KR100720655B1 - 항산화 및 항암효과를 나타내는 ｙｋ 생약 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 연교, 천궁, 백지, 황금, 황련, 사삼, 형개, 상백피, 치자, 패모 및 감초를 포함하는 혼합생약 추출물을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 구체적으로 본 발명의 혼합생약 추출물은 전자공여능으로 확인한 항산화효과 및 암세포주에 대한 증식 억제효과를 나타내는바 항산화 및 항암효과를 갖는 화장료 조성물로 유용하게 이용될 수 있다.

연교, 천궁, 백지, 황금, 황련, 사삼, 형개, 상백피, 치자, 패모, 감초, 화장료 조성물

Description

항산화 및 항암효과를 나타내는 ＹＫ 생약 조성물{ＹＫ Crude drug composition showing anti-oxidative and anti-tumor activity}

도 1은 본 발명의 추출물의 추출과정을 나타낸 것이다.

본 발명은 항산화 및 항암활성을 갖는 연교, 천궁, 백지, 황금, 황련, 사삼, 형개, 상백피, 치자, 패모 및 감초를 포함하는 혼합생약 추출물을 함유하는 조성물에 관한 것이다.

인간의 피부는 끊임없이 변화를 겪게 되며, 그 중 가장 대표적인 것이 노화에 의한 피부의 기능 저하 및 시각적인 아름다움의 감소이다. 피부의 노화는 크게 유전적 요소에 따른 내적 노화와 태양광선 등의 외부 환경적 요소에 따른 외적 노화로 구분 된다(Doris EV, Cosm. & Toil. USA, 111, pp31-37, 1996). 외적 노화는 피부의 주름을 형성시키며, 대표적인 주름형성의 인자로서 활성 산소, 자외선 및 콜라겐의 생합성 감소 등을 들 수 있다. 피부의 내적 노화의 경우 인위적인 조절이 불가능하나, 외적 노화의 경우 활성산소 제거, 섬유아세포의 증식 및 콜라겐의 생 합성 촉진 등의 조절로서 내적 요인에 비하여 용이하며, 그 중 비타민 A와 그 유도체는 피부 내 섬유아세포의 증식 및 콜라겐 합성을 증진시켜 주름을 완화하는 것으로 알려져 있다. 또한, 피부에 있어서 태양광선 등은 주름을 형성할 뿐만 아니라 기저층에 존재하는 색소 세포인 멜라노사이트를 자극하여 멜라닌을 합성한다. 이러한 멜라닌의 과잉 생산은 기미 및 주근깨를 형성하며 또한 피부암과도 밀접한 관계가 있다. 멜라노사이트에서 멜라닌의 생합성 과정에 관여하는 효소로서 타이로시나제가 있으며, 타이로시나제의 저해제로서 cinnamic acid, 안식향산(benzoic acid), 시스테인(cysteine), 클로로제닉산(chlorogenic acid)등이 알려져 있으며, 주로 여성의 기미 치유에 사용되는 하이드로퀴논(hydroquinone)을 비롯하여 멜라노스타틴(melanostatin), 트로폴론(tropolone), 코직산(kojic acid), 알부틴(arbutin) 등이 사용되어 왔으나, 안전성 등의 문제점이 있는 경우가 많으며 효과도 명확하거나 뚜렷하게 확인되고 있지는 못한 실정이다. 따라서 인간이 오랫동안 안전하게 먹어왔던 천연물로부터 타이로시나제 저해능이 뛰어난 물질을 이용하려는 시도가 이루어지고 있다.

항산화활성이란 생체 내 활성산소의 생성을 방지하고 세포에 회복 불가능한 손상을 야기하는 산화현상을 방지하는 활성을 말한다. 안정한 상태의 산소(triplet oxygen)는 효소계, 환원 대사, 화학약품, 공해물질, 광화학 반응과 같은 환경적 및 생화학적 요인 등에 의해 슈퍼옥사이드 라디칼, 하이드록실 라디칼, 과산화수소(hydrogen peroxide, H₂O₂)와 같은 반응성이 큰 활성 산소(Reactive oxygen species: ROS)로 전환되어 다양한 세포 구성 성분인 지질, 단백질, DNA를 산화시켜 염증을 유발하거나 여러 기관들을 손상시킨다고 알려져 있다(Beckman JS, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 87, pp1620-1624, 1990 : Sagar S, et al., Mol. Cell Biochem., 111, pp103-108, 1992 : Ames BN, et al., Proc. Natl. Acad, USA, 90, pp7915_7922, 1993). 그 예로는 수퍼옥사이드 음이온(superoxide anion, ·O₂), 과산화수소, 히이드록실 라디칼, 단일항 산소(singlet oxygen, ¹O₂), 지질과산화에 의해 생성되는 알콕실 라디칼(alkoxyl radical, RO·), 퍼옥실 라디칼(peroxyl radical, ROO·) 그리고 과산화질소 이온(ONOO^-)을 들 수 있다.

이들 활성산소의 작용은 체내 방어기구인 슈퍼옥사이드디스뮤타제(SOD), 카탈라아제(catalase), 퍼옥시다아제(peroxidase) 등의 항산화성 효소 및 비타민 C, E, 글루타치온(glutathione) 등의 항산화물질의 작용에 의하여 최소화될 수 있으나, 이러한 생체방어력에 이상이 생기거나 과도한 활성산소에 노출될 경우, 이 균형이 깨어져서 활성산소가 기질, 단백질, DNA 등을 비가역적으로 파괴하게 되며, 그 결과, 노화(aging), 암, 복합성 동맥경화(multiple atherosclerosis), 관절염 및 파킨슨병(parkinson's disease)과 같은 각종 질병이 유발된다는 것이 보고되었다(Griffiths HR, et al., FEBS Lett., 388, pp161-164, 1996 ; Squadrito GL, et al., Free Radic. Biol. Med., 25, pp392-493, 1998 ; Choi JS, Phytochem. Res., 16, pp232-235, 2002 ; Dreher D, et al., Eur. J. Cancer, 32A(1), pp30-38, 1996 ; Sohal RS, et al., Free Radic. Biol. Med., 33(1), pp37-44, 2002).

