KR100908928B1 - 양식어류용 사료첨가제, 사료조성물 및 이를 이용한양식어류의 사육방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 바실러스 서브틸러스(Bacillus-subtilus) KS-3, 바실러스 아밀로리퀘파시엔스(Bacillus-amyloliquefaciens) KS-4, 바실러스-아가라다에렌스(Bacillus-agaradhaerens) KS-5, 파에니바실러스 렌티모부스(Paenibacillus-lentimorbus) KS-6, 바실러스 라에볼락티쿠스(Bacillus-laevolacticus) KS-7, 류코노스톡 파라메센테로이드(Leuconostoc paramesenteroides) KS-9, 쿠르시아 시비리카(Kurthia-sibirica) KS-13 및 스핑고박테리움 스피리티보럼-GC 서브그룹 B(플라보박테리움)(Sphingobacterium-spiritivorum-GC subgroup B(Flavobacterium) KS-18로 구성되는 군에서 선택되는 적어도 1종 이상의 미생물을 포함하는 양식어류용 사료첨가제 또는 사료조성물을 제공한다.
양식어류, 미생물 제제
Description
본 발명은 양식어류용 사료첨가제 및 사료조성물에 관한 것으로 보다 상세하게는 양식어류에 안전하게 사용할 수 있으며, 사료 이용효율이 높은 신규한 양식어류용 사료첨가제 및 사료조성물과, 이들을 양식어류에 급여하여 사육하는 방법에 관한 것이다.
양식 어류의 가식부인 근육의 품질이 천연어의 근육에 비해 뒤떨어지는 것은 가끔 지적되는 바이다. 그 육질의 차이는 방어, 참돔, 넙치 등의 혈합근의 붉은 색의 선명한 색조가 양식어에서는 뒤떨어지고, 맛, 풍미의 점에서 이미, 이취가 수반되는 경우가 많기 때문이다.
종래 사료첨가제나 사료조성물은 주로 양식어류의 육질 개선과 폐사율의 감소 등에 초점을 맞추어 오고 있는 실정이지만, 아직까지는 사료의 이용효율도 높지 못할 뿐만 아니라 육질개선 및 폐사율의 감소효과도 그렇게 만족할 만한 수준이 되지 못하고 있다.
나아가, 지방은 중요한 생체 구성 성분으로서, 통상적으로 총지방 함량중 HDL의 함량을 높게 해 주는 것이 좋으나, 종래의 사료조성에 의하면 주로 LDL 성분이 증가할 뿐 HDL 성분의 증가효과는 미미한 수준에 불과하다.
따라서, 폐사율을 줄여 안전하게 사용할 수 있고, 육질의 개선 및 HDL의 함량을 증가시킬 수 있는 새로운 사료첨가제 내지는 사료조성물의 보급이 요구되고 있다.
본 발명은 상기와 같은 종래기술이 가지는 문제를 해소하기 위해 안출된 것으로, 그 목적은 양식어류에 안전하게 사용할 수 있으며, 육질개선효과 내지는 HDL의 함량을 증가시키고, 나아가 사료 이용효율이 높은 신규한 양식어류용 사료첨가제 및 이를 배합한 사료조성물을 제공함에 있다.
또한, 본 발명은 양식어류에 안전하게 사용할 수 있으며, 육질개선효과 내지는 HDL의 함량을 증가시키고, 나아가 사료 이용효율이 높은 신규한 사료첨가제 및 이를 배합한 사료조성물을 양식어류에 급여하여 사육하는 방법을 제공함에 있다.
본 발명은 바실러스 서브틸러스(Bacillus-subtilus) KS-3, 바실러스 아밀로리퀘파시엔스(Bacillus-amyloliquefaciens) KS-4, 바실러스-아가라다에렌스(Bacillus-agaradhaerens) KS-5, 파에니바실러스 렌티모부스(Paenibacillus-lentimorbus) KS-6, 바실러스 라에볼락티쿠스(Bacillus-laevolacticus) KS-7, 류코노스톡 파라메센테로이드(Leuconostoc paramesenteroides) KS-9, 쿠르시아 시비리카(Kurthia-sibirica) KS-13 및 스핑고박테리움 스피리티보럼-GC 서브그룹 B(플라보박테리움)(Sphingobacterium-spiritivorum-GC subgroup B(Flavobacterium) KS-18를 포함하는 양식어류용 사료첨가제 또는 사료조성물을 포함한다.
또한 본 발명은 상기 바실러스 서브틸러스(Bacillus-subtilus) KS-3, 바실러스 아밀로리퀘파시엔스(Bacillus-amyloliquefaciens) KS-4, 바실러스-아가라다에렌스(Bacillus-agaradhaerens) KS-5, 파에니바실러스 렌티모부스(Paenibacillus-lentimorbus) KS-6, 바실러스 라에볼락티쿠스(Bacillus-laevolacticus) KS-7, 류코노스톡 파라메센테로이드(Leuconostoc paramesenteroides) KS-9, 쿠르시아 시비리카(Kurthia-sibirica) KS-13 및 스핑고박테리움 스피리티보럼-GC 서브그룹 B(플라보박테리움)(Sphingobacterium-spiritivorum-GC subgroup B(Flavobacterium) KS-18를 포함하는 양식어류용 사료첨가제 또는 사료조성물을 동물에 급여하여 사육하는 방법을 제공함에 있다.
상기 사료첨가제는 분말 또는 펠렛 제형, 또는 액상 제형인 것이 바람직하다.
상기 본 발명의 구성에 의하면 양식어류에 안전하게 사용할 수 있으며, 육질개선효과 내지는 HDL의 함량을 증가시키고, 나아가 사료 이용효율이 높은 사료첨가제 및 사료조성물을 제공할 수 있다.
이하 본 발명의 내용을 실시예 및 시험예를 통하여 구체적으로 설명한다. 그러나, 이들은 본 발명을 보다 상세하게 설명하기 위한 것으로 본 발명의 권리범위가 이들에 의해 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 사용되는 미생물들의 분리과정은 다음과 같다.
