KR100635782B1 - 거피 흑콩 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부자극완화용 화장료 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 거피 흑콩 추출물을 유효 성분으로 함유하는 피부자극 완화용 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 거피 흑콩 추출물을 유효 성분으로 함유하는 세포독성 억제용 조성물, 염증 억제용 조성물 및 상기 조성물을 유효성분으로 함유하는 피부자극 완화용 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 거피 흑콩 추출물을 포함하는 조성물은 세포독성이 없고, 기존의 항염증제에 비해 화장품 원료에 의한 염증 반응을 현저히 억제하며, 화장료로 제조하여 사용하였을 경우 탁월한 피부자극 완화 효과를 나타낸다.
거피 흑콩 추출물, 피부자극 완화, 화장료 조성물
Description
본 발명은 거피 흑콩 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부자극 완화용 화장료 조성물에 관한 것이다.
피부 민감도에 따라 화장품의 사용으로 인해 다양한 피부자극이 일어날 수 있는데, 이러한 피부자극은 가려움 (itching), 따끔거림 (stinging) 및 화끈거림 (burning) 등의 자극감과 홍반 (erythema) 및 부종 (edema) 등의 반응으로 설명할 수 있다. 접촉성 피부염으로는 자극성 접촉 피부염, 알레르기성 접촉 피부염, 감각성 자극 및 광독성 피부염 등이 대별할 수 있으나, 이들을 명확하게 구별하기는 어려우며 서로 혼합되어 일어나는 경우가 대부분이다.
화장품은 인체를 청결히 하고 매력을 더하며 용모를 밝게 변화시키거나 피부, 모발의 건강을 유지 또는 증가시키기 위하여 사용하는 것이나, 화장료 조성물 에는 이와 같은 목적과는 거리가 있는 화장품 제조 및 유지에 필수적인 성분들이 포함된다. 이러한 성분은 화장료의 보존, 유지 및 기능을 부여하기 위하여 필수 불가결하게 첨가되는 성분으로 방부제, 계면활성제, 자외선 차단제 및 미백제 등이 있으며 실제로 화장품에 첨가하였을 때 일부 사용자들에게서 피부자극이 나타나기도 한다.
또한, 햇볕에 장시간 노출되거나, 생활공간의 건조화, 개인의 알레르기 체질, 스트레스 및 화학적으로 유해한 물질이 증가함에 따라 민감성 피부의 비율이 증가하는 경향을 보이고 있으며, 최근 소비자의 성향이 자연 친화적 및 저 자극으로 바뀌고 있다.
이에, 화장품 제조업자들은 자연 친화적인 천연물이 주성분인 효능이 우수한 새로운 자극 완화 물질을 제품에 적용시켜줌으로써 그 자극을 최소화시키기 위한 노력을 한층 더 가속화하고 있다.
본 명세서 전체에 걸쳐 다수의 특허문헌이 참조되고 그 인용이 표시되어 있다. 인용된 특허문헌의 개시 내용은 그 전체로서 본 명세서에 참조로 삽입되어 본 발명이 속하는 기술 분야의 수준 및 본 발명의 요지가 보다 명확하게 설명된다.
본 발명자들은 상술한 당업계의 요구를 해결하고자 다수의 천연물을 대상으 로 추출물을 제조하여 자극원에 대한 피부자극을 완화하는 효과가 우수한 물질을 선별하는 작업을 수행한 결과, 거피 (去皮) 흑콩 추출물이 피부자극 완화 효과를 나타내며, 거피하지 않은 흑콩 추출물 및 흑콩의 껍질 추출물에 비해 세포독성 경감, 항염증 효과 및 자극원에 대한 피부자극 완화 효과가 훨씬 우수함을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명의 목적은 세포독성 억제용 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 다른 목적은 염증 억제용 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 또 다른 목적은 피부자극 완화용 화장료 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기의 실시예 및 청구범위에 의해 보다 명확하게 된다.
본 발명의 일 양태에 따르면, 본 발명은 거피 흑콩 (Glycine max Merr) 추출물을 유효성분으로 함유하는 세포독성 억제용 조성물을 제공한다.
본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 거피 흑콩 추출물을 유효성분으로 함유하는 염증 억제용 조성물을 제공한다.
