KR100772336B1 - Skin care composition containing stabilized Castanea crenata extract and Terminalia chebula extract with niosome - Google Patents
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Abstract
본 발명은 율피추출물과 가자추출물을 안정화한 니오좀을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 조성물은 유효성분인 율피추출물과 가자추출물을 니오좀의 총중량에 대하여 0.1~10 중량%의 양으로 함유하고, 바람직하게는 0.5~50 중량% 함유한다. The present invention relates to a cosmetic composition containing niosome stabilized Yulpi extract and Gaza extract, the composition of the present invention is the active ingredient Yulpi extract and Gaja extract in an amount of 0.1 to 10% by weight relative to the total weight of niosome And preferably 0.5 to 50% by weight.
본 발명의 조성물인 율피추출물과 가자추출물은 각각 섬유아세포의 세포증식효과를 상승시켜 피부노화방지 및 미백효과에 우수한 효과를 나타내며, 율피추출물과 가자추출물을 동시에 처리함으로서 세포증식에 있어 월등히 높은 상승효과를 나타낼 수 있다. 또한, 패쇄된 이중층구조를 가진 니오좀(Niosome)을 완성하여, 그 구조안에 본 발명의 유효성분인 율피추출물과 가자추출물을 효과적으로 안정화할 수 있고, 보조유화제로서 사용한 다이글리세롤이 니오좀 입자의 크기를 작게함으로서 피부침투를 더욱 용이하게 할 수 있다. Yulpi extract and Gaza extract of the present invention increase the cell proliferation effect of fibroblasts, respectively, and show an excellent effect on the skin aging prevention and whitening effect, and significantly increase synergistic effect in cell proliferation by simultaneously treating Yulpi extract and Gaza extract Can be represented. In addition, it is possible to effectively stabilize the niosome (Nisome) having a closed double-layer structure, to effectively stabilize the Yulpi extract and the Gaza extract, the active ingredient of the present invention in the structure, the diglycerol used as co-emulsifier is the size of the niosome particles It is possible to further facilitate the skin penetration by making it smaller.
따라서 율피추출물과 가자추출물을 안정화한 니오좀을 함유한 본 발명의 조성물은 피부침투효과를 촉진시키고 유효성분의 효과를 극대화하여 뛰어난 피부탄력 증진 효과를 나타낼 수있다Therefore, the composition of the present invention containing niosome stabilized yulpi extract and gaza extract can exhibit an excellent skin elasticity promoting effect by promoting the skin penetration effect and maximize the effect of the active ingredient
가자추출물, 율피추출물, 니오좀, 화장료 조성물Gaza extract, Yulpi extract, niosome, cosmetic composition
Description
본 발명은 율피, 가자 추출물을 안정화한 니오좀을 함유하는 화장료 조성물에 관한것이다.The present invention relates to a cosmetic composition containing niosome stabilized yulpi, Gaza extract.
화장품의 궁극적인 목표는 아름답고 건강한 피부를 유지하는 것으로 이를 위한 다양한 방안들이 제시되고 있다. 특히 피부 노화현상에 의해 피부는 외적으로 다양한 변화를 가져오며 이는 아름답고 건강한 피부를 유지하는데 가장 부정적인 요인으로 작용한다. 피부 노화의 원인은 피부가 건조해지고, 자외선의 과다 노출에 의한 생체 성분의 산화 및 나이에 따른 피부의 생리적 기능 저하 등을 들 수 있다. 특별히, 생체가 호흡하는 과정 중 산소의 환원이나, 자외선 조사, 식균작용 등으로 발생하는 자유라디칼(Free radical)에 의한 손상은 인체내에서 광범위하게 발생하여 노화 발생기작중의 하나의 이론으로 인식되고 있다.[Age(1984) 7, 111-131, Harman}. 피부는 크게 표피, 진피, 피하지방층으로 구분되며 피부의 노화는 진피층의 변화와 밀접한 관계를 갖고 있다. 노화가 진행되기 전에는 피부세포의 생리활성 이 활발하여 진피(Dermis)에 있는 섬유아세포 (fibroblast)에서는 피부의 탄력 및 주름형성 억제에 중요한 콜라겐 (collagen)의 합성과 신진대사가 완성하며 또한 피부수분유지에 필수적인 히알루론산(Hyaluronic acid)을 포함한 당단백질류인 GAGS(Glucosaminoglycans) 합성도 활발하여 피부에 탄력성, 부드러움, 유연성 및 보습성을 부여한다. 또한 표피 (Epidermis)에서는 기저세포(basal layer cell)의 증식 (proliferation)이 활발하고 ,피부세포간의 결합을 강화시키는 라미닌, 인테그린, 데스모좀과 같은 결합단백질(Adhansion protein)의 생성이 균형적으로 이루어져 피부 세포조직을 강화시켜 건강한 피부를 유지해 준다. 그러나 현대인의 피부는 외부의 각종 유해 환경 및 스트레스에 노출되어 다양한 손상을 받고 있고, 나이가 들면서 피부의 생리활성이 저하되고 손상된 피부의 회복속도가 느려지면서 피부는 탄력저하, 건조, 주름형성, 칙칙함등의 다양한 피부노화 현상을 맞게 된다. 따라서 화장료의 가장 큰 목표는 이런 노화증세를 개선하는데 있고, 이를 위한 다양한 화장료가 개발되어지고 있다.The ultimate goal of cosmetics is to maintain beautiful and healthy skin. In particular, due to skin aging, the skin causes various changes externally, which is the most negative factor in maintaining beautiful and healthy skin. Causes of skin aging include dry skin, oxidation of biological components due to excessive exposure to ultraviolet rays, and deterioration of the physiological function of skin with age. In particular, damage caused by free radicals caused by reduction of oxygen, ultraviolet irradiation, phagocytosis, and the like during the respiration of living organisms is widely recognized in the human body and is recognized as one of the aging mechanisms. Age (1984) 7, 111-131, Harman. Skin is divided into epidermis, dermis and subcutaneous fat layer, and aging of skin is closely related to the change of dermis layer. Prior to aging, skin cells are physiologically active, so fibroblasts in dermis complete collagen synthesis and metabolism, which are important for skin elasticity and wrinkle suppression. It is also active in synthesizing Glucosaminoglycans (GAGS), a glycoprotein that contains hyaluronic acid, which is essential to the skin, giving skin elasticity, softness, flexibility and moisturizing properties. In epidermis, the proliferation of basal layer cells is active, and the production of binding proteins such as laminin, integrin, and desmosome, which enhance the binding between skin cells, is balanced. Maintains healthy skin by strengthening skin tissue. However, the skin of modern man is exposed to various harmful environment and stresses and suffers various damages. As he ages, the skin's physiological activity decreases and the damaged skin's recovery rate slows down, the skin loses elasticity, dryness, wrinkle formation, and dull skin Various skin aging symptoms such as. Therefore, the biggest goal of cosmetics is to improve the aging symptoms, various cosmetics have been developed for this.