토양시료(충북 제천의 산림의 부숙토)를 60℃에서 30분 동안 열처리한 후 막자사발에서 곱게 갈아 준비해 둔 다음, 시료 1g을 취하여 0.85 % NaCl 9㎖에 현탁한 후, 희석한다. 상기 희석 현탁액 100 ㎕를 TSA, BL, BBL 배지(DIFCO 사)에 도말하여 28℃에서 배양하고, 혐기성 균주를 동정하기 위하여 ANAEROGENTM COMPACT (OXOID 제품)을 사용하여 배양한다. 배양된 균주는 콜로니 형태가 다른 것들을 선발하여 TSA 배지에서 적어도 3회 이상 계대배양하여 단일콜로니로 분리한 후, 분리된 균주는 액체 배양하고 게노믹 DNA(genomic DNA)를 순화하여 16S RNA의 프라이머를 이용하여 증폭한 뒤, 증폭된 부분을 주형(template)으로 하고 519r과 785r 프라이머(primer)를 사용하여 서열을 시퀀싱(sequencing)하는 과정을 거쳐 분리할 수 있다.
그 결과물을 NCBI DB에서 조사하여 종을 동정하였는 바, 16S RNA로 균을 동정하는 데 사용된 프라이머 세트는 "Nucleic acid techniques in bacterial systematics (John Wiley and Sons, England)"와 "nucleic acid research (2000) 28(1):173-174를 참고하였다.
이와 같이 분리된 본 발명에 사용되는 미생물은 한국유전자은행 (대전광역시 유성구 어은동 52번지 소재)을 기탁기관으로 하여, 바실러스 아밀로리퀘파시엔스(Bacillus-amyloliquefaciens) KS-4는 KCTC 11186BP, 바실러스-아가라다에렌스(Bacillus-agaradhaerens) KS-5는 KCTC 11187BP, 파에니바실러스 렌티모부스(Paenibacillus-lentimorbus) KS-6는 KCTC 11188BP, 바실러스 라에볼락티쿠스(Bacillus-laevolacticus) KS-7는 KCTC 11189BP, 류코노스톡 파라메센테로이 드(Leuconostoc paramesenteroides) KS-9는 KCTC 11190BP, 쿠르시아 시비리카(Kurthia-sibirica) KS-13은 KCTC 11191BP 및 스핑고박테리움 스피리티보럼-GC 서브그룹 B(플라보박테리움)(Sphingobacterium-spiritivorum-GC subgroup B(Flavobacterium) KS-18은 KCTC 11192BP로서 2007.09.04일자로 각각 기탁되어 있다.
상기와 같은 미생물 들을 이용하여 본 발명에 따른 양식어류용 사료첨가제 및 사료조성물은 다음과 같은 방법으로 제조될 수 있다.
상기 본 발명에 따른 양식어류용 사료첨가제는 상기 토양미생물 혼합종균 0.001 내지 0.02중량%와, 쌀겨 2 내지 5중량%, 당밀 2 내지 4중량% 및 황설탕 2 내지 4중량%에 나머지 물을 혼합하여 100중량%가 되도록 하여 혼합한 후 온도 20 내지 25℃를 유지하며 2 내지 6시간 간격으로 5 내지 10㎥/h의 공기를 1 내지 3시간 동안 폭기하는 과정을 일일 2 내지 6회 반복적으로 수행하며 15 내지 21일간 배양하여 제조할 수 있다. 상기 폭기 등의 조건은 본 발명자의 연구결과 최적화된 결과이며, 당업자라면 상기 조건에 다소의 변형을 가할 수 있으나 그러한 변형이 본 발명의 권리범위를 벗어나지 않는다는 것도 알 것이다.
이와 같은 토양미생물 혼합종균의 배양액을 제조한 후에는 쌀겨, 및 볏짚, 왕겨 등과 같은 농산물 부산물로 구성된 군으로부터 선택된 1종 이상의 배양원료 76.9 중량% 및 상기 토양미생물 혼합종균의 배양액 23.1 중량%로 구성된 혼합원료를 제조한 후, 상기 토양미생물 혼합종균 0.01 내지 0.1 중량%를 접종하는 접종단계를 수행할 수 있다. 본 발명의 사료첨가제는 배양원료로서 비교적 구하기 용이하고 원가부담이 적은 쌀겨, 농산물 부산물 등을 사용할 수 있다. 상기 배양원료는 상기 쌀겨 또는 농산물 부산물 단독으로, 또는 조합되어 사용되어도 무방하다.
상기 접종단계를 수행한 후에는, 쌀겨, 농산물 부산물 및 토양미생물 혼합종균의 배양액으로 구성되고, 상기 토양미생물 혼합종균이 접종된 혼합원료를 80 내지 85℃에서 2 내지 8시간동안 배양시키는 고온 배양단계를 거치게 된다. 본 발명에 의한 사료첨가제의 제조방법은 전술한 바와 같이, 80℃ 이상의 초고온에서 배양하는 것을 특징으로 한다. 보통의 미생물배양은 20 내지 40℃ 범위에서 이루어지는 것이 일반적인 것임을 고려하면, 본 발명에 의한 사료첨가제는 초고온의 조건에서 수행된다는 것을 알 수 있다. 특히, 본 발명의 일실시예에서는 상기 토양미생물 혼합종균이 접종된 혼합원료를 80 내지 85℃에서 2 내지 8시간 동안 30 내지 80rpm/min의 속도로 교반하면서 초고온 배양시켰다. 이때 배양온도는 불필요한 미생물의 증식을 억제하기 위해 80℃ 이상에서 수행하나, 상기 토양미생물 혼합종균의 활성도를 유지하기 위해 85℃이하에서 수행하는 것이 바람직하다.
상기 고온 배양 후 본 발명의 사료첨가제는 어느 정도의 수분을 함유하고 있기는 하지만 고온배양의 영향으로 성형에는 적합하지 않은 분말상으로 존재하게 된다. 이를 그대로 건조되거나 분쇄과정을 거쳐 건조되어 분말상으로 제조될 수도 있으나, 필요에 따라 선택적으로 성형과정을 거칠 수 있기 때문에 성형을 위하여 수분을 공급하는 것이다. 상기 성형과정은 특별한 제한은 없으며, 본 발명의 일실시예에서는 배양된 사료첨가제를 펠렛형으로 가공할 경우 시간당 800 내지 1,000kg 처리용량의 성형기를 이용하여 성형하였다.
상기 고온배양 또는 성형 단계 후에는 건조단계를 수행하게 된다. 상기 건조는 사료첨가제가 열변형 등의 우려가 없는 범위에서 공지의 건조방법 모두 사용가능하며 특별한 제한은 없다. 본 발명의 일실시예에서는 50 내지 80℃ 범위에서 열풍건조를 수행하였다.
