KR101481943B1 - 자초 추출물의 제조방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 자초 추출물의 제조 방법은 인체에 유해한 클로로포름, 벤젠, 핵산 등과 같은 유기 용제를 사용하지 않으면서도, 고가의 생산 설비가 요구되지 않아, 경제적이고, 친환경적인 새로운 추출 방법에 관한 것이다.
본 발명의 자초 추출물의 제조 방법은 자초를 분쇄하는 자초분쇄단계(S10)와, 분쇄된 자초에 분쇄된 자초 중량 대비 5 내지 10배의 에탄올과 에탄올의 중량 대비 0.0001 내지 0.001배의 계면활성제를 혼합한 후, 에탄올의 비등점에서 환류 추출하여 제1추출액을 산출(産出)하는 제1환류추출단계(S20)와, 제1환류추출단계(S20)에서 산출된 제1추출액을 여과하고, 여과액을 진공 농축하여 제1농축액을 산출하는 제1진공농축단계(S30)와, 제1진공농축단계(S30)에서 산출된 제1농축액에 분쇄된 자초 중량 대비 5 내지 10배의 에탄올과, 제1농축액의 중량 대비 2 내지 10배의 오일을 혼합한 후, 에탄올의 비등점에서 환류 추출하여 제2추출액을 산출하는 제2환류추출단계(S40)와, 제2환류추출단계(S40)에서 산출된 제2추출액을 진공 농축하여 제2농축액을 산출하는 제2진공농축단계(S50)와, 제2농축액을 정치(定置)한 후, 제2농축액의 수층을 제거하여 시코닌이 함유된 오일을 산출하는 오일추출단계(S60)로 구성된다.

Description

자초 추출물의 제조방법{The method of Lithosperumum erythrorhizon extration}

본 발명은 자초 추출물의 제조방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 항염증, 피부손상 치유, 면역력 증강, 항산화, 항노화, 더욱 나아가 항암 효과까지 보고 되고 있는 자초의 경제적이면서, 친환경적인 새로운 자초 추출물의 제조방법에 관한 것이다.

자초(Lithosperumum erythrorhizon; Siebold & Zuccarini)는 지리적으로는 일본, 만주, 한국, 중국에 분포하며, 지치과에 속하며, 우리나라 전국에 분포하고 있고, 특히, 전라남도 진도지역에서 많이 재배되며, 진도 홍주의 원료로 이용되어 왔다.

자초는 중국의 한의서인 신농본초경에도 수록되어 있는 것으로서, 한방에서는 소염, 해열, 해독을 목적으로 하는 처방전에 배합하여 사용되고 있으며, 종양, 화상, 동상, 수포, 치질 등의 연고로서 외용되고 있다.

지초의 유용 성분은 시코닌(shikonin)과 시코닌 유도체이다.

Y. Tanaka 등은 자초 자근의 색소인 시코닌 유도체가 항균 작용이 있음을 보고한 바 있으며, 이들이 보고한 바에 따르면, 시코닌 유도체는 그람양성균(Gram positive bacillus)인 황색포도상구균(Stapyhylococcus aureus), 살시나 루테아(Sarcina Lutea) 및 바실러스균(Basillus subtilis)에 대하여서 항균 작용이 있으며, 유효농도는 50-500㎍/㎖ 임을 밝힌 바 있다.

또한, 대한민국 등록특허공보 제10-0967814호 "자초추출물로부터 분리되는 시코닌을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 또는 치료용 조성물"(등록일자 : 2010.06.28)에는 자초추출물로부터 분리되는 시코닌을 사용하여 지방구 형성 억제 및 지방세포의 아포토시스를 유발하여 비만에 효과가 있다는 것이 개시되어 있다.

시코닌은 나프토퀴논(naphthoquinone) 유도체 물질로, 그 아류 화합물로서 아세틸시코닌(acetyl shikonin), 더하이드로 시코닌(dehydro shikonin), 이소브티릴 시코닌(isobutyryl shikonin), β-디메딜아크릴 시코닌(β-dimethylacryl shikonin) 등이 있으며, 이러한 화합물들 모두 핵산, 클로로포름, 석유에테르, 에탄올 등에는 쉽게 용해되나, 물에 대한 용해도는 극히 낮은 특성을 갖는다.

