로 유용하게 사용될 수 있다. 또한, 본 발명의 화장료 조성물은 천연 한방 재료를 사용하므로 기존 합성 방부제의 대체 효과를 충분히 기대할 수 있다.

Description

노인 냄새 제거용 천연 한방 화장료 조성물{Cosmetic composition for deoderizing odl men smell by using orental natural materials}

본 발명은 노인 냄새 제거용 천연 한방 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 항산화 활성 및 항균/방부 효과가 우수한 천연 한방 성분을 함유하여 노령층에서 발생하는 가령취, 즉, 노인 냄새를 제거할 수 있는 천연 한방 화장료 조성물에 관한 것이다.

최근 노화 방지를 목적으로 하는 안티에이징 기능의 화장품은 더욱 진보된 기술력으로 세포재생을 지나 복원까지 영역을 넓히고 있다. 그러나 국내에는 노화 지연과 주름개선을 위한 기능성 화장품들로 넘쳐나고 있지만 정작 '노인'만을 위한 제품은 찾아보기 힘든 실정이다.

노화로 인해 발생하는 노인 특유의 냄새로 인해 고통 받는 노인과 주변인들을 위한 미용 및 개인 건강관리 제품은 끊임없이 요구 되고 있는 실정이며, 이러한 높은 수요로 인해 노인 냄새(일명: 가령취; 日,시세이도社에서 규명)를 억제하는 제품은 제 각기 많은 업체에서 속속 출시되고 있다. 미국은 고령친화 화장품 시장이 36억 4천만달러(2007)이며, 일본은 고령친화 향장제품이 300여종(2007)에 이른다. 이처럼 북미/일본 등 선진국은 고령친화 화장품의 개발이 활발하게 진행되고 있는 반면에 국내에서는 이러한 고령친화 화장품의 개발이 저조한 실정이다. 또한, 노인 체취 제거 제품은 국내 업계에선 거의 없다고 봐야 할 정도로 미미하다. 국내 화장품 업체들은 시장성을 이유로 고령친화 화장품의 개발을 미루고 있는 실정이다.

본 출원인의 조사 자료에 의하면 55세부터 75세까지의 세대 중 88.5%가 화장품을 사용하고 있으며 주름개선 제품과 체취제거 제품을 선호하는 것으로 나타났다. 그러나 시중에 판매되고 있는 체취제거 제품들은 노인층에 포커스를 맞춘 제품이 아닌, 주 고객층인 2,30대를 겨냥한 제품으로 민감하고, 피부의 세포활성이 떨어져있는 노인들에게는 안전성이 검증되지 않은 제품들이 대부분이다. 또한, 노인층을 위한 전용 제품으로 나와 있는 상품들도 노인체취의 강한 향 성분을 마스킹(masking)하기 위해 방향족 화합물을 사용함으로써 많은 부작용으로 인해 또 다른 문제를 야기한다.

특히, 노년기가 되면 피지에 포함된 지방산인 시스-9헥사데세노익 산(cis-9hexadecenoic acid)(C₁₆H₃₀O₂)이 산화, 분해되어 생기는 물질로 인해 특유의 노인냄새가 발생되는데 이는 노네날 알데하이드(C₉H₁₆O)라는 물질이며, 이는 주로 고령층에서 많이 생성되지만 만성 질환을 앓고 있는 환자 특히 주로 거동이 힘든 환자들에서 발생한다. 즉, 신진대사가 원활하지 못하면서 피부에 노폐물이 더욱 많이 남게 되고 이들 피지선에서 불포화지방산이 분해되면서 생기는 물질인 노네날 알데하이드가 더 많이 만들어져 쾨쾨한 냄새가 배출된다. 따라서, 체내에서 피지선을 통해 배출되는 반응물질인 시스-9헥사데세노익 산의 산화를 방지하면 노인 냄새를 억제 시킬 수 있을 것으로 기대된다.

이에 본 발명은 피부, 특히 노인들의 피부에서 발생하는 시스-9헥사데세노익 산과 같은 노폐물의 산화를 억제하는 천연물 유래 항산화 물질을 함유하며 또한 피부의 과산화 지질로 인해 발생하는 균들의 작용을 억제하는 천연물 유래 항균/방부 물질을 함유하는 노인 냄새 제거용 천연 한방 화장료 조성물을 제공하고자 한다.

본 발명에 의하면, 상황버섯 추출물, 고삼 추출물, 황금 추출물, 산초 추출물, 백두홍 추출물 및 이끼 추출물을 포함하는 것을 특징으로 하는 노인 냄새 제거용 천연 한방 화장료 조성물이 제공된다.

본 발명의 화장료 조성물은 항산화 활성 및 항균/방부 효과가 우수하여 노령층에서 발생하는 가령취, 즉, 노인 냄새 제거용 화장료 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.

또한, 본 발명의 화장료 조성물은 천연 한방 재료를 사용하므로 기존 합성 방부제의 대체 효과를 충분히 기대할 수 있다.

본 발명에서는 피부, 특히 노인들의 피부에서 발생하는 시스-9헥사데세노익 산과 같은 노폐물의 산화를 억제하는 천연물 유래 항산화 물질로서 상황버섯 추출물을 사용하고, 또한 피부의 과산화 지질로 인해 발생하는 균들의 작용을 억제하는 천연물 유래 항균/방부 물질로서 고삼 추출물, 황금 추출물, 산초 추출물, 백두홍 추출물 및 이끼 추출물을 사용하였을 경우에 노인 냄새, 일명 가령취가 현저히 제거되는 것을 발현하여 본 발명을 완성하게 되었다.

이하 본 발명을 보다 상세히 설명한다.