상기 과정에 의해 얻어지는 본 발명에 따른 사료첨가제는 양식어류의 사료첨가제 또는 각 양식어류에 따라 시판되는 사료조성물에 위 사료첨가제를 첨가한 형태의 사료조성물의 형태로서 제조될 수 있다.
본 발명에 따른 사료첨가제 또는 사료조성물을 급여할 수 있는 어류에 특별 한 제한은 없다. 예를 들어, 넙치, 가자미, 뱀장어, 민물장어, 바다장어, 우럭 등과 같은 어류들을 들 수 있다.
사료에 첨가되는 본 발명에 의한 사료첨가제의 첨가량은 특별한 한정을 요하는 것은 아니며, 예를 들어 양식어류에 따라 시판되는 사료에 균주의 총수가 1×105 ∼ 1×1012 cfu/g 정도 함유하도록 첨가하면 된다.
이하 본 발명의 내용을 실시예를 통해 보다 상세하게 설명하기로 한다. 다만 이들 실시예는 본 발명의 이해를 위한 예시에 불과할 뿐 본 발명의 권리범위가 이에 한정되는 것으로 해석하여서는 아니됨에 유의해야 한다.
<실시예 1> 토양미생물 혼합종균의 배양
미생물이 함유된 토양시료(충북 제천의 산림의 부숙토)를 60℃에서 30분 동안 열처리한 후 막자사발에서 곱게 갈아 준비해 둔 다음, 시료 1g을 취하여 0.85 % NaCl 9㎖에 현탁한 후, 10-3 배로 희석하였다. 상기 희석 현탁액 100 ㎕를 TSA, BL, BBL 배지(DIFCO 사)에 도말하여 28℃에서 배양하여 토양미생물 혼합종균을 배양하였다. 상기 토양미생물 혼합종균을 분리동정한 결과 바실러스 속 균주 또는 유산균인 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis), 바실러스 소노렌시스(Bacillus sonorensis), 바실러스 TUT1206(Bacillus sp. TUT1206), 바실러스 Q-12(Bacillus sp. Q-12), 바실러스 터모아밀로보란스(Bacillus thermoamylovorans), 류코노스톡 파라메센테로이드(Leuconostoc paramesenteroides) 및 페디오코커스 펜토사세이스 스트레인 LM2632(Pediococcus pentosaceis strain LM2632) 등으로 구성되어 있음을 알 수 있었다.
<실시예 2> 액상의 양식어류용 사료첨가제의 제조
상기와 같이 배양된 토양미생물 혼합종균 0.01kg, 쌀겨 4kg, 당밀 2kg 및 황설탕 4kg을 음용수 기준에 적합한 물과 혼합하여 무게가 100kg이 되도록 혼합한 후 20 내지 25℃를 유지하며 4시간 간격으로 10㎥/h의 공기를 2시간 동안 폭기하는 과정을 일일 4회 반복적으로 수행하며 21일간 배양하여 토양미생물 혼합종균의 배양액을 제조하였다. 상기 토양미생물 혼합종균의 배양액은 총균수 4.3 x 109 cfu/g 였다.
이와는 별도로, 미리 분쇄한 65kg의 쌀겨, 농산물부산물로 35kg의 볏짚을 혼합기능이 있는 배양기에 넣고 30분간 혼합하였다. 상기 혼합된 배양원료에 상기 토양미생물 혼합종균의 배양액 30kg을 넣어 수분농도 70%로 조절한 다음, 상기 토양미생물 혼합종균을 상기 수분농도가 조절된 혼합원료 전체중량의 0.01%로 접종하였다. 상기 토양미생물 혼합종균이 접종된 혼합원료를 외기온도 300℃, 배양기 내부온도 80 내지 85℃,30 내지 80rpm/min으로 교반하면서 초고온 배양을 4시간 진행하였다.
<실시예 3> 미생물의 동정
상기와 같이 제조한 액상의 양식어류용 사료첨가제 중 콜로니 형태가 다른 것들을 선발하여 TSA 배지에서 적어도 3회 이상 계대배양하여 단일콜로니로 분리한 후, 분리된 균주는 액체 배양하고 지노믹 DNA(genomic DNA)를 순화하여 16S RNA의 프라이머를 이용하여 증폭한 뒤, 증폭된 부분을 주형(template)으로 하고 519r과 785r 프라이머(primer)를 사용하여 서열을 시퀀싱(sequencing)하였다. 그 결과물을 NCBI DB에서 조사하여 종을 동정하였는 바, 16S RNA로 균을 동정하는 데 쓰인 프라이머 세트는 "Nucleic acid techniques in bacterial systematics (John Wiley and Sons, England)"와 "nucleic acid research (2000) 28(1):173-174를 참고하였다.
또한, 상기 16s RNA 시퀀싱 외에 GC-MIDI분석, BIOLOG 분석을 더해 동정을 하였다. 상기 16s RAN 시퀀싱 결과와 GC-MIDI의 결과가 상이한 경우에는 GC-MIDI의 결과를 따르는 방향으로 동정하였다. 하기 표 1은 상기 16s RNA 시퀀싱 결과와 GC-MIDI 및 Biolog 분석 결과를 통해 확인된 본 발명의 사료첨가제에 포함된 신규한 균주에 대한 동정결과를 나타낸 것이다. 하기 표 1에 나타난 것과 같이, 본 발명의 사료첨가제는 식물성 병원균에 대하여 길항작용을 갖는 총 8종의 신규한 균주를 포함한다. SEQ NO 1∼8은 각각 하기 신규한 균주에 대한 16s RNA 분석결과이다.
<표 1>
| GC 분석 | 16s RNA sequencing | Biolog 분석 | ||
| No.1 | 유사도 | |||
| ks-3 | 0.914 | Bacillus - subtilis | Bacillus subtilis | Bacillus amyloliquefaciens B |
| ks-4 | 0.769 | Bacillus-amyloliquefaciens | ← | ← |
| ks-5 | 0.761 | Bacillus - agaradhaerens | Bacillus sp. | Bacillus subtilis C |
| ks-6 | 0.789 | Paenibacillus - lentimorbus | ← | ← |
| ks-7 | 0.794 | Bacillus - laevolacticus | Bacillus sonorensis | Bacillus licheniformis |
| ks-9 | Leuconostoc paramesenteroides | Leuconostoc paramesenteroides | ||
| ks-13 | 0.294 | Kurthia - sibirica | Bacillus oleronius | Streptococcus iniae |
| ks-18 | 0.674 | Sphingobacterium - spiritivorum | Uncultured bacterium PE02 | Sphingobacterium spiritovorum |
<실시예 4> 분말상의 양식어류용 사료첨가제의 제조
상기 실시예 2에서 제조한 액상의 사료첨가제를 실온(20 내지 25℃)으로 냉각한 다음 열풍건조(60℃)의 과정을 거쳐 수분함량 12%의 사료첨가제 92kg을 제조하였다.