이러한 산화적 스트레스에 기인한 질병을 예방하고, 식품의 산화적 변패를 방지하기 위해, 식용 혹은 약용식물로부터 강력하고 무해한 천연 항산화제를 분리, 동정, 개발하려는 많은 연구가 진행되고 있다. 또한 식물 유래의 천연 화합물들은 자유 라디칼, 그리고 활성 산소종의 소거제 혹은 환원제로서 산화과정을 지연시킨다고 한다(Pratt, D. E., American Chemical Society, pp54-71, 1994 : Larson, R. A., Phytochem., 27, pp969-978, 1988).

지금까지 개발된 합성 항산화제로는 BHA (butylated hydroxy anisole), BHT (butylated hydroxy toluene) 및 NDGA(nordihydro-guaiaretic acid) 등이 있으며, 천연 항산화제로는 수퍼옥사이드 디스뮤타제, 퍼옥시다아제, 카탈라아제, 글루타치온 퍼옥시다아제 등의 항산화효소와 토코페롤(비타민 E), 비타민 C(Vitamin C, ascorbic acid), 카르테노이드, 글루타치온 등의 비효소적 항산화물질 등이 있다.

그러나 합성 항산화제는 생체 내에서 독성을 나타내어 알레르기와 종양을 발생시킬 수 있는 단점이 있으며, 온도에 약해 한번 열을 가하면 쉽게 파괴되는 단점이 있다. 반면에, 천연 항산화제는 합성 항산화제에 비해 생체에 안전하다는 장점이 있으나, 그 효과가 약하다는 단점이 있다. 따라서 항산화활성이 탁월하고 보다 안전한 새로운 천연 항산화제 개발이 절실히 요구되고 있다. 항산화 효과 확인 시 이용되는 DPPH 라디칼 소거효과 시험에서 DPPH는 안정한 자유 라디칼로서 그것의 비공유전자로 인해 517nm 부근에서 최대 흡수치를 나타내며, 전자 또는 수소를 받으면 517nm부근에서 흡광도가 감소하며 각 추출물에서 이러한 라디칼을 환원시키거 나 상쇄시키는 능력이 크면 높은 항산화 활성 및 활성 산소를 비롯한 다른 라디칼에 대한 소거 활성을 기대할 수 있다.

또한 암은 인류가 해결해야 할 난치병 중의 하나로, 전 세계적으로 이를 치유하기 위한 개발에 막대한 자본이 투자되고 있는 실정이며, 우리나라의 경우, 질병 사망원인 중 제 1위의 질병으로서 연간 약 10 만 명 이상이 진단되고, 약 6 만 명 이상이 사망하고 있다. 이러한 암의 유발 인자인 발암물질로는 흡연, 자외선, 화학물질, 음식물, 기타 환경인자들이 있으나, 그 유발 원인이 다양하여 치료제의 개발이 어려울 뿐만 아니라 발생하는 부위에 따라 치료제의 효과 또한 각기 다르다. 현재 치료제로 사용되는 물질들은 상당한 독성을 지니고 있으며, 암 세포만을 선택적으로 제거하지 못하므로, 암의 발생 후 이의 치료뿐 아니라, 암의 발생을 예방하기 위한 독성이 적고 효과적인 항암제의 개발이 절실히 필요하다.

연교(Forsythia viridissima)는 물푸레나무과(木犀科, Oleaceae)에 속하는 개나리의 과실로써 신농본초경(神農本草經)에 기재되어 있으며 한방과 민간에서 종창, 임질, 통경, 이뇨, 치질, 결핵, 나력, 옴, 해옥 및 월경불순 등의 치료제로 널리 사용되고 있다(Kim TJ. Korea resources plants, pp261, 1991). 연교의 종류는 중국연교(Forsythia viridissma Lindle). 일본연교(Forsythia korea Nakai)로 대별된다. 일본연교(F. koreana)는 F. viridissima Lindle var.koreana Nakai란 학명으로 사용하기도 하며 한연교 라고도 불리우고 있다. 중국연교(F. viridissima)는 의성개나리 또는 금종화 라고도 하는데 우리나라 일부와 중국의 절강(折江), 복건성(福建省)등지에서 자생한다(Lee EB. and Keum HJ., Kor. J. Pharmacol. 19(4), pp262-269, 1988).

연교에 함유되어 있는 성분에는 리그난류, 리그난 글리코사이드류, 플라보노이드 및 카페올 글리코사이드(caffeoyl glycoside)류 등이 있으며, 그 활성성분이 혈압강화작용 및 항염효과를 가지고 있음이 보고되고 있다(Takeshi H, Yuka K, et al., Yakugaku Zasshi, 39(1), pp235-241, 1995).

연교의 생리활성물질의 분리 및 그들의 생리적·약리적 작용에 관한 연구보고는 많은 반면 연교의 복합처방물인 연교산 대한 연구로는 박 등(박지수, 대전대대학원 박사학위논문, 2005)의 아토피 동물 모델에 미치는 영향에 대한 연구가 보고 되어 있으나 연교산 및 구성약물에 대해서는 임상적 연구나 효소학적 측면의 생리활성기능 및 항암효과에 대해서는 많은 연구가 진행되어 있지 않은 실정이다.

