KR100962581B1 - 물에 대한 용해도가 개선된 신규 신남알데하이드 유도체,이의 제조 방법 및 이를 포함하는 항암제 조성물 - Google Patents

물에 대한 용해도가 개선된 신규 신남알데하이드 유도체,이의 제조 방법 및 이를 포함하는 항암제 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 세포주기 억제 및 세포사멸을 유도하여 암세포주의 성장을 억제하는 활성을 가진 하기 화학식 1로 표시되는 물에 대한 용해도가 개선된 신규한 신남알데하이드 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 및 이의 제조 방법에 관한 것이다:
[화학식 1]
Figure 112008045549830-pat00001
또한, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 화합물을 포함하는 항암제 조성물에 관한 것이다.
신남알데하이드 유도체, 세포주기 저해, 세포사멸 유도, 항암, 암세포 억제

Description

물에 대한 용해도가 개선된 신규 신남알데하이드 유도체, 이의 제조 방법 및 이를 포함하는 항암제 조성물{Novel cinnamaldehyde derivatives having improved solubility in water, a method for preparing the same and a pharmaceutical composition comprising the same}
본 발명은 신규한 신남알데하이드 유도체에 관한 것이다. 더욱 상세하게는, 본 발명은 물에 대한 용해도가 개선된 신규한 신남알데하이드 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 이의 제조 방법 및 이를 포함하는 항암제 조성물에 관한 것이다.
신체를 구성하고 있는 세포들의 분열 증식과 분화는 생명 현상의 유지에 기본이다. 정상적인 기능을 이루기 위한 세포의 증식 및 성장은 정교한 세포 내 신호전달 체계에 의해서 조절되며, 이 일련의 과정은 세포가 외부로부터 받은 신호를 여러 단백질들(PLC, PKC, Shc, Grb2, Raf, MAPK, MEK 등)과 분자 매개체들(GTP, cAMP 등)을 통해 핵 내의 세포 시계로 전달시킴으로써 이루어진다. 이러한 일련의 과정 중에서 어느 한 부분에 이상이 발생하게 되면 자체적인 조절 기작에 의해서 균형을 유지하기도 하지만, 많은 경우에는 질병으로 발전하게 된다. 특히, 세포 내 핵에 존재하는 세포주기는 세포들의 생명 유지를 조절하는 중요한 과정 중의 하나이다.
세포주기는 일상적으로 우리가 사용하고 있는 시계가 초침, 분침, 시침으로 구분되듯이 4개의 독특한 단계로 나뉘어 진다. 즉, Gap1(G1기), DNA 합성단계(S기, Synthetic phase), Gap2(G2기), 분열기(M기, Mitosis phase) 등이 바로 그것이다. 또한, 세포가 높은 밀도로 존재하거나, 낮은 농도의 성장 인자의 환경에서 장기간 방치되면, 세포는 휴면기라고 불리는 성장 멈춤(Go기) 상태로 접어든다. 이러한 일련의 핵 내 반응을 세포주기라 한다.
시계 내에는 전기적 또는 물리적 힘에 의해서 시계추가 진동하고 이에 따라서 초침, 분침, 시침이 순차적으로 움직임으로써 우리에게 정확한 시각을 알려 주게 된다. 이를 위해서는 시계추에 일정한 힘이 가해져야 하며 이를 조절하는 각종 부속품들이 시계를 구성하고 있다. 이와 마찬가지로 세포주기에도 체크포인트(checkpoint)라고 불리는 복잡한 네트워크가 있어서 세포시계가 정확히 G1-S-G2-M기의 순서로 진행되도록 유도해 준다. 체크포인트에서 세포주기의 다음 단계로 넘어가기 위한 조건이 충족되었는지를 확인한 후, 모든 조건이 만족되면 S기 또는 M기가 진행된다. 이런 체크포인트 조절 메커니즘의 결핍은 유전물질의 불안정성을 증가시켜 조절 불가능한 세포 성장을 가져오며, 때로는 암과 같은 무절제한 세포성장을 일으키기도 한다.
핵 외부로부터의 신호 전달과 영양 상태가 양호하면 G1기의 세포 크기가 커지고, 세포주기로 진입하게끔 해준다. 세포주기 작동은 효모에서는 START, 포유세포에서는 제한점(restriction point)이라고 불리는 G1 체크포인트에서 이루어진다. 이 지점을 지난 후 특별한 제동이 없으면 세포는 자동적으로 4단계의 세포주기를 거쳐서 자신의 게놈을 복제하고 분열하게 된다. 포유세포에서의 이들 단계를 자세히 살펴보면 다음과 같다. 체크포인트가 존재하는 G1기는 새로운 세포를 만들기 위한 준비 단계로서 이때에 성장인자와 충분한 영양이 공급되지 못하면 세포주기는 멈추게 되고, 성장 멈춤기인 Go 상태로 접어들게 된다. 그러나 충분한 영양이 공급되고 다양한 성장 인자들이 준비되면 세포주기는 S기로 진행되게 된다. 이때에 세포는 자신의 게놈을 복제하여 두 개의 복제 염색체를 만들 뿐만 아니라, 두 세포로 분열되기 위해 세포질 내의 여러 인자들이 복제되어 진다. S기가 끝나면 세포는 제2의 체크포인트로 알려진 G2 단계로 진입한다. 이 G2 기간 동안의 주요 메커니즘은 DNA 복제와 완성을 조절하며 분열기로의 진입을 준비한다. 그러므로 세포의 구성에 필요한 다양한 인자들이 이때에 생산된다. 두 세포로 분열되는데 필요한 인자들이 충분히 만들어진 후에 세포의 실질적 분열이 일어나는 분열기인 M기로 진행되며, M기는 시간적으로 가장 짧고 가장 드라마틱한 단계이다. 복제된 게놈이 세포의 양극으로 분리되어 두 개의 딸세포가 만들어지는 단계이기 때문이다. 이런 일련의 과정은 한 세포가 성장하여 두 세포로 분열되기 위해서 모든 세포가 거치는 과정이므로 세포의 생명 유지에 매우 중요한 과정이다. 그러므로 세포주기의 연구와 이들을 조절하는 물질의 개발은 세포성장기작의 연구 및 세포주기이상에서 발생하는 암의 예 방, 치료제 개발에 필수적이라 할 수 있다(Marcos Malumbres and Mariano Barbacid, Nature Review Cancer 2001, 1, 222-231).
