KR101867440B1 - 멜라닌 색소를 유효성분으로 포함하는 피부 개선 조성물 - Google Patents

멜라닌 색소를 유효성분으로 포함하는 피부 개선 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 멜라닌 색소를 유효성분으로 포함하여 피부의 자극을 예방 및 완화시키는 효능을 갖는 화장료 조성물을 제공한다.
나아가, 본 발명은 우단콩(Mucuna pruriens) 등의 천연 추출물로부터 유래 멜라닌 색소를 포함하는 피부자극 예방 및 억제용 화장료 조성물을 제공한다. 본 발명의 화장료 조성물은 피부의 자극을 예방 또는 억제하는 효과를 갖는다.

Description

멜라닌 색소를 유효성분으로 포함하는 피부 개선 조성물{Composition for skin promotion containing melanin as active ingredient}
본 발명은 피부의 자극을 완화하여 피부를 개선하는 피부 자극 예방 및 완화용 조성물에 관한 것이다.
피부는 신체 중 가장 큰 기관으로 항상 외부와 접하고 있으면서 여러 가지 자극이나 건조한 환경으로부터 생체를 보호하는 보호막의 역할을 하고 있으며, 다른 기관에 비하여 새로운 세포의 생성과 소멸이 활발히 일어나는 기관이다. 또한, 물리적인 찰과상으로부터 보호하고, 몸 안에 가지고 있는 물의 손실을 막아주며 태양으로부터 나오는 해로운 자외선으로부터 보호해주고, 몸의 체온을 조절해주는데 매우 중요한 역할을 담당하고 있다.
한편, 민감성 피부란 일반적인 피부와 비교하여 상대적으로 피부 반응이 잘 유발되는 경우를 말한다. 여러 가지 설문조사에 따르면 30-50%의 소비자가 스스로를 민감한 피부라고 여기고 있다. 그러나 민감성 피부의 증상 및 원인이 명확하게 밝혀져 있지는 않으나 일반적으로 민감성 피부를 가진 사람들은 화장품, 스트레스, 대기 오염 등 외부적 환경에 의한 영향을 쉽게 받는다. 이러한 영향은 홍반 등의 염증성 반응 및 피부 건조, 거칠어짐 등 육안적으로 확인할 수 있는 변화뿐만 아니라 따가움, 화끈거림, 가려움 등의 주관적인 느낌까지 매우 다양한 형태로 나타난다. 민감성 피부를 구분하는 시험으로서, 따가움 화끈거림 등을 유발한다고 알려진 젖산(lactic acid)이나 DMSO를 처리하여 민감성 피부를 분류하는 예도 있다(Kligman et al., Dermatoses, 1988, 36, 45-49).
지금까지의 저자극성 피부용 화장품들은 자극을 일으킬 여지가 있는 유효성분을 제거하여 접촉성 피부염, 알러지성 피부염 등을 일으키지 않도록 개발되어 왔다. 그러나 환경적, 심리적 요인에 의해 민감성 피부 보유자들의 화장품에도 유효성분들의 사용이 요구된다. 이에 화장품 업계에서는 사이토카인 및 염증성 매개물질의 조절에 의해 면역반응을 완화시키며, 피부 장벽 강화 기능, 피부 보호 기능을 통해 피부 자극을 완화시키려는 시도들이 있어 왔다. 구체적인 예로 염증성 매개물질의 조절 및 민감성 피부의 역반응 조절의 브레디키닌 길항제(bradykinin antagonist; USP 5,849,312 참조)가 있으며, 사이토카인 중 하나인 TNF-α 저해제를 민감성 피부용 제제로 적용한 예(USP 5,851,556)가 있다.
일반적으로 자극반응이나 염증반응의 기전을 살펴보면, 사람의 각질형성 세포나 랑게르한스 세포에서는 외부의 물질에 의해 다양한 사이토카인을 만들어 방출할 수 있다. 이러한 사이토카인은 인체 내 면역 체계 활성화 촉진 물질로서 피부의 자극유발이나 국소적인 염증반응의 진행에 필수적이다(J Appl Toxicol 16:65-70, 1996). 실제로 자극성 접촉 피부염에서 인터루킨-6(Interleukin-6;IL-6), 인터루킨-1(Interleukin-1;IL-1), 종양 괴사인자-α(Tumor necrosis factor-α; TNF-α)의 증가가 보고된바 있다(Contact Dermatitis 35:355-60, 1996, Dec).
