KR100411703B1 - 계란을 이용한 눈꽃 동충하초 재배방법 - Google Patents

계란을 이용한 눈꽃 동충하초 재배방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 눈꽃 동충하초 종균(Paecilonyces japonica)을 계란에 접종하여 자실체를 형성시키는 것을 특징으로 하는 계란을 이용한 눈꽃 동충하초 재배방법에 관한 것이다.
보다 상세하게는 계란에 눈꽃 동충하초 종균액을 접종하여 감염시키는 단계, 상기 감염된 계란에 내생균핵을 형성시키는 단계 및 상기 내생균핵이 형성된 계란으로부터 자실체를 형성시키는 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 계란을 이용한 눈꽃 동충하초 재배방법에 관한 것이다.
본 발명의 구성에 따른 계란을 이용한 눈꽃 동충하초 재배방법은, 식생활에서 구입하기 편리한 완전식품인 계란에 눈꽃 동충하초 종균을 접종하여 눈꽃 동충하초를 재배하는 것으로서, 지속적인 대량 생산이 가능하여 경제적 이점이 있으며, 자연상태에 서식하는 눈꽃 동충하초에 비해 위생적이다.

Description

계란을 이용한 눈꽃 동충하초 재배방법{The method of culture for Paecilonyces japonica using a egg}
본 발명은 눈꽃 동충하초 종균(Paecilonyces japonica)을 계란에 접종하여 자실체를 형성시키는 것을 특징으로 하는 계란을 이용한 눈꽃 동충하초 재배방법에 관한 것이다.
보다 상세하게는 계란에 눈꽃 동충하초 종균액을 접종하여 감염시키는 단계, 상기 감염된 계란에 내생균핵을 형성시키는 단계, 및 상기 내생균핵이 형성된 계란으로부터 자실체를 형성시키는 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 계란을 이용한 눈꽃 동충하초 재배방법에 관한 것이다.
본 발명의 눈꽃 동충하초(Paecilonyces japonica)와 관련한 동충하초라는 이름은 동충하초균이 침입하여 겨울에는 곤충의 몸속에 균핵을 형성하여 있다가 여름에는 풀처럼 돋아나오는 모습에서 연류되었다. 즉 동충하초균의 포자나 균사가 곤충이나 균핵, 식물의 종자 등에 침입하여 기주안에 있는 물질을 영양원으로 이용함으로써 내생균핵을 형성시킨 후에 밖으로 자실체를 형성하는 것이 동충하초 버섯이다.
현재 곤충을 포함한 절지동물, 균류 또는 고등식물의 종자에 기생하는 균류에 속하는 모든 균류를 넓은 의미에서 동충하초라 부르며, 지금까지 곤충에 침입하는 동충하초균은 세계적으로 800여종으로 알려져 있다. 이들 중 버섯을 형성하는 것은 대부분 자낭균강(Acomycetes), 맥강균목(Clavicipitales), 맥강균과(Clavicipitaceae)에 속하는 코디셉스(Cordyceps)속, 포도넥트리데스(Podonectrides)속, 토루비엘라(Torrubiella)속, 시미주오마이세스(Shimizuomyces)속, 스페로코디셉스(Sphaeracordyceps)속, 웨이크필디오니세스(Wakefieldionyces)속, 네오코디셉스(Neocordyceps)속, 아트리코디셉스(Atricordyceps)속이 알려져 있으며, 그 종의 수는 세계적으로 400여종이 보고되어져 있고(성 등, 1998; 청수, 1996), 그 대표적인 동충하초로는 번데기 동충하초, 큰매미 동충하초, 유충흑색다발 동충하초, 큰 유충방망이 동충하초, 풍뎅이 동충하초, 유충긴목구형 동충하초, 눈꽃 동충하초 등이 있다.
동충하초균의 일반적인 특징은 완전세대의 유성생식 기관으로서 자낭포자를 형성하고 생활사의 일부로 부성생식 기관으로서 포자를 형성하며 생활사의 일부로 무성생식 기관으로서 포자를 형성하는 불완전 세대를 갖는다(Evans, H.C 1992).