본 발명의 또 다른 양태에 따르면, 본 발명은 거피 흑콩 추출물을 유효 성분으로 함유하는 피부자극 완화용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 조성물에 유효성분으로 포함되는 거피 흑콩 추출물은 흑콩에서 껍질을 제거한 흑콩의 알맹이만으로부터 추출된 것이다.
본 발명자들은 다수의 천연물을 원료로 하여 다양한 추출방법으로 추출물을 제조하였고, 자극원으로부터의 세포자극 완화 및 염증 억제 효과가 우수한 물질을 선별하는 작업을 수행한 결과, 거피 흑콩 추출물이 상술한 본 발명의 목적에 가장 부합된다는 사실을 발견하게 되었다.
한편, 대한민국 특허출원 제1997-58585호의 개시사항에 따르면, 흑콩을 일반적인 용매 추출법에 의해 수용성 성분을 추출하여 화장료 성분으로 사용할 경우 항산화, 세포 증식 효과 및 피부색 개선 효과가 있음이 공지되어 있다.
그러나, 본 발명의 거피 흑콩 추출물은 기존의 흑콩 추출물에서 발견되지 않은 신규 효능인 피부자극 완화 효과가 우수하며, 흑콩 추출물 및 흑콩의 껍질 추출물에 비해 세포독성이 없고 항염증 효과가 있으며 피부자극 완화 효과가 우수하다.
본 발명의 거피 흑콩 추출물은 흑콩 껍질에서 나타나는 세포독성을 제거하고, 흑콩 껍질 특유의 색소를 제거하여 제형의 적용 용이성을 확대시킬 수 있으므로, 피부자극 완화용 화장료 조성물의 유효성분으로 제공된다.
상기 거피 흑콩 추출물을 제조하기 위해 사용하는 추출 용매는 물, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올 (예; 메탄올, 에탄올, 프로판올 및 부탄올 등), 상기 저급 알코올과 물과의 혼합용매, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 클로로포름 및 1,3-부틸렌글리콜로 구성된 군으로부터 선택되며, 바람직하게는, 함수 저급 알코올, 보다 바람직하게는 에탄올, 가장 바람직하게는 70% 에탄올이다.
보다 구체적으로는, 본 발명의 조성물에 포함되는 거피 흑콩 추출물은 다음의 제조과정에 의해 제조된다: (a) 흑콩을 세척한 후 거피하여 알맹이만을 얻어 건조하고 파쇄하는 단계; (b) 70% 에탄올을 가해 15-35℃에서 추출하는 단계; 및 (c) 추출액을 여과한 후 건조하는 단계.
한편, 본 발명의 거피 흑콩 추출물은 상기한 추출 용매뿐만 아니라, 다른 추출 용매를 이용하여도 실질적으로 동일한 효과를 나타내는 추출물이 얻어질 수 있다는 것은 당업자에게 자명한 것이다.
또한, 본 발명의 거피 흑콩 추출물은 상술한 추출 용매에 의한 추출물뿐만 아니라, 통상적인 정제 과정을 거친 추출물도 포함한다. 예컨대, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외여과막을 이용한 분리, 다양한 크로마토그래피 (크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 활성 분획도 본 발명의 추출물에 포함되는 것이다.
본 발명의 거피 흑콩 추출물은 감압 증류, 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수 있다.
본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 상기 추출물의 함량은 조성물 총 중량에 대하여 0.0001-10.0 중량%이다. 상기 함량 미만일 경우에는 기대효과가 나타나기 어렵고, 상기 함량을 초과하는 경우에는 효과가 더 이상 증가하지 않는다.
본 발명의 거피 흑콩 추출물은 외부 자극 물질에 의한 세포 독성을 완화하고 항염증 활성이 있으며, 화장품 원료에 의한 피부자극을 완화한다. 따라서, 본 발명의 화장료 조성물은 거피 흑콩 추출물을 유효 성분으로 포함하는 조성물로서 제조되어, 피부 자극성이 큰 화장료 조성물을 피부에 적용하기 전 또는 적용한 후에 적용될 수 있다. 또한, 거피 흑콩 추출물을 피부 자극성이 큰 화장료 조성물에 추가적으로 첨가시켜 피부에 적용될 수도 있다.