상기에서 언급한 것과 같이 포유동물의 세포는 G1기에 존재하는 제1의 체크포인트 또는 G2/M에 있는 제2의 체크포인트를 조절함으로써, 그 성장을 조절할 수 있다. 이 두 체크포인트의 비정상적인 진행이 세포 노화나 암 등의 질병 발생과 연결되어 진다. 이런 체크포인트에서 중요한 역할을 하는 것이 cyclin D(D1, D2, D3 등) 들이다. 이들은 CDK(cyclin dependent kinase) 2, 4 또는 6에 결합하여 이들 효소의 활성을 조절하며, 인산화된 단백질의 인산기를 제거하는 CDC25 등이 세포주기 전체를 조절하는데 있어서 매우 중요한 역할을 하게 된다. 이러한 연구결과들을 바탕으로 다양한 세포주기 조절제들이 종양과 같은 난치성 질병 치료제로 개발되고 있다(Peter L Toogood, Current Opinion in Chemical Biology 2002, 6, 472-478).
신남알데하이드 유도체의 항암활성 등은 이미 보고되어 있으나 물에 대한 용해도가 매우 낮아서 항암제로의 개발에 어려움이 있었다. 예로서 벤조일옥시 신남알데하이드 등은 세포에서의 활성 및 복강 투여 동물에서의 항암 활성은 우수하나 물에 대한 용해도가 매우 낮아서 정맥 투여가 불가능하고 경구 투여시 항암활성이 급격히 감소하는 단점을 가지고 있다(Han, D. C., et al., J. Biol . Chem . 2004, 279, 6911-6920). 다양한 신남알데하이드 유도체들이 만들어졌지만 물에 대한 용해도로 인하여 동물에서의 항암효과가 개선되지 못하였다(Shin D. S. et al., Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 17 (2007) 5423.5427; Bioorganic & Medicinal Chemistry 14 (2006) 2498.2506; Byoung-Mog Kwon, et al., USA Patent 6,949,682, 2005; 권병목 등 대한민국특허 10-0668171).
상기와 같은 점을 감안하여, 본 발명자들은 암세포의 G2/M기에서 성장을 멈추게 하여 비정상적 성장을 억제시킴으로써 우수한 항암 활성을 나타내는 새로운 신남알데하이드 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 개발하여 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 물에 대한 용해도가 개선된 신규한 신남알데하이드 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 제공하고자 하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 신규한 신남알데하이드 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 제조하는 방법을 제공하고자 하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 신규한 신남알데하이드 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물을 제공하고자 하는 것이다.
하나의 양태로서, 본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 신남알데하이드 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 제공한다.
Figure 112008045549830-pat00002
상기 화학식 1에서,
R은 C1~C3알콕시C1~C4알킬카보닐기; 비치환되거나 하나 이상의 C1~C4의 알킬기 로 치환된, O와 N 중에서 선택된 1개 또는 2개의 이종원자를 갖는 6원 헤테로사이클릭카보닐기; 1개 또는 2개 이상의 N을 이종원자로 갖는 C4~C10의 헤테로아릴기; 및 C6~C10의 아릴기로 치환된 설포닐기 중에서 선택된다.
바람직하게는, 상기 화학식 1에서
R은 메톡시아세틸기(methoxyacetyl); 비치환되거나 하나 이상의 C1~C2알킬기로 치환된 피페라진카보닐기; 피콜릴(picolyl); 및 벤젠설포닐기 중에서 선택된다.
보다 바람직한 양태로서, 본 발명은 하기 화학식 2 내지 화학식 7로 이루어진 군으로부터 선택된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 제공한다.
Figure 112008045549830-pat00003
Figure 112008045549830-pat00004
Figure 112008045549830-pat00005
Figure 112008045549830-pat00006
Figure 112008045549830-pat00007
Figure 112008045549830-pat00008
본원에서 사용된 용어 "알콕시"는 탄소수 1 내지 3개의 저급알콕시기를 의미하며, 예를 들어 메톡시, 에톡시, 프로폭시 등을 포함한다.
용어 “알킬”이란 탄소수 1 내지 4의 직쇄 또는 측쇄의 라디칼을 의미하며, 예를 들어 메틸, 에틸, n-프로필, 이소-프로필, n-부틸, 이소-부틸, 3차-부틸 등을 포함한다.
용어 “헤테로사이클릭”이란 이종원자 O와 N 중에서 선택된 1개 또는 2개의 이종원자를 갖는 6원의 환을 의미하며, 방향족 환은 포함되지 않는다. 예를 들어 피페라진, 모르폴린 등을 포함한다. 피페라진이 특히 바람직하다.