최근에는 천연으로부터 얻어지는 성분들을 화장품에 이용하는 사례가 급증하고 있어, 천연 식물성분들에 대한 다양한 피부 생리활성을 검색하여 피부미용효과가 우수한 물질들이 개발되고 있다. 그러나 대부분의 생약 성분들은 그 자체가 불안정할 뿐만 아니라 화장료에 적용시 화장료의 안정성에 큰 문제점을 갖고 있다.In recent years, the use of natural ingredients in cosmetics has been increasing rapidly, and various skin physiological activities on natural plant ingredients have been searched for, and materials having excellent skin beauty effects have been developed. However, most herbal ingredients are not only unstable by themselves, but also have a big problem in the stability of the cosmetic when applied to the cosmetic.
이러한 문제를 해결하고자 현재 제약 분야 뿐 아니라, 화장품, 식품 분야등에서는 생리활성 성분이 파괴되지 않고 안정하게 전달할 수 있으며, 생리활성 성분이 지용성이든 수용성이든 모두 내포시킬수 있는 리포좀을 이용하고 있다. 리포좀 은 크게 다막리포좀(MLV : Multilamella vesicle)과 단막리포좀(ULV : Unilamella vesicle)로 구분되고 ULV는 다시 대단막리포좀(Large Unilamella vesicle)과 소단막리포좀(Small Unilamella vesicle)으로 나눌 수 있다. MLV는 그 크기가 400~3,500㎚이고 리포좀안에 내포시킬 수 있는 양은 5~15%이며, LUV는 그 크기가 100~1,000㎚이고 리포좀안에 내포시킬수 있는 양은 36~65%이며, SLV는 그 크기가 20~50㎚이고 리포좀 안에 내포시킬 수 있는 양은 0.5~1.0% 이다.In order to solve this problem, as well as in the pharmaceutical field, cosmetics, foods, etc. are currently using liposomes that can be stably delivered without destroying the physiologically active ingredients, and can contain both lipophilic and water-soluble physiologically active ingredients. Liposomes are largely divided into multi-membrane liposomes (MLV: Multilamella vesicle) and monolithic liposomes (ULV: Unilamella vesicle). MLV is 400 ~ 3500nm in size and can contain 5 ~ 15% in liposomes, LUV is 100 ~ 1,000nm and can contain 36 ~ 65% in liposomes. It is 20-50 nm and the amount which can be contained in a liposome is 0.5-1.0%.
생리활성물질을 내포시킬 수 있는 양은 LUV가 가장 많으나 불안정하고, SLV는 가장 안정하나 내포시킬 수 있는 양이 적다. 또한 사람의 피부의 구조는 다막The amount of bioactive substances that can be contained is the most LUV but unstable, SLV is the most stable, but the amount that can contain less. In addition, the structure of human skin
(Multilamella)의 구조를 갖고 있어 MLV는 피부와 친화력이 있으나 크기가 너무 커 피부 침투가 어렵다. Because of its structure, MLV has affinity with the skin, but is too large to penetrate the skin.
이에 반하여 니오좀은 현재 제약 분야에서 생리활성 성분을 안정화하여 약물전달시스템(Drug Delivery system)에 이용되고 있는 리포좀의 특별한 한 종류로, 그 크기가 10~200㎚로 피부 침투가 용이하고 리포좀에 비해 수용성 성분을 과량 내포할 수 있고 안정하다. 또한 구성 성분도 리포좀은 인지질에 의해 형성되는 반면, 니오좀은 세라마이드(Ceramide), 세레브로사이드(Cerebroside), 스핑고리피드In contrast, niosome is a special kind of liposomes currently used in drug delivery systems by stabilizing physiologically active ingredients in the pharmaceutical field. It can contain excess water soluble components and is stable. In addition, liposomes are formed by phospholipids, while niosomes are ceramide, cerebromide, and sphingolipid.
(Sphingolipid) 유도체를 사용하여 베시클(vesicle)을 형성하고 이 베시클 안에 (Sphingolipid) derivatives are used to form vesicles within the vesicles
생리 활성 성분을 내포시킨다. Contains bioactive ingredients.
