KR100967814B1

KR100967814B1 - 자초추출물로부터 분리되는 시코닌을 유효성분으로함유하는 비만의 예방 또는 치료용 조성물

Info

Publication number: KR100967814B1
Application number: KR1020080021666A
Authority: KR
Inventors: 박지호; 황은주; 박유경; 김선여; 강철훈; 손낙원; 조여원
Original assignee: 진도군
Priority date: 2008-03-07
Filing date: 2008-03-07
Publication date: 2010-07-05
Also published as: KR20090096225A

Abstract

본 발명은 자초추출물로부터 분리되는 시코닌(shikonin)을 유효성분으로 함유하는 조성물에 관한 것으로서, 구체적으로 본 발명의 시코닌은 3T3-L1 세포의 지방분화 억제 또는 아포토시스의 유발을 확인함으로써, 비만의 예방 및 치료를 위한 약학조성물 또는 건강기능식품으로 유용하게 이용될 수 있다.

자초추출물, 시코닌(shikonin), 3T3-L1 세포, 지방분화억제, 아포토시스, 비만

Description

자초추출물로부터 분리되는 시코닌을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 또는 치료용 조성물 {A composition comprising shikonin isolated from an extract of Lithospermum erythrorhizon for preventing or treating obesity}

본 발명은 자초추출물로부터 분리되는 시코닌을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다.

[문헌 1] Van der Ploeg LH., Curr Opin Chem Biol 4(4), pp. 452-460, 2000

[문헌 2] 박현우 et al., 비만치료제 기술가치평가. 한국과학기술정보연구원, pp. 1-34, 2004

[문헌 3] Stuart P. Weisberg. et al., J. Clin . Invest (112), pp. 1796-1808, 2003

[문헌 4] Xin, C. et al., Phytotherapy Research 16(3), pp. 199-209, 2002

[문헌 5] J. Korean Soc . Food Sci . Nutr 28(5), pp 984-989, 1999

[문헌 6] Weng, X. C. et al., Food Chemistry 69(2), pp. 143-146, 2000

[문헌 7] Kamei. R, et al., Biochem . Biophys . Res . Commun . 292, pp. 642-651, 2002

[문헌 8] Harmon, A. W., Harp, J. B., Am . J. Physiol . Cell Physiol (280), pp. 807-813, 2001

[문헌 9] Takada, E. et al., J. Immunol (166), pp. 1641-1649, 2001

[문헌 10] Kyung Jin Lee, Chul Yung Choi, Young Chul Chung, Young Sup Kim, Si Yung Ryu, Seong Hwan Roh and Hye Gwang Jeong., Toxicology Letters, 147, p271, 2004

비만이란 체지방의 과잉축적에 기인하는 건강잔해의 합병을 보이거나 임상적으로 그 합병이 예측되는 경우의 의학적 감량을 필요로 하는 질병으로 당뇨병, 고혈압, 고지혈증, 심장질환, 관절염, 호흡기질환, 성기능 장애, 암 발생 등에 중요한 위험 인자이다. 비만은 원인에 따라 크게 2가지 형태로 분류될 수 있다. 하나는 단순성(조절성) 비만으로 비만환자의 99% 이상을 차지하며 음식물 섭취량 조절이 잘 되지 않아 칼로리의 섭취와 소비의 불균형으로 생긴 비만이다(Van der Ploeg LH., Curr Opin Chem Biol 4(4), pp. 452-460, 2000). 또다른 하나는 증후성(대사성 또는 내분비성) 비만으로 비만환자의 1% 미만으로 비만 신체의 영양대사 장애로 인해 체지방이 축적되어 생긴 비만이다(박현우. et al., 비만치료제 기술가치평가. 한국과학기술정보연구원, pp. 1-34, 2004).

또한 지방세포의 유형에 따라 크게 2가지 형태로 분류될 수 있다. 하나는 선천적 비만(세포증식형)으로 지방세포의 크기는 정상이나 지방세포 수가 왕성하게 증가하여 생긴 경우이며, 대부분 생후 1년의 어린 연령층에 발생하므로 유전인 적으로 보며 일명 소아비만이라고도 한다(박현우. et al., 비만치료제 기술가치평가. 한국과학기술정보연구원, pp. 1-34, 2004). 또다른 하나는 후천적 비만(세포비대형)으로 지방세포의 수는 정상이나 지방세포의 크기가 증가하여 비만이 된 경우로 대부분 성인이 된 이후 시작되어 중년의 연령에서 주로 발병한다(박현우. et al., 비만치료제 기술가치평가. 한국과학기술정보연구원, pp. 1-34, 2004).