본원에서 사용된 용어 “헤테로아릴”이란 N을 이종원자로 갖는 탄소수 4 내지 10개의 모노- 또는 폴리-사이클릭 방향족 환을 의미하며, 예를 들어 피콜릴(picolyl), 피리딘(pyridine), 피리미딘(pyrimidine), 피라진(pyrazine), 피리다진(pyridazine) 등을 포함한다. 피콜릴기가 특히 바람직하다.
용어 “아릴”이란 탄소수 6 내지 10개의 모노- 또는 폴리-사이클릭 방향족 환을 의미하며, 예를 들어 페닐, 나프틸 등을 포함한다. 페닐기가 특히 바람직하다.
용어 “이탈기”는 염소, 브롬, 요오드 등의 할로겐 원자, 톨루엔설포닐옥시기, 메탄설포닐옥시기 등을 나타낸다.
본 발명의 화학식 1의 화합물들은 당해 기술 분야에서 통상적인 방법에 따라 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물로 제조될 수 있다.
염으로는 약학적으로 허용가능한 유리산(free acid)에 의해 형성된 산부가염이 유용하다. 산 부가염은 통상의 방법, 예를 들어 화합물을 과량의 산 수용액에 용해시키고, 이 염을 수혼화성 유기 용매, 예를 들어 메탄올, 에탄올, 아세톤 또는 아세토니트릴을 사용하여 침전시켜서 제조한다. 동 몰량의 화합물 및 물 중의 산 또는 알콜(예, 글리콜 모노메틸에테르)을 가열하고, 이어서 상기 혼합물을 증발시켜 건조시키거나, 또는 석출된 염을 흡인 여과시킬 수 있다.
이때, 유리산으로는 유기산과 무기산을 사용할 수 있으며, 무기산으로는 염산, 인산, 황산, 질산, 주석산 등을 사용할 수 있고 유기산으로는 메탄술폰산, p-톨루엔술폰산, 아세트산, 트리플루오로아세트산, 말레인산(maleic acid), 숙신산, 옥살산, 벤조산, 타르타르산, 푸마르산(fumaric acid), 만데르산, 프로피온산 (propionic acid), 구연산(citric acid), 젖산(lactic acid), 글리콜산(glycollic acid), 글루콘산(gluconic acid), 갈락투론산, 글루탐산, 글루타르산(glutaric acid), 글루쿠론산(glucuronic acid), 아스파르트산, 아스코르브산, 카본산, 바닐릭산, 히드로아이오딕산 등을 사용할 수 있으며, 이들에 제한되지 않는다.
또한, 염기를 사용하여 약학적으로 허용가능한 금속염을 만들 수 있다. 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속염은, 예를 들어 화합물을 과량의 알칼리 금속 수산화물 또는 알칼리 토금속 수산화물 용액 중에 용해시키고, 비용해 화합물 염을 여과한 후 여액을 증발, 건조시켜 얻는다. 이때, 금속염으로서는 특히 나트륨, 칼륨 또는 칼슘염을 제조하는 것이 제약상 적합하나 이들에 제한되는 것은 아니다. 또한, 이에 대응하는 은염은 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염을 적당한 은염(예, 질산은)과 반응시켜 얻을 수 있다.
상기 화학식 1의 화합물의 약학적으로 허용가능한 염은, 달리 지시되지 않는 한, 화학식 1의 화합물에 존재할 수 있는 산성 또는 염기성 기의 염을 포함한다. 예를 들어, 약학적으로 허용가능한 염으로는 히드록시기의 나트륨, 칼슘 및 칼륨 염 등이 포함될 수 있고, 아미노기의 기타 약학적으로 허용가능한 염으로는 히드로브로마이드, 황산염, 수소 황산염, 인산염, 수소 인산염, 이수소 인산염, 아세테이트, 숙시네이트, 시트레이트, 타르트레이트, 락테이트, 만델레이트, 메탄술포네이트(메실레이트) 및 p-톨루엔술포네이트(토실레이트) 염 등이 있으며 당업계에서 알려진 염의 제조방법을 통하여 제조될 수 있다.
다른 하나의 양태로서, 본 발명은 하기 단계를 포함하는, 화학식 1로 표시되는 신남알데하이드 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염의 제조 방법을 제공한다:
1) 하기 화학식 8로 표시되는 하이드록시 신남알데하이드를 화학식 9의 화합물과 반응시켜 화학식 1의 화합물을 제조하는 단계.
Figure 112008045549830-pat00009
Figure 112008045549830-pat00010
상기 화학식 9에서,
R은 C1~C3알콕시C1~C4알킬카보닐기; 비치환되거나 하나 이상의 C1~C4의 알킬기로 치환된, O와 N 중에서 선택된 1개 또는 2개의 이종원자를 갖는 6원 헤테로사이클릭카보닐기; 1개 또는 2개 이상의 N을 이종원자로 갖는 C4~C10의 헤테로아릴기; 및 C6~C10의 아릴기로 치환된 설포닐기 중에서 선택되고,
Z는 이탈기이다.
바람직하게는, 상기 화학식 9에서
R은 메톡시아세틸기(methoxyacetyl); 비치환되거나 하나 이상의 C1~C2알킬기로 치환된 피페라진카보닐기; 피콜릴(picolyl); 및 벤젠설포닐기 중에서 선택되고,
Z는 염소(Cl) 또는 브롬(Br)이다.