본 발명에서 사용하는 상황버섯은 학명이 펠리너스 린테우스(Phellinus linteus)이며, 목진흙버섯이라고도 하며, 동의보감에서는 상목이(桑木耳)라는 이름으로 탕액편에 기록되어 있다. 갓은 지름 6-12cm, 두께 2-10cm로, 반원 모양, 편평한 모양, 둥근 산 모양, 말굽 모양 등 여러 가지 모양을 하고 있다. 표면에는 어두운 갈색의 털이 짧고 촘촘하게 나 있다가 자라면서 없어지고 각피화한다. 검은빛을 띤 갈색의 고리 홈이 나 있으며 가로와 세로로 등이 갈라진다. 가장자리는 선명한 노란색이고 아랫면은 황갈색이며 살도 황갈색이다. 자루가 없고 포자는 연한 황갈색으로 공 모양이다. 다년생으로 뽕나무 등에 겹쳐서 나는 목재부후균이다. 초기에는 진흙 덩어리가 뭉쳐진 것처럼 보이다가 다 자란 후에는 나무 그루터기에 혓바닥을 내민 모습이어서 수설(樹舌)이라고도 한다. 항암 효과가 뛰어난 것으로 알려져 있으며, 귀중한 약재로서 한국에서는 대량으로 재배하고 있다. 약용하기 위해 달이면 노란색이거나 연한 노란색으로 맑게 나타나며, 맛과 향이 없는 것이 특징이다. 맛이 순하고 담백하여 먹기에도 좋다. 한국, 일본, 오스트레일리아, 북아메리카 등에 자생한다.

본 발명에서 사용하는 고삼은 학명이 소포라 플라베센스 솔란더 엑스 에이톤(Sophora flavescens Solander ex Aiton)으로 콩과에 속하고, 우리나라 각처의 산과 들에서 자생하는 다년초로서 키가 80~120cm, 전체에 노란색의 짧은 털이 있다. 뿌리는 비대, 아주 쓴맛이 나며, 줄기는 곧게 서있고, 잎은 호생하며, 깃꼴 겹잎, 작은 잎은 10쌍으로 2~4cm, 가장자리는 밋밋하며, 턱잎은 실모양이며, 길이 5~8cm, 잎자루의 길이 15~25cm, 꽃은 연한 노란색, 길이 15~18mm, 많은 꽃이 총상화서를 이루며, 줄기 끝에 붙어있고, 열매는 협과, 원형통, 씨와 씨사이에 잘록하게 들어가 염주 모양으로 되어있으며, 개화기는 6~8월, 결실기는 9~10월이며, 뿌리는 약용으로 쓰인다.

본 발명에서 사용하는 황금은 학명이 스쿠텔라리아 바이칼렌시스 조지(Scutellaria baicalensis GEORGE)이며, 꿀풀과에 속한 여러해살이풀로서 동아시아 대륙 원산으로, 한국 각처의 산지에 나고, 흔히 밭에 재배하며 높이 60 센티미터 가량이다. 전체에 털이 나 있고, 줄기는 밀생하며 네모지고, 가지가 많이 갈라진다. 잎은 마주나며, 잎자루는 거의 없고, 길이 4.5 센티미터, 폭 8 밀리미터, 가장자리에 톱니가 없다. 꽃은 총상꽃차례, 자주색, 원줄기 끝과 가지 끝에 붙는다. 꽃받침은 종 모양, 꽃이 핀 후에 닫히고, 화관은 입술 모양이며, 화관의 길이는 2.5 센티미터 정도이다. 열매는 꽃받침 안에 들어 있고, 둥근 모양이다. 어린 순은 식용하고 뿌리는 이뇨·소염성 해열·출혈성 염증 등의 약재로 이용한다.

본 발명에 사용하는 산초는 학명이 잔토실럼 피페리텀(Zanthoxylum Piperitum)이며, 특이한 냄새가 있으며 맛은 맵고 성질은 따듯하며 독이 있다. 생김새는 2~3분과로 이루어진 삭과로 각 분과는 편구형이며 2편으로 갈라진다. 열매껍질의 바깥 면은 어두운 황적색 또는 어두운 적색으로 유실로 인한 오목한 작은 점이 많이 있고 안쪽 면은 엷은 황백색이다. 또한, 최근에는 산초나무 종자에서 추출한 정유 물질이 국부마취 및 진통작용이 있고, 항균작용에서는 대장균, 적리균, 구균류, 디프테리아균, 황색포도상구균, 피부사상균 등에 억제 작용이 있는 것으로 보고되고 있다. 산초는 일종의 내장 자극제이며, 건위 정장약으로도 이용이 된다. 매운 성분의 산시올은 국부 마취성의 작용이 강하고 살충 효과가 있어 벌레와 생선 독을 제거한다. 의약용으로 피부병에도 효과가 있다고 하며, 옻이 올랐을 때 산초 잎을 달여서 피부를 씻든지 목욕물에 넣고 목욕을 하면 잘 낫는다고 알려져 있다.

본 발명에 사용하는 백두홍은 학명이 펄사틸라 코리아나(Pulsatilla Koreana)이며, 뿌리에 아네모닌과 탄닌질이 있다. 신선한 뿌리에는 프로토아네모닌의 형태로 들어 있으며, 공기 속에서 2분자가 중합되어 아네모닌으로 된다. 또한 헤데라게닌을 비당부분으로 한 4가지 사포닌이 분리되었다. 뿌리 달인액은 혈압내림작용, 아메바원충을 죽이는 작용이 있으며, 전초 달인 액은 말초혈관 확장 작용과 심장의 수축작용을 강화시키는 것으로 알려져 있다.

본 발명에 사용하는 이끼는 학명이 우스니아 바바타(Usnea Barbata(Lichen))로서 이끼는 물에서 땅 위로 올라온 최초의 식물로써, 땅 위에서 살지만 곰팡이처럼 습기가 많고 그늘진 곳에 떼를 지어 모여 있다. 엽록체가 있어서 광합성을 하며 홀씨로 번식한다. 물과 양분은 몸 전체에서 흡수한다. 색깔은 녹색이며 모양은 솔잎, 우산 모양 등으로 무리로 모여 있다. 극지에 사는 이끼 등에서 노화방지 물질을 추출해 화장품에 이용하는 연구가 진행 중이며, 미백·주름개선 효과 물질도 밝혀졌다.