<실시예 5> 넙치 사료조성물
본 발명에 따른 액상의 사료첨가제를 양식에 사용되는 사료에 첨가하였을 때의 넙치의 체장에 미치는 효과를 조사하였다.
사료에 본 발명에 따른 액상의 사료첨가제를 혼합하여 최종 미생물수가 107 cfu/g가 되도록 사용하였다. 넙치 양식에서 성장촉진 효과를 조사하기 위해 각 군당 치어 300마리씩 2번 반복하여 본 발명의 사료첨가제를 90일간 투여하였다. 이때 대조군은 어류 사료 투여군, 실험군은 어류사료에 본 발명에 따른 사료첨가제를 혼합한 것을 투여한 군으로 나누어 투여하였으며, 이후 넙치의 체장과 체중을 측정하였다.
그 결과, 대조군과 비교하였을 때 본 발명에 따른 실험군을 넙치에 투여하였을 때는 체장의 변화가 나타나지 않았다. 그러나, 체중의 경우는 실험군을 투여하는 기간이 길어짐에 따라 대조군에 비해 체중증가율이 뚜렷이 차이나게 증가하였다 (표 2, 3 참조). 그 결과, 최종 3개월째 투여했을 때는 대조군에 비하여 실험군의 성장률이 48% 이상 높았다. 따라서, 본 발명의 사료첨가제는 어류의 성장을 효과적으로 증식시킬 수 있어 양어용 사료첨가물로 유용하게 사용될 수 있음을 확인하였다.
<표 2>
* 증가율 = (투여기간 후 체장/초기 체장)×100
<표 3>
* 증가율 = (투여기간 후 체장/초기 체장)×100
<실시예 6> 민물장어 사료조성물
시판되는 민물장어 양식용 사료에 본 발명에 따른 액상의 사료첨가제를 혼합하여 최종 미생물수가 107 cfu/g가 되도록 사용하였다. 민물장어 양식에서 육질을 조사하기 위해 각 군당 치어 300마리씩 2번 반복하여 본 발명의 사료첨가제를 90일간 투여하였다. 이때 대조군은 시판 민물장어양식용 사료투여군, 실험군은 어류사료에 본 발명에 따른 사료첨가제를 혼합한 것을 투여한 군으로 나누어 투여하였으며, 이후 장어의 육질을 분석하였다. 육질분석을 위해 장어의 순수한 근육조직만을 채취하였으며, 수분은 자동수분분석기(HR 73 halogen moisture analyzer, Switzerland), 조단백질은 켈달질소정량법(N6.25), 조지방은 속슬렛 추출법(에테르 추출법), 조회분은 직접회화법으로 각각 분석하였다.(AOAC.1990.) 분석결과는 아래의 표 4와 같다.
<표 4> 육질분석
상기 표 4에서 얻어진 결과와 같이, 조단백질의 성분은 대조군(16.33%)에 비하여 투여군(19.21%)에서 높게 나왔으며, 조회분의 함량은 대조군(2.39%)에서 투여군(2.01%)보다 높게 나왔다. 이것은 육질을 볼 때 탄력성이나 맛이 대조군보다 투 여군에서 더 우수하다는 것을 나타내며, 이는 장어의 단백함을 결정하는 요인으로 작용한다.
또, 대조군과 투여군에서 각각 10마리 이상 무작위로 선택하고, 장어의 혈관궁을 통하여 혈액을 채집하여 혈중 LDL과 HDL의 차이를 분석하였다. 채집된 혈액은 4℃에서 3,000rpm으로 10분 동안 처리하여 상층액을 측정하였다. 분석결과는 아래의 표 5와 같다.
<표 5>
상기 표 5에서 얻어진 결과와 같이 LDL의 수치는 대조군(82.41mg/dL)과 투여군(90.74mg/dL)에서 유의한 차이를 보이지 않으나, HDL의 함량은 대조군(187.19mg/dL)에 비하여 투여군(347.98mg/dL)에서 70%이상 증가됨을 확인하였다.
또한, 간세포조직을 관찰한 결과 대조군에서는 간세포의 사멸현상(necrosis)이 뚜렷하게 나타났으나, 투여군에서는 오히려 모든 세포의 활성이 최적의 조건임을 확인하였다. 이를 상세히 살펴보면, 투여군의 간조직은 대조군에 비하여 핵 응축의 현상이 발견되지 않았으며, 이는 항생제 따른 세포이상이 발생되지 않았음과 혼합물 키토산올리고당 유도체가 안전함을 증명하는 결과이다.
폐사율을 측정한 결과 2년차와 3년차 양식장어에서 폐사율은 종래 30%에서 현 10% 정도로 거의 발생하지 않았으며, 1년차 장어치어에서 육성기에 이르기까지 의 성장과정의 폐사율은 양식 환경(밀집 양식법, 유행성 질환 등)에 따라 다소의 폐사(약 30%)는 발생하고 있다. 사료효율과 증체효과는 75 ~ 80%로 나타났다.
상술한 바와 같이, 본 발명의 바람직한 실시예를 참조하여 설명하였지만 해당 기술 분야의 숙련된 당업자라면 하기의 특허청구범위에 기재된 본 발명의 사상 및 영역으로부터 벗어나지 않는 범위 내에서 본 발명을 다양하게 수정 및 변경시킬 수 있음을 이해할 수 있을 것이다.
