KR100979945B1 - 캘콘 화합물을 유효성분으로 하는 말라리아 치료용 약학적조성물 - Google Patents

캘콘 화합물을 유효성분으로 하는 말라리아 치료용 약학적조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR100979945B1
KR100979945B1 KR1020070141489A KR20070141489A KR100979945B1 KR 100979945 B1 KR100979945 B1 KR 100979945B1 KR 1020070141489 A KR1020070141489 A KR 1020070141489A KR 20070141489 A KR20070141489 A KR 20070141489A KR 100979945 B1 KR100979945 B1 KR 100979945B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
hydroxy
ethanol
reaction
pharmaceutical composition
hydroxyl group
Prior art date
Application number
KR1020070141489A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20090073522A (ko
Inventor
이동웅
임순성
Original Assignee
동국대학교 경주캠퍼스 산학협력단
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 동국대학교 경주캠퍼스 산학협력단 filed Critical 동국대학교 경주캠퍼스 산학협력단
Priority to KR1020070141489A priority Critical patent/KR100979945B1/ko
Publication of KR20090073522A publication Critical patent/KR20090073522A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR100979945B1 publication Critical patent/KR100979945B1/ko

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/12—Ketones
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/45—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by condensation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/78—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
    • C07C45/79—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives by solid-liquid treatment; by chemisorption
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2121/00—Preparations for use in therapy
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

본 발명은 캘콘 화합물 및 그 유도체를 유효성분으로 하는 말라리아 치료용 약제학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 합성 캘콘 화합물들은 우수한 말라리아 치료효과를 가지고 있어 말라리아 치료제로서 효과적으로 사용가능하다.
캘콘 화합물(chalcone), 말라리아 치료효과, 세포독성