본 발명자들은 피부에 유해한 유기 자유 라디칼을 잘 소거하여 피부노화를 억제할 수 있으며, 또한 피부의 혈액순환을 촉진하여 피부에 탄력과 윤기를 줄 수 있는 화장료를 제공하고자 연구한 결과, 자유라디칼 소거능이 탁월한 목적을 달성할 수 있음을 발견하였다. 본 발명에서는 연교산의 자유라디칼 소거능을 검증하고 연교산 구성 약물들의 우수한 약리작용인 항암작용을 검토하여 화장품의 천연소재로서의 적합성을 검토함으로써 본 발명을 완성하였다.

본 발명의 목적은 연교, 천궁, 백지, 황금, 황련, 사삼, 형개, 상백피, 치자, 패모 및 감초 1~3:1~3:1~3:1~3:1~3:1~3:1~3:1~3:1~3:1~3:1~3의 혼합건조중량비(w/w)인 혼합생약 추출물을 함유하며 안정성에 문제가 없는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 항산화 및 항암효과를 갖는 연교, 천궁, 백지, 황금, 황련, 사삼, 형개, 상백피, 치자, 패모 및 감초를 포함하는 혼합생약 추출물을 함유하는 조성물을 제공한다.

본 발명의 추출물의 바람직한 혼합 중량비는 연교 1~10: 천궁 1~10: 백지 1~10: 황금 1~10: 황련 1~10: 사삼 1~10: 형개 1~10: 상백피 1~10: 치자 1~10: 패모 1~10: 감초 1~10, 보다 바람직하게는 연교 1~5: 천궁 1~5: 백지 1~5: 황금 1~5: 황련 1~5: 사삼 1~5: 형개 1~5: 상백피 1~5: 치자 1~3: 패모 1~5: 감초 1~5, 더욱더 바람직하게는 상기 추출물의 혼합 건조 중량비가 연교 1~3: 천궁 1~3: 백지 1~3: 황금 1~3: 황련 1~3: 사삼 1~3: 형개 1~3: 상백피 1~3: 치자 1~3: 패모 1~3: 감초 1~3 로 혼합된 것이다.

상기 추출물은 정제수를 포함한 물, 탄소수 1 내지 4의 저급알코올 또는 프로필렌글리콜, 초산에칠, 부틸렌글리콜, 에테르, 클로로포름으로 구성된 그룹으로부터 선택된 하나 이상의 용매에 가용한 추출물을 포함한다.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.

본 발명의 추출물은 연교, 천궁, 백지, 황금, 황련, 사삼, 형개, 상백피, 치자, 패모 및 감초 1~10:1~10:1~10:1~10:1~10:1~10:1~10:1~10:1~10:1~10:1~10, 보다 바람직하게는 연교, 천궁, 백지, 황금, 황련, 사삼, 형개, 상백피, 치자, 패모 및 감초 1~5:1~5:1~5:1~5:1~5:1~5:1~5:1~5:1~5:1~5:1~5, 더욱더 바람직하게는 연교, 천궁, 백지, 황금, 황련, 사삼, 형개, 상백피, 치자, 패모 및 감초 1~3:1~3:1~3:1~3:1~3:1~3:1~3:1~3:1~3:1~3:1~3의 혼합건조중량비(w/w)로 혼합한 후, 추출 용매로 에탄올을 1 내지 30배, 바람직하게는 5 내지 15배 부피량을 10 내지 50℃, 바람직하게는 실온에서 0.5 내지 48시간, 바람직하게는 20 내지 30시간 동안 냉침추출, 열수추출, 초음파 추출, 환류냉각 추출 등의 추출방법으로, 바람직하게는 냉침추출법으로 추출하거나, 또는 추출 용매로 증류수를 1 내지 30배, 바람직하게는 5 내지 15배 부피량을 30 내지 100℃, 바람직하게는 60 내지 90℃의 추출 온도에서 0.5 내지 10시간, 바람직하게는 1 내지 5시간 침적, 냉침추출, 열수추출, 초음파 추출, 환류냉각 추출 등의 추출방법으로, 바람직하게는 환류냉각 추출한 후 추출액을 원심분리 및 여과, 농축하여 본 발명의 추출물을 수득한다.

상기 추출방법에 의해 얻어진 추출물의 전자공여능 실험으로 확인한 항산화효과 및 암세포주에 대한 증식 억제효과를 측정한 결과, 뛰어난 항산화 효과 및 암세포주에 대한 증식 억제효과가 탁월하여 항산화 및 항암용 화장료 조성물로 유용하게 이용될 수 있다.

본 발명은 상기 추출공정에서 얻어지는 항산화 및 항암활성을 나타내는 연교, 천궁, 백지, 황금, 황련, 사삼, 형개, 상백피, 치자, 패모 및 감초를 포함하는 혼합생약 추출물을 함유하는 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 조성물은 조성물 총 중량에 대하여 상기 추출물을 0.01 내지 10 % 중량 백분율, 바람직하게는 0.1 내지 8 % 중량 백분율, 가장 바람직하게는 0.5 내지 5 % 중량 백분율로 포함한다.

본 발명의 추출물을 포함하는 조성물은 피부의 노화방지, 암예방 및 항균 효과를 위한 화장품 및 세안제 등에 다양하게 이용될 수 있다. 본 조성물을 첨가할 수 있는 제품으로는, 예를 들어, 각종 크림, 로션, 스킨 등과 같은 화장품류와 클렌징, 세안제, 비누, 트리트먼트, 미용액 등이 있다.

본 발명의 화장료는 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군에서 선택된 조성물을 포함한다.