<110> YANG, Kuk San
<120> A feed additive for raising fishes, a feed composition, and a
breeding method thereof
<160> 8
<170> KopatentIn 1.71
<210> 1
<211> 1518
<212> RNA
<213> Bacillus subtilis
<220>
<221> rRNA
<222> (1)..(1518)
<400> 1
ucgauuagug uuugauccug gcucaggacg aacgcuggcg gcgugccuaa uacaugcaag 60
ucgagcggac agaugggagc uugcucccug auguuagcgg cggacgggug aguaacacgu 120
ggguaaccug ccuguaagac ugggauaacu ccgggaaacc ggggcuaaua ccggaugguu 180
guuugaaccg caugguucaa auauaaaagg uggcuucggc uaccacuuac agauggaccc 240
gcggcgcauu agcuaguugg ugagguaacg gcucaccaag gcgacgaugc guagccgacc 300
ugagagggug aucggccaca cugggacuga gacacggccc agacuccuac gggaggcagc 360
aguagggaau cuuccgcaau ggacgaaagu cugacggagc aacgccgcgu gagugaugaa 420
gguuuucgga ucguaaagcu cuguuguuag ggaagaacaa guaccguucg aauagggcgg 480
uaccuugacg guaccuaacc agaaagccac ggcuaacuac gugccagcag ccgcgguaau 540
acguaggugg caagcguugu ccggaauuau ugggcguaaa gggcucgcag gcgguuucuu 600
aagucugaug ugaaagcccc cggcucaacc ggggaggguc auuggaaacu ggggaacuug 660
agugcagaag aggagagugg aauuccacgu guagcgguga aaugcguaga gauguggagg 720
aacaccagug gcgaaggcga cucucugguc uguaacugac gcugaggagc gaaagcgugg 780
ggagcgaaca ggauuagaua cccugguagu ccacgccgua aacgaugagu gcuaaguguu 840
aggggguuuc cgccccuuag ugcugcagcu aacgcauuaa gcacuccgcc uggggaguac 900
ggucgcaaga cugaaacuca aaggaauuga cgggggcccg cacaagcggu ggagcaugug 960
guuuaauucg aagcaacgcg aagaaccuua ccaggucuug acauccucug acaauccuag 1020
agauaggacg uccccuucgg gggcagagug acagguggug caugguuguc gucagcucgu 1080
gucgugagau guuggguuaa gucccgcaac gagcgcaacc cuugaucuua guugccagca 1140
uucaguuggg cacucuaagg ugacugccgg ugacaaaccg gaggaaggug gggaugacgu 1200
caaaucauca ugccccuuau gaccugggcu acacacgugc uacaauggac agaacaaagg 1260
gcagcgaaac cgcgagguua agccaauccc acaaaucugu ucucaguucg gaucgcaguc 1320
ugcaacucga cugcgugaag ccggaaucgc uaguaaucgc ggaucagcau gccgcgguga 1380
auacguuccc gggccuugua cacaccgccc gucacaccac gagaguuugu aacacccgaa 1440
gucggugagg uaaccuuuua ggagccagcc gccgaaggug ggacagauga uuggggugaa 1500
gucguaacaa gguagcca 1518
<210> 2
<211> 1514
<212> RNA
<213> Bacillus amyloliquefaciens
<220>
<221> rRNA
<222> (1)..(1514)
<400> 2
uggcuaccuu guuacgacuu caccccaauc aucuguccca ccuuaggcgg cuggcuccaa 60
aaagguuacc ccaccgacuu cggguguuac aaacucucgu ggugugacgg gcggugugua 120
caaggcccgg gaacguauuc accgcggcau gcugauccgc gauuacuagc gauuccagcu 180
ucauguaggc gaguugcagc cuacaauccg aacugagaac gguuuuauga gauuagcucc 240
accucgcggu cuugcagcuc uuuguaccgu ccauuguagc acguguguag cccaggucau 300
aaggggcaug augauuugac gucaucccca ccuuccuccg guuugucacc ggcagucacc 360
uuagagugcc caacugaaug auggcaacua agaucaaggg uugcgcucgu ugcgggacuu 420
aacccaacau cucacgacac gagcugacga caaccaugca ccaccuguca cucugcuccc 480
gaaggagaag cccuaucucu aggguuguca gaggauguca agaccuggua agguucuucg 540
cguugcuucg aauuaaacca caugcuccac cgcuugugcg ggcccccguc aauuccuuug 600
aguuucagcc uugcggccgu acuccccagg cggagugcuu aaugcguuaa cuucagcacu 660
aaagggcgga aacccucuaa cacuuagcac ucaucguuua cggcguggac uaccagggua 720
ucuaauccug uuugcucccc acgcuuucgc gccucagugu caguuacaga ccagaaaguc 780
gccuucgcca cugguguucc uccauaucuc uacgcauuuc accgcuacac auggaauucc 840
acuuuccucu ucugcacuca agucucccag uuuccaauga cccuccacgg uugagccgug 900
ggcuuucaca ucagacuuaa gaaaccaccu gcgcgcgcuu uacgcccaau aauuccggau 960
aacgcuugcc accuacguau uaccgcggcu gcuggcacgu aguuagccgu ggcuuucugg 1020
uuagguaccg ucaaggugcc agcuuauuca acuagcacuu guucuucccu aacaacagag 1080
uuuuacgacc cgaaagccuu caucacucac gcggcguugc uccgucagac uuucguccau 1140
ugcggaagau ucccuacugc ugccucccgu aggagucugg gccgugucuc agucccagug 1200
uggccgauca cccucucagg ucggcuacgc aucguugccu uggugagccg uuaccucacc 1260
aacuagcuaa ugcgacgcgg guccauccau aagugacagc cgaagccgcc uuucaauuuc 1320
gaaccaugcg guucaaaaug uuauccggua uuagccccgg uuucccggag uuaucccagu 1380
cuuaugggca gguuacccac guguuacuca cccguccgcc gcuaacuuca uaagagcaag 1440
cucuuaaucc auucgcucga cuugcaugua uuaggcacgc cgccagcguu cauccugagc 1500
caugaucaaa cucu 1514
<210> 3
<211> 1513
<212> RNA
<213> Bacillus agaradhaerens
<220>
<221> rRNA
<222> (1)..(1513)
<400> 3
