KR20000045573A

KR20000045573A - 연교 추출물을 함유하는 항산화 화장료

Info

Publication number: KR20000045573A
Application number: KR1019980062133A
Authority: KR
Inventors: 김정하; 김범준
Original assignee: 유상옥; 주식회사 코리아나화장품
Priority date: 1998-12-30
Filing date: 1998-12-30
Publication date: 2000-07-25

Abstract

본 발명은 연교 추출물을 함유하는 항산화 화장료에 관한 것이다. 본 발명의 연교 추출물은 연교를 건조시키고 분쇄하여 미세한 분말로 만든 후, 1~15 배의 추출용매를 가하여 실온에서 1~15일간 침적시켜 추출한 용액을 감압농축하여 얻어진다.

본 발명의 화장료는 유연화장수(스킨), 수렴화장수, 영양화장수(로션), 영양크림, 맛사지크림, 에센스 또는 팩 등의 형태로 제조될 수 있다.

Description

연교 추출물을 함유하는 항산화 화장료

본 발명은 연교(Forsythia Fructus)추출물을 함유하는 항산화 화장료에 관한 것으로, 구체적으로는 우수한 항산화 작용으로 인해 피부노화를 방지 또는 지연시킴과 동시에, 천연물질로서 안전한 항산화 화장료에 관한 것이다.

피부의 노화는 자유 라디칼(free radical)에 의한 생체물질의 산화적 손상에 기인한다. 즉 과산화수소, 히드록시 라디칼, 슈퍼옥사이드 라디칼 등의 활성산소와 같은 반응성이 높은 자유 라디칼은 세포막을 구성하는 지질을 과산화시켜 세포막을 파괴하고 단백질을 산화시키며 핵산을 공격하여 산화적 손상을 일으켜 생체물질을 파괴하고 결국 세포를 죽게한다.

따라서 피부의 노화 방지 또는 지연은 생체물질의 산화적 손상을 억제함으로써 가능하게 된다.

항산화 화장료의 목표는 건강한 피부를 유지하는 것이며, 아울러 나이가 들면서 자연적으로 생기는 피부의 노화를 지연시키는 데 있다. 이를 위해 여러 천연식물성분들의 피부생리활성을 검색하여 안전성이 우수하고 피부 미용 효과가 우수한 물질들을 개발하기 위한 연구가 현재 활발히 진행되고 있다.

지금까지 항산화작용을 갖는 것으로 알려진 물질은 아스코르빈산(ascorbic acid), 디엘-알파토코페롤(dl-α-tocopherol), 베타카로틴(β-carotene), 디부틸히드록실톨루엔(BHT) 등이 있다.

그러나 이러한 물질들은 합성품으로 사용되기 때문에 장기 사용시 또는 다량 사용시 피부 안전성의 문제를 일으킬 수 있으므로 보다 안전하고 유용하게 피부에 적용할 수 있는 새로운 항산화 화장료의 개발이 절실하게 요구되고 있는 실정이다.

본 발명자들은 피부노화를 방지하는 물질을 검색하기 위하여 여러가지 식물추출물을 대상으로 연구한 결과, 연교 추출물이 항산화작용이 크다는 것을 알게 되어 본 발명을 완성하게 되었다.

연교(Forsythia Fructus)는 개나리의 열매로, 그 성분은 리그난(lignan)으로서 악티게닌(arctigenin)등, 리그난 배당체로서 악틴(arctin) 등 및 카페인 배당체(caffeic acid glycoside) 등이 알려져 있다(한대석 등, 생약학, 동명사, pp 285-286, 서울, 1993). 연교는 한방에서는 소염, 배농 피부질환제로서 사용되고 있다. 개나리는 물푸레나무과(Oleaceae)에 속하는 식물로 한국과 중국 등지에서 자생하고 있다.

본 발명의 목적은 피부노화를 방지 또는 지연시키는 항산화 화장료를 제공하는 것이다.