본 발명은 한국내 자생하는 식물을 대상으로 민간 및 한방에서 피부미용제로 널리 이용되고 있는 생약 및 식물을 피부노화 현상에 따른 주름 및 피부탄력을 개선하는 화장료를 개발하기 위한 것이다.The present invention is to develop a cosmetic to improve the wrinkles and skin elasticity according to the skin aging phenomenon of herbal medicines and plants that are widely used as skin cosmetics in folk medicine and herbal medicine for native plants in Korea.
따라서 본 발명자들은 본 발명의 율피와 가자가 피부노화방지와 미백효과에 뛰어난 생리활성을 갖고 있다는 것을 발견하고, 이를 니오좀에 안정화함으로서 율피와 가자가 갖고 있는 피부생리활성 효과를 극대화함은 물론 화장료에서의 안정성을 해결하여 본 발명을 완성하였다. Therefore, the present inventors found that yulpi and gaza of the present invention have excellent physiological activity in preventing skin aging and whitening effect, and by maximizing the skin physiological activity effect of yulpi and gaza by stabilizing it in niosome as well as cosmetics The present invention was completed by solving the stability at.
본 발명의 목적은 율피,가자추출물을 안정화한 니오좀을 함유하는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
An object of the present invention is to provide a cosmetic composition containing niosome stabilized yulpi, gaza extract.
본 발명은 율피, 가자추출물을 안정화한 니오좀을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition containing niosome stabilized yulpi, gaza extract.
본 발명의 유효성분인 율피추출물과 가자추출물은 니오좀의 총중량에 대하여 0.1~10 중량%의 양으로 함유되고, 바람직하게는 0.5~50 중량% 함유된다. Yulpi extract and Gaza extract of the present invention are contained in an amount of 0.1 to 10% by weight, preferably 0.5 to 50% by weight relative to the total weight of niosomes.
본 발명의 조성물에서 율피추출물은 니오좀 총 중량에 대해 0.001~3.0 중량%의 양으로 함유되고 바람직하게는 0.01~1.0% 함유된다. Yulpi extract in the composition of the present invention is contained in an amount of 0.001 to 3.0% by weight relative to the total weight of niosomes, preferably 0.01 to 1.0%.
율피는 밤나무과에 속하는 밤나무(Castanea crenata)의 과실을 싸고 있는 짙은 갈색의 속껍질로서 밤 과실로부터 분리하여 햇볕에 말린 후 사용한다. 율피는 한방에서 피부미용제로 널리 사용되어지고 있고, 동의보감에서는 율피를 꿀에 개어 얼굴에 발랐을 때 주름방지 및 주름살 제거에 효과가 있다고 보고되고 있다.(동의 보감 外形篇 '面' 湯液篇 '果部') 율피추출물은 율피를 세척건조하여 유기용매에서 추출하고 이를 저온 숙성시킨 후 여과, 건조하여 얻는다. Yulpi is a dark brown bark that covers the fruit of the chestnut tree (Castanea crenata), which belongs to the chestnut family. It is separated from the chestnut fruit and dried in the sun. Yulpi is widely used as a beauty treatment in herbal medicine, and Dongbobom has been reported to be effective in preventing wrinkles and wrinkles when applied to the face by applying Yulpi in honey. (Yongbo Bogam 外形 篇 面面 湯 液 篇 '果Yulpi extract is obtained by washing and drying Yulpi in organic solvent, aging it at low temperature, filtration and drying.
본 발명의 조성물에서 가자추출물은 니오좀 총 중량에 대해 0.001~3.0 중량%의 양으로 함유되고 바람직하게는 0.01~1.0% 함유된다.In the composition of the present invention, the Gaza extract is contained in an amount of 0.001 to 3.0% by weight based on the total weight of niosomes, preferably 0.01 to 1.0%.
가자(Terminalia chebula)추출물은 사군자과 식물인 가자나무의 성숙한 과실을 말린 것으로부터 유효성분을 추출한 것으로 항산화 효과, 프리라디칼제거 효과 및 항균효과가 강력한 것으로 나타나 있다. 본 발명자들은 천연 식물을 대상으로 항산화 및 프리라디칼 소거능이 있는 물질에 대한 연구를 진행하던 중 가자 (Terminalia chebula) 추출물이 우수한 항산화 프리라디칼 소거능을 갖고 있음을 발견하여 생체성분의 산화적 스트레스로 인한 손상을 억제하기위해 사용하였다.The terminalia chebula extract is an active ingredient extracted from dried fruit of the cabbage, a common plant, which has been shown to have strong antioxidant, free radical and antibacterial effects. The inventors of the present invention, while studying a substance with antioxidant and free radical scavenging activity in natural plants, found that the extract of Terminalia chebula has excellent antioxidant free radical scavenging activity and thus damage caused by oxidative stress of biological components. It was used to suppress.
가자추출물은 율피추출물과 동일한 방법으로, 세척 건조한 후 유기용매에서 추출하고 이를 숙성시킨후 여과,건조하여 얻을 수 있다.The Gaza extract can be obtained by the same method as Yulpi extract, washed, dried, extracted from an organic solvent, aged, filtered and dried.
본 발명의 조성물에서 니오좀은 안정한 비이온계면활성제(Nonionic surfactant), 보조유화제(Co-emulsifier), 콜레스테롤(Cholesterol), 콜레스테릴에스테르(Cholesteryl ester), 및 소이스테롤(Soy sterol)을 혼합 사용하여 고압유화시킴으로서 이 패쇄된 이중층구조를 가진 니오좀(Niosome)을 완성하였다. In the composition of the present invention, niosomes are used in combination with a stable nonionic surfactant, co-emulsifier, cholesterol, cholesteryl ester, and soy sterol. The high pressure emulsification was completed to complete the niosome (Nisome) having this closed double layer structure.