피부 자극성이 큰 화장료 조성물은 락틱산 (lactic acid), 글리콜릭산 (glycolic acid), 살리실산 (salicylic acid) 또는 레티노산 (retinoic acid)이며, 바람직하게는 락틱산이다. 따라서, 본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 피부자극 완화제로서의 거피 흑콩 추출물 및 락틱산을 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서 상기 추출물 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.
본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파 운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등 이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 거피 흑콩 추출물을 함유하는 화장료 조성물은 화장료 원료에 의한 피부 자극을 크게 감소시키고, 피부 자극에 의해 발전되는 염증을 억제시키며, 제형의 안정성이 뛰어나다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
제조예 1: 거피 흑콩 추출물의 제조
흑콩 (Bioland, 한국)을 정제수로 세척한 후 거피하여 알맹이만을 얻었다. 상기 거피된 흑콩을 건조하고 작은 조각으로 파쇄한 뒤, 여기에 건조 중량의 1-10 배의 70% 에탄올을 가하였다. 15-35℃에서 5일간 추출한 후 300 메쉬 여과포로 여과하고, 다시 와트만 5번 여과지로 여과한 후, 회전 감압증발기로 건조하였다. 건조된 거피 흑콩 추출 파우더를 50% 1,3-부틸렌글리콜에 용해하여 사용하였다.
제조예 2: 흑콩 껍질 추출물의 제조
흑콩을 정제수로 세척한 후 껍질만을 얻어 건조하고 작은 조각으로 파쇄한 뒤, 여기에 건조 중량의 1-10배의 70% 에탄올을 가하였다. 15-35℃에서 5일간 추출한 후 300 메쉬 여과포로 여과하고, 다시 와트만 5번 여과지로 여과한 후, 회전 감압증발기로 건조하였다. 건조된 흑콩 껍질 추출 파우더를 50% 1,3-부틸렌글리콜에 용해하여 사용하였다.
제조예 3: 흑콩 추출물의 제조
흑콩을 정제수로 세척한 후 건조하고 작은 조각으로 파쇄한 뒤, 여기에 건조 중량의 1-10배의 70% 에탄올을 가하였다. 15-35℃에서 5일간 추출한 후 300 메쉬 여과포로 여과하고, 다시 와트만 5번 여과지로 여과한 후, 회전 감압증발기로 건조하였다. 건조된 흑콩 추출 파우더를 50% 1,3-부틸렌글리콜에 용해하여 사용하였다.
실험예 1: 거피 흑콩 추출물의 락틱산에 의한 세포자극의 완화 효과 시험
인간 피부세포인 섬유아세포 (한국세포주은행)를 T-75 플라스크 (Falcon, 미 합중국)에서 80% 정도 성장할 때까지 배양하였다. 이것을 다시 96웰 플레이트 (Falcon, 미합중국)에 3 ×104 세포/웰이 되게 옮겨 24시간 동안 배양하였다. 배양 후 현미경을 통해 세포가 완전히 부착되어 잘 자라는지 여부를 확인하고, 피부세포 자극원으로 락틱산을 이용하여 실험을 진행하였다. 이때 락틱산은 0.2% (이 농도에서 피부세포는 모두 사멸함)로 사용하였다. 즉, 96웰 플레이트의 각 웰에 0.2% 락틱산이 함유된 DMEM (시그마, 미합중국)을 200 ㎕씩 첨가하고 제조예 1, 제조예 2, 그리고 제조예 3의 추출물을 각각 50, 100, 200 400 및 800 ㎍/㎖의 농도로 조절하여 첨가하였다(실험군 1, 실험군 2, 실험군 3). 이때, 락틱산 및 추출물을 모두 첨가하지 않은 것을 대조군 1로 하였으며 락틱산만 첨가한 것을 대조군 2로 사용하였다. 시험 물질을 첨가하고 12시간 경과 후 세포의 생존율을 측정하기 위하여 MTT ([3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) 시약을 각 웰에 10 ㎕씩 첨가하였다. 4시간 경과 후에 ELISA 리더를 이용하여 570 nm 파장에서 흡광도를 측정하고 하기 수학식 1에 따라 세포 생존율을 계산한 뒤 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다.