Description

캘콘 화합물을 유효성분으로 하는 말라리아 치료용 약학적 조성물{Pharmaceutical composition containing chalcone compounds for treating malarial disease}
본 발명은 캘콘 화합물 및 그 유도체를 유효성분으로 하는 말라리아 치료용 약제학적 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 2종의 캘콘 화합물과 4종의 디하이드로캘콘 화합물의 우수한 항말라리아 효과를 확인하고, 이를 유효성분으로 함유하는 말라리아 치료용 약제학적 조성물에 관한 것이다.
말라리아는 아메리카, 아시아, 아프리카의 열대 및 아열대 지역에서 흔하게 발견되는 감염성 질환으로서 매년 4～9억명이 감염되어 이 가운데 1～3백만명이 사망하는 매우 위험한 질환이다(Breman, 2001). 인간의 말라리아는 플라스모디움 팔시파룸(Plasmodium falciparum), P. 말라리아에(P. malariae), P. 오발레(P. ovale), P. 비박스(P. vivax) 등에 의해 발병되는데, 이 가운데에서 특히 P. 팔시파룸이 가장 중요한 발명원인이 되며 이 원충에 의한 감염이 전체의 약 80%를 차지하고 사망자의 약 90%가 이 원충에 의한 것으로 보고되어 있다(Mendis 등, 2001).
P. 팔시파룸에 의해 발병되는 말라리아를 치료하는 최초의 치료약은 17세기 신코나 나무(cinchona tree)를 이용한데서 비롯되었으며 이 나무에 함유된 키니네(quinine, 퀴놀린 알칼로이드의 일종)가 말라리아에 매우 강한 치료효과가 있음이 알려졌다. 1944년 키니네의 화학적 합성이 보고(Woodward 및 Doering, 1944)된 이후, 여러 가지 종류의 다양한 항말라리아 약물이 합성(Wataya 등, 2005) 되었는데 대표적으로 클로로퀸(chloroquine)과 그 유도체들이 현재까지 유용한 약물로 임상에서 사용되고 있다.
그러나 P. 팔시파룸이 기존의 항말라리아 약물에 내성을 가져 효과가 약해짐에 따라 천연물이나 합성물에 의한 새로운 치료물질을 개발하고자 하는 노력들이 계속되고 있다 (Gessler 등, 1994; Tran 등, 2003). 본 발명에서 합성한 캘콘 화합물과 유사한 화합물의 항말라리아 효과에 대한 연구결과를 소개하면, 1) 1-(2,5-dichlorophenyl)-3-(4-quinolinyl)-2-propen-1-one을 비롯한 23종의 캘콘 화합물들의 IC50 값은 0.23∼16.0 μM (Li 등, 1995)이며 2) 2‘,3’,4‘-trimethoxy-3-quinolinylchalcone을 비롯한 92종의 캘콘 화합물들의 IC50 값이 2.0∼600 μM (Liu 등, 2001)로 보고되어 있으며, 3) licochalcone A, crotaorixin, medicagenin, crotaramosmin, crotaramin 및 crotin등의 천연 캘콘 화합물들이 2-50 μg/ml의 농도에서 P. 팔시파룸을 100% 억제하는 것으로 보고 (Narender 등, 2005) 되었으며, 4) 8종의 레티노이드형 캘콘류의 IC50 값이 4.9-44.6 μM (Valla 등, 2006)으로 알 려져 있다.
위에 소개한 캘콘 화합물외에도 많은 화합물이 천연물로부터 분리되거나 화학적으로 합성되어 항말라리아 효과가 검색되었으나 본 발명에서 합성한 캘콘 화합물들의 P. 팔시파룸 성장억제 효과에 관한 기존 연구보고는 아직 없다.
이에, 본 발명자들은 종래 알려진 항말라리아 물질보다 효과가 우수하면서 부작용이 적은 화합물을 찾고자 연구를 거듭한 결과, 특정 캘콘 화합물 및 그 유도체의 항말라리아 억제효과를 확인하고, 연구를 계속한 결과 본 발명을 완성하기에 이르렀다.
즉, 본 발명의 목적은 말라리아를 유발하는 P. 팔시파룸의 성장을 억제하여 말라리아를 치료할 수 있는 캘콘 화합물 및 그 유도체를 함유하는 약제학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 암예방 및 치료용 약제학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또다른 목적은 말라리아를 유발하는 P. 팔시파룸의 성장을 억제하여 말라리아를 치료할 수 있는 캘콘 및 디하이드로캘콘 화합물 및 그 유도체를 제조하는 방법을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위해서, 본 발명의 일견지에 의하면,
캘콘 및 디하이드로캘콘 유도체로 이루어지는 캘콘 화합물 및 그 유도체를 유효성분으로 하는 말라리아 치료 및 예방용 약제학적 조성물을 제공한다. 즉, 특정 캘콘 화합물 및 그 유도체를 말라리아를 치료하기에 유용한 양으로 함유함을 특징으로 하는 것으로, 이들 화합물들은 말라리아의 주요 발명 원충인 P. 팔시파룸의 성장을 억제하여 말라리아를 치료할 수 있다.