본 발명은 연교 추출물을 함유하는 항산화 화장료에 관한 것이다.

여기서 연교는 개나리(Forsythia viridissima) 또는 의성개나리(F. koreana)의 열매가 바람직하다.

본 발명의 화장료에 함유되는 연교 추출물은 연교로부터 통상적인 추출방법에 의하여 추출된다.

즉, 연교를 건조시키고 분쇄하여 미세한 분말로 만든 후, 추출용매를 가하여 실온에서 1~15일간 침적시켜 유효성분을 추출한다. 이때 추출용매로는 물, 저급알코올, 물과 저급알코올의 혼합용매, 아세톤, 디에틸에테르, 클로로포름, 헥산 또는 에틸아세테이트를 사용할 수 있으며, 연교의 미세분말 1kg에 대하여 1~15ℓ의 추출용매를 사용하는 것이 바람직하다. 이렇게 추출한 용액을 감압농축하여 연교 추출물로 하고, 이를 화장료에 첨가한다.

이때 화장료에 첨가되는 연교 추출물의 양은 화장료에 대하여 0.001~10중량%이고, 바람직하게는 0.01~5중량%이다.

본 발명의 항산화 화장료는 유연화장수(스킨), 수렴화장수, 영양화장수(로션), 영양크림, 맛사지크림, 에센스, 팩 등의 통상의 화장료 형태로 제조될 수 이TEk.

이하 본 발명을 실시예 및 처방예를 들어 상세히 설명하나, 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.

실시예 1

정제수로 세척하고 건조한 후 분쇄한 연교 미세분말 1㎏을 물 4.5ℓ에 넣고 실온에서 15일간 침적한 후 와트만 2번 여과지로 여과하였다. 이 여액을 냉각콘덴서가 달린 감압농축장치에서 농축하여 건조중량 156g의 연교 추출물을 얻었다.

실시예 2~14

하기 표 1의 추출용매를 사용한 것을 제외하고는 실시예 1과 같은 방법으로 추출하여 연교추출물을 얻었다. 이를 하기 표 1에 기재하였다.

실시예 2~14

실시예	추출용매	연교 추출물의 건조중량(g)
실시예 2	25 % 에탄올	102
실시예 3	50 % 에탄올	105
실시예 4	75 % 에탄올	123
실시예 5	100 % 에탄올	156
실시예 6	80 % 메탄올	165
실시예 7	100 % 메탄올	144
실시예 8	아세톤	91
실시예 9	클로로포름	123
실시예 10	헥산	96
실시예 11	노말-프로판올	95
실시예 12	이소프로판올	102
실시예 13	노말-부탄올	108
실시예 14	에틸아세테이트	141

실험예 1 : 연교 추출물의 항산화 작용 시험

상기 실시예 1~14에서 제조한 연교 추출물에 대하여 항산화 작용을 펜톤반응(fenton reaction)에 의한 지질과산화반응계(lipid peroxidation system)를 이용한 티오바르비츄릭산법(TBA assay)으로 측정하였다.

즉, 에틸리놀레이트 10㎕, 0.2% 소디움도데실설폭시드(SDS), 염화제일철 10

μ

㏖, 과산화수소 2

μ

㏖을 함유하는 25 mM 트리즈마(Trizma)염산/0.75 mM 염화칼륨완충액 5 ㎖에 연교 추출물의 디메틸설폭시드(DMSO)시험용액을 가하고 55 ℃에서 16시간동안 항온시킨 후, 4% 디부틸히드록실톨루엔(BHT) 50 ㎕를 가하여 반응을 정지시킨다. 이 용액 0.3 ㎖를 시험관에 넣고 0.05 N 염산 3.0 ㎖, 0.67% 티오바르비츄릭산(TBA) 용액을 가하고 30분간 끓인다. 이 반응액을 냉각시킨 후 85% 부탄올 4.0 ㎖을 가하고 원심분리 후 부탄올층의 흡광도를 535 ㎚에서 측정하였다.