| 추출물의 농도 (㎍/㎖) | 세포 생존율(%) | ||||
| 실험군 1 | 실험군 2 | 실험군 3 | 대조군 2 | 대조군 1 | |
| 50 | 74.3 | 0.0 | 5.7 | 0.0 | 100.0 |
| 100 | 85.4 | 1.3 | 12.6 | ||
| 200 | 97.5 | 2.5 | 18.2 | ||
| 400 | 99.2 | 2.7 | 20.0 | ||
| 800 | 100.0 | 3.1 | 21.8 | ||
상기 표 1을 살펴보면, 락틱산만을 첨가한 대조군 2의 세포 생존율이 0%이고 아무것도 첨가하지 않은 대조군 1의 세포 생존율이 100%로 나타나 세포 생존율 측정 실험이 정확하게 실시되었음을 알 수 있었다. 본 발명의 거피 흑콩 추출물을 처리한 경우(실험군 1) 추출물 농도 의존적으로 세포의 생존율이 크게 증가하였다. 그러나 흑콩 껍질 추출물이나(실험군 2), 흑콩 추출물(실험군 3)을 처리한 경우에서는 거피흑콩 추출물(실험군 1)의 경우에 비해 세포의 생존율 증가비가 낮았다.
실험예 2 : 거피 흑콩 추출물의 항염증 효과 시험
거피 흑콩 추출물의 항염증 효과를 측정하기 위해서 평소 피부병 내지는 피부 알레르기 증상이 없는 사람 20명을 대상으로 염증 억제 효과를 측정하였다. 실험 대상자의 연령분포는 23-32세이고, 평균연령은 28세였다. 팔 상박 5군데에 항염증 효과를 측정할 위치를 표지한 후 크로마미터 (chromameter, 미놀타)로 피부의 홍반 (a* value)을 측정하였다. 4 군데의 측정 위치에 제조예 1, 제조예 2, 또는 제조예 3의 추출물 (제조예 1-실험군 1, 제조예 2-실험군 2, 제조예 3-실험군 3) 5%와 감초산 (대조군) 5%를 각각 1시간 간격으로 4회 적용하고, 나머지 측정 위치에는 비처리하였다. 마지막 적용 20-30분 경과 후 측정 위치를 흐르는 물로 가볍게 닦아내었다. 상박에 물이 다 마르면 메틸 니코티네이트 (methyl nicotinate, 0.04%) 80 ㎕를 페이퍼 디스크에 흠뻑 적신 후 1분 30초 동안 올려놓았다. 1분 30초 경과 후 페이퍼 디스크를 제거한 후 흐르는 물에 씻어 내었다. 20-30분 후 염증이 유발되면 홍반이 생기는데 이 홍반의 발생 정도를 크로마미터로 측정하여 실험 초기의 홍반 정도와 비교하여 홍반 억제 정도를 평가하였다. 홍반 정도를 이용한 항염증 효과는 아래 수학식 2에 의해 계산하였으며, 그 결과를 표 2에 나타내었다.
상기에서 Δa*은 실험 후의 홍반 측정값에서 실험 전의 홍반 측정값을 뺀 수치이다.
| 처리군 | Δa* | 홍반 생성율(%) | 항염증 효과(%) |
| 비처리 (control) | 1.73 | 100 | - |
| 5% 감초산 (대조군) | 1.27 | 73.4 | 26.6 |
| 5% 거피 흑콩 추출물 (실험군 1) | 0.62 | 35.8 | 64.2 |
| 5% 흑콩 껍질 추출물 (실험군 2) | 1.19 | 68.8 | 31.2 |
| 5% 흑콩 추출물 (실험군 3) | 1.05 | 60.7 | 39.3 |
상기 표 2를 통해, 기존에 항염증제로 사용된 감초산에 비하여 거피 흑콩 추출물의 홍반 생성율이 낮으며, 항염증 효과가 훨씬 뛰어남을 알 수 있었다. 또한, 흑콩 껍질 추출물 (실험군 2)이나 흑콩 추출물 (실험군 3)에 비해 거피 흑콩 추출물 (실험군 1)의 항염증 효과가 현저히 높음을 알 수 있었다.