이때 적용가능한 캘콘 화합물 및 그 유도체의 화학식은 다음과 같다:
Figure 112007095014336-pat00001
상기 식에서 1 내지 2번 화합물은 캘콘 유도체이고, 3 내지 6번 화합물은 디하이드로캘콘 유도체로서, 구체적으로 1번 화합물은 2‘-히드록시-5’-브로모-3,4-디메톡시캘콘으로, 2번 화합물은 2‘-히드록시-3,4,4’-트리메톡시캘콘으로, 3번 화합물은 2‘-히드록시-5’-메틸-3,4-디메톡시디히드로캘콘, 4번 화합물은 2‘-히드록시-3,4,4’-트리메톡시디히드로캘콘, 5번 화합물은 2‘-히드록시-4’,5’-디메틸-3,4-디메톡시디히드로캘콘콘, 6번 화합물은 2‘-히드록시-5’-클로로캘콘으로 명명된다.
본 발명의 제2 견지에 의하면,
2‘-히드록시-5’-브로모-3,4-디메톡시캘콘, 2‘-히드록시-3,4,4’-트리메톡시캘콘 및 2‘-히드록시-5’-클로로캘콘으로 이루어진 캘콘 및 디하이드로캘콘 유도체를 유효성분으로 하여 낮은 FM3A 세포독성의 EC50 값을 갖는 것을 특징으로 하는, 암 예방 및 치료용 약제학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 제3 견지에 의하면,
일견지 또는 제2 견지의 2‘-히드록시-5’-브로모-3,4-디메톡시캘콘, 2‘-히드록시-3,4,4’-트리메톡시캘콘 유도체는
상기 벤즈알데히드에 치환되어있는 수산기와 2-히드록시아세토페논의 2번 위치를 제외한 나머지 수산기는 아세톤 용매하에 탄산칼륨과 클로로메틸메틸에테르를 넣고 환류하여 보호하고, 상기 아세토페논의 2번 위치의 수산기는 테트라히드로퓨란 용매 하에 수소화나트륨을 촉매로 사용하여 클로로메틸메틸에테르를 0℃에서 반응하여 보호하는 제1 단계; 및
상기 제1 단계에서 보호된 수산기를 가지는 알데히드 유도체와 아세토페논 유도체를 에탄올에서 수산화칼륨을 가하여 클라이젠-슈미트 축합반응을 수행하는 제2 단계;를 거쳐 수행하는 것을 특징으로 하는 제조방법을 제공한다.
본 발명의 제4 견지에 의하면,
일견지 또는 제2 견지중 2'-히드록시-5'-클로로캘콘은
5‘-클로로-2’-히드록시아세토페논과 50% 수산화칼륨 수용액을 에탄올에 용해하고 벤즈알데히드를 첨가후 실온에서 5시간 반응시키는 단계;
상기 반응액에 물을 가하고 묽은 염산으로 처리후 에틸아세테이트로 추출하는 단계;
상기 추출에 의해 분리한 용매층을 염화나트륨 수용액으로 세척하고 건조시키는 단계; 및
생성된 생성물을 실리카겔 칼럼크로마토그래피법으로 정제하여 2'-히드록시-5'클로로캘콘을 합성하는 단계; 를 수행하는 것을 특징으로 하는 제조방법을 제공한다.
본 발명의 제5 견지에 의하면,
일견지 또는 제2 견지의 디하이드로켈콘 유도체는
제6항의 2'-히드록시캘콘을 에탄올에 녹인 후 10% 팔리디움/챠콜을 가하고 1기압하에서 수소가스를 가하여 수소화 반응을 시키면서 실온에서 4시간동안 얇은층 크로마토그래피상에서 기질이 없어질 때까지 반응시키는 단계;
상기 반응의 종결을 확인 후, 셀라이트상에서 여과하고 에탄올로 세척하는 단계;
세척된 반응물을 무수망초로 건조 여과하여 얻은 고체를 실리카겔 칼럼크로마토그래피법로 정제하여 디히드로캘콘 유도체를 얻는 단계; 를 수행하는 것을 특징으로 하는 제조방법을 제공한다.
이하, 본 발명을 상세히 설명하고자 한다.
캘콘 화합물은 2개의 방향환을 가지고 있는 1,3-디페닐-2-프로펜-1-온의 구조에서 방향환에 여러 가지 종류의 치환기를 가질수 있기 때문에 다양한 화합물이 천연에서 발견되거나 화학적으로 합성되고 있다. 캘콘류는 황색∼적색의 색소로서 천연에서는 별로 발견되지 않으며 주로 꽃잎에 존재한다. 캘콘류의 환원체인 디히드로캘콘류는 천연에서도 분리되고 있지만 그 수는 많지 않다.
캘콘 화합물들은 일반적으로 항산화 활성을 가지고 있는 것으로 알려져 각종 성인병의 예방 및 치료에 효과가 있고 이 외에도 항암효과등이 보고되어 있다(Tringali, 2001).
본 발명은 상기 효능을 갖는 캘콘 화합물들을 합성하여 아직 알려지지 않은 다양한 약리효과를 연구하는 과정에서 일부 화합물이 우수한 항말라리아 효과가 있음을 발견하고 이들을 함유한 약제학적 조성물을 제공하는데 그 특징을 갖는다.
본 발명에서 사용된 화합물들은 알려진 방법을 변형하여 다음과 같은 단계에 의해 얻어진다:
즉, 2‘-히드록시-5’-브로모-3,4-디메톡시캘콘, 2‘-히드록시-3,4,4’-트리메톡시캘콘 유도체는
상기 벤즈알데히드에 치환되어있는 수산기와 2-히드록시아세토페논의 2번 위치를 제외한 나머지 수산기는 아세톤 용매하에 탄산칼륨과 클로로메틸메틸에테르를 넣고 환류하여 보호하고, 상기 아세토페논의 2번 위치의 수산기는 테트라히드로퓨란 용매 하에 수소화나트륨을 촉매로 사용하여 클로로메틸메틸에테르를 0℃에서 반응하여 보호하는 제1 단계; 및