상기와 같은 여러 종류의 동충하초는 그 종류에 따라 구성성분에 다소 차이가 있지만 일반적으로 수분 10.84%, 지방 8.4%, 조단백 25.32%, 탄수화물 28.90%,회분 4.1%로 구성되어 있고, 지방성분으로 포화지방산 13%, 불포화지방산 82.2%가 함유되어 있으며, 단백질 성분으로 인체에 없어서는 안될 필수 아미노산이 약 18종 함유되어 있고, 비타민 B2도 100g당 0.29㎎ 함유되어 있다(성재모, 버섯건강요법, P178∼P192).
또한, 동충하초에는 매우 강력한 면역기능 증강작용이 있다는 사실이 최근에 증명되었는데, 동충하초에서 추출한 영양액은 유기체의 면역기능을 현저하게 강화시키고 체액면역과 세포면역에 대해서도 촉진효과가 있어, 종양과 바이러스 감염에 대한 유기체의 저항력을 높인다. 특히 최근 연구에 의하면 동충하초에 종양억제율 83%의 대단히 높은 항암성분이 있음이 발견되었다. 이와 관련하여 일본 도호쿠 대학 약학부 곤도 교수는 동충하초 중에 에르고스테롤퍼옥사이드라는 암을 강하게 공격하는 약리성분이 함유되어 있다는 것을 규명하였다.
특히 본 발명의 눈꽃 동충하초는 자연 생태계에서 곤충집단의 밀도를 조절하지만 동물생체를 기주(host)로 하여 생식생장을 하기 때문에 동물성 당-단백질을 포함하는 면역증강물질이 함유되어 있어서 항암효과를 인정받고 있다.
상기와 같은 우수한 효과에도 불구하고 자연 상태로 생장되어 생육조건이 까다로운 동충하초 자실체를 채집하는 것은 매우 어렵기 때문에 전세계적으로 그 생산량이 국소하고 따라서 일부 사람에 의하여 고가로 사용하고 있으므로, 동충하초 자실체를 안정적으로 공급하기 위한 재배방법이 요구되고 있다.
상기와 같은 특징을 갖는 동충하초를 재배하는 방법에 대해 우리나라에서 출원된 특허를 요약해 보면 다음과 같다.
임양빈(1998)은 접종실에서 배양한 종균을 25∼27℃의 종균실에서 누에번데기에 종균이식을 수행한 다음 약 2∼3주간 균사체 배양을 실시한 후 15∼20℃의 항온항습실에서 자실체를 형성시킴으로써 영양생장에서 포자형성 직전까지 저온 스트레스에 의한 생식생장을 유도함을 특징으로 하는 동충하초 버섯의 인공재배방법(대한민국공개특허공보 제 2000-0018848호)을 출원하였다.
권득수(1999)는 누에번데기와 곡물을 이미 설정된 소정의 비로 혼합한 것에 동충하초 종균을 투입하여 동충하초를 재배함으로써, 동충하초 재배시간이 대폭 감소되도록 함과 아울러 곡물에 의하여 수분과 영양분이 적정하게 조절되어 최적의 활착조건을 갖도록 하는 번데기 동충하초 재배방법(대한민국공개특허공보 제 1999-0046312호)을 출원하였다.
이재일(1996)은 건조된 다양한 곤충을 물에 넣고 끓인 다음 수분함량을 60∼65%가 되도록 조절한 뒤 종균병에 1/3 정도 넣고 고압살균하여 냉각시킨 후 무균실에서 중간 배양된 동충하초 버섯 종균을 투입하여 곤충과 동충하초버섯 종균이 잘 혼합되도록 교반하여 배양하는 것을 특징으로 하는 곤충만을 이용한 동충하초버섯의 대량 재배방법(대한민국 등록특허공보 제0179455호)을 출원하였다.
이재일(1997)은 누에번데기 자체만을 배지로 하여 밀리터리스 동충하초의 종균을 배양하고 이 밀리터리스 동충하초 종균 자체만으로 밀리터리스 동충하초를 재배하는 누에 번데기를 이용한 밀리터리스 동충하초의 종균 배양방법 및 재배방법(대한민국 등록특허공보 제0232710호)을 출원하였다.