따라서, 종래의 경우 자초로부터 유용 성분을 추출하기 위한 자초 추출물의 제조방법은 벤젠, 석유에테르, 핵산, 클로로포름 등을 이용한 유기 용매 추출법을 사용하고 있다.

대한민국 특허공보 제89-001237호 "자근 색소의 추출방법"(공고일자 : 1989.04.28)에는 벤젠 또는 헥산을 사용한 공지의 방법으로 추출한 자근 추출액에 추출액량의 0.5-2배량의 저급 알코올 및 0.01N-0.5N 수산화나트륨 수용액을 각각 가하고 진탕하여 방치한 후 수층을 분리하고 분리한 수층 pH를 2-3으로 조정한 다음, 여기서 동량의 벤젠, 헥산 또는 클로로포름을 가하고 진탕 방치한 후 유기용매층을 분리하고 농축하여 자초 100g에 대해서 자근 색소 혼합물 343㎎을 획득한 자근 색소의 추출방법이 개시되어 있다.

또한, 대한민국 등록특허공보 제10-0967814호 "자초추출물로부터 분리되는 시코닌을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 또는 치료용 조성물"에는 국내산 자초를 분쇄한 후 동결 건조기에서 건조시키고, 0℃이하 바람직하게는 -20℃ 냉장고에서 보관한후, 자초 중량(kg)의 약 1배 내지 20배, 바람직하게는 약 3배 내지 10배의 물, C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합용매, 바람직하게는 에탄올로 5분 내지 5시간, 바람직하게는 1시간 동안 초음파 추출(ultrasonication)하여 자초 추출물을 수득하고, 수득한 자초 추출물을 감압하에서 유기 용매를 건조 시키고 잔사를 물에 현탁시켜 클로로포름:에탄올(2:1) 용액과 정제수를 사용하여 수층과 클로로포름:에탄올 분획으로 나누어 클로로포름:에탄올(2:1) 분획을 대상으로 HPLC를 실시하여 시코닌을 분리하여, 시코닌을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 및 치료용 약학 조성물이 개시되어 있다.

상기와 같이 클로로포름, 핵산 등의 유기 용매로 분획하는 종래의 자초 추출물의 제조방법은 연구자에 따라 자초로부터 유용 성분 추출시 수율의 변동 폭이 크고, 클로로포름, 핵산 등의 유기 용매는 상온에서 휘발성이 강하므로, 작업자에게 노출되기 쉬우며, 노출될 경우 작업자에게 가볍게는 현기증이나 두통을 유발시키며, 심지어는 신경마비, 백혈병 등을 유발시킬 수 있는 문제점을 가지고 있다.

상기와 같은 문제점을 극복하기 위해 대한민국 공개특허공보 제10-2013-0121384호 "초임계 유체추출장치를 이용한 시코닌 및 그 유도체를 함유하는 자초 추출물의 제조방법 및 그 산물"(공개일자 : 2013.11.06)에는 자초를 분쇄하는 단계와, 상기 분쇄한 자초를 초임계 유체추출기에 충진하는 단계와, 상기 초임계유체 추출기에 충진된 상기 분쇄한 자초를 압력 200bar, 온도 50℃에서 CO2 유속 20mL/min의 조건으로 40분간 추출하는 단계와, 상기 추출물을 추출물 100 중량부를 기준으로 하여 2배의 정제수를 첨가하여 감압농축 하는 단계와, 상기 감압 농축물을 동결건조하여 통상의 유기용매 추출법을 이용한 94% 에탄올에서 추출한 추출물에는 β-Hydroxyisovalerylshikonin 0.020%, Acetylshikonin 0.614% 인 반면, 초임계 유체추출장치에 의해 Shikonin 0.958%, β-Hydroxyisovalerylshikonin 1.461%, Acetylshikonin 5.257%, Isobutylshikonin 2.581% 측정되었다고 시코닌 및 그 유도체 함유 자초 추출물의 제조 방법이 개시되어 있으나, 이 방법은 클로로포름이나, 벤젠과 같은 유독 유기 용매를 사용하지는 않으나, 작업성이 낮고, 고가의 초임계 추출 장비가 필요한 문제점을 가지고 있다.