상기 제1 단계에서 보호된 수산기를 가지는 알데히드 유도체와 아세토페논 유도체를 에탄올에서 수산화칼륨을 가하여 클라이젠-슈미트 축합반응을 수행하는 제2 단계;를 거쳐 제조되는 것을 특징으로 한다.
또한, 2'-히드록시-5'-클로로캘콘은
5‘-클로로-2’-히드록시아세토페논과 50% 수산화칼륨 수용액을 에탄올에 용해하고 벤즈알데히드를 첨가후 실온에서 5시간 반응시키는 단계;
상기 반응액에 물을 가하고 묽은 염산으로 처리후 에틸아세테이트로 추출하는 단계;
상기 추출에 의해 분리한 용매층을 염화나트륨 수용액으로 세척하고 건조시 키는 단계; 및
생성된 생성물을 실리카겔 칼럼크로마토그래피법으로 정제하여 2'-히드록시-5'클로로캘콘을 합성하는 단계; 를 거쳐 제조되는 것을 특징으로 한다.
또한, 디하이드로켈콘 유도체는
상술한 2'-히드록시캘콘을 에탄올에 녹인 후 10% 팔리디움/챠콜을 가하고 1기압하에서 수소가스를 가하여 수소화 반응을 시키면서 실온에서 4시간동안 얇은층 크로마토그래피상에서 기질이 없어질 때까지 반응시키는 단계;
상기 반응의 종결을 확인 후, 셀라이트상에서 여과하고 에탄올로 세척하는 단계;
세척된 반응물을 무수망초로 건조 여과하여 얻은 고체를 실리카겔 칼럼크로마토그래피법로 정제하여 디히드로캘콘 유도체를 얻는 단계; 를 거쳐 제조되는 것을 특징으로 한다.
즉, 2'-히드록시켈콘을 합성하는 단계; 2'-히드록시켈콘을 환원하는 단계; 얻어진 유기층을 무수망초로 건조, 여과 후 감압농축하여 잔사를 얻는 단계; 및 실리카겔 칼럼크로마토그래피법으로 정제하는 단계에 의해 얻어진다.
본 발명의 약제학적 조성물에 있어서, 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 경구를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파 라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물에서 화합물의 유효량은 투여경로, 제형, 사용하는 목적, 환자의 질환의 정도 등에 따라 광범위한 범위 내에서 결정될 수 있다. 그러나, 일반적으로 함량이 1.0-2.0 mg/kg/주(week), 바람직하게는 1.5 mg/kg/주의 농도로 투여되도록 제형화될 수 있다.
위의 화합물을 상기한 범위 내로 투여하기 위한 제제는 통상의 형태를 가질 수 있으며, 예를 들면 알약 형태나 캡슐등의 형태로 사용할 수 있다. 이들은 경구 또는 각종의 비경구 투여 경로를 통해 말라리아의 치료를 위해 투여될 수 있으며, 투여 제형에 따라 적합한, 그리고 당업자에게 이미 주지되어 있으며 당업자가 용이하게 선정할 수 있는 각종의 부형제, 담체, 또는 희석제 등을 함유할 수 있다.
본 발명의 특정 캘콘 화합물은 P. 팔시파룸 원충의 성장을 억제함으로써 말라리아 질환을 치료할 수 있어 항말라리아제로 유효하게 사용될 뿐 아니라 이 과정에서 캘콘 유도체의 일종인 2‘-히드록시-5’-브로모-3,4-디메톡시캘콘, 2‘-히드록시-3,4,4’-트리메톡시캘콘 및 2‘-히드록시-5’-클로로캘콘이 낮은 FM3A 세포독성의 EC50 값을 갖는 것을 확인하고 암 예방 및 치료용 약제학적 조성물 또한 함께 제공할 수 있다.
본 발명의 특정 캘콘 화합물은 P. 팔시파룸 원충의 성장을 억제함으로써 말라리아 질환을 치료할 수 있어 항말라리아제로 유효하게 사용될 수 있으며, 특정 캘콘 유도체는 암 예방 및 치료제로 적용할 수 있다.
[ 실시예 1] 2'- 히드록시캘콘의 합성
벤즈알데히드에 치환되어있는 수산기와 2-히드록시아세토페논의 2번 위치를 제외한 나머지 수산기는 아세톤 용매하에 탄산칼륨과 클로로메틸메틸에테르를 넣고 환류하여 보호하고, 아세토페논의 2번 위치의 수산기는 테트라히드로퓨란 용매 하에 수소화나트륨을 촉매로 사용하여 클로로메틸메틸에테르를 0℃에서 반응하여 보호한다. 보호된 수산기를 가지는 알데히드 유도체와 아세토페논 유도체를 96% 에탄올에서 수산화칼륨을 가하여 클라이젠-슈미트 축합반응을 통해 2'-히드록시캘콘을 합성한다.
[ 실시예 2] 디하이드로캘콘 유도체의 합성
2'-히드록시캘콘을 에탄올에 녹인 후, 10% 팔리디움/챠콜을 가하고 1기압하에서 수소가스를 가하여 수소화 반응을 시키면서 실온에서 4시간동안 얇은층 크로마토그래피상에서 기질이 없어질 때까지 반응시켰다. 반응이 종결된 것을 확인한 다음, 셀라이트상에서 여과하고 에탄올로 세척하였으며, 이어서 무수망초로 건조 여과하여 얻은 고체를 실리카겔 칼럼크로마토그래피법(용매: 10% 에틸아세테이트의 헥산용액)를 행하여 디히드로캘콘 유도체를 얻었다.
[ 실시예 3] 2‘-히드록시-5’- 클로로캘콘의 합성
5‘-클로로-2’-히드록시아세토페논과 50% 수산화칼륨 수용액을 에탄올에 용해 후, 여기에 벤즈알데히드를 가하고 실온에서 5시간 반응시킨 다음, 물을 가한 반응용액을 묽은 염산으로 처리한다. 이 용액을 에틸아세테이트로 추출한 다음, 분리한 용매층을 염화나트륨 수용액으로 세척하고 건조시킨 다음, 생성된 생성물을 실리카겔 칼럼크로마토그래피법(용매: 20% 에틸아세테이트의 헥산용액)으로 정제하여 합성하였다.