상기 본 발명의 제조 방법의 일 양태를 도식화하면 하기 반응식 1로 나타낼 수 있다.
Figure 112008045549830-pat00011
상기 반응식 1에서, 먼저 하이드록시 신남알데하이드를 유기 용매에 녹이고 치환된 아세틸 클로라이드, 치환된 벤조일 클로라이드, 피코닐 클로라이드, 또는 피페닐 카보닐 클로라이드 화합물과 반응시킨다. 상기 반응은 카보네이트 화합물의 존재 하에 10 시간 이상, 11 내지 13 시간 동안 수행한다. 이때, 유기용매로는 아세토나이트릴, 아세톤 등을 사용할 수 있다.
보다 바람직한 양태로서, 본 발명은 상기 1) 단계 이후에, 1) 단계에서 제조된 화합물을 유기용매에 녹인 후 염산을 첨가하여 반응시키는 단계를 추가로 포함할 수 있다. 이때, 유기용매로는 아세토나이트릴, 아세톤 등을 사용할 수 있다.
본 발명은 상기 추가 단계를 통해 물에 대한 용해도를 더욱더 개선시킬 수 있다.
본 발명에서 제조된 화합물의 구조분석을 위하여, 먼저, UV 흡광도 분석, IR (infrared) 흡광도 분석 및 고해상도 질량분석기 분석을 실시하여 상기 순수 정제된 화합물의 분자량 및 분자식을 결정한다. 구체적으로, UV 흡광도 분석은 시마주사의 UV-265 분광광도계(Shimadzu UV-265 spectrophotometer)로 측정하고, IR 흡광도는 바이오-라드사의 디지랩 디비존 FTS-80 분광광도계(Bio-Rad Digilab Division FTS-80 spectrophotometer)로 측정하고, 분자량 및 분자식은 VG70-SEQ 질량 분석계(mass spectrometry; MS)를 이용한 고해상도(High resolution) MS를 측정하여 결정한다. 또한 핵자기공명기(Varian 300 MHz, 500 MHz NMR)를 이용하여 1H, 13C-NMR 스펙트럼을 얻고, 이들 스펙트럼을 종합적으로 분석하여 최종적으로 구조를 결정할 수 있다.
또 다른 하나의 양태로서, 본 발명은 화학식 1로 표시되는 신남알데하이드 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 하는 항암제 조성물을 제공한다.
본 발명에서 항암이란 암의 예방 및 치료 효과 모두를 포함한다.
상기 암은 결장암, 폐암, 비소세포성 폐암, 골암, 췌장암, 피부암, 두부 암, 경부 암, 피부 흑색종, 안구내 흑색종, 자궁암, 난소암, 직장암, 위암, 항문부근 암, 결장암, 유방암, 나팔관암종, 자궁내막암종, 자궁경부암종, 질암종, 음문암종, 호지킨병(Hodgkin's disease), 식도암, 소장암, 내분비선암, 갑상선암, 부갑상선암, 부신암, 연조직 육종, 요도암, 음경암, 전립선암, 만성 백혈병, 급성 백혈병, 림프구 림프종, 방광암, 신장 암, 수뇨관 암, 신장세포 암종, 신장골반 암종, 중추신경계(CNS; central nervous system) 종양 등이 있다.
본 발명에 따른 화합물은 암세포의 비정상적인 성장을 억제하는 효과가 우수하여 암 질환의 치료 및 예방에 유용하게 이용될 수 있다.
일 실시예로서, 화학식 1의 화합물들을 인체 결장암 세포주 SW620에 10-20 microM로 처리하면 세포주기 G2+M기에 정지시켜서 세포의 성장을 억제하는 효과를 나타낸다. 구체적으로, 세포 성장 억제 효과 실험은 다음과 같이 수행할 수 있다. 먼저, 인체 결장암 세포주 SW620의 배양액에, DMSO에 녹인 상기 화합물을 처리한 후, 48시간째에 세포 DNA를 염색하고, 염색된 세포를 벡톤-디킨스 팍스 칼리버 (Becton-Dickinson FACS calibur (Becton-Dickinson, San Jose, CA, USA))를 이용하여 세포 주기를 측정하고, 벡톤-디킨스 모디핏 (Becton-Dickinson Modifit) 세포 주기 분석 프로그램을 이용하여 세포주기의 G1, S, G2+M기에 있는 세포의 양을 백분율로 계산한다.
본 발명에 따른 화학식 1의 화합물을 포함하는 약학 조성물은 통상의 방법에 따른 적절한 담체, 부형제 또는 희석제를 더 포함할 수 있다. 본 발명의 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이 트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.
본 발명에 따른 조성물은 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 또는 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
상세하게는, 제형화할 경우 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트, 수크로오스, 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 액체 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 및 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 오일, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔, 마크로골, 트윈 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 화합물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나, 바람직한 효과를 위해서 본 발명의 화합물은 통상적으로 하루에 체중 1 kg 당 1 내지 50 mg, 바람직하게는 5 내지 50 mg의 양을 일회 내지 수회에 나누어 투여할 수 있다.
본 발명에 따른 화합물의 약학적 투여 형태는 이들의 약학적으로 허용가능한 염의 형태로도 사용될 수 있고, 또한 단독으로 또는 기타 약학적 활성 화합물과 결합뿐만 아니라 적당한 집합으로 사용될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 랫트, 마우스, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내 (intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다.