각 추출물의 항산화 효과는 다음의 공식으로 산출하였다.

그 결과를 하기 표2에 나타내었다.

연교 추출물들의 항산화 작용

추출물	항산화 작용(%)^*
	실 험 농 도 (㎍/㎖)
	10	50	100
실시예 1	49	44	58
실시예 2	57	48	61
실시예 3	55	66	81
실시예 4	24	24	57
실시예 5	21	35	47
실시예 6	29	52	71
실시예 7	20	71	83
실시예 8	20	50	75
실시예 9	60	58	80
실시예 10	22	49	62
실시예 11	46	54	73
실시예 12	19	47	79
실시예 13	22	59	89
실시예 14	57	59	71

* 3회 평균치

상기 결과에서 알 수 있는 바와 같이 본 발명의 연교 추출물들은 대부분 높은 활성을 나타내었으며, 비극성용매 및 극성용매의 추출물 모두에서 효과가 크게 나타났다.

실험예 2 : 연교 추출물 및 기존 항산화제의 항산화 작용 비교

상기 실시예 1~14의 연교 추출물과 기존 항산화제인 아스코르빈산(ascorbic acid), 디엘-알파토코페롤(dl-α-tocopherol), 베타카로틴(β-carotene) 및 디부틸히드록실톨루엔(BHT)의 항산화 작용을 실험예 1과 동일한 방법으로 측정하여 50% 억제효과를 나타내는 농도인 IC₅₀을 비교하였다.

그 결과는 하기 표 3에 나타낸 바와 같다.

연교 추출물 및 기존 항산화제의 항산화 작용

시험물질	IC₅₀(㎍/㎖)
실시예 1	21.5
실시예 2	〈 10
실시예 3	〈 10
실시예 4	131.2
실시예 5	156.4
실시예 6	35.4
실시예 7	27.7
실시예 8	39.6
실시예 9	〈 10
실시예 10	51.1
실시예 11	17.7
실시예 12	39.4
실시예 13	29.0
실시예 14	〈 10
아스코르빈산(ascorbic acid)	219.0
디엘-알파토코페롤(dl-α-tocopherol)	33.6
베타카로틴(β-carotene)	〉200
디부틸히드록실톨루엔(BHT)	〈 10

상기 실시예 1~14의 연교 추출물은 다른 항산화제들에 비하여 비교할만한 높은 활성을 나타내었다. 특히 실시예 1, 2 및 3의 극성추출물과 실시예 14의 노말부탄올 추출물의 활성이 높았다. 따라서 연교추출물들이 천연물의 혼합물임에도 유의할만한 항산화활성을 가지고 있음을 알 수 있다.

실험예 3 : 연교 추출물의 과산화수소 유도 세포독성에 대한 억제효과

실시예 6에서 제조한 연교 추출물의 과산화수소 유도 세포독성에 대한 억제효과를 마우스 유래 피부섬유아세포(fibroblast)를 사용하여 측정하였다.

과산화수소는 세포내에서 히드록실라디칼(hydroxyl radical)을 생성하여 지질과산화를 유발시켜 세포막의 손상과 세포독성을 일으킨다. 연교 추출물의 항산화작용을 피부세포수준에서 시험하기 위하여 다음과 같이 측정하였다.

대수증식기의 마우스 피부섬유아세포를 웰(well)당 10,000개로 96웰 플레이트에 접종하여 디엠이엠(DMEM)배지 80 ㎕에서 24시간 배양한 후, 배지 중의 최종농도가 10^-3M이 되도록 배지에 희석시킨 과산화수소 10 ㎕를 가하고 동시에 실시예 6의 연교 추출물의 디메틸설폭시드(DMSO)용액 10 ㎕을 최종농도가 0, 50, 100, 200, 500

μ

g/㎖가 되도록 가하여 20시간 추가로 배양한 후, 5 ㎎/㎖의 엠티티(MTT)용액을 15 ㎕씩 첨가하고 4시간 후에 디메틸설폭시드 용액을 웰당 150㎕씩 가해 용해시킨 다음 마이크로플레이트리더(microplate reader)로 570 ㎚에서 흡광도를 측정하였다.

