KR100570120B1

KR100570120B1 - 산사자 추출물을 함유하는 자유라디칼 소거용 화장료

Info

Publication number: KR100570120B1
Application number: KR1019980062136A
Authority: KR
Inventors: 김정하; 김범준; 허문영; 김현표
Original assignee: 주식회사 코리아나화장품
Priority date: 1998-12-30
Filing date: 1998-12-30
Publication date: 2006-07-27
Also published as: KR20000045576A

Abstract

본 발명은 산사자(산사나무 열매) 추출물을 함유하는 자유라디칼 소거용 화장료에 관한 것이다.

본 발명의 산사자 추출물은 산사자를 건조시키고 분쇄하여 미세한 분말로 만든 후, 1~15 배의 추출용매를 가하여 실온에서 1~15일간 침적시켜 추출한 용액을 감압농축하여 얻어진다.

본 발명의 화장료는 유연화장수(스킨), 수렴화장수, 영양화장수(로션), 영양크림, 맛사지크림, 에센스 또는 팩 등의 형태로 제조될 수 있다.

본 발명의 자유라디칼 소거용 화장료는 피부의 자유라디칼을 소거함으로써, 자유라디칼에 의한 생체물질의 산화를 억제하여 피부의 노화 방지 또는 지연시키고 천연의 물질이어서 안전하다.

Description

산사자 추출물을 함유하는 자유라디칼 소거용 화장료

본 발명은 산사자(Crataegi Fructus) 추출물을 함유하는 자유라디칼 소거용 화장료에 관한 것으로, 구체적으로는 자유라디칼 소거 작용이 뛰어나 피부노화를 방지 또는 지연시키고 천연의 물질이어서 안전한 항산화 화장료에 관한 것이다.

화장료의 목표는 아름답고 건강한 피부를 유지하는 것이며, 아울러 나이가 들면서 자연적으로 생기는 피부의 노화를 지연시키는데 있다. 이를위해 여러 천연 식물 성분들의 피부생리활성을 검색하여 안전성이 우수하고 피부미용효과가 강한 물질들을 개발하기 위한 연구가 현재 활발히 진행중이다.

피부의 노화는 자유라디칼(free radical)에 의한 생체물질의 산화적 손상에 기인한다. 즉 과산화수소, 히드록시 라디칼, 슈퍼옥사이드 라디칼 등의 활성산소와 같은 반응성이 높은 자유라디칼은 세포막을 구성하는 지질을 과산화시켜 세포막을 파괴하고 단백질을 산화시키며 핵산을 공격하여 산화적 손상을 일으켜 생체물질을 파괴하고 결국 세포를 죽게한다.

따라서 피부의 노화 방지 또는 지연은 피부내 자유라디칼을 소거함으로써 가능하게 된다.

지금까지 알려진 자유라디칼소거작용을 갖는 물질로는 아스코르빈산(ascorbic acid), 디엘-알파토코페롤(dl-α-tocopherol), 베타카로틴(β-carotene), 디부틸히드록실톨루엔(BHT) 등이 있다.

그러나 이러한 물질들은 합성품으로 사용되기 때문에 장기 사용시 또는 다량 사용시 피부 안전성의 문제를 일으킬 수 있으므로 보다 안전하고 유용하게 피부에 적용할 수 있는 새로운 항산화 화장료의 개발이 절실하게 요구되고 있는 실정이다.

본 발명자들은 피부 노화를 방지하는 물질을 검색하기 위해 여러가지 식물추출물을 대상으로 연구한 결과, 산사자에서 얻은 추출물이 자유라디칼 소거 작용이 크다는 것을 알게되어 본 발명을 완성하게 되었다.

산사자(Crataegi Fructus)는 산사나무의 열매로, 그 성분은 아미그달린(amygdalin), 퀘르세틴(quercetin), 클로로제닉산(chlorogenic acid) 및 우르솔릭산(ursolic acid)등이 알려져 있다(한대석 등, 생약학, 동명사, pp 281-282, 서울, 1993). 산사자는 최근에는 혈액순환 개선제로 개발되어 의약품으로 사용되고 있다. 산사나무는 장미과(Rosaceae)에 속하는 식물로서 한국과 중국 등지에서 자생하고 있다(동국대 한의대 본초학회역, 중국본초도감, 제1권, pp43, 여강출판사, 서울, 1994)

본 발명의 목적은 자유라디칼 소거 작용이 있어 피부노화를 방지 또는 지연시키는 천연물질의 화장료를 제공하는 것이다.

본 발명은 산사자 추출물을 함유하는 자유라디칼 소거용 화장료에 관한 것이다.

여기서 산사자는 산사나무(Crataegus pinnatifida)의 열매가 바람직하다.