비이온계면활성제는 폴리옥시에칠렌알킬에더 (Polyoxyethylene alkylether), 폴리옥시에칠렌 알킬에스테르 (Polyoxyethylene alkylester), 사카로스디에스테르 (Saccharose diester)등을 사용하고 그 양은 니오좀의 총 중량에 대하여 10~50 중량%의 양으로 함유되고, 바람직하게는 30~40 중량% 함유된다. 보조유화제로는 다이 글리세롤 (Diglycerol)을 사용하고 그 양은 니오좀의 총중량에 대하여 1~50 중량%의 양으로 함유되고, 바람직하게는 2~10 중량% 함유된다. 콜레스테롤, 콜레스테릴에스테르 및 소이스테롤은 니오좀의 총중량에 대하여 30~80 중량%의 양으로 함유되고, 바람직하게는 50~70중량% 함유되며, 이때 콜레스테릴에스테르(Cholesteryl ester)로는 콜레스테릴노나노에이트 (Cholesteryl nonanoate), 콜레스테릴스테아레이트(Cholesteryl stearate), 콜레스테릴이소스테아레이트 (Cholesteryl isostearate), 콜레스테릴올리에이트 (Cholesteryl oleate), 콜레스테릴이소스테-아릴카보네이트 (Cholesteryl isostearyl carbonate)등을 사용한다. Nonionic surfactants include polyoxyethylene alkylether, polyoxyethylene alkylester, saccharose diester, etc. and the amount is 10 to 50 based on the total weight of niobium. It is contained in the amount of% by weight, preferably 30 to 40% by weight. Diglycerol is used as the co-emulsifier and the amount is contained in an amount of 1 to 50% by weight, preferably 2 to 10% by weight based on the total weight of niosomes. Cholesterol, cholesteryl ester and soysterol are contained in an amount of 30 to 80% by weight, preferably 50 to 70% by weight, based on the total weight of niosomes, wherein cholesteryl ester is a cholesterol Cholesteryl nonanoate, Cholesteryl stearate, Cholesteryl isostearate, Cholesteryl oleate, Cholesteryl isostere-arylcarbonate (Cholesteryl isostearyl carbonate).
또한 이 비이온계면활성제 이외에도 피부의 지질이 갖고 있는 역활을 위하여 글리세린(Gltcerin)골격에 세라마이드(Ceramide)를 결합시켜 양친매성 성질을 갖게함으로서 천연지질성분과 유사토록 하였다. 이때 사용된 세라마이드는 니오좀의 총중량에 대하여 0.1~10 중량%의 양으로 함유되고, 바람직하게는 2.0~6.0 중량% 함유된다. In addition to the nonionic surfactant, ceramide was combined with a glycerin skeleton for the role of lipids in the skin to have amphiphilic properties, thereby making them similar to natural lipid components. The ceramide used at this time is contained in an amount of 0.1 to 10% by weight based on the total weight of niosomes, preferably 2.0 to 6.0% by weight.
본 발명의 화장료 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며 예를 들면, 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 아이크림, 맛사지크림, 클린징폼, 클린징워터, 파우더, 엣센스, 팩 등의 제형을 가질 수있다. The cosmetic composition of the present invention is not particularly limited in the formulation, for example, it has a formulation such as softening longevity, astringent longevity, nourishing longevity, eye cream, massage cream, cleansing foam, cleansing water, powder, essence, pack Can be.
또한, 각 제형의 화장료 조성물에 있어서, 피부개선을 위한 생약성분으로 본 발명의 율피추출물 및 가자추출물을 포함하여 그 외 생약 성분들을 화장료의 제형 또는 사용목적 등에 따라 당업자가 어려움없이 적의 선정하여 배합할 수 있다.In addition, in the cosmetic composition of each formulation, other herbal ingredients, including the yulpi extract and Gaza extract of the present invention as a herbal ingredient for skin improvement, can be appropriately selected by those skilled in the art without difficulty according to the formulation or purpose of use of the cosmetic. Can be.
이하 제조예, 실험예를 들어 본 발명의 구성 및 효과를 상세히 설명하고자 하나, 본 발명이 이에 한정하고자 하는 것은 아니다. Hereinafter, the configuration and effects of the present invention will be described in detail with reference to preparation examples and experimental examples.
제조예 1. 율피추출물Preparation Example 1. Yul Extract
정제수로 세척하고 건조시킨 다음 분말화한 율피가루 1㎏을 70% 에탄올수용액 5ℓ에 넣고 15~40℃에서 5일간 추출한 후 300메쉬 여과포로 여과하고,4~15℃에서 10일간 방치하여 저온 숙성시킨 후 와트만 2번 여과지로 여과하였다.이 추출물을 냉각 콘덴서가 달린 증류장치에서 70℃로 감압 농축하고 건조하여 89.5g(건조중량)을 얻었으며, 추출 수율은 8.9±0.5% 이었다.After washing with purified water and drying, 1 kg of powdered Yulpi powder was added to 5 L of 70% ethanol aqueous solution, extracted for 5 days at 15-40 ° C., filtered through a 300 mesh filter cloth, and left at 4-15 ° C. for 10 days to be aged at low temperature. The filter was then filtered through Whatman No. 2 filter. The extract was concentrated under reduced pressure at 70 ° C. in a distillation apparatus equipped with a cooling condenser and dried to obtain 89.5 g (dry weight), and the extraction yield was 8.9 ± 0.5%.