본 발명의 화장료 조성물에 함유되는 상기 각 추출물은 일반적으로 알려진 통상적인 추출방법에 의해 얻어질 수 있다. 예를 들어, 초임계 추출법, 열수 추출법 및 에탄올 추출법 중 적어도 하나의 추출법에 의해 얻어질 수 있다. 각 재료는 재배나 수확 후 볕이나 그늘에 말린 후 포장하여 약재상에서 판매되는 것을 구입하여 사용할 수 있다. 일 구현예로, 각 재료를 세정하고 분말화하여 각각 약 10배량의 추출 용매에서 5일간 냉침한 후, 추출원액을 여과, 농축 및 동결건조 등의 방법에 의해 각 재료의 추출물의 건조분말을 얻었다. 이때 사용되는 추출용매로는 정제수, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 글리세롤, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸렌 글리콜, 메틸 아세테이트, 에틸아세테이트, 벤젠, 헥산, 디에틸 에테르 및 디클로로메탄로 구성된 군중에서 선택된 1 종 또는 2 종 이상의 용매를 혼합하여 사용할 수 있다.

상기와 같이 얻어진 상황버섯 추출물, 고삼 추출물, 황금 추출물, 산초 추출물, 백두홍 추출물 및 이끼 추출물을 이용하여 일반적으로 알려진 통상적인 화장료 제조법을 통해 화장료 조성물을 제조할 수 있다. 예를 들어, 상기와 같이 얻어진 각 추출물에 글리세린, 정제수, 글리콜 디스테아레이트와 같이 일반적으로 사용되는 화장료 성분을 혼합하여 바디로션이나, 바디클렌져 등의 화장료를 제조할 수 있다.

상기와 같이 얻어진 상황버섯 추출물은 강력한 항산화 활성을 나타내는 것으로 확인되었으며, 그리고 고삼, 황금, 산초, 백두홍 및 이끼 추출물은 항균 및 방부 효과가 우수한 것으로 확인되었다(하기 실시예 참조). 또한, 상기와 같이 얻어진 상황버섯 추출물을 함유한 바디클렌져 및 바디로션 등의 화장료를 제조한 경우에 항산화 효과 및 항균/방부 효과가 매우 우수하였으며, 부작용이 발생하지 않아 상황버섯, 고삼, 황금, 산초, 백두홍 및 이끼 추출물은 안전하고 효과가 우수한 화장료 조성물로 사용될 수 있음을 알 수 있었다.

상기 상황버섯 추출물은 화장료 조성물 제조시 함유되는 양은 이에 특별히 한정하는 것은 아니나, 건조중량기준으로 조성물 총 중량에 대하여 0.5-1.5중량%로 함유될 수 있다. 이는 0.5중량% 미만에서는 항산화 효과를 기대할 수 없고, 1.5중량%을 초과하면 함유량 증가에 따른 뚜렷한 효과 증가가 없으며 안전성 또는 제형상의 제조에 어려움이 있기 때문이다.

상기 각 고삼, 황금, 산초, 백두홍 및 이끼 추출물은 화장료 조성물 제조시 함유되는 양은 이에 특별히 한정하는 것은 아니나, 건조중량기준으로 조성물 총 중량에 대하여 0.2-1중량%로 함유될 수 있다. 이는 0.2중량% 미만에서는 항균 및 방부 효과를 기대할 수 없고, 1중량%을 초과하면 함유량 증가에 따른 뚜렷한 효과 증가가 없으며 안전성 또는 제형상의 제조에 어려움이 있기 때문이다.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 상기 상황버섯 추출물, 고삼 추출물, 황금 추출물, 산초 추출물, 백두홍 추출물 및 이끼 추출물 외에 본 발명이 목적으로 하는 주 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 바람직하게는 주 효과에 상승효과를 줄 수 있는 다른 화장료 첨가제 성분 등을 함유하는 것도 무방하다.

본 발명에 따른 노인 냄새 제거용 천연 한방 화장료 조성물은 액상, 페이스트상, 고체상, 크림상 등을 비롯하여 다양한 화장료로 제조할 수 있고, 그 기능을 저해하지 않는 한 제형에 특별한 제한은 없다.

이하 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명한다.

<실시예>

1. 재료 및 방법

A. 상황버섯 추출물에 대한 항산화 시험

1) 실험 재료

본 실험에 사용된 상황버섯은 (주)류충현 약용버섯 농장에서 공급받았으며 실험에 사용하기 위하여 Freeze-dry(Samwon Freezing engineering Co., SFDTS 10K))를 사용하여 수분을 제거한 후 시료로 사용하였다. 또한, 각 추출은 초임계 추출법과 열수/에탄올 추출을 동시에 사용하여 고농도, 고순도의 추출물을 분리하여 사용하였다. 시료 추출 조건은 다음과 같다.

시료 번호		온도(℃)	압력(bar)
추출물	잔여물	온도(℃)	압력(bar)
1	13	40	150
2	14	50	150
3	15	40	200
4	16	50	200
5	17	40	250
6	18	50
7	19	60
8	20	40	300
9	21	50
10	22	60
11		에탄올 추출(여과 농축 후, 100ml로 정용)
12		물 추출(여과 농출 후, 100ml로 정용)

※ 시료 [1~10, 13~22] 초임계 추출

2) 항산화 시험

① 1,1-디페닐-2-피크릴히드라질(DPPH) 라디컬-스캐벤징 활성 측정

각 추출물의 항산화 활성은 Abe 등(Biosci. Biotech. Bioch., 64: 306-333, 2000)이 제시한 DPPH radical-scavenging 활성 검정법을 약간 변형하여 측정하였다. 즉, DPPH(Sigma Chemical Co., St. Louis, MO, USA) 에탄올 용액(100 μM) 900 μL에 희석한 시료용액 100 μL를 가하여 보텍스 믹서로 가볍게 혼합한 다음, 암소에서 20분간 반응시킨 후, 517 nm에서 흡광도를 측정하였다.