최근 비만 인구가 급격히 증가하면서 비만의 치료 및 예방에 관한 관심이 증가되고 있다. 비만한 사람은 당뇨병, 고혈압, 고지혈증, 심장질환, 관절염, 호흡기질환, 성기능 장애, 암 등의 질병에 대한 발병율이 높고 평균수명도 감소된다(Stuart P. Weisberg. et al., J. Clin . Invest (112), pp. 1796-1808, 2003). 비만의 치료방법으로는 식사요법, 운동요법, 행동조절요법, 약물치료, 치아교정, 위절제술 등이 있으나 최근에는 약물로서의 비만치료제를 사용하는 방법이 활기를 띄고 있다.

현재 비만치료를 위해 임상에서 여려가지 비만치료제들이 사용되고 있으나 변비, 기름기 많은 변, 복부 팽만감, 잦은 방귀, 복통, 입마름, 불면증 등의 여러 가지 부작용을 일으키고 있다. 따라서 비만의 치료를 위해서는 부작용이 없고 다양한 기전을 지닌 약제나 기능성 원료의 개발이 필요하며 다양한 성분을 함유하고 있는 천연물질로부터 물질을 분석하여 비만 치료제의 개발이 요구되는 실정이다.

자초(Lithospermum erythrorhizon ; Siebold & Zuccarini)는 지리적으로 일본, 만주, 중국에 분포하며, 지치과에 속하며, 우리나라 전국 각처의 산야지초원에 자생하였으나 지금은 드물게 나타나며 전라남도 진도 지방에서 많이 재배한다.

자초뿌리에는 홍색을 띤 나프토키논(naphthoquinone) 유도체인 시코닌(Shikonin), 아세틸 시코닌(Acetyl shikonin), 이소부티릴 시코닌(Isobutyryl shikonin), ββ,ββ-디메틸아크릴 시코닌(ββ,ββ-dimethylacryl shikonin), 이소발레릴 시코닌(Isovaleryl shikonin), αα-메틸-n-부티릴 시코닌(αα-methyl-n-butyryl shikonin), 그리고 ββ-히드록시이소발레릴 시코닌(ββ- hydroxyisobaleryl shikonin) 등이 함유되어 있으며, 한방에서는 뿌리를 건위, 황달, 임질, 개선(疥癬), 익기(益氣), 해독, 해열, 이대소변(利大小便), 청열(淸熱), 종창, 화상, 동상, 습진, 물집, 피임약 등에 약재로 사용하며, 민간에서는 불로약으로 사용하기도 한다. 이외에도 항염증, 항균, 그리고 항바이러스 효과 등이 있는 것으로 알려져 있다.

또한 시코닌(shikonin)계 화합물로 상처, 화상 등의 치료연고제로 화장품 원료 및 항생제로 사용하고 있으며, 최근 자초뿌리에 함유된 시코닌계 화합물에 관한 연구에서 항암(Xin, C. et al., Phytotherapy Research 16(3), pp. 199-209, 2002; J. Korean Soc . Food Sci . Nutr 28(5), pp 984-989, 1999) 및 항산화(Weng, X. C. et al., Food Chemistry 69(2), pp. 143-146, 2000) 효과가 있음이 보고된 바 있다. 또한 3T3-L1 지방세포에서 시코닌(shikonin)의 세포내 신호전달은 인슐린과 다르지만, 글루코스의 흡수는 인슐린과 같은 작용을 하는 것이 밝혀졌다(Kamei. R, et al., Biochem . Biophys . Res . Commun . 292, pp. 642-651, 2002).

시코닌(shikonin)이 자초뿌리에 함유되어 있는 화합물로써, 현재까지 이 화합물에 대한 연구는 국내외에 보고되어 있지 않으며, 특히 항비만 작용에 대해서는 기재되거나 교수된 바는 없다.

따라서, 본 발명자는 자초추출물로부터 분리되는 시코닌(shikonin)을 사용하여 지방구 형성 억제 및 지방세포의 아포토시스를 유발하여 비만의 탁월한 효과가 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하게 되었다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 자초추출물로부터 분리되는 시코닌을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 및 치료용 약학조성물을 제공한다.

또한 본 발명은, 자초추출물로부터 분리되는 시코닌을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공한다.

본원에서 정의되는 추출물은 정제수를 포함한 물, 에탄올, 메탄올, 부탄올과 같은 저급 알콜 또는 이들의 혼합용매, 바람직하게는 에탄올에 가용한 추출물을 포함한다.

상기 자초 추출물은 자초의 잎, 열매, 뿌리 또는 가지, 바람직하게는, 뿌리로부터 추출된 추출물을 포함한다.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.