제조예 2. 가자추출물Preparation Example 2 Gaza Extract
사군자과 식물인 가자의 과실을 말린 것을 깨끗한 물로 세척한 다음 건조화하여 분말화 하고, 분말화된 가자 1㎏을 70% 에탄올수용액 5ℓ에 넣고 15~40℃에서 5일간 추출한 후 300메쉬 여과포로 여과하고 4~15℃에서 10일간 방치하여 저온 수성시킨 후 와트만 2번 여과지로 여과하였다. 이 추출물을 냉각 콘덴서가 달린 증류장치에서 70℃로 감압 농축하고 건조하여 45.3g(건조중량)을 얻었으며,추출 수율은 4.5±0.3% 이었다.The dried fruit of Gaza, a four-colored plant, was washed with clean water, dried, and powdered. 1 kg of powdered Gaza was poured into 5 L of 70% ethanol aqueous solution, extracted at 15-40 ° C. for 5 days, and filtered with 300 mesh filter cloth. The mixture was left at ˜15 ° C. for 10 days, cooled to low temperature, and filtered through Whatman No. 2 filter paper. The extract was concentrated under reduced pressure at 70 ° C. in a distillation apparatus equipped with a cooling condenser and dried to obtain 45.3 g (dry weight), and the extraction yield was 4.5 ± 0.3%.
제조예 3. 니오좀 제조방법Preparation Example 3
니오좀은 하기 표 1의 조성으로서 A상을 85℃까지 가온하여 균일하게 혼합, 용해시키고 45℃까지 냉각하여 제조예 1과 2에서 제조된 B상을 넣고 혼합한 후 1000bar의 압력 조건 하에서 고압유화장치(Microfludizer)에 3회 통과시켜 얻었다.Niosomes are mixed in the A phase as a composition of Table 1 to 85 ℃ to uniformly mix, dissolve and cool to 45 ℃ to mix the B phase prepared in Preparation Examples 1 and 2, and then pressurized under 1000 bar pressure conditions Obtained by passing through a device (Microfludizer) three times.
실시예 1 및 비교예 1.Example 1 and Comparative Example 1.
본 발명의 율피추출물과 가자추출물을 안정화한 니오좀을 함유한 조성물(실시예 1) 및 니오좀을 함유하지 않은 조성물(비교예 1)이 제조되었다.A composition containing niosomes stabilized with the yulpi extract and the Gaza extract of the present invention (Example 1) and a composition containing no niosomes (Comparative Example 1) were prepared.
상기 표 2의 니오좀은 제조예 3에서 제조된 것으로 율피추출물과 가자추출물을 함유하고 있다.The niosomes in Table 2 were prepared in Preparation Example 3 and contain the extract of Yule and the extract of Gaza.
실험예 1.Experimental Example 1.
본 발명의 조성물인 율피추출물과 가자추출물의 세포증식효과를 측정하였다.The cell proliferation effect of Yulpi extract and Gaza extract of the composition of the present invention was measured.
1) 실험방법1) Experiment Method
인체 정상 섬유아세포(Human normal fibroblast)를 96웰 마이키로 플레이트 (96-well microplate)의 각 웰(well)에 1X104 세포가 되도록 접종하여 디엠이엠(DMEM) 배지에서 24시간 배양하였다. 배양 후 제조예 2와 3에서 제조한 율피추출물과 가자추출물을 최종 농도 250㎍/㎖ 되도록 조정한 시럼(serum)이 없는 Human normal fibroblasts were inoculated to 1 × 10 4 cells in each well of a 96-well microplate with 96-well microkeys and incubated in DMEM medium for 24 hours. After culturing, the yeast extract and Gaza extracts prepared in Preparation Examples 2 and 3 were adjusted to a final concentration of 250 µg / ml.
디엠이엠(DMEM) 배지로 교체한 후 24시간 더 배양하였다.After incubation for 24 hours after replacement with DMEM medium.
MTT용액[3-4,5-Dimethyl-thiazole-2-yl) 2,5-diphenyl tetrazolium bromide : 5㎎/㎖] 10㎕씩 첨가하고 4시간 방치후, 배지부분을 버렸다. 각 웰당 100㎕의 디메틸 설폭시드(DMSO : Dimethyl sulfoxide)용액을 가하여 20분간 교반 후, 마이크로 플레이트 리더(microplate Reader)로 570㎚에서 흡광도를 측정하였다. 실험결과는 표 3에 나타내었다. 10 μl of MTT solution [3-4,5-Dimethyl-thiazole-2-yl) 2,5-diphenyl tetrazolium bromide: 5 mg / ml] was added thereto, and left for 4 hours. 100 μl of dimethyl sulfoxide (DMSO) solution was added to each well, followed by stirring for 20 minutes, and the absorbance was measured at 570 nm with a microplate reader. The experimental results are shown in Table 3.
세포 증식 효과는 다음 공식에 의해 산출되었다.The cell proliferation effect was calculated by the following formula.
2) 실험결과2) Experiment result
*상기 값은 3회 실시 평균값임* The above values are averages of 3 runs
섬유아세포의 증식은 피부주름 및 피부탄력 증진에 있어 중요한 콜라겐, 인테그린 및 라미닌 생합성 증가와 매우 밀접한 관계를 가지고 있다. 본 발명의 The proliferation of fibroblasts is closely related to the increase in collagen, integrin and laminin biosynthesis which are important for skin wrinkle and skin elasticity enhancement. Of the present invention
율피추출물과 가자추출물은 이러한 섬유아세포의 세포증식에 있어 각각 우수한 Yulphy extract and Gaza extract are superior in cell proliferation of these fibroblasts.