< 실험예 1> 말라리아 원충의 배양
본 실험에 사용된 말라리아 원충인 플라스모디움 팔시파룸(ATCC 30932, FCR-3 strain)은 Trager와 Jensen의 방법(Trager 등, 1976)을 변형하여 사용하였다. 즉, A형 인간 적혈구세포의 5% 헤마토크리트를 RPMI 1640 배지에 현탁시키고 열로 활성화시킨 10% A형 인간혈청을 보충하였다. 플레이트를 5% 이산화탄소-5% 산소-90% 질소가 함유된 배양기에서 37°C에서 배양시키고, 100개의 적혈구마다 5개가 원충에 감염될 때까지 (5% parasitemia) 배지를 매일 바꾸어 주었다.
< 실험예 2> 항말라리아 효과 측정
상기 실험예 1에서 배양한 플라스모디움 팔시파룸을 사용하여 다음과 같은 알려진 방법(Kim 등, 1998; 1999)을 약간 변형하여 항말라리아 활성을 검색하였다. 이를 위해 합성한 플라보노이드 화합물을 여러 가지 농도의 디메틸설폭사이드 용액을 만들었으며 이 용액 5 μl를 24-웰 멀티-디쉬(24-well multi-dish)의 각 웰에 첨가하였다. 0.3% parasitemia 정도의 적혈구를 995 μl의 배지를 함유하는 각 웰에 가하여 최종 헤마토크리트 레벨이 3%가 되게 하였다. 이들 플레이트를 5% 이산화탄소-5% 산소-90% 질소가 함유된 배양기에서 37 °C에서 72시간 배양하였다. 시료의 항말라리아 활성을 측정하기 위하여 각 배양 플레이트에서 얇은 혈액필름을 만들고 김사(Giemsa)로 염색하였다. 한 개의 혈액필름 당 총 만개의 적혈구를 현미경으로 관찰하였다. 모든 측정 시료화합물은 최종 농도가 5.0-5.8 μg/ml에서 두번에 걸쳐 측정하였다. 이와 동시에 약물이 없는 대조군도 함께 측정하였으며 모든 데이터는 평균값으로 계산하였다. 대조군의 Parasitemia는 72 시간에 4-5%가 되게 조절하였다. EC50 값은 72시간 동안 원충의 증가를 대조군에 비해 50% 억제하는 효과를 의미한다.
< 실험예 3> 포유류 종양세포의 배양
마우스의 종양세포 [FM3A 세포; wild-type, subclone F28-7(Yoshioka 등, 1987)]는 일본 암연구 자원은행(Japanese Cancer Research Resources Bank)에서 공급받았으며 이 FM3A 세포를 현탁배지에서 37 °C에서 5% 이산화탄소 조건하에서 배 양하였다. 이 때, 2% 열로 불활성화 된 태아 소의 혈청이 든 ES 배지를 함유하는 플라스틱 병에서 배양하였다.
< 실험예 4> 포유류 종양세포주에 대한 세포독성 측정
FM3A 세포는 약 12시간 2회에 걸쳐 성장시켰다. 시료화합물에 노출되기 전에 세포의 농도는 5×104 cells/ml에 맞추었다. 995 μl의 세포현탁액을 시험용 플레이트에 나누고 디메틸설폭사이드(5 μl)에 용해한 여러 가지 농도의 화합물을 24-웰 플레이트의 각 웰에 첨가하였다. 이 플레이트를 37 °C에서 5% CO2 하에서 48 시간 배양하였다. 모든 시료 화합물은 각각의 농도에서 2회 측정하였다. 세포수는 Micro cell counter CC-130 (Toa Medical Electric Co., Japan)으로 측정하였으며 모든 데이터는 평균값으로 계산하였다. EC50 값은 48시간 동안 대조군의 세포 증가를 50% 억제하는데 필요한 화합물의 농도를 의미한다. 선택성(selectivity)은 FM3A 세포에 대한 평균 EC50 값을 P. 팔시파룸에 대한 평균 EC50 값으로 나눈 것을 의미한다.
그 결과를 하기 표 1에 나타내었다.
화합물 번호 최종 농도
(μg/ml)		 P. 팔시파룸 억제효과
(% 억제율 / EC50 값)		 FM3A 세포독성
EC50 (μg/ml) 		선택지수
1 5.2 22 1.7 -
2 5.4 37 1.4 -
3 5.2 15 무독성 -
4 5.4 100 / 1.0 3.3 3.3
5 5.4 29 무독성 -
6 5.2 14 1.7 -
상기 표 1로부터, 본 발명의 화합물중에서 4번 화합물(2‘-히드록시-3,4,4’-트리메톡시디히드로캘콘)은 최종 농도 5.4 μg/ml에서 P. 팔시파룸의 성장을 100% 억제하였으며 EC50 값도 매우 낮은 1.0 μg/ml로 나타나 매우 우수한 항말라리아 효과를 보여주었다. 특히, 이 화합물은 P. 팔시파룸에 대한 EC50 값을 FM3A 세포독성의 EC50 값으로 나눈 선택지수가 3.3으로 산출되어 매우 강력한 항말라리아 약물로 개발될 가능성을 시사한다. 다음으로는 2번 화합물(2‘-히드록시-3,4,4’-트리메톡시캘콘)이 P. 팔시파룸의 성장을 37% 억제하였고 1번 화합물(2‘-히드록시-5’-브로모-3,4-디메톡시캘콘)과 5번 화합물(2‘-히드록시-4’,5’-디메틸-3,4-디메톡시디히드로캘콘콘)이 22∼29%의 비슷한 억제효과를 보여주었으며 3번 화합물(2‘-히드록시-5’-메틸-3,4-디메톡시디히드로캘콘)과 6번 화합물(2‘-히드록시-5’-클로로캘콘)은 다른 화합물에 비해 상대적으로 약한 14∼15% 정도의 억제효과를 나타내었다. 1번, 2번, 6번 화합물들은 FM3A에 대한 세포독성은 매우 낮아 이들은 종양세포 억제효과가 우수한 것으로 평가된다.