본 발명에 따른 화학식 1의 신남알데하이드 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염은, 암세포의 세포주기 G2/M기를 고정시켜 비정상적 성장을 억제시킬 뿐만 아니라 물에 대한 용해도도 개선되어 더욱 우수한 항암 효과를 나타낸다.
이하, 본 발명을 실시 예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나 이들 실시 예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시 예에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1: 화학식 2의 화합물 제조
하이드록시 신남알데하이드 1g을 아세톤 200 mL에 녹인 후, 탄산칼륨 2g과 메톡시 아세틸 클로라이드 0.8g을 첨가하여 상온에서 5 시간 동안 교반시켰다. 반응이 종결된 후, 활성물질을 함유하고 있는 유기 용매 층을 모아 감압 하에 농축하였다. 농축된 추출물 1.2g을 메틸렌클로라이드 30 mL에 용해시키고 에틸아세테이트와 헥산의 비율을 30 : 70으로 실리카겔(Merck, Art No. 9385) 컬럼 크로마토그래피하여 활성분획을 분리하여 엷은 노란색의 화학식 2의 화합물 1.3g을 얻었다(수득율: 90%). 화학식 2의 화합물의 물리화학적 성질을 하기 표 1에 나타내고, 수소 NMR 스펙트럼을 도 1에 나타내었다.
외형 (appearance) 엷은 노란색
분자식 C12H12O4
분자량 220.22
융점(℃) 47℃
용해성 가용성 알코올, DMSO
불용성 헥산
물에 대한 용해도 320μM
1H-NMR (CDCl3): 9.69(1H, d, J = 7.2), 7.68(1H, d, J = 8.1), 7.51(2H, m), 7.33(1H, t, J = 7.5), 7.22(2H, d, J = 8.1), 4.38(2H, s), 3.56(3H, s).
실시예 2: 화학식 3의 화합물 제조
하이드록시 신남알데하이드 1g을 아세톤 200 mL에 녹인 후, 탄산칼륨 2g과 4-피콜릴 클로라이드(4-picolyl chloride) 0.8g을 첨가하여 상온에서 5 시간 동안 교반시켰다. 반응이 종결된 후, 활성물질을 함유하고 있는 유기 용매 층을 모아 감압 하에 농축하였다. 농축된 추출물 1.5g을 메틸렌클로라이드 30 mL에 용해시키고 에틸아세테이트와 헥산의 비율을 60 : 40으로 실리카겔(Merck, Art No. 9385) 컬럼 크로마토그래피하여 활성분획을 분리하여 연노랑색의 화학식 3의 화합물 1.4g을 얻었다(수득율: 90%). 화학식 3의 화합물의 물리화학적 성질을 하기 표 2에 나타내었다.
외형 (appearance) 엷은 노란색
분자식 C15H13O2
분자량 239
융점(℃) 95℃
용해성 가용성 알코올, DMSO
불용성 헥산, H2O
1H-NMR (CDCl3): 9.72(1H, d, J = 7.2), 8.65(2H, m), 7.92(1H, d, J = 15.9), 7.61(1H, m), 7.37(3H, m), 7.05(1H, t, J = 7.2), 6.91(1H, d, J = 8.1), 6.81(1H, m), 5.212(2H, s).
실시예 3: 화학식 4의 화합물 제조
하이드록시 신남알데하이드 1g을 아세톤 200 mL에 녹인 후, 탄산칼륨 2g과 4-메틸 피페라진 1-카보닐 클로라이드 1.9g을 첨가하여 상온에서 5 시간 동안 교반시켰다. 반응이 종결된 후, 활성물질을 함유하고 있는 유기 용매 층을 모아 감압 하에 농축하였다. 농축된 추출물 1.5g을 메틸렌클로라이드 30 mL에 용해시키고 에틸아세테이트와 메탄올의 비율을 99 : 1로 실리카겔(Merck, Art No. 9385) 컬럼 크로마토그래피하여 활성분획을 분리하여 옅은 노란색의 화학식 4의 화합물 1.6g을 얻었다(수득율: 90%). 화학식 4의 화합물의 물리화학적 성질을 하기 표 3에 나타내고, 수소 NMR 스펙트럼을 도 2에 나타내었다.
외형 (appearance) 옅은 노란색
분자식 C15H18N2O3
분자량 274
융점(℃) 100℃
용해성 가용성 알코올, DMSO
불용성 헥산, H2O
1H-NMR (CDCl3): 9.69(1H, d, J = 7.2), 7.63(2H, m), 7.45(1H, m), 7.29(1H, d, J = 7.5), 7.18(1H, m), 6.71(1H, m), 3.77(2H, m), 3.62(2H, m), 2.49(4H, m), 2.36(3H, s).
실시예 4: 화학식 5의 화합물 제조
하이드록시 신남알데하이드 1g을 아세톤 200 mL에 녹인 후, 탄산칼륨 2g과 벤젠설포닐 클로라이드 1.2g을 첨가하여 상온에서 5 시간 동안 교반시켰다. 반응이 종결된 후, 활성물질을 함유하고 있는 유기 용매 층을 모아 감압 하에 농축하였다. 농축된 추출물 1.9g을 메틸렌클로라이드 30 mL에 용해시키고 에틸아세테이트와 헥산의 비율을 30 : 70으로 실리카겔(Merck, Art No. 9385) 컬럼 크로마토그래피하여 활성분획을 분리하여 연노랑색의 화학식 5의 화합물 1.7g을 얻었다(수득율: 90%). 화학식 5의 화합물의 물리화학적 성질을 하기 표 4에 나타내었다.