세포증식효과를 갖고 있음을 알 수 있다. 그러나 율피추출물과 가자추출물을 각각 처리했을 때의 섬유아세포의 세포증식효과보다, 율피추출물과 가자추출물을 동량으로 혼합한 경우 세포증식에 있어 월등히 높은 상승효과을 가져왔다. 결과적으로 율피추출물과 가자추출물을 동시에 처리해 줌으로서 세포증식효과를 상승시킬 수 있었다.It can be seen that it has a cell proliferation effect. However, when the Yulpi extract and the Gaza extract were treated with fibroblasts, respectively, the same amount of Yulpi extract and the Gaza extract had a much higher synergistic effect on cell proliferation. As a result, it was possible to increase the cell proliferation effect by simultaneously treating Yulpi extract and Gaza extract.
실험예 2.Experimental Example 2.
본 발명의 조성물인 율피추출물의 인테그린 합성증진효과를 측정하였다.Integrin synthesizing effect of Yulpi extract, a composition of the present invention was measured.
1) 실험방법1) Experiment Method
인체 정상 섬유아세포 (human Normal fibroblast)를 96-웰 마이크로 플레이트에 접종시키고 (2X104세포/웰) 24시간 배양하였다. 배양 후 배지를 시럼이 함유되지 않은 디엠이엠(DMEM)으로 교체한다. 이때 100㎍/㎖ 농도의 율피추출물을 배지와 함께 넣고 72시간 배양하였다. 배양 후 각 웰의 인테그린의 함량은 ELISA방법으로 분석하였다. 실험결과는 표 4에 나타내었다.Human Normal fibroblasts were seeded in 96-well microplates (2 × 10 4 cells / well) and incubated for 24 hours. After incubation the medium is replaced with DMEM without serum. At this time, 100 g / ml concentration of Yulpi extract was added together with the medium and incubated for 72 hours. After incubation, the integrin content of each well was analyzed by ELISA. The experimental results are shown in Table 4.
2)실험결과2) Experimental results
본 발명의 조성물인 율피추출물이 피부의 주름개선 및 피부탄력증진에 있어 중요한 섬유아세포와 세포사이의 결합력을 증진시켜 세포 상호간의 정보전달 및 세포활성을 촉진시키는 결합단백질인 인테그린의 생합성을 촉진시킴을 알 수 있다.Yulpi extract, the composition of the present invention, promotes the biosynthesis of integrin, a binding protein that promotes information transfer and cell activity between cells by enhancing the binding capacity between fibroblasts and cells, which are important for skin wrinkle improvement and skin elasticity. Able to know.
실험예 3.Experimental Example 3.
본 발명의 조성물인 율피추출물과 가자추출물울 안정화한 니오좀을 함유하는 화장료의 피부탄력 증진효과를 측정하였다.The skin elasticity-promoting effect of the cosmetic containing yulpi extract and Gaza extract of the present invention stabilized niosomes were measured.
1)실험방법1) Experiment Method
온도 24~26℃, 습도 75% 조건에서 20세 이상의 건강한 여성 30명(평균연령 29.5세)을 2그룹으로 나누고, A그룹에서는 실시예 1를, B그룹에서는 비교예 1를 각각 상기표 1에 따라 제형하여 눈가를 중심으로 12주간 도포(2회/일)한 후, 피부탄력측정기(Cutometer SEM 575, C+K Electronic Co.,Germary)를 이용하여 피부탄력을 측정하였다. 시험결과는 하기표 2에 Cutometer SEM 575의 △R8(R8(12주))-R8(0주)) 값으로 기재하였는데, R8 값은 피부 점탄성(vicoelasticity)의 성질을 나타낸다. 실험결과는 하기 표 5에 나타내었다.Thirty healthy women (mean age 29.5 years old) over 20 years old were divided into two groups at a temperature of 24 to 26 ° C and a humidity of 75%, Example 1 in Group A, and Comparative Example 1 in Group B, respectively. After the formulation was applied for 12 weeks (2 times / day) around the eyes, the skin elasticity was measured using a skin elasticity analyzer (Cutometer SEM 575, C + K Electronic Co., Germary). The test results are described in Table 2 below as values of ΔR8 (R8 (12 weeks))-R8 (0 weeks) of Cutometer SEM 575, where R8 values indicate the nature of skin viscoelasticity. The experimental results are shown in Table 5 below.
2) 실험결과2) Experiment result
표 5의 결과에서와 같이, 율피추출물과 가자추출물을 안정화한 니오좀을 함유한 실시예 1의 피부탄력은 율피추출물과 가자추출물을 안정화하지 않고 직접 제형에 사용한 비교예 1에 비해 79.3%나 증가하였다. 따라서 율피추출물과 가자추출물을 안정화한 니오좀을 함유한 실시예 1이 피부탄력증진에 있어 훨씬 더 뛰어난 효과를 나타냄을 알 수 있다.As shown in the results of Table 5, the skin elasticity of Example 1 containing niobium stabilized Yul extract and Gaza extract was increased by 79.3% compared to Comparative Example 1 used directly in the formulation without stabilizing Yul extract and Gaza extract It was. Therefore, it can be seen that Example 1 containing niobium stabilized yulpi extract and Gaza extract showed much more excellent effect on skin elasticity.
실험예 4.Experimental Example 4.
본 발명의 율피추출물과 가자추출물을 안정화한 니오좀을 함유한 화장료에 대한 피부 침투 효과를 측정하였다.The skin penetration effect on the cosmetics containing niosomes in which the yulpi extract and the Gaza extract of the present invention were stabilized were measured.