본 발명의 화장료에 함유되는 산사자 추출물은 산사자로부터 통상적인 추출방법에 의하여 추출된다. 즉, 산사자를 건조시키고 분쇄하여 미세한 분말로 만든 후, 추출용매를 가하여 실온에서 1~15일간 침적시켜 유효성분을 추출한다. 이때 추출용매로는 물, 저급알코올, 물과 저급알코올의 혼합용매, 아세톤, 디에틸에테르, 클로로포름, 헥산 또는 에틸아세테이트를 사용할 수 있으며, 산사자의 미세분말 1kg에 대하여 1~15ℓ의 추출용매를 사용하는 것이 바람직하다.

이렇게 추출한 용액을 감압농축하여 산사자 추출물로 하고, 이를 화장료에 첨가한다. 이때 화장료에 첨가되는 산사자 추출물의 양은 화장료에 대하여 0.001~10 중량%이고, 바람직하게는 0.01~5 중량%이다.

본 발명의 자유라디칼 소거용 화장료는 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수(로션), 영양크림, 맛사지크림, 에센스, 팩 등의 형태로 제조될 수 있다.

이하 본 발명을 상세히 설명하나, 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.

실시예 1

정제수로 세척하고 건조한 후 분쇄한 산사자 미세분말 1㎏을 물 3ℓ에 넣고 실온에서 15일간 침적한 후 와트만 2번 여과지로 여과하였다. 이 여액을 냉각콘덴서가 달린 감압농축장치에서 농축하여 건조중량 97g의 산사자 추출물을 얻었다.

실시예 2~14

하기 표 1의 추출용매를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 같은 방법으로 추출하여 산사자 추출물을 얻었다.

[표 1]

실험예 1 : 산사자 추추물의 자유라디칼 소거 작용 시험

실시예 1~15에서 제조한 산사자 추출물에 대하여 자유라디칼 소거 작용을 다음과 같이 측정하였다.

즉, 60μM 1,1-디페닐-2-피크릴 히드라질 (1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl, DPPH) 에탄올 용액 2 ㎖에 산사자 추출물의 디메틸설폭시드(DMSO) 용액 2 ㎖를 가하고 상온에서 30분간 반응시킨 후, 520 ㎚에서 흡광도를 측정하였다.

자유라디칼 소거 작용(%)은 다음의 공식으로 산출하였다.

그 결과는 하기 표 2에 나타내었다.

[표 2]

산사자 추출물들은 대부분 높은 활성을 나타내었으며, 특히 디에틸에테르, 클로로포름 및 헥산 등의 비극성용매의 추출물보다 에탄올, 메탄올 등의 중등도 극성 또는 물과 같은 극성용매의 추출물 모두에서 효과가 크게 나타났다.

실험예 2 : 산사자 추출물 및 기존 항산화제의 자유라디칼 소거 작용 비교

실시예 1~15의 산사자 추출물과 기존 항산화제인 아스코르빈산(ascorbic acid), 디엘-알파토코페롤(dl-α-tocopherol), 베타카로틴(β-carotene) 및 디부틸히드록실톨루엔(BHT)의 자유라디칼 소거 작용을 실험예 1에서와 동일한 방법으로 측정하여 50% 억제 효과를 나타내는 농도인 IC₅₀을 비교했다.

그 결과는 하기 표 3에 나타낸 바와 같다.

[표 3]

지용성이 큰 실시예 9~11을 제외한 본 발명의 산사자 추출물들은 조추출물임에도 불구하고 다른 항산화제와 비교될 만한 높은 활성을 나타내었으며, 이같은 활성은 산사자 추출물이 천연물혼합물로서도 강한 활성을 가지고 있음을 알 수 있다.

실험예 3 : 산사자 추출물의 과산화수소 유도 세포독성에 대한 억제효과

실시예 6에서 제조한 산사자 추출물의 과산화수소 유도 세포독성에 대한 억제효과를 마우스 유래 피부섬유아세포(fibroblast)를 사용하여 측정하였다.

과산화수소는 세포내에서 히드록실라디칼(hydroxyl radical)을 생성하여 지질과산화를 유발시켜 세포막의 손상과 세포독성을 일으킨다. 산사자 추출물의 자유라디칼 소거 작용을 피부세포수준에서 시험하기 위하여 다음과 같이 측정하였다.

대수증식기의 마우스 피부섬유아세포를 웰(well)당 10,000개로 96웰 플레이트에 접종하여 디엠이엠(DMEM)배지 80㎕에서 24시간 배양한 후, 배지 중의 최종농도가 10^-3M이 되도록 배지에 희석시킨 과산화수소 10 ㎕를 가하고 동시에 실시예 6의 산사자 추출물의 디메틸설폭시드 용액 10 ㎕을 최종농도가 0, 50, 100, 200, 500 ㎍/ml가 되도록 가하여 20시간 추가로 배양한 후, 5 ㎎/㎖의 엠티티(MTT)용액을 15 ㎕씩 첨가하고 4시간 후에 디메틸설폭시드 용액을 웰당 150 ㎕씩 가해 용해시킨 다음 마이크로플레이트리더(microplate reader)로 570 ㎚에서 흡광도를 측정하였다.