수용성 비타민으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 비타민 B1, 비타민 B2, 비타민 B6, 피리독신, 염산피리독신, 비타민 B12, 판토텐산, 니코틴산, 니코틴산아미드, 엽산, 비타민 C, 비타민 H 등을 들 수 있으며, 그들의 염 (티아민염산염, 아스코르빈산나트륨염 등)이나 유도체 (아스코르빈산-2-인산나트륨염, 아스코르빈산-2-인산마그네슘염 등)도 본 발명에서 사용할 수 있는 수용성 비타민에 포함된다. 수용성 비타민은 미생물 변환법, 미생물의 배양물로부터의 정제법, 효소법 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 수득할 수 있다.

유용성 비타민으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 비타민 A, 카로틴, 비타민 D2, 비타민 D3, 비타민 E (d1-알파 토코페롤, d-알파 토코페롤, d-알파 토코페롤) 등을 들 수 있으며, 그들의 유도체 (팔미틴산아스코르빈, 스테아르산아스코르빈, 디팔미틴산아스코르빈, 아세트산dl- 알파 토코페롤, 니코틴산dl-알파 토코페롤비타민 E, DL-판토테닐알코올, D-판토테닐알코올, 판토테닐에틸에테르 등) 등도 본 발명에서 사용되는 유용성 비타민에 포함된다. 유용성 비타민은 미생물 변환법, 미생물의 배양물로부터의 정제법, 효소 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 취득할 수 있다.

고분자 펩티드로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 콜라겐, 가수 분해 콜라겐, 젤라틴, 엘라스틴, 가수 분해 엘라스틴, 케라틴 등을 들 수 있다. 고분자 펩티드는 미생물의 배양액으로부터의 정제법, 효소법 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 정제 취득할 수 있으며, 또는 통상 돼지나 소 등의 진피, 누에의 견섬유 등의 천연물로부터 정제하여 사용할 수 있다.

고분자 다당으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 히드록시에틸셀룰로오스, 크산탄검, 히알루론산나트륨, 콘드로이틴 황산 또는 그 염 (나트륨염 등) 등을 들 수 있다. 예를 들어, 콘드로이틴 황산 또는 그 염 등은 통상 포유동물이나 어류로부터 정제하여 사용할 수 있다.

스핑고 지질로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 세라미드, 피토스핑고신, 스핑고당지질 등을 들 수 있다. 스핑고 지질은 통상 포유류, 어류, 패류, 효모 또는 식물 등으로부터 통상의 방법에 의해 정제하거나 화학 합성법에 의해 취득할 수 있다.

해초 엑기스로는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 갈조 엑기스, 홍조 엑기스, 녹조 엑기스 등을 들 수 있으며, 또, 이 들의 해초 엑기스로부터 정제된 칼라기난, 아르긴산, 아르긴산나트륨, 아르긴산칼륨 등도 본 발명에서 사용되는 해초 엑기스에 포함된다. 해초 엑기스는 해초로부터 통상의 방법에 의해 정제하여 취득할 수 있다.

본 발명의 화장료에는 상기 필수 성분과 더불어 필요에 따라 통상 화장료에 배합되는 다른 성분을 배합해도 된다.

이외에 첨가해도 되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제, 정제수 등을 들 수 있다.

유지 성분으로서는 에스테르계 유지, 탄화수소계 유지, 실리콘계 유지, 불소계 유지, 동물 유지, 식물 유지 등을 들 수 있다.

에스테르계 유지로서는 트리2-에틸헥산산글리세릴, 2-에틸헥산산세틸, 미리스틴산이소프로필, 미리스틴산부틸, 팔미틴산이소프로필, 스테아르산에틸, 팔미틴산옥틸, 이소스테아르산이소세틸, 스테아르산부틸, 리놀레산에틸, 리놀레산이소프로필, 올레인산에틸, 미리스틴산이소세틸, 미리스틴산이소스테아릴, 팔미틴산이소스테아릴, 미리스틴산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 세바신산디에틸, 아디핀산디이소프로필, 네오펜탄산이소알킬, 트리(카프릴, 카프린산)글리세릴, 트리2-에틸헥산산트리메틸롤프로판, 트리이소스테아르산트리메틸롤프로판, 테트라2-에틸헥산산펜타엘리슬리톨, 카프릴산세틸, 라우린산데실, 라우린산헥실, 미리스틴산데실, 미리스틴산미리스틸, 미리스틴산세틸, 스테아르산스테아릴, 올레인산데실, 리 시노올레인산세틸, 라우린산이소스테아릴, 미리스틴산이소트리데실, 팔미틴산이소세틸, 스테아르산옥틸, 스테아르산이소세틸, 올레인산이소데실, 올레인산옥틸도데실, 리놀레산옥틸도데실, 이소스테아르산이소프로필, 2-에틸헥산산세토스테아릴, 2-에틸헥산산스테아릴, 이소스테아르산헥실, 디옥탄산에틸렌글리콜, 디올레인산에틸렌글리콜, 디카프린산프로필렌글리콜, 디(카프릴,카프린산)프로필렌글리콜, 디카프릴산프로필렌글리콜, 디카프린산네오펜틸글리콜, 디옥탄산네오펜틸글리콜, 트리카프릴산글리세릴, 트리운데실산글리세릴, 트리이소팔미틴산글리세릴, 트리이소스테아르산글리세릴, 네오펜탄산옥틸도데실, 옥탄산이소스테아릴, 이소노난산옥틸, 네오데칸산헥실데실, 네오데칸산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 이소스테아르산이소스테아릴, 이소스테아르산옥틸데실, 폴리글리세린올레인산에스테르, 폴리글리세린이소스테아르산에스테르, 시트르산트리이소세틸, 시트르산트리이소알킬, 시트르산트리이소옥틸, 락트산라우릴, 락트산미리스틸, 락트산세틸, 락트산옥틸데실, 시트르산트리에틸, 시트르산아세틸트리에틸, 시트르산아세틸트리부틸, 시트르산트리옥틸, 말산디이소스테아릴, 히드록시스테아르산 2-에틸헥실, 숙신산디2-에틸헥실, 아디핀산디이소부틸, 세바신산디이소프로필, 세바신산디옥틸, 스테아르산콜레스테릴, 이소스테아르산콜레스테릴, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 올레인산콜레스테릴, 올레인산디히드로콜레스테릴, 이소스테아르산피트스테릴, 올레인산피트스테릴, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소세틸, 12-스테알로일히드록시스테아르산스테아릴, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소스테아릴 등의 에스테르계 등을 들 수 있다.