이에, 본 발명자들은 피부 자극에 대한 연구를 진행한 결과, 멜라닌 색소가 우수한 피부 자극 예방 및 완화 효능을 나타냄을 발견하였다. 나아가, 천연 추출물 중 우단콩 추출물로부터 유래한 멜라닌 색소가 우수한 피부 자극 예방 및 완화 효능을 나타냄을 발견하였다. 보다 상세하게는 신경전달물질인 도파민의 전구체인 L-도파(L-DOPA)가 함유되어 있는 우단콩 추출물에서 유래한 멜라닌 색소를 효과적으로 이용하기 위하여 연구한 결과, 염증성 반응 경로에 관계된 염증성 사이토카인인 IL-8 및 MPC-1 인자가 피부자극의 형성 과정에 관여하며, 이들 염증성 매개분자의 발현 조절에 의해 역반응을 조절하여 피부 자극을 예방하고 완화시키는 효과를 가질 수 있음을 발견하였다.
따라서, 본 발명의 목적은 피부 자극을 예방 및 완화시키는 기능성 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
상기의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 우단콩 추출물 유래 멜라닌 색소를 포함하는 피부자극 예방 및 완화용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에 의해 제공되는 멜라닌 색소, 나아가 우단콩 추출물 유래 멜라닌 색소를 포함하는 화장료 조성물은 여러 가지 자극으로부터 피부를 보호하며, 염증성 사이토카인의 발현을 조절하여 피부염, 피부 건조, 피부 거칠어짐, 따가움, 가려움, 화끈거림 등 과 같은 피부자극을 예방 및 완화시킨다.
도 1은 시험예 1에서의 실시예 1 및 2, 비교예 1 및 2의 올트랜스 레티노산에 대한 염증성 사이토카인(MCP-1)의 발현양을 나타낸 것이다.
도 2는 시험예 2에서의 실시예 1 및 2, 비교예 1 및 2의 올트랜스 레티노산에 대한 염증성 사이토카인(IL-8)의 발현양을 나타낸 것이다.
본 발명의 화장료 조성물은 멜라닌 색소를 유효성분으로 포함한다. 본 발명에서 사용되는 멜라닌 색소는 천연 추출물에서 유래한 것이 바람직하고, 나아가 우단콩 추출물 유래 멜라닌 색소가 더 바람직하다.
본 발명에서 사용하는 우단콩(Mucuna pruriens)은 콩과 식물로서 아프리카, 인도 및 카리브해에서 많이 발생하는 식물이다. 또한, 전통적으로 혈당을 낮추어 주며 우단콩 추출물에는 도파민의 전구체인 L-도파가 함유되어 있고, 이는 도파민이라는 신경전달물질로 전환되어 성장호르몬을 자극하는 효과가 있는 한편, 파킨슨병의 치료에 사용되는 것으로 알려져 있다.
본 발명은 멜라닌 색소를 유효성분으로 포함하는 피부 자극 예방 및 완화용 화장료 조성물을 제공한다. 또한, 본 발명의 화장료 조성물에 포함하는 상기 멜라닌 색소는 우단콩 추출물 유래 멜라닌 색소인 것이 바람직하며, 조성물 총 중량에 대하여 0.01~10 중량%로 포함되는 것이 바람직하다.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 우단콩 추출물은 업계에서 통상적으로 사용하는 추출법을 이용하여 제조할 수 있다. 보다 상세하게는, 햇볕에 말린 우단콩을 분쇄하여 분말로 만들고 4℃의 온도에서 24시간 동안 탈이온 증류수에 담근 후 원심분리기로 분리시킨 후, 그 상청액을 감압 하에 동결 건조시켜 제조하는 것이 바람직하다.
본 발명의 우단콩 추출물 유래 멜라닌 색소는 우단콩 추출물을 pH8~10의 조건에서 전처리하고 3~5일간 15~35℃에서 산화하여 제조된 것이 바람직하다.
한편, 본 발명의 멜라닌 색소, 특히 우단콩 추출물에서 유래한 멜라닌 색소는 올트랜스 레티노산(all-trans retinoic acid)에 의한 염증성 사이토카인의 발현을 조절하여 이를 억제시킴으로써 피부 자극을 예방 및 완화시키는 효과를 제공한다.
본 발명의 조성물은 외형제 조성물로서 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며, 예를 들면 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 아이에센스, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 파우더, 보디로션, 보디크림, 보디오일, 보디에센스 등의 화장료 제형을 가질 수 있다. 또한, 로션, 연고, 겔, 크림, 패취 또는 분무제와 같은 경피 투과형 제형을 갖는 화장료 조성물 일 수 있다. 또한, 각각의 제형에 있어서 다른 성분들은 기타 외용제의 종류 또는 사용목적에 따라 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합 할 수 있다.