② 2,2'-아지노-비스(3-에틸벤즈티아졸린-6-설폰산)(ABTS+) 라디칼 - 스캐벤징 활성 측정

각 추출물들의 항산화 활성은 ABTS+ 라디칼-스캐벤징에 의해 측정되었다. 즉, ABTS+ 라디칼 용액은 1.0 mM의 2,2'-아조비스(2-아미디노-프로판) 디하이드로클로라이드(Sigma Chemical Co., USA)를 인산 완충염수(PBS)에 녹인 2.5 mM의

ABTS와 혼합하여 70℃의 항온조에서 30분간 반응시켜 제조된 것을 실험에 사용하였다. PBS는 100 mM 포타슘 포스페이트 버퍼(pH 7.4)로서 150mM NaCl을 포함하는 용매를 사용하였다.

블루-그린 ABTS+라디컬의 농도는 분광광도계를 사용하여 734 nm에서 0.7±0.02(mean±SD)가 되도록 조정하였다. 희석한 각 시료용액을 10 μL씩 취해서 980 μL ABTS 라디칼 용액에 첨가한 다음, 37℃에서 10분간 반응시킨 후, 734 nm에서 흡광도를 측정하여 시료의 ABTS+ 라디칼-스캐벤징 활성을 조사하였다.

③ SOD(Superoxide radical scavenging) 활성 측정

각 추출물의 수퍼옥시드 라디칼 스캐벤징 활성은 Jeong 등(Radiat. Phys. Chem., 78: 575-577, 2009)이 제시한 ultra weak chemiluminescence analyzer (UWLA, BPCL-2-KIC, Institue of Biophysics, Academy of Science, Beijing, China)를 이용하여 측정하였다. 즉, 반응용액 2,1 mL(2.0 mM 루시제닌 1.0 mL,

PBS(pH 7.4) 1.0 mL, 1.0 M 아르기닌 0.05 mL, 그리고 1.4 μM 메틸글리옥살 0.05 mL)을 석영 둥근 바다 큐벳에 넣어 13분 동안 라디칼 생성을 유도한 다음, 여기에 희석한 시료 용액을 첨가하여 ultra weak chemiluminescence

analyzer로 측정하였다.

B. 고삼/황금/산초/백두홍/이끼 추출물에 대한 항균 시험

1) 실험 재료

본 실험에 사용된 고삼, 황금, 산초, 백두홍 및 이끼는 (주)유로코스텍에서 구입하였으며, 특히 이끼는 아일랜드 이끼(Irish Moss)를 사용하였다. 실험에 사용하기 위하여 Freeze-dry(Samwon Freezing engineering Co., SFDTS 10K))를 사용하여 수분을 제거한 후 시료로 사용하였다. 또한, 각 추출은 초임계 추출법과 열수/에탄올 추출을 동시에 사용하여 고농도, 고순도의 추출물을 분리하여 사용하였다.

시료 추출 조건

고삼, 황금, 산초. 백두홍, 이끼는 Freeze dry (Samwon Freezing engineering Co., SFDTS 10K)로 동결 건조하여 분쇄 후 시료로 사용하였다. 또한, 각 시료의 기능성 물질 분리 및 추출을 위해 3%(v/v)의 에탄올을 첨가하여 추출하였다.

2) 항균 시험

그람 음성 박테리아 12종/그람 양성 박테리아 12종/이스트 5종/균류 6종/기타 화장품 품질 검사외의 균류 33종에 대해 항균 시험을 하였다.

용매 추출물에 대한 항균 및 항진균력은 고체배지 희석법을 이용하여 측정 하였다. [{실험근거} * 실험 종합 미생물학, 대학사 p.116(1998)]

각 추출물을 10% DMSO 생리 식염수에 용해 시킨 후 추출물의 농도를 최고농도 2,000μg/ml에서 최저농도 62.5μg/ml까지 2배 희석단계를 수행하였다. 희석된 각각의 시료 2.0ml를 페트리디쉬에 취하고 여기에 배지 18.0ml를 섞어 배지가 굳은 다음 배양시킨 균을 백금이로 5mm정도 도말하여 세균은 37℃ 배양기에서 24시간, 진균은 22℃배양기에서 5~7일간 배양하였다. 각 배양이 끝나면 집락 여부를 관찰 하여 미생물 균주의 성장을 억제하는 항생물질의 최소억제 농도를 측정하는 ＭＩＣ(Minimum Inhibitory Concentration)측정 방법을 사용하였다.[{실험근거} *진단병원미생물학, 고려의학 p.589 (1996)]

* 실험 개요

1) Mueller Hinton broth를 사용하여 액체 배지를 만든다.

2) 10개의 튜브를 준비하여 한 개는 4ml, 나머지는 2ml씩 배지를 채운다. (10SET의 배지를 만든다).

3) 균을 희석하기 위한 배지를 만든다.

4) 고압 증기 멸균 후 2)의 튜브들에 항생제를 첨가한다.

5) 튜브에서 2ml씩을 옮겨 2배씩 희석한다.

6) 대장균의 농도를 희석하여 저 농도의 튜브에서부터 균을 이식한다.

7) 인큐베이터에서 균을 배양 시킨 후 관찰한다.

8) 균이 자라지 않는 최소 농도를 측정한다.