1) 실험방법1) Experiment Method
Dermal Equivalent(DE)-인체 정상 섬유아세포(Human normal fibroblast) 1X105 cell/㎖ 세포를 인체의 결합조직을 이루는 섬유조직과 유사한 콜라겐 젤 구조에 콜라겐 수용액 3㎎/㎖ : 5X DMEM : 2.2% 소듐바이카보네이트(Sodium bicardonate)와 200mM Hepes 완충액이 포함된 0.05N 수산화나트륨이 7:2:1로 혼합 된 배지에 접종하여 5% CO2, 37℃에서 7일 동안 배양하였다. 이를 3㎛ 다공성 폴리카보네이트(Porous polycarbonate)재질로 된 막(Membrane)에 의해 안쪽과 바깥쪽이 구분된 플레이트(Plate)의 안쪽에 넣고 섬유아세포가 배양된 Derma Equivalent(DE)Dermal Equivalent (DE) -Human normal fibroblast 1X10 5 cells / ml Cells in collagen gel structure similar to the fibrous tissue that forms the connective tissue of human body 3mg / ml: 5X DMEM: 2.2% sodium bi 0.05N sodium hydroxide containing carbonate (Sodium bicardonate) and 200mM Hepes buffer was inoculated in a medium mixed with 7: 2: 1 and incubated at 5% CO 2 , 37 ° C for 7 days. Derma Equivalent (DE) in which fibroblasts were cultured by putting it inside a plate separated by an inside and an outside by a membrane made of a 3 μm porous polycarbonate material.
표면위에 표피각질형성세포(Epidermal Keratinocyte) 1X105cell/㎖ 세포를 접종하여 EGF와 BPE가 함유된 K-SFM 배지를 안쪽과 바깥쪽에 넣고 7일 동안 배양하였다. 그 후 플레이트 안쪽의 배지를 버려 공기가 배양세포의 표면에 접촉되도록 하고 바깥쪽에 10% FBS가 함유된 K-SFM과 EGF가 들어있지 않은 DMEM이 동량으로 혼합된 배지를 넣어 2주간 배양하여 다층의 표피와 진피가 형성된 인공피부를 얻었다. 여기에 본 발명의 실험예 및 비교예를 맨 위층의 인공피부 조직에 적용하여 4시간 배양후 10% FBS가 함유된 K-SFM과 EGF가 들어있지 않은 DMEM이 동량으로 혼합된 배지에서 인공피부의 표피와 진피를 침투하여 통과된 추출물의 양을 HPLC로 분석하였다. 시험결과는 하기 표 6에 나타내었다.The epidermal keratinocytes (Epidermal Keratinocyte) 1X10 5 cells / ㎖ cells were inoculated on the surface of EGF and BPE containing K-SFM medium was incubated for 7 days. Afterwards, the medium inside the plate was discarded to allow the air to come into contact with the surface of the cultured cells, followed by incubating for 2 weeks in a medium in which K-SFM containing 10% FBS and DMEM without EGF were mixed in the same amount and incubated for 2 weeks. Artificial skin with epidermis and dermis was obtained. The experimental and comparative examples of the present invention were applied to the artificial skin tissue of the top layer, and after 4 hours of cultivation, the artificial skin was treated in a medium in which K-SFM containing 10% FBS and DMEM without EGF were equally mixed. The amount of extract passed through the epidermis and dermis was analyzed by HPLC. The test results are shown in Table 6 below.
2) 실험결과2) Experiment result
실험결과 표 6에서와 같이, 본 발명의 율피추출물과 가자추출물을 안정화한 니오좀을 함유한 화장료는 율피추출물과 가자추출물을 그대로 사용한 비교예에 비해 10배 이상의 피부 침투효과가 우수함을 알 수 있다. 이는 본 발명의 니오좀의 평균입자 크기가 100㎚로 아주 작아 피부침투가 용이하기 때문이다.Experimental results As shown in Table 6, it can be seen that the cosmetics containing the niobium stabilized yulpi extract and Gaza extract of the present invention has a 10 times higher skin penetration effect than the comparative example using Yulpi extract and Gaza extract as it is. . This is because the average particle size of the niosomes of the present invention is very small at 100 nm, thereby facilitating skin penetration.
본 발명의 니오좀에 보조유화제로서 사용한 다이글리세롤이 니오좀 입자의 크기를 작게함으로서 피부침투를 더욱 용이하게 하였다. 따라서 상기의 실험예 3의 피부탄력 증진 효과에 있어서, 본 발명의 실시예 1는 피부 침투효과가 비교예 1보다 우수하여 좀 더 우수한 피부탄력 증진효과를 보이고 있음을 알 수 있다.Diglycerol used as a co-emulsifier in the niosome of the present invention further facilitated skin penetration by reducing the size of the niosome particles. Therefore, in the above-described skin elasticity enhancing effect of Experimental Example 3, it can be seen that Example 1 of the present invention shows a better skin elasticity enhancing effect than the skin penetration effect of Comparative Example 1.