이하 본 발명을 하기 실시예 및 시험예에 의거하여 보다 구체적으로 설명한다. 그러나 이들 실시예 및 시험예는 본 발명에 대한 이해를 돕기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위가 이들 예로 한정되는 것은 아니다.
[참고예] 우단콩 추출물의 제조
햇볕에 말린 우단콩을 분쇄하여 분말로 만들었다. 이를 4℃의 온도에서 24시간 동안 탈이온 증류수에 담근 후 20분 동안 원심분리기로 분리시킨 후, 그 상청액을 감압 하에 동결 건조시켜 제조하였다.
[제조예]우단콩 추출물 유래 멜라닌 색소의 제조
상기 참고예에서 제조한 우단콩 추출물 파우더를 1% 농도로 정제수에 용해한 후, 염기용액으로 수산화나트륨 수용액을 사용하여 pH 8-10로 조정하였다. 이를 교반하면서 5일간 실온에서 산화하여, 0.3-0.5%의 멜라닌 용액을 수득하였다.
[시험예 1]MCP-1의 발현양 측정
케라티노사이트(HaCa T cell line) 에 상기 제조예에서 제조한 멜라닌 용액을 적정농도로 처치하여, 피부 자극원의 하나인 올트랜스 레티노산(all-trans retinoic acid, ATRA))에 대한 염증성 사이토카인(MCP-1)의 발현양을 측정하였다.
구체적인 시험방법은 하기와 같다.
HaCa T 세포를 96 웰플레이트(well plate, 2.0 X 104 cell/well)에 심고 24시간 동안 배양하였다. HaCa T 단분자막을 200ul의 인산완충식염수(PBS)(제조사; Lonza)로 세 번에 걸쳐 세척하고, 200ul의 무혈청 DMED(Dulbecco's modified eagle medium)를 24시간 동안 첨가하였다. 24시간의 혈청기아상태(serum starvation) 후, HaCa T 단분자막을 인산완충식염수로 세 번에 걸쳐 세척하고 150ul의 1% 배지 함유 FBS(FBS containing media)를 첨가하였다.
실시예 1 및 2
HaCa T 세포들은 항자극 시약으로서, 50ul으로 희석된 상기 제조예에서 제조한 멜라닌 용액 500ppm(실시예 1)과 상기 제조예에서 제조한 멜라닌 용액 100ppm(실시예 2)으로 10분 동안 각각 처리하고, 1% 배지 함유 FBS에서 항자극 처리 세포로 희석되었으며, 24시간 동안 배양된 50ul의 1uM의 올트랜스 레티노산(제조사: Sigma-Aldrich, St. Louis, USA)을 첨가하였다.
비교예 1
HaCa T 세포들을 50ul으로 희석된 히드로코르티손 1ppm으로 10분 동안 처리하고, 1% 배지 함유 FBS에서 항자극 처리세포로 희석되고 24시간 동안 배양된 50uL의 1uM의 올트랜스 레티노산을 첨가하였다. 그리고 상기 실시예 1 및 2와 동일한 방법으로 405nm에서 흡수도를 측정하였다.
비교예 2
상기 실시예 1 및 2에서 사용된 HaCa T세포에 어느 항자극 시약도 처리하지 않은 상태로 상기와 동일한 50uL의 1uM의 올트랜스 레티노산을 첨가하였다.
대조군
상기 실시예 1 및 2에서 사용된 HaCa T세포에 어느 항자극 시약도, 올트랜스 레티노산도 첨가하지 않았다.
상기 실시예 1 및 2, 비교예 1 및 2, 대조군의 상청액을 수집하고 MCP-1(Monocyte Chemoattractant Protein-1) (상품명: BD OptEIATM; 제조사: BD Biosciences, New Jersey, USA)용 사이토카인 ELISA를 수행하였다. 2,2'-아지노-비스-3-에틸벤즈티아졸린-6-술폰산(2,2'-azino-bis-3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid) (제조사: Sigma-Aldrich)와의 접합체를 배양 후 SoftMax®Pro 5 (제조사: Molecular device, Sunnyvale, USA)를 사용하여 405nm에서 흡수도를 측정하였다.
모든 샘플들은 3중으로 시험하였으며, MCP-1의 발현양은 pg/ml로 나타내었다. 발현양 및 자극 감소율(%)은 다음의 식으로 계산되었다.