외형 (appearance) 옅은 노란색
분자식 C15H12O4S
분자량 288
융점(℃) 액체
용해성 가용성 알코올, DMSO
불용성 헥산
물에 대한 용해도 600 μM
1H-NMR (CDCl3): 9.41(1H, d, J = 7.2), 7.81(2H, m), 7.67(1H, t, J = 7.8), 7.49(4H, m), 7.33(1H, m), 7.27(1H, m), 6.45(1H, m).
실시예 5: 화학식 6의 화합물 제조
화학식 3의 화합물 1g을 아세톤 200 mL에 녹인 후, 37% 염산을 1 mL 첨가하여 10 시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 활성물질을 함유하고 있는 유기용매층을 감압 하에 농축시키고 농축된 추출물을 재결정하여 화학식 6의 화합물 1g을 얻었다. 화학식 6의 화합물의 물리화학적 성질을 하기 표 5에 나타내었다.
외형 (appearance) 옅은 노란색
분자식 C15H14ClNO2
분자량 275
융점(℃) 187℃
용해성 가용성 알코올, H2O
불용성 헥산, 아세톤
1H-NMR (CDCl3): 9.74(1H, d, J = 7.2), 8.75(2H, d, J = 6), 7.91(1H, d, J = 16.2), 7.53(2H, m), 7.63(1H, m), 7.41(1H, t, J = 7.2), 7.11(1H, t, J = 7.2), 6.85(2H, m), 5.37(2H, s).
실시예 6: 화학식 7의 화합물 제조
화학식 4의 화합물 1g을 아세톤 200 mL에 녹인 후, 37% 염산을 1 mL 첨가하여 10 시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 활성물질을 함유하고 있는 유기용매층을 감압 하에 농축시키고 농축된 추출물을 재결정하여 화학식 7의 화합물 1g을 얻었다. 화학식 7의 화합물의 물리화학적 성질을 하기 표 6에 나타내었다.
외형 (appearance) 옅은 노란색
분자식 C15H19ClN2O3
분자량 310
융점(℃) 125℃
용해성 가용성 알코올, H2O
불용성 헥산, 아세톤
1H-NMR (CDCl3): 9.71(1H, d, J = 7.2), 7.62(1H, m), 7.51(2H, m), 7.33(1H, t, J = 6.6), 7.16(1H, d, J = 7.5), 6.68(1H, m), 4.38(2H, m), 4.13(1H, m), 3.89(1H, m), 2.88(4H, s).
실험예 1: 세포주기 분석
세포주기 분석을 위하여 인체 결장암 세포주 SW620을 10% FBS를 함유한 각각의 RPMI 1640과 DMEM 배지를 이용하여 T25 플라스크(배양액 7.5㎖)에 분주한 후, 12시간 동안 37℃ 배양기에서 배양하였다. 12시간 배양한 후, 대조군(control)으로 사용될 세포 배양액에는 DMSO를 최종 농도가 0.1%(7.5㎕)가 되도록 넣어 주고, 처리군으로 사용될 세포 배양액에는 다양한 농도로 DMSO에 녹여진 시료를 7.5 ㎕ 첨가하였다. DMSO 또는 시료를 처리한 세포주는 물질 처리 후 각기 48시간째에 분리하여 세포분석을 위해 사용하였다.
세포주기 분석을 위하여 배양된 세포는 플라스크에서 배지를 제거한 후, 트립신을 이용하여 배양 플라스크에서 분리하여 원심분리(300g, 5분)하였다. 분리된 세포는 인산염 완충액(phosphate buffer)을 이용하여 두 차례 씻어주어 배지 성분을 제거하였다. 이렇게 준비된 세포에 70% 에탄올 3 mL를 처리하여 -20℃에서 12시간 동안 방치하여 세포를 고정시켰다. 에탄올로 고정된 세포는 원심분리 (300g, 3분)한 후, 다시 차가운 PBS로 두 번 세포를 씻어내어 잔여 에탄올을 제거하였다. 세포에 500㎕ PBS를 가하여 골고루 섞어 준 후, 100 ㎍/mL RNase A를 50㎕를 처리하여 37℃에서 30분간 방치한 후, 1 mg/mL propidium iodide(in PBS)를 10㎕를 처리하여 세포 DNA를 염색하였다. 염색된 세포는 벡톤-디킨슨 팍스 칼리버(Becton-Dickinson FACS calibur (Becton-Dickinson, San Jose, CA, USA))를 이용하여 20,000개 세포의 세포 주기를 측정하였고, 벡톤-디킨슨 모디핏(Becton-Dickinson Modifit) 세포 주기 분석 프로그램을 이용하여 세포주기의 G1, S, G2+M 기에 있는 세포의 양을 백분율로 계산하였다.
화학식 2 내지 화학식 7의 화합물이 세포주기에 미치는 영향을 분석한 결과를 하기 표 7 내지 표 13에 나타내었다.