<참고문헌>
1. Breman, J. Am. J. Trop. Med. Hyg. 2001, 64, 1
2. Mendis, K.; Sina, B.; Marchesini, P.; Carter, R. Am. J. Trop. Med. Hyg. 2001, 64, 97
3. Woodward, R.; Doering, W. J. Am . Chem . Soc . 1944, 66, 849.
4. Wataya, Y.; Kim, H-S. Jikken Igaku, 2005, 23, 2741.
5. Gessler, M. C.; Nkunya, M. H. H.; Mwasumbi, L. B.; Heinrick, M.; Tanner, M. ACTA Tropica , 1994, 56,65.
6. Tran, Q. L.; Tezuka, Y.; Ueda, J.-Y.; Nguyen, N. T.; Maruyama, Y.; Begum, K.; Kim, H.-S.; Wataya, Y.; Tran, Q. K.; Kadota, S. J. Ethnopharmacol. 2003, 86, 249.
7. Kanokmedhakul, S.; Kanokmedhakul, K.; Nambuddee, K.; Kongsaeree, P. J. Nat . Prod. 2004, 67, 968.
8 Beldjoudi, N.; Mambu, L.; Labaieed, M.; Grellier, P.; Ramanitrahasimbola, D.; Rasoanaivo, P.; Martin, M. T.; Frappier, F. J. Nat . Prod. 2003, 66, 1447.
9 Auffret, G.; Labaied, M.; Frappier, F.; Rasoanaivo, P.; Grellier, P.; Lewin, G. Bioorg . Med . Chem . Letters 2007, 17, 959.
10 Tasdemir, D.; Lack, G.; Brun, R.; Ruedi, P.; Scapozza, L.; Perozzo, R. J. Med . Chem. 2006, 49, 3345.
11. Li, R.; Chen, X.; Gong, B.; Dominguez, J. N.; Davidson, E.; Kurzban, G.; Miller, R. E.; Nuzum, E. O.; Rosenthal, P. J. J. Med. Chem 1995, 38, 5031.
12. Valla, A.; Valla, B.; Cartier, D.; Le Guillou, R.; Labia, R.; Florent, L.; Charneau, S.; Schrevel, J.; Potier, P. Eur . J. Med . Chem. 2006, 41, 142.
13. Tringali C. Bioactive compounds from natural sources. pp. 162-163, 348-349. Taylor&Francis, London and New York, 2001.
14. Narender, T. S.; Tanvir, K.; Srinivasa Rao, M.; Srivastava, K.; Puri, S. K. Bioorg . Med . Chem . Letters 2005, 15, 2453.
15. Liu, M.; Wilairat, P.; Go, M.-L. J. Med . Chem. 2001, 44, 4443.
16. Trager, W.; Jensen, J. B. Science 1976,193,673.
17. Kim, H.-S.; Miyake, H.; Arai, M.; Wataya, Y.. Parasitology International 1998, 47, 59.
18. Kim, H.-S.; Shibata, Y.; Wataya, Y.; Tsuchiya, K.; Masuyama, A.; Nojima, M. . J. Med . Chem . 1999, 42, 2604.
19. Yoshioka, A.; Tanaka, S.; Hiraoka, O.; Koyama, Y.; Hirota, Y.; Ayusawa, D.; Seno, T.; Garrett, C.; Wataya, Y. J. Biol . Chem. 1987, 262, 8235.
상기에서 설명한 바와 같이, 본 발명의 특정 캘콘 화합물은 P. 팔시파룸 원충의 성장을 억제함으로써 말라리아 질환을 치료할 수 있어 항말라리아제로 유효하게 사용될 수 있으며, 특정 캘콘 유도체는 암 예방 및 치료제로 적용할 수 있다.