실험예 3: 인체 피부 첩포시험
과거력상 피부자극에 과민반응을 보인 적이 없으며, 현재 피부병 내지 피부 알레르기 증상이 없는 20-30대 여성 20명을 대상으로 인체 피부 첩포시험을 실시하였다. 거피 흑콩 추출물 5.0 중량%가 함유된 하기 제형예 4의 영양 크림에 피부자극 물질인 락틱산 5.0 중량%를 자극원으로 첨가한 화장료를 실시예로 하고, 락틱산 및 거피 흑콩 추출물을 첨가하지 않은 화장료를 대조예, 거피 흑콩 추출물을 정제수로 대체하고 락틱산만 첨가한 화장료를 비교예 1, 실시예의 화장료에서 거피 흑콩 추출물을 5.0 중량% 감초산으로 대체한 화장료를 비교예 2로 하여 피부 첩포시험을 실시하였다.
우선 시험부위를 70% 에탄올로 닦아낸 뒤 건조시켰다. 준비된 시험물질을 15 ㎍씩 핀 챔버 (Finn chamber, 100ㅧ10, EPITEST, 핀란드국) 내에 적하시킨 후 시험 대상자의 전박 (forearm) 안쪽 부위에 밀폐 첩포하였다. 24시간 동안 첩포하고 첩포물을 제거한 후 표시펜으로 시험부위를 표시하였다. 각각 1시간 그리고 24시간 후 (첩포물 제거 후 1시간, 24시간 후 = 첩포 부착 포함 25시간, 48시간)에 확대경 (8MC-150, DAZOR, 미합중국)을 이용하여 시험 부위를 관찰하여 홍반 및 부종 유무를 관찰하였다.
피부반응은 하기 표 3의 국제접촉피부염연구회 (ICDRG: International Contact Dermatitis Research Group )의 규정에 따라 판정하였으며, 하기 수학식 3에 의하여 평균피부반응도를 계산하고 그 결과를 표 4에 나타내었다.
| 기 호 | 점 수 | 평가 기준 |
| - | 0 | 무반응, 정상 피부 |
| ± | 0.5 | 희미한 또는 가벼운 홍반 |
| + | 1.0 | 경계가 뚜렷하나 약한 홍반, 부종 및 구진 |
| ++ | 2.0 | 뚜렷한 홍반, 구진 및 소수포 |
| +++ | 3.0 | 심한 홍반 및 소포형성 |
| ++++ | 6.0 | 대수포 형성 |
| 시험물질 | 24시간 | 48시간 | 평균피부반응도 (n=20) |
| ± + ++ | ± + ++ | ||
| 대조예 | 2 - - | - - - | 0.42 |
| 비교예 1 | 8 6 - | 2 2 - | 5.42 |
| 비교예 2 | 7 4 - | 2 1 - | 3.96 |
| 실시예 | 4 1 - | 2 0 - | 1.67 |
상기 표 4에서 알 수 있듯이, 5.0 중량% 거피 흑콩 추출물을 함유하는 화장료 (실시예)는 5.0% 감초산을 함유하는 화장료 (비교예 2)에 비해 락틱산에 의해 유발된 피부자극을 훨씬 효과적으로 완화시켰다.
실험예 4: 거피 흑콩 추출물의 세포독성 억제 효과
인간 피부세포인 섬유아세포 (한국세포주은행)를 T-75 플라스크 (Falcon, 미합중국)에서 80%정도 성장할 때까지 배양하였다. 이것을 다시 96-웰 플레이트 (Falcon, 미합중국)의 각 웰에 105 세포수/웰이 되게 옮겨 24시간 동안 배양하였다. 배양 후 현미경을 통해 세포가 플레이트의 웰에 꽉 차서 자라는지 여부를 확인하고 각 웰에 DMEM (시그마, 미합중국)을 200 ㎕씩 첨가한 뒤, 제조예 1, 2 및 3의 추출물을 0.5, 1, 2 및 4 ㎎/㎖로 조절하여 첨가하였다. 시험 물질을 첨가하고 24시간 경과 후 세포의 생존율을 비교하기 위하여 MTT 시약을 각 웰에 10 ㎕씩 첨가하였다. 4시간 경과 후에 세포 생존율을 ELISA 리더를 이용하여 570 nm 파장에서 흡광도를 측정하고 하기 수학식 4에 따라 세포 생존율을 계산하여 표 5에 나타내었다.