Figure 112011060323280-pat00001
측정 결과 및 상기 식 1로 계산한 자극 감소율(%)을 하기의 표 1에 나타내었다(도 1 참조).
처치농도 사이토카인 발현양(pg/ml) 자극 감소율(%)
실시예 1 500ppm 950.2 96.60
실시예 2 100ppm 1104.7 82.13
비교예 1 1ppm 1027.6 86.75
비교예 2 1uM 1898.8 -
대조군 - 894.7 -
상기 표 1에 나타난 결과로부터, HaCa T 세포에 적정 농도의 멜라닌 색소 용액을 처치할 경우 피부 자극원의 하나인 올트랜스 레티노산에 대한 염증성 사이토카인인 MCP-1의 발현이 유의적으로 감소한다는 사실을 ELISA를 통해 확인할 수 있었다. 또한, 멜라닌 색소 용액의 처치 농도가 증가하면 염증성 사이토카인 MCP-1의 발현의 억제 정도가 커짐을 알 수 있었다.
[시험예 2] IL-8의 발현양 측정
상기 시험예 1과 동일한 실시예 1 및 2, 비교예 1 및 2, 대조군을 제조하였다. 그리고 이의 상청액을 수집하고 IL-8((BD OptEIATM; BD Biosciences, New Jersey, USA))용 사이토카인 ELISA를 수행하였다. 그리고 동일한 방법으로 2,2'-아지노-비스-3-에틸벤즈티아졸린-6-술폰산(제조사: Sigma-Aldrich)와의 접합체를 배양 후 SoftMax®Pro 5 (제조사: Molecular device, Sunnyvale, USA) 를 사용하여 405nm에서 흡수도를 측정하였다.
모든 샘플들은 3중으로 시험하였으며, MCP-1의 발현양은 pg/ml로 나타내었다. 발현 수준 및 자극 감소율(%)는 상기 식 1로 계산되었다.
측정 결과 및 자극 감소율(%)을 하기의 표 2에 나타내었다(도 2 참조).
처치농도 사이토카인 발현양(pg/ml) 자극 감소율(%)
실시예 1 500ppm 415.8 83.9
실시예 2 100ppm 603.8 26.3
비교예 1 1ppm 407.7 86.6
비교예 2 1uM 711.8 -
대조군 - 360.4 -
상기 표 2에 나타난 결과로부터, HaCa T 세포에 적정 농도의 멜라닌 색소 용액을 처치할 경우 피부 자극원의 하나인 올트랜스 레티노산에 대한 염증성 사이토카인인 IL-8의 발현이 유의적으로 감소한다는 사실을 ELISA를 통해 확인할 수 있었다. 또한, 멜라닌 색소 용액의 처치 농도가 증가하면 염증성 사이토카인 IL-8의 발현의 억제 정도가 커짐을 알 수 있었다.
본 발명에 의한 화장료 조성물은 하기의 제형예와 같이 제조될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
[제형예 1] 영양화장수
하기 표 3에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양화장수를 제조할 수 있다.
원료명 함량(중량%)
글리세린 8.0
부틸렌글리콜 4.0
히알루론산 추출물 5.0
베타글루칸 7.0
카보머 0.1
우단콩 추출물 유래 멜라닌 색소 1.0
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 8.0
스쿠알란 5.0
세테아릴 글루코사이드 1.5
소르비탄 스테아레이트 0.4
세테아릴 알코올 1.0
방부제 적량
향 적량
색소 적량
트리에탄올아민 0.1
정제수 잔량
[제형예 2] 영양로션
하기 표 4에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양로션을 제조할 수 있다.
원료명 함량(중량 %)
정제수 잔량
글리세린 3.0
부틸렌글리콜 3.0
유동파라핀 5.0
베타글루칸 7.0
카보머 0.1
우단콩 추출물 유래 멜라닌 색소 1.0
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 3.0
스쿠알란 5.0
세테아릴 글루코사이드 1.5
소르비탄 스테아레이트 0.4
폴리솔베이트 60 1.5
방부제 적량
향 적량
색소 적량
트리에탄올아민 0.1
[제형예 3] 영양크림
하기 표 5에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양크림을 제조할 수 있다.