C. 상황버섯, 고삼, 황금, 산초, 백두홍 및 이끼 추출물을 이용한 향장품 제형 응용

상황버섯, 고삼, 황금, 산초, 백두홍 및 이끼는 모두 INCI에 등재 되어 있는 화장품 원료로 사용 적합한 원료이며, 실험 결과, 기존의 파라벤 류의 합성 방부제를 대체할 만한 수준의 방부 효과를 바탕으로 바디클렌저/바디로션에 응용하여 시험하였다.

1) 시험 내용

상황버섯, 고삼, 황금. 산초, 백두홍 및 이끼 추출물을 각 바디클렌저, 바디 로션에 적용시켜 항균효과를 측정하였다. 먼저 가용화 제형인 바디 클렌저와 유화제형인 로션에서 컨트롤은 방부제를 첨가하지 않았고, 시험군은 상황버섯, 고삼, 황금, 산초, 백두홍 및 이끼 추출물을 각 0.5%씩을 첨가하고, 양성 컨트롤은 바디 클렌저/바디 로션에 메틸 파라벤 0.1%, 부틸 파라벤 0.1%를 첨가하였다.

2) 시험 방법

이 실험에는 그람 음성 박테리아인 에스케리차 콜라이(Escherichia coil), 슈도모나스 아에루지노스(Pseudomonas aeruginos)와 그람 양성 박테리아인 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus), 진균인 칸디다 알비칸스(Candida albicans)를 사용하였다. 트립틱소이 아가에는 에스케리차 콜라이(Escherichia coil), 슈도모나스 아에루지노스(Pseudomonas aeruginos) 및 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus)를 접종하고, 시부로 덱스트로즈 아가(sabouraud dextrose agar)에는 칸디다 알비칸스(Candida albicans)를 접종하였다. 이것을 37℃ 인큐베이터에서 48시간 배양한 후, 0.8% 생리 식염수로 현탁하여 세균은 10⁸cells/ml, 진균은 10⁶cells/ml가 되도록 하였다.

항균효과를 시험할 10ml의 바디 클렌저, 바디 로션에 생리 식염수로 현탁된 균을 첨가하여 균일하게 섞었다. 이것을 1ml를 채취하여 Letheen Broth 9ml에 혼합시켜 10^-1 희석액을 만들고, 단계적으로 희석하여 10^-2, 10^-3, 10^-4 희석액을 만들었다. 10^-2, 10^-3, 10^-4 희석액을 Letheen agar 플레이트에 1ml씩 접종한 후 37℃ 인큐베이터에서 72시간 배양시켜 각 균수를 측정하였다.

미생물이 접종된 바디 클렌저/ 바디 로션 샘플을 37℃ 인큐베이터에서 보관하여 4주간 균수의 변화를 측정하였다. 화장품의 방부력 측정 방법은, 제품에 미생물을 접종하여 28일간 접종 미생물 수의 증감을 관찰하는 장기 측정법인 CTFA법을 기준으로 하였다.

균의 접종 후 0, 1~3, 7, 14, 21, 28일 후에 시료를 채취하여 세균수를 측정하는 방법으로 세균은 접종 7일 이내 접종균의 99.9%이상 균수가 감소해야 하며, 시험기간 동안 증식이 없어야 한다. 또한, 효모, 곰팡이는 접종 7일 이내 최소 90%이상 균수가 감소해야하며, 시험기간 동안 증식하지 않아야한다.

바디 클렌저의 처방

성분	시험군(중량%)	양성 컨트롤(중량%)
성분	상황버섯+고삼+황금+산초 +백두홍+이끼	양성 컨트롤(중량%)
물	to 100	to 100
암모늄 라우레스 설페이트(Ammonium Laureth Sulfate)	25.00	25.00
코카미도프로필 베테인(Cocamidopropyl Betaine)	10.00	10.00
TEA 라우릴 설페이트	10.00	10.00
글리세린	8.00	8.00
라우라미드 DEA	3.00	3.00
스테아르트리모늄 클로라이드(Steartrimonuim Chloride)	2.00	2.00
글리콜 디스테아레이트(Glycol Distearate)	2.00	2.00
폴리쿼터늄-10(PolyQuaternium-10)	1.00	1.00
소디움 클로라이드	1.00	1.00
상황버섯 추출물(Phellinus Linteus Extract)	1.00	1.00
백두홍 추출물(Pulsatilla Koreana Extract)	0.50	-
이끼 추출물(Usnea Barbata (Lichen) Extract)	0.50	-
산초 추출물(Zanthoxylum Piperitum Fruit Extract)	0.50	-
황금 추출물(ScutellariaBaicalensisRootExtract)	0.50	-
고삼 추출물(Sophora Angustifolia Root Extract)	0.50	-
감잎 추출물(Diospyros kaki leaf Extract)	0.50	0.50
향료(주식회사 나우코스(갈락솔라이드, 헤디온, 리날로울 함유))	0.20	0.20
시트르산(Citric Acid)	0.10	0.10
디소디움 EDTA	0.03	0.03
메틸 파라벤	-	0.10
부틸 파라벤	-	0.10

바디 로션의 처방

성분	시험군(중량%)	양성 컨트롤
성분	상황버섯+고삼+황금+산초 +백두홍+이끼	양성 컨트롤
물	to 100	to 100
디프로필렌 글리콜	10.00	10.00
미네랄 오일	5.00	5.00
헥실 라우레이트	3.00	3.00
스테아르산	2.50	2.50
폴리소르베이트 60	2.00	2.00
PEG/PPG-17/6 Copolymer	2.00	2.00
스테아릴 알코올	2.00	2.00
디메티콘	1.50	1.50
소르비탄 세스퀴올레이트	1.50	1.50
글리세릴 스테아레이트	1.50	1.50
PEG-100 스테아레이트	1.00	1.00
상황버섯 추출물(Phellinus Linteus Extract)	1.00	1.00
백두홍 추출물(Pulsatilla Koreana Extract)	0.50	-
Usnea Barbata (Lichen) Extract	0.50	-
산초 추출물(Zanthoxylum Piperitum Fruit Extract)	0.50	-
황금 추출물(ScutellariaBaicalensisRootExtract)	0.50	-
고삼 추출물(Sophora Angustifolia Root Extract)	0.50	-
감잎 추출물(Diospyros kaki leaf Extract)	0.50	0.50
향료(주식회사 나우코스(갈락솔라이드, 헤디온, 리날로울 함유))	0.15	0.15
트리에탄올아민	0.15	0.15
카보머	0.13	0.13
알란토인	0.10	0.10
잔탄검	0.05	0.05
디소디움 EDTA	0.03	0.03
메틸 파라벤	-	0.1
부틸 파라벤	-	0.1