산사자 추출물의 과산화수소 유도 세포독성에 대한 억제효과는 다음의 공식으로 산출하였다.

그 결과는 하기 표 4에 나타낸 바와 같다.

[표 4]

산사자 추출물은 과산화수소 유도 세포독성에 대하여 농도의존적으로 억제한 것으로 나타났다. 따라서 산사자 추출물은 마우스 유래 피부섬유아세포내에서 생성된 지질과산화작용을 억제하여 세포독성을 억제하고 있음을 알 수 있다.

실험예 4 : 세포 독성 실험

실시예 6에서 제조한 산사자 추출물 자체의 세포독성을 마우스 유래 피부섬유아세포를 사용하여 다음과 같은 방법으로 측정하였다.

대수증식기의 마우스 피부섬유아세포를 웰당 10,000개로 96웰 플레이트에 접종하여 디엠이엠(DMEM)배지 80 ㎕에서 24시간 배양한 후, 실시예 6의 산사자 추출물의 디메틸설폭시드 희석용액 10 ㎕을 최종농도가 0, 50, 100, 200, 500 ㎍/㎖가 되도록 가하고 20시간 추가로 배양한 후, 5 ㎎/㎖의 MTT 용액을 15 ㎕씩 첨가하고 4시간 후에 디메틸설폭시드용액을 웰당 150 ㎕씩 가해 용해시킨 다음 마이크로플레이트 리더로 570 ㎚에서 흡광도를 측정하였다.

산사자 추출물 자체의 세포독성은 세포 생존률(%)로 나타내었으며, 하기의 공식으로 산출하였다.

그 결과는 하기 표 5에 나타낸 바와 같다.

[표 5]

실시예 6의 산사자 추출물은 그 자체로서 음성대조군에 비하여 유의성있는 세포독성을 나타내지 않았다.

처방예 1

산사자 추출물을 함유한 화장료중 유연화장수의 처방예는 다음과 같다. 여기서 산사자 추출물은 실시예 6의 것을 말한다.

처방예 2

산사자추출물을 함유한 화장료중 수렴화장수의 처방예는 다음과 같다. 여기서 산사자 추출물은 실시예 6의 것을 말한다.

처방예 3

산사자 추출물을 함유한 화장료중 영양화장수(로션)의 처방예는 다음과 같다. 여기서 산사자추출물은 실시예 6의 것을 말한다.

처방예 4

산사자 추출물을 함유한 화장료중 영양크림의 처방예는 다음과 같다. 여기서 산사자 추출물은 실시예 6의 것을 말한다.

처방예 5

산사자 추출물을 함유한 화장료중 맛사지크림의 처방예는 다음과 같다. 여기서 산사자추출물은 실시예 6의 것을 말한다.

처방예 6

산사자 추출물을 함유한 화장료중 에센스의 처방예는 다음과 같다. 여기서 산사자 추출물은 실시예 6의 것을 말한다.

처방예 7

산사자 추출물을 함유한 화장료중 팩의 처방예는 다음과 같다. 여기서 산사자 추출물은 실시예 6의 것을 말한다.

본 발명의 자유라디칼 소거용 화장료는 피부의 자유라디칼을 소거함으로써 자유라디칼에 의한 생체물질의 산화를 억제하여 피부의 노화를 방지 또는 지연시킨다.

Claims

산사자(Crataegi Fructus) 추출물을 함유하는 자유라디칼 소거용 화장료.
제1항에 있어서, 산사자 추출물을 화장료에 대하여 0.001~10중량%의 양으로 함유함을 특징으로 하는 자유라디칼 소거용 화장료.
제1항에 있어서, 산사자 추출물이 산사자를 건조시키고 분쇄하여 미세한 분말로 만든 후, 추출용매를 가하여 실온에서 1~15일간 침적시켜 추출한 용액을 감압농축하여 얻어짐을 특징으로 하는 자유라디칼 소거용 화장료.
제3항에 있어서, 추출용매가 물, 저급알코올, 물과 저급알코올의 혼합용매, 아세톤, 디에틸에테르, 클로로포름, 헥산 및 에틸아세테이트로 이루어진 군으로부터 선택됨을 특징으로 하는 자유라디칼 소거용 화장료.
제1항에 있어서, 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 영양크림, 맛사지크림, 에센스 또는 팩으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것임을 특징으로 하는 자유라디칼 소거용 화장료.