본 발명의 시코닌은 하기와 같이 수득될 수 있다.

본 발명의 상기 자초 추출물은 국내산 자초를 분쇄한 후 동결 건조기에서 건조시키고, 0℃이하 바람직하게는 -20℃ 냉장고에서 보관한후, 자초 중량(kg)의 약 1배 내지 20배, 바람직하게는 약 3배 내지 10배의 물, C₁ 내지 C₄의 저급 알코올 또는 이들의 혼합용매, 바람직하게는 에탄올로 5분 내지 5시간, 바람직하게는 1시간 동안 초음파 추출(ultrasonication)하여 자초 추출물을 수득할 수 있다.

상기 수득한 자초 추출물을 감압하에서 유기 용매를 건조 시키고 잔사를 물에 현탁시켜 클로로포름:에탄올(2:1) 용액과 정제수를 사용하여 수층과 클로로포 름:에탄올 분획으로 나누었으며 클로로포름:에탄올(2:1) 분획을 대상으로 HPLC를 실시하여 시코닌을 분리할 수 있다.

본 발명은 상기의 시코닌을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 및 치료용 약학 조성물을 제공한다.

본 발명의 조성물은, 조성물 총 중량에 대하여 상기 시코닌을 0.1 내지 50 % 중량으로 포함한다.

본 발명의 시코닌을 포함하는 조성물은 통상의 방법에 따른 적절한 담체, 부형제 또는 희석제를 더 포함할 수 있다.

본 발명의 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.

본 발명의 시코닌을 포함하는 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 또는 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.

상세하게는, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 시코닌에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼 슘카보네이트 (calcium carbonate), 수크로스 (sucrose), 락토오스 (lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 및 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔 (witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.

본 발명에 따른 시코닌은 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으나, 일반적으로 0.01 내지 500 mg/㎏의 양, 바람직하게는 0.1 내지 100 mg/㎏의 양을 일일 1회 내지 수회로 나누어 투여할 수 있다. 또한 시코닌의 투여량은 투여경로, 질병의 정도, 성별, 체중, 나이 등에 따라서 증감될 수 있다. 따라서 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.

본 발명의 약학 조성물은 랫트, 마우스, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내(intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다.

본 발명의 시코닌은 독성 및 부작용이 거의 없으므로 예방 목적으로 장기간 복용 시에도 안심하고 사용할 수 있다.

본 발명은 상기 시코닌을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공한다.

본 발명의 시코닌을 포함하는 조성물은 비만의 예방을 위한 약제, 식품 및 음료 등에 다양하게 이용될 수 있다.

본 발명의 시코닌을 첨가할 수 있는 식품으로는, 각종 식품류, 예를 들어, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강보조 식품류 등이 있으며, 환제, 분말, 과립, 침제, 정제, 캡슐 또는 음료인 형태로 사용할 수 있다.

이때, 식품 또는 음료 중의 상기 시코닌의 양은, 일반적으로 본 발명의 건강식품 조성물의 경우 전체 식품 중량의 0.01 내지 15 중량%로 가할 수 있으며, 건강 음료 조성물의 경우 100 ㎖를 기준으로 0.02 내지 10 g, 바람직하게는 0.3 내지 1 g의 비율로 가할 수 있다

본 발명의 건강 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 시코닌을 함유하는 외에는 액체성분에는 특별한 제한점은 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예로는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린; 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제 (타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등)) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖당 일반적으로 약 1 내지 20 g, 바람직하게는 약 5 내지 12 g이다.

상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 조성물들은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.

본 발명의 시코닌은 지방세포의 지방 분화 억제 및 지방세포의 아포토시스의 증가를 나타내는 바, 비만의 예방 및 치료용 약학조성물 및 건강기능식품으로 유용하게 사용될 수 있다.

이하, 본 발명을 하기 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다.

단, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용 이 하기 실시예, 참고예 및 실험예에 의해 한정되는 것은 아니다.

실시예 1. 자초 추출물의 제조

경동시장에서 구입한 국내산 자초를 1cm 크기로 분쇄한 후 동결 건조기에서 건조시킨 후 -20℃ 냉장고에 보관한 후, 건조 시료 100g을 85 % 에탄올(EtOH) 1000ml로 1시간 동안 초음파 추출(ultrasonication)하여 자초 7g을 수득하였다(도 1 참조).