uggcuaccuu guuacgacuu caccccaauc aucuguccca ccuucggcgg cuggcuccua 60
aaagguuacc ucaccgacuu cggguguuac aaacucucgu ggugugacgg gcggugugua 120
caaggcccgg gaacguauuc acugcggcau gcugauccgc gauuacuagc gauuccagcu 180
ucacgcaguc gaguugcaga cugcgauccg aacugagaac agauuugugg gauuggcuua 240
accucgcggu uucgcugccc uuuguucugu ccauuguagc acguguguag cccaggucau 300
aaggggcaug augauuugac gucaucccca ccuuccuccg guuugucacc ggcagucacc 360
uuagagugcc caacugaaug cuggcaacua agaucaaggg uugcgcucgu ugcgggacuu 420
aacccaacau cucacgacac gagcugacga caaccaugca ccaccuguca cucugccccc 480
gaaggggacg uccuaucucu aggauuguca gaggauguca agaccuggua agguucuucg 540
cguugcuucg aauuaaacca caugcuccac cgcuugugcg ggcccccguc aauuccuuug 600
aguuucaguc uugcgaccgu acuccccagg cggagugcuu aaugcguuag cugcagcacu 660
aaggggcgga aacccccuaa cacuuagcac ucaucguuua cggcguggac uaccagggua 720
ucuaauccug uucgcucccc acgcuuucgc uccucagcgu caguuacaga ccagagaguc 780
gccuucgcca cugguguucc uccacaucuc uacgcauuuc accgcuacac guggaauucc 840
acucuccucu ucugcacuca aguuccccag uuuccaauga cccuccccgg uugagccggg 900
ggcuuucaca ucagacuuaa gaaaccgccu gcgagcccuu uacgcccaau aauuccggac 960
aacgcuugcc accuacguau uaccgcggcu gcuggcacgu aguuagccgu ggcuuucugg 1020
uuagguaccg ucaaggugcc gcccuauuug aacggcacuu guucuucccu aacaacagag 1080
cuuuacguac cgaaaaccuu caucacucac gcggcguugc uccgucagac uuucguccau 1140
ugcggaagau ucccuacugc ugccucccgu aggagucugg gccgugucuc agucccagug 1200
uggccgauca cccucucagg ucggucacgc aucguugccu uggugagccg uuaccucacc 1260
aacuagcuaa ugcgccgcgg guccaucugu aagugguagc cgaagccacc uuuuaugucu 1320
gaaccaugcg guucaaacaa acauccggua uuagccccgg uuucccggag uuaucccagu 1380
cuuacaggca gguuacccac guguuacuca cccguccgcc gcuaacauca gggagcaagc 1440
ucccaucugu ccgcucgacu ugcauguauu aggcacgccg ccagcguucg uccugagcca 1500
ggaucaaacu cua 1513
<210> 4
<211> 1513
<212> RNA
<213> Paenibacillus lentimorbus
<220>
<221> rRNA
<222> (1)..(1513)
<400> 4
uggcuaccuu guuacgacuu caccccaauc aucuguccca ccuucggcgg cuggcuccaa 60
aagguuaccu caccgacuuc ggguguuaca aacucucgug gugugacggg cgguguguac 120
aaggcccggg aacguauuca ccgcggcaug cugauccgcg auuacuagcg auuccagccu 180
cacgcagucg aguugcagac ugcgauccga acugagaaca gauuuguggg auuggcuuag 240
ccucgcggcu ucgcugcccu uuguucugcc cauuguagca cguguguagc ccaggucaua 300
aggggcauga ugauuugacg ucauccccac cuuccuccgg uuugucaccg gcagucaccu 360
uagagugccc aacugaaugc uggcaacuaa gaucaagggu ugcgcucguu gcgggacuua 420
acccaacauc ucacgacacg agcugacgac aaccaugcac caccugucac ucugcccccg 480
aaggggaagc ccuaucucua ggguugucag aggaugucaa gaccugguaa gguucuucgc 540
guugcuucga auuaaaccac augcuccacc gcuugugcgg gcccccguca auuccuuuga 600
guuucagucu ugcgaccgua cuccccaggc ggagugcuua augcguuugc ugcagcacua 660
aagggcggaa acccucuaac acuuagcacu caucguuuac ggcguggacu accaggguau 720
cuaauccugu ucgcucccca cgcuuucgcg ccucagcguc aguuacagac cagagagucg 780
ccuucgccac ugguguuccu ccacaucucu acgcauuuca ccgcuacacg uggaauucca 840
cucuccucuu cugcacucaa guuccccagu uuccaaugac ccuccccggu ugagccgggg 900
gcuuucacau cagacuuaag aaaccgccug cgcgcgcuuu acgcccaaua auuccggaca 960
acgcuugcca ccuacguauu accgcggcug cuggcacgua guuagccgug gcuuucuggu 1020
cagguaccgu caagguaccg cccuauucga acgguacuug uucuucccua acaacagagu 1080
uuuacgaucc gaaaaccuuc aucacucacg cggcguugcu ccgucggacu uucguccauu 1140
gcggaagauu cccuacugcu gccucccgua ggagucuggg ccgugucuca gucccagugu 1200
ggccgaucac ccucucaggu cggcuacgca ucguugccuu ggugagccgu uaccucacca 1260
acuagcuaau gcgccgcggg uccaucugua agugguagcu aaaagccacc uuuuauauuu 1320
gaaccaugcg guucaaacaa gcauccggua uuagccccgg uuucccggag uuaucccagu 1380
cuuacaggca gguuacccac guguuacuca cccguccgcc gcuaacauca gggagcaagc 1440
ucccaucugu ccgcucgacu ugcauguauu aggcacgccg ccagcguucg uccugagcca 1500
ugaucaaacu cua 1513
<210> 5
<211> 1538
<212> RNA
<213> Bacillus laevolacticus
<220>
<221> rRNA
<222> (1)..(1538)
<400> 5
uagaguuuga ucauggcuca ggaugaacgc uggcggcgug ccuaauacau gcaagucgaa 60
cgcuuugucu uuaacugaua ugaagagcuu gcucugauuu gauuuuaucu gacaaagagu 120
ggcgaacggg ugaguaacac guggguaacc uaccucuuag caggggauaa cauuuggaaa 180
caagugcuaa uaccguauaa uaccaacaac cgcaugguug uugguugaaa gaugguucug 240