실험예 5. 제형의 안정성 시험Experimental Example 5. Stability Test of Formulation
상기 본 발명의 율피추출물과 가자추출물을 안정화한 니오좀을 함유한 화장료에 대한 안정성 시험Stability test for cosmetics containing niosomes stabilized Yulpi extract and Gaza extract of the present invention
1) 실험방법1) Experiment Method
화장료의 안정성을 시험하기 위해 상기 실시예 1, 비교예 1을 45℃로 일정하게 유지되는 항온조에서 불투명 추자 용기에 담아 12주 동안 보관하고 또한 4℃로 일정하게 유지되는 완전히 차광된 냉장고 내에서 불투명 초자 용기에 담아 12주동안 보관한 후, 분리 정도 및 변색 정도를 비교 측정하였다. 그 결과를 하기 표 7에 나타내었다. 이때 제품 분리 및 변색 정도를 다음의 6등급으로 분류하여 평가하였다.In order to test the stability of the cosmetics Example 1, Comparative Example 1 in an opaque pendulum container kept in a constant temperature maintained at 45 ℃ kept for 12 weeks and also opaque in a fully shaded refrigerator kept constant at 4 ℃ After storing for 12 weeks in a glass container, the degree of separation and discoloration were measured. The results are shown in Table 7 below. At this time, the degree of product separation and discoloration were evaluated by classifying into the following six grades.
제품 변색 평가 기준 : Product discoloration evaluation criteria:
0: 변화없음 1: 극히 조금 분리(변색)0: no change 1: very little separation (discoloration)
2: 조금 분리(변색) 3: 조금 심하게 분리 (변색)2: Slightly separated (discolored) 3: Slightly separated (discolored)
4: 심하게 분리(변색) 5: 극히 심하게 분리 (변색)4: severely separated (discolored) 5: extremely severely separated (discolored)
표 7에서 알 수 있는 바와 같이, 실시예 1는 45℃에서 변색이나 분리 증상이 없이 안정하였으나, 본 발명의 율피추출물과 가자추출물을 안정화 하지않고 직접 제형에 사용한 비교예 1은 45℃에서 심한 분리 및 변색이 일어나 추출물이 불안정할 뿐 아니라 율피추출물과 가자추출물이 제형에 들어가 제형이 불안정해 졌음을 알 수있다.As can be seen from Table 7, Example 1 was stable at 45 ℃ without discoloration or separation symptoms, Comparative Example 1 used directly in the formulation without stabilizing Yulpi extract and Gaza extract of the present invention severe separation at 45 ℃ And discoloration occurs as well as the extract is unstable as well as Yulpi extract and Gaza extract can be seen that the formulation is unstable.
이하 상기한 실험예들의 결과를 근거로 하여 본 발명의 율피추출물과 가자추출물을 안정화한 니오좀을 함유하는 화장료를 조성하여 제시한다. 그러나, 본 발명의 조성물을 하기의 제형예들로 한정하고자 하는 것은 아니다.Hereinafter, based on the results of the above experimental examples, to present a cosmetic composition containing niosomes stabilized Yulpi extract and Gaza extract of the present invention. However, the composition of the present invention is not intended to be limited to the following formulation examples.
제형예 1. 유연화장수(스킨로션)Formulation Example 1 Softening Cosmetic (Skin Lotion)
하기 표에 나타난 바와 같이 유연화장수를 통상의 방법에 따라 제조하였다.As shown in the following table, the softening lotion was prepared according to a conventional method.
제형예 2. 영양화장수(밀크로션)Formulation Example 2. Nutrients (Milk Lotion)
하기 표에 나타난 바와 같이 영양화장수를 통상의 방법에 따라 제조하였다.Nutrients were prepared according to a conventional method as shown in the table below.
제형예 3. 영양크림Formulation Example 3. Nutrition Cream
하기 표에 나타난 바와 같이 영양크림을 통상의 방법에 따라 제조하였다Nutritious cream was prepared according to a conventional method as shown in the following table.
제형예 4. 마사지크림Formulation Example 4 Massage Cream
하기 표에 나타난 바와 같이 마사지크림을 통상의 방법에 따라 제조하였다Massage cream was prepared according to a conventional method as shown in the table below.
제형예 5. 팩Formulation Example 5 Pack
하기 표에 나타난 바와 같이 팩을 통상의 방법에 따라 제조하였다Packs were prepared according to conventional methods as shown in the table below.
본 발명의 율피추출물과 가자추출물은 각각 섬유아세포의 세포증식효과를 상승시켜 피부노화방지 및 미백효과에 우수한 효과를 나타내며, 율피추출물과 가자추출물을 동시에 처리함으로서 세포증식에 있어 월등히 높은 상승효과를 나타낼 수 있다. 또한, 패쇄된 이중층구조를 가진 니오좀(Niosome)을 완성하여, 패쇄된 이중층 구조안에 본 발명의 유효성분인 율피추출물과 가자추출물을 효과적으로 안정화할 수 있고, 보조유화제로서 사용한 다이글리세롤이 니오좀 입자의 크기를 작게함으로서 피부침투를 더욱 용이하게 할 수 있다. Yulpi extract and Gaza extract of the present invention increases the cell proliferation effect of fibroblasts, respectively, and shows an excellent effect on skin aging prevention and whitening effect, and shows a significantly higher synergistic effect on cell proliferation by simultaneously treating Yulpi extract and Gaza extract Can be. In addition, by completing a niosome (blocked double layer structure) (Niososome), the effective ingredient of the present invention in the blocked double layer structure can effectively stabilize Yulpi extract and Gaza extract, diglycerol used as co-emulsifier niosome particles By reducing the size of the skin penetration can be further facilitated.
따라서 율피추출물과 가자추출물을 안정한 니오좀을 함유한 본 발명의 조성물은 피부침투효과를 촉진시키고 유효성분의 효과를 극대화하여 뛰어난 피부탄력 증진 효과를 나타낼 수있다 Therefore, the composition of the present invention containing the niobium stable yulpi extract and Gaza extract can exhibit an excellent skin elasticity promoting effect by promoting the skin penetration effect and maximize the effect of the active ingredient
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