대한민국 특허공보 제89-001237호 "자근 색소의 추출방법"(공고일자 : 1989.04.28) 대한민국 등록특허공보 제10-0967814호 "자초추출물로부터 분리되는 시코닌을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 또는 치료용 조성물"(등록일자 : 2010.06.28) 대한민국 공개특허공보 제10-2013-0121384호 "초임계 유체추출장치를 이용한 시코닌 및 그 유도체를 함유하는 자초 추출물의 제조방법 및 그 산물"(공개일자 : 2013.11.06)

본 발명의 목적은 자초 추출물을 제조하는 공정 중에 인체에 유해한 클로로포름, 벤젠, 핵산 등과 같은 유기 용제를 사용하지 않으며, 초임계 추출장치와 같은 고가의 생산 설비가 요구되지 않아, 경제적이고, 인체에 무해한 자초 추출물의 제조방법을 제공하는 데 있다.

상기의 목적을 달성하기 위하여 본 발명의 자초 추출물의 제조방법은 자초를 분쇄하는 자초분쇄단계; 분쇄된 자초에 분쇄된 자초 중량의 5 내지 10배의 에탄올과 상기 에탄올의 중량 대비 0.0001 내지 0.001배의 계면활성제를 혼합한 후, 상기 에탄올의 비등점에서 환류 추출하여 제1추출액을 산출하는 제1환류추출단계; 상기 제1환류추출단계에서 산출된 제1추출액을 여과하고, 여과액을 진공 농축하여 제1농축액을 산출하는 제1진공농축단계: 상기 제1진공농축단계에서 산출된 제1농축액에 상기 분쇄된 자초 중량 대비 5 내지 10배의 에탄올과, 상기 제1농축액의 중량 대비 2 내지 10배의 오일을 혼합한 후, 상기 에탄올의 비등점에서 환류 추출하여 제2추출액을 산출하는 제2환류추출단계; 상기 제2환류추출단계에서 산출된 제2추출액을 진공 농축하여 제2농축액을 산출하는 제2진공농축단계; 및 상기 제2농축액을 정치한 후, 제2농축액의 수층을 제거하여 시코닌이 함유된 오일을 산출하는 오일추출단계를 구비한 것을 특징으로 한다.

또한, 본 발명의 자초 추출물의 제조방법은 상기 오일추출단계에서 시코닌이 함유된 오일 내부에 잔존하는 수분을 제거하는 수분제거단계를 더 구비한 것을 특징으로 한다.

본 발명의 자초 추출물의 제조방법은 에탄올과 식용유화제 및 오일을 사용하여 자초 추출물을 추출하고, 자초 추출물의 제조 과정에서 진공 농축에 의해 에탄올을 제거하므로서 클로로포름, 벤젠, 핵산과 같은 인체에 유해한 유기 용제를 사용하지 않고서도 인체에 무해한 자초 추출물을 획득할 수 있으며, 이와 같이 인체에 무해한 자초 추출물을 이용하여 피부용제, 화장품, 소프트 캅셀 등에 사용하더라도 인체에 전혀 해가 발생되지 않으며, 고가의 장비가 필요없으므로 저렴하게 자초 추출물을 제조할 수 있다.

도 1은 본 발명의 자초 추출물의 제조방법의 공정순서도이다.

이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 자초 추출물의 제조방법을 상세히 설명하고자 한다.

도 1은 본 발명의 자초 추출물의 제조방법의 공정순서도이다.