cuaucacuaa gagauggacc cgcggugcau uagcuaguug guaagguaac ggcuuaccaa 300
ggcgaugaug cauagccgag uugagagacu gaucggccac aaugggacug agacacggcc 360
cauacuccua cgggaggcag caguagggaa ucuuccacaa ugggcgcaag ccugauggag 420
caacgccgcg ugugugauga aggguuucgg cucguaaaac acuguuauaa gagaagaacg 480
gcacugagag uaacuguuca gugugugacg guaucuuacc agaaaggaac ggcuaaauac 540
gugccagcag ccgcgguaau acguauguuc caagcguuau ccggauuuau ugggcguaaa 600
gcgagcgcag acgguuauuu aagucugaag ugaaagcccu cagcucaacu gaggaauggc 660
uuuggaaacu ggaugacuug agugcaguag aggaaagugg aacuccaugu guagcgguga 720
aaugcguaga uauauggaag aacaccagug gcgaaggcgg cuuucuggac uguaacugac 780
guugaggcuc gaaagugugg guagcaaaca ggauuagaua cccugguagu ccacaccgua 840
aacgaugagu gcuagauguu cgaggguuuc cgcccuugag ugucgcagcu aacgcauuaa 900
gcacuccgcc uggggaguac gaccgcaagg uugaaacuca aaggaauuga cggggacccg 960
cacaagcggu ggagcaugug guuuaayycg aagcaacgcg aagaaccuua ccaggucuug 1020
acaucccuug cuaauccuag aaauaggacg uucccuucgg ggacaaggug acagguggug 1080
caugguuguc gucagcucgu gucgugagau guuggguuaa gucccgcaac gagcgcaacc 1140
cuuauuauua guugccagca uucaguuggg cacucuagug agacugccgg ugacaaaccg 1200
gaggaaggug gggaugacgu caaaucauca ugccccuuau gaccugggcu acacacgugc 1260
uacaauggca uauacaacga gucgccaacc cgcgagggug cgcuaaucuc uuaaaguaug 1320
ucucaguucg gauuguaggc ugcaacucgc cuacaugaag ucggaaucgc uaguaaucgc 1380
ggaucagcac gccgcgguga auacguuccc gggucuugua cacaccgccc gucacaccau 1440
gagaguuugu aacacccaaa gccggugggg uaaccuuuua ggagccagcc gucuaaggug 1500
ggacagauga uuagggugaa gucguaacaa gguaacca 1538
<210> 6
<211> 1494
<212> RNA
<213> Leuconostoc paramescenteroides
<220>
<221> rRNA
<222> (1)..(1494)
<400> 6
uggcuaccuu guuacgacuu caccccaguc augaauccua ccgugguaau cgccccccuu 60
gcgguuaggc uaacuacuuc ugguaaaacc cacucccaug gugugacggg cgguguguac 120
aagacccggg aacguauuca ccgcgacaug cugauccgcg auuacuagcg auuccgacuu 180
cacgcagucg aguugcagac ugcgauccgg acuacgaucg gguuucuggg auuggcuccc 240
ccucgcgggu uggcugcccu cugucccgac cauuguauga cgugugaagc ccuacccaua 300
agggccauga ggacuugacg ucauccccac cuuccuccgg uuugucaccg gcagucucau 360
uagagugucc uuucguagca acuaaugaca aggguugcgc ucguugcggg acuuaaccca 420
acaucucacg acacgagcug acgacagcca ugcagcaccu guguuccggu ucucuugcga 480
gcacugccaa aucucuucgg cauuccagac augucaaggg uagguaaggu uuuucgcguu 540
gcaucgaauu aauccacauc auccaccgcu ugugcggguc cccgucaauu ccuuugaguu 600
uuaaucuugc gaccguacuc cccaggcggu caacuucacg cguuagcugc gcuaccaagg 660
gccgaagccc ccaacagcua guugacaucg uuuagggcgu ggacuaccag gguaucuaau 720
ccuguuugcu ccccacgcuu ucgugcauga gcgucagugu uaucccagga ggcugccuuc 780
gccaucggug uuccuccgca ucucuacgca uuucacugcu acacgcggaa uuccaccucc 840
cucugacaca cucuagcccg guaguuaaaa augcaguucc aagguuaagc ccugggauuu 900
cacaucuuuc uuuccgaacc gccugcgcac gcuuuacgcc caguaauucc gauuaacgcu 960
ugcacccuac guauuaccgc ggcugcuggc acguaguuag ccggugcuua uucugcaggu 1020
accgucagcu gccccaggua uuaaccaggg ccguuucuuu ccugccaaaa gugcuuuaca 1080
acccgaaggc cuucaucgca cacgcgggau ggcuggauca ggguugcccc cauuguccaa 1140
aauuccccac ugcugccucc cguaggaguc ugggccgugu cucaguccca guguggcugg 1200
ucguccucuc aaaccagcua cggaucgucg ccuugguagg ccuuuacccc accaacuagc 1260
uaauccgaua ucggccgcuc caauagugcg aggcccgaag gucccccgcu uucccccgua 1320
gggcguaugc gguauuagcu acgcuuucgc guaguuaucc cccgcuacug ggcacguucc 1380
gauacauuac ucacccguuc gccacucgcc gccagaccga aguccgcgcu gccguucgac 1440
uugcaugugu aaagcauccc gcuagcguuc aaucugagcc aggaucaaac ucua 1494
<210> 7
<211> 1508
<212> RNA
<213> Kurthia sibirica
<220>
<221> rRNA
<222> (1)..(1508)
<400> 7
ugguuaccuu guuacgacuu caccccaguc aucggccaca ccguggcaag cgcccucccg 60
aagguuaagc uaccugcuuc uggugcaaca aacucccaug gugugacggg cgguguguac 120
aaggcccggg aacguauuca ccgcagcaau gcugaucugc gauuacuagc gauuccgacu 180
ucauggaguc gaguugcaga cuccaauccg gacugagaug ggguuucugg gauuggcuua 240
ccgucgccgg cuugcagccc ucugucccca ccauuguagu acguguguag cccuggucgu 300
aagggccaug augacuugac gucaucccca ccuuccuccg guuugucacc ggcggucucc 360
uuagaguucc caccauuacg ugcuggcaac uaaggacaag gguugcgcuc guugcgggac 420
uuaacccaac aucucacgac acgagcugac gacagccaug cagcaccugu cucacgguuc 480