전라북도농업기술원의 문병영(1999)은 야생에서 서식하는 나방류 번데기에서 신규한 번데기 동충하초 균주를 분리하고 이 균주를 잡균의 오염없이 배양하는 방법을 출원하였다.
김동원(1998)은 동물성 배지를 이용하여 동충하초 종균을 직접 배양함으로써 약효기능이 뛰어난 동충하초 재배방법을 출원하였다.
정홍열(1999)은 건조된 누에 유충 또는 번데기에 동충하초균을 접종하여 동충하초를 배양하는 방법을 출원하였다.
이상몽(1999)은 동충하초 종균을 작삼 번데기에 직접 주사하여 감염시킨 후 자실체 형성을 유도하는 작삼번데기 동충하초 재배방법을 출원하였다.
그러나, 상기와 같이 현재까지 출원된 동충하초 재배방법에 관한 특허는 동충하초가 곤충을 기주로 하여 자실체를 형성한다는 사실을 근거로 누에 유충이나 누에 번데기 등을 배지로 이용하여 동충하초를 재배하는 방법에 관한 것이다.
또한, 현재 출원된 발명은 동충하초를 배양하기 위한 배지를 식생활에서 쉽게 구입할 수 없었고, 영양적으로 완전한 식품을 사용하지 않는 문제점이 있었다.
상기와 같은 문제점을 해결하기 위하여 본 발명자들은, 식생활에서 쉽게 구입할 수 있는 완전식품으로 알려진 계란에 눈꽃 동충하초 종균을 접종시켜 계란을 배지로 하는 눈꽃 동충하초 자실체를 생산함으로써 본 발명을 완성시켰다.
본 발명의 목적은 눈꽃 동충하초 종균을 계란에 직접 감염시킨 후 자실체 형성을 유도하는 계란을 이용한 눈꽃 동충하초 재배방법을 제공함에 있다.
본 발명의 또 다른 목적은 종래의 누에 번데기의 배지를 이용하여 재배하는 불편한 점과 생산량의 제한 및 경제성을 고려하여 우리 생활속에서 쉽게 구입할 수 있는 계란을 이용한 눈꽃 동충하초 재배방법을 제공함에 있다.
도 1은 눈꽃 동충하초(Paecilonyces japonica) 종균액을 계란에 접종시킨 후 계란으로부터 균사가 발생하여 자실체가 성장하는 모습을 나타낸 사진이다.
본 발명은 눈꽃 동충하초 종균(Paecilonyces japonica)을 계란에 접종하여 자실체를 형성시키는 것을 특징으로 하는 계란을 이용한 눈꽃 동충하초 재배방법에 관한 것이다.
보다 상세하게는 동충하초 균주를 PDA 고체배지에서 고체 종균을 배양한 후 PDA배지에서 액체 종균을 배양하여 자외선 살균실(UV실)에서 멸균된 눈꽃 동충하초 종균액을 계란에 접종하여 감염시키는 단계, 상기 감염된 계란에 내생균핵을 형성시키는 단계, 및 상기 내생균핵이 형성된 계란으로부터 자실체를 형성시키는 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 계란을 이용한 눈꽃 동충하초 재배방법에 관한 것이다.
이하 동충하초의 고체 종균의 제조, 액체 종균의 제조, 액체 종균의 배양 등을 실시예를 통하여 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 청구범위가 이들 실시예에 내재된 기술적 사상에 국한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
실시예 1. 고체종균 제조를 위한 PDA 배지
증류수 100㎖를 삼각 플라스크에 넣고 PDA 2.4g, 아가(agar) 1.4g을 넣고 완전히 녹인 다음 자동가압멸균기(autoclave)에서 멸균하였다. 삼각 플라스크를 자동가압멸균기에서 꺼낸 다음 자외선 살균실(UV실)에서 실험재료(눈꽃 동충하초종균)와 함께 멸균하였다. 멸균한 PDA배지액을 페트리디쉬(petridish)에 나누어 분주하여 완전히 식힌 후, 멸균된 동충하초의 종균을 2㎣ 첨가하여 배양기(incubator 22℃)에서 30일간 배양하였다.