실시예 2. 시코닌의 분리 및 정제

상기 실시예 1에서 수득한 자초 추출물을 감압하에서 유기 용매를 건조 시키고 잔사를 물에 현탁시켜 클로로포름:에탄올(2:1) 용액과 정제수를 사용하여 수층과 클로로포름:에탄올 분획으로 나누었으며 클로로포름:에탄올(2:1) 분획을 대상으로 HPLC를 실시하였다. HPLC 분석조건은 아세토니트릴(acetonitrile) 60%와 증류수 40%을 0~15분까지 컬럼에 계속 흘려 보내주다가 15~30분에는 아세토니트릴의 양을 점점 늘려서 100%까지 증가시켰다. 30~40분까지는 아세토니트릴을 100%로 유지시켜 주었으며, 40분이후로는 다시 60%로 감소켰다. 상기 분석조건으로 반-분취(semi-preparative) HPLC를 이용하여 각각의 성분을 분리하여 시코닌 570mg을 수득하였다(도 2 참조).

참조예 1. 세포배양

3T3-L1 세포주는 ATCC(CL-173)에서 구입하였고, 10% FBS (16000-044, Gibco BRL, 미국), 1% 페니실린 및 스트렙토마이신 (15140-122, Gibco BRL, 미국)으로 혼합된 DMEM 배양액 (30-2002, ATCC, 미국)에서 37℃, 5% CO₂ 조건하에 배양하였으며, 배지는 이틀에 한번 교체 하였다.

실험예 1. 지방 분화 억제 실험

시코닌의 세포 생존능 효과를 확인하기 위하여 기존문헌에 기재된 방법을 응용하여 하기와 같은 실험을 하였다(Harmon, A. W., Harp, J. B., Am . J. Physiol . Cell Physiol (280), pp. 807-813, 2001).

지방전구세포인 3T3-L1 세포를 35mm 플레이트에 1× 10⁶ cell/ml로 분주한 후 세포밀도가 약 100%가 되면 지방 분화 호르몬인 0.5mM IBMX(3-isobutyl-1-methylxantin), 1μM 덱사메타손(Dexamethasone) 및 10μg/ml 인슐린(Insulin)을 넣고, 농도 별로 녹인 시코닌을 48시간 처리하여 배양하였다. 세포배양액을 10μM 인슐린과 농도 별로 녹인 시코닌이 든 배양액으로 치환하고, 이어 매 2일마다 세포배양액을 치환하였다. 현미경으로 지방구 형성이 90% 이상이 되었는지 확인을 한 뒤, 배지를 제거하고 Oil Red O 염색을 하여 지방구 형성을 측정하였다. 90% 이상의 세포가 지방세포로 분화하기까지는 약 12일 정도가 소요되었다.

실험결과, 도 3에서 나타내는 바와 같이 시코닌을 농도 별로 처리하였을때, 지방 분화 억제를 농도 별로 뚜렷히 감소됨을 확인 할 수 있었다(도 3 참조).

실험예 2. 아포토시스 ( Apoptosis ) 유발 실험

시코닌이 3T3-L1 세포의 아포토시스를 유발하여 지방세포의 세포사를 일으켜 지방형성 억제 효과를 확인하기 위하여 기존문헌에 기재된 방법을 응용하여 하기와 같은 실험을 하였다 (Takada, E. et al., J. Immunol (166), pp. 1641-1649, 2001).

세포를 60mm plate에 1 × 10⁶cells/ml의 양으로 분주하여 24시간동안 배양 후, 시코닌을 각각 1μM, 2μM, 4μM, 10μM의 농도별로 처리하고, 각각 24시간, 48시간, 72시간 배양하였다. 0.25% triypsin-EDTA 2ml을 넣고 3분간 배양하고, 300g, 4℃에서 5분간 원심분리하였다. 상층액을 조심스럽게 제거하고 PBS로 3회 세척한 뒤, 아이스 에탄올 5ml을 추가하여 2시간 이상 배양하여 세포를 고정하였다. 아이스 에탄올을 제거하고 PBS로 2회 세척하고, RNase A(R6513, Sigma, 미국) (1mg/ml) 용액 100μl를 넣고 상온에서 30분간 배양한 후, PI(propidium iodide, 50μl/ml) 염색 용액(P4170, Sigma, 미국) 400μl를 넣어 볼텍싱을 하고, 4℃에서 30분 동안 차광 상태로 배양하였다. 필터(352340, BD, 미국)로 필터하고 FACs(fluorescence activated cell sorter)용 튜브에 옮기고 FACs(FACSVantage SE, BD, 미국)에서 아포토시스를 측정하였다.

실험결과, 도 4에서 나타내는 바와 같이 시코닌(shikonin)을 각각의 농도별 및 시간별 처리하였을 때, 시코닌의 농도가 증가할수록 지방세포의 아포토시스 유 발을 증가시키는 것을 볼 수 있었으며 또한, 시간이 지날수록 지방세포의 아포토시스가 증가함을 확인 할 수 있었다. 따라서 시코닌의 지방 형성 억제 효과가 탁월한 것으로 관찰되었다(도 4 참조).