| 추출물의 농도 (㎎/㎖) | 세포 생존율(%) | ||
| 흑콩 추출물 | 흑콩 껍질 추출물 | 거피 흑콩 추출물 | |
| 0.5 | 92.0 | 73.8 | 100 |
| 1 | 79.7 | 50.6 | 100 |
| 2 | 65.2 | 42.9 | 100 |
| 4 | 48.3 | 17.5 | 100 |
상기 표 5를 살펴보면, 흑콩 껍질 추출물의 세포 생존율이 가장 낮아 흑콩 추출물의 세포독성은 껍질에 의해 나타남을 알 수 있으며, 거피 흑콩 추출물의 경우 흑콩 추출물 및 흑콩 껍질 추출물에 비해 세포 생존율이 훨씬 높아 세포독성을 효과적으로 억제시켜줌을 알 수 있었다. 따라서, 거피 흑콩 추출물은 세포독성 억제를 통해 피부자극 완화 효과가 있다.
상기 실험예를 근거로 피부자극 완화 효과가 우수한 거피 흑콩 추출물을 함유하는 여러 가용화제형과 유화제형의 화장료 조성을 제시한다. 아래와 같은 제형예에서 이를 상세히 설명하지만 본 발명의 조성물이 하기 예에만 한정되는 것은 아니다.
제형예 1: 유연화장수 (스킨로션)
하기 표 6의 조성으로 제조예 1의 거피 흑콩 추출물을 함유하는 유연화장수를 통상의 방법에 따라 제조하였다.
| 성분 | 함량 (중량%) |
| 거피 흑콩 추출물 | 2.0 |
| 글리세린 | 5.0 |
| 1,3-부틸렌글리콜 | 3.0 |
| PEG 1500 | 1.0 |
| 알란토인 | 0.1 |
| DL-판테놀 | 0.3 |
| EDTA-2Na | 0.02 |
| 벤조페논-9 | 0.04 |
| 소듐 히아루로네이트 | 5.0 |
| 에탄올 | 10.0 |
| 옥틱도데세스-16 | 0.2 |
| 폴리솔베이트 20 | 0.2 |
| 향 | 0.02 |
| 유니사이드-유 13 | 0.01 |
| 그린 #13 | 0.001 |
| 증류수 | 잔량 |
| 합계 | 100 |
제형예 2: 수렴화장수
하기 표 7의 조성으로 제조예 1의 거피 흑콩 추출물을 함유하는 수렴화장수를 통상의 방법에 따라 제조하였다.
| 성분 | 함량 (중량%) |
| 거피 흑콩 추출물 | 2.0 |
| 글리세린 | 2.0 |
| 1,3-부틸렌글리콜 | 2.0 |
| 알란토인 | 0.2 |
| DL-판테놀 | 0.2 |
| EDTA-2Na | 0.02 |
| 벤조페논-9 | 0.04 |
| 소듐 히아루로네이트 | 3.0 |
| 에탄올 | 15.0 |
| 폴리솔베이트 20 | 0.3 |
| 위치하겔 추출물 | 2.0 |
| 구연산 | 미량 |
| 향 | 0.02 |
| 유니사이드-유 13 | 0.01 |
| 그린 #13 | 0.001 |
| 증류수 | 잔량 |
| 합계 | 100 |
제형예 3: 영양화장수
하기 표 8의 조성으로 제조예 1의 거피 흑콩 추출물을 함유하는 영양화장수를 통상의 방법에 따라 제조하였다.
| 성분 | 함량 (중량%) |
| 거피 흑콩 추출물 | 2.0 |
| 글리세릴 스테아레이트 SE | 1.5 |
| 세테아릴알콜 | 1.5 |
| 라놀린 | 1.5 |
| 폴리솔베이트 60 | 1.3 |
| 솔비탄스테아레이트 | 0.5 |
| 경화식물유 | 1.0 |
| 광물유 | 5.0 |
| 스쿠알란 | 3.0 |
| 트리옥타노인 | 2.0 |
| 디메치콘 | 0.8 |
| 초산 토코페롤 | 0.5 |
| 카르복시비닐 폴리머 | 0.12 |
| 글리세린 | 5.0 |
| 1,3-부틸렌글리콜 | 3.0 |
| 소듐히아루로네이트 | 5.0 |
| 트리에탄올아민 | 0.12 |
| 향 | 0.01 |
| 유니사이드-유 13 | 0.02 |
| 그린 #3 | 0.003 |
| 증류수 | 잔량 |
| 합계 | 100 |
제형예 4: 영양크림
하기 표 9의 조성으로 제조예 1의 거피 흑콩 추출물을 함유하는 영양크림을 통상의 방법에 따라 제조하였다.