원료명 함량(중량 %)
글리세린 3.0
부틸렌글리콜 3.0
유동파라핀 7.0
베타글루칸 7.0
카보머 0.1
우단콩 추출물 유래 멜라닌 색소 1.0
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 3.0
스쿠알란 5.0
세테아릴 글루코사이드 1.5
소르비탄 스테아레이트 0.4
폴리솔베이트 60 1.2
방부제 적량
향 적량
색소 적량
트리에탄올아민 0.1
정제수 잔량
[제형예 4] 마사지 크림
하기 표 6에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 마사지 크림을 제조할 수 있다.
원료명 함량(중량 %)
글리세린 8.0
부틸렌글리콜 4.0
유동파라핀 45.0
베타글루칸 7.0
카보머 0.1
우단콩 추출물 유래 멜라닌 색소 1.0
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 3.0
밀납 4.0
세테아릴 글루코사이드 1.5
세스퀴 올레인산 소르비탄 0.9
바세린 3.0
방부제 적량
향 적량
색소 적량
파라핀 1.5
정제수 잔량
[제형예 5] 팩
하기 표 7에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 팩을 제조할 수 있다.
원료명 함량(중량 %)
글리세린 4.0
폴리비닐알콜 15.0
히알루론산 추출물 5.0
베타글루칸 7.0
알란토인 0.1
우단콩 추출물 유래 멜라닌 색소 1.0
노닐 페닐에테르 0.4
폴리솔베이트 60 1.2
방부제 적량
향 적량
색소 적량
에탄올 6.0
정제수 잔량
[제형예 6] 연고
하기 표 8에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 연고를 제조할 수 있다.
원료명 함량(중량 %)
글리세린 8.0
부틸렌글리콜 4.0
유동파라핀 15.0
베타글루칸 7.0
카보머 0.1
우단콩 추출물 유래 멜라닌 색소 1.0
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 3.0
스쿠알란 1.0
세테아릴 글루코사이드 1.5
소르비탄 스테아레이트 0.4
세테아릴 알코올 1.0
방부제 적량
향 적량
색소 적량
밀납 4.0
정제수 잔량

Claims (9)

  1. 용출된 멜라닌 색소가 0.3-0.5% 포함된 우단콩(Mucuna pruriens) 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 자극 예방 및 완화용 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 멜라닌 색소가 포함된 우단콩 추출물은 우단콩 건조 분말을 물에 넣고 원심분리하여 얻은 상청액을 감압 조건 하에 동결건조하여 우단콩 추출물을 얻은 뒤, 상기 우단콩 추출물을 pH 8~10의 조건 하에서 전처리한 다음, 산화시켜 얻은 것임을 특징으로 하는, 피부 자극 예방 및 완화용 화장료 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 멜라닌 색소가 포함된 우단콩 추출물은 올트랜스 레티노산(all-trans retinoic acid)에 의한 염증성 사이토카인의 발현을 억제시키는 것을 특징으로 하는, 피부 자극 예방 및 완화용 화장료 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 멜라닌 색소가 포함된 우단콩 추출물의 함량은 조성물의 총 중량을 기준으로 0.01~10중량%임을 특징으로 하는, 피부 자극 예방 및 완화용 화장료 조성물.
  5. 제2항에 있어서, 상기 멜라닌 색소가 포함된 우단콩 추출물은 우단콩 건조 분말을 물에 넣고 원심분리하여 얻은 상청액을 감압 조건 하에 동결건조하여 우단콩 추출물을 얻은 뒤, 상기 우단콩 추출물에 염기성 용액을 처리하여 pH 8~10의 조건 하에서 전처리한 다음, 3~5일간 15~35℃의 온도에서 산화시켜 얻은 것임을 특징으로 하는, 피부 자극 예방 및 완화용 화장료 조성물.
  6. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 유연화장수, 영양화장수, 영양로션, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 클렌징크림, 클렌징폼, 팩 및 바디로션으로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나로 제형화되는 것을 특징으로 하는, 피부 자극 예방 및 완화용 화장료 조성물.
  7. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 로션, 연고, 겔, 크림, 패취 및 분무제로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나의 경피 투과형 제형을 갖는 것을 특징으로 하는, 피부 자극 예방 및 완화용 화장료 조성물.
  8. 제3항에 있어서, 상기 염증성 사이토카인은 IL-8(interleukin-8) 또는 MCP-1(monocyte chemotactic protein-1)인 것을 특징으로 하는, 피부 자극 예방 및 완화용 화장료 조성물.
  9. 제1항에 있어서, 상기 피부 자극은 피부의 건조, 피부의 염증, 피부의 홍반, 피부의 따가움, 피부의 화끈거림 및 피부의 가려움으로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는, 피부 자극 예방 및 완화용 화장료 조성물.
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