탄화 수소계 유지로서는 스쿠알렌, 유동 파라핀, 알파-올레핀올리고머, 이소파라핀, 세레신, 파라핀, 유동 이소파라핀, 폴리부덴, 마이크로크리스탈린왁스, 와셀린 등의 탄화 수소계 유지 등을 들 수 있다.

실리콘계 유지로서는 폴리메틸실리콘, 메틸페닐실리콘, 메틸시클로폴리실록산, 옥타메틸폴리실록산, 데카메틸폴리실록산, 도데카메틸시클로실록산, 디메틸실록산ㆍ메틸세틸옥시실록산 공중합체, 디메틸실록산ㆍ메틸스테알록시실록산 공중합체, 알킬 변성 실리콘유, 아미노 변성 실리콘유 등을 들 수 있다.

불소계 유지로서는 퍼플루오로폴리에테르 등을 들 수 있다.

동물 또는 식물 유지로서는 아보카도유, 아르몬드유, 올리브유, 참깨유, 쌀겨유, 새플라워유, 대두유, 옥수수유, 유채유, 행인(杏仁)유, 팜핵유, 팜유, 피마자유, 해바라기유, 포도종자유, 면실유, 야자유, 쿠쿠이너트유, 소맥배아유, 쌀 배아유, 시아버터, 월견초유, 마커데이미아너트유, 메도홈유, 난황유, 우지(牛脂), 마유, 밍크유, 오렌지라피유, 호호바유, 캔데리러왁스, 카르나바왁스, 액상 라놀린, 경화피마자유 등의 동물 또는 식물 유지를 들 수 있다.

보습제로서는 수용성 저분자 보습제, 지용성 분자 보습제, 수용성 고분자, 지용성 고분자 등을 들 수 있다.

수용성 저분자 보습제로서는 세린, 글루타민, 솔비톨, 만니톨, 피롤리돈-카르복실산나트륨, 글리세린, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 에틸렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜B(중합도 n = 2 이상), 폴리프로필렌글리콜(중합도 n = 2 이상), 폴리글리세린B(중합도 n = 2 이상), 락트산, 락트산염 등을 들 수 있다.

지용성 저분자 보습제로서는 콜레스테롤, 콜레스테롤에스테르 등을 들 수 있다.

수용성 고분자로서는 카르복시비닐폴리머, 폴리아스파라긴산염, 트라가칸트, 크산탄검, 메틸셀룰로오스, 히드록시메틸셀룰로오스, 히드록시에틸셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 카르복시메틸셀룰로오스, 수용성 키틴, 키토산, 덱스트린 등을 들 수 있다.

지용성 고분자로서는 폴리비닐피롤리돈ㆍ에이코센 공중합체, 폴리비닐피롤리돈ㆍ헥사데센 공중합체, 니트로셀룰로오스, 덱스트린지방산에스테르, 고분자 실리콘 등을 들 수 있다.

에몰리엔트제로서는 장쇄아실글루타민산콜레스테릴에스테르, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 12-히드록시스테아르산, 스테아르산, 로진산, 라놀린지방산콜레스테릴에스테르 등을 들 수 있다.

계면 활성제로서는 비이온성 계면 활성제, 음이온성 계면 활성제, 양이온성 계면 활성제, 양성 계면 활성제 등을 들 수 있다.

비이온성 계면 활성제로서는 자기 유화형 모노스테아르산글리세린, 프로필렌글리콜지방산에스테르, 글리세린지방산에스테르, 폴리글리세린지방산에스테르, 솔비탄지방산에스테르, POE (폴리옥시에틸렌)솔비탄지방산에스테르, POE 솔비트지방산에스테르, POE 글리세린지방산에스테르, POE 알킬에테르, POE 지방산에스테르, POE 경화피마자유, POE 피마자유, POEㆍPOP (폴리옥시에틸렌ㆍ폴리옥시프로필렌) 공중합체, POEㆍPOP 알킬에테르, 폴리에테르변성실리콘, 라우린산알카놀아미드, 알 킬아민옥시드, 수소첨가대두인지질 등을 들 수 있다.

음이온성 계면 활성제로서는 지방산비누, 알파-아실술폰산염, 알킬술폰산염, 알킬알릴술폰산염, 알킬나프탈렌술폰산염, 알킬황산염, POE 알킬에테르황산염, 알킬아미드황산염, 알킬인산염, POE 알킬인산염, 알킬아미드인산염, 알킬로일알킬타우린염, N-아실아미노산염, POE 알킬에테르카르복실산염, 알킬술포숙신산염, 알킬술포아세트산나트륨, 아실화 가수분해 콜라겐펩티드염, 퍼플루오로알킬인산에스테르 등을 들 수 있다.