도 1에 도시된 바와 같이 본 발명의 자초 추출물의 제조방법은 자초를 분쇄하는 자초분쇄단계(S10)와, 분쇄된 자초에 분쇄된 자초 중량의 5 내지 10배의 에탄올과 에탄올의 중량 대비 0.0001 내지 0.001배의 계면활성제를 혼합한 후, 에탄올의 비등점에서 환류 추출하여 제1추출액을 산출(産出)하는 제1환류추출단계(S20)와, 제1환류추출단계(S20)에서 산출된 제1추출액을 여과하고, 여과액을 진공 농축하여 제1농축액을 산출하는 제1진공농축단계(S30)와, 제1진공농축단계(S30)에서 산출된 제1농축액에 분쇄된 자초 중량 대비 5 내지 10배의 에탄올과, 제1농축액의 중량 대비 2 내지 10배의 오일을 혼합한 후, 에탄올의 비등점에서 환류 추출하여 제2추출액을 산출하는 제2환류추출단계(S40)와, 제2환류추출단계(S40)에서 산출된 제2추출액을 진공 농축하여 제2농축액을 산출하는 제2진공농축단계(S50)와, 제2농축액을 정치(定置)한 후, 제2농축액의 수층을 제거하여 시코닌이 함유된 오일을 산출하는 오일추출단계(S60)로 구성된다.

또한, 본 발명의 자초 추출물의 제조방법은 오일추출단계(S60)에서 시코닌이 함유된 오일 내부에 잔존하는 수분을 제거하는 수분제거단계(S70)를 더 구비할 수 있다.

또한, 상기 계면활성제는 친수친유기평형(親水親有基平衡)(HLB :Hhydrophile-Lipophile balance)가 15이하의 식용유화제로, 글리세린 자방산에스테르, 글리세린아세트산지방산에스테르, 글리세린락트지방산에스테르, 글리세린스트리산자방산에스테르, 글리세린숙신산지방산에스테르, 글리세린아세틸타르타르산지방산에스테르, 폴리글리세린지방산에스테르, 폴리글리세린축합리시놀레산에스테르, 설탕지방산에스테르, 폴리옥시에틸렌(20)소르비탄스테아레이트(폴리솔르베이트 60), 폴리소르베이트 65(트리스테아레이트) 및 폴리소르베이트 80(모노올레이트) 종에서 선택된 식용유화제 1종 또는 그 이상의 혼합물이다.

또한, 상기 오일은 식물성 오일, 동물성 오일 및 광물성 오일 종에서 선택된 오일 1종 또는 그 이상의 혼합물로, 요오드화 값이 130 이하이다.

상기의 구성에 따른 본 발명인 자초 추출물의 제조방법의 동작은 다음과 같다.

도 1에 도시된 바와 같이 자초분쇄단계(S10)는 건조시킨 자초를 분쇄기를 사용하여 분쇄한다.

제1환류추출단계(S20)는 분쇄된 자초에 분쇄된 자초 중량의 5 내지 10배의 에탄올과 에탄올의 중량 대비 0.0001 내지 0.001배의 계면활성제를 혼합한 후, 에탄올의 비등점인 80℃에서 4시간 정도 환류 추출하여 제1추출액을 산출(産出)한다.

에탄올은 50% 이상의 농도을 갖는 에탄올을 사용하며, 에탄올의 농도가 낮으면 자초의 용해도가 감소되어 시코닌을 갖는 자초 추출물의 수율이 감소되게 된다.

자초는 공극을 많이 가지고 있어 자초 중량 대비 충분한 양의 에탄올을 첨가하는 것이 바람직하며, 대략 자초 중량 대비 5 내지 10배를 첨가한다.

시코닌과 시코닌 유기체를 함유하는 자초는 핵산, 클로로포름, 석유에테르 등과 같은 유기용제는 쉽게 용해되나, 물에 대한 용해도는 극히 낮은 특성을 가지며, 에탄올은 유기용제 보다는 용해도가 낮으나, 물 보다는 용해도가 높기 때문에 본 발명은 자초를 용해시키기 위해 에탄올을 사용한다.

그러나, 에탄올의 용해도는 유기용제 보다는 낮기때문에 자초의 용해도를 증가시키기 위해 에탄올과 함께 계면활성제를 첨가하며, 계면활성제는 특히 친수친유기평형(HLB :Hhydrophile-Lipophile balance) 값이 15이하의 것을 사용하며, 계면활성제의 친수친유기평형값이 작을수록, 즉 계면활성제가 소수성의 특성이 높아질 수록 자초가 에탄올에 용해되는 용해도는 증가하게 된다.