실시예 2. 동충하초 액체종균 배양을 위한 PDA 배지
증류수 100㎖를 삼각 플라스크에 넣고 PDA 2.4g을 넣고 완전히 녹인 다음 자동가압멸균기(autoclave)에서 멸균하였다. 삼각 플라스크를 자동가압멸균기에서 꺼낸 다음 자외선 살균실(UV실)에서 실험재료(눈꽃 동충하초종균)와 함께 멸균하였다. 멸균한 PDA배지액을 페트리디쉬(petridish)에 나누어 분주하여 완전히 식힌 후, 멸균된 동충하초 종균을 2㎣ 첨가하여 혼합 배양기(shaking incubator, 160rpm, 25℃)에서 7일간 배양하였다.
실시예 3. 계란에 종균 접종
계란에 종균을 접종하기 위하여 250㎖ 비이커를 자동가압멸균기(120℃, 20분)에서 멸균하였다. 비이커, 계란, 실험재료(동충하초 종균)를 UV실에 넣고 다시 1시간 동안 멸균하였다. 비이커에 계란을 한개를 깨어 넣었다. 이때 계란에 접종하는 동충하초 액체 종균의 포자 농도가 107∼109포자(spores)/㎖가 되도록 하며, 가장 바람직하게는 108포자(spores)/㎖가 되도록 계란에 동충하초 액체종균 0.4∼0.7㎖를 접종하며 가장 바람직하게는 0.4㎖를 접종하였다.
접종된 동충하초 액체 종균을 내생균핵 형성을 위하여 온도 22∼26℃, 습도 80∼95%의 배양기에서 15∼30일 배양하였다.
상기와 같이 배양된 동충하초 종균의 성장과정을 관찰하면 다음과 같다.
1일차에 계란 속에 기포가 발생하고, 2일차에는 종균이 접종된 계란의 부분이 백색으로 변하였다. 3일차에 계란의 노른자에서 백색의 종균이 자라기 시작하여, 비이커 전체로 균사체가 퍼져 자라기 시작하였다. 7일차에 노른자위에서 자실체가 자라기 시작하여 10일차에 자실체가 0.5㎝, 13일차에 1㎝, 15일차에 1.5㎝, 18일차에 2㎝, 29일차에 4㎝ 정도 자라서 흰자위에도 자실체가 자라기 시작하였고, 45일차에 7.5㎝ 정도까지 자랐다. 자실체는 계란 위에 얇은 막처럼 자라는데, 예외적으로 0.5㎝ 정도까지 자라는 자실체도 있었다. 완전히 생성된 계란 1개당 자실체는 45일 이후 완전히 자라며, 수는 170∼190개 정도였다. 자실체의 길이는 2∼7.5㎝이고, 자실체 전체의 무게는 5.08g이었다.
상기와 같이 실시예에 의한 결과를 표 1에 나타내었다.
계란에 접종된 동충하초 종균을 접종 후 자실체 형성 결과
접종된 계란수 자실체 등급
500
400 50 50
※ 계란은 신선한 것을 위주로 함.
이상에서 상세히 설명한 바와 같이, 본 발명은 계란을 배지로 이용하여 눈꽃 동충하초를 재배하는 방법으로 식생활에서 쉽게 구입할 수 있는 완전 식품을 이용하여 대량생산이 가능하고, 자연에 서식하는 눈꽃 동충하초보다 경제적으로 이점이있으며 위생적이다.

Claims (3)

  1. 계란에 눈꽃동충하초 액체 종균의 포자 농도가 107∼109포자(spores)/㎖가 되도록 액체종균 0.4∼0.7㎖의 종균액을 접종하여 감염시키는 단계;
    상기 감염된 계란에 온도 22∼26℃, 습도 80∼95%의 조건하에 20∼30일간 유지시켜 내생균핵을 형성시키는 단계; 및
    상기 내생균핵이 형성된 계란으로부터 자실체를 형성시키는 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 계란을 이용한 눈꽃 동충하초 재배방법.
  2. 제 1항에 있어서,
    상기 계란에 눈꽃 동충하초 종균액을 접종하여 감염시키는 단계에서 눈꽃동충하초 액체종균의 포자의 농도가 108포자(spores)/㎖가 되도록 접종하는 것을 특징으로 하는 계란을 이용한 눈꽃 동충하초 재배방법.
  3. 삭제
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