양이온성 계면 활성제로서는 염화알킬트리메틸암모늄, 염화스테아릴트리메틸암모늄, 브롬화스테아릴트리메틸암모늄, 염화세토스테아릴트리메틸암모늄, 염화디스테아릴디메틸암모늄, 염화스테아릴디메틸벤질암모늄, 브롬화베헤닐트리메틸암모늄, 염화벤잘코늄, 스테아르산디에틸아미노에틸아미드, 스테아르산디메틸아미노프로필아미드, 라놀린 유도체 제 4급 암모늄염 등을 들 수 있다.

양성 계면 활성제로서는 카르복시베타인형, 아미드베타인형, 술포베타인형, 히드록시술포베타인형, 아미드술포베타인형, 포스포베타인형, 아미노카르복실산염형, 이미다졸린 유도체형, 아미드아민형 등의 양성 계면 활성제 등을 들 수 있다.

유기 및 무기 안료로서는 규산, 무수규산, 규산마그네슘, 탤크, 세리사이트, 마이카, 카올린, 벵갈라, 클레이, 벤토나이트, 티탄피막운모, 옥시염화비스무트, 산화지르코늄, 산화마그네슘, 산화아연, 산화티탄, 산화알루미늄, 황산칼슘, 황산바륨, 황산마그네슘, 탄산칼슘, 탄산마그네슘, 산화철, 군청, 산화크롬, 수산화크롬, 칼라민 및 이들의 복합체등의 무기 안료 ; 폴리아미드, 폴리에스테르, 폴리프 로필렌, 폴리스티렌, 폴리우레탄, 비닐수지, 요소수지, 페놀수지, 불소수지, 규소수지, 아크릴수지, 멜라민수지, 에폭시수지, 폴리카보네이트수지, 디비닐벤젠ㆍ스티렌 공중합체, 실크파우더, 셀룰로오스, CI 피그먼트옐로우, CI 피그먼트오렌지 등의 유기 안료 및 이들의 무기 안료와 유기 안료의 복합 안료 등을 들 수 있다.

유기 분체로서는 스테아르산칼슘 등의 금속비누 ; 세틸린산아연나트륨, 라우릴린산아연, 라우릴린산칼슘 등의 알킬인산금속염 ; N-라우로일-베타-알라닌칼슘, N-라우로일-베타-알라닌아연, N-라우로일글리신칼슘 등의 아실아미노산 다가금속염 ; N-라우로일-타우린칼슘, N-팔미토일-타우린칼슘 등의 아미드술폰산 다가금속염 ; N-엡실론-라우로일-L-리진, N-엡실론-팔미토일리진, N-알파-파리토일올니틴, N-알파-라우로일아르기닌, N-알파-경화우지지방산아실아르기닌 등의 N-아실염기성아미노산 ; N-라우로일글리실글리신 등의 N-아실폴리펩티드 ; 알파-아미노카프릴산, 알파-아미노라우린산 등의 알파-아미노지방산 ; 폴리에틸렌, 폴리프로필렌, 나일론, 폴리메틸메타크릴레이트, 폴리스티렌, 디비닐벤젠ㆍ스티렌 공중합체, 사불화에틸렌 등을 들 수 있다.

자외선 흡수제로서는 파라아미노벤조산, 파라아미노벤조산에틸, 파라아미노벤조산아밀, 파라아미노벤조산옥틸, 살리실산에틸렌글리콜, 살리신산페닐, 살리신산옥틸, 살리신산벤질, 살리신산부틸페닐, 살리신산호모멘틸, 계피산벤질, 파라메톡시계피산-2-에톡시에틸, 파라메톡시계피산옥틸, 디파라메톡시계피산모노-2-에틸헥산글리세릴, 파라메톡시계피산이소프로필, 디이소프로필ㆍ디이소프로필계피산에스테르 혼합물, 우로카닌산, 우로카닌산에틸, 히드록시메톡시벤조페논, 히드록시메 톡시벤조페논술폰산 및 그 염, 디히드록시메톡시벤조페논, 디히드록시메톡시벤조페논디술폰산나트륨, 디히드록시벤조페논, 테트라히드록시벤조페논, 4-tert-부틸-4'-메톡시디벤조일메탄, 2,4,6-트리아닐리노-p-(카르보-2'-에틸헥실-1'-옥시)-1,3,5-트리아진, 2-(2-히드록시-5-메틸페닐)벤조트리아졸 등을 들 수 있다.

살균제로서는 히노키티올, 트리클로산, 트리클로로히드록시디페닐에테르, 크로르헥시딘글루콘산염, 페녹시에탄올, 레조르신, 이소프로필메틸페놀, 아줄렌, 살리칠산, 진크필리티온, 염화벤잘코늄, 감광소 301 호, 모노니트로과이어콜나트륨, 운데시렌산 등을 들 수 있다.

산화 방지제로서는 부틸히드록시아니솔, 갈릭산프로필, 엘리소르빈산 등을 들 수 있다.

pH 조정제로서는 시트르산, 시트르산나트륨, 말산, 말산나트륨, 프말산, 프말산나트륨, 숙신산, 숙신산나트륨, 수산화나트륨, 인산일수소나트륨 등을 들 수 있다.

알코올로서는 세틸알코올 등의 고급 알코올을 들 수 있다.

또한, 이외에 첨가해도 되는 배합 성분은 이에 한정되는 것은 아니며, 또, 상기 어느 성분도 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 배합 가능하지만, 총중량에 대하여 바람직하게는 0.01 - 5 % 중량 백분율, 보다 바람직하게는 0.01 - 3 % 중량 백분율로 배합된다.