Claims (8)

  1. 2‘-히드록시-5’-브로모-3,4-디메톡시캘콘, 2‘-히드록시-3,4,4’-트리메톡시캘콘, 2'-히드록시-5'-클로로켈콘, 2‘-히드록시-5’-메틸-3,4-디메톡시디히드로캘콘, 2‘-히드록시-3,4,4’-트리메톡시디히드로캘콘 및 2‘-히드록시-4’,5’-디메틸-3,4-디메톡시디히드로캘콘으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 것을 유효성분으로 하는 말리리아 예방 및 치료용 약제학적 조성물.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 제1항에 있어서,
    상기 약제학적 조성물은 1.0-2.0 mg/kg/주(week)의 농도로 제형화되어, P. 팔시파룸 억제에 의한 말라리아 치료 및 예방 효과를 갖는 것을 특징으로 하는 조성물.
  5. 삭제
  6. 제1항에 있어서,
    상기 2‘-히드록시-5’-브로모-3,4-디메톡시캘콘 또는 2‘-히드록시-3,4,4’-트리메톡시캘콘는
    벤즈알데히드에 치환되어있는 수산기와 2-히드록시아세토페논의 2번 위치를 제외한 나머지 수산기는 아세톤 용매하에 탄산칼륨과 클로로메틸메틸에테르를 넣고 환류하여 보호하고, 상기 아세토페논의 2번 위치의 수산기는 테트라히드로퓨란 용매 하에 수소화나트륨을 촉매로 사용하여 클로로메틸메틸에테르를 0℃에서 반응하여 보호하는 제1 단계; 및
    상기 제1 단계에서 보호된 수산기를 가지는 알데히드 유도체와 아세토페논 유도체를 에탄올에서 수산화칼륨을 가하여 클라이젠-슈미트 축합반응을 수행하는 제2 단계;
    를 거쳐 제조되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  7. 제1항에 있어서,
    상기 2'-히드록시-5'-클로로캘콘은
    5‘-클로로-2’-히드록시아세토페논과 50% 수산화칼륨 수용액을 에탄올에 용해하고 벤즈알데히드를 첨가후 실온에서 5시간 반응시키는 단계;
    상기 반응액에 물을 가하고 묽은 염산으로 처리후 에틸아세테이트로 추출하는 단계;
    상기 추출에 의해 분리한 용매층을 염화나트륨 수용액으로 세척하고 건조시키는 단계; 및
    생성된 생성물을 실리카겔 칼럼크로마토그래피법으로 정제하여 2'-히드록시-5'클로로캘콘을 합성하는 단계;
    를 거쳐 제조되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  8. 제1항에 있어서,
    상기 2‘-히드록시-5’-메틸-3,4-디메톡시디히드로캘콘, 2‘-히드록시-3,4,4’-트리메톡시디히드로캘콘 또는 2‘-히드록시-4’,5’-디메틸-3,4-디메톡시디히드로캘콘은
    제6항의 2'-히드록시캘콘을 에탄올에 녹인 후 10% 팔리디움/챠콜을 가하고 1기압하에서 수소가스를 가하여 수소화 반응을 시키면서 실온에서 4시간동안 얇은층 크로마토그래피상에서 기질이 없어질 때까지 반응시키는 단계;
    상기 반응의 종결을 확인 후, 셀라이트상에서 여과하고 에탄올로 세척하는 단계;
    세척된 반응물을 무수망초로 건조 여과하여 얻은 고체를 실리카겔 칼럼크로마토그래피법로 정제하여 디히드로캘콘 유도체를 얻는 단계;
    를 거쳐 제조되는 것을 특징으로 조성물.
KR1020070141489A 2007-12-31 2007-12-31 캘콘 화합물을 유효성분으로 하는 말라리아 치료용 약학적조성물 KR100979945B1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020070141489A KR100979945B1 (ko) 2007-12-31 2007-12-31 캘콘 화합물을 유효성분으로 하는 말라리아 치료용 약학적조성물