연교 추출물의 과산화수소 유도 세포독성에 대한 억제효과는 다음의 공식으로 산출하였다.

그 결과는 하기 표 4에 나타낸 바와 같다.

연교 추출물의 과산화수소 유도 세포 독성에 대한 억제효과

연교 추출물의 처리농도 (㎍/㎖)	세포 독성 억제 효과 (%)^*
0	0
50	0
100	4.0
200	19.0
500	49.5

* 3회 평균치

연교 추출물은 과산화수소 유도 세포독성에 대하여 농도의존적으로 억제한 것으로 나타났다. 따라서 연교 추출물은 마우스 유래 피부섬유아세포내에서 생성된 지질과산화작용을 억제하여 세포독성을 억제하고 있음을 알 수 있다.

실험예 4 : 세포 독성 실험

실시예 6에서 제조한 연교 추출물 자체의 세포독성을 마우스 유래 피부섬유아세포를 사용하여 다음과 같은 방법으로 측정하였다.

대수증식기의 마우스 피부섬유아세포를 웰당 10,000개로 96웰 플레이트에 접종하여 DMEM 배지 80 ㎕에서 24시간 배양한 후, 실시예 6의 연교 추출물의 디메틸설폭시드 용액 10 ㎕을 최종농도가 0, 50, 100, 200, 500

μ

g/㎖가 되도록 가하고 20시간 추가로 배양한 후, 5 ㎎/㎖의 MTT 용액을 15 ㎕씩 첨가하고 4시간 후에 DMSO를 웰당 150 ㎕씩 가해 용해시킨 다음 마이크로플레이트 리더로 570 ㎚에서 흡광도를 측정하였다.

연교 추출물 자체의 세포독성은 세포 생존률(%)로 나타내었으며, 하기의 공식으로 산출하였다.

그 결과는 하기 표 5에 나타낸 바와 같다.

연교 추출물의 세포독성

연교 추출물의 처리농도 (㎍/㎖)	세포 생존률 (%)^*
0	100.0
50	96.4
100	84.3
200	90.1
500	117.3

* 3회 평균치

실시예 6의 연교 추출물은 그 자체로서 음성대조군에 비하여 유의성있는 세포독성을 나타내지 않았다.

처방예 1

연교 추출물을 함유한 화장료중 유연화장수의 처방예는 다음과 같다. 여기서 연교 추출물은 실시예 6의 것을 말한다.

성분	함량(단위:중량%)
연교 추출물글리세린1,3-부칠렌글리콜피이지 1500알란토인DL-판테놀이디티에이-2엔에이(EDTA-2NA)벤조페논-9소듐히아루로네이트에탄올옥틸도데세스-16폴리솔베이트 20방부제향색소정제수	0.15.03.01.00.10.30.020.045.010.00.20.2미량미량미량잔량
계	100

처방예 2

연교 추출물을 함유한 화장료중 수렴화장수의 처방예는 다음과 같다. 여기서 연교 추출물은 실시예 6의 것을 말한다.

성분	함량(단위:중량%)
연교 추출물글리세린1,3-부칠렌글리콜피이지 1500알란토인DL-판테놀소듐히아루로네이트에탄올옥틸도데세스-16폴리솔베이트 20위치하젤추출물구연산방부제향색소정제수	0.12.02.01.00.20.23.015.00.20.32.0미량미량미량미량잔량
계	100

처방예 3

연교 추출물을 함유한 화장료중 영양화장수(로션)의 처방예는 다음과 같다. 여기서 연교 추출물은 실시예 6의 것을 말한다.