본 발명의 화장료는 용액, 유화물, 점성형 혼합물 등의 형상을 취할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효성분으로서 상기 추출물 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예를 들면, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제 및 담체를 포함한다.

본 발명의 항산화 및 항암효과를 갖는 기능성 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어 유액, 크림, 화장수, 팩, 파운데이션, 로션, 미용액, 모발화장료 등을 들 수 있다.

구체적으로, 본 발명의 화장료 조성물은 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클린저의 제형을 포함한다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이 트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

이하, 본 발명을 하기 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다.

단, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예 및 실험예에 의해 한정되는 것은 아니다.

참고예 1. 혼합 생약의 준비

본 실험에 사용된 생약처방은 동의보감에 기록된 내용에 준하였으며, 시료로 사용된 약재들은 대구한의대학교 부속 한방병원 약제과에서 구입하여 물로 세척하여 음건 후 사용하였다.

참고예 2. 세포 배양

본 실험에 이용한 세포 B16F10(피부암세포주), G361(피부암세포주), MDA-MA-231(유방암세포주), A549(폐암세포주)은 KCLB(Korean Cell Line Bank)로부터 구입하였다. 각 세포의 배양은 10% FBS(fetal bovine serum)과 100unit/ml의 페니실린/스트렙토마이신 (penicillin/streptomycin)을 1%를 첨가한 RPMI 1640 배지 및 DMEM배지를 사용하였으며, 37℃, 5%, CO₂ 배양기에서 배양하였다.

참고예 3. 통계 처리

본 연구의 통계처리는 SPSS 10.0 for 윈도우 프로그램을 사용하였으며, 유의차 검증은 분산분석(ANOVA : analysis of variance)을 한 후 p=0.05 수준에서 던칸의 다중 검증법(DMRT : Duncan's multiple range test)에 따라 분석하였다.

실시예 1. 시료 추출물의 제조

1-1. 물 추출물 제조

본 발명의 구성 생약재인 연교 , 천궁, 백지, 황금, 황련, 사삼, 형개, 상백피, 치자, 패모, 감초를 각각 2.63g씩 혼합하고, 총 중량에 10배 양의 증류수를 첨가하여 85℃에서 3시간 환류 냉각 추출하였다. 상등액과 침전물을 분리하여 3회 반 복 추출하여 물 추출물을 수득한 후, 원심분리, 여과 및 농축하여 동결건조 후 냉장실에 보관하며 본 실험의 시료로 사용하였다(이하 YKW라 명명함).

1-2. 에탄올 추출물 제조

본 발명의 구성 생약재인 연교 , 천궁, 백지, 황금, 황련, 사삼, 형개, 상백피, 치자, 패모 및 감초를 각각 2.63g씩 혼합하고, 총 중량에 10배의 70％ 에탄올을 가하여 실온에서 24시간 침지하였다. 상등액과 침전물을 분리하여 상등액을 취하고, 같은 방법으로 3회 반복 추출하여 에탄올 추출물을 수득한 후, 원심분리 및 여과, 농축하여 동결건조 후 냉장실에 보관하며 본 실험의 시료로 사용하였다(이하 YKE라 명명함).

실시예 2. 스킨로션의 제조

상기 실시예 1의 추출물을 사용하여 스킨 로션을 제조하였다.

번호	원 료	중량(%)
1	YK 추출물	1.0
2	부틸렌글리콜	5.0
3	글리세린	3.0
4	카르복시비닐폴리머	0.06
5	디소듐 에틸렌디아민테트라아세틱에시드	0.01
6	에탄올	7.0
7	소르비탄모노스테아레이트	0.8
8	트리에탄올아민	0.2
9	하이드로지네이티드 캐스터 오일	0.4
10	페닐트리메티콘	0.5
11	파라옥시안식향산프로필	0.2
12	파라옥시안식향산메틸	0.2
13	향료	0.1
14	정제수	잔량
	계	100.0

실험예 1. 항산화 효과 측정

YK 혼합생약 추출물의 항산화 효과를 측정하기 위해, 전자공여능(electron donating ability: EDA)을 Blois의 방법을 변형하여 실시하였다. (Blois MS et al., Nature, 181, pp1199-1200, 1958)

각 시료용액 2.0㎖에 0.2mM의 DPPH (α-α-diphenyl-β-picrylhydrazyl) 1.0㎖ 넣고 교반한 후 30분간 방치한 다음 517nm에서 흡광도를 측정하였다. 전자공여능은 하기 수학식 1에 기재된 방법인 시료용액의 실험구와 대조구의 흡광도 감소율을 측정하여 확인하였다.

본 발명의 YK 혼합생약의 열수 추출물 및 에탄올 추출물에 대한 DPPH 라디칼 소거활성을 측정하여 하기 표 1에 나타내었다. 전자공여능은 추출물의 농도에 의존적으로 증가하는 것을 확인할 수 있었고, 열수 추출물의 경우 1000ppm에서 약 70%, 에탄올 추출물은 1000ppm에서 80%이상 탁월한 효과를 나타내어 본 발명의 혼합생약이 탁월한 전자공여능을 가짐을 확인할 수 있었다.

시료	시료의 농도(ppm)	EDA(%)
YKW	1	2.8±0.9
	10	4.8±0.9
	100	29.8±0.1
	1000	68.6±0.7
YKE	1	5.1±0.9
	10	11.5±2.1
	100	35.2±1.9
	1000	80.5±0.9

실험예 2. MTT 평가 방법에 의한 항암 효과 측정

실시예 1의 암세포주에 대한 증식억제효과는 Carmichael의 방법에 따라 MTT 어세이로 측정하였다(Carmichael J, et al., Cancer Res., 47(4), pp936-942, 1987).