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020070141489A KR100979945B1 (ko) 2007-12-31 2007-12-31 캘콘 화합물을 유효성분으로 하는 말라리아 치료용 약학적조성물

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020100021990A Division KR100979948B1 (ko) 2010-03-11 2010-03-11 캘콘 화합물을 유효성분으로 하는 암 치료용 약학적 조성물

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20090073522A KR20090073522A (ko) 2009-07-03
KR100979945B1 true KR100979945B1 (ko) 2010-09-03

Family

ID=41330666

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020070141489A KR100979945B1 (ko) 2007-12-31 2007-12-31 캘콘 화합물을 유효성분으로 하는 말라리아 치료용 약학적조성물

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR100979945B1 (ko)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101761767B1 (ko) 2015-03-04 2017-07-26 한국과학기술연구원 찰콘 유도체를 포함하는 신독성 감소용 조성물
KR20200025428A (ko) 2018-08-30 2020-03-10 경북대학교 산학협력단 머위 추출물을 유효성분으로 함유하는 말라리아 예방 또는 치료용 약학조성물
CN111214485B (zh) * 2020-03-16 2022-10-28 无锡恒成医疗科技股份有限公司 一种微粉化芒硝组合物及其制备方法与应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
NARENDER 외, Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, Volume 15, Issue 10, Pages 2453-2455 (2005.05.16)

Also Published As

Publication number Publication date
KR20090073522A (ko) 2009-07-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Hayat et al. Antiprotozoal activity of chloroquinoline based chalcones
JP2009539817A (ja) 抗真菌療法におけるクマリン誘導体の使用
US20180118647A1 (en) Method of Using dihydro-resveratrol or its stilbenoid derivatives and/or chemical variants in treatment of tumorous pathologies
KR100979945B1 (ko) 캘콘 화합물을 유효성분으로 하는 말라리아 치료용 약학적조성물
KR20090073511A (ko) 플라보노이드 화합물을 유효성분으로 하는 말라리아 치료용약학적 조성물
KR100979948B1 (ko) 캘콘 화합물을 유효성분으로 하는 암 치료용 약학적 조성물
JP2008526949A (ja) 新規の抗マラリア薬９ａ−カルバモイル−アミノアルキルおよび９ａ−チオカルバモイル−アミノアルキルアザライド
KR100543897B1 (ko) 치자 추출물 및 치자로부터 분리된 신규 화합물 및 그 용도
CN113214097B (zh) 治疗阿尔茨海默病的化合物
JP6346761B2 (ja) Ｔｉｅ２活性化剤、並びに医薬品組成物、及び経口組成物
JP5288532B2 (ja) セスキテルペンラクトンを含有する医薬組成物
JP3740284B2 (ja) 抗マラリア活性を有する新規化合物又はその塩
JP6441526B2 (ja) Ｔｉｅ２活性化剤、血管の成熟化剤、及び血管の安定化剤、並びにＴｉｅ２活性化用経口組成物
JPH08208501A (ja) ガルシニア マンゴスタナｌ．の抽出物を含有する抗ヘリコバクター・ピロリ薬
KR100836568B1 (ko) 왕겨 추출물을 유효성분으로 함유하는 항암용 조성물
KR101201866B1 (ko) 고미신-ａ를 유효성분으로 함유하는 암 예방 및 치료를 위한 약학 조성물
JP2009535395A (ja) ９ａ−置換アザリド
JP4590525B2 (ja) 抗リーシュマニア剤
JP5457638B2 (ja) 環状過酸化物誘導体
KR20080114395A (ko) 에피카테킨을 유효성분으로 하는 청각보호제 조성물
JP2019023238A (ja) Ｔｉｅ２活性化剤、血管の成熟化剤、及び血管の安定化剤、並びにＴｉｅ２活性化用経口組成物
KR20230170629A (ko) 덜꿩나무 잎 유래 화합물 및 이를 포함하는 타이로시나제 활성 저해능력 조성물
CN117447480A (zh) E20在化疗致卵巢损伤保护中的应用
KR100822887B1 (ko) 치매의 치료 또는 예방을 위한 조성물
JP4418039B2 (ja) 新規ジナフトフランキノン誘導体

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
A107 Divisional application of patent
E902 Notification of reason for refusal
N231 Notification of change of applicant
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant
FPAY Annual fee payment

Payment date: 20130617

Year of fee payment: 4

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20140617

Year of fee payment: 5

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20150623

Year of fee payment: 6

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20160630

Year of fee payment: 7

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20170623

Year of fee payment: 8