실험예 3. 세포독성실험

시코닌의 세포 독성을 확인하기 위하여 기존문헌에 기재된 방법을 응용하여 하기와 같은 실험을 하였다 (Kyung Jin Lee, Chul Yung Choi, Young Chul Chung, Young Sup Kim, Si Yung Ryu, Seong Hwan Roh and Hye Gwang Jeong., Toxicology Letters, 147, p271, 2004).

세포독성 분석을 위해 96-웰 마이크로티터 플레이트(48-well microtiter plate)에 세포농도 1× 10⁴ cells/㎖로 조절하여 세포를 분주한 후 농도별로 시코닌을 각 웰(well)에 첨가하여 시간별로 배양한다. 100μl의 MTT [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide]를 첨가하고 4시간 반응시켜 포르마잔(formazan)을 형성시킨 후, 상등액을 제거하고 DMSO 200 μl/well을 가하여 포르마잔을 녹인 다음 ELISA reader(Variokan, Thermo Electron)를 이용하여 540 nm 파장에서 측정한 결과, 도 5에서 나타내는 바와 같이 시코닌은 농도가 증가함에도 독성을 나타내지 않았으나, 배양시간이 증가함에 따라 세포의 독성이 증가되는 것을 확인하였다(도 5 참조).

하기에 본 발명의 시코닌을 함유하는 약학조성물의 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.

제제예 1. 산제의 제조

시코닌 300 mg

유당 100 mg

탈크 10 mg

상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.

제제예 2. 정제의 제조

시코닌 300 mg

옥수수전분 100 mg

유당 100 mg

스테아린산 마그네슘 2 mg

상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.

제제예 3. 캅셀제의 제조

시코닌 300 mg

결정성 셀룰로오스 3 mg

락토오스 14.8 mg

마그네슘 스테아레이트 0.2 mg

통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.

제제예 4. 주사제의 제조

시코닌 300 mg

만니톨 180 mg

주사용 멸균 증류수 2974 mg

Na₂HPO₄12H₂O 26 mg

통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플당 (2 ㎖) 상기의 성분 함량으로 제조한다.

제제예 5. 액제의 제조

시코닌 300 mg

이성화당 10 g

만니톨 5 g

정제수 적량

통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100 ㎖로 조절한 후 갈색 병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조한다.

제제예 6. 건강 식품의 제조

시코닌 1000 ㎎

비타민 혼합물 적량

비타민 A 아세테이트 70 ㎍

비타민 E 1.0 ㎎

비타민 B₁ 0.13 ㎎

비타민 B₂ 0.15 ㎎

비타민 B₆ 0.5 ㎎

비타민 B₁₂ 0.2 ㎍

비타민 C 10 ㎎

비오틴 10 ㎍

니코틴산아미드 1.7 ㎎

엽산 50 ㎍

판토텐산 칼슘 0.5 ㎎

무기질 혼합물 적량

황산제1철 1.75 ㎎

산화아연 0.82 ㎎

탄산마그네슘 25.3 ㎎

제1인산칼륨 15 ㎎

제2인산칼슘 55 ㎎

구연산칼륨 90 ㎎

탄산칼슘 100 ㎎

염화마그네슘 24.8 ㎎

상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.

제제예 7. 건강 음료의 제조

시코닌 300 ㎎

비타민 C 15 g

비타민 E(분말) 100 g

젖산철 19.75 g

산화아연 3.5 g

니코틴산아미드 3.5 g

비타민 A 0.2 g

비타민 B₁ 0.25 g

비타민 B₂ 0.3 g

물 정량

통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간 동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2 ℓ 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강음료 조성물 제조에 사용한다.

상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만 수요계층이나, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.

도 1는 자초 추출물로부터 분리되는 시코닌의 제조과정을 나타낸 도이며,

도 2는 자초 추출물로부터 분리되는 시코닌의 HPLC 결과를 나타낸 도이고,

도 3은 시코닌을 각각의 농도별로 처리했을때의 3T3-L1 지방세포의 지방 분화 형성 억제 효과를 나타낸 도이며,

도 4는 시코닌을 각각의 농도 및 시간별로 처리했을때의 지방세포의 아포토시스 유발 효과를 나타낸 도이고,

도 5는 시코닌의 세포 독성을 나타낸 도이다.

Claims

시코닌을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 및 치료용 약학조성물.
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시코닌을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 및 개선용 건강기능식품.
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