즉, 암세포주를 96 웰 플래이트에 0.6~8×10³cells/well이 되게 180㎕ 분주하고 시료를 농도별로 조제하여 20㎕첨가한 후 37℃, 5% CO₂ 배양기에서 48시간 배양하였고, 대조군은 시료와 동량의 증류수를 첨가하여 동일한 조건으로 배양하였다. 여기에 5mg/㎖ 농도로 제조한 MTT 용액 20㎕를 첨가하여 4시간 배양한 후 배양액을 제거하고 각 웰당 DMSO:EtOH (1:1) 150㎕를 가하여 30분간 교반한 뒤 엘리사(ELISA) 판독기로 550nm에서 흡광도를 측정하여 암세포주의 성장억제효과를 측정하였고 하기의 수학식 2을 이용하여 항암효과를 판정하였다.

실험 결과 하기 표 2에 기재한 바와 같이, YK 추출물의 암세포에 대한 세포증식 억제율은 암세포 모두 시료 농도가 증가함에 따라 세포 증식 억제율이 증가하였는데, 100ppm에서 열수 추출물 및 에탄올 추출물 모두 30%이하의 낮은 증식억제효과가 나타났으나 1,000ppm에서 폐암세포인 A549를 제외한 B16F10, G361, MDA의 열수 추출물 및 에탄올 추출물의 세포 증식 억제율은 1,000ppm에서 70%이상의 생장 저해가 나타났다. 특히 피부암 세포주 및 유방암세포주에 대하여 열수 추출물의 경우 1,000ppm에서 각각 93.9%, 92.5%의 증식억제효과가 나타났으며 에탄올 추출물의 경우 1,000ppm에서 각각 72.5%, 84.9%의 증식억제효과가 나타났다. 이는 한 등( Han J, Kim HJ, et al., The Korean J. of Mycology, 27(4), pp312-7, 1997)이 보고한 전통 메주에서 분리한 단독균으로 제조한 메주 추출물의 혈액암세포에 대한 증식억제능이 500ppm 의 농도에서 58%인 점과 비교할 때 본 발명의 YK 혼합생약 추출물이 암세포 증식 억제능이 더 우수한 것으로 나타났다.

	YKW(ppm)			YKE(ppm)
	10	100	1000	10	100	1000
피부암세포주 (B16F10)	13.1±6.2	28.4±5.3	93.9±1.3	15.9±2.9	29.9±1.6	72.5±5.5
피부암세포주 (G361)	30.7±9.9	29.8±11.2	79.5±4.7	20.8±5.2	26.1±5.1	56.7±5.7
유방암세포주 (MDA-MA-231)	14.9±3.5	24.9±9.4	92.5±3.7	8.0±2.8	16.0±1.8	84.9±5.4
폐암세포주 (A549)	23.6±2.5	24.2±3.1	59.9±3.1	19.4±3.1	26.9±8.8	50.9±7.5

실험예 3. 인체 첩포시험(Patch test)

본 발명의 YK 추출물에 대하여 피부 자극 정도를 알아보기 위하여, 실시예 2에 대하여 피부 첩포시험을 실시하였다. 피검자는 20~50세의 시험 부위에 피부 질환이 없는 사람으로 선정하였으며 총 15명에게 실시하였다. 첩포 부위인 상박부를 70% 에탄올로 닦아내고 건조시킨 후, 핀챔버(fin chamber)를 사용하여 바셀린을 블랭크로, 실시예 2의 스킨로션을 0.02g씩 가하여 인체 상박부에 24시간 첩포하고, 첩포 제거 후 1시간 이내에 피부반응을 검사하고, 다음날(48시간 후) 다시 검사하였다. 피부 반응 판정은 인체 첩포시험의 검사기준인 표 3에 의해 판정하고, 피부 자극 유발 가능성의 평가는 다음 수학식 3로부터 계산된 평균반응률로 하였으며, 실시예 2에 따른 화장료에 대한 피부 첩포시험 결과를 표 4에 나타내었다.

인체 첩포시험의 검사 기준

피부반응	점수
-	0	반응없음
±	1	미약한 양성 반응 (홍반)
+	2	양성 반응 (홍반)
++	3	강한 양성 반응 (홍반, 부종)
+++	4	심한 양성 반응 (홍반, 부종, 수포)

인체 첩포시험의 검사 결과

시험물질	24시간 후 반응 있는 피검자수(명)					48시간 후 반응 있는 피검자수(명)					평균반응률 (%)
	0	1	2	3	4	0	1	2	3	4
실시예 2	15	0	0	0	0	15	0	0	0	0	0

인체 첩포시험 검사 결과 실시예 2를 포함하는 조성물은 무자극 범위에 속하여 인체에 안전한 물질임을 확인하였다.

상기에서 설명한 바와 같이, 본 발명의 연교, 천궁, 백지, 황금, 황련, 사삼, 형개, 상백피, 치자, 패모 및 감초를 포함하는 혼합생약 추출물을 함유하는 화장료 조성물은 전자공여능실험 결과 항산화 효과를 나타내며, 암세포주에 대한 증식 억제효과를 나타내는바, 항산화 및 항암효과를 갖는 화장료 조성물로 유용하게 이용될 수 있다.

Claims (4)

1. 연교, 천궁, 백지, 황금, 황련, 사삼, 형개, 상백피, 치자, 패모 및 감초 1~3:1~3:1~3:1~3:1~3:1~3:1~3:1~3:1~3:1~3:1~3의 혼합건조중량비(w/w)인 혼합생약의 물 또는 에탄올 추출물을 함유하는 화장료 조성물.
2. 삭제
3. 삭제
4. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스쳐크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클린저로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나의 제형인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.

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