처방예 4

연교 추출물을 함유한 화장료중 영양크림의 처방예는 다음과 같다. 여기서 연교 추출물은 실시예 6의 것을 말한다.

성분	함량(단위:중량%)
연교 추출물글리세린소듐히아루로네이트폴리솔베이트 60경화식물유광물유스쿠알란트리옥타노인디메치콘트리에탄올아민친유형모노스테아린산글리세린세테아릴알콜스테아린산밀납솔비탄스테아레이트소듐마그네슘실리케이트베타인방부제향색소정제수	2.05.04.01.51.05.03.05.01.01.02.02.21.51.00.60.13.0미량미량미량잔량
계	100

처방예 5

연교 추출물을 함유한 화장료중 맛사지크림의 처방예는 다음과 같다. 여기서 연교 추출물은 실시예 6의 것을 말한다.

성분	함량(단위:중량%)
연교 추출물글리세린소듐히아루로네이트이소스테아릴이소스테아레이트광물유스쿠알란트리옥타노인디메치콘트리에탄올아민친유형모노스테아린산글리세린세테아릴알콜스테아린산밀납하이드록시에칠셀룰로루즈베타인방부제향색소정제수	0.36.04.05.035.05.05.00.50.71.51.51.01.00.123.0미량미량미량잔량
계	100

처방예 6

연교 추출물을 함유한 화장료중 에센스의 처방예는 다음과 같다. 여기서 연교 추출물은 실시예 6의 것을 말한다.

성분	함량(단위:중량%)
연교 추출물글리세린피이지 1500알란토인DL-판테놀소듐히아루로네이트에탄올옥틸도데세스-16베타인이디티에이-2엔에이(EDTA-2Na)벤조페논-9하이드록시에칠셀룰로우즈카르복시비닐폴리머트리에탄올아민옥틸도데칸올방부제향색소정제수	5.010.02.00.10.38.06.00.45.00.020.040.10.20.180.3미량미량미량잔량
계	100

처방예 7

연교 추출물을 함유한 화장료중 팩의 처방예는 다음과 같다. 여기서 연교 추출물은 실시예 6의 것을 말한다.

성분	함량(단위:중량%)
연교 추출물글리세린피이지 1500알란토인DL-판테놀에탄올사이클로덱스트린글리시리친산모노암모늄니코틴아미드피이지40 경화피마자유방부제향색소정제수	3.03.02.00.10.46.00.150.30.50.3미량미량미량잔량
계	100

본 발명의 항산화 화장료는 자유 라디칼에 의한 생체물질의 산화를 억제하여 피부의 노화를 방지 또는 지연시키는 효과를 갖는다.

Claims

연교(Forsythia Fructus) 추출물을 함유하는 항산화 화장료.
제1항에 있어서, 연교가 개나리(Forsythia viridissima)의 열매 또는 의성개나리(Forsythia. koreana)의 열매 중에서 선택되는 것임을 특징으로 하는 항산화 화장료.
제1항에 있어서, 연교 추출물을 화장료에 대하여 0.001~10중량%의 양으로 함유하는 것임을 특징으로 하는 항산화 화장료.
제1항에 있어서, 연교추출물이 연교를 건조시키고 분쇄하여 미세한 분말로 만든 후, 추출용매를 가하여 실온에서 1~15일간 침적시켜 추출한 용액을 감압농축하여 얻어짐을 특징으로 하는 항산화 화장료.
제4항에 있어서, 추출용매가 물, 저급알코올, 물과 저급알코올의 혼합용매, 아세톤, 디에틸에테르, 클로로포름, 헥산 및 에틸아세테이트로 이루어진 군으로부터 선택됨을 특징으로 하는 항산화 화장료.
제1항에 있어서, 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 영양크림, 맛사지크림, 에센스 및 팩으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것임을 특징으로 하는 항산화 화장료.