친수친유기평형(HLB) 값은 계면활성제의 친수성, 소수성을 나타내는 지수로서, 이 값이 증가할수록 친수성, 감소할수록 소수성을 띄게 된다. 최대 값이 40으로, 샴푸나 액상 세제에 많이 사용되는 Sodium lauryl sulfate가 40이며, sorbitan trioleate가 1.8로 가장 소수성이다

이러한 계면활성제들 중에서도 식용이 가능한 인체에 무해한 식용유화제를 사용한다.

본 발명의 경우 식용유화제로, 글리세린 자방산에스테르, 글리세린아세트산지방산에스테르, 글리세린락트지방산에스테르, 글리세린스트리산자방산에스테르, 글리세린숙신산지방산에스테르, 글리세린아세틸타르타르산지방산에스테르, 폴리글리세린지방산에스테르, 폴리글리세린축합리시놀레산에스테르, 설탕지방산에스테르, 폴리옥시에틸렌(20)소르비탄스테아레이트(폴리솔르베이트 60), 폴리소르베이트 65(트리스테아레이트) 및 폴리소르베이트 80(모노올레이트) 종에서 선택된 식용유화제 1종 또는 그 이상의 혼합물을 사용한다.

분쇄된 자초에 에탄올과 함께 첨가되는 계면활성제는 에탄올의 중량 대비 0.0001 내지 0.001배의 미소량을 첨가하며, 첨가되는 계면활성제의 중량이 에탄올의 중량 대비 0.0001배 보다 작으면 계면활성제의 첨가되는 양이 너무 작아 자초 추출물의 효율이 감소되며, 첨가되는 계면활성제의 중량이 에탄올의 중량 대비 0.001배 보다 크면 후공정인 오일추출단계(S60)에 추출된 오일 내에 잔류하는 계면활성제의 양이 많아지게 되어 품질 저하가 발생된다.

상기와 같이 제1환류추출단계(S20)에 의해 자초가 용해된 에탄올과 계면활성제가 혼합된 제1추출액이 제조된다.

제1진공농축단계(S30)는 제1환류추출단계(S20)에서 산출된 제1추출액을 30℃ 온도로 냉각한 후, 1㎛ 필터를 사용하여 여과시켜 여과액을 50℃의 온도범위에서 진공 농축하여 제1농축액을 산출한다. 제1환류추출단계(S20)에서 추출된 제1추출액은 80℃ 온도 범위에 있게 되므로, 먼저, 제1추출액을 30℃ 정도로 냉각시킨 후, 제1추출액에는 에탄올에 용해된 시코닌을 함유하는 자초 추출물외에 에탄올에 용해되지 않는 자초 부산물이 있으므로 제1추출액을 여과시켜 자초 부산물을 제거시킨다.

자초 추출물이 용해된 에탄올과 미소량의 계면활성제로 구성된 제1추출액을 진공(감압) 농축기에 의해 농축시켜 자초 추출물이 포함된 제1농축액을 산출한다. 이때, 진공 농축시 에탄올은 기화되면서 휘발되어 제거된다.

제2환류추출단계(S40)는 제1진공농축단계(S30)에서 산출된 제1농축액에 분쇄된 자초 중량 대비 5 내지 10배의 에탄올과, 제1농축액의 중량 대비 2 내지 10배의 오일을 혼합한 후, 에탄올의 비등점인 80℃에서 4시간 정도 환류 추출하여 제2추출액을 산출한다, 이는 제1환류추출단계(S20)와 동일한 방법이나, 오일을 혼합하여 자초 추출물이 포함된 오일층을 제조하여, 자초 추출물이 포함된 오일을 용도에 맞게 피부용제, 화장품 등에 바로 사용할 수 있도록 한다.

제2환류추출단계(S40)에 오일과 제1농축액은 서로 혼합이 잘 되지 못하므로, 에탄올을 첨가하여 오일과 제1농축액 상호간에 혼합이 잘되게 된다.

오일은 식물성 오일, 동물성 오일 및 광물성 오일 종에서 선택된 오일 1종 또는 그 이상의 혼합물의 오일을 사용하며, 바람직하게는 지방 100g이 흡수하는 요오드량으로 나타내는 요오드화 값(iodin value)이 130 이하인 것으로, 예를 들면, 면실유, 참깨유, 미강유, 올리브유, 소기름, 또는 야자유 등과 같은 반건성유 또는 불건성유가 바람직하다.