2. 결과

A. 상황버섯 추출물의 항산화 활성 시험 결과

1) DPPH(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl radical scavenging) 활성측정 결과

DPPH 라디칼은 비교적 안정한 자유라디칼로 천연자원의 항산화 활성을 검색하는데 널리 이용되는 방법으로서 상황버섯 추출물의 DPPH 라디칼 생성 억제효과의 결과는 표 4과 같다. 추출조건에 따라 얻어진 추출물 20㎕를 일정하게 첨가하여 활성을 측정한 결과, 초임계에 비해 열수 추출과 에탄올 추출물이 활성이 더 높았으며,열수 추출과 에탄올 추출물은 대조군 대비 40-50%의 활성으로 초임계 추출에 비하여 비교적 높게 나타났다.

DPPH 라디칼 스캐벤징 활성

시료 No.	DPPH 라디칼 스캐벤징 활성(%)	시료 No.	DPPH 라디칼 스캐벤징 활성(%)
1	25.8	13	36.9
2	34.6	14	22.7
3	25.1	15	31.6
4	32.3	16	43.7
5	43.5	17	31.9
6	38.8	18	31.9
7	44.6	19	33.5
8	44.1	20	25.4
9	30.5	21	34.8
10	53.8	22	36.4
11	91.3
12	83.4

2) ABTS 라디칼 스캐벤징 활성 측정 결과

ABTS 라디칼을 이용한 항산화능의 측정은 포타슘 퍼설페이트와의 반응에 의해 생성된 ABTS 프리 라디칼이 추출물 내의 항산화 물질에 의해 제거되어 라디칼 특유의 색인 청록색이 탈색되는 것을 이용한 방법으로 상황버섯의 ABTS 활성 측정 결과, 하기 표 5와 같이 각 추출물에 대하여 227.4～458.4㎍/㎖를 나타냈다. 초임계 추출 조건을 보면 300bar, 60℃일 때 가장 높은 라디칼 활성을 나타내었고, 압력과 온도가 가장 낮은 150bar, 40℃ 조건에서 가장 낮은 활성을 보였다.

ABTS 라디칼 스캐벤징 활성

시료 No.	ABTS 라디칼 스캐벤징 활성(%)	시료 No.	ABTS 라디칼 스캐벤징 활성(%)
1	227.4	13	421.4
2	281.6	14	244.9
3	234.0	15	348.7
4	283.0	16	458.5
5	373.1	17	356.1
6	349.1	18	349.1
7	368.0	19	370.2
8	394.2	20	279.0
9	243.2	21	384.6
10	475.9	22	425.4
11	778.1
12	779.4

3) SOD(Superoxide radical scavenging) 활성 측정 결과

생체 대사 과정에서 발생하는 유해 산소 종의 하나인 수퍼옥시드(O₂)는 수퍼옥시드 디스무타아제(SOD)에 의하여 소거된다. 상황버섯 초임계 추출물을 2, 4, 6, 8㎕씩 첨가하여 측정한 결과, SOD 활성은 농도와 정의관계를 보였다. 특히, 추출물 농도에 따른 결과에서 추출물 8㎕를 첨가하였을 때 SOD 활성은 7, 8, 9번이 눈에 띄게 활성이 높은 결과를 보여 추출 조건이 상당히 큰 영향을 미쳤다는 결과를 얻을 수 있었다. 상황버섯 추출물을 SOD 활성 측정 결과, 15.8 ～ 59.1%의 높은 활성을 보였다. 초임계 추출물에서 시료 No. 7, 8, 9에서 비교적 높은 활성을 보였다. 특히, 초임계 추출시 250bar/60℃ 조건이 가장 활성이 높게 나타났고, 300bar의 경우 50℃보다 40℃에서 활성이 높아 고압의 경우 낮은 온도에서 효과가 보다 높게 나타났다.

추출물의 농도에 따른 SOD 활성

	시료 No.
농도(㎕)	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11
0	0.0	0.0	0.0	0.0	0.0	0.0	0.0	0.0	0.0	0.0	0.0
2	4.5	7.0	6.7	6.6	15.9	15.6	24.2	17.5	19.7	9.8	7.9
4	8.4	12.5	11.5	13.7	23.8	18.5	41.7	32.5	34.3	18.6	13.9
6	11.2	17.6	15.7	17.5	29.5	24.5	50.8	44.5	41.7	23.1	20.1
8	15.8	22.9	20.5	22.2	37.6	31.4	59.2	53.9	48.0	27.3	28.4

4) 상황버섯 항산화 활성 시험 결과의 고찰

상기와 같이 상황버섯 추출물은 통상적으로 알려진 녹차의 DPPH 50~60%의 항산화 활성능과 비교하여 항산화 활성 효과가 우수하다고 판단된다. 또한 상황버섯의 다양한 생리 활성을 지닌 화합물을 검토함으로써 향장품의 항산화 소재로서의 충분한 가치가 있다고 여겨진다.