화학식 2의 화합물의 암세포에서의 세포주기 저해활성
세포주 화합물 농도 세포의 비율(%)
G0-G1 S G2-M
SW620 대조군 20 μM 56.15 30.32 13.53
화학식 2의 화합물 33.00 17.06 49.94
화학식 3의 화합물의 암세포에서의 세포주기 저해활성
세포주 화합물 농도 세포의 비율(%)
G0-G1 S G2-M
SW620 대조군 20 μM 58.83 21.23 19.94
화학식 3의 화합물 39.80 26.57 33.63
화학식 4의 화합물의 암세포에서의 세포주기 저해활성
세포주 화합물 농도 세포의 비율(%)
G0-G1 S G2-M
SW620 대조군 30 μM 60.12 28.35 11.54
화학식 4의 화합물 37.50 17.01 45.49
화학식 5의 화합물의 암세포에서의 세포주기 저해활성
세포주 화합물 농도 세포의 비율(%)
G0-G1 S G2-M
HCT116 대조군 20 μM 75.15 22.52 2.33
화학식 5의 화합물 36.01 18.05 45.94
화학식 6의 화합물의 암세포에서의 세포주기 저해활성
세포주 화합물 농도 세포의 비율(%)
G0-G1 S G2-M
MDA-MB-231 대조군 40 μM 55.12 19.18 25.70
화학식 6의 화합물 43.85 14.84 41.31
화학식 6의 화합물의 암세포에서의 세포주기 저해활성
세포주 화합물 농도 세포의 비율(%)
G0-G1 S G2-M
SW620 대조군 20 μM 60.83 19.23 19.94
화학식 6의 화합물 39.80 26.57 33.63
화학식 7의 화합물의 암세포에서의 세포주기 저해활성
세포주 화합물 농도 세포의 비율(%)
G0-G1 S G2-M
SW620 대조군 30 μM 58.15 30.33 11.52
화학식 7의 화합물 35.11 17.06 47.83
상기 표 7 내지 표 13으로부터 알 수 있는 바와 같이, 본 발명의 화학식 2 내지 화학식 7의 화합물은 세포주기에 중요한 요소인 G2/M기 세포 성장을 정지시켜 세포분열을 저해하는 뛰어난 효과를 나타내었다. 이를 통해 본 발명의 화합물이 암세포의 비정상적인 성장을 억제하여 암을 치료 또는 예방하는데 유용함을 확인할 수 있었다.
실험예 2: 경구투여 항암활성 실험
마우스를 시료투여군, 용매대조군(vehicle control), 양성대조군으로 나누고, 각각의 마우스에 인체 결장암 세포주 HT-29를 3 × 107 cells/ml의 세포농도로 마우스당 0.3 ml 씩 우측의 견갑부와 흉벽사이의 액와부위 피하에 주입하였다. 시료투여군의 마우스에는 화학식 6의 화합물을 이식 후 다음날(day1)부터 투여를 개시하여 부검 전날까지 매일 1회 경구로 각각 10 mg/kg의 용량으로 투여를 반복 실시하였다. 양성대조군의 마우스에는 화학식 6의 화합물 대신 양성대조물질로서 아드레아마이신(ADM))을 2 mg/kg의 용량으로 투여하는 것을 제외하고는 시료투여군의 마우스와 동일하게 처치하였다.
동물의 체중변화는 시험기간 동안 3회/주 정도 측정하여 약물의 투여에 기인한 체중감소와 같은 독성 정도를 알아보았다. 암세포 이식 후 6일째부터 18일째까지 총 5회 종양의 크기를 개체별로 측정하였다.
종양의 크기는 verier caliper를 이용하여 3 방향을 측정한 후, 하기 수학식 1로 표현하였다.
Tumor volume = (Length × Width × Height)/2
세포 이식 후 18일째에 동물을 희생시켜 종양을 분리한 후에 무게를 측정하였다.
HT-29 암세포주를 이식한 nude mouse에 약물투여를 개시한 후 18일간 몸무게 변화를 관찰하였다. 실험 결과를 보면 용매대조군과 비교하여 시료투여군에서 체중의 감소는 관찰되지 않았다. 양성대조군[아드레아마이신(ADM) 투여군]의 경우에는 최종일에 10.3%(p<0.001)의 통계적으로 유의한 체중감소가 관찰되었다.
한편, 도 3을 통해 알 수 있는 바와 같이 화학식 6의 화합물을 투여한 시료투여군에서는 30.7%(p<0.001)의 통계적으로 유의한 종양성장억제효과가 관찰되었으며, 양성대조군의 경우에는 45.4%(p<0.001)의 통계적으로 유의한 종양성장억제효과가 나타났다.
실험예 3: 랫트에 대한 경구투여 급성 독성실험
본 발명에 따른 신남알데하이드 유도체의 독성을 측정하기 위하여 하기와 같이 실험동물을 사용하여 급성독성 실험을 하였다.
6주령의 특정병원부재(SPF) SD계 랫트를 사용하여 급성독성실험을 다음과 같이 실시하였다. 군당 2 마리씩의 SD계 랫트에 실시예에서 제조된 신남알데하이드 유도체를 주사용 증류수에 용해시켜 1000 mg/kg의 용량으로 단회 경구 투여하였다. 시험물질 투여 후 동물의 폐사 여부, 임상증상, 체중변화를 관찰하고 혈액학적 검사와 혈액생화학적 검사를 실시하였으며, 부검하여 육안으로 복강 장기와 흉강 장기의 이상여부를 관찰하였다.
그 결과, 시험물질을 투여한 모든 동물에서 특기할 만한 임상증상이나 폐사된 동물은 없었으며, 체중변화, 혈액검사, 혈액생화학 검사, 부검소견 등에서도 독성변화는 관찰되지 않았다.
따라서, 본 발명에 따른 신남알데하이드 유도체는 모든 랫트에서 1000 mg/kg까지 독성변화를 나타내지 않으므로 경구 투여 최소 치사량(LD50)이 1000 mg/kg 이상인 안전한 물질로 판정되었다.