요오드화 값이 130 이상인 대두유, 해바라기유, 유채유 등을 사용하지 못하는 것은 아니지만, 보관과 사용의 안전성을 고려할 때, 건성유 보다는 반건성유, 또는 불건성유가 보다 바람직하다.

오일은 사용용도에 따라, 적절한 양을 사용하면 되나, 제1농축액의 중량 대비 2 내지 10배를 혼합하는 것이 바람직하다.

제2진공농축단계(S50)는 제2환류추출단계(S40)에서 산출된 제2추출액을 50℃에서 진공 농축하여 제2농축액을 산출하며, 이때 제2추출액에 혼합된 에탄올은 완전히 제거된다.

오일추출단계(S60)는 에탄올이 완전히 제거된 제2농축액을 20℃로 냉각시킨 후, 2시간 정도 정치(定置)하여 수층과 오일층으로 분획시킨 후, 분획깔때기를 사용하여 제2농축액 중 수층을 제거하여 시코닌이 함유된 오일층만을 추출한다.

상기의 오일추출단계(S60)에서 추출된 시코닌이 함유된 오일층을 그대로 사용하여도 무방하나, 오일층 내부에 수분이 잔존할 경우 잔존하는 수분에 의해 오일층 내에 미생물이 번식할 수 있으며, 이로 인해 제품의 품질 저하가 발생될 수 있으므로 오일추출단계(S60) 후, 수분제거단계(S70)에서 시코닌이 함유된 오일 내부에 잔존하는 수분을 완전히 제거한다.

수분제거단계(S70)는 수분 제거를 위해 무수황산나트륨을 사용하여 시코닌이 함유된 오일 내부에 잔존하는 수분을 제거한 후, 필터를 사용여과시켜, 수분이 포함된 무수황상나트륨을 제거시키고, 여과된 시코닌이 함유된 오일층을 얻을 수 있다.

이하, 본 발명의 바람직한 실시예는 다음과 같다.

분쇄한 자초 1,000g에 분쇄한 자초의 중량 대비 5배인 70% 에탄올 수용액 5,000g을 가하고, 친수친유기평형(HLB) 값이 15이하인 식용유화제인 글리세린아세트산지방산에스테르를 에탄올의 중량 대비 0.0008배인 4g을 첨가한 후, 에탄올의 비등점인 80℃에서 4시간 동안 환류추출장치를 사용하여 환류(reflux)시킨다.

환류 추출후, 추출액을 30℃로 냉각 시킨후, 1㎛ 필터로 여과하여 에탄올에 용해되지 않은 자초의 부산물을 제거한 후, 진공농축기를 사용하여 50℃에서 진공 농축하여, 농축액 400g이 될 때까지 농축한다.

농축액 400g에 분쇄된 자초 중량 대비 5배인 에탄올 2,000g과 반건성유인 요오드화값이 110∼123 인 미강유(Rice Bran Oil)를 농축액 중량 대비 5배인 2,000g을 첨가하여 혼합하고, 재차 환류추출장치와 진공농축기를 사용하여 에탄올의 비등점인 80℃로 4시간 환류 시킨후, 진공 농축하여, 진공 농축된 농축액 내의 에탄올을 완전히 제거시킨다.

농축액 내의 에탄올을 완전히 제거한후, 20℃로 냉각한후, 2시간 동안 정치하고, 분획깔때기를 사용 분획하여, 수층과 미강유층을 분획하여, 미강유층만을 추출한다.

미강유층에 무수황산나트륨 200g을 가하여, 미강유층 내부에 존재할수 있는 여분의 수분을 제거한후, 여과하여, 시코닌이 함유된 미강유 1,800g을 획득하였다.

미강유 중의 시코닌의 존재를 확인하기 위하여, 순상 HPLC(waters 2696 Seperations Module)로 분석하였다. Colum은 Xbridge C18 5㎛ 4.6×150㎜ Colum(Waters, Ireland)을 사용하였고, 검출기는 Photodiode Array Dector(2996, Waters, USA)로 파장은 520 ㎚에서 검출하였다.