B. 고삼, 황금, 산초, 백두홍 및 이끼 추출물의 항균 및 방부 시험 결과

고삼,황금,산초,백두홍,이끼의 각 추출물을 10% DMSO 생리 식염수에 용해 시킨 후 추출물의 농도를 최고농도 2,000μg/ml에서 최저농도 62.5μg/ml까지 2배 희석단계를 수행하였다. 희석된 각각의 시료 2.0ml를 페트리디쉬에 취하고 여기에 배지 18.0ml를 섞어 배지가 굳은 다음 배양시킨 균을 백금이로 5mm정도 도말하여 세균은 37℃ 배양기에서 24시간, 진균은 22℃배양기에서 5~7일간 배양하였다.

1) 그람 음성 박테리아/그람 양성 박테리아의 최소 억제 농도(MIC) 시험 결과

그람 음성 박테리아	MIC (ppm)	그람 양성 박테리아	MIC (ppm)
Escherichia coli	260	Bacillus subtilis	370
Pseudomonas aeruginosa	340	Bacillus cereus	350
Salm. typhimurium	360	Clostridium botulinum	360
Salm. pullorum	300	Lactobacillus arabinosus	520
Aerobacter aerogenes	270	Staphylococcus aureas	410
Proteus vulgaris	320	Listeria monocytogenes	410
Vibrio Cholerae	350	Corynebacterium acnes	480
Cloaca cloacae	340	Diplococcus pneumoniae	440
Klebsiella edwardsii	280	Mycobacterium 　　　　　smegmatis	380
Legionella pneumoniae	360	Sarcina lutea	370
Moraxella duplex	310	Streptococcus agalactiae	430
Shigella flexneri	320	Clostridium tetani	370

2) 이스트/균류의 최소 억제 농도(MIC) 시험결과

이스트	MIC (ppm)	균류	MIC (ppm)
Candida albicans	480	Aspergillus niger	890
Saccharomyces cerevisiae	450	Aspergillus fumigatus	810
Rhodotorula minuta	400	Penicillium citrinum	830
Rhodotorula mucilaginosa	430	Fusarium monliforme	720
Rhodotorula texensis	430	Aureobasidium pullulans	870
		Chaetomuim globosum	730

3) 다른 미생물의 최소억제 농도(MIC) 시험 결과

박테리아(300-600ppm)		이스트 및 균류 (500-1000ppm)
Aerobacter spp.	Proteus vulgaris	Aspergilus flavus
Bacillus mycoikes	Shigella dysenteriae	Aspergilus oryzae
Brucella abortus	Salmonella anatum	Epidermophyton floccosum
Brevibacterium ammoniagenes	Salmonella choleraesuis	Epidermo phyton
Corynebacterium acnesanaerobic	Salmonella typhi	Poria spp.
Clostridium spp	Salmonella schorttmuelleria	Pulluaria pullulans
Erwinia	Staphylococcus pyogenes	Trichophyton rubrum
Hycobacterium	Staphylococcus saprophylicus	Trichophyton interdigtal
Listeria multocida	Staphylococcus epidermidis	Trichophyton gypseum
Lipophilic　diptheroid strain	Staphylococcus pyogenes	Keratinomyces ajelloi
Mima polymorpha	Staphylococcus faecalis	Monilia albicans

4) 고삼, 황금, 산초, 백두홍 및 이끼 추출물의 항균 및 방부 시험 결과의 고찰

산초/백두홍/이끼의 배합 원료를 사용하였을 때, 균의 생장과 번식 억제력은 모두 식약청 고시 적정 균의 수에 미달 되는바, 기존 파라벤류의 합성 방부제의 대체 효과 및 제품 상용화를 충분히 기대 할 수 있을 것으로 사료된다.

C. 상황버섯, 고삼, 황금, 산초, 백두홍 및 이끼 추출물을 이용한 향장품 제형 응용 결과

1) 대장균(Escherichia coil)에 대한 항균력

그람 음성 박테리아인 대장균(Escherichia coil)에 대한 상황버섯/고삼/황금/산초/백두홍/이끼 추출물의 항균력을 측정한 결과는 다음과 같다.

(A) 바디 클렌저

셀 수(cell/ml)
	3일	1주	2주	3주	4주
컨트롤	2,310,000	3,000	1,000	100	100
시험군	1,800,000	0	0	0	0
양성 컨트롤	1,200,000	0	0	0	0

(B) 바디 로션

셀 수(cell/ml)
	3일	1주	2주	3주	4주
컨트롤	2,280,000	9,600	5,200	100	100
시험군	710,000	0	0	0	0
양성 컨트롤	520,000	0	0	0	0

(A) 바디 클렌저에서 방부제를 첨가하지 않은 컨트롤 군에서 3일째에 대장균이 가장 많이 존재하였고, 4주차까지도 생존하였다. 메틸 파라벤 0.1%와 부틸 파라벤 0.1%를 첨가한 양성 컨트롤 군에서는 3일째 균의 거의 절반 가까이 사멸되었고, 상황버섯 추출물 1중량% 및 고삼, 황금, 산초, 백두홍 및 이끼 추출물이 각각 0.5중량%씩 첨가한 시험군에서는 첨가한 3일째 되는 날 양성 컨트롤군의 균수와 거의 비슷한 정도의 균이 남아있었다.

(B) 바디 로션에서 방부제를 첨가하지 않은 컨트롤군에서 3일째에 대장균이 가장 많이 존재하였고, 4주차까지도 생존히였다. 양성 컨트롤군에서는 3일째 되는 날 균이 감소하기 시작하여 1주차부터는 균이 완전히 사멸되었다. 이에 반해 시험군에서는 3일째되는 날부터 균의 수가 양성 컨트롤군의 균수와 거의 비슷한 결과를 보였고, 1주차부터는 양성 컨트롤군과 마찬가지로 모든 균이 사멸되었다.

이 결과를 통해 가용화 제형과 유화 제형 모두 상황버섯 추출물 1중량% 및 고삼, 황금, 산초, 백두홍 및 이끼 추출물이 각각 0.5중량%씩 첨가한 시험군은 메틸 파라벤 0.1중량%와 부틸 파라벤 0.1중량%를 첨가한 양성 컨트롤군과 비슷한 향균력을 보이는 것을 알 수 있다.