| 성분 | 함량 (중량%) |
| 거피 흑콩 추출물 | 5.0 |
| 친유형 모노스테아린산글리세린 | 2.0 |
| 세테아릴알콜 | 2.2 |
| 스테아린산 | 1.5 |
| 밀납 | 1.0 |
| 폴리솔베이트 60 | 1.5 |
| 솔비탄스테아레이트 | 0.6 |
| 경화식물유 | 1.0 |
| 스쿠알란 | 3.0 |
| 광물유 | 5.0 |
| 트리옥타노인 | 5.0 |
| 디메치콘 | 1.0 |
| 소듐마그네슘실리케이트 | 0.1 |
| 글리세린 | 5.0 |
| 베타인 | 3.0 |
| 트리에탄올아민 | 1.0 |
| 소듐히아루로네이트 | 4.0 |
| 향 | 0.01 |
| 유니사이드-유13 | 0.02 |
| 그린 #3 | 0.003 |
| 증류수 | 잔량 |
| 합계 | 100 |
제형예 5: 맛사지 크림
하기 표 10의 조성으로 제조예 1의 거피 흑콩 추출물을 함유하는 맛사지 크림을 통상의 방법에 따라 제조하였다.
| 성분 | 함량 (중량%) |
| 거피 흑콩 추출물 | 4.0 |
| 친유형 모노스테아린산 글리세린 | 1.5 |
| 세테아릴알콜 | 1.5 |
| 스테아린산 | 1.0 |
| 폴리솔베이트 60 | 1.5 |
| 솔비탄스테아레이트 | 0.6 |
| 이소스테아릴 이소스테레이트 | 5.0 |
| 스쿠알란 | 5.0 |
| 광물유 | 35.0 |
| 디메치콘 | 0.5 |
| 히드록시에틸셀룰로오스 | 0.12 |
| 글리세린 | 6.0 |
| 트리에탄올아민 | 0.7 |
| 향 | 0.01 |
| 유니사이드-유13 | 0.02 |
| 그린 #3 | 0.003 |
| 증류수 | 잔량 |
| 합계 | 100 |
제형예 6: 에센스
하기의 표 11의 조성으로 제조예 1의 거피 흑콩 추출물을 함유하는 에센스를 통상의 방법에 따라 제조하였다.
| 성분 | 함량 (중량%) |
| 거피 흑콩 추출물 | 4.0 |
| 글리세린 | 10.0 |
| 베타인 | 5.0 |
| PEG 1500 | 2.0 |
| 알란토인 | 0.1 |
| DL-판테놀 | 0.3 |
| EDTA-2Na | 0.02 |
| 벤조페논-9 | 0.04 |
| 히드록시에틸 셀룰로오스 | 0.1 |
| 소듐 히아루로네이트 | 8.0 |
| 카르복시비닐폴리머 | 0.2 |
| 트리에탄올아민 | 0.18 |
| 옥틸도데칸올 | 0.3 |
| 옥틸도데세스-16 | 0.4 |
| 에탄올 | 6.0 |
| 향 | 0.02 |
| 유니사이드-유 13 | 0.01 |
| 그린 #3 | 0.001 |
| 증류수 | 잔량 |
| 합계 | 100 |
제형예 7: 팩
하기 표 12의 조성으로 제조예 1의 거피 흑콩 추출물을 함유하는 팩을 통상의 방법에 따라 제조하였다.