본 발명에 의해 제조된 시코닌이 함유된 미강유에서의 시코닌의 총 함량은 미강유 1㎖당 5㎎ 이였다.

따라서, 상기 실시예에 따른 분쇄된 자초 1,000g에 대하여 1,800g의 미강유를 획득하였으므로, 미강유에는 9g 정도의 시코닌이 함유되어 있어, 본 발명의 따른 시코닌의 추출 수율은 0.9% 인 것을 알 수 있으며, 이는 전술한 대한민국 특허공보 제89-001237호 "자근 색소의 추출방법"의 경우 수율이 0.343% 이고, 대한민국 공개특허공보 제10-2013-0121384호 "초임계 유체추출장치를 이용한 시코닌 및 그 유도체를 함유하는 자초 추출물의 제조방법 및 그 산물"에 개시된 통상의 유기용매 추출법을 이용한 94% 에탄올에서 추출한 추출물의 경우 수율이 0.634% 인 것에 비해 높은 수율을 획득할 수 있음을 알 수 있다.

이와 같이 본 발명의 자초 추출물의 제조방법은 인체에 유해한 유기용제를 사용하지 않으면서도, 높은 수율의 시코닌을 획득할 수 있다.

Claims (5)

1. 자초를 분쇄하는 자초분쇄단계(S10);
   분쇄된 자초에 분쇄된 자초 중량의 5 내지 10배의 에탄올과 상기 에탄올의 중량 대비 0.0001 내지 0.001배의 계면활성제를 혼합한 후, 상기 에탄올의 비등점에서 환류 추출하여 제1추출액을 산출하는 제1환류추출단계(S20);
   상기 제1환류추출단계(S20)에서 산출된 제1추출액을 여과하고, 여과액을 진공 농축하여 제1농축액을 산출하는 제1진공농축단계(S30):
   상기 제1진공농축단계(S30)에서 산출된 제1농축액에 상기 분쇄된 자초 중량대비 5 내지 10배의 에탄올과, 상기 제1농축액의 중량 대비 2 내지 10배의 오일을 혼합한 후, 상기 에탄올의 비등점에서 환류 추출하여 제2추출액을 산출하는 제2환류추출단계(S40);
   상기 제2환류추출단계(S40)에서 산출된 제2추출액을 진공 농축하여 제2농축액을 산출하는 제2진공농축단계(S50); 및
   상기 제2농축액을 정치한 후, 제2농축액의 수층을 제거하여 시코닌이 함유된 오일을 산출하는 오일추출단계(S60)를 구비한 것을 특징으로 하는 자초 추출물의 제조방법.
   
2. 제 1 항에 있어서, 상기 오일추출단계(S60)에서 시코닌이 함유된 오일 내부에 잔존하는 수분을 제거하는 수분제거단계(S70)를 더 구비한 것을 특징으로 하는 자초 추출물의 제조방법.
   
3. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 상기 계면활성제는 친수친유기평형(HLB)이 15이하의 식용유화제인 것을 특징으로 하는 자초 추출물의 제조방법.
   
4. 제 3 항에 있어서, 상기 식용유화제는 글리세린 자방산에스테르, 글리세린아세트산지방산에스테르, 글리세린락트지방산에스테르, 글리세린스트리산자방산에스테르, 글리세린숙신산지방산에스테르, 글리세린아세틸타르타르산지방산에스테르, 폴리글리세린지방산에스테르, 폴리글리세린축합리시놀레산에스테르, 설탕지방산에스테르, 폴리옥시에틸렌(20)소르비탄스테아레이트(폴리솔르베이트 60), 폴리소르베이트 65(트리스테아레이트) 및 폴리소르베이트 80(모노올레이트) 종에서 선택된 식용유화제 1종 또는 그 이상의 혼합물을 특징으로 하는 자초 추출물의 제조 방법.
   
5. 제 1 항에 있어서, 상기 오일은 식물성 오일, 동물성 오일 및 광물성 오일 종에서 선택된 오일 1종 또는 그 이상의 혼합물로, 요오드화 값이 130 이하인 것을 특징으로 하는 자초 추출물의 제조 방법.

Images