2) 슈도모나스 아에루지노스(Pseudomonas aeruginos)에 대한 항균력

그람 음성 박테리아인 슈도모나스 아에루지노스(Pseudomonas aeruginos)에 대한 상황버섯/고삼/황금/산초/백두홍/이끼 추출물의 항균력을 측정한 결과는 다음과 같다.

(A) 바디 클렌저

셀수(cell/ml)
	3일	1주	2주	3주	4주
컨트롤	220,000	34,000	9,000	3000	0
시험군	60,000	0	0	0	0
양성 컨트롤	76,000	0	0	0	0

(B) 바디 로션

셀수(cell/ml)
	3일	1주	2주	3주	4주
컨트롤	480,000	190,000	36,000	1,000	1,000
시험군	2,000	0	0	0	0
양성 컨트롤	7,000	0	0	0	0

상기 실험 결과로부터 알 수 있는 바와 같이, 슈도모나스 아에루지노스(Pseudomonas aeruginos) 균에 대한 항균력 실험 결과는 양성 컨트롤군의 균수와 거의 비슷하지만, 상황버섯 추출물 1중량% 및 고삼, 황금, 산초, 백두홍 및 이끼 추출물이 각각 0.5중량%씩 첨가한 시험군에서는 항균력이 더 높은 것을 알 수 있었다.

3) 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus)에 대한 항균력

그람 양성 박테리아인 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus)에 대한 상황버섯/고삼/황금/산초/백두홍/이끼 추출물의 항균력을 측정한 결과는 다음과 같다.

(A) 바디 클렌저

셀수(cell/ml)
	3일	1주	2주	3주	4주
컨트롤	270,000	3,100	500	100	100
시험군	6,000	0	0	0	0
양성 컨트롤	4,000	0	0	0	0

(B) 바디 로션

셀수(cell/ml)
	3일	1주	2주	3주	4주
컨트롤	2,200,000	14,000	1,100	100	100
시험군	20,000	0	0	0	0
양성 컨트롤	30,000	0	0	0	0

상기 실험 결과로부터 알 수 있는 바와 같이, 바디 클렌저의 경우 방부제를 첨가하지 않은 컨트롤 군에서 3일째에 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus)가 가장 많이 존재하였고, 4주차까지도 존재하였다. 반면, 시험군과 양성 컨트롤군에서는 3일째부터 균이 현저히 사멸되기 시작해 1주일째부터는 균이 완전히 사멸되었다.

또한, 바디 로션을 살펴보면 방부제를 첨가하지 않은 컨트롤군에서 3일째에 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus)가 가장 많이 존재하였고, 4주차 까지도 존재하였다. 바디 클렌저와 마찬가지로 바디 로션에서도 시험군과 양성 컨트롤군에서는 3일째부터 균이 현저히 사멸되기 시작해 1주일째부터는 균이 완전히 사멸되었다.

4) 칸디다 알비칸스(Candida albicans)에 대한 항균력

진균인 칸디다 알비칸스(Candida albicans)에 대한 고삼/황금/산초/백두홍/이끼 추출물의 항균력을 측정한 결과는 다음과 같다.

(A) 바디 클렌저

셀수(cell/ml)
	3일	1주	2주	3주	4주
컨트롤	190,000	5,300	600	400	200
시험군	73,000	0	0	0	0
양성 컨트롤	89,000	0	0	0	0

(B) 바디 로션

셀수(cell/ml)
	3일	1주	2주	3주	4주
컨트롤	210,000	4,400	800	100	0
시험군	62,000	0	0	0	0
양성 컨트롤	58,000	0	0	0	0

상기 실험 결과로부터 알 수 있는 바와 같이, 컨트롤군은 바디 클렌저, 바디 로션에서 4주차까지 균이 사멸되지 않은 반면 시험군과 양성 컨트롤군에서는 1주에 모든 칸디다 알비칸스가 사멸되었다. 위의 결과로부터 시험군은 양성 컨트롤군과 유사한 칸디다 알비칸스(Candida albicans)에 대해 우수한 항균력을 갖고 있음이 확인되었다.

3. 결론

본 실험은 노령층에서 사용하는 화장품에 대해 보다 더 안전하며 위험성이 적은 가령취 제거용 천연 항균제의 개발을 위한 실험으로 진행되었다. 실험 결과, 본 발명에 따라 상황버섯, 고삼, 황근, 산초, 백두홍 및 이끼 추출물을 함유한 화장료 조성물은 기존 파라벤류를 함유하는 화장료와 유사한 항균/방부 효과를 나타내는 것으로 보아 기존 합성 방부제의 대체 효과를 충분히 기대 할 수 있을 것으로 사료된다.

Claims

상황버섯 추출물, 고삼 추출물, 황금 추출물, 산초 추출물, 백두홍 추출물 및 이끼 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 노인 냄새 제거용 천연 한방 화장료 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 상황버섯 추출물은 건조중량기준으로 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.5-1.5중량%로 포함되는 것을 특징으로 하는 노인 냄새 제거용 천연 한방 화장료 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 고삼 추출물, 황금 추출물, 산초 추출물, 백두홍 추출물 및 이끼 추출물은 건조중량기준으로 화장료 조성물 총 중량에 대하여 각각 0.2-1중량%로 포함되는 것을 특징으로 하는 노인 냄새 제거용 천연 한방 화장료 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 각 추출물은 초임계 추출법, 열수 추출법 및 에탄올 추출법 중 적어도 하나의 추출법에 의해 얻어지는 것을 특징으로 하는 노인 냄새 제거용 천연 한방 화장료 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 액상, 크림상, 페이스트상 또는 고체상임을 특징으로 하는 노인 냄새 제거용 천연 한방 화장료 조성물.