| 성분 | 함량 (중량%) |
| 거피 흑콩 추출물 | 2.0 |
| 폴리비닐알콜 | 15.0 |
| 셀룰로오스 검 | 0.15 |
| 글리세린 | 3.0 |
| PEG 1500 | 2.0 |
| 시이크데스트린 | 0.15 |
| DL-판테놀 | 0.4 |
| 알란토인 | 0.1 |
| 글리시리진산 모노암모늄 | 0.3 |
| 니코틴아미드 | 0.5 |
| 에탄올 | 6.0 |
| PEG 40 경화피마자유 | 0.3 |
| 향 | 미량 |
| 유니사이드-유13 | 0.02 |
| 그린 #3 | 0.003 |
| 증류수 | 잔량 |
| 합계 | 100 |
실험예 5 : 거피 흑콩 추출물을 함유하는 크림의 제형의 안정성 시험
본 발명의 화장료 제형의 온도 변화에 따른 안정성을 시험하였다. 거피 흑콩 추출물을 함유하는 상기 제형예 4의 크림 (실시예), 상기 제형예 4에서 거피 흑콩 추출물을 5.0 중량% 감초산으로 대체한 크림 (비교예) 및 상기 제형예 4에서 거피 흑콩 추출물을 정제수로 대체한 크림 (대조예)을 불투명 초자 용기에 담아 45℃로 일정하게 유지되는 항온조에서 1주동안 보관하고, 또한 불투명 초자 용기에 담아 4℃로 일정하게 유지되고 완전히 차광 된 냉장고 내에서 1주 동안 보관한 후 변 색 정도를 비교 측정하였다. 이때 제품 변색 정도는 다음 표 13의 6등급으로 분류하여 평가하였으며, 그 결과를 하기 표 14에 나타내었다.
| 점 수 | 평가 기준 |
| 0 | 변화 없음 |
| 1 | 극히 조금 변함 |
| 2 | 조금 변함 |
| 3 | 조금 심하게 변함 |
| 4 | 심하게 변함 |
| 5 | 극히 심하게 변함 |
| 온도 | 실험물질 변색 정도 | ||
| 실시예 | 대조예 | 비교예 | |
| 45℃ | 0 | 0 | 2 |
| 4℃ | 0 | 0 | 2 |
상기 표 14에서 알 수 있는 바와 같이, 거피 흑콩 추출물을 함유하는 제형예 4의 크림 (실시예)은 변색이 거의 되지 않아 상기 거피 흑콩 추출물 대신 감초산을 함유하는 크림 (비교예)에 비해 안정성이 매우 우수함을 알 수 있었다. 추출물을 정제수로 대체한 대조예에서는 변색이 일어나지 않은 것으로 보아 크림의 기타 함유 성분에 의해서는 변색이 일어나지 않는다는 것을 알 수 있었다.
이상에서 상세히 설명하듯이, 본 발명은 거피 흑콩 추출물을 유효 성분으로 포함하는 피부자극 완화용 화장료 조성물을 제공한다. 거피 흑콩 추출물은 기존의 항염증제에 비해 화장품 원료에 의한 피부자극을 현저히 완화시켜 주며, 또한 증가된 항염증 활성을 나타내므로, 화장료에 사용하였을 경우 탁월한 피부자극 완화 효과가 있다. 본 발명의 거피 흑콩 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물은 피부에 도포하였을 때 발생할 수 있는 피부자극을 이용하여 완화시켜줌으로써 화장품의 피부 안전성을 증진시킬 수 있다.
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
Claims (7)
- 삭제
- 삭제
- 거피 흑콩 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부자극 완화용 화장료 조성물.
- 제 3 항에 있어서, 상기 거피 흑콩 추출물은 물, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올, 상기 저급 알코올과 물과의 혼합용매, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 클로로포름 및 1,3-부틸렌글리콜로 구성된 군으로부터 선택되는 용매를 사용하여 추출되는 것을 특징으로 하는 피부자극 완화용 화장료 조성물.
- 제 3 항에 있어서, 상기 거피 흑콩 추출물은 조성물의 총 건조중량에 대하여 0.0001-10.0 중량%로 함유되는 것을 특징으로 하는 피부자극 완화용 화장료 조성물.
- 제 3 항에 있어서, 상기 조성물은 락틱산을 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 피부자극 완화용 화장료 조성물.
- 제 3 항에 있어서, 상기 화장료는 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 피부자극 완화용 화장료 조성물.
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|---|---|---|---|---|
| WO2010013885A1 (en) * | 2008-08-01 | 2010-02-04 | Amorepacific Corporation | Cosmetic composition containing salt-fermented extract of natural materials |
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