KR100723574B1 - 신규 프로브를 이용하여 돼지콜레라 바이러스 유전자를정량분석하는 방법 및 이의 시약 - Google Patents
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Abstract
Description
Claims (5)
- 서열번호 1 내지 서열번호 3로 표시되는 염기서열 또는 상기 염기서열에 상보적인 염기서열로 이루어지는 돼지콜레라 바이러스 진단용 프로브.
- 제 1 항 기재의 프로브를 사용하여 시료로부터 중합PCR 증폭한 돼지콜레라 바이러스 유전자를 정량분석하는 방법.
- 제 2 항에 있어서,상기 검출은 하기 (a) 내지 (e) 단계를 포함하여 이루어지는 것을 특징으로 하는 돼지콜레라 바이러스 유전자를 정량분석하는 방법.(a) 피검체로부터 돼지콜레라 바이러스의 RNA를 분리하고, 상기 RNA를 RT-PCR처리하여 두가닥의 DNA 유전자로 전환한 다음, 이를 표지물이 부착된 프라이머와 PCR증폭하여 시료를 준비하는 단계;(b) 상기 증폭된 DNA 시료를 가열 또는 알칼리 처리하여 단일 가닥 상태로 변성시켜주는 단계;(c) 상기 변성된 유전자를 플레이트에 고정된 제 1 항 기재의 프로브와 핵산 교잡 반응을 수행하는 단계;(d) 비특이적으로 결합한 반응물을 세척액으로 제거하고, 상기 (a) 단계의 표지물과 특이적 결합하고 발색효소가 부착된 상보성 물질을 사용하여 교잡 반응을 수행하는 단계; 및(e) 비특이적으로 결합한 반응물을 세척액으로 제거하고 상기 (d) 단계의 발색효소과 반응 하는 기질 반응액을 사용하여 발색정도를 측정한 다음 표준대조시료와 비교하여 돼지콜레라 바이러스 유전자를 정량분석하는 단계
- 서열번호 1 내지 서열번호 3로 표시되는 염기서열 또는 상기 염기서열에 상보적인 염기서열로 이루어지는 프로브를 이용하여 시료 내에 돼지콜레라 바이러스를 정량분석하는 돼지콜레라 정량분석용 시약.
- 제 4 항에 있어서,상기 프로브를 고정한 고정체와;피검체에 포함된 돼지콜레라 바이러스로부터 RNA를 분리하고, 표지물이 부착된 프라이머를 사용하여 RT-PCR로 두가닥의 DNA 유전자로 PCR증폭하여 처리한 시료; 및상기 프라이머의 표지물과 특이적으로 결합하고 발색효소가 부착된 상보성 물질 및 상기 발색효소와 반응하여 발색되는 기질 반응액을 포함하여 이루어지는 돼지콜레라 바이러스 정량분석용 시약.
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CN102766633A (zh) * | 2012-07-25 | 2012-11-07 | 湖南大学 | 可用于检测人肝癌细胞株Bel-7404的核酸适体及其筛选方法和应用 |
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KR100904772B1 (ko) * | 2006-06-05 | 2009-06-26 | 대한민국(관리부서 : 농림수산식품부 국립수의과학검역원) | 유전자칩, 이를 이용한 돼지콜레라 바이러스 또는소바이러스성설사증 바이러스 유전자의 검사방법 및 그를포함하는 진단키트 |
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KR100478435B1 (ko) | 2002-12-31 | 2005-03-28 | 주식회사 제노바이오텍 | 돼지콜레라 바이러스에 대한 단일클론항체를 이용한 돼지콜레라 바이러스 진단용 키트 |
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2005
- 2005-03-29 KR KR1020050026064A patent/KR100723574B1/ko active IP Right Grant
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CN102766633B (zh) * | 2012-07-25 | 2014-06-04 | 湖南大学 | 可用于检测人肝癌细胞株Bel-7404的核酸适体及其筛选方法和应用 |
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