본 발명에 따른 화학식 1의 신남알데하이드 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염은, 암세포의 세포주기 G2/M기를 고정시켜 비정상적 성장을 억제시킬 뿐만 아니라 물에 대한 용해도도 개선되어 더욱 우수한 항암 효과를 나타낸다. 따라서, 본 발명에 따른 화합물을 포함하는 조성물은 암 질환의 예방 및 치료에 유용하게 이용될 수 있다.
도 1은 화학식 2의 화합물의 수소 NMR 스펙트럼을 나타내는 도면이다.
도 2는 화학식 4의 화합물의 수소 NMR 스펙트럼을 나타내는 도면이다.
도 3은 화학식 2의 화합물이 인체 결장암 세포주 SW620에서 세포주기 억제 활성에 미치는 영향을 나타내는 그래프이다. 여기에서 A는 대조구인 물에서의 세포주기 억제 활성을 나타내고, B는 화학식 2의 화합물을 20 μM로 처리했을 때, C는 화학식 2의 화합물을 40 μM로 처리했을 때 세포주기 억제 활성을 나타낸다.

Claims (9)

  1. 하기 화학식 1로 표시되는 신남알데하이드 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
    [화학식 1]
    Figure 112010003313937-pat00012
    상기 화학식 1에서,
    R은 C1~C3알콕시C1~C4알킬카보닐기; 비치환되거나 하나 이상의 C1~C4의 알킬기로 치환된, O와 N 중에서 선택된 1개 또는 2개의 이종원자를 갖는 6원 헤테로사이클릭카보닐기; 및 1개 또는 2개 이상의 N을 이종원자로 갖는 C4~C10의 헤테로아릴기 중에서 선택된다.
  2. 제 1항에 있어서, 상기 화학식 1에서
    R은 메톡시아세틸기(methoxyacetyl); 비치환되거나 하나 이상의 C1~C2알킬기로 치환된 피페라진카보닐기; 및 피콜릴(picolyl) 중에서 선택된 신남알데하이드 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  3. 제 2항에 있어서, 하기 화학식 2 내지 4, 화학식 6 및 화학식 7로 이루어진 군으로부터 선택된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
    [화학식 2]
    Figure 112010003313937-pat00013
    [화학식 3]
    Figure 112010003313937-pat00014
    [화학식 4]
    Figure 112010003313937-pat00015
    [화학식 6]
    Figure 112010003313937-pat00017
    [화학식 7]
    Figure 112010003313937-pat00018
  4. 하기 단계를 포함하는, 화학식 1로 표시되는 신남알데하이드 화합물의 제조 방법:
    1) 하기 화학식 8로 표시되는 하이드록시 신남알데하이드를 화학식 9의 화합물과 반응시켜 화학식 1의 화합물을 제조하는 단계.
    [화학식 1]
    Figure 112010003313937-pat00019
    [화학식 8]
    Figure 112010003313937-pat00020
    [화학식 9]
    Figure 112010003313937-pat00021
    상기 화학식에서,
    R은 C1~C3알콕시C1~C4알킬카보닐기; 비치환되거나 하나 이상의 C1~C4의 알킬기로 치환된, O와 N 중에서 선택된 1개 또는 2개의 이종원자를 갖는 6원 헤테로사이클릭카보닐기; 및 1개 또는 2개 이상의 N을 이종원자로 갖는 C4~C10의 헤테로아릴기 중에서 선택되고,
    Z는 이탈기이다.
  5. 제 4항에 있어서, 상기 화학식에서
    R은 메톡시아세틸기(methoxyacetyl); 비치환되거나 하나 이상의 C1~C2알킬기로 치환된 피페라진카보닐기; 및 피콜릴(picolyl) 중에서 선택되고,
    Z는 염소(Cl) 또는 브롬(Br)인 신남알데하이드 화합물의 제조 방법.
  6. 제 4항에 있어서, 상기 1) 단계 이후에, 1) 단계에서 제조된 화합물을 유기용매에 녹인 후 염산을 첨가하여 반응시키는 단계를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 신남알데하이드 화합물의 제조 방법.
  7. 제 6항에 있어서, 상기 유기용매는 아세토나이트릴 또는 아세톤임을 특징으로 하는 신남알데하이드 화합물의 제조 방법.
  8. 제 1항 내지 제 3항 중 어느 한 항 기재의 화합물을 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물.
  9. 제 8항에 있어서, 상기 암은 결장암, 폐암, 비소세포성 폐암, 골암, 췌장암, 피부암, 두부 암, 경부 암, 피부 흑색종, 안구내 흑색종, 자궁암, 난소암, 직장암, 위암, 항문부근암, 결장암, 유방암, 나팔관암종, 자궁내막암종, 자궁경부암종, 질암종, 음문암종, 호지킨병(Hodgkin's disease), 식도암, 소장암, 내분비선암, 갑상선암, 부갑상선암, 부신암, 연조직 육종, 요도암, 음경암, 전립선암, 만성 백혈병, 급성 백혈병, 림프구 림프종, 방광암, 신장 암, 수뇨관 암, 신장세포 암종, 신장골반 암종, 또는 중추신경계(CNS; central nervous system) 종양임을 특징으로 하는 항암제 조성물.
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KR101722827B1 (ko) * 2015-01-29 2017-04-04 전북대학교산학협력단 하이드록시 라디칼 생성유도 고분자 항암제 및 그의 제조방법
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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