ccgaaggcac caauccaucu cuggaaaguu ccguggaugu caagaccagg uaagguucuu 540
cgcguugcau cgaauuaaac cacauacucc accgcuugug cgggcccccg ucaauuccuu 600
ugaguuucag ucuugcgacc guacucccca ggcggcgaac uuaacgcguu agcuucgaua 660
cugcgugcca aguugcaccc aacauccagu ucgcaucguu uagggcgugg acuaccaggg 720
uaucuaaucc uguuugcucc ccacgcuuuc gugccucagu gucaguguug guccagaugg 780
ccgccuucgc cacagauguu ccucccgauc ucuacgcauu ucacugcuac accgggaauu 840
ccgccauccu cuaccacacu cuaguugccc aguauccacu gcaauuccca gguugagccc 900
agggcuuuca caacggacuu aaacaaccac cuacgcacgc uuuacgccca guaauuccga 960
guaacgcuug cacccuucgu auuaccgcgg cugcuggcac gaaguuagcc ggugcuuauu 1020
cuuuggguac cgucagaaca aucggguauu aaccgacugc uuuucuuucc caacaaaagg 1080
gcuuuacaac ccgaaggccu ucuucaccca cgcggcaugg cuggaucagg cuugcgccca 1140
uuguccaaua uuccccacug cugccucccg uaggagucug gaccgugucu caguuccagu 1200
guggcugauc auccucucag accagcuacg gaucgucgcc uuggugggcc uuuaccccgc 1260
caacuagcua auccgacauc ggcucaucua uccgcgcgaa gcccgaaggu ccuccgcuuu 1320
cacccuaagg ucguaugcgg uauuagcgua aguuucccua cguuaucccc cacgaaaagg 1380
uagauuccga uguauuccuc acccguccgc cacucgccac ccagagagca agcucuccug 1440
ugcugccguu cgacuugcau guguuaggcc ugccgccagc guucacucug agccaggauc 1500
aaacucua 1508
<210> 8
<211> 1091
<212> RNA
<213> Sphingobacterium spiritivorum
<220>
<221> rRNA
<222> (1)..(1091)
<400> 8
uacaaaucuc acgacacgag cugacgacaa ccaugcacca ccugucacuc ugcccccuaa 60
ggggaagccc uaucucuagg guugucagag gaugucaaga ccugguaagg uucuucgcgu 120
ugcuucgaau uaaaccacau gcuccaccgc uugugcgggc ccccgucaau uccuuugagu 180
uucagucuug cgaccguacu ccccaggcgg agugcuuaau gcguuugcug cagcacuaaa 240
gggcggaaac ccucuaacac uuagcacuca ucguuuacgg cguggacuac caggguaucu 300
aauccuguuc gcuccccacg cuuucgcgcc ucagcgucag uuacagacca gagagucgcc 360
uucgccacug guguuccucc acaucccuac gcauuucacc gcuacacgug gaauuccgcu 420
cuccucuucu gcacucaagu uccccaguuu ccaaugaccc uccccgguug agccgggggc 480
uuucacauca gacuuaagaa accgccugcg cgcgcuuuac gcccaauaau uccggacaac 540
gcuugccacc uacguauuac cgcggcugcu ggcacguagu uagccguggc uuucugguua 600
gguaccguca agguaccgcc cuauucgaac gguacuuguu cuucccuaac aacagaguuu 660
uacgauccga aaaccuucau cacucacgcg gcguugcucc gucagacuuu cguccauugc 720
ggaagauucc cugcugcugc cucccguagg agucugggcc gugucucagu cccagugugg 780
ccgaucaccc ucucaggucg gcuacgcauc gucgccuugg ugagccguua ccucaccaac 840
uagcuaaugc gccgcggguc caucuguaag ugguagcuga aagccaccuu uuauaauuga 900
accaugcggc ucaaucaagc auccgguauu agccccgguu ucccggaguu aucccagucu 960
uacaggcagg uuacccacgu guuacucacc cguccgccgc ugaccuaagg gagcaagcuc 1020
ccgucggucc gcucgacuug cauguauuag gcacgccgcc agcguucguc cugagccaug 1080
aucaaacucu a 1091
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- 바실러스 서브틸러스(Bacillus-subtilus) KS-3, 바실러스 아밀로리퀘파시엔스(Bacillus-amyloliquefaciens) KS-4, 바실러스-아가라다에렌스(Bacillus-agaradhaerens) KS-5, 파에니바실러스 렌티모부스(Paenibacillus-lentimorbus) KS-6, 바실러스 라에볼락티쿠스(Bacillus-laevolacticus) KS-7, 류코노스톡 파라메센테로이드(Leuconostoc paramesenteroides) KS-9, 쿠르시아 시비리카(Kurthia-sibirica) KS-13 및 스핑고박테리움 스피리티보럼-GC 서브그룹 B(플라보박테리움)(Sphingobacterium-spiritivorum-GC subgroup B(Flavobacterium) KS-18를 포함하는 양식어류용 사료첨가제
- 제 2항에 있어서, 미생물의 총균수는 1×105 ∼ 1×1012 cfu/g 인 것을 특징으로 하는 양식어류용 사료첨가제.
- 제 2항에 있어서, 분말 제형 또는 펠렛 제형인 것을 특징으로 하는 양식어류용 사료첨가제.
- 제 2항에 있어서, 액상 제형인 것을 특징으로 하는 양식어류용 사료첨가제.
- 제 2항의 사료첨가제를 배합한 양식어류용 사료조성물.
- 제 6항에 있어서, 어류는 방어, 참돔, 넙치, 가자미, 뱀장어, 민물장어, 바다장어, 우럭의 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 양식어류용 사료조성물
- 바실러스 서브틸러스(Bacillus-subtilus) KS-3, 바실러스 아밀로리퀘파시엔스(Bacillus-amyloliquefaciens) KS-4, 바실러스-아가라다에렌스(Bacillus-agaradhaerens) KS-5, 파에니바실러스 렌티모부스(Paenibacillus-lentimorbus) KS-6, 바실러스 라에볼락티쿠스(Bacillus-laevolacticus) KS-7, 류코노스톡 파라메센테로이드(Leuconostoc paramesenteroides) KS-9, 쿠르시아 시비리카(Kurthia-sibirica) KS-13 및 스핑고박테리움 스피리티보럼-GC 서브그룹 B(플라보박테리움)(Sphingobacterium-spiritivorum-GC subgroup B(Flavobacterium) KS-18를 포함하는 양식어류 사료첨가제 또는 사료조성물을 양식어류에 급여하여 사육하는 방법.
- 제 8항에 있어서, 어류는 방어, 참돔, 넙치, 가자미, 뱀장어, 민물장어, 바다장어, 우럭의 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 양